CN116077511A - 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用 - Google Patents

硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116077511A
CN116077511A CN202211258880.3A CN202211258880A CN116077511A CN 116077511 A CN116077511 A CN 116077511A CN 202211258880 A CN202211258880 A CN 202211258880A CN 116077511 A CN116077511 A CN 116077511A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cornea
hydrogen sulfide
corneal
sulfide donor
cells
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202211258880.3A
Other languages
English (en)
Inventor
蔡晓琛
顾雨春
谭帅帅
吴理达
张昕然
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengnuo Regenerative Medical Technology Beijing Co ltd
Original Assignee
Chengnuo Regenerative Medical Technology Beijing Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengnuo Regenerative Medical Technology Beijing Co ltd filed Critical Chengnuo Regenerative Medical Technology Beijing Co ltd
Priority to CN202211258880.3A priority Critical patent/CN116077511A/zh
Publication of CN116077511A publication Critical patent/CN116077511A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7084—Compounds having two nucleosides or nucleotides, e.g. nicotinamide-adenine dinucleotide, flavine-adenine dinucleotide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供了硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用。与现有技术相对比，本发明具有以下优点：本发明提供了硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用，经过小鼠模型试验可以得知，硫化氢供体GYY4137具有显著的逆转角膜内皮细胞衰老的功效，无论是对于角膜内皮细胞营养不良症还是角膜损伤，均具有十分优异的治疗效果。

Description

硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用。
技术背景
角膜是眼睛最前面的透明部分，覆盖虹膜、瞳孔及前房，并为眼睛提供大部分屈光力。角膜具有维持正常视力、保护眼睛不受伤害、维持角膜完整的作用。角膜内皮细胞的功能直接影响角膜的透明性，眼部的炎症、眼外伤、手术及长期戴角膜接触镜等均会影响角膜内皮的功能和数量。
Fuchs角膜内皮营养不良，又称为滴状角膜，是角膜内皮细胞进行性的损伤，角膜后弹力层增厚，细胞外基质赘疣沉积，最终发展成为角膜内皮失代偿为特征的遗传性角膜疾病。随病程发展出现角膜上皮、基质水肿、浑浊。最终可导致角膜瘢痕。本病常伴有高眼压、短眼轴、浅前房等，女性发病约为男性发病的2倍。早发型角膜内皮细胞营养不良症在生命的前10年发生，与之相关的突变专一地与COL8A2基因连锁。晚发型角膜内皮细胞营养不良症与TCF4，TCF8，AGBL1，LOXHD1，SLC4A11，TGFB1，FCD1，FCD2，FCD3，FCD4，KANK4，LAMC1，ATP1B1基因连锁。目前FECD的研究模型包括COL8A2等突变体小鼠模型及365nm UV诱导的C57小鼠模型。
Fuchs角膜内皮细胞营养不良有遗传成分，大约30％的患者有明确的家族史，目前认为此病是一种常染色体显性遗传疾病。Fuchs角膜内皮细胞营养不良也能与其它疾病并发，在患有心血管疾病的患者中更容易发生，也可以与圆锥角膜、年龄相关性黄斑疾病并发。我国在老年性白内障术前角膜内皮细胞检查中，Fuchs角膜内皮细胞营养不良的发现率为0.8％。
角膜内皮细胞营养不良症在早期出现角膜赘疣不需要治疗，当出现晨间视力下降、视物不清时，可使用高渗葡萄糖溶液以加快角膜基质脱水。治疗性角膜接触镜对角膜上皮大泡有减轻症状作用。当出现角膜大泡、持续角膜水肿，严重影响视力时，可行穿透角膜移植术或者角膜内皮移植术。目前，角膜内皮移植术成功率较高，在角膜内皮细胞功能失代偿的早期，应行角膜内皮移植术进行治疗。
角膜损伤是临床常见而处理棘手的眼外伤之一，以化学烧伤为主，而化学烧伤中最常见的是碱烧伤。角膜损伤后发生的无菌性角膜溃疡、穿孔、眼球粘连及继发性青光眼等更是眼部致残的常见原因。
临床上角膜损伤的治疗方式包括及时彻底清洗结膜囊、结膜下注射维生素C、阿托品散瞳、局部及全身抗菌消炎、营养角膜、羊膜移植、自血疗法、遮盖患眼等，但这些药物只能轻微地缓解病情，治疗效果较差。
有研究使用皮质类固醇激素治疗角膜损伤，结果显示其具有抗炎和免疫抑制作用，具有一定的治疗作用。但是皮质类固醇激素会抑制组织再生，并具有其它潜在的副作用，总体上治疗效果仍然不够。
目前没有根治角膜内皮细胞营养不良和角膜损伤的药物。
发明内容
针对上述存在的技术局限性，本发明提出了硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用；其克服了背景技术中提到的不足和缺陷。
为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：
本发明的发明点是提供了硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用。
可选地，上述的应用，所述角膜相关疾病为角膜内皮营养不良所引起的病症。
可选地，上述的应用，所述角膜相关疾病为角膜损伤所引起的病症。
可选地，上述的应用，所述角膜相关疾病为角膜细胞衰老所引起的病症。
可选地，上述的应用，所述硫化氢供体为GYY4137、ATB-346、四硫代钼酸铵、阿司匹林衍生物、双氯芬酸衍生物中的一种或多种。
药理研究表明，人工合成硫化氢供体GYY4137具有抗癌、舒张血管、抗高血压、抗炎及维持肾功能等多种活性，且这些活性与其释放硫化氢的性能相关。ATB-346主要应用于治疗风湿性关节炎，四硫代钼酸铵主要用于治疗Wilson病。其他硫化氢供体，如阿司匹林衍生物被报道在胃肠道黏膜、心血管系统、神经炎症方面具有其独特的保护作用，双氯芬酸衍生物既能保护胃肠道又具备强力的抗炎效果，并且在血管闭塞性疾病中有独特保护作用，减轻缺血/再灌注损伤。
可选地，上述的应用，所述硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为0.1％-3％；ATB-346的使用浓度为8-12μM；四硫代钼酸铵的使用浓度为0.8-1.2mM。
可选地，上述的应用，所述硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为为2％。
治疗角膜相关疾病的药物中，还可以包含有可联用药物；可联用药物为丁苯酞或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
丁苯酞的使用浓度按照质量体积百分比计为0.5-2.5％；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的使用浓度为40μM-2mM。
可联用药物中，硫化氢供体为GYY4137，使用浓度为0.1％-3％，优选为2％。
与现有技术相对比，本发明具有以下优点：本发明提供了硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用，经过小鼠模型试验可以得知，硫化氢供体GYY4139具有显著的逆转角膜内皮细胞衰老的功效，无论是对于角膜内皮细胞营养不良症还是角膜损伤，均具有十分优异的治疗效果。
附图说明
图1为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜内皮细胞营养不良症实验中的β-半乳糖苷酶染色结果对比图。
图2为本发明一实施例的不同硫化氢供体对逆转HUVEC细胞衰老的效果对比图。
图3为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的阴性对照组角膜HE染色结果。
图4为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的模型对照组角膜HE染色结果。
图5为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的贝复舒处理组角膜HE染色结果。
图6为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的ATB-346处理组角膜HE染色结果。
图7为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的四硫钼酸铵处理组角膜HE染色结果。
图8为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中的GYY4137处理组角膜HE染色结果。
图9为本发明一实施例的硫化氢供体治疗角膜损伤实验中模型对照组和GYY4137处理组的小鼠眼睛照片；其中，图9A为模型对照组小鼠眼睛照片，角膜出现明显混浊；图9B为给予GYY41372天后的小鼠眼睛照片，角膜混浊得到明显改善。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面对本发明进行进一步详细说明。但是应该理解，此处所描述仅仅用以解释本发明，并不用于限制本发明的范围。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术术语和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同，本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在限制本发明。本文中所使用的试剂和仪器均商购可得，所涉及的表征手段均可参阅现有技术中的相关描述，本文中不再赘述。
为了进一步了解本发明，下面结合最佳实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1
硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用。
角膜相关疾病为角膜内皮营养不良所引起的病症。
角膜相关疾病为角膜损伤所引起的病症。
角膜相关疾病为角膜细胞衰老所引起的病症。
硫化氢供体为GYY4137、ATB-346、四硫代钼酸铵、阿司匹林衍生物、双氯芬酸衍生物中的一种或多种。
硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为0.1％-3％；ATB-346的使用浓度为8-12μM；四硫代钼酸铵的使用浓度为0.8-1.2mM。
硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为2％。
治疗角膜相关疾病的药物中，还可以包含有可联用药物；可联用药物为丁苯酞或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸；丁苯酞的使用浓度按照质量体积百分比计为0.5-2.5％；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的使用浓度为40μM-2mM；可联用药物中，硫化氢供体为GYY4137，使用浓度为0.1％-3％，优选为2％。
实施例2
硫化氢供体治疗角膜内皮细胞营养不良症：
1、实验材料：
如下表1所示。
表1
名称 生产公司 货号 常用溶剂 终浓度
GYY4137二氯甲烷配合物 Sigma SML0100 DPBS 2％
四硫钼酸铵 Sigma 15060-55-6 DPBS 1mM
ATB-346 Selleck 1226895-20-0 DPBS 10μM
DPBS(无钙镁) Gibco 2380005  
2、实验方法
2.1角膜内皮细胞营养不良症小鼠模型的建立：
6-8周龄C57雄鼠，麻醉，向造模眼球滴加散瞳药，眼球距光源14mm，分别用250J，500J，750J，1000J紫外光(UVLED点固化光源)照射C57小鼠眼球，照射后第3，5，7天取眼球冷冻切片，做β-半乳糖苷酶染色。250J照射条件下，第5，第7天角膜细胞出现衰老(β-半乳糖苷酶染色阳性)。大于250J的照射条件可见明显的眼球烧伤，因此采用250J照射的条件，单侧左眼照射。
确定造模方法为：6-8周龄C57雄鼠，麻醉，向造模眼球滴加散瞳药，眼球距光源14mm，单侧左眼1600mW(250J)照射630s。
2.2硫化氢供体治疗角膜内皮细胞营养不良症实验：
按照上述2.1中方法照射6个小时后滴加药物，设置阴性对照组5只(不做处理)，模型对照组5只(单侧照射，不加药)，实验组3组，单侧照射，分别加3种不同硫化氢供体(GYY4137，ATB-346，四硫钼酸铵)。每天滴加一次。7天后杀小鼠，取造模眼球，冷冻切片，进行β-半乳糖苷酶染色，对角膜细胞衰老情况进行评价。
具体实验分组、给药情况和实验结果见表2。
表2
实验分组 照射强度(J) 药物浓度 样本数 角膜β-半乳糖苷酶染色阳性样本数
阴性对照 0 0 5 0
模型对照 250 0 5 4
表皮生长因子 250 贝复舒 4 2
GYY4137 250 2％ 5 0
ATB-346 250 10μM 4 2
四硫钼酸铵 250 1mM 4 0
3、实验结果：
图1的β-半乳糖苷酶染色结果显示，阴性对照组染色全部呈阴性，模型对照组80％样本角膜内皮β-半乳糖苷酶染色呈阳性(箭头所指)，说明365nm UV(250J)照射导致了角膜内皮细胞的衰老，造模成功。GYY4137和四硫钼酸铵组β-半乳糖苷酶染色结果全部呈阴性，说明GYY4137和四硫钼酸铵具有显著的逆转角膜内皮细胞衰老的能力，而表皮生长因子和ATB-346效果不明显。
365nm UV照射小鼠眼球进行角膜内皮营养不良症造模的研究由刘彩灵于2019年提出，该文章报道了在365nm UV照射后，角膜内皮细胞会减少，但未对角膜内皮细胞的衰老——这一角膜内皮营养不良症的病因提出证据。本实验首次证实了365nm UV照射会造成角膜内皮细胞的衰老。
实施例3
硫化氢供体逆转细胞衰老：
1、实验材料：
如表3所示。
表3
名称 生产公司 货号 常用溶剂 终浓度
GYY4137二氯甲烷配合物 Sigma SML0100 DPBS 2％
四硫钼酸铵 Sigma 15060-55-6 DPBS 0/50/100μM
ATB-346 Selleck 1226895-20-0 DPBS 0/2/5/10/20μM
DPBS(无钙镁) Gibco 2380005 —— ——
Bafilomycin Abcam 88899-55-2 —— ——
EGF(表皮生长因子) DPBS 0.2/1/10/20/50ng/ml
HUVEC(人脐带静脉内皮细胞) ScienCell #8000 —— ——
ECM培养基  
2、实验方法：
由于Fuchs角膜内皮营养不良症的患者会出现明显的角膜内皮细胞衰老，所以本部分设置细胞实验，考察不同硫化氢供体药物对P6代HUVEC细胞(衰老细胞)的影响。
实验分组：空白对照组(不做任何处理)、阳性对照组(分别用0.2、1、10、20、50ng/ml EGF处理HUVEC)、GYY-4137组(分别用0.01％、0.02％、0.05％、0.1％、0.2％的GYY-4137处理HUVEC)、四硫钼酸铵组(分别用50、100μM四硫钼酸铵处理HUVEC)、ATB-346组(分别用2、5、10、20μMATB-346处理HUVEC)。
按照上述实验分组方案处理P6代HUVEC后，用100nM巴佛洛霉素Bafilomycin处理细胞1h，抑制溶酶体中β-半乳糖苷酶活性，再加β-半乳糖苷酶的活性荧光底物染料于ECM培养基中，37度培养2h，用DPBS洗两遍，用胰酶消化收集细胞，进行流式细胞分析。从平均荧光强度及染色降低细胞比例比较不同硫化氢供体对逆转HUVEC细胞衰老的效果。
3、实验结果：
空白对照组衰老细胞比例为98.6％衰老细胞，经不同EGF(用于促进角膜修复)处理后，细胞衰老比例并未减少；0.2ng/ml EGF处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为99.4％，1ng/ml EGF处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为99.3％，10ng/ml EGF处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为99.5％，20ng/ml EGF处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为98.8％，EGF 50ng/ml处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为99.0％。可见，EGF没有逆转HUVEC细胞衰老的效果。
经一定浓度GYY-4137处理后，HUVEC细胞衰老比例会明显减少；0.2％GYY-4137处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为16.7％，0.1％GYY-4137处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为55.3％，0.05％ GYY-4137处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为97.5％，0.02％GYY4137处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为98.2％，0.01％ GYY-4137处理P6代HUVEC细胞后衰老细胞比例为98.9％。可见，0.2％ GYY-4137(如图2所示)能够显著逆转HUVEC细胞衰老，0.1％ GYY-4137有一定程度逆转衰老的效果。
其它两种硫化氢供体药物ATTM和ATB-346均没有明显的逆转衰老效果，具体结果为：50μM ATTM处理后衰老细胞比例为99.5％，100μM ATTM处理后衰老细胞比例为99.9％衰老细胞；2μM ATB-346处理后衰老细胞比例为99.5％，5μM ATB-346处理后衰老细胞比例为98.8％，10μM ATB-346处理后衰老细胞比例为99.3％，20μM ATB-346处理后衰老细胞比例为99.0％。
实施例4
硫化氢供体治疗角膜损伤：
1、实验材料：
如表4所示。
表4
名称 生产公司 货号 常用溶剂 终浓度
GYY4137二氯甲烷配合物 Sigma SML0100 DPBS 2％
四硫钼酸铵 Sigma 15060-55-6 DPBS 1mM
ATB-346 Selleck 1226895-20-0 DPBS 10μM
DPBS(无钙镁) Gibco 2380005  
2、实验方法及结果：
2.1角膜损伤小鼠模型的建立：
选择6-8周ICR小鼠，麻醉、双眼滴加散瞳药后，用284nm消毒紫外灯照射小鼠双眼，观察到明显角膜浑浊后停止照射，经过预实验确定照射时间30min。
2.2硫化氢供体治疗角膜损伤：
上述方法照射结束后6个小时后滴加药物，设置有阴性对照组(不做处理)、模型对照组(不给药)和实验组，分别左眼滴加表皮生长因子、2％的GYY4137，10μM的ATB-346，1mM四硫钼酸铵，第二日10:00、17:00滴加两次药物。第三天杀小鼠取眼球做石蜡切片进行HE染色。实验为双眼造模，除模型对照组外，实验组右眼也可作为模型对照。
3、实验结果：
284nm UV照射ICR小鼠眼球30min后，肉眼可见角膜明显浑浊，3天后角膜浑浊自动消失。
各组角膜HE染色结果具体见表5。
表5
Figure BDA0003890400000000091
Figure BDA0003890400000000101
图3为阴性对照样本中的代表图，如图3所示，阴性对照组眼球结构完整，可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜和晶状体。角膜结构未见异常：角膜上皮层上皮细胞排列整齐；角膜基质层未见水肿，未见炎性反应，亦未见新生血管；角膜内皮层排列整齐规则。
图4为模型对照样本中的代表图，如图4所示，眼球结构完整，可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜和晶状体。角膜：未见角膜上皮层；角膜基质层轻度水肿，可见少量炎性细胞浸润，未见新生血管；角膜内皮层排列整齐规则。模型对照组小鼠均出现了角膜基质层水肿和炎性细胞浸润，未见新生血管，内皮层下方见睫状体与晶状体粘连(黑色箭头)，可见模型对照组所有小鼠均出现了角膜损伤。
图5为贝复舒处理样本中的代表图，如图5所示，贝复舒处理组眼球可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜结构、未见晶状体。角膜增厚，角膜上皮层上皮细胞排列疏松紊乱；角膜基质层水肿，未见炎性细胞浸润，未见新生血管；角膜内皮层增生，上皮细胞呈多层排列，间质见毛细血管增生(黑色箭头)和少量炎性细胞浸润。66.6％占比的小鼠出现角膜基质层水肿，33.3％占比的小鼠出现血管增生，33.3％占比的小鼠出现炎性细胞浸润，33.3％占比的小鼠出现角膜内皮层增生。
图6为ATB-346处理样本中的代表图，如图6所示，眼球结构完整，可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜和晶状体。角膜：未见角膜上皮层；角膜基质层轻微水肿，未见炎性细胞浸润和新生血管；角膜内皮层排列整齐规则。有40％占比的小鼠角膜结构完全恢复正常，角膜上皮层上皮细胞排列规则；40％占比的小鼠出现角膜基质层水肿，20％占比的小鼠出现血管增生，40％占比的小鼠出现炎性细胞浸润，20％占比的小鼠出现坏死组织。
图7为四硫钼酸铵处理样本中的代表图，如图7所示，眼球可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜，未见晶状体。角膜结构：未见角膜上皮层；角膜基质层疏松水肿，大量炎性细胞浸润，见少量新生血管和坏死组织；内膜层被炎性细胞覆盖，不可识别。60％占比的小鼠出现角膜基质层水肿，40％占比小鼠出现血管增生，100％占比的小鼠出现炎性细胞浸润，20％占比的小鼠出现坏死组织。
如图8所示，GYY4137处理组眼球结构完整，可见角膜、巩膜、虹膜、视网膜和晶状体。角膜结构正常，角膜上皮层上皮细胞排列规则；角膜基质层未见水肿，亦未见炎性细胞浸润和新生血管；角膜内皮层排列整齐规则。有40％占比的小鼠角膜结构完全恢复正常，角膜上皮层上皮细胞排列规则；角膜基质层未见水肿，亦未见炎性细胞浸润和新生血管，角膜内皮层排列整齐规则。其余60％占比的小鼠虽略有轻微水肿和炎性细胞浸润，但是与模型对照组、表皮生长因子、四硫钼酸铵组相比，症状明显得到了改善。
表皮生长因子组和四硫钼酸铵组所有小鼠的角膜损伤均未得到改善，ATB-346组有40％占比小鼠的角膜结构恢复正常，但是有20％占比的小鼠出现了组织坏死。
如图9所示，图9A为模型组(本发明中的阳性对照组)小鼠眼睛照片，眼球出现明显混浊，图9B为给予GYY41372天后的小鼠眼睛照片，眼球混浊得到明显改善。
综上，硫化氢供体GYY4137可作为一种治疗角膜内皮细胞营养不良症和角膜损伤的新药物。
实施例5
本专利所提供的治疗角膜相关疾病的药物，除了上述所提及的硫化氢供体GYY4137之外，还可以包含可联用药物丁苯酞或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
丁苯酞的使用浓度按照质量体积百分比计为0.5-2.5％；优选为2％；
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的使用浓度为40μM-2mM；优选为1mM。按照实施例2的方法建立角膜内皮细胞营养不良症小鼠模型，采用相同的方法检测β-半乳糖苷酶染色，对角膜细胞衰老情况进行评价。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述角膜相关疾病为角膜内皮营养不良所引起的病症。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述角膜相关疾病为角膜损伤所引起的病症。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述角膜相关疾病为角膜细胞衰老所引起的病症。
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述硫化氢供体为GYY4137、ATB-346、四硫代钼酸铵、阿司匹林衍生物、双氯芬酸衍生物中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为0.1％-3％；ATB-346的使用浓度为8-12μM；四硫代钼酸铵的使用浓度为0.8-1.2mM。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述硫化氢供体GYY4137的使用浓度按照质量百分比计为2％。
CN202211258880.3A 2022-10-14 2022-10-14 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用 Pending CN116077511A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211258880.3A CN116077511A (zh) 2022-10-14 2022-10-14 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211258880.3A CN116077511A (zh) 2022-10-14 2022-10-14 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116077511A true CN116077511A (zh) 2023-05-09

Family

ID=86201327

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211258880.3A Pending CN116077511A (zh) 2022-10-14 2022-10-14 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116077511A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117257957A (zh) * 2023-11-21 2023-12-22 呈诺再生医学科技(北京)有限公司 miR-660-5p在制备治疗光老化的药物中的应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZHU LIN 等: "Protective effect of hydrogen sulfide on endothelial cells through Sirt1-FoxO1-mediated autophagy", 《ANN TRANSL MED. 》, vol. 8, no. 23, pages 1 - 13 *
何婷婷等: "硫化氢通过下调NLRP3/caspase-1 信号通路抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞焦亡", 《中国病理生理杂志》, vol. 37, no. 10, pages 1738 - 1746 *
孟富慧等: "四硫代钼酸铵作为新型硫化氢供体的鉴定及其对皮肤细胞的保护作用", 《中国病理生理杂志》, vol. 31, no. 12, pages 2271 - 2276 *
曾云等: "硫化氢在糖尿病微血管疾病中的研究进展", 《中国动脉硬化杂志》, vol. 26, no. 4, pages 414 - 41 *
罗邦等: "硫化氢供体生物学作用研究进展", 中南医学科学杂志, vol. 44, no. 1, pages 107 - 111 *
韩宇逸等: "硫化氢对眼科疾病潜在治疗作用的研究进展", 《眼科新进展》, vol. 36, no. 4, pages 390 - 395 *
韩宇逸等: "硫化氢对眼科疾病潜在治疗作用的研究进展", 眼科新进展, vol. 36, no. 4, pages 390 - 395 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117257957A (zh) * 2023-11-21 2023-12-22 呈诺再生医学科技(北京)有限公司 miR-660-5p在制备治疗光老化的药物中的应用
CN117257957B (zh) * 2023-11-21 2024-02-27 呈诺再生医学科技(北京)有限公司 miR-660-5p在制备治疗光老化的药物中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Barrientez et al. Corneal injury: Clinical and molecular aspects
Shah et al. Systemic diseases and the cornea
Sharma et al. Evaluation of umbilical cord serum therapy in acute ocular chemical burns
Bian et al. Dexamethasone drug eluting nanowafers control inflammation in alkali-burned corneas associated with dry eye
Shimazaki et al. Donor source affects the outcome of ocular surface reconstruction in chemical or thermal burns of the cornea
de Oliveira et al. Biological effects of mitomycin C on late corneal haze stromal fibrosis following PRK
CN116077511A (zh) 硫化氢供体在制备治疗角膜相关疾病的药物中的应用
De Aracena Del Cid et al. Subconjunctival application of regenerative factor-rich plasma for the treatment of ocular alkali burns
Pushker et al. Neurotrophic keratopathy
Chen et al. Use of autologous serum eye drops with contact lenses in the treatment of chemical burn-induced bilateral corneal persistent epithelial defects
CN1302812C (zh) 含海藻糖和玻璃酸的眼部用药传递系统及其制备方法
Tsubota Ocular surface management in corneal transplantation, a review
AU5135098A (en) Use of nerve growth factor for the storage, culture or treatment of cornea
CN111419793A (zh) 一种含富勒烯及其衍生物的滴眼液及其制备方法
Ion et al. Melting keratitis in dogs and cats
CN111150831B (zh) 多肽KdPT的应用
CN104546692B (zh) 重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶
Wu et al. Chitosan-based thermosensitive hydrogel with longterm release of murine nerve growth factor for neurotrophic keratopathy
Cameron et al. Pyogenic granulomas of the cornea
RU2714193C1 (ru) Способ лечения воспалительных или дистрофических заболеваний глаз
RU2440801C1 (ru) Способ лечения глубоких стромальных кератитов
Wang et al. Total ocular surface amniotic membrane transplantation for paraquat-induced ocular surface injury
Dua et al. The ocular surface: Functional anatomy, medical and surgical management
CN108992438A (zh) 莱菔硫烷在制备治疗圆锥角膜疾病药物中的应用
Punjabi et al. A clinical study to evaluate therapeutic efficacy of soft contact lenses in corneal diseases

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination