CN116172995A - 一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用，实验证明，沙丁胺醇治疗后模型小鼠内异症病灶个数减少与体积缩小，减轻疼痛及性激素无改变。

Description

一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

背景技术

子宫内膜异位症(内异症)是一种妇科常见良性疾病，属于慢性炎症性雌激素依赖性疾病，其主要症状是疼痛、不孕与包块，而疼痛是内异症的特征性症状。虽然经过100多年的研究，但内异症的发病机制至今仍然不清。目前认为免疫、炎症、血管生成及细胞凋亡在内异症的发生与发展中起关键作用。内异症的治疗包括手术与药物，但内异症手术后复发率高，目前主张内异症避免重复手术，早期药物干预及药物长期管理。目前治疗内异症的药物其实就是应用抑制雌激素的药物，主要包括口服避孕药、高效孕激素与促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)三种。GnRHa有严重的低雌激素副反应，只能作为短期治疗，且在治疗过程中需要耐受不来月经及不能生育的问题；高效孕激素由于存在低雌激素、闭经、不规则子宫出血、乳腺癌与血液高凝风险往往使患者不能长期坚持使用，且在治疗过程中不能妊娠；口服避孕药虽可以来月经，但也存在不规则子宫出血、乳腺癌与血液高凝风险也往往使患者不能长期坚持使用，且在治疗过程中不能妊娠。显然，研究开发新的药物包括老药新用以治疗内异症，使其药物治疗过程中来月经，不影响患者的性激素水平，又能够保留患者的生育能力是目前内异症临床的迫切任务。

沙丁胺醇是一种短效β2肾上腺素能受体激动剂，临床上用作平喘药，能有效地抑制组胺等致过敏性物质的释放、防止支气管痉挛。沙丁胺醇除了支气管扩张作用外，还可通过β-2肾上腺素能受体发挥抗炎作用，通过抑制VEGF发挥抗血管生成作用及通过下调BCL2蛋白表达水平促进细胞凋亡。

目前，尚未见沙丁胺醇治疗内异症的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：成功建立子宫内膜异位症小鼠模型后，分别给予沙丁胺醇0mg/kg，2mg/kg，4mg/kg，8mg/kg每天一次，持续3周，观察治疗后小鼠模型病灶个数与体积大小以及小鼠体重情况。治疗结束后切除病灶执行病理组织验证以及免疫组织化学明确该药经免疫、炎症、血管生成及细胞凋亡等途径缩小病灶的机制。

本发明的有益效果是：本发明提供了一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的新应用。经实验证明，沙丁胺醇治疗后模型小鼠内异症病灶个数减少与体积缩小，且病灶周围促进内异症发展的因子也减少。

附图说明

图1为各实验组每只小鼠体内囊肿外观图像；

图2为各实验组每只小鼠体内囊肿数目的统计结果图；

图3为各实验组每只小鼠体内囊肿总体积的统计结果图；

图4为各实验组每只小鼠体内囊肿总重量的统计结果图；

图5为各实验组每只小鼠体重的统计结果图；

图6为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织经甲苯胺蓝对肥大细胞染色图及统计结果图；

图7为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织炎症因子免疫组化染色图及统计结果图；

图8为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织血管生成因子免疫组化染色图及统计结果图；

图9为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织纤维化因子免疫组化染色图、Masson染色图及统计结果图；

图10为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织抗凋亡因子免疫组化染色图、TUNEL染色图及统计结果图；

图11为对照组与沙丁胺醇处理组小鼠内异组织神经因子免疫组化染色图及统计结果图。

具体实施方法

下面结合附图，对本发明进行详细说明。在不冲突的情况下，下述的实施例及实施方式中的特征可以相互组合。

本发明提出了一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用，通过建立子宫内膜异位症小鼠模型后，分别给予沙丁胺醇0mg/kg，2mg/kg，4mg/kg，8mg/kg每天一次，持续3周，观察治疗后小鼠模型病灶个数与体积大小以及小鼠体重情况。治疗结束后切除病灶执行病理组织验证以及免疫组织化学明确该药经免疫、炎症、血管生成及细胞凋亡等途径缩小病灶的机制。

下面通过实验对本发明提出的沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用进行进一步说明。

实验步骤：选取24只5-6周龄的balb/c小鼠，剪取8只供体鼠的子宫剪碎，加生理盐水混悬，腹腔注射入16只受体鼠中。造模成功后的第15天，将16只模型小鼠分成4组，每组四只模型小鼠。四组模型小鼠分别用不同浓度的硫酸沙丁胺醇水溶液进行灌胃给药，浓度依次为0mg/kg，2mg/kg，4mg/kg，8mg/kg，每天一次，持续3周。观察治疗后小鼠模型病灶个数与体积大小以及小鼠体重情况。给药结束后，模型小鼠称重并断颈处死，剖开腹部，仔细寻找腹腔中的内异症病灶并小心取出，计算每只模型小鼠病灶的个数，体积及重量。切除小鼠病灶组织进行蜡块包埋，随后切片进行病理组织染色，以验证内异症模型成功及药物治疗后变化。同时执行免疫组织化学染色进行免疫细胞(巨噬细胞与肥大细胞)、炎症因子(IL-1β与TNF-ɑ)、血管生成(PDGFb与CD31)、纤维化(TGFb与Masson)、细胞凋亡(BCL2与TUNEL)及神经出芽(TUBB3、SP及NGF)的生物标志物检测以探讨其缩小病灶的作用机制。

实验结果：图1-4可以看出应用不同剂量的沙丁胺醇治疗均可显著减少模型小鼠内异症的病灶个数及病灶体积以及病灶重量，图5显示沙丁胺醇对小鼠体重无明显影响,说明沙丁胺醇无明显毒性。病灶缩小最理想的是8mg/kg每天一次的沙丁胺醇，可获得对内异症模型小鼠有良好的治疗疗效。后续我们使用对照组及8mg/kg治疗组小鼠的异位组织切片进行染色进一步探究药物作用机理。图6显示沙丁胺醇处理的小鼠病灶组织处被染色的肥大细胞数明显少于未用药的对照溶剂组，图7炎症因子的免疫组化染色显示沙丁胺醇处理的小鼠病灶处炎症因子(F4/80,IL1B,TNFa)水平显著下降，表明沙丁胺醇可改善内异病灶的炎症环境。沙丁胺醇处理后异位组织病灶处血管生成相关因子(PDGFb，CD31)表达水平下降(图8)，表明沙丁胺醇能抑制病灶周围血管生成。图9显示沙丁胺醇能降低病灶处纤维化因子TGF的水平，减轻病灶纤维化程度。图10显示沙丁胺醇可以降低抗凋亡因子BCL2的水平，促进病灶组织细胞的凋亡。图11显示沙丁胺醇处理后降低了病灶处神经因子TUBB3,SP,NGF的表达，减少病灶处神经密度，可提高小鼠的疼痛阈值。

综上所述，沙丁胺醇治疗内异症模型小鼠导致病灶个数与体积明显减少是通过改善免疫环境、抗炎、抗血管生成、抑制纤维化，促进细胞凋亡及减少神经生成等机制而发挥作用的。

发现该药治疗可以显著减少模型病灶个数、显著缩小模型内异症病灶大小、增加模型小鼠疼痛阈值而不影响激素水平也不影响生育。

以上实施例仅用于说明本发明的设计思想和特点，其目的在于使本领域内的技术人员能够了解本发明的内容并据以实施，本发明的保护范围不限于上述实施例。所以，凡依据本发明所揭示的原理、设计思路所作的等同变化或修饰，均在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种沙丁胺醇在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述沙丁胺醇的剂量为每天一次浓度为8mg/kg的硫酸沙丁胺醇水溶液。

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