CN116036185A - 一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油及其制备方法和应用,涉及中药精油技术领域,该种预防治疗冠状病毒感染的复方精油按重量份数计,包括如下原料:苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份);采用本申请提供的复方精油,能够降低HCoV‑229E感染小鼠的肺指数;能够抑制炎症因子表达,与复方精油对肺指数的影响结果一致;且不同配比的复方精油均有降低肺组织病毒载量的作用。
Description
技术领域
本发明涉及中药精油领域技术,尤其是指一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油及其制备方法和应用。
背景技术
冠状病毒引起的人类疾病主要是呼吸系统感染,其中HCoV-229E为α属冠状病毒,感染症状:通常会引起轻度或中度的上呼吸道疾病,有时会引起肺炎或支气管炎等下呼吸道疾病,心肺疾病患者、免疫力低下人群、婴儿和老年人中较为常见;现有技术中治疗冠状病毒引起的疾病的药物多为合成药物,其药物代谢周期长,药物毒性大;而目前采用中药复方精油来抗冠状病毒引起疾病较为少见,且现有技术中的复方精油针对冠状病毒的治疗效果较差,需要开发一种降低HCoV-229E感染小鼠的肺指数、抑制炎症因子表达,且能够降低肺组织病毒载量的复方精油;因此,针对此现状,迫切需要开发一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油及其制备方法和应用,以满足实际使用的需要。
发明内容
有鉴于此,本发明针对现有技术存在之缺失,其主要目的是提供一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油及其制备方法和应用,其通过采用本申请提供的复方精油,能够降低HCoV-229E感染小鼠的肺指数;能够抑制炎症因子表达,与复方精油对肺指数的影响结果一致;且不同配比的复方精油均有降低肺组织病毒载量的作用;复方精油采用中草药提取,具有毒副作用小的优点。
为实现上述目的,本发明采用如下之技术方案:
一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油,按重量份数计,包括如下原料:苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)。
所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其包括如下步骤:
S1、制备苍术挥发油:苍术洗净干燥后粉粹,过筛,加入10倍量的蒸馏水置于水蒸气蒸溜提取罐中,蒸馏提取8h后收集挥发油;所得挥发油经石油醚萃取3次,减压浓缩得苍术挥发油;
S2、制备金银花挥发油:取金银花于挥发油水蒸气蒸溜提取罐中提取金银花挥发油;
S3、制备连翘挥发油:取连翘药材置水蒸气蒸溜提取罐中,加入12倍量水浸泡1h,水蒸气蒸溜提取5h,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,得连翘挥发油;
S4、制备野菊花挥发油:取粉碎的菊花于水蒸气蒸溜罐中,加14倍量水浸泡1小时,水蒸气蒸溜提取13h,得野菊花挥发油;
S5、制备石菖蒲挥发油:采用挥发油提取对石菖蒲饮片加热提取,再采用萃取的方法得石菖蒲挥发油;
S6、制备艾叶挥发油:艾叶粉碎后置于提取罐中,料液比1:12加入水,浸泡2.0h,煮沸后保持微沸状态提取6h,停止加热后静置20min,收集挥发油提取器中的艾叶挥发油;
S7、制备广藿香挥发油:将广藿香洗净晾干,粉碎,过筛;采用超临界二氧化碳萃取法提取;
S8、制备天竺葵精油:将天兰葵药材的花、叶、茎混合均匀,采用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取;
S9、制备薄荷挥发油:取薄荷叶粉碎后置于超声辅助蒸馏提取装置中,料液比1:12加入10%氯化钠溶液水,浸泡1h,超声功率300W、频率40kHz、超声提取时间40min,得到薄荷挥发油;
S10、制备罗文莎叶精油:将罗文莎叶片洗净后平铺在烘房中,放置12~24小时,蒸汽杀青后,气流干燥处理至叶片的水分含量不高于10%,粉碎得到粉末,将粉末至于水蒸气蒸溜提取罐中,按照料液比1:10加入水,浸泡0.5h,提取8h,收集挥发油提取器中挥发油,所得挥发油用无水硫酸钠干燥24h;
S11、制备复方精油:按重量份数计,将苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)混合均匀得到复方精油。
作为一种优选方案:所述S2中提取金银花挥发油的具体步骤包括:取金银花于挥发油水蒸气蒸溜提取罐中,加入20倍量的8.5%氯化钠溶液浸泡1h,连接挥发油测定器与回流冷凝管,自冷凝管上端加入8.5%的氯化钠溶液,充满至挥发油测定器的刻度部分为止;水蒸气蒸溜提取7h,停止加热,放置,冷却,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,即得金银花挥发油。
作为一种优选方案:所述S5中制备石菖蒲挥发油的具体步骤为:称取石菖蒲饮片置于圆底烧瓶中,加入9倍量的蒸馏水,浸泡3h,混合后连接挥发油提取器和冷凝管,将烧瓶置电热套中加热至微沸,并保持微沸,提取6小时,放置片刻,开启提取器下端活塞,将水缓缓放出,用石油醚冲洗冷凝管和提取器,萃取油层,水洗至中性收集石油醚层,无水硫酸钠脱水,在自然条件下挥干石油醚,即得石菖蒲挥发油。
作为一种优选方案:所述S7中采用超临界二氧化碳萃取法提取的具体步骤为:按照药材与携带剂的质量比为200:1加入携带剂,携带剂按照体积比组成:乙醇68份、环己烷4份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行萃取。
作为一种优选方案:所述S7中超临界二氧化碳流体萃取的条件为:萃取釜温度40℃,萃取压强28MPa,流速为20kg/h,萃取时间2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到广藿香挥发油。
作为一种优选方案:所述S8中超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取的具体步骤为:加入携带剂,药材与加入的携带剂质量比为200:1,携带剂组成:乙醇68份、环己烷4份、二氯乙烷0.7份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取;将萃取后的二氧化碳流体进入分离器进行分离。
作为一种优选方案:所述S8中超临界二氧化碳萃取的条件为:萃取釜温度38℃,萃取压强20MPa,流速为17kg/h,萃取时间3h,二氧化碳流体的流量为12kg/h;所述分离的条件为:分离器压力为6.5MPa,温度为42℃,提取2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到淡黄色天竺葵精油。
所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油在制备抗冠状病毒药物制剂中的应用。
作为一种优选方案:所述抗冠状病毒药物制剂选自复方精油、喷雾剂、精油贴、凝胶剂或乳剂中的任意一种。
本发明与现有技术相比具有明显的优点和有益效果,具体而言,由上述技术方案可知,通过采用苍术挥发油、金银花挥发油、连翘挥发油、野菊花挥发油、石菖蒲挥发油、艾叶挥发油、广藿香挥发油、天竺葵精油、薄荷挥发油、罗文莎叶精油制备复方精油,得到的复方精油能够降低HCoV-229E感染小鼠的肺指数;复方精油各配比组给药后对免疫细胞有不同程度影响,可升高CD3+T细胞、CD4+T、CD8+T细胞及B细胞的百分比;复方精油能够抑制炎症因子表达,与复方精油对肺指数的影响结果一致;不同配比的复方精油均有降低肺组织病毒载量的作用;复方精油采用中草药提取,具有毒副作用小的优点。
为更清楚地阐述本发明的结构特征和功效,下面结合附图与具体实施例来对其进行详细说明。
附图说明
图1为本发明之复方精油对hCoV-229E感染小鼠肺炎模型外周血免疫细胞比例的影响示意图。
具体实施方式
一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油,按重量份数计,包括如下原料:苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)。
该一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其包括如下步骤:
S1、制备苍术挥发油:苍术洗净干燥后粉粹,过筛,加入10倍量的蒸馏水置于水蒸气蒸溜提取罐中,蒸馏提取8h后收集挥发油;所得挥发油经石油醚萃取3次,减压浓缩得苍术挥发油;
S2、制备金银花挥发油:取金银花于挥发油水蒸气蒸溜提取罐中,加入20倍量的8.5%氯化钠溶液浸泡1h,连接挥发油测定器与回流冷凝管,自冷凝管上端加入8.5%的氯化钠溶液,充满至挥发油测定器的刻度部分为止;水蒸气蒸溜提取7h,停止加热,放置,冷却,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,即得金银花挥发油;
S3、制备连翘挥发油:取连翘药材置水蒸气蒸溜提取罐中,加入12倍量水浸泡1h,水蒸气蒸溜提取5h,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,得连翘挥发油;
S4、制备野菊花挥发油:取粉碎的菊花于水蒸气蒸溜罐中,加14倍量水浸泡1小时,水蒸气蒸溜提取13h,得野菊花挥发油;
S5、制备石菖蒲挥发油:精密称取石菖蒲饮片适量,置圆底烧瓶中,加入9倍量的蒸馏水与沸石数粒,浸泡3h,振摇混合后连接挥发油提取器和冷凝管,自冷凝管上端加水使充满挥发油提取器刻度部分,水溢流入圆底烧瓶时为止,将烧瓶置电热套中加热至微沸,并保持微沸,提取6小时,放置片刻,开启提取器下端活塞,将水缓缓放出,用石油醚冲洗冷凝管和提取器,萃取油层,水洗至中性收集石油醚层,无水硫酸钠脱水,在自然条件下挥干石油醚,即得橙黄色石菖蒲挥发油;
S6、制备艾叶挥发油:艾叶粉碎后置于提取罐中,料液比1:12加入水,浸泡2.0h,煮沸后保持微沸状态提取6h,停止加热后静置20min,收集挥发油提取器中挥发油;
S7、制备广藿香挥发油:将广藿香洗净晾干,粉碎,过筛;按照药材与携带剂的质量比为200:1加入携带剂,携带剂按照体积比组成:乙醇68份、环己烷4份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行萃取;萃取釜温度40℃,萃取压强28MPa,流速为20kg/h,萃取时间2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到广藿香挥发油;
S8、制备天竺葵精油:将天兰葵药材的花、叶、茎混合均匀,加入携带剂,药材与加入的携带剂质量比为200:1,携带剂组成:乙醇68份、环己烷4份、二氯乙烷0.7份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取;将萃取后的二氧化碳流体进入分离器进行分离;超临界二氧化碳萃取的条件为:萃取釜温度38℃,萃取压强20MPa,流速为17kg/h,萃取时间3h,二氧化碳流体的流量为12kg/h;该分离的条件为:分离器压力为6.5MPa,温度为42℃,提取2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到淡黄色天竺葵精油;
S9、制备薄荷挥发油:取薄荷叶粉碎后置于超声辅助蒸馏提取装置中,料液比1:12加入10%氯化钠溶液水,浸泡1h,超声功率300W、频率40kHz、超声提取时间40min,得到薄荷挥发油;
S10、制备罗文莎叶精油:将罗文莎叶片洗净后平铺在烘房中,放置12~24小时,蒸汽杀青后,气流干燥处理至叶片的水分含量不高于10%,粉碎得到粉末,将粉末至于水蒸气蒸溜提取罐中,按照料液比1:10加入水,浸泡0.5h,提取8h,收集挥发油提取器中挥发油,所得挥发油用无水硫酸钠干燥24h;
S11、制备复方精油:按重量份数计,将苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)混合均匀得到复方精油。
该一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油在制备抗冠状病毒药物制剂中的应用。
该抗冠状病毒药物制剂选自复方精油、喷雾剂、精油贴、凝胶剂或乳剂中的任意一种。
实施例1
复方配比1组:将苍术挥发油20份、金银花挥发油6份、连翘挥发油6份、野菊花挥发油5份、石菖蒲挥发油5份、艾叶挥发油5份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油5份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油3份混合均匀得到复方精油。
实施例2
复方配比2组:将苍术挥发油10份、金银花挥发油10份、连翘挥发油10份、野菊花挥发油10份、石菖蒲挥发油5份、艾叶挥发油3份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油5份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
实施例3
复方配比3组:将苍术挥发油20份、金银花挥发油5份、连翘挥发油5份、野菊花挥发油6份、石菖蒲挥发油6份、艾叶挥发油5份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油2份、薄荷挥发油5份、罗文莎叶精油4份混合均匀得到复方精油。
实施例4
复方配比4组:将苍术挥发油15份、金银花挥发油7份、连翘挥发油7份、野菊花挥发油6份、石菖蒲挥发油6份、艾叶挥发油5份、广藿香挥发油4份、天竺葵精油5份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
实施例5
复方配比5组:将苍术挥发油10份、金银花挥发油10份、连翘挥发油10份、野菊花挥发油5份、石菖蒲挥发油5份、艾叶挥发油5份、广藿香挥发油5份、天竺葵精油5份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
实施例6
复方配比6组:将苍术挥发油10份、金银花挥发油8份、连翘挥发油8份、野菊花挥发油10份、石菖蒲挥发油10份、艾叶挥发油2份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油5份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
实施例7
复方配比7组:将苍术挥发油15份、金银花挥发油10份、连翘挥发油10份、野菊花挥发油8份、石菖蒲挥发油5份、艾叶挥发油2份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油3份、薄荷挥发油3份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
实施例8
复方配比8组:将苍术挥发油12份、金银花挥发油10份、连翘挥发油10份、野菊花挥发油7份、石菖蒲挥发油7份、艾叶挥发油2份、广藿香挥发油2份、天竺葵精油3份、薄荷挥发油5份、罗文莎叶精油2份混合均匀得到复方精油。
效果实施例1
复方精油对人冠状病毒229E(hCoV-229E)感染ICR小鼠肺炎模型的治疗作用;
取ICR小鼠150只,SPF级,体重13-15g,雌雄各半,按体重等级随机分为正常对照(滴鼻给药组)、HCoV-229E感染模型(滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比1组(实施例1滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比2组(实施例2滴鼻给药组)、HCoV-229E筛选复方配比3组(实施例3滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比4组(实施例4滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比5组(实施例5滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比6组(实施例6滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比7组(实施例7滴鼻给药组)、HCoV-229E复方配比8组(实施例8滴鼻给药组),每组15只;除正常对照组外,其余小鼠用异氟烷轻度麻醉后,以100TCID50 HCoV-229E病毒液滴鼻感染,50μL/只,感染相应组别的小鼠;感染当天开始滴鼻给药,每日1次,连续4天,10μL/只;正常对照组、模型对照组在同等情况下分别滴鼻给予等量植物油(玉米油)10μL/只,每日1次,连续4天;感染第5天称重、眼眶静脉取血,测定外周血中免疫细胞比例,取血后处死各组小鼠,称定肺组织重量、并测定肺组织中炎症因子、病毒载量;
统计方法:采用SPSS 22.0软件进行统计,组间比较采用对照t检验和单因素方差分析,x±s表示;采用独立样本t检验或单因素方差分析(ANOVA),然后进行Dunnet检验用于多重比较组间差异,以P<0.05表示统计结果差异具有统计学意义;结果见表1-3和图1。
肺指数=[肺湿重(g)/体重(g)]×100
肺指数抑制率=(模型对照组肺指数-给药组肺指数)/(模型对照组肺指数-正常对照组肺指数)×100%
表1:各配比复方精油对人冠状病毒hCoV-229E感染小鼠肺炎模型的治疗作用(x±sd,n=15)
注:与正常组比较,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
由表1可知;复方精油中富含药理效应显著的小分子化合物,这些化合物具有一定的脂溶性,更容易透过细胞膜快速到达病灶部位;对前期筛选的复方精油对人冠状病毒袭肺小鼠模型进行药效评价;研究发现,给予模型小鼠各复方配比精油,模型小鼠体质量减轻,摄食量和饮水量减少,嗜卧懒动甚则精神萎靡,毛色潮湿,扎堆少动,反应迟缓,食欲不振,纳呆等临床表现明显改善;与正常对照组比较,HCoV-229E模型对照组小鼠肺指数显著增加(P<0.01);与模型对照组比较,各配比复方精油滴鼻给药方式均有一定降低HCoV-229E感染小鼠的肺指数,但其中复方配比1组、复方配比3组、复方配比4组及复方配比7组在降低肺指数方面作用显著,分析与该四个复方中苍术占比较高有关。
由图1可知:临床新型冠状病毒感染者大多数患者的淋巴细胞总数明显减少,提示淋巴细胞(特别是T淋巴细胞)可能是冠状病毒的靶点;小鼠外周血免疫细胞比例结果如图1,结果所示,采用hCoV-229E病毒株感染ICR小鼠,小鼠外周血中免疫细胞CD3+T细胞、CD4+T、CD8+T细胞及B细胞的百分比均明显降低,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05、P<<0.01),与冠状病毒患者临床指标症状具有一致性;复方精油各配比组给药4天后对以上免疫细胞有不同程度影响,可升高CD3+T细胞、CD4+T、CD8+T细胞及B细胞的百分比,与模型对照组比较有显著性升高,其中复方配比1组、复方配比3组、复方配比4组及复方配比7组优于其他各组。
表2:各配比复方精油对人冠状病毒hCoV-229E感染小鼠肺炎模型炎症因子的影响(x±sd,n=15);
注:与正常组比较,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
新型冠状病毒颗粒开始通过呼吸道传播,继而引发细胞因子风暴,从而引发一系列严重的免疫反应;在SARS-Cov和MERS-CoV感染中,与肺部炎症和肺损伤有关的IL-6、TNF-a、IL-15等促炎细胞因子水平升高;严重的炎症反应对冠状病毒肺炎所致肺损伤的破坏作用可能是病毒致病性的主要原因之―,因此,在冠状病毒肺炎治疗中,抑制及检测细胞因子或趋化因子的产生具有重要意义;考察了复方精油对人冠状病毒hCoV-229E感染小鼠肺炎模型炎症因子的影响,由表2可知;结果显示复方配比1组、复方配比3组、复方配比4组及复方配比7组可显著抑制炎症因子表达,与复方精油对肺指数的影响结果一致。
表3:各配比复方精油对人冠状病毒hCoV-229E感染小鼠肺炎模型病毒载量的影响;
由表3可知,模型组小鼠肺组织病毒滴度显著提高,不同复方精油配比组均有降低肺组织病毒载量的作用,其中复方配比1组、复方配比3组、复方配比4组及复方配比7组作用更为显著。
效果实施例2
复方精油对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的体外抑制效率:
用细胞感染法测定经实施例1-实施例8得到的复方精油作用后样本中具有感染性子代病毒的量;以细胞病变作为判断指标,观察并计算中药精油对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的抑制效率;结果见表4;
表4:复方配比1组至复方配比8组的复方精油对100TCID50新型冠状病毒(Delta株)半数抑制浓度;
由表4可知;复方配比1组至复方配比8组的复方精油对100TCID50新型冠状病毒(Delta株)具有半数抑制效果;其中复方配比1组的复方精油稀释227172倍后,对100TCID50新型冠状病毒(Delta株)具有半数抑制效果。
本发明的设计重点在于,通过采用苍术挥发油、金银花挥发油、连翘挥发油、野菊花挥发油、石菖蒲挥发油、艾叶挥发油、广藿香挥发油、天竺葵精油、薄荷挥发油、罗文莎叶精油制备复方精油,得到的复方精油能够降低HCoV-229E感染小鼠的肺指数;复方精油各配比组给药后对免疫细胞有不同程度影响,可升高CD3+T细胞、CD4+T、CD8+T细胞及B细胞的百分比;复方精油能够抑制炎症因子表达,与复方精油对肺指数的影响结果一致;不同配比的复方精油均有降低肺组织病毒载量的作用;复方精油采用中草药提取,具有毒副作用小的优点。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非对本发明的技术范围作任何限制,故凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何细微修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (10)
1.一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油,其特征在于;按重量份数计,包括如下原料:苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)。
2.一种如权利要求1所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;包括如下步骤:
S1、制备苍术挥发油:苍术洗净干燥后粉粹,过筛,加入10倍量的蒸馏水置于水蒸气蒸溜提取罐中,蒸馏提取8h后收集挥发油;所得挥发油经石油醚萃取3次,减压浓缩得苍术挥发油;
S2、制备金银花挥发油:取金银花于挥发油水蒸气蒸溜提取罐中提取金银花挥发油;
S3、制备连翘挥发油:取连翘药材置水蒸气蒸溜提取罐中,加入12倍量水浸泡1h,水蒸气蒸溜提取5h,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,得连翘挥发油;
S4、制备野菊花挥发油:取粉碎的菊花于水蒸气蒸溜罐中,加14倍量水浸泡1小时,水蒸气蒸溜提取13h,得野菊花挥发油;
S5、制备石菖蒲挥发油:采用挥发油提取对石菖蒲饮片加热提取,再采用萃取的方法得石菖蒲挥发油;
S6、制备艾叶挥发油:艾叶粉碎后置于提取罐中,料液比1:12加入水,浸泡2.0h,煮沸后保持微沸状态提取6h,停止加热后静置20min,收集挥发油提取器中的艾叶挥发油;
S7、制备广藿香挥发油:将广藿香洗净晾干,粉碎,过筛;采用超临界二氧化碳萃取法提取;
S8、制备天竺葵精油:将天兰葵药材的花、叶、茎混合均匀,采用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取;
S9、制备薄荷挥发油:取薄荷叶粉碎后置于超声辅助蒸馏提取装置中,料液比1:12加入10%氯化钠溶液水,浸泡1h,超声功率300W、频率40kHz、超声提取时间40min,得到薄荷挥发油;
S10、制备罗文莎叶精油:将罗文莎叶片洗净后平铺在烘房中,放置12~24小时,蒸汽杀青后,气流干燥处理至叶片的水分含量不高于10%,粉碎得到粉末,将粉末至于水蒸气蒸溜提取罐中,按照料液比1:10加入水,浸泡0.5h,提取8h,收集挥发油提取器中的挥发油,所得挥发油用无水硫酸钠干燥24h;
S11、制备复方精油:按重量份数计,将苍术挥发油(10~20份)、金银花挥发油(5~10份)、连翘挥发油(5~10份)、野菊花挥发油(5~10份)、石菖蒲挥发油(5~10份)、艾叶挥发油(2~5份)、广藿香挥发油(2~5份)、天竺葵精油(2~5份)、薄荷挥发油(3~5份)、罗文莎叶精油(2~5份)混合均匀得到复方精油。
3.根据权利要求2所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S2中提取金银花挥发油的具体步骤包括:取金银花于挥发油水蒸气蒸溜提取罐中,加入20倍量的8.5%氯化钠溶液浸泡1h,连接挥发油测定器与回流冷凝管,自冷凝管上端加入8.5%的氯化钠溶液,充满至挥发油测定器的刻度部分为止;水蒸气蒸溜提取7h,停止加热,放置,冷却,收集挥发油提取器中挥发油,加入无水硫酸钠除去萃取液中的水,即得金银花挥发油。
4.根据权利要求2所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S5中制备石菖蒲挥发油的具体步骤为:称取石菖蒲饮片置于圆底烧瓶中,加入9倍量的蒸馏水,浸泡3h,混合后连接挥发油提取器和冷凝管,将烧瓶置电热套中加热至微沸,并保持微沸,提取6小时,放置片刻,开启提取器下端活塞,将水缓缓放出,用石油醚冲洗冷凝管和提取器,萃取油层,水洗至中性收集石油醚层,无水硫酸钠脱水,在自然条件下挥干石油醚,即得石菖蒲挥发油。
5.根据权利要求2所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S7中采用超临界二氧化碳萃取法提取的具体步骤为:按照药材与携带剂的质量比为200:1加入携带剂,携带剂按照体积比组成:乙醇68份、环己烷4份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行萃取。
6.根据权利要求5所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S7中超临界二氧化碳流体萃取的条件为:萃取釜温度40℃,萃取压强28MPa,流速为20kg/h,萃取时间2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到广藿香挥发油。
7.根据权利要求2所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S8中超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取的具体步骤为:加入携带剂,药材与加入的携带剂质量比为200:1,携带剂组成:乙醇68份、环己烷4份、二氯乙烷0.7份,混合均匀后加入萃取釜中,用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取;将萃取后的二氧化碳流体进入分离器进行分离。
8.根据权利要求7所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油的制备方法,其特征在于;所述S8中超临界二氧化碳萃取的条件为:萃取釜温度38℃,萃取压强20MPa,流速为17kg/h,萃取时间3h,二氧化碳流体的流量为12kg/h;所述分离的条件为:分离器压力为6.5MPa,温度为42℃,提取2h,从分离器底部放出萃取物,静置后,经油水分离得到淡黄色天竺葵精油。
9.一种如权利要求1所述的一种预防治疗冠状病毒感染的复方精油在制备抗冠状病毒药物制剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于;所述抗冠状病毒药物制剂选自复方精油、喷雾剂、精油贴、凝胶剂或乳剂中的任意一种。
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