CN116059520A - 一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医用材料技术领域，具体涉及具有pH响应的双层可溶性微针贴片及其制备方法与应用，所述的微针贴片包括微针基底：由可溶性的聚合物基质制备而成，不含目标药物；微针针尖：由可溶性的聚合物基质和多孔碳酸钙微球制备而成，所述的多孔碳酸钙微球中含有目标药物；具有优异的生物相容性，无潜在的刺激性和免疫原性。同时采用碳酸钙微球包载目标药物，提高目标药物的利用率；利用碳酸钙微球的生物相容性，相对较大的比表面积，表现出更优异的包载率；微针贴片插入目标部位后通过pH响应，局部释放目标药物，提高局部有效药物浓度且节约用药成本；通过微针治疗技术具有精度高、规模化、经济高效优点。

Description

一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物医用材料技术领域，具体涉及一种具有PH响应的双层可溶性微针贴片及其制备方法与应用。
背景技术
关节炎主要研究的有类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎、急性痛风性关节炎等。类风湿性关节炎、骨关节炎等在发病时，炎症部位细胞的外环境当中，酸碱度有所下降，pH可达到6.8左右[1][2]。
痛风性关节炎是由于嘌呤代谢异常，引发尿酸排泄降低或血尿酸指标增高而致尿酸盐沉积的临床疾病，其以急性红、肿、剧痛为主要关节表现，可造成畸形或关节强直，破坏骨与关节部位。急性痛风性关节炎作为痛风的首发表现，有着病情复发率高、根治困难等特征，该病是由于机体尿酸盐沉积至关节囊、滑囊、软骨及骨质而引起的炎性反应与组织损伤，主要表现就是发病急，患者会出现畏寒、发红、肿胀、发热以及全身不适疼痛症状，病变环境内pH下降，可达到5.37左右[3]，常在夜间起病，且疼痛非常剧烈，活动受限。疼痛症状可致关节剧痛，且多呈现突发性单侧疼痛，关节周边组织可见明显的肿胀、发热与压痛表现。多数患者是坐轮椅或拄双拐到医院就诊。年龄大于40岁的男性是急性痛风性关节炎的高发人群，且常见于拇趾、踝关节及跖趾关节处。生活方式与痛风性关节炎的引发有着紧密联系。急性痛风性关节炎的治疗主要是制动、注意睡眠饮食、口服中西药、针灸、严重者需要配合手术治疗。对于传统药物治疗方式来讲，存在心血管系统、胃肠道、泌尿系统等不良反应；口服存在首关消除效应，药物到达指定部位时疗效有一定衰减；对于依从性不好的患者，难以按时服用.
微针透皮给药属于新型给药系统，已经应用于各个领域，痛风的治疗也已经有应用，例如发明专利CN113768865A公开了一种抑制炎症因子释放治疗痛风急性发作的聚合物微针及制备方法，所述的聚合物微针直接贴于病征部位即可，简单方便；通过纳米材料包裹缓释，使得药物能充分发挥作用，具有更好定点、靶向治疗效果，药物利用率更高；发明专利CN111920942A公开了一种用于快速溶解痛风石的聚合物微针及制备方法和应用，通过纳米材料包裹，使药物能与尿酸盐结晶充分作用，具有更好的定点溶晶效果，药物利用率更高。由于简单、易于管理、无创、愈合更快，微针可用作皮下注射的替代品，用于在真皮和皮下层局部、安全和无痛地递送疫苗、药物和基因等。针对痛风性关节炎，微针可以穿透角质层，避免了口服用药的首关消除效应，本身用药过程也是一次针灸治疗，且提高了目标药物的利用率，同时还有创口小、痛感轻等优点。
在本发明中，发明人根据患者在痛风性关节炎发生时的身体状况，尿酸含量显著升高，病变环境内pH可达到5.37左右，设置了一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片，通过在微针贴片的针尖部分设置碳酸钙微球，使得所述的微针贴片可以在pH＝5.5的PBS中释放量较pH＝7.5的PBS中快很多，最终释放率也较高，呈现出pH敏感性，这是因为在酸性的条件下，碳酸钙微球更易分解，进而将负载在微球上的姜黄素释放出来；且所述微针贴片低成本、高效率、操作简单，具有良好的生物相容性且无体内毒性，可通过pH响应精切的递送生物制剂或药物至炎症部位，提高目标药物的利用率，实现治疗目的。
参考文献：
[1]Enas,A,Mahmoud,etal.InflammationResponsiveLogic GateNanoparticlesfortheDelivery of Proteins[J].Bioconjugate Chemistry,2011,22(7):1416–1421.
[2]杨锋.基于壳聚糖衍生物的pH/ROS双响应性纳米载药系统的构建和性能研究[D].北京化工大学,2017.
[3]张会良,蔡亮,黄伟彦.膝关节镜治疗痛风性关节炎术后血液指标变化及四妙散加五味消毒饮的干预作用[J].内蒙古中医药,2017,36(9):1.
发明内容
为了实现上述目的，本发明的首要目的是提供一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片，包括：
微针基底：由可溶性的聚合物基质制备而成，不含目标药物，
微针针尖：由可溶性的聚合物基质和多孔碳酸钙微球制备而成，所述的多孔碳酸钙微球中含有目标药物；
优选的，所述的目标药物与多孔碳酸钙微球质量比为1:4，所述的目标药物为四黄散、双柏、非布司他、秋水仙碱、姜黄素、痛风康、仙藤、乌蔹莓、黄芩中的一种或者几种。
优选的，所述的可溶性聚合物基质的浓度为5％-25％w/v，所述的可溶解聚合物基质为透明质酸、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、聚-L谷氨酸中的一种或几种。
优选的，所述多孔碳酸钙微球的制备方法如下：
(1)取两份聚丙烯酸溶液，分别加入到Na2CO3溶液和CaCl2溶液中，搅拌，反应；
(2)将SDS溶液加入到装有Na2CO3和聚丙烯酸的混合溶液的烧杯中，搅拌，将CaCl2和聚丙烯酸混合溶液快速倒入，反应；
(3)所得的CaCO3产物经过滤，洗涤，放入真空干燥箱中干燥，干燥后的粉末经煅烧，除去SDS，即得。
优选的，步骤(1)所述的反应时间为0.5h，步骤(2)所述的搅拌速度为200r/min，反应时间为1h，步骤(3)所述的洗涤为用去离子水和无水乙醇各洗涤3次，真空干燥箱的温度为80℃，干燥时间为24h，煅烧的温度为350℃，时间为3h。
优选的，所述的Na2CO3溶液的浓度为0.1mol/L，所述的CaCl2溶液的浓度为0.1mol/L，所述的聚丙烯酸溶液的浓度为0.5g/L。
本发明的第二目的是提供所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片的制备方法，包括如下步骤：
S1：微针针尖溶液的制备：取5％-25％w/v可溶性聚合物基质与含有目标药物的多孔碳酸钙微球溶于去离子水中搅拌均匀；
S2：微针基底材料制备：取5％-25％w/v可溶性聚合物基质与去离子水搅拌均匀；
S3：在微针模板上均匀滴加步骤S1制备的针尖溶液，常温抽真空，干燥，刮去底板多余的材料，重复上述操作制备得到药物集中分布的针尖；
S4：将步骤S2制备的微针基底材料溶液均匀涂布于步骤S3制备得到的微针模板上，常温抽真空，干燥，获得成型的微针贴片；
S5：将步骤S4中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得双侧可溶性微针贴片。
优选的，步骤S3和步骤S4所述的抽真空压力为-0.8kPa，干燥时间为1-6h。
本发明的第三目的是提供一种透皮给药系统，所述的透皮给药系统通过所述的方法制备得到。
本发明的第四目的是提供所述的pH响应双层可溶性微针贴片用于制备治疗痛风性关节炎或急性痛风性关节炎药物的应用。
本发明的有益效果是：(1)本发明提供了一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片，针尖与基底采用易溶解且可降解的聚合物基质，具有优异的生物相容性，安全性高，无潜在的刺激性和免疫原性；(2)所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片采用真空浇筑法制备，在制备微针的过程中，干燥后的针尖并没有完全填充模板，后将基底液加入，使得部分基底液进入到针尖根部，完成基底部分和针尖部分地连接；(3)将目的药物添加在针尖中，可无痛、微创、高效地将药物运送到皮下，避免传统注射引起的炎症、感染、出血等副作用，提高局部有效药物浓度且节约用药成本；(4)所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片应用多孔碳酸钙微球作为响应与载药基质，具有低成本、安全性、良好的生物相容性、pH敏感性以及缓释性，从而增加了生物制剂或药物的吸收率；达到缓解炎症的目的；(5)所述的微针贴片具有精度高、规模化、经济高效等优点，且本发明所述的制备方法，简单明了，制备条件容易满足，易实现批量生产。
附图说明
图1为本发明提供的碳酸钙微球与姜黄素的透射电子显微镜照片
图2为本发明提供的具有pH响应的双层可溶性微针贴片的光学和扫描电子显微镜照片图3维本发明提供的载姜黄素碳酸钙微球在pH＝7.5和pH＝5.5的PBS中的缓释率
图4为本发明具有pH响应的双层可溶性微针贴片治疗结束后各组大体照片
图5为本发明具有pH响应的双层可溶性微针贴片治疗期间肿胀度变化折线图
图6为本发明具有pH响应的双层可溶性微针贴片治疗结束后各组炎性因子定量折线图
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例所述的苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内染色质与胞质内核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。H&E染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
以下实施例所述ELISA染色即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术(包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术)中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速、定性或者定量甚至定位的特点。本实验适用于炎性因子的检测。
以下实施例所述的尿素钠盐(MSU)购自中国上海麦克林生化科技有限公司。
以下实施例所述的姜黄素(Cur)购自中国上海麦克林生化科技有限公司。
实施例1、空白微针贴片(HA-MN组)的制备
(1)制备透明质酸微针针尖/基底溶液(15％w/v):称取1.5g透明质酸钠(分子量10万～20万)溶于10mL去离子水中，磁力搅拌下搅拌24h，确保充分搅匀；
(2)微针模板上均匀滴加步骤(1)制备溶液100μL，常温抽真空至-0.8kPa，干燥20min后刮去底板多余材料，重复上述滴加与加压操作，刮去多余材料，干燥12h，形成透明质酸微针的针尖。
(3)将步骤(1)中的微针基底材料均匀涂布于步骤(5)干燥后的微针模板上，常温抽真空至-0.8kPa，干燥12h，获得成型微针贴片；
(4)将步骤(3)中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得空白微针贴片(HA-MN组)。
实施例2、碳酸钙微针贴片(CaCO3-MN组)的制备
(1)制备透明质酸微针针尖/基底溶液(15％w/v):称取1.5g透明质酸钠(分子量10万～20万)溶于10mL去离子水中，磁力搅拌下搅拌24h，确保充分搅匀；
(2)制备多孔碳酸钙微球：预先制备0.1mol/L的Na2CO3溶液，0.1mol/L的CaCl2溶液和一定浓度的PAA溶液(0.5g/L)，取出两份PAA(0.1g)，分别加入到Na2CO3溶液(200mL)和CaCl2溶液(200mL)中，低速搅拌0.5h。将一定浓度的SDS溶液(10mmol/L)只加入到装有Na2CO3和PAA的混合溶液的烧杯中，然后调转速度为200r/min，将CaCl2和PAA混合溶液快速倒入此烧杯中，在一定温度、转速为200r/min的条件下，保持反应1h，所得的CaCO3产物经过滤，用去离子水和无水乙醇各洗涤3次后，放入80℃的真空干燥箱中干燥24h后，干燥后的粉末在350℃烘箱中煅烧三小时，除去SDS；
(3)将步骤(1)中的透明质酸溶液与步骤(2)中的多孔碳酸钙微球均匀混合得到载药针尖制作液，多孔碳酸钙微球的浓度为1.68mg/mL；
(4)微针模板上均匀滴加步骤(3)制备的载药针尖溶液100μL，常温抽真空至-0.8kPa，干燥20min后刮去底板多余材料，重复上述滴加与加压操作，刮去多余材料，干燥12h，形成载多孔碳酸钙微球的针尖。
(5)将步骤(1)中的微针基底材料均匀涂布于步骤(4)干燥后的微针模板上，常温抽真空至-0.8kPa，干燥12h，获得成型微针贴片；
(6)将步骤(5)中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得碳酸钙微针贴片(CaCO3-MN组)。
实施例3、姜黄素微针贴片(Cur-MN组)的制备
(1)制备透明质酸微针针尖/基底溶液(15％w/v):称取1.5g透明质酸钠(分子量10万～20万)溶于10mL去离子水中，磁力搅拌下搅拌24h，确保充分搅匀；
(2)移液枪量取10mL无水乙醇，装入用锡箔纸包好的药瓶中。避光称取10mg姜黄素，装入药瓶中，搅拌使其溶解均匀，获得姜黄素溶液。将步骤(1)中的透明质酸溶液与姜黄素均匀混合得到载药针尖制作液；
(3)微针模板上均匀滴加步骤(2)制备的载药针尖溶液100μL，常温抽真空至-0.8kPa，干燥20min后刮去底板多余材料，重复上述滴加与加压操作，刮去多余材料，干燥12h，形成载多孔碳酸钙微球的针尖。
(4)将步骤(1)中的微针基底材料均匀涂布于步骤(3)干燥后的微针模板上，常温抽真空至-0.8kPa，干燥12h，获得成型微针贴片；
(5)将步骤(4)中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得姜黄素微针贴片(Cur-MN组)。
实施例4、双层pH响应的微针贴片(CaCO3-Cur-MN组)的制备
(1)制备透明质酸微针针尖/基底溶液(15％w/v):称取1.5g透明质酸钠(分子量10万～20万)溶于10mL去离子水中，磁力搅拌下搅拌24h，确保充分搅匀；
(2)制备多孔碳酸钙微球：预先制备0.1mol/L的Na2CO3溶液，0.1mol/L的CaCl2溶液和一定浓度的PAA溶液(0.5g/L)，取出两份PAA(0.1g)，分别加入到Na2CO3溶液(200mL)和CaCl2溶液(200mL)中，低速搅拌0.5h。将一定浓度的SDS溶液(10mmol/L)只加入到装有Na2CO3和PAA的混合溶液的烧杯中，然后调转速度为200r/min，将CaCl2和PAA混合溶液快速倒入此烧杯中，在一定温度、转速为200r/min的条件下，保持反应1h，所得的CaCO3产物经过滤，用去离子水和无水乙醇各洗涤3次后，放入80℃的真空干燥箱中干燥24h后，干燥后的粉末在350℃烘箱中煅烧三小时，除去SDS；
(3)制备载姜黄素的多孔碳酸钙微球：移液枪量取10mL无水乙醇，装入用锡箔纸包好的药瓶中。避光称取10mg姜黄素，装入药瓶中，搅拌使其溶解均匀。称取40mg步骤(2)中制备好的空心碳酸钙微球作为药物载体装入药瓶中，将药瓶放入装满冰的烧杯中，用超声仪器超声五分钟，使碳酸钙粉末均匀分散在药品溶液中。加入磁子，将药瓶放入装满冰的烧杯中，将烧杯放在磁力搅拌器上，调节转速，搅拌24h。将溶液避光倒入离心管中，在高速冷冻离心机中离心，抽去上清液备用。将碳酸钙载药微球放入冷冻干燥机中，除去液体，用锡箔纸包好放入冰箱备用；
(4)将步骤(1)中的透明质酸溶液与步骤(3)中的载姜黄素的多孔碳酸钙微球均匀混合得到载药针尖制作液，载姜黄素的多孔碳酸钙微球的浓度为1.68mg/mL；
(5)微针模板上均匀滴加步骤(4)制备的载药针尖溶液100μL，常温抽真空至-0.8kPa，干燥20min后刮去底板多余材料，重复上述滴加与加压操作，刮去多余材料，干燥12h，形成载姜黄素的多孔碳酸钙微球的针尖。
(6)将步骤(1)中的微针基底材料均匀涂布于步骤(5)干燥后的微针模板上，常温抽真空至-0.8kPa，干燥12h，获得成型微针贴片；
(7)将步骤(6)中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得双层pH响应微针贴片。
制备得到的pH响应微针贴片如图2所示，所载药物集中于微针贴片的针尖部分，此微针贴片的针尖部分为载姜黄素的多孔碳酸钙微球和可快速溶解的透明质酸，基底材料为透明质酸，针尖可插入到皮肤。
实施例5、双层pH响应微针贴片(CaCO3-Cur-MN组)的制备
该实施例与实施例1相同，不同之处在于：步骤(1)制备的透明质酸的质量分数为20％。
实施例6、双层pH响应微针贴片(CaCO3-Cur-MN组)的制备
该实施例与实施例1相同，不同之处在于：步骤(1)制备的15％基底材料换成聚乙烯醇。
实验例1：双层pH响应微针贴片的形貌表征及pH响应性检测
使用透射电子显微镜对所制备的多孔碳酸钙微球及载姜黄素的多孔碳酸钙微球进行微观形貌表征，使用相机及扫描电子显微镜对所制备的双层pH响应微针贴片的微观形貌进行表征，使用紫外分光光度计425nm波长下的吸收峰对pH＝5.5(模拟痛风性关节炎或急性痛风性关节炎时组织的pH值)和pH＝7.5(模拟正常组织的pH值)状态下的载姜黄素后的多孔碳酸钙微球测试不同时间后的定量释放。
另外还设置了pH的浓度梯度，使用紫外分光光度计425nm波长下的吸收峰对不同pH状态下的载姜黄素后的多孔碳酸钙微球测试不同时间后的定量释放。
实验例2：动物实验
使用实施例4制备得到的双层pH响应微针贴片治疗痛风性关节炎的疗效评估。
1.实施对象:
8周龄的雄性SD大鼠，42只，体重180g-200g，购于兰州大学实验动物中心。研磨MSU晶体麻醉下将MSU悬浊液(25mg/mL，50μL)进行关节注射。诱导急性痛风性关节炎模型。关节囊的对侧凸起被视为成功注射的标准。如MSU注射后2h有明显的肿胀，则急性痛风性关节炎模型建立成功。
2.实验分组及治疗
(1)正常组(Normal组)：正常生理盐水；10ml/kg；
(2)阴性对照组(Negative组)：建模后不进行治疗；
(3)阳性对照组(Colchicine组)：建模后应用秋水仙碱灌胃治疗，秋水仙碱0.3mg/kg，，给药频率每天一次，共三次；
(4)空白微针组(HA-MN组)：建模后应用透明质酸微针贴片治疗；
(5)碳酸钙微针组(CaCO3-MN组)：建模后应用载有碳酸钙微球的微针贴片治疗；
(6)姜黄素微针组(Cur-MN组)：建模后应用载有姜黄素的微针贴片治疗；
(7)双层pH响应微针贴片组(CaCO3-Cur-MN组)：建模后应用含有碳酸钙载姜黄素的微针贴片进行治疗；
第(4)(5)(6)(7)组，每天治疗两次，共治疗6次。
3.评价效果：使用游标卡尺，分别在建模前，建模后3h、6h、12h、36h、60h、84h测量关节的肿胀程度。84h后过量麻醉处死大鼠，并采集
血液样本：室温下30分钟，并在4℃以3000r离心10分钟分离血清，所有的血清样品均储于-80℃，直至ELISA分析。同时收集炎症关节组织置于4％多聚甲醛内固定，脱钙后进行H&E染色。观察各组大鼠炎症组织的病理变化。
4.实验结果：
图1显示了单独碳酸钙微球以及载姜黄素后的多孔碳酸钙微球的形貌。图2显示了微针贴片的形貌。图3定量显示了在不同pH下的PBS缓冲液中载姜黄素的碳酸钙微球累积释放率随时间的变化曲线。可以看到在pH＝5.5的PBS中释放量较pH＝7.4的PBS中快很多，最终释放率也较高，呈现出pH敏感性，这是因为在酸性的条件下，碳酸钙微球更易分解，进而将负载在微球上的姜黄素释放出来；姜黄素在pH＝7.5的PBS中，36h内累积释放率为56.78％，在pH＝5.5的PBS中，累积释放率为89.28％。
图4显示了各分组大鼠建模及其治疗后关节照片。图5定量显示了各分组关节的肿胀变化曲线。可以看出在建模后12h达到肿胀的最高值，Cur-MN组与CaCO3-Cur-MN组在处死时的肿胀率较其他组低，其中效果最优异的是CaCO3-Cur-MN组，其与Colchicine组处死时的肿胀率相近，都接近恢复至Normal组。图6显示了各分组治疗后关节组织炎性因子定量折线图，ELISA实验结果中CaCO3-Cur-MN组中IL-6、TNF-α、ICAM-1、1L-1β炎性因子含量都相较于其他组(包括Cur-MN组)，与Normal组炎性因子含量统计差异性更小，说明载姜黄素的碳酸钙微球(pH响应型微针贴片)比没有载姜黄素的碳酸钙微球(直接包裹目的药物的微针贴片)能够提高姜黄素的药效利用率，更好释放药物，关节的炎症得到了抑制。动物实验表明本发明专利提供的pH响应型微针贴片用于治疗关节炎症，使用后关节肿胀明显减小，炎症因子得到了明显抑制，疗效显著。
综上所述，本发明提供了一种用于治疗痛风性关节炎或急性痛风性关节炎的pH响应型微针贴片，针尖溶液和基底材料采用易溶解且可降解的聚合物基质，具有优异的生物相容性，安全性高，无潜在的刺激性和免疫原性；所述的微针贴片采用真空浇筑制备，反复多次加压；将目标药物添加在针尖中，可无痛、微创、高效地将药物运送到皮下，避免传统注射方式引起的炎症、感染、出血等负作用，提高局部有效药物浓度且节约用药成本。所述的微针贴片具有精度高、规模化、经济高效等优点，且本发明所述的制备方法，简单明了，制备条件容易满足，易实现批量生产。
最后应说明的是：虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式，以上所述仅为本发明的优选实例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征等同替换。凡在本发明的精神与原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，包括：
微针基底：由可溶性的聚合物基质制备而成，不含目标药物，
微针针尖：由可溶性的聚合物基质和多孔碳酸钙微球制备而成，所述的多孔碳酸钙微球中含有目标药物。
2.如权利要求1所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，所述的目标药物与多孔碳酸钙微球质量比为1:4，所述的目标药物为四黄散、双柏、非布司他、秋水仙碱、姜黄素、痛风康、仙藤、乌蔹莓、黄芩中的一种或者几种。
3.如权利要求1所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，所述的可溶性聚合物基质的浓度为5％-25％w/v，所述的可溶解聚合物基质为透明质酸、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、聚-L谷氨酸中的一种或几种。
4.如权利要求1所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，所述多孔碳酸钙微球的制备方法如下：
(1)取两份聚丙烯酸溶液，分别加入到Na2CO3溶液和CaCl2溶液中，搅拌，反应；
(2)将SDS溶液加入到装有Na2CO3和聚丙烯酸的混合溶液的烧杯中，搅拌，将Na2CO3和聚丙烯酸混合溶液快速倒入，反应；
(3)所得的CaCO3产物经过滤，洗涤，放入真空干燥箱中干燥，干燥后的粉末经煅烧，除去SDS，即得。
5.如权利要求4所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，步骤(1)所述的反应时间为0.5h，步骤(2)所述的搅拌速度为200r/min，反应时间为1h，步骤(3)所述的洗涤为用去离子水和无水乙醇各洗涤3次，真空干燥箱的温度为80℃，干燥时间为24h，煅烧的温度为350℃，时间为3h。
6.如权利要求4所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片，其特征在于，所述的Na2CO3溶液的浓度为0.1mol/L，所述的CaCl2溶液的浓度为0.1mol/L，所述的聚丙烯酸溶液的浓度为0.5g/L。
7.如权利要求1-6任一项所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：微针针尖溶液的制备：取5％-25％w/v可溶性聚合物基质与含有目标药物的多孔碳酸钙微球溶于去离子水中搅拌均匀；
S2：微针基底材料制备：取5％-25％w/v可溶性聚合物基质与去离子水搅拌均匀；
S3：在微针模板上均匀滴加步骤S1制备的针尖溶液，常温抽真空，干燥，刮去底板多余的材料，重复上述操作制备得到药物集中分布的针尖；
S4：将步骤S2制备的微针基底材料溶液均匀涂布于步骤S3制备得到的微针模板上，常温抽真空，干燥，获得成型的微针贴片；
S5：将步骤S4中成型的微针贴片从微针模板上剥离，获得双侧可溶性微针贴片。
8.如权利要求6所述的具有pH响应的双层可溶性微针贴片的制备方法，其特征在于，步骤S3和步骤S4所述的抽真空压力为-0.8kPa，干燥时间为1-6h。
9.一种透皮给药系统，其特征在于，所述的透皮给药系统通过权利要求6所述的方法制备得到。
10.如权利要求1-6任一项所述的pH响应双层可溶性微针贴片用于制备治疗痛风性关节炎或急性痛风性关节炎药物的应用。
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