CN116210725B - 桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 - Google Patents
桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116210725B CN116210725B CN202310097241.1A CN202310097241A CN116210725B CN 116210725 B CN116210725 B CN 116210725B CN 202310097241 A CN202310097241 A CN 202310097241A CN 116210725 B CN116210725 B CN 116210725B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- phellinus linteus
- application
- anthracnose
- preventing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000001727 Tropicoporus linteus Species 0.000 title claims abstract description 54
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 45
- 230000003405 preventing effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title abstract description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title abstract description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 14
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 4
- 230000004345 fruit ripening Effects 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 21
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 18
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 18
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 241000208293 Capsicum Species 0.000 description 12
- 239000001390 capsicum minimum Substances 0.000 description 12
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 8
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 7
- 241000722363 Piper Species 0.000 description 7
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 7
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 7
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 241000001748 Sanghuangporus sanghuang Species 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 241001480649 Colletotrichum destructivum Species 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitro-1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C2=C1 FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 2
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 2
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 2
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 2
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 2
- 241000123392 Hymenochaetaceae Species 0.000 description 2
- 241000991728 Hymenochaetales Species 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 2
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 2
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 2
- 241000789545 Trimeria grandifolia Species 0.000 description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 2
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000222518 Agaricus Species 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 241000222199 Colletotrichum Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108091023242 Internal transcribed spacer Proteins 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000001791 Sanghuangporus Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 241000533293 Sesbania emerus Species 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 230000001680 brushing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000005089 fruit drop Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000054 fungal extract Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000004080 punching Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
- A01P3/00—Fungicides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属于微生物技术领域,具体公开了桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物病害中的应用,所述提取物具体为桑树桑黄菌YX2发酵后菌丝体的乙醇提取物,所述桑树桑黄菌YX2已于2020年12月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,菌种保藏号为CGMCC NO.21078;所述桑树桑黄菌YX2提取物用于防治植物炭疽病,仅需纳克级别即可明显提高作物对植物炭疽病的抗性,安全高效、对环境友好,成本低,具有广阔的应用前景。
Description
【技术领域】
本发明属于微生物技术领域,具体涉及桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物病害中的应用。
【背景技术】
植物炭疽病大多数是由炭疽菌属(Colletotrichum Corda)内的一种或几种侵染引起的一种真菌性病害。目前已报道约有200余种植物均可被炭疽病菌侵染并发病,包括农作物、果树、花卉、林木等具有重要经济价值的植物。其症状表现为:产前植物死苗、叶斑、叶枯、落果,产后果实腐烂,严重影响植物生长发育和产品质量,每年由于炭疽病侵染造成的经济损失无法估量,其中包括由炭疽病属菌引起的辣椒炭疽病,严重时可造成辣椒40%~50%以上的产量损失;烟草炭疽病,严重时可给烟草种植产业带来毁灭性打击;咖啡豆浆果炭疽病,严重时可以导致50%~80%以上的经济损失,对非洲、东南亚等地咖啡产业的发展造成威胁;柑橘炭疽病,严重时造成40%以上的损失。当前生产上,化学药剂是防治植物炭疽病的主要手段,但其容易造成严重的农作物安全和环境问题;选育抗病品种也是防治炭疽病的重要手段,其具经济有效且对人、环境友好等优点,但抗病品种培育和抗性鉴定体系不健全且需要大量人力和物力是选育抗病品种面临的困难。
桑黄是大型真菌,作为传统中药在中国已有约两千年的历史记载。目前被认为是一类真菌的统称,且物种多样,仅东亚地区称之为桑黄的真菌种类有40种之多。其属担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomy-cetes)、锈革孔菌目(Hymenochaetales)、锈革孔菌科(Hymenochaetaceae)、桑黄孔菌属(Sanghuangporus)真菌。桑黄含有各种氨基酸、多糖高分子化合物、多种酶类、多酚类、三萜类、脂肪酸类和多种微量元素等成分,现有技术中对桑黄菌的研究主要在医学领域方面,暂没有在农业方面的研究。
【发明内容】
针对现有技术的缺陷,本发明的目的在于,提供桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物病害中的应用。
为了实现上述技术效果,本发明采用如下技术方案:
本发明的第一方面在于,提供所述桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物病害中的应用。
本发明所述桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)YX2采集于泰山森林野生桑树中,且已于2020年12月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,菌种保藏号为CGMCC NO.21078。
所述桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)YX2的形态为:所述菌株菌落在PDA培养基上于25℃条件下培养一周,直径为75~80mm,菌落平坦,菌丝棕黄色,平铺,绳状,边缘羊毛状。两周后菌丝变成棕褐色。生殖菌丝具简单分隔,无色至浅黄色,薄壁至稍厚壁,多分枝,频繁分隔,直径为2~3.5μm;骨架菌丝金黄色,厚壁,具宽或窄内腔,少分枝,多分隔,近规则排列,直径为3~4.5μm。
优选地,所述提取物为桑树桑黄菌YX2发酵后菌丝体的乙醇提取物。
优选地,所述桑树桑黄菌YX2提取物的制备方法,包括发酵所述桑树桑黄菌YX2制备菌丝体的步骤,及将菌丝体采用乙醇进行提取的步骤;具体过程如下:
发酵培养:将桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)YX2的菌种接到PDA培养基上,25℃培养一周,琼脂挖块接种于装有50mL PDA培养液的250mL三角烧瓶,于25℃,160-180r/min下旋转摇床上培养3天作为种子,以10%量接种于装有150mL发酵培养基的500mL三角瓶中,同样条件下培养5天,终止发酵,得发酵液;
乙醇提取:将发酵液离心过滤,得菌丝体,将菌丝体在50℃下干燥、粉碎,加入乙醇冷浸24小时,然后超声提取2h;重复提取2次,合并滤液,即得桑树桑黄菌YX2提取物。
优选地,提取时,乙醇的加入量为菌丝体干燥后重量的20%,且每次提取加入乙醇的量相同。
优选地,所述植物病害为植物真菌性病害,具体为植物炭疽病。
具体地,所述植物炭疽病的病原菌为毁灭炭疽病菌(Colletotrichumdestructivum)。
具体地,所述桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物炭疽病时的施用方式为叶面喷施。
具体地,所述桑树桑黄菌YX2提取物的施用时间为5~6叶期或果实成熟期。
具体地,所述桑树桑黄菌YX2提取物的施用浓度为250~1000ng/mL。
具体地,当所述提取物应用于烟草植株防治烟草炭疽病时,在烟草植株5~6叶期,将所述桑树桑黄菌YX2提取物喷施于叶面。
具体地,当所述提取物应用于辣椒防治辣椒炭疽病时的施用方法为:在辣椒果实成熟期,将所述桑树桑黄菌YX2提取物喷施于叶面。
本发明的第二方面在于,提供一种用于上述应用的菌剂,包括桑树桑黄菌YX2提取物。
本发明的第三方面在于,提供一种组合物,所述组合物包括上述菌剂。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明所述桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)YX2已于2020年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,菌种保藏号为CGMCCNO.21078;
本发明所述桑树桑黄菌YX2提取物仅需极少的用量即可对炭疽病有很好地防效,可以将其用于所述炭疽病菌侵染的烟草、辣椒、茄子、番茄、黄瓜、南瓜等多种作物,提高其对炭疽病的抗性;因此,本发明提供了一种新的生物源制剂,安全高效、对环境友好,且成本低,具有广阔的应用前景。
【附图说明】
图1为所述桑树桑黄菌YX2的菌落形态;
图2为所述桑树桑黄菌YX2于显微镜下观察的菌丝形态(左侧放大倍数为40×0.65,右侧放大倍数为100×1.4);
图3为所述桑树桑黄菌YX2通过ITS序列分析建立的系统发育进化树;
图4为不同处理组烟草叶片的发病情况;
图5为不同处理组辣椒的发病情况。
【具体实施方式】
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,本发明用以下具体实施例进行说明,但绝非仅限于此。以下所述为本发明较好的实施例,仅仅用于描述本发明,不能理解为对本发明的限制,应当指出的是在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进,均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例1菌株的分离与鉴定
1、菌株的分离:
本发明所述桑树桑黄菌YX2从泰山森林中野生桑树上分离得到;
(1)取新鲜桑黄子实体,用干净刷子刷去子实体表面的杂质,用75%乙醇进行表面消毒,然后置于无菌烧杯中备用;
(2)将已消毒的子实体在无菌超净工作台上切开,用已灭菌的解剖刀在菌片中央切取米粒大的组织块,接入无菌的PDA培养基表面,倒置于25℃恒温箱中培养;
(3)待长出菌丝后,取生长快的菌丝,移入另一无菌PDA平板培养皿表面培养,待长出菌丝后,取生长快、无杂菌污染的菌丝块,移入PDA平板培养基表面培养,如此反复几次分离、纯化;直至每个平板上只含有统一特征的单一菌落,最后得到一株菌,编号为YX2。
2、菌株的鉴定
(1)菌株的形态特征
将所述菌株YX2在PDA培养基上,25℃培养一周,直径75~80mm,菌落平坦,菌丝棕黄色,平铺,绳状,边缘羊毛状,两周后菌丝变成棕褐色,如图1所示;
在显微镜下可见生殖菌丝具简单分隔,无色至浅黄色,薄壁至稍厚壁,多分枝,频繁分隔,直径为2~3.5μm;骨架菌丝金黄色,厚壁,具宽或窄内腔,少分枝,多分隔,近规则排列,直径为3~4.5μm,如图2所示(左图放大倍率为40×0.65,右图放大倍率为100×1.4)。
(2)菌株的分子生物学鉴定
以ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG和ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC为引物,对所述菌株YX2进行扩增,并对扩增产物进行测序分析,具体序列见序列表;
基于blast搜索,选取与研究菌株序列最接近的种或最靠近的进化分支代表菌株的序列进行比对,利用Mega6.0软件通过ML算法,利用bootstrap 1000次建树结果建立进化树如图3所示;NCBI数据库对比分析,发现其与桑树桑黄菌的同源相似性达98%。
最终通过形态学鉴定和分子生物学鉴定,确定该菌株为桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)。
实施例2桑树桑黄菌YX2提取物的制备
所述桑树桑黄菌YX2提取物具体为其发酵后菌丝体的乙醇提取物,具体制备过程如下:
1.发酵培养:
将实施例1分离、纯化得到的桑树桑黄菌(Sanghuangporus sanghuang)YX2的菌种接到PDA培养基上,25℃培养一周,琼脂挖块接种于装有50mL PDA培养液的250mL三角烧瓶,于25℃,160-180r/min下旋转摇床上培养3天作为种子,以10%量接种于装有150mL发酵培养基的500mL三角瓶中,同样条件下培养5天,终止发酵,得种子液。
2.乙醇提取:
将发酵液离心过滤,得菌丝体,将菌丝体在50℃下干燥、粉碎,加入乙醇冷浸24小时,然后超声提取2h;重复提取2次,合并滤液,即得所述桑树桑黄菌YX2提取物。所述乙醇的加入量为菌丝体干燥后重量的20%;每次提取加入乙醇的量相同。
实施例3桑树桑黄菌YX2提取物在室内烟草炭疽病防效试验中的应用
1、试验方法:
以烟草(品种:三生烟)为供试植物,将其培养至5~6叶期,挑选大小相近、长势一致、无病无虫的幼苗开展试验;
活化炭疽病菌(Colletotrichum destructivum)至PDA平板上,培养7d,用5mm的打孔器在平板上打取菌块(从菌落的边缘处打一圈),以进行病原菌的接种试验;
在接种病原菌前2小时,分别使用无菌水及浓度为62.50ng/mL、125.00ng/mL、250.00ng/mL、500.00ng/mL、1000.00ng/mL的桑树桑黄菌YX2提取物喷施烟草叶面,每个处理重复3次;
待处理两小时后将烟草底部第二片剪下,放入干净的150mm玻璃培养皿中,叶柄处用湿润纱布保湿,离体叶片用菌块接种的方法每个叶片接种3个菌块(确保菌丝贴在叶片),盖上培养皿盖,放于人工培养室中培养,观察其发病情况,并在第5d时,采用十字交叉法测量叶片病斑直径大小(cm),挑选防效区分最为明显的处理进行拍照,并根据病斑直径计算不同浓度的真菌提取物对烟草炭疽病的防效,计算公式如下:
防效(%)=(对照组病斑直径-处理组病斑直径)/对照组病斑直径×100%
2、试验结果
不同处理组烟草叶片的发病情况如表1和图4所示:
表1不同浓度的YX2提取物对烟草抗炭疽病的影响
处理编号 | 浓度/ng·mL-1 | 叶片病斑直径/cm | 防效/% |
CK | 0 | (1.63±0.09)a | - |
1 | 62.5 | (0.89±0.04)b | (45.25±3.85)c |
2 | 125 | (0.83±0.01)b | (48.73±2.46)c |
3 | 250 | (0.46±0.04)c | (71.31±4.21)b |
4 | 500 | (0.20±0.02)d | (88.03±1.15)a |
5 | 1000 | (0.30±0.04)cd | (81.49±3.27)ab |
注:表1中不同小写字母表示在0.05水平差异显著。
由表1和图4可以看出,叶喷所述桑树桑黄菌YX2提取物可有效提高烟草抗炭疽病菌侵染的能力,当所述提取物的使用浓度为250~1000ng/mL时,对炭疽病的防效达到71%以上,当使用浓度为500ng/mL时,叶片病斑直径最小,防效最高,达88.03%。
实施例4桑树桑黄菌YX2提取物在室内辣椒炭疽病防效试验中的应用
1、试验过程:
以辣椒(品种:王者线椒)为供试植物,挑选大小一致且无病的果实,然后将辣椒果实表面用75%的酒精擦拭干净,无菌水清洗2~3次,晾干后分别将浓度为62.50ng/mL、125.00ng/mL、250.00ng/mL、500.00ng/mL、1000.00ng/mL的桑树桑黄菌YX2提取物喷洒在辣椒表面,待晾干后,用针刺接种法将辣椒表皮刺破,接种1mL浓度为3×105个孢子/mL的炭疽病菌(Colletotrichum destructivum)分生孢子悬浮液;以加无菌水的处理作为空白对照,每处理3个重复。
放于人工培养室中培养,观察其发病情况,并在第5天时,采用十字交叉法测量叶片病斑直径大小(cm),并根据病斑直径计算不同浓度的真菌提取物对辣椒炭疽病的防效。
2.试验结果:
不同处理组辣椒的发病情况如表2和图5所示;
表2不同浓度的YX2提取物对辣椒抗炭疽病的影响
处理编号 | 浓度/ng·mL-1 | 果实病斑直径cm | 防效% |
CK | 0 | (5.25±0.26)a | - |
1 | 62.5 | (3.90±0.06)b | (25.30±4.32)d |
2 | 125 | (3.37±0.12)bc | (35.41±4.91)cd |
3 | 250 | (0.97±0.09)e | (81.52±1.67)a |
4 | 500 | (1.67±0.08)d | (67.99±2.51)b |
5 | 1000 | (2.90±0.16)c | (44.39±4.90)c |
注:表2中不同小写字母表示在0.05水平差异显著。
由表2和图5可以看出,叶喷所述桑树桑黄菌YX2提取物可有效提高辣椒对炭疽病菌的抗性,当所述提取物的使用浓度为250~1000ng/mL时,对炭疽病的防效达到44%以上,当使用浓度为250ng/mL时,辣椒果实病斑直径最小,防效最高,达81.52%。
综上,本申请所述桑树桑黄菌YX2提取物可用于所述炭疽病菌能够侵染的烟草、辣椒、茄子、番茄、黄瓜、南瓜等多种作物,提高其对植物炭疽病的抗性,且所述提取物可与其他杀菌剂同时施用。
以上实施例仅表达了本申请的具体实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本申请保护范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本申请技术方案构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本申请的保护范围。
Claims (7)
1.桑树桑黄菌YX2提取物在防治植物炭疽病中的应用,所述桑树桑黄菌YX2已于2020年12月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,菌种保藏号为CGMCCNO.21078。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述提取物为桑树桑黄菌YX2发酵后菌丝体的乙醇提取物,其制备过程包括发酵所述桑树桑黄菌YX2制备菌丝体的步骤,及将菌丝体采用乙醇进行提取的步骤。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述桑树桑黄菌YX2提取物的施用方法为叶面喷施。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述桑树桑黄菌YX2提取物的喷施时间为植株5~6叶期或果实成熟期。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述桑树桑黄菌YX2提取物的使用浓度为250~1000ng/mL。
6.一种用于权利要求1所述应用的菌剂,其特征在于,包括桑树桑黄菌YX2提取物。
7.一种组合物,其特征在于,包括权利要求6所述的菌剂。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310097241.1A CN116210725B (zh) | 2023-02-08 | 2023-02-08 | 桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310097241.1A CN116210725B (zh) | 2023-02-08 | 2023-02-08 | 桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116210725A CN116210725A (zh) | 2023-06-06 |
CN116210725B true CN116210725B (zh) | 2023-11-07 |
Family
ID=86583862
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202310097241.1A Active CN116210725B (zh) | 2023-02-08 | 2023-02-08 | 桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116210725B (zh) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106719854A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-05-31 | 蚌埠市众星蔬果科技专业合作社联合社 | 一种苹果腐烂病防治剂以及用该防治剂防治苹果腐烂病的方法 |
CN106797958A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-06-06 | 泰安市泰山林业科学研究院 | 一种抗植物病毒的大型真菌制剂及其制备方法 |
CN111978421A (zh) * | 2020-08-21 | 2020-11-24 | 浙江省林业科学研究院 | 一种桑树桑黄多糖及其制备和用途 |
CN112680364A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-04-20 | 方荣俊 | 一株来自鬼桑的桑树桑黄菌株及其应用 |
CN115161362A (zh) * | 2022-06-23 | 2022-10-11 | 菏泽学院 | 桑黄发酵液在调控牡丹根际微生物中的应用 |
-
2023
- 2023-02-08 CN CN202310097241.1A patent/CN116210725B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106719854A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-05-31 | 蚌埠市众星蔬果科技专业合作社联合社 | 一种苹果腐烂病防治剂以及用该防治剂防治苹果腐烂病的方法 |
CN106797958A (zh) * | 2017-01-05 | 2017-06-06 | 泰安市泰山林业科学研究院 | 一种抗植物病毒的大型真菌制剂及其制备方法 |
CN111978421A (zh) * | 2020-08-21 | 2020-11-24 | 浙江省林业科学研究院 | 一种桑树桑黄多糖及其制备和用途 |
CN112680364A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-04-20 | 方荣俊 | 一株来自鬼桑的桑树桑黄菌株及其应用 |
CN115161362A (zh) * | 2022-06-23 | 2022-10-11 | 菏泽学院 | 桑黄发酵液在调控牡丹根际微生物中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Clara Chepkirui et.al.An unprecedented spiro [furan-2,1’-indene]-3-one derivative and other nematicidal and antimicrobial metabolites from Sanghuangporus sp. (Hymenochaetaceae, Basidiomycota) collected in Kenya.Phytochemistry Letters.2018,第25卷141-146. * |
鲍氏层孔菌发酵产物抑菌活性的研究;邹莉等;吉林农业大学学报;第35卷(第1期);19-23 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116210725A (zh) | 2023-06-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107937284B (zh) | 一株季也蒙毕赤酵母及其应用 | |
CN112322560B (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在香梨病害防治中的应用 | |
CN113444651B (zh) | 一种西红花内生真菌及其在防治球茎腐烂病中的应用 | |
CN107365710B (zh) | 一株对榛实象甲具有强致病力的绿僵菌菌株及其应用 | |
CN106119134B (zh) | 黄色蠕形霉y28及其在防治果树腐烂病中的应用 | |
CN110616157B (zh) | 一株尖孢镰孢菌及其应用 | |
CN110643551B (zh) | 一株防治水稻稻瘟病的嗜根寡养单胞菌s11及其应用 | |
CN117106639A (zh) | 野尻链霉菌菌株及其发酵液在防治辣椒炭疽病中的应用 | |
CN109609403B (zh) | 一种生防菌及其在农作物霜霉病防治方面的应用 | |
CN116064284B (zh) | 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
CN111662829A (zh) | 一株绿僵菌chma-005及其在防治茶尺蠖中的应用 | |
CN110982764A (zh) | 一种防治水稻稻瘟病的特基拉芽孢杆菌s12及其应用 | |
CN109055265B (zh) | 一种生防菌及其在农作物蔓枯病防治方面的应用 | |
CN116478887A (zh) | 一种防治猕猴桃夏季溃疡病的微生物菌剂及其应用 | |
CN107937285B (zh) | 防治苹果果实轮纹病的生防菌季也蒙毕赤酵母y-1及其生防制剂 | |
CN116210725B (zh) | 桑树桑黄菌yx2提取物在防治植物病害中的应用 | |
CN107325973B (zh) | 一株对榛椿象具有强致病力的白僵菌菌株及其应用 | |
CN110558334A (zh) | 一种木贼镰刀菌在防控杂草麻叶荨麻中的应用 | |
CN111979151B (zh) | 一种生防菌株及其应用 | |
CN112322561B (zh) | 一株克雷伯氏菌及其在果树梨火疫病防治中的应用 | |
CN112063558B (zh) | 一种假单胞菌属菌株及其应用 | |
CN110669819A (zh) | 一种花生腐烂病病原真菌的致病性鉴定方法 | |
CN116410867B (zh) | 一种黄曲霉菌菌株及其应用 | |
CN111838190A (zh) | 一种防治茎基腐病和流胶病的生防菌剂及其制备方法与应用 | |
CN114480145B (zh) | 一株对核桃长足象具有强致病力的菌株及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Application of YX2 extract from mulberry tree and mulberry yellow fungus in the prevention and control of plant diseases Granted publication date: 20231107 Pledgee: Bank of Tai'an Limited by Share Ltd. Pledgor: SHANDONG PENGBO BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2024980025538 |
|
PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |