CN116196246B - 一种具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物及其制备方法。本发明所述具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物采用以下技术方案：所述组合物的制备包括将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂制备得到。本发明化妆品组合物控油效果显著，安全性高，还兼具较好的舒缓抗炎、清除自由基功效。

Description

一种具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物及其制 备方法

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物及其制备方法。

背景技术

皮肤分泌皮脂对人体皮肤维持正常的生理功能具有重要意义，如润滑皮肤、维持皮肤水分、抑制病原微生物的生长及入侵等功能；此外也可作为抗菌物质和抗氧化物质的传递系统。研究表明，成年人皮脂生成速率超过标准数值后，就会呈现出油性皮肤的外观。皮脂过度分泌容易导致毛孔堵塞、黑头粉刺、痤疮等影响皮肤美观的问题。

皮肤皮脂主要有内源性皮脂和外源性皮脂。其中内源性皮脂受年龄、性别、温度、湿度、紫外线、饮食习惯和内分泌影响较大，特别是雄激素是促进皮脂腺发育及皮脂分泌的首要因素；外源性皮脂则主要来源于角质层细胞崩解产生的脂质。

目前用于皮肤控油的途径主要为：1.采用表面活性剂、TiO₂、SiO₂、滑石粉等成分清除或吸附皮肤多余油脂；但容易造成皮肤屏障损伤及毛孔堵塞等风险，并且无法从根源上解决皮脂分泌异常的情况。2.添加硫酸锌、水杨酸、果酸等具有收敛毛孔、减少皮脂排除及改善毛囊口过度角化功效的成分。3.采用外用或口服维A酸等具有抑制5α-还原酶活性的药物调控内分泌系统。4.采用现代提取技术提纯植物中天然活性成分，调控皮脂腺细胞分泌皮脂，如黄连素等。

纯度较高的天然活性成分虽有较好的效果及低刺激性，但价格昂贵；活性较高的合成成分虽然物美价廉，但对皮肤的刺激性、角质层过度渗透带来的炎症反应以及毒副作用亦是亟需解决的问题。油性皮肤的调理不仅要考虑减少皮脂腺分泌皮脂的数量，还需要考虑皮脂的组成和氧化情况；通过抑制氧化应激、减少自由基的生成来减少过氧化皮脂的产生，提高皮脂的质量，减少炎症的发生，保持皮肤的健康和平衡。

发明内容

本发明针对现有技术在控油功效上的缺陷，提供一种以天然中草药为主要原料的具有控油效果优异，且安全性高，同时还兼具较好舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物。

本发明的第二目的在于提供一种控油效果显著、安全性高、具有舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法。

为达到上述目的，本发明提供的具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物采用以下技术方案：所述组合物的制备包括将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂制备得到。

所述组合物制备时，以质量份计，龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.1-3.0份、乳酸菌0.1-3.0份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份。

龙胆草味苦,性寒。归肝、胆、胃经；具有泻肝胆实火，清下焦湿热的功效。龙胆主含环烯醚萜苷,如龙胆苦苷、当药苷、当药苦苷等。龙胆草有很好的对荧光素酶的活化效果，对特异性皮肤炎和皮肤过敏有作用，可在抑制刺激的化妆品中采用，并起抗炎作用。龙胆草对表皮细胞胆留醇的分泌有促进作用，胆留醇是人体皮脂中一重要的柔润成分，龙胆提草的添加可改善油性粗糙皮肤的状态，可以抑制皮脂腺的过度分泌皮脂。龙胆草对脂溢性皮炎，痤疮湿热，皮肤垢腻，瘙痒由较好疗效。基于控油、舒缓、清除自由基等效果考虑，本发明更优选龙胆草用量为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。

茵陈味苦,性微寒；归脾、胃、肝、胆经；具有清湿热,退黄疸的功效。茵陈含有香豆素类化合物、挥发油、黄酮类、氦原酸等化合物,具有利胆保肝、解热、抑菌、降血脂、扩张冠脉及促纤溶的作用。痤疮,皮损以结节、脓疱为主,炎症明显,偏于湿热者,可用单味茵陈煎剂进行外洗。茵陈中色原酮类成分对5α-还原酶有较好的抑制作用，其煎剂具有抗菌及抑制炎症反应的作用。基于控油、舒缓、清除自由基等效果考虑，本发明更优选茵陈用量为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。

作为优选地，本发明化妆品组合物中，当使用龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.6-0.9)时，化妆品组合物的舒缓抗炎效果显得更加明显。作为优选地，为了进一步增加组合物舒缓抗炎效果，龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.62-0.87)、1：(0.65-0.85)、1：(0.68-0.83)或1：(0.7-0.8)显得更为合适。

甘草化学成分主要有黄酮类、三萜皂甙、香豆素、生物碱、挥发油、有机酸、糖类等，其中黄酮和三萜皂甙是其主要活性成分；甘草黄酮是很好的复合型天然抗氧化剂，能深入皮肤内部并保持高活性从而产生抗氧化清除自由基效果。基于控油、舒缓、清除自由基效果考虑，本发明更优选甘草用量为1.5、2.0、2.5、2.8、3.0、3.2、3.5、3.8、4.0、4.5质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。

陈皮，俗称“橘子皮”，通常采摘成熟的果实，然后剥其果皮晒干制作而成。陈皮味苦、性温，归肺脾经，具有理气健脾、燥湿化痰的功效。陈皮富含黄酮等化合物，在抗氧化清除自由基等方面具有极强的效应。基于控油、舒缓、清除自由基效果考虑，本发明更优选陈皮用量为0.8、1.0、1.2、1.5、1.8、2.0、2.2、2.5、2.8质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。

作为优选地，本发明化妆品组合物中，当使用甘草和陈皮的质量比为1：(0.3-0.7)时，化妆品组合物的抗氧化清除自由基效果显得更加明显。作为优选地，为了进一步增加组合物抗氧化清除自由基效果，甘草和陈皮的质量比为1：(0.32-0.65)、1：(0.35-0.63)、1：(0.38-0.60)或1：(0.4-0.55)显得更为合适。

作为优选地，为了赋予化妆品组合物更好的控油、舒缓、清除自由基效果，本发明酵母菌用量为0.15、0.2、0.3、0.4、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、2.7、2.8、2.9质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。本发明酵母菌可为干酵母粉，合适的酵母菌可为合肥郯润生物科技有限公司生产的酵母粉(CAS 119-44-8)。

作为优选地，为了赋予化妆品组合物更好的控油、舒缓、清除自由基等效果，本发明乳酸菌用量为0.15、0.2、0.3、0.4、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、2.7、2.8、2.9质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。本发明乳酸菌可为乳酸菌冻干粉，合适的乳酸菌可为山东萍聚生物科技有限公司生产的乳酸菌冻干粉。

作为优选地，当使用酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)时，化妆品组合物的控油、舒缓、清除自由基等效果显得更加明显。作为优选地，为了进一步增加组合物控油、舒缓、清除自由基等效果，本发明酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.95-1.15)、1：(0.97-1.12)、1：(0.98-1.11)或1：(1-1.1)显得更为合适。

作为优选地，本发明稳定剂用量为6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。作为优选地，本发明所述稳定剂包括多元醇。更优选，所述多元醇包括甘油、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、丁二醇、1，2-己二醇中的至少一种。

作为优选地，本发明水的用量为30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190质量份这样的点值，以及上述任意两个点值之间的范围。优选本发明所述水可选自去离子水、自来水、离子水、矿泉水、河水、湖水、蒸馏水、纯水中至少一种。

作为优选地，本发明的控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其制备包括将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂制备得到；其中所述组合物制备时，以质量份计，龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.01-0.5份、乳酸菌0.01-0.5份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份；所述龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.6-0.9)；所述甘草和陈皮的质量比为1：(0.3-0.7)；所述酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)。

作为优选地，本发明的控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其制备是包括龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂制备得到；其中所述组合物制备时，以质量份计，龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.01-0.5份、乳酸菌0.01-0.5份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份；所述龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.6-0.9)；所述甘草和陈皮的质量比为1：(0.3-0.7)；所述酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)；所述稳定剂包括多元醇。

作为优选地，本发明的控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其制备是包括龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂制备得到；其中所述组合物制备时，以质量份计，龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.01-0.5份、乳酸菌0.01-0.5份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份；所述龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.6-0.9)；所述甘草和陈皮的质量比为1：(0.3-0.7)；所述酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)；所述稳定剂包括甘油、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、丁二醇、1，2-己二醇中的至少一种。

另一方面地，本发明所述控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法，所述制备方法包括本领域常规制备工艺步骤。

作为优选地，本发明化妆品组合物的制备方法，包括：(1)、按照比例称取原料；(2)、植物原料预处理；(3)、发酵提取；(4)、膜分离及调配。

作为优选地，所述步骤(2)的植物原料预处理包括：将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水搅拌，灭菌，得到植物粉末料液。

作为优选地，所述步骤(3)的所述发酵提取包括：在植物粉末料液中加入酵母菌和乳酸菌，搅拌均匀，发酵、除渣，得到除渣料液。

作为优选地，所述步骤(4)的所述膜分离及调配包括：将除渣料液通过陶瓷膜并收集澄清的滤液，加入稳定剂，搅拌均匀，灭菌，得到所述化妆品组合物。

作为优选地，所述步骤(2)灭菌为在80-100℃下保温5-30分钟。更优选为90-95℃下保温10-30分钟。

作为优选地，所述步骤(3)的发酵的条件为：在25-35℃下发酵4-8h。更优选在26-34℃下发酵4.5-7.5小时，或，在27-33℃下发酵4.5-7小时，或在28-32℃下发酵5-7小时。

作为优选地，所述步骤(2)和(3)的搅拌转速均各自独立地为100-1000转/分，优选为200-900转/分、200-800转/分、200-700转/分、200-500转/分。所述步骤(2)和(3)的搅拌时间均各自独立地为0.1-3小时，优选为0.2-2.5小时、0.4-2小时、0.5-1.5小时。

作为优选地，所述步骤(4)的陶瓷膜为滤孔小于500nm的陶瓷膜。可优选为陶瓷膜为滤孔400nm、300nm、200nm或100nm的陶瓷膜。

作为优选地，所述步骤(4)灭菌为紫外灭菌。

作为优选地，本发明所述控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于：包括如下制备步骤：

(1)、按比例称取原料；

(2)、植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水并在转速为100-1000转/分下搅拌0.1-3小时，然后在80-100℃下保温5-30分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；

(3)、发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入酵母菌和乳酸菌，在转速为100-1000转/分下搅拌0.1-3小时搅拌均匀，在25-35℃下发酵4-8h，除渣，得到除渣料液；

(4)、膜分离及调配：将步骤(3)的除渣料液通过小于500nm陶瓷膜并收集澄清的滤液，加入稳定剂，在转速为100-1000转/分下搅拌0.1-3小时搅拌均匀搅拌均匀，紫外灭菌，即得所述化妆品组合物。

有益效果：

本发明将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮、水使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，然后添加稳定剂所得到化妆品组合物，在较低浓度下，0.5％质量浓度下显示出显著的抑制SZ95人皮脂腺细胞分泌油脂的作用，本发明化妆品组合物具有显著控油效果。本发明特别地选择使用龙胆作为原料，可以显著地提高组合物的控油效果。

本发明化妆品组合物具有较强的抑制透明质酸酶活性，本发明制备得到的化妆品组合物透明质酸酶抑制率达到95.3％，具有优异的抗炎效果。

本发明化妆品组合物具有优良的清除自由基能力，对DPPH·自由基清除率达到95.6％，超氧自由基清除率达到89.8％，具有优异的抗氧化抗衰效果。

本发明限定的组分和用量体系中，龙胆草和茵陈协同赋予组合物优异的舒缓效果。甘草和陈皮相辅相成，显著地提高组合物的抗氧抗衰效果，两者在本发明用量范围内产生协同复配增加组合物抗氧化、清除自由基效果。

本发明还通过酵母菌发酵工艺提升了组合物功效活性。本发明使用乳酸菌和酵母菌复合菌进行发酵制备植物发酵成分得到的化妆品组合物具有协同增加产品抗氧化、舒缓等效果。本发明控制酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)具有更优异的抗氧化、舒缓、控油等效果。

本发明采用植物原料制备化妆品组合物，具有安全风险低的优势。

具体实施方式

下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。

除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。其中，本发明测试中的龙胆草来源于亳州市弘宝堂商贸有限公司；茵陈来源于亳州市亳源通中药材种植有限公司；甘草来源于广东逢春制药有限公司；陈皮来源于福建天民茶业有限公司；酵母菌来源于合肥郯润生物科技有限公司生产的酵母粉(CAS 119-44-8)；乳酸菌来源于山东萍聚生物科技有限公司生产的乳酸菌冻干粉。

实施例1

一种控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其制备步骤如下：

(1)、按比例称取原料；其中，制备原料，以质量份计：龙胆草3.0份、茵陈2.4份、甘草3.0份、陈皮1.5份、酵母菌0.5份、乳酸菌0.5份、稳定剂丁二醇15.0份、加水至原料总质量共150份；

(2)、植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水并在转速为300转/分下搅拌0.5小时，然后在95℃下保温10分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；

(3)、发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入酵母菌和乳酸菌，在转速为200转/分下搅拌0.5小时搅拌均匀，在30℃下发酵5h，除渣，得到除渣料液；

(4)、膜分离及调配：将步骤(3)的除渣料液通过100nm陶瓷膜并收集澄清的滤液，加入稳定剂，并在转速为300转/分下搅拌0.4小时搅拌均匀，紫外灭菌，即得所述化妆品组合物。

实施例2

一种控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其制备步骤如下：

(1)、按比例称取原料；其中，制备原料，质量份计：龙胆草2.5份、茵陈2份、甘草2.8份、陈皮1.6份、酵母菌0.45份、乳酸菌0.5份、稳定剂1，3-丙二醇20.0份、加水至原料总质量共150份；

(2)、植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水并在转速为400转/分下搅拌0.4小时，然后在93℃下保温12分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；

(3)、发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入酵母菌和乳酸菌，在转速为300转/分下搅拌0.6小时搅拌均匀，在32℃下发酵4.8h，除渣，得到除渣料液；

(4)、膜分离及调配：将步骤(3)的除渣料液通过100nm陶瓷膜并收集澄清的滤液，加入稳定剂，并在转速为300转/分下搅拌0.4小时搅拌均匀，紫外灭菌，即得所述化妆品组合物。

对比例1：

制备原料不使用酵母菌，乳酸菌用量变为1份，且步骤(3)的发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入乳酸菌，在转速为200转/分下搅拌0.5小时搅拌均匀，在30℃下发酵5h，除渣，得到除渣料液；其他与实施例1均相同。

对比例2：

制备原料不使用乳酸菌，酵母菌用量变为1质量份，且步骤(3)的发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入酵母菌，在转速为200转/分下搅拌0.5小时搅拌均匀，在30℃下发酵5h，除渣，得到除渣料液；其他与实施例1均相同。

对比例3：

制备原料酵母菌、乳酸菌总用量保持为1质量份，乳酸菌和酵母菌的质量比为1:0.5；其他与实施例1均相同。

对比例4：

制备原料酵母菌、乳酸菌总用量保持为1质量份，乳酸菌和酵母菌的质量比为1:1.6；其他与实施例1均相同。

对比例5：

制备原料不使用龙胆草，茵陈用量变为5.4份，且步骤(1)的植物原料预处理：将茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水并在转速为300转/分下搅拌0.5小时，然后在95℃下保温10分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；其他与实施例1均相同。

对比例6：

制备原料不使用茵陈，龙胆草用量变为5.4份，且步骤(1)的植物原料预处理：将龙胆草、甘草、陈皮粉碎，加水并在转速为300转/分下搅拌0.5小时，然后在95℃下保温10分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；其他与实施例1均相同。

对比例7：

制备原料不使用甘草，陈皮用量变为4.5份，且步骤(1)的植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、陈皮粉碎，加水并在转速为300转/分下搅拌0.5小时，然后在95℃下保温10分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；其他与实施例1均相同。

对比例8：

制备原料不使用陈皮，甘草用量变为4.5份，且步骤(1)的植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、甘草粉碎，加水并在转速为300转/分下搅拌0.5小时，然后在95℃下保温10分钟进行灭菌，得到植物粉末料液；其他与实施例1均相同。

实施例和对比例性能测试：

一、控油效果测定

2.1实验目的及依据

目的：通过检测产品抑制细胞油脂分泌的能力，探究化妆品组合物产品的控油功效。

依据：实验根据《化妆品功效宣称评价规范》和《香烟烟雾提取物对SZ95人皮脂腺细胞增殖、凋亡及脂质合成的影响》进行试验设计，通过与正常组对比，验证样品的控油功效。

2.2实验方法

实验细胞：选用永生化人皮脂腺细胞系SZ95，细胞株通过了细胞系质控实验检测，结果合格。本次试验代数：P10。

仪器：二氧化碳培养箱，多功能酶联检测仪，生物安全柜，倒置显微镜，倒置荧光显微镜，8通道移液枪。

试剂：胎牛血清，高糖DMEM培养基，青霉素-链霉素溶液，胰蛋白酶-EDTA溶液，改良油红检测试剂盒，多聚甲醛，异丙醇，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。

分组与对照：

(1)样品组：0.5％质量浓度的各实施例或对比例所述化妆品组合物的去离子水溶液。

(2)试验对照信息：①空白对照：完全培养基；②阳性对照：12.5μmol/L EGCG。

操作步骤

1)细胞准备：把生长状态良好的细胞接种于24孔板中，孔板边缘孔加入500μlPBS溶液，并分别设置空白对照组、阳性对照组和受试的样品组。将24孔板放置在CO2培养箱中培养过夜。

2)给药：弃掉24孔板中的培养基，开展给药操作。正常组给予1ml完全培养基，样品组给予1m对应浓度的受试物。给药完毕后将24孔板放置在CO2培养箱中培养。

3)油滴检测：孵育结束后，按照油红检测试剂盒的使用说明书进行检测，用倒置显微镜和酶标仪分别检测各样品孔的油滴情况。

2.3评判指标

2.4实验结果

正常培养条件下，受试物对皮脂腺细胞分泌油滴含量见表1。

表1皮脂腺细胞中油滴相对含量

“*”表示与空白对照组相比具有显著性差异，“*”：p＜0.05。

通过表1关于控油效果测定可知，本发明由龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.1-3.0份、乳酸菌0.1-3.0份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份制备得到的化妆品组合物的皮脂腺细胞中油滴相对含量测试值可低至(75.908±5.558*)％，其可显著降低油脂含量效果，本发明化妆品组合物具有优异的控油效果。

通过实施例1和对比例1-2的比较可知，本发明限定的乳酸菌和酵母菌用量范围内，使用乳酸菌和酵母菌复合菌进行发酵制备植物发酵成分得到的化妆品组合物具有协同增加产品控制油脂分泌的效果，使得本发明化妆品组合物具有优异的控油效果。本发明中酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)使得化妆品组合物的控油效果更好，可参考对比例3-4和实施例的比较。本发明创造性地选择使用酵母菌和乳酸菌共同发酵，提高了产品控制油脂分泌效果，使得产品在控油化妆品中具有较大的应用空间。

本发明化妆品组合物中省略龙胆草得到的组合物对比例5进行测试时，显示皮脂腺细胞中油滴相对含量为92.454±3.726*。而本发明含有龙胆草得到的组合物实施例1进行测试时，显示皮脂腺细胞中油滴相对含量仅为75.908±5.558*。可见，本发明含有龙胆草的化妆品组合物具有优异的控油效果，本发明使用龙胆作为原料，可以预料不到地增加组合物的控油效果。

二、抗氧化、舒缓活性测试

1.1实验目的

以护肤品中常用紧抗氧化成分VC及舒缓成分甘草酸二钾对比，测试组合物对DPPH·自由基、超氧自由基和透明质酸酶活性的抑制效果，从而检查本发明组合物的抗氧化、舒缓作用。

1.2样品溶液的选择

质量浓度为0.05％的VC、1.0％甘草酸二钾水溶液和上述实施例、对比例化妆品组合物。

1.3实验方法

1)清除DPPH·自由基能力测定：分别吸取1.4mL的不同样品溶液和2.0mL的DPPH·自由基乙醇溶液(质量浓度为0.05mg/mL)于试管中，室温下避光反应30min，于519nm处测定吸光度值A1；吸取2.0mL的DPPH乙醇溶液、1.4mL纯水，测定吸光度值A0；吸取2.0mL无水乙醇、1.4mL样品溶液，测定吸光度值A2。根据下式计算清除率：

清除率＝[1-(A1-A2)/A0]×100％。

2)清除超氧自由基能力的测定：分别吸取2mL不同样品溶液、4.5mL的50mmol/LTris-HCl(pH8.2)缓冲液及0.4mL的25mmol/L邻苯三酚溶液于试管中，混匀，25℃水浴5min，再加入8mmol/L HCl溶液1mL，混匀，于波长325nm处测定吸光度值A1；另以纯水替代样品溶液同法测定吸光度值A0；以纯水替代邻苯三酚溶液同法测定吸光度值A2。

根据下式计算清除率：清除率＝[1-(A1-A2)/A0]×100％。

抑制透明质酸酶活性的测定：取0.1mL0.25mmol/LCaCl2溶液和0.5mL500U/mL透明质酸酶液(溶剂为pH＝5.6的醋酸缓冲液)于37℃保温培养20min；加入样品溶液0.5mL，继续37℃保温培养20min；加入0.5mL1.0mg/mL的透明质酸钠溶液(溶剂为pH＝5.6的磷酸缓冲液)37℃保温培养30min，常温放置5min；加入0.1mL0.4mol/LNaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮-碳酸钠溶液(3.5mL乙酰丙酮溶于50mL0.1mol/L碳酸钠溶液)，置于沸水浴中加热15min后立即冰水浴冷却5min；加入埃尔利希试剂(0.8g对二甲氨基苯甲醛溶于15mL浓盐酸和15mL无水乙醇混合均匀)1.0mL，并用3.0mL无水乙醇进行稀释，常温显色20min，采用分光光度计测定其在530nm波长下的吸光度值。根据以下公式计算抑制率：

式中：A—试样溶液吸光值

B—(醋酸缓冲液代替酶液)试样空白吸光值

C—(醋酸缓冲液代替样品溶液)对照溶液吸光值

D—(醋酸缓冲液代替样品溶液及酶液)对照空白吸光值

1.4抗氧化、舒缓活性测试如表2

表2：抗氧化、舒缓活性测试

通过表2关于抗氧化、舒缓活性测试可知，本发明制备得到的化妆品组合物在具有优异的控油效果之外，还兼具较好的清除自由基和抗炎舒缓效果。本发明组合物DPPH·自由基清除率达到95.6％，超氧自由基清除率达到89.8％，透明质酸酶抑制率达到95.3％。本发明化妆品组合物相较于0.05％VC溶液具有显著清除自由基效果，相较于1.0％甘草酸二钾具有优异的透明质酸酶抑制率的提高。

通过实施例1和对比例1-4的比较可知，本发明使用乳酸菌和酵母菌复合菌进行发酵制备植物发酵成分得到的化妆品组合物具有协同增加产品抗氧化、舒缓等效果。本发明控制酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)具有更优异的抗氧化和舒缓效果。

本发明中对比例5-6中保持龙胆草或茵陈总量与实施例1龙胆草和茵陈总量相同时，不使用茵陈或龙胆草中的一种所得到组合物的舒缓效果降低明显。对比例7-8中保持陈皮或甘草总量与实施例1中陈皮和甘草总量相同时，不使用甘草或陈皮中的一种得到的组合物的舒缓效果降低明显。可知，在本发明限定的组分和用量体系中，龙胆草和茵陈两者协同赋予组合物优异的舒缓效果，甘草和陈皮相辅相成，显著地提高组合物的抗氧抗衰效果，两者在本发明用量范围内产生协同复配的效果。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (4)

1.一种控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物，其特征在于：所述组合物制备时，以质量份计，制备原料包括：龙胆草1.0-10.0份、茵陈1.0-10.0份、甘草1.0-5.0份、陈皮0.5-3.0份、酵母菌0.1-3.0份、乳酸菌0.1-3.0份、水20.0-200.0份、稳定剂5.0-25.0份；

所述龙胆草和茵陈的质量比为1：(0.6-0.9)；

所述甘草和陈皮的质量比为1：(0.3-0.7)；

所述酵母菌和乳酸菌的质量比为1：(0.9-1.2)；

所述稳定剂为甘油、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、丁二醇、1，2-己二醇中的至少一种。

2.如权利要求1所述控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于：包括如下制备步骤：

(1) 按比例称取原料；

(2) 植物原料预处理：将龙胆草、茵陈、甘草、陈皮粉碎，加水搅拌，灭菌，得到植物粉末料液；

(3) 发酵提取：在步骤(2)植物粉末料液中加入酵母菌和乳酸菌，搅拌均匀，发酵、除渣，得到除渣料液；

(4) 膜分离及调配：将步骤(3)的除渣料液通过陶瓷膜并收集澄清的滤液，加入稳定剂，搅拌均匀，灭菌，即得所述的具有控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物。

3.如权利要求2所述控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)的发酵的条件为：在25-35℃下发酵4-8小时。

4.如权利要求2所述控油、舒缓、清除自由基功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)的陶瓷膜为滤孔小于500 nm的陶瓷膜。