CN116210695B - 一种促进植物伤口愈合的化合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进植物伤口愈合的化合物及其应用。本发明通过评价了在诱导愈伤培养基中添加2，6‑二甲氧基苯酚后对愈伤组织增殖率的影响，以及对活体树枝伤口愈合的观察，证明了2，6‑二甲氧基苯酚可以使苹果愈伤组织快速增殖，可以将其制备为促进苹果树、枣树树皮愈合的药剂。2，6‑二甲氧基苯酚开发作为促进树皮愈合的药剂，具有高效且对植物低毒的生长调节剂，适合于植物处理病害、受伤及嫁接时促进愈合的要求，可以使树体快速回复基本功能，具有广阔的市场应用及研究前景。
Description
技术领域
本发明属于化合物新应用领域，具体涉及一种促进植物伤口愈合的化合物及其应用。
背景技术
苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌(Valsamali)引起的重要病害，是现今威胁苹果产业的因素之一。防治苹果树腐烂病必需的一步是要刮除病斑，并涂抹药剂。而产生的树皮伤口如不能及时愈合，将会造成病菌的二次侵入，影响树体恢复健康。而需要寻找一种新的化合物可以加速树皮伤口的愈合，这对接下来防治苹果腐烂病是至关重要的一步。
2，6-二甲氧基苯酚(2,6-Dimethoxyphenol)，主要存在于生物体燃烧后的残留物中，可用于调配干草、坚果、香荚兰、咖啡、老姆、肉味香精及烟用香精等的可食用添加剂，对人畜较安全。目前，针对2，6-二甲氧基苯酚的促进植物伤口愈合的活性尚未见研究，目前市场上出售的各种促进植物伤口愈合的药剂不仅商品价格较高，而且使用效果较差，对植物愈伤促进效果不明显。枣树环割的主要目的就是为了提高座果率，枣树坐果率的高低，关键在于枣树营养生长和生殖生长的平衡。通过环割，切断了枣树韧皮组织中向根系和下部组织运转养分的通道，使光合作用的产物集中在树冠，为枣树生殖生长提供充分的营养，从而提高了座果率、促进了幼果快速生长。但是枣树环割稍有不慎，不仅不会提高枣树的产量，还会导致树势变弱。抗病虫害能力下降，严重时还会导致枣树当年死亡。因此，市场上目前正亟需一种能迅速激活植物愈伤形成，促进细胞分裂和生长代谢，修复植物枝干皮层伤口，加速伤口愈合的高效愈伤剂来解决树木的伤口愈合问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进植物伤口愈合的化合物及其应用，具体的是2，6-二甲氧基苯酚在制备促进植物伤口愈合药物中的应用。
为达到上述的目的，本发明采用了以下技术方案：
2，6-二甲氧基苯酚在制备促进植物伤口愈合药物中的应用。
可选的，所述的植物伤口包括植物枝干皮层伤口。
可选的，所述植物为苹果树和/或枣树。
可选的，所述的促进植物伤口愈合药物中2，6-二甲氧基苯酚的浓度为0.1～3000μg/mL。
一种促进树皮伤口愈合的方法，包括：涂抹或喷涂含有2，6-二甲氧基苯酚的药物于枝干伤口处。
可选的，所述的药物中还添加质量百分浓度为1％的乙醇。
本发明的优点：
本发明的化合物来源于生物质体，不易刺激树木产生药害，是一种新型、有效的促进伤口愈合的药剂。
附图说明
附图是用来提供对本公开的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本公开，但并不构成对本公开的限制。在附图中：
图1为2,6-二甲氧基苯酚的PAL酶活曲线图；
图2为自动荧光显微镜观察愈伤组织生长情况的显微图；注：a为1000μg/mL2，6-二甲氧基苯酚处理的愈伤组织；b为2000μg/mL2，6-二甲氧基苯酚处理的愈伤组织；c为2，4-D处理；d为清水处理。组织缩写为表皮EP；Bar＝100μm。
具体实施方式
为进一步公开而不是限制本发明，以下结合实例对本发明作进一步的详细说明。
2，6-二甲氧基苯酚在制备促进植物伤口愈合药物中的应用。可作为植物愈伤组织诱导剂，可作为诱导剂应用于植物组织培养，可作为诱导剂在植物组织培养过程中用于提高植物愈伤组织增殖率。还可以作为诱导剂在植物组织培养过程中用于促进植物愈伤组织快速形成。
本发明中2，6-二甲氧基苯酚作为诱导剂，提高了愈伤组织增殖率，达到缩短植物组织培养周期的作用；显著加快了苹果树表皮伤口的愈合，可以使树体在遭遇创伤后快速愈合；2，6-二甲氧基苯酚成本低廉、安全无毒、操作简单、效果显著。
比如，本发明中提到的植物伤口包括植物枝干皮层伤口。再比如，本发明中提到的植物为苹果树和/或枣树。
促进植物伤口愈合药物中2，6-二甲氧基苯酚的浓度为0.1～3000μg/mL。
实验证明：2，6-二甲氧基苯酚对愈伤组织的增殖率呈剂量依赖性。2，6-二甲氧基苯酚对愈伤组织的PAL酶活性呈剂量依赖性。2，6-二甲氧基苯酚对苹果树及枣树树枝伤口的愈合速度呈剂量依赖性。
本发明的2，6-二甲氧基苯酚可用于促进苹果树及枣树树皮伤口愈合。在植物产生新创伤时及时涂抹或者喷涂2，6-二甲氧基苯酚，在低温低湿的条件下及早用药，药液附加质量百分浓度为1％的乙醇溶解，对枝干伤口处上下喷雾，以树干患处湿润为度。本发明将2，6-二甲氧基苯酚配制成一定浓度的乙醇溶液，以苹果与枣树作为实验材料，对苹果愈伤组织细胞团与苹果和枣树的细胞皮为实验材料，比如，2，6-二甲氧基苯酚配制成浓度为2000μg/mL、1000μg/mL的2，6-二甲氧基苯酚的乙醇溶液，使用时现用现配，添加到植物组织培养基中可以显著提高植物愈伤组织细胞团的增殖率，同时可以加速植物体表皮伤口愈合。其实验结果显示，用2，6-二甲氧基苯酚处理的苹果愈伤组织细胞团增殖率显著增加，苹果表皮愈合情况明显优于生长素2，4-D处理与清水处理，表明2，6-二甲氧基苯酚具有促进苹果树表皮愈合的作用，在苹果组织培养过程中可以显著缩短培养周期，且对植物表皮伤口的愈合具有一定的作用。
实施例1：
分别将诱导产生的苹果及枣树愈伤组织转接入加入1μg/mL浓度的2，6-二甲氧基苯酚的MS培养基，每皿加入的愈伤组织为3块，接种后称重，试验重复三次。接种后在25～28℃的温度下进行暗培养，分别于7d、15d、30d取出愈伤组织进行称量(鲜重)。利用如下公式计算增殖率，在7～30d分别达到了15.65％～274.78％和10.41％～123.09％。
愈伤组织增殖率(％)＝((接种后质量-接种前质量)/接种前质量)×100；
以2,6-二甲氧基苯酚(1μg/mL)处理后的愈伤组织，分别于3d、5d、7d、9d、12d、15d取样，测试PAL酶的活性。两者的PAL酶活性均显现出先升高而后降低的趋势，如图1，2,6-二甲氧基苯酚的活性在第5d左右达到第一个峰值，为对照的2倍，活性为而且第9d左右PAL酶的活性达到第二个峰值，为对照的3倍。
实施例2：
分别将诱导产生的苹果及枣树愈伤组织转接入加入2μg/mL浓度的2,6-二甲氧基苯酚的MS培养基，每皿加入的愈伤组织为3块，接种后称重，试验重复三次。接种后在25℃-28℃的温度下进行暗培养，分别于7d、15d、30d取出愈伤组织细胞团进行称量(鲜重)。利用实例1中公式计算增殖率，在7d-30d分别达到了36.51％-373.02％和23.67％-207.28％。
以2,6-二甲氧基苯酚(2μg/mL)处理后的愈伤组织细胞团，分别于3d、5d、7d、9d、12d、15d取样，测试PAL酶的活性。两者的PAL酶活性均显现出先升高而后降低的趋势，如图1，2,6-二甲氧基苯酚的活性在第5d左右达到第一个峰值，为对照的3倍，活性为而且第9d左右PAL酶的活性达到第二个峰值，为对照的4倍。
实施例3：
取直径在0.5cm下的幼嫩苹果枝条划出伤口，分别涂抹配置浓度为2000μg/mL、1000μg/mL2,6-二甲氧基苯酚溶液与1000μg/mL的2，4-D，清水涂抹作为CK，每处理重复10次。于第60d取枝条段及伤口附近的组织，沿枝条纵轴方向切割为0.2cm×0.2cm的方形小块，使用石蜡包埋后切片，染色后贴在载玻片上制成永久装片，使用自动荧光显微镜观察愈伤组织生长情况，其结果如图2所示，可以观察到涂抹过2,6-二甲氧基苯酚的苹果枝条伤口愈合宽度明显优于清水对照与药剂对照。
实施例4：
取直径在0.5cm下的幼嫩苹果枝条划出伤口，分别涂抹配置浓度为2000μg/mL2,6-二甲氧基苯酚溶液与1000μg/mL的2，4-D，清水涂抹作为CK，每处理重复10次。于第60d取枝条段及伤口附近的组织，沿枝条纵轴方向切割为0.2cm×0.2cm的方形小块，使用石蜡包埋后切片，染色后贴在载玻片上制成永久装片，使用自动荧光显微镜观察愈伤组织生长情况，其结果如图2所示，可以观察到涂抹过2,6-二甲氧基苯酚的苹果枝条伤口愈合宽度及表皮闭合完整度明显优于药剂对照2,4-D与清水对照，且2000μg/mL的2,6-二甲氧基苯酚处理的愈合情况优于1000μg/mL处理。
以上详细描述了本公开的优选实施方式，但是，本公开并不限于上述实施方式中的具体细节，在本公开的技术构思范围内，可以对本公开的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本公开的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本公开对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本公开的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本公开的思想，其同样应当视为本公开所公开的内容。
Claims (4)
1.2，6-二甲氧基苯酚在制备促进植物伤口愈合药物中的应用，其特征在于，所述的植物伤口包括植物枝干皮层伤口；所述植物为苹果树和/或枣树。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的促进植物伤口愈合药物中2，6-二甲氧基苯酚的浓度为0.1～3000µg/mL。
3.一种促进树皮伤口愈合的方法，其特征在于，包括：涂抹或喷涂含有2，6-二甲氧基苯酚的药物于枝干伤口处；
所述的枝干为苹果树和/或枣树的枝干。
4.根据权利要求3所述的促进树皮伤口愈合的方法，其特征在于，所述的药物中还添加质量百分浓度为1%的乙醇。
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