CN116019225A - 一种含有玉米肽的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种含有玉米肽的组合物及其应用,属于食品(包括功能性食品或特医食品)、保健品以及生物医药技术领域,所述组合物包括玉米肽和复合益生菌。本发明对溃疡性结肠炎有显著的治疗效果,可有效修复粘膜损伤,降低细胞内炎症因子的浸润,改善溃疡性结肠炎模型小鼠肠道组织的病理变化,减少结肠组织中炎性因子TNF‑α、IL‑6、IFN‑γ、IL‑8的表达,从而发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。本发明的玉米肽和复合益生菌均为食源性原料,具备良好的安全性和生物相容性,无毒副作用,解决了单纯使用抗生素类药物副作用等问题,在治疗急性溃疡性结肠炎中具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于食品、保健品以及生物医药技术领域,具体涉及一种含有玉米肽的组合物及其应用。
背景技术
溃疡性结肠炎是一种病因尚不明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,通常认为肠道免疫反应过度,有可能引起炎症和溃疡。其次,一些溃疡性结肠炎会家族性发病,推断其与某些基因表达相关。再者,某些环境因素与溃疡性结肠炎的发病也有一部分关联。
传统治疗急性溃疡性结肠炎的药物,如美沙拉嗪,长期使用可能引起很大的副作用,例如头疼、恶心、呕吐等,对人体造成损伤。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种含有玉米肽的组合物及其应用,本发明的组合物的原料为食源性原料,用于治疗溃疡性结肠炎没有毒副作用。
本发明提供了一种含有玉米肽的组合物,包括以下组分:玉米肽和复合益生菌;所述玉米肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述复合益生菌包括鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌。
优选的,所述组合物包括以下重量份的组分:玉米肽60份、鼠李糖乳杆菌20份、动物双歧杆菌10份、植物乳杆菌5份和保加利亚乳杆菌5份。
优选的,所述鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的有效活菌数比为4:2:1:1。
优选的,所述复合益生菌中鼠李糖乳杆菌的有效活菌数为12×1011CFU/g;所述复合益生菌中动物双歧杆菌的有效活菌数为6×1011CFU/g;所述复合益生菌中植物乳杆菌的有效活菌数为3×1011CFU/g;所述复合益生菌中保加利亚乳杆菌有效活菌数为3×1011CFU/g。
本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备食品或保健品中的应用;所述食品或保健品的功效包括以下功效中的一种或几种:调节胃肠功能、清除体内的乙醇、降低血压、抗疲劳、抗衰老、抑制L-谷氨酸诱导的神经毒性和抗氧化。
优选的,所述食品包括功能性食品或特医食品。
本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用。
优选的,所述治疗溃疡性结肠炎通过以下1)~5)中的一个或几个方面实现:
1)修复粘膜损伤;
2)降低细胞内炎症因子的浸润;
3)改善肠道组织的病理变化;
4)减少结肠组织中炎性因子的表达;
5)改善肠道菌群。
优选的,所述炎性因子包括:TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8中的一种或几种。
优选的,所述产品包括药品;所述产品的剂型包括口服制剂。
本发明提供了一种含有玉米肽的组合物,包括玉米肽和复合益生菌;所述玉米肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述复合益生菌包括鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌。本发明提供的组合物对溃疡性结肠炎有显著的治疗效果,可有效修复粘膜损伤,降低细胞内炎症因子的浸润,改善溃疡性结肠炎模型小鼠肠道组织的病理变化,减少结肠组织中炎性因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-8的表达,而发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。本发明的玉米肽和复合益生菌均为食源性原料,具备良好的安全性和生物相容性,无毒副作用,解决了单纯使用抗生素类药物副作用等问题,在治疗溃疡性结肠炎中具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为不同组别小鼠疾病活动指数DAI指数变化;
图2为不同组别小鼠结肠组织HE染色;
图3为不同组别小鼠结肠组织IFN-γ的表达;
图4为不同组别小鼠结肠组织IL-6的表达;
图5为不同组别小鼠结肠组织TNF-α的表达;
图6为不同组别小鼠结肠组织IL-8的表达;
图1~6中,单因素方差分析统计显著性差异,###表示DSS组VS Con组,P<0.001,★★★表示DSS组VS治疗组P<0.001,★★表示DSS组VS治疗组P<0.01,★表示DSS组VS治疗组P<0.05,ns表示无显著性差异。
具体实施方式
本发明提供了一种含有玉米肽的组合物,包括以下组分:玉米肽和复合益生菌;优选的,所述组合物由以下组分组成:玉米肽和复合益生菌;所述玉米肽的氨基酸序列如SEQID NO.1所示;所述复合益生菌包括鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌。
在本发明中,复合益生菌可以补充肠道有益菌,对肠胃有保护作用,能调节肠道菌群平衡,缓解肠道不适,促进食物消化和营养吸收,还可以抑制有害菌的生成,消除炎症。玉米肽抗炎抗氧化,促进益生菌的生长和繁殖,增加肠道益生菌的绝对数量,抑制腐败菌的生长繁殖,优化肠内微生态环境,维持正常的肠道功能。益生菌辅助玉米肽功能提升,玉米肽促进益生菌定植,二者相辅相成,协同促进机体健康。
在本发明中,所述玉米肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,具体为:Leu-Asp-Tyr-Glu。本发明的玉米肽是一种玉米活性单体肽,是通过对玉米蛋白进行酶解反应后,经分离纯化后获得的小分子肽。本发明的玉米肽分子量低,通过小肠粘膜迅速被吸收,不经加工直接进入细胞。研究表明,氧化应激对于维持肠道健康至关重要。
本发明的复合益生菌具有良好的耐酸性、人工胃肠液耐受性及胆盐耐受性,所含的益生菌菌株均具有较高的安全性。在本发明中,所述复合益生菌能合成消化酶,促进肠道对营养物质的吸收,防止或减少致病菌的附着,维持肠道的结构平衡,改善便秘、腹泻和消化不良,从而抑制炎症反应。
在本发明中,所述组合物优选的包括以下重量份的组分:玉米肽60份、鼠李糖乳杆菌20份、动物双歧杆菌10份、植物乳杆菌5份和保加利亚乳杆菌5份,更优选的,所述组合物由以下重量份的组分组成:玉米肽60份、鼠李糖乳杆菌20份、动物双歧杆菌10份、植物乳杆菌5份和保加利亚乳杆菌5份。在本发明中,所述鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的有效活菌数比优选为4:2:1:1。
在本发明中,所述复合益生菌中鼠李糖乳杆菌的有效活菌数优选为12×1011CFU/g;所述复合益生菌中动物双歧杆菌的有效活菌数优选为6×1011CFU/g;所述复合益生菌中植物乳杆菌的有效活菌数优选为3×1011CFU/g;所述复合益生菌中保加利亚乳杆菌有效活菌数优选为3×1011CFU/g。
在本发明中,所述组合物优选的采用以下方法制备得到:将所述玉米肽和复合益生菌混合,得到组合物;所述组合物优选为100目筛网的筛下组分;所述组合物的保存温度优选为-80℃。
本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备食品或保健品中的应用;
所述食品或保健品的功效包括以下功效中的一种或几种:调节胃肠功能、清除体内的乙醇、降低血压、抗疲劳、抗衰老、抑制L-谷氨酸诱导的神经毒性和抗氧化;
所述食品包括功能性食品或特医食品。
在本发明中,所述组合物还具有改善肠道菌群的益生特点,能够使肠道菌群健康化。
本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品的应用。
在本发明中,所述溃疡性结肠炎优选的包括急性溃疡性结肠炎和慢性溃疡性结肠炎。
在本发明中,所述治疗溃疡性结肠炎优选的通过以下1)~5)中的一个或几个方面实现:
1)修复粘膜损伤;
2)降低细胞内炎症因子的浸润;
3)改善肠道组织的病理变化;
4)减少结肠组织中炎性因子的表达;
5)改善肠道菌群。
在本发明中,所述炎性因子包括:TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8中的一种或几种。
在本发明中,所述产品优选的包括药品;所述产品的剂型优选的包括口服制剂;所述口服制剂包括粉剂、颗粒剂或片剂。
下面将结合本发明中的实施例,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。
下述实施例中涉及的小鼠为6~8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,购自北京维通利华实验动物技术有限公司;下述实施例中涉及的ELISA试剂盒购自泉州市睿信生物科技有限公司;下述实施例中涉及的大便隐血检测试剂盒购自埃博生物医药(杭州)有限公司;下述实施例中涉及的艾迪莎美沙拉嗪缓释颗粒购自上海爱的发制药有限公司;下述实施例中涉及的葡聚糖硫酸钠(DSS)购自上海翊圣生物科技有限公司;下述实施例中涉及的H&E染色试剂盒购自泉州市睿信生物科技有限公司;下述实施例中涉及的益生菌包括鼠李糖乳杆菌,动物双歧杆菌,植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌均由吉林大学生命科学学院提供。
在本发明中,组合物由以下重量份的组分组成:玉米肽60份、鼠李糖乳杆菌20份、动物双歧杆菌10份、植物乳杆菌5份和保加利亚乳杆菌5份。在本发明中,所述复合益生菌中鼠李糖乳杆菌的有效活菌数优选为12×1011CFU/g;所述复合益生菌中动物双歧杆菌的有效活菌数优选为6×1011CFU/g;所述复合益生菌中植物乳杆菌的有效活菌数优选为3×1011CFU/g;所述复合益生菌中保加利亚乳杆菌有效活菌数优选为3×1011CFU/g。将所述玉米肽和复合益生菌混合,得到肽-益生菌。
实施例1
1.1动物试验
1.1.1动物试验设计
清洁级C57BL/6J小鼠,雄性,体重在18~20g左右,适应性喂养7d。小鼠适应性饲养1周后随机分为6组,每组5只,即空白组、模型组(DSS组)、AC组、低剂量组(P1组),中剂量(P2组),高剂量组(P3组),参见如下表1。适应性饲养7天后,空白组在整个实验阶段内正常饮食与用水,每天灌胃治疗。
表1实验设计方案
1.1.2疾病活动指数(DAI)的测定
实验中记录小鼠体重、大便性状及便血情况,观察小鼠毛发、精神状态、食量及活动情况等。DSS模型小鼠的疾病活动指数(Disease activity index,DAI)评分标准见表2。
DAI=(体重指数+大便性状+潜血情况)/3。
表2结肠组织病理学损伤评分标准
计分 | 体重下降(%) | 大便形状 | 大便隐血 |
0 | ≤0 | 正常 | 大便隐血阴性 |
1 | 0-5 | 松散 | 少量带血的粪便 |
2 | 5-10 | 稀便 | 一定量血腥粪便 |
3 | 10-15 | 半松散的大便 | 大量血腥粪便 |
4 | ≥15 | 水样便 | 肉眼血便 |
1.1.3结肠细胞因子的测定
灌胃结束后,取结肠组织上清,通过ELISA试剂盒,检测结肠组织TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-8的表达。
1.1.4小鼠结脏组织病理评估
取小鼠部分结肠浸泡于福尔马林溶液,反复颠倒使组织充分固定,室温保存。把经福尔马林溶液固定后的织依次进行脱水、石蜡包埋、制成切片、苏木精—伊红(H&E)染色。显微镜观察结肠组织的黏膜组织损伤与炎性细胞浸润情况。
1.2数据处理
实验数据均以平均数±标准差来表示,至少重复3次,采用origin软件对不同组之间的数据进行单因素方差,进行作图,P<0.05为统计学上有显著差异。
2.结果与分析
2.1 DAI评分
疾病活动指数(DAI)是结合小鼠的体重下降百分比、腹泻情况和便血情况这三种指标进行综合评分,并将得到的3项结果的总分除以3得到的值。
如图所示,DSS组小鼠DAI变化最为明显,便血严重,大便松散,体重下降严重。Con组小鼠的DAI无明显变化,小鼠粪便正常,无便血情况,体重未下降。治疗组中,AC组和P3组小鼠的DAI变化较DSS小。
2.2不同的治疗方案对小鼠结肠组织的影响
HE组织染色可以反映出肠道的病变程度。荧光显微镜下观察,Con组结肠组织结构正常,腺体形态正常,腺体间的杯状细胞正常,隐窝正常,未能观察到有明显的中性粒细胞细胞浸润及溃疡。DSS组结肠黏膜被大量破坏,能明显观察到有大量的中性粒细胞细胞浸润,杯状细胞数量明显降低,黏膜充血、水肿明显,腺体及腺腔排列不规则且有损伤或消失,隐窝结构被破坏、形状扭曲,部分地区能观察到溃疡及脓肿的形成。AC组,P3组结肠组织结构完整,能观察到有少量中性粒细胞浸润,粘膜部分略有充血水肿,杯状细胞数量丰富。P1组和P2组有一定程度的粘膜充血水肿,中性粒细胞浸润,腺体及腺腔有损伤,隐窝变形,杯状细胞减少。
2.3不同的治疗方案对小鼠结肠组织炎性因子水平的影响
采用酶联免疫吸附法测定小鼠结肠组织中TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-8的含量。与Con组相比,DSS组小鼠结肠组织中促炎细胞因子TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.05),而P1组、P2组和P3组均不同程度降低了促炎细胞因子水平。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述,但它仅仅是本发明一部分实施例而不是全部实施例,人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例,这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (10)
1.一种含有玉米肽的组合物,包括以下组分:玉米肽和复合益生菌;所述玉米肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述复合益生菌包括鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌。
2.根据权利要求所述的组合物,其特征在于,所述组合物包括以下重量份的组分:玉米肽60份、鼠李糖乳杆菌20份、动物双歧杆菌10份、植物乳杆菌5份和保加利亚乳杆菌5份。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于,所述鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌、植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的有效活菌数比为4:2:1:1。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,所述复合益生菌中鼠李糖乳杆菌的有效活菌数为12×1011CFU/g;所述复合益生菌中动物双歧杆菌的有效活菌数为6×1011CFU/g;所述复合益生菌中植物乳杆菌的有效活菌数为3×1011CFU/g;所述复合益生菌中保加利亚乳杆菌有效活菌数为3×1011CFU/g。
5.权利要求1~4任意一项所述的组合物在制备食品或保健品中的应用;所述食品或保健品的功效包括以下功效中的一种或几种:调节胃肠功能、清除体内的乙醇、降低血压、抗疲劳、抗衰老、抑制L-谷氨酸诱导的神经毒性和抗氧化。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述食品包括功能性食品或特医食品。
7.权利要求1~4任意一项所述的组合物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述治疗溃疡性结肠炎通过以下1)~5)中的一个或几个方面实现:
1)修复粘膜损伤;
2)降低细胞内炎症因子的浸润;
3)改善肠道组织的病理变化;
4)减少结肠组织中炎性因子的表达;
5)改善肠道菌群。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述炎性因子包括:TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8中的一种或几种。
10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述产品包括药品;所述产品的剂型包括口服制剂。
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