CN115989869A - 一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 - Google Patents
一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115989869A CN115989869A CN202310023045.XA CN202310023045A CN115989869A CN 115989869 A CN115989869 A CN 115989869A CN 202310023045 A CN202310023045 A CN 202310023045A CN 115989869 A CN115989869 A CN 115989869A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yeast protein
- curcumin
- glycosylated
- solution
- glycosylated yeast
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 title claims abstract description 111
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 title claims abstract description 111
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 78
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 73
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 claims abstract description 78
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 claims abstract description 55
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 claims abstract description 39
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 24
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 16
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 14
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 claims description 12
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 claims description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 12
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 claims description 12
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 12
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000005496 eutectics Effects 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims description 5
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 claims description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 14
- 238000010411 cooking Methods 0.000 abstract description 13
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 abstract description 2
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 16
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 13
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 12
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 12
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 5
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 5
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical group [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 3
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 3
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 2
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006069 physical mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000036186 satiety Effects 0.000 description 1
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Noodles (AREA)
Abstract
本发明公开了一种糖基化酵母蛋白‑姜黄素纳米颗粒的制备方法及其在生鲜湿面制品中的应用，属于疏水性功能因子载运体系技术领域。本发明以NADES作为可控的美拉德反应体系制备了糖基化酵母蛋白，采用糖基化酵母蛋白构建纳米颗粒载运体系，最后将糖基化酵母蛋白‑姜黄素纳米颗粒添加到生鲜湿面中。本发明制备的糖基化酵母蛋白‑姜黄素纳米颗粒的添加强化了生鲜湿面的面筋网络结构，从而提升了生鲜湿面的蒸煮特性。由于姜黄素在糖基化酵母蛋白‑姜黄素纳米颗粒中具有良好的分散性和稳定性，因此提升了生鲜湿面的贮藏稳定性、感官品质以及面条蒸煮前后的抗氧化活性。
Description
技术领域
本发明属于疏水性功能因子载运体系技术领域，具体涉及到一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法及其在生鲜湿面制品中的应用。
背景技术
近年来，人们不再满足于对食品饱腹感和生存必需品的需求，更加注重其营养价值和保健功能。食品中的生物活性成分，如姜黄素、益生菌、植物精油、矿物质、功能性油脂、生物活性肽、类胡萝卜素等。然而，由于这些生物活性成分存在溶解度差、加工贮藏稳定性差，存在异味以及生物利用度低等问题，使其在机体中的吸收利用受限。为了提高生物活性成分的稳定性及生物利用度，诸多食品级载运体系应运而生，其中包括乳液、凝胶(纳米凝胶和微凝胶)、纳米颗粒和脂质体等。
蛋白质经美拉德反应基的糖基化修饰后可以提升溶解性、乳化性、抗氧化性以及环境稳定性等功能特性，这赋予了糖蛋白作为新型生物活性物质载运体系的潜力。因此，糖基化蛋白质被认为是一种有前景的食品载体。使用糖基化蛋白纳米颗粒负载姜黄素，可扩大姜黄素的应用场景，提升其负载效率，使其更加便捷的添加至不同食品体系中。
生鲜湿面是一类水分含量高的面制品，因水分活度大极易导致腐败菌生长，因此无法实现工业化生产。目前，延长生鲜湿面的货架期、延缓其贮藏品质的劣变是面条产业亟待解决的问题。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，该方法包括以下步骤：
S1、NADES体系的制备：将氯化胆碱与葡萄糖混合搅拌，置于烘箱中加热使其融化，然后在水浴条件下磁力搅拌反应，获得均匀的透明的天然低共熔溶剂，简称NADES；
S2、酵母蛋白的预处理：将酵母蛋白粉末溶解在去离子水中，在室温下磁力搅拌1-2h后，调节pH至12，继续搅拌保持30min后，加热处理，冷却至室温后调节pH至7，离心，将上清液冷冻干燥并储存于-20℃条件下备用；
S3、糖基化酵母蛋白的制备：将NADES和酵母蛋白水中混合，加热降低粘度后，在85℃下加热2.5-3h；
S4、糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备：将姜黄素溶解在无水乙醇中，将糖基化酵母蛋白粉末分散在PBS缓冲液中，在室温下持续搅拌1-2h后，在搅拌条件下加入姜黄素溶液，在20-30℃条件下搅拌4-6h，最后冷冻干燥处理48h，并在-20℃条件下储存。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S1中氯化胆碱与葡萄糖的摩尔质量比为2∶(1-4)。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S1中氯化胆碱与葡萄糖的摩尔质量比为1.5∶(1-1.5)。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S1中氯化胆碱与葡萄糖的摩尔质量比为1∶1。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S1中将氯化胆碱与葡萄糖混合液置于90℃的烘箱中加热4h使其融化。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S1中水浴温度为85-100℃，磁力搅拌速度150-250rpm，时间为4-6h。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S2中将12-15mg酵母蛋白粉末溶解在1mL去离子水；使用1mol/L NaOH溶液或1mol/L盐酸溶液调节酵母蛋白粉溶液pH值；加热处理温度为80-90℃，时间为30min。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S2中离心速度为1500-1800×g，时间为15min。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S3中NADES和酵母蛋白的质量比为(80-95)：(5-20)；加热至80-90℃降低粘度。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S3中在85℃下加热2.5h
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S3中NADES、酵母蛋白和水的质量体积比为9.5g∶0.5g∶4mL。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法的一种优选方案，其中：S4中姜黄素溶液浓度为5mg/mL，糖基化酵母蛋白溶液浓度w/v为0.5％，姜黄素溶液与糖基化酵母蛋白溶液的体积比为(1-5)∶(95-99)；PBS缓冲液浓度为0.01mol/L，pH为7。
本发明的另一个目的是提供如上述所述的方法获得糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的应用，具体的将糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒溶于水中，然后加入食盐溶解，将该溶液注入加有小麦面粉的全自动面条机中，获得生鲜湿面。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的应用的一种优选方案，其中：糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒和水的质量体积比为5g∶85mL。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的应用的一种优选方案，其中：食盐加入量为2-5g。
作为本发明糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的应用的一种优选方案，其中：小麦面粉用量为250g。
本发明提供了一种疏水性功能因子载运体系的制备的方法及其应用，以NADES作为可控的美拉德反应体系制备了糖基化酵母蛋白，采用糖基化酵母蛋白构建纳米颗粒载运体系，最后将糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒添加到生鲜湿面中，从而提升了生鲜湿面的蒸煮特性、贮藏稳定性、感官品质以及面条蒸煮前后的抗氧化活性。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明采用NADES作为蛋白质糖基化修饰的反应体系，其具有通过改变反应平衡增强蛋白质糖基化的预期能力，并可有效地修饰蛋白质结构。
(2)本发明利用糖基化酵母蛋白更好的保护姜黄素免受化学降解，从而提升了姜黄素的释放量、环境稳定性、抗氧化活性及体生物可给率，有效利用姜黄素分子中的酚羟基具有的良好的抑菌活性，有效延缓生鲜湿面的劣变过程，同时姜黄素的强抗氧化性也增加了面条的保健功能与营养价值，有效抑制生鲜湿面的贮存期褐变、面粉膨胀势的改变与菌落总数增长，提升生鲜湿面贮藏过程中的感官特性和质构特性。
(3)本发明将制备获得的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒作为复配食品添加剂应用到生鲜湿面中，不仅可以更好的提升生鲜湿面蒸煮前后的抗氧化活性，还可以更有效的强化面条内部组分的结构，使得面条的微观结构更加稳定和均匀、蒸煮损失和吸水率均显著减少。在贮藏方面，因为姜黄素中的酚羟基能够阻碍细菌蛋白质的正常表达，从而发挥抑菌保鲜功能，并且姜黄素与糖基化酵母蛋白结合后具有更好的分散性和稳定性，因此糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒表现出更好的抑菌活性，达成生鲜湿面营养增效和品质提升的目的。
附图说明
图1为糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备原料的傅里叶红外光谱对比图；
图2为糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备原料的X-衍射光谱对比图；
图3为不同环境下糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备原料的外观视觉图和平均粒径变化；其中，A为不同pH外观视觉图，B为不同离子强度外观视觉图度，C为不同温度外观视觉图，D为不同pH平均粒径变化图，E为不同离子强度平均粒径变化，F为不同温度平均粒径变化图；
图4为糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备原料的抗氧化活性变化对比图；其中，A为DPPH自由基清除能力，B为ABTS+清除能力，C为还原力；
图5为糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备原料的体外消化特性的对比曲线图；
图6为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面的扫描电子显微镜图；
图7为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面的荧光显微镜图；
图8为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面的蒸煮损失率和吸水率；
图9为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在蒸煮前后的亮度和黄度值变化；其中，A为亮度，B为黄度；
图10为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在贮藏期间的菌落总数变化；其中，A为表观图，B为菌落总数；
图11为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在贮藏期间的酸度变化；
图12为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在贮藏期间的亮度值变化；
图13为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在贮藏期间的面粉膨胀势变化；
图14为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在贮藏期间的质构变化；其中，A为面条坚实度，B为面条坚实度；
图15为复配不同食品添加剂得到的生鲜湿面在蒸煮前后的抗氧化活性变化；其中，A为DPPH自由基清除能力，B为ABTS+清除能力，C为还原力。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例中所采用的原料如无特别说明均为商业购买。
具体实施方式一：
通过以下具体实施例，对本发明作进一步说明。
本具体实施方式制备糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的方法，包括以下步骤：
S1、NADES体系的制备：将摩尔质量比为1∶1-1.5∶1的氯化胆碱与葡萄糖混合搅拌，置于90℃的烘箱中烘4h使其融化，水浴锅中85-100℃条件150-250rpm磁力搅拌4-6h以获得均匀的透明的天然低共熔溶剂(natural deep eutectic solvent，NADES)；
S2、酵母蛋白的预处理：将酵母蛋白粉末(12-15mg/mL)溶解在去离子水中，在室温下磁力搅拌1-2h，用NaOH(1mol/L)调节pH至12。保持30min后在80-90℃条件下加热30min。之后将其冷却至室温，用盐酸溶液(1mol/L)将溶液pH调回7。以1500-1800×g的速度离心15min后，将上清液冷冻干燥并储存于-20℃条件下备用。
S3、糖基化酵母蛋白的制备：NADES(9.5g)和酵母蛋白(0.5g)在4mL水中混合，加热至80-90℃降低粘度后，在85℃下加热2.5-3h。
S4、糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备：将姜黄素(5mg/mL)溶解在无水乙醇中。将糖基化酵母蛋白(0.5％，w/v)粉末分散在PBS(0.01mol/L，pH 7)中，并在室温下持续搅拌1-2h。在搅拌条件下，将1mL姜黄素溶液连续添加到99mL糖基化酵母溶液中。将所得溶液在20-30℃条件下以450-550rpm搅拌4-6h。之后，将所有样品冷冻干燥48h，并在-20℃条件下储存。
应用本具体实施方式制备糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒制备生鲜湿面，具体操作过程为：
将糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒(5g)溶于85mL水中，然后将2-5g食盐充分溶解在溶液中。将250g小麦面粉加入全自动面条机中，将该溶液倒入机器注水口。
实施例1
本实施例制备糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的方法，包括以下步骤：
S1、NADES体系的制备：将摩尔质量比为1∶1的氯化胆碱与葡萄糖混合搅拌，置于90℃的烘箱中烘4h使其融化，水浴锅中90℃条件200rpm磁力搅拌4h以获得均匀透明的液体，天然低共熔溶剂(nature deep eutectic solvent，NADES)；
S2、酵母蛋白的预处理：
将酵母蛋白粉末溶解在去离子水中，获得浓度为13mg/mL的酵母蛋白溶液，在室温下磁力搅拌1h，用NaOH(1mol/L)调节pH至12，继续保持搅拌30min后，在85℃条件下加热30min。之后将其冷却至室温，用盐酸溶液(1mol/L)溶液pH调回7。以1600×g的速度离心15min后，将上清液冷冻干燥并储存于-20℃条件下备用。
S3、糖基化酵母蛋白的制备：
NADES(9.5g)和酵母蛋白(0.5g)在4mL水中混合，加热至80℃降低粘度后，在85℃下加热2.5h。
S4、糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备：
首先，将姜黄素溶解在无水乙醇中，获得浓度为5mg/mL的姜黄素溶液。
然后，将糖基化酵母蛋白粉末分散在PBS(0.01mol/L，pH 7)中，获得浓度为0.5％(w/v)的糖基化酵母蛋白溶液，并在室温下持续搅拌1h。
再然后，在搅拌条件下，将1mL姜黄素溶液连续添加到99mL糖基化酵母蛋白溶液中。
最后，将所得溶液在25℃条件下以500rpm搅拌5h。之后，将所有样品冷冻干燥48h，获得糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，并在-20℃条件下储存。
对比例1
本对比例制备酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的方法步骤如下：
首先，将姜黄素溶解在无水乙醇中，获得浓度为5mg/mL的姜黄素溶液。
然后，将酵母蛋白粉末分散在PBS(0.01mol/L，pH 7)中，获得浓度为0.5％(w/v)的酵母蛋白溶液，并在室温下持续搅拌1h。
再然后，在搅拌条件下，将1mL姜黄素溶液连续添加到99mL酵母蛋白溶液中。
最后，将所得溶液在25℃条件下以500rpm搅拌5h。之后，将所有样品冷冻干燥48h，获得酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，并在-20℃条件下储存。
对上述实施例1以及对比例1获得的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒、酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒以及姜黄素、酵母蛋白、姜黄素-酵母蛋白物理混合物、姜黄素-糖基化酵母蛋白物理混合物进行结构以及性能表征，结果如下所述：
(1)图1为上述物质的傅里叶红外光谱对比图，图2为上述物质的X-衍射光谱对比图，由图1和图2的结果表明姜黄素已经成功的包埋进蛋白质的疏水性内核中。
(2)图3为上述物质在不同环境下外观视觉图和平均粒径变化，图4为上述含有姜黄素物质在抗氧化活性变化对比图；其中，A为DPPH自由基清除能力，B为ABTS+清除能力，C为还原力；图5为上述含有姜黄素物质的体外消化特性的对比曲线图；由图3-图5的结果可知，糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒在不同pH、NaCl浓度的环境下，未发生絮凝且平均直径无显著增加，还原力相比其他物质更高，有效提高姜黄素的生物可给率更高，保护姜黄素免受化学降解，从而提升了姜黄素的释放量。
实施例2
将实施例1获得糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒应用于生鲜湿面制备中，具体的方法如下：
将5g糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒溶于85mL水中，然后将3g食盐充分溶解在溶液中。将250g小麦面粉加入全自动面条机中，将该溶液倒入机器注水口。全自动面条机运行得到生鲜湿面。
对比例2
本对比例与实施例2不同处为：不添加糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，其余操作过程以及参数设定与实施例2相同。
对比例3
本对比例与实施例2不同处为：使用姜黄素替换糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，其余操作过程以及参数设定与实施例2相同。
对比例4
本对比例与实施例2不同处为：使用对比例1获得姜黄素-酵母蛋白的纳米颗粒替换糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，其余操作过程以及参数设定与实施例2相同。
对上述实施例2以及对比例2-对比例4获得的复配不同食品添加剂的生鲜湿面进行结构以及性能表征，结果如下所述：
(1)对比上述生鲜湿面煮前和煮后的扫描电子显微镜图以及荧光显微镜图，其中煮制过程为：精准称量生鲜湿面20g，并在500mL沸水中蒸煮，至面条白色内核消失后(约2.5-4min)，将煮熟的面条从沸水中捞出，将面条样品在冰水中漂洗30s，经沥水1min后称重。结果如图6和图7所示，由图6可知，与添加姜黄素粉末和添加酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒相比，添加糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的生鲜湿面煮前淀粉颗粒与面筋网络紧密结合，煮后面呈现出致密的蛋白网络结构，面条表面较为平整。由图7可知，与添加姜黄素粉末和添加酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒相比，添加糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的生鲜湿面煮前蛋白质结构更完整。
(2)对比上述生鲜湿面的蒸煮损失率和吸水率以及蒸煮前后的亮度、黄度值变化以及抗氧化活性变化，结果如图8、图9和图15所示，与添加姜黄素粉末和添加酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒相比，添加糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的生鲜湿面具有更低的蒸煮损失和吸水率，且L*(明-暗度，值越大则越亮)，b*(表示蓝-黄色，值越大越黄)更大，以及更好的抗氧化活性。
(3)对比上述生鲜湿面贮藏期间的菌落总数变化、酸度变化、亮度值变化、面粉膨胀势变化以及质构变化，结果如图10-图14所示，在生鲜湿面的贮藏方面，糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒比酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒具有更好的抑菌活性，更低的酸度值，更好的抑制褐变的效果，质构特性和感官特性。
综上可知，本发明以糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒为复配添加剂，开发了一种理化及感官品质改良型生鲜湿面，为疏水性功能因子在食品体系的应用拓展了新的途径。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、NADES体系的制备：将氯化胆碱与葡萄糖混合搅拌，置于烘箱中加热使其融化，然后在水浴条件下磁力搅拌反应，获得均匀的透明的天然低共熔溶剂，简称NADES；
S2、酵母蛋白的预处理：将酵母蛋白粉末溶解在去离子水中，在室温下磁力搅拌1-2h后，调节pH至12，继续搅拌保持30min后，加热处理，冷却至室温后调节pH至7，离心，将上清液冷冻干燥并储存于-20℃条件下备用；
S3、糖基化酵母蛋白的制备：将NADES和酵母蛋白水中混合，加热降低粘度后，在85℃下加热2.5-3h；
S4、糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备：将姜黄素溶解在无水乙醇中，将糖基化酵母蛋白粉末分散在PBS缓冲液中，在室温下持续搅拌1-2h后，在搅拌条件下加入姜黄素溶液，在20-30℃条件下搅拌4-6h，最后冷冻干燥处理48h，并在-20℃条件下储存。
2.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S1中氯化胆碱与葡萄糖的摩尔质量比为2：(1-4)。
3.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S1中将氯化胆碱与葡萄糖混合液置于90℃的烘箱中加热4h使其融化。
4.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S1中水浴温度为85-100℃，磁力搅拌速度150-250rpm，时间为4-6h。
5.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S2中将12-15mg酵母蛋白粉末溶解在1mL去离子水；使用1mol/LNaOH溶液或1mol/L盐酸溶液调节酵母蛋白粉溶液pH值；加热处理温度为80-90℃，时间为30min。
6.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S2中离心速度为1500-1800×g，时间为15min。
7.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S3中NADES和酵母蛋白的质量比为(80-95)：(5-20)；加热至80-90℃降低粘度。
8.根据权利要求1所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的制备方法，其特征在于，S4中姜黄素溶液浓度为5mg/mL，糖基化酵母蛋白溶液浓度w/v为0.5％，姜黄素溶液与糖基化酵母蛋白溶液的体积比为(1-5)：(95-99)；PBS缓冲液浓度为0.01mol/L，pH为7。
9.一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒，其特征在于，采用权利要求1-8任一项所述的方法后的。
10.一种权利要求9所述的糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒的应用，其特征在于，将糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒溶于水中，然后加入食盐溶解，将该溶液注入加有小麦面粉的全自动面条机中，获得生鲜湿面。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310023045.XA CN115989869A (zh) | 2023-01-06 | 2023-01-06 | 一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310023045.XA CN115989869A (zh) | 2023-01-06 | 2023-01-06 | 一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115989869A true CN115989869A (zh) | 2023-04-21 |
Family
ID=85994860
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310023045.XA Pending CN115989869A (zh) | 2023-01-06 | 2023-01-06 | 一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115989869A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110786511A (zh) * | 2019-11-12 | 2020-02-14 | 武汉轻工大学 | 一种乳清分离蛋白糖基化反应产物制备姜黄素均匀乳液的方法和姜黄素均匀乳液 |
| CN112868978A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-06-01 | 吉林大学 | 一种具有保鲜作用的姜黄素纳米乳液及制备方法 |
| CN114376067A (zh) * | 2022-01-18 | 2022-04-22 | 大连工业大学 | 一种改性蛋白纳米颗粒、其制备方法及应用 |
-
2023
- 2023-01-06 CN CN202310023045.XA patent/CN115989869A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110786511A (zh) * | 2019-11-12 | 2020-02-14 | 武汉轻工大学 | 一种乳清分离蛋白糖基化反应产物制备姜黄素均匀乳液的方法和姜黄素均匀乳液 |
| CN112868978A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-06-01 | 吉林大学 | 一种具有保鲜作用的姜黄素纳米乳液及制备方法 |
| CN114376067A (zh) * | 2022-01-18 | 2022-04-22 | 大连工业大学 | 一种改性蛋白纳米颗粒、其制备方法及应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 刘晓婷;屈凌波;许旭;: "生鲜湿面保鲜技术与品质的研究进展", 粮食科技与经济, no. 06 * |
| 姚月华;王亚琴;贾鑫;唐宁;程永强;: "茶多酚对生鲜面品质及抗氧化特性的影响", 核农学报, no. 10 * |
| 张家辉;李曼;朱科学;郭晓娜;周惠明;王彬;张士康;: "超微绿茶粉生鲜面的研制及特性研究", 食品工业科技, no. 09 * |
| 曹静;翁静宜;程萌;齐军茹;: "大豆分离蛋白-葡聚糖糖基化产物作为乳化剂和活性物质载体的性能分析", 食品科学, no. 08 * |
| 杨脉: "低共熔溶剂中蛋白质美拉德反应", 中国优秀硕士学位论文全文数据库工程科技I辑, no. 7, pages 024 - 139 * |
| 胡思;李华;陆启玉;: "茶多酚生鲜面的制作及特性研究", 河南工业大学学报(自然科学版), no. 05 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113017095B (zh) | 玉米油藜麦蛋白皮克林高内相乳液的制备方法及应用 | |
| CN104397828B (zh) | 一种改性玉米醇溶蛋白复合缓释抗菌液态膜的制备方法 | |
| JP2010539924A (ja) | 野菜抽出物発酵液の製造方法およびこれにより製造される野菜抽出物発酵液 | |
| CN109601898B (zh) | 一种提高鱼糜凝胶强度的方法 | |
| JPS60160849A (ja) | 繊維状の食用蛋白質複合体及びその製造方法 | |
| Homayounpour et al. | Protective effect of nanochitosan incorporated with free/nanoliposome Cumin (Cuminum cyminum L.) aqueous extract on sardine fish | |
| CN111670929A (zh) | 一种微胶囊包埋鱿鱼墨黑色素饼干及其制备方法 | |
| Cai et al. | Application of composite coating of Nostoc commune Vauch polysaccharides and sodium carboxymethyl cellulose for preservation of salmon fillets | |
| CN111171348A (zh) | 一种抑制南美白对虾腐败菌的含虾青素生物抗菌复合膜的制备方法 | |
| KR101859609B1 (ko) | 식이섬유 및 젖산균을 이용한 발효소시지 제조방법 | |
| Chotigavin et al. | Novel sous-vide pressure technique affecting properties of local beef muscle | |
| CN115989869A (zh) | 一种糖基化酵母蛋白-姜黄素纳米颗粒及其制备方法的应用 | |
| CN113261677A (zh) | 一种抗菌大豆分离蛋白-没食子酸纳米颗粒及其制备方法 | |
| CN112042937A (zh) | 一种水溶性叶黄素乳液凝胶及其制备方法 | |
| KR19980031022A (ko) | 해조류의 알긴산을 이용한 젤리형 가공식품의 제조방법 | |
| CN114391563B (zh) | 一种煎炸预拌粉及其制备方法 | |
| CN113892505B (zh) | 一种抑制烘焙食品多元危害物生成的方法 | |
| CN102823889A (zh) | 一种可增加成品凝胶性能的鱼丸制作方法 | |
| AU2021103800A4 (en) | Controlled-Released Lutein Emulsion Gel and Formulation Thereof | |
| CN111418759B (zh) | 一种富含不饱和脂肪酸的即食谷物制品及其生产方法 | |
| JP2766829B2 (ja) | 一部ゲル化した親水性マンナンペースト状食品素材お よびその製造方法 | |
| CN1065728C (zh) | 一种生产豆制饮料的方法 | |
| CN111264838B (zh) | 鱼明胶乳液及其制备方法 | |
| CN113861470A (zh) | 一种可食结冷胶-壳聚糖-花青素膜的制备方法 | |
| EP0644726B1 (en) | Method to manufacture a biotechnical product lowering the cholesterol level in blood |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |