CN115975043A - 重组促卵泡激素融合蛋白 - Google Patents

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CN115975043A CN202211201659.4A CN202211201659A CN115975043A CN 115975043 A CN115975043 A CN 115975043A CN 202211201659 A CN202211201659 A CN 202211201659A CN 115975043 A CN115975043 A CN 115975043A
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Abstract

本公开涉及一种重组促卵泡激素融合蛋白,其包含两条不同的肽链,这两条肽链在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及Fc链上的结构的双重作用下,折叠成稳定的异二聚体。本公开提供的重组融合蛋白半衰期长,活性较高,小剂量一次给药即可以促进动物催产和催熟,提高人工繁殖效率,可以应用于人的辅助生殖、治疗多囊性卵巢综合征和不排卵疾病、动物超数排卵、动物同期发情、受胎产仔、治疗动物不孕不育、促进动物繁殖、胚胎移植、促排精排卵、刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮以及治疗动物不孕不育、治疗母畜卵巢疾病、促进家畜繁殖、提高公畜精液品质、诱导母畜发情、卵母细胞的体外成熟和体外受精。

Description

重组促卵泡激素融合蛋白
技术领域
本公开属于基因工程技术领域。具体地,本公开涉及一种新型长效促性腺激素及其制备方法,以及其在促进动物繁殖中的用途。
背景技术
促性腺激素(Gonadotropin,Gn)是由脊椎动物垂体(Pituitary Gland,PG)前叶细胞合成与分泌的一类糖蛋白激素(Glycoprotein Hormones,GPHs),主要生理作用是刺激生殖细胞的生长、发育、成熟、排精及排卵。
促卵泡激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)又称卵泡刺激素,促卵泡生成素,是由脑垂体合成并分泌的一种糖蛋白激素。FSH分子是由非共价键结合的α亚基和β亚基两个亚基所组成的异二聚体。在同一物种中,FSH与其它糖蛋白激素如促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、促甲状腺素(Thyroid Stimulating Hormone,TSH)等的α亚基的氨基酸序列相同,由92-96个氨基酸组成(不同哺乳动物组成不同)。FSHβ亚基基因由109-115个氨基酸组成,决定了FSH的生物学特异性,单独的α和β亚基都不具有生物学活性,只有在二者结合的情况下才能发挥生物学作用。
在女性中,FSH的功能是促进卵泡发育和成熟,并且协同促黄体生成素(LH)促使发育成熟的卵泡分泌雌激素和排卵,参与正常月经的形成。FSH能够促进卵泡的发育和成熟,如果FSH水平低于正常值,可能患有多囊性卵巢综合征等疾病。在畜牧业中,FSH常应用于动物超数排卵、体外受精等,并且与动物产仔关系密切。
FSH可以从脑垂体或尿液中提取得到,也可以重组生产。由于天然FSH的半衰期较短,为了获得良好的治疗效果,通常需要每天连续注射,操作不方便,同时也给病人或动物带来了痛苦。因此,开发长效FSH、提高生物活性、减少注射次数、增加使用便利性,势在必行。
2010年德国默克上市了长效FSH(Elonva),将CTP(hCG的羧基末端肽)加在FSHβ亚基C-末端(US5585345),其在人体内的半衰期约为70h。
CN108676096公开了将猪FSHβ亚基直接或间接与人、灵长类或马属哺乳动物绒毛膜促性腺激素的β亚基羧端肽CTP相连,猪FSHα亚基通过范德华力与猪FSHβ亚基结合,其在大鼠体内半衰期约为30h。
有多篇专利报道将FSH和Fc以不同的形式连接,可以延长FSH的半衰期,提高体内生物活性。CN103509121B公开了将FSHβ亚基直接或者间接通过接头融合在Fc片段上,α亚基通过α亚基和β亚基的亲和力或者接头与FSHβ亚基结合在一起,其在大鼠体内的半衰期为30-40h。CN107540748A公开了将猪FSHα亚基/β亚基直接或间接通过连接元件融合至Fc片段上,β亚基/α亚基通过范德华力或连接元件与α亚基/β亚基结合,其在大鼠体内的半衰期约为60h。CN103554269B将pFSHβ亚基、CTP、pFSHα亚基与人IgG Fc变体连接,其在大鼠体内的半衰期约为40h,是猪垂体FSH的10倍以上。CN106496331A中,在FSHα亚基与FSHβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链锁扣结构(KiH,Knobs-into-Holes)的双重作用下,折叠成稳定的异二聚体形式的FSH融合蛋白,其半衰期约为248小时,而同时测定的果纳芬(重组FSH)的半衰期为17.3小时,前者的半衰期为后者的14倍。
鱼类存在两种类型的GtHs,即GtHⅠ和GtHⅡ,分别对应于哺乳类的促卵泡素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)和促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)。GtH是一个二聚体分子,由共同的含抗原决定因素的α亚基和激素生物学特异性的β亚基组成,两个亚基只有结合在一起才能发挥激素的生物学活性。促性腺激素I是由GtHα与GtH Iβ组成的异二聚体,促性腺激素II是由GtHα与GtH IIβ组成的异二聚体。一般认为,促性腺激素I即卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)主要在性腺发育早期起作用,即卵黄生成期和精子生成期由脑垂体大量分泌产生,并对刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮起主要作用,经学者研究,FSH在促排精排卵中同样起着重要的作用(CN102080095A)。
实践证明鱼类脑垂体由于其含天然的GtH催产效果既好又广泛适用于各种鱼类,但是由于鱼脑垂体采集难度较高,难以实现大规模生产,导致价格昂贵并且非常稀缺,仅用于现有催产剂不能有效催产的鱼类,从鲤鱼GtH的基因资源入手,通过基因工程技术开发用于鱼类催产繁殖的重组促性腺激素(rGtH I)鱼类催产剂。该新型鱼类催产剂具有极大的优势,它不仅具有高效的催产作用,又能够实现大规模工业化生产,满足当前鱼类催产剂市场需求和成本控制要求。
CN201010572061.7中,在毕赤酵母中表达斜带石斑鱼促性腺激素I,设计GtHα和GtHβ两个亚基串联共表达GtH(β-α)和并联共表达GtH(β+α)两种分子构型。通过在体试验和离体试验验证重组蛋白的生理活性,试验结果显示两种构型的蛋白都能够促进睾酮和雌二醇的释放。
一般认为,促性腺激素II即促黄体生成素(GtH II),GtH II主要作用于卵子和精子的成熟及排放。
在水产养殖中,GtH对于繁殖育种发挥着至关重要的作用,可以加快促进类固醇性激素酮类、雌醇类的分泌,加速生殖、繁殖周期的开始活动,促进产生精原、卵原等原始生殖的细胞,也加快了配子的发育、生长,促进了卵子和精子的发育成熟,也使得繁殖期时可以顺利地排放(王武.金钱鱼促性腺激素基因的克隆、原核表达及功能验证《中国优秀硕士论文全文数据库农业科技辑》2018,第2018年卷(第2期))。
实践证明鱼类脑垂体由于含有天然的GtH,催产效果既好又广泛适用于各种鱼类,但是由于鱼脑垂体采集难度较高,难以实现大规模生产,导致价格昂贵并且非常稀缺,仅用于现有催产剂不能有效催产的鱼类。从鲤鱼GtH的基因资源入手,通过基因工程技术开发用于鱼类催产繁殖的重组促性腺激素(rGtH II)鱼类催产剂。该新型鱼类催产剂具有极大的优势,它不仅具有高效的催产作用,又能够实现大规模工业化生产,满足当前鱼类催产剂的市场需求和成本控制要求。
在CN106434684B专利中,提取了金钱鱼性腺的RNA,利用RT-PCR和RACE技术,克隆获得金钱鱼GtH II基因序列全长。再进行原核表达金钱鱼黄体生成素GtH II基因,通过亲和柱纯化,获得纯的GtH II重组蛋白,以应用于鱼类体外注射来促进鱼类性腺发育,进而使鱼类性腺发育表现同步性。实验组的雌性金钱鱼血清中雌二醇7天时有显著上升,血清中睾酮含量处理前后无明显变化。实验组的雄性金钱鱼血清中睾酮在14天时含量有显著上升,而血清中雌二醇含量处理前后无明显变化。
JP5783522B2专利中设计了鳗鱼带CTP(人绒毛膜促性腺激素的β亚基羧端肽)的GtH构型为GtH Iβ-CTP/GtHα-his的重组GtH I-CTP和GtH构型为GtH IIβ-CTP/GtHα-his的重组GtH II-CTP,上述重组GtH I-CTP和GtH II-CTP均在CHO细胞中进行表达。通过离体试验表明在未成熟的睾丸培养液中,添加GtH I、GtH II、GtH I-CTP、GtH II-CTP,测培养液中的11KT(11-酮睾酮)的浓度,在GtH I 200ng/mL以及GtH II 500ng/mL以上的适度显著促进了11KT的产生。特别是GtH II-CTP 20ng/ml低浓度也能看到效果。同时,在高度给药组中,11KT产生量与对照组相比最高达到了100倍左右。在体内生物活性试验中,未成熟的雄性鳗鱼每周一次以200μg/kg体重给药GtH I-CTP,持续8周,给药实验结束三天后,测量实验鱼的体重和切除睾丸的重量,计算性腺体指数(GSI:性腺重量/体重)。结果显示对照组的GSI约为0.2,而当给予GtH I-CTP时,GSI约为4.4,这是一个非常高的值。另外,组织观察结果显示,对照组的睾丸中仅存在增殖前的精原细胞,而在用GtH I-CTP治疗的个体的睾丸中观察到包括精子在内的处于不同发育阶段的生殖细胞,从而证明GtH I-CTP可以促进精原细胞发育成各个阶段的生殖细胞。重组鳗鱼GtH可以人工催熟鳗鱼。
双特异性抗体中实现异源二聚体的方式,处理办法有Knobs-into-Holes(US20030078385)、离子相互作用(WO2007147901)、静电转向(WO2009089004)、卷曲螺旋、亮氨酸拉链、螺旋-转角-螺旋基序等办法。
KiH技术是1996年由Genentech的Paul Carter团队开发的,该技术是抗体重链有效异源二聚化(heterodimerization)的基础。通常利用重组表达系统制备抗体A和抗体B的异源二聚体时,表达产物中AB异源二聚体正确组装的比例不到50%,通过锁扣模式可以增加异源二聚体的稳定性,将正确组装的比例提高到80%以上。
静电转向是利用在肽中带相反电荷的氨基酸、蛋白质结构域、以及蛋白质之间有利的静电相互作用来控制高级蛋白质分子的形成。在美国专利申请公开号US2014/0024111中披露了一种使用静电转向效应改变抗体结构域的相互作用,以减少双特异性抗体生成中的同源二聚体形成的方法。
现有GtH重组表达的研究很少,未见Fc长效化改造,一般半衰期短,生物活性不高。而JP5783522B2中,GtH与CTP连接,提高了生物活性,但纯化基于其带有的his-tag,纯化效率不高,且CTP糖基化程度高,表达的蛋白异质性强。
将GtH I和Fc以不同的形式连接,可以延长GtH I的半衰期,提高体内生物活性,同时有利于提高下游纯化效率。Fc部分采用锁扣模式(即KiH模式)或静电转向模式,可以帮助GtH I的α亚基和β亚基正确搭配组装。
将GtH II和Fc以不同的形式连接,可以延长GtH II的半衰期,提高体内生物活性,同时有利于提高下游纯化效率。Fc部分采用锁扣模式或静电转向模式,可以帮助GtH II的α亚基和β亚基正确搭配组装。
因为FSHα亚基的C端参与FSH与FSH受体(FSHR)的相互作用(Jiang et al.,Molecular and Cellular Endocrinology,2014,382:424-451),CN107540748A、CN103554269B和CN106496331A将α亚基的C端与Fc链连接会影响FSH的活性。CN103509121B会出现有一部分α亚基和β亚基不能正确搭配组装的问题。
发明内容
为了解决现有技术的问题,本公开将Gnα和Gnβ亚基与Fc链相连,采用三种连接模式:
(1)Gnα亚基和Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连;
(2)将Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连,Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连;
(3)将Gnα和Gnβ亚基的N端与Fc链相连。
Fc采用锁扣模式或者静电转向模式进行改造,可以实现正确组装的稳定的异二聚体融合蛋白。Fc与α和β亚基通过柔性肽连接,减少对两个亚基结构的影响。扣式Fck与野生型IgG1相比具有EU编号为S354C、T366W的位点的突变,锁式Fch与野生型IgG1相比具有EU编号为Y349C、T366S、L368A、Y407V的位点的突变;扣式Fc4k与野生型IgG4相比具有EU编号为S354C、T366W的位点的突变,锁式Fc4h与野生型IgG4相比具有EU编号为Y349C、T366S、L368A、Y407V的位点的突变。
本公开涉及的两种静电转向模式,分别命名为T型和D型:
静电转向T型中,T正电荷链(Fc(T+))与野生型IgG1相比具有EU编号为D221R、P228R、K409R的突变;T正电荷链(Fc4(T+))与野生型IgG4相比具有EU编号为S228R、K409R的突变;T负电荷链(Fc(T-))与野生型IgG1相比具有EU编号为D221E、P228E、L368E的突变;T负电荷链(Fc4(T-))与野生型IgG4相比具有EU编号为S228E、L368E的突变。
静电转向D型中,D正电荷链(Fc(D+))与野生型IgG1相比具有EU编号为L351K、T366K的突变;D正电荷链(Fc4(D+))与野生型IgG4相比具有EU编号为L351K、T366K的突变;D负电荷链(Fc(D-))与野生型IgG1相比具有EU编号为L351D、L368E的突变;D负电荷链(Fc4(D-))与野生型IgG4相比具有EU编号为L351D、L368E的突变。
同时对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造(EU编号为C220S、D356E、L358M的位点,Kabat编号为G230S位点),改变两条链的距离,使相连的α和β亚基更容易相互结合。
从而可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的重组Fc与GtH融合蛋白。
本公开提供的重组Fc与GtH融合蛋白半衰期长,活性较高,小剂量一次给药即可以促进哺乳动物的卵泡发育,促进动物催产和催熟,提高人工繁殖效率。本公开提供的融合蛋白可以应用于人的辅助生殖、治疗多囊性卵巢综合征和不排卵疾病、动物超数排卵、动物同期发情、受胎产仔、治疗动物不孕不育、促进动物繁殖、胚胎移植、促排精排卵、刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮以及治疗动物不孕不育、治疗母畜卵巢疾病、促进家畜繁殖、提高公畜精液品质、诱导母畜发情、卵母细胞的体外成熟和体外受精。
一方面,本公开提供了一种重组Fc融合蛋白,所述融合蛋白包含两条不同的肽链,其中一条肽链由Gnα亚基和Fc链直接或通过接头间接连接形成,另一条肽链由Gnβ亚基和Fc链直接或通过接头间接连接形成,这两条肽链在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及Fc链上的结构的双重作用下,折叠成稳定的异二聚体;优选地,所述Fc链包括对野生Fc链进行锁扣模式改造,静电转向模式改造后的Fc链。
根据前述的重组融合蛋白,所述重组融合蛋白中肽链的组合模式包括下列Fc链与Gnα亚基或Gnβ亚基之间的连接:
(1)所述Gnα亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnα-Fc;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Gnα-Fc和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(2)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Fc-Gnα和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(3)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnβ;所述肽链Fc-Gnα和Fc-Gnβ在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体。
根据前述重组Fc融合蛋白,本公开提供的Gn选自人FSH(hFSH)、猪FSH(pFSH)、鲤鱼GtH I、鲤鱼GtH II,其中所述Gnα亚基与Gnβ亚基直接或通过接头间接连接在Fc上;其中所述接头是由2-20个柔性氨基酸组成的柔性多肽,所述柔性氨基酸选自Gly、Ser、Ala和Thr中的至少一种,优选为(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)n,其中n为2-5之间的整数,更优选地n为4;
在另一方面,本公开提供了编码前述重组Fc融合蛋白的核酸。
在另一方面,本公开提供了制备所述重组Fc与Gn融合蛋白的方法,其步骤包括:
(1)构建表达重组Fc与Gn融合蛋白的表达载体:
(2)将步骤(1)构建的所述表达载体导入宿主细胞;
(3)在适合所述重组Fc与Gn融合蛋白表达的条件下培养所述宿主细胞;
在一些实施方案中,所述方法还包括步骤(4)分离表达的重组Fc与Gn融合蛋白。
在一些实施方案中,所述分离表达的重组Fc与Gn融合蛋白包括以下步骤:
(i)离心所述宿主细胞的发酵液,收集上清,获得澄清发酵液;
(ii)将澄清的发酵液经ProteinA柱层析,洗脱,获得洗脱液;
(iii)将洗脱液经阳离子层析柱纯化;
在另一方面,本公开提供了一种药物组合物,其包含前述融合蛋白或前述核酸。所述药物组合物还包含药学上可接受的载体。
在另一方面,本公开提供了一种所述重组Fc融合蛋白、所述核酸、所述药物组合物在制备应用于人的辅助生殖、治疗多囊性卵巢综合征和不排卵疾病、动物超数排卵、动物同期发情、受胎产仔、治疗动物不孕不育、促进动物繁殖、胚胎移植、促排精排卵、刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮以及治疗动物不孕不育、治疗母畜卵巢疾病、促进家畜繁殖、提高公畜精液品质、诱导母畜发情、卵母细胞的体外成熟和体外受精的药物中的用途;其中所述动物包括猪、鱼、牛、羊、马或狗;优选猪或鱼。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分,示出了符合本说明书的实施例,并与说明书一起用于解释本说明书的原理。
图1示出了人IgG Fc区天然序列hIgG1(SEQ ID NO.8)、hIgG2、hIgG3和hIgG4(SEQID NO.10)的序列对比,用星号示出这些序列间的差异。
图2示出了Fc融合蛋白的结构,其中促性腺激素亚基可与Fc1k、Fc4k、Fc1h、Fc4h、Fc1(T+)、Fc4(T+)、Fc1(T-)、Fc4(T-)、Fc1(D+)、Fc4(D+)、Fc1(D-)和Fc4(D-)通过柔性肽连接。
图3示出了Fc融合蛋白的表达纯化结果。
图3A中:
条带1:0811-1(pK3),未纯化的本公开的Fc-L-pFSH;
条带2:0811-1(pK3),纯化的本公开的Fc-L-pFSH;
条带3:0811-2(hK3),未纯化的本公开的Fc-L-hFSH;
条带4:0811-2(hK3),纯化的本公开的Fc-L-hFSH;
条带5:0811-3,未纯化的本公开的Fc-L-pFSH(KiH);
条带6:0811-3,纯化的本公开的Fc-L-pFSH(KiH);
条带7:0811-4,未纯化的本公开的Fc-L-hFSH(KiH);
条带8:0811-4,纯化的本公开的Fc-L-hFSH(KiH);
条带9:0811-5,未纯化的CMPR1(hFSH-IgG1-hFC,CN110041435A);
条带10:0811-5,纯化的CMPR1(hFSH-IgG1-hFC,CN110041435A);
条带11:Marker。
图3B中:
条带1:0811-6,未纯化的CMPR2(hFSH-IgG2-hFC,CN103539862B);
条带2:0811-6,纯化的CMPR2(hFSH-IgG2-hFC,CN103539862B);
条带3:0811-7,未纯化的CMPR3(pFSH-IgG1-hFC,CN103554269B);
条带4:0811-7,纯化的CMPR3(pFSH-IgG1-hFC,CN103554269B);
条带5:0811-8,未纯化的CMPR4(pFSH-IgG2-hFC,CN103554269B);
条带6:0811-8,纯化的CMPR4(pFSH-IgG2-hFC,CN103554269B);
条带7:0811-9,未纯化的CMPR5(pFSH-pFC,CN103554269B);
条带8:0811-9,纯化的CMPR5(pFSH-pFC,CN103554269B);
条带9:Marker。
图3C中条带M为分子量标准品,条带1为纯化的Fc4-L-hFSH
图3D中:条带M为分子量标准品,条带1-9分别为hK1、hK2、hK3、hD1、hD2、hD3、hT1、hT2、hT3。
图3E中:条带M为分子量标准品,条带10-18分别为pK1、pK2、pK3、pD1、pD2、pD3、pT1、pT2、pT3。
图3F中:条带M为分子量标准品,条带19-27分别为hK1-4、hK2-4、hK3-4、hD1-4、hD2-4、hD3-4、hT1-4、hT2-4、hT3-4。
图3G中:条带1为分子量标准品,条带2-7分别为纯化的本公开的GtH I-K1、纯化的本公开的GtH I-K2、纯化的本公开的GtH I-K3、纯化的本公开的GtH I-T1、纯化的本公开的GtH I-T2、纯化的本公开的GtH I-T3。
图3H中:条带1为分子量标准品,条带2-4分别为纯化的本公开的GtH I-D1、纯化的本公开的GtH I-D2、纯化的本公开的GtH I-D3。
图3I中:条带M为分子量标准品,条带1-9分别为GtH II融合蛋白K1、GtH II融合蛋白K2、GtH II融合蛋白K3、GtH II融合蛋白D1、GtH II融合蛋白D2、GtH II融合蛋白D3、GtHII融合蛋白T1、GtH II融合蛋白T2、GtH II融合蛋白T3。
图4示出了重组Fc融合蛋白的体内活性结果。图4A示出了Fc-pFSH融合蛋白的体内活性结果,其中Fc-L-pFSH(Kih+Mut)蛋白对应pK3蛋白,Fc-L-hFSH(Kih+Mut)蛋白对应hK3蛋白,Fc-L-hFSH(Kih+Mut)蛋白对应hK3-4蛋白;图4B示出了Fc与FSH融合蛋白的体内活性结果;图4C示出了Fc与GtHI的融合蛋白的体内活性结果;图4D示出了Fc与GtH II的融合蛋白的体内活性结果,其中K1-K3、D1-D3、T1-T3分别为GtH II融合蛋白K1、GtH II融合蛋白K2、GtH II融合蛋白K3、GtH II融合蛋白D1、GtH II融合蛋白D2、GtH II融合蛋白D3、GtH II融合蛋白T1、GtH II融合蛋白T2、GtH II融合蛋白T3。
图5示出了重组Fc-FSH融合蛋白促进小鼠超数排卵的典型图片。图5-15是Fc-L-pFSH组卵细胞的典型图片;图5-6是Fc-L-hFSH组卵细胞的典型图片;图5-1是Fc-L-pFSH(KiH)组卵细胞的典型图片;图5-2是Fc-L-hFSH(KiH)组卵细胞的典型图片;图5-25是PMSG组卵细胞的典型图片;图5中的其他图是表9中其他重组Fc-FSH融合蛋白组卵细胞的典型图片。
具体实施方式
I.定义
在本公开中,除非另有说明,否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且,本文中所用的蛋白质和核酸化学、分子生物学、细胞和组织培养、微生物学、免疫学相关术语和实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的术语和常规步骤。同时,为了更好地理解本公开,下面提供相关术语的定义和解释。
如本文使用的且除非另作说明,术语“约”或“大约”是指在给定值或范围的加或减10%之内。在需要整数的情况下,该术语是指在给定值或范围的加或减10%之内、向上或向下舍入到最接近的整数。
众所周知,诸如缺失、添加或取代一个或数个胺基酸之胺基酸序列的微小变化可能导致最初蛋白质之等位(allelic)形式,其具有实质上相同特性。
术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C末端。所述“Fc区”可以是Fc区天然序列或Fc区变体。虽然免疫球蛋白重链的Fc区的边界可能不同,但人IgG重链Fc区通常定义为从氨基酸残基Cys226或从Pro230到其羧基末端的一段序列。免疫球蛋白的Fc区通常包括两个恒定区,CH2和CH3。
人IgGFc区的“CH2结构域”(也称为“Cγ2”结构域)通常从约氨基酸231延伸到约氨基酸340。所述CH2结构域的独特性在于它不与其它结构域紧密成对。而是两个N连接的分支糖链介于完整的天然IgG分子的两个CH2之间。推测所述糖可以为结构域-结构域配对提供取代物,并且帮助稳定CH2结构域。Burton,分子免疫学22:161-206(1985)。
术语“CH3结构域”包括Fc区中从C末端到CH2结构域的一段残基(即IgG中从大约氨基酸残基341到约氨基酸残基447)。
“Fc区天然序列”包括与自然中发现的Fc区的氨基酸序列相同的氨基酸序列。人Fc区天然序列包括人IgG1 Fc区(hIgG1)天然序列;人IgG2 Fc区(hIgG2)天然序列;人IgG3 Fc区(hIgG3)天然序列;人IgG4 Fc区(hIgG4)天然序列以及其自然发生的变体。图1描述了人IgG Fc区天然序列hIgG1(SEQ ID NO.8)、hIgG2、hIgG3和hIgG4(SEQ ID NO.10)的序列对比,用星号示出这些序列间的差异。
“Fc区变体”包括以至少一个在此定义的“氨基酸修饰”而区别于Fc区天然序列的氨基酸序列。优选所述Fc区变体与Fc区天然序列或与亲本多肽的Fc区相比,具有至少一个氨基酸取代,如在Fc区天然序列或亲本多肽的Fc区中约1-10个氨基酸取代,优选约1-5个氨基酸取代。所述Fc区变体优选与Fc区天然序列和/或与亲本多肽的Fc区至少有大约80%的同源性,最优选至少与其大约90%同源,更优选至少与其大约95%同源。
如本文所用,术语同一性和同源性,或任选地相同和同源,是可互换的,并且是指两个多肽分子序列相似性。当两个被比较序列中的一个位置被相同的氨基酸单体亚基占据时,则各个分子与该位置同源。两个序列之间的同源性百分比是两个序列共享的相应或同源位置数量除以位置总数ⅹ100的函数。例如,如果两个序列中的10个位置相同或6个相同,那么这两个序列是60%同源的。例如,氨基酸序列ASVIDT和AGVFPT具有50%的同源性(6个位置中的3个相对应)。通常,进行序列比较以获得最大同源性。这样的比较可以例如使用Needleman et al.,J.Mol Biol.48:443453(1970)的方法进行,其可以简单地通过诸如Align程序(DNASTAR,Inc.)。相似序列是当比较时共享相同和相似氨基酸残基的那些序列,其中与参考序列相比,相似残基代表相应氨基酸残基的允许点突变的保守取代。在这个意义上,参考序列中残基的保守取代是被残基取代,其在物理或功能上类似于相应的参考残基,例如具有相似的尺寸、形状、电荷、化学性质,包括形成共价键或氢键的能力等。因此,保守取代的序列变体是与参考序列或野生型序列的不同之处,在于存在一个或多个保守取代或允许的基因突变。
术语“氨基酸修饰”是指预定氨基酸序列中的改变。修饰实例包括氨基酸取代、插入和/或缺失。在此优选的氨基酸修饰是取代。
特定位点,例如Fc区的“氨基酸修饰”指特定残基的取代或缺失,或指在特定残基附近插入至少一个氨基酸残基。在特定残基“附近”插入指在距其一到二个残基之处插入。该插入可在特定残基的N端或C端。
术语“氨基酸取代”是指用另一个不同的“取代”氨基酸残基取代预定氨基酸序列中已存在的至少一个氨基酸。所述取代残基可以是“天然氨基酸残基”(即由遗传密码编码)且选自:丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、组胺酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和缬氨酸(Val)。优选所述的取代残基不是半胱氨酸。用一或多个非天然氨基酸残基进行的取代也包含在本文的氨基酸取代的定义中。“非天然氨基酸残基”指除上文所列天然氨基酸残基以外的,能在肽链中与相邻氨基酸残基共价结合的那些。非天然氨基酸残基包括正亮氨酸、鸟氨酸、正缬氨酸、同型丝氨酸和其它氨基酸残基类似物,如Ellman等,酶学方法202:301-336(1991)所述的那些。为了制备这些非天然氨基酸,可以应用Noren等,科学244:182(1989)和Ellman等,出处同上的方法。简言之,这些方法涉及化学激活非天然氨基酸残基的抑制性tRNA,随后进行该RNA的体外转录和翻译。
术语“氨基酸插入”是指向预定氨基酸序列中掺入至少一个氨基酸。虽然所述插入通常包括一或二个氨基酸残基的插入,但本公开考虑更大的“肽插入子”,例如约3-5个或高达约10个氨基酸残基的插入。被插入的残基可以是上述的天然或非天然残基。
术语“氨基酸缺失”是指从预定氨基酸序列中除去至少一个氨基酸残基。
术语“铰链区”通常定义为从人IgG1的Glu216到Pro230的一段序列(Burton,分子免疫学22:161-206(1985))。通过将形成重链内S-S键的第一个和最后一个半胱氨酸放置在相同的位置上,可以将其它IgG同种型的铰链区与IgG1序列对比排列。
术语“接头”指包含一个或多个氨基酸,典型地约2-20个氨基酸的肽。接头在本领域中是已知的或在本文中描述。在一些实施方案中,所述接头是柔性多肽。所述柔性多肽由柔性氨基酸组成,所述柔性氨基酸选自Gly、Ser、Ala和Thr中的至少一种。合适的非免疫原性接头肽是例如(G4S)n,(SG4)n或G4(SG4)n肽接头,其中“n”一般是介于1和10之间,典型地介于1和4之间的数目,特别是3或4,即肽选自GGGGS(SEQ ID NO.136)、GGGGSGGGGS(SEQ IDNO.137)、SGGGGSGGGG(SEQ ID NO.138)、GGGGGSGGGGSSGGGGS(SEQ ID NO.139)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.140)、GGGGSGGGGSGGGG(SEQ ID NO.141)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.142)、GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)、GSPGSSSSGS(SEQID NO.144)、GSGSGSGS(SEQ ID NO.145)、GSGSGNGS(SEQ ID NO.146)、GGSGSGSG(SEQ ID NO.147)、GGSGSG(SEQ ID NO.148)、GGSG(SEQ ID NO.149)、GGSGNGSG(SEQ ID NO.150)、GGNGSGSG(SEQ ID NO.151)和GGNGSG(SEQ ID NO.152);特别感兴趣的肽接头是(G4S)2或GGGGSGGGGS(SEQ ID NO.137)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.142)和GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)。
术语“GtH”即促性腺激素(Gonadotropin Hormone,GtH)是由脊椎动物垂体(Pituitary Gland,PG)前叶细胞合成与分泌的一类糖蛋白激素(Glycoprotein Hormones,GPHs),主要生理作用是刺激生殖细胞的生长、发育、成熟、排精及排卵。
术语“FSH”即卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)主要在性腺发育早期起作用,即卵黄生成期和精子生成期由脑垂体大量分泌产生,并对刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮起主要作用。
术语“锁扣模式”指利用1996年Genentech的Paul Carter团队开发的KiH技术对Fc链进行改造,该技术是抗体重链有效异源二聚化(heterodimerization)的基础。通常利用重组表达系统制备抗体A和抗体B的异源二聚体时,表达产物中AB异源二聚体正确组装的比例不到50%,通过锁扣模式可以增加异源二聚体的稳定性,将正确组装的比例提高到80%以上。
术语“静电转向模式”是指利用在肽中带相反电荷的氨基酸、蛋白质结构域、以及蛋白质之间有利的静电相互作用来控制高级蛋白质分子的形成。在美国专利申请公开号2014/0024111中披露了一种使用静电转向效应改变抗体结构域的相互作用以减少有利于双特异性抗体生成中的异源二聚体形成的同源二聚体形成的方法。当引入两对正负电荷时,以“Double”的首字母D命名静电转向D型,静电转向D型中D正电荷链与野生型IgG1相比具有EU编号为L351K、T366K的突变;D负电荷链与野生型IgG1相比具有EU编号为L351D、L368E的突变。当引入三对正负电荷时,以“Triple”的首字母T命名静电转向T型,静电转向T型中T正电荷链与野生型IgG1相比具有EU编号为D221R、P228R、K409R的突变;T负电荷链与野生型IgG1相比具有EU编号为D221E、P228E、L368E的突变。
术语“药物组合物”指这样的制剂,其以允许包含在其中的活性成分的生物学活性有效的形式存在,并且不包含对施用所述制剂的受试者具有不可接受的毒性的另外的成分。
术语“药用载体”或“药学上可接受的载体”指与治疗剂一起施用的稀释剂、佐剂(例如弗氏佐剂(完全和不完全的))、赋形剂或媒介物。
如本文使用的和除非另作说明,术语“包含”,“包括”,“具有”,“含有”,包括其语法上的等同形式,通常应当理解为开放式且非限制性的,例如,不排除其他未列举的要素或步骤。
II.具体实施方案详述
第一方面,本公开提供一种重组Fc融合蛋白,所述Fc融合蛋白包含两条不同的肽链,其中一条为促性腺激素α亚基(Gnα亚基)根据一定的连接模式直接或者通过接头间接连接在Fc链上形成的肽链,另一条为促性腺激素β亚基(Gnβ亚基)根据一定的连接模式直接或者通过接头间接连接在Fc链上形成的肽链,所述肽链在促Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的异二聚体。
在一些具体实施方式中,其中所述连接模式包含选自下列Fc链与Gnα亚基或Gnβ亚基之间的连接:
(1)所述Gnα亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnα-Fc;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Gnα-Fc和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(2)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Fc-Gnα和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(3)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnβ;所述肽链Fc-Gnα和Fc-Gnβ在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体。
在一些具体实施方式中,其中所述锁扣结构或静电转向模式,其特征分别如下:
(1)所述锁扣结构包含两条不同的Fc链,其中一条为扣式Fc链(Fck),另一条为锁式Fc链(Fch)。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnα-Fck;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fch;所述肽链Gnα-Fck和Gnβ-Fch在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Gnα-Fck:Gnβ-Fch形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnα-Fch;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fck;所述肽链Gnα-Fch和Gnβ-Fck在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Gnα-Fch:Gnβ-Fck形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fch;所述肽链Fck-Gnα和Gnβ-Fch在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fck-Gnα:Gnβ-Fch形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fck;所述肽链Fch-Gnα和Gnβ-Fck在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fch-Gnα:Gnβ-Fck形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnβ;所述肽链Fck-Gnα和Fch-Gnβ在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fck-Gnα:Fch-Gnβ形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnβ;所述肽链Fch-Gnα和Fck-Gnβ在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fch-Gnα:Fck-Gnβ形式的异二聚体。
(2)所述静电转向模式包含两条不同的Fc链,其中一条为正电荷链(Fc(+)),另一条为负电荷链(Fc(-))。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnα-Fc(+);另一条肽链为Gnβ亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(-);所述肽链Gnα-Fc(+)和Gnβ-Fc(-)在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(+):Gnβ-Fc(-)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(T+):Gnβ-Fc(T-)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(D+):Gnβ-Fc(D-)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnα-Fc(-);另一条肽链为Gnβ亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(+);所述肽链Gnα-Fc(-)和Gnβ-Fc(+)在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(-):Gnβ-Fc(+)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(T-):Gnβ-Fc(T+)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(D-):Gnβ-Fc(D+)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(-);所述肽链Fc(+)-Gnα和Gnβ-Fc(-)在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(+)-Gnα:Gnβ-Fc(-)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T+)-Gnα:Gnβ-Fc(T-)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D+)-Gnα:Gnβ-Fc(D-)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(+);所述肽链Fc(-)-Gnα和Gnβ-Fc(+)在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(-)-Gnα:Gnβ-Fc(+)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T-)-Gnα:Gnβ-Fc(T+)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D-)-Gnα:Gnβ-Fc(D+)形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnβ;所述肽链Fc(+)-Gnα和Fc(-)-Gnβ在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(+)-Gnα:Fc(-)-Gnβ形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T+)-Gnα:Fc(T-)-Gnβ形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D+)-Gnα:Fc(D-)-Gnβ形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnβ;所述肽链Fc(-)-Gnα和Fc(+)-Gnβ在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(-)-Gnα:Fc(+)-Gnβ形式的异二聚体。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T-)-Gnα:Fc(T+)-Gnβ形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D-)-Gnα:Fc(D+)-Gnβ形式的异二聚体。
在一些具体实施方式中,其中所述促性腺激素为脊椎动物促性腺激素。
在一些优选地实施方式中,所述脊椎动物选自人、猪、牛、羊、马、狗或鱼。
在一些优选地实施方式中,所述促性腺激素(Gn)选自人FSH(hFSH)、猪FSH(pFSH)、鲤鱼GtH I、鲤鱼GtH II。
在一些优选地实施方式中,所述pFSHα亚基包含与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述pFSHα亚基具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.1上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述pFSHβ亚基包含与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述pFSHβ亚基具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.2上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述hFSHα亚基包含与SEQ ID NO.3所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述hFSHα亚基具有SEQ ID NO.3所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.3上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述hFSHβ亚基包含与SEQ ID NO.4所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述hFSHβ亚基具有SEQ ID NO.4所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.4上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
更优选地,所述鲤鱼GtHα亚基包含与SEQ ID NO.5所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtHα亚基具有SEQ ID NO.5所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.5上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述鲤鱼GtH Iβ亚基包含与SEQ ID NO.6所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtH Iβ亚基具有SEQ ID NO.6所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.6上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
优选地,所述鲤鱼GtH IIβ亚基包含与SEQ ID NO.7所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtH IIβ亚基具有SEQ ID NO.7所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.7上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些具体实施方式中,其中所述Fc链包含IgG的铰链区以及CH2和CH3区。
在一些优选地实施方式中,所述IgG来自人、猪、牛、羊、马或狗。在一些优选地实施方式中,所述IgG为人IgG。
在一些优选地实施方式中,所述Fc链为IgG1或IgG4的Fc链。在一些优选地实施方式中,所述Fc链为人IgG1或IgG4的Fc链。
在一些优选地实施方式中,所述Fc链的铰链区以及CH2和CH3区包含与SEQ IDNO.8或10所示的野生型IgGFc区具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述Fc链具有选自下述任何一个或多个根据EU编号的氨基酸突变:
C220S;
D221E;
D221R;
P228E;
S228E;
P228R;
S228R;
Y349C;
L351D;
L351K;
S354C;
D356E;
L358M;
T366K;
T366S;
T366W;
L368A;
L368E;
Y407V;
K409R。
在一些优选地实施方式中,所述Fc链具有选自根据Kabat编号的氨基酸突变:G230S。
在一些优选地实施方式中,所述Fc链还包含选自下述任何一个或多个根据EU编号的氨基酸突变:
E233缺失;
L234P或L234F;
L235V;
G236A;
H268Q;
K274Q;
N276K;
Y296F;
Y300F;
L309V;
A327G;
A330S;
P331S;
A339T;
R355Q;
N384S;
K392N;
V397M;
K409R;
Q419E;
V422I;
H435R;
Y436F;
P445L。
在一些优选地实施方式中,所述扣式Fc链(Fc1k)具有S354C和T366W突变;更优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述扣式Fc链(Fc4k)具有S354C和T366W突变;更优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述锁式Fc链(Fc1h)具有Y349C、T366S、L368A和Y407V突变;更优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述锁式Fc链(Fc4h)具有Y349C、T366S、L368A和Y407V突变;更优选地,所述锁式Fc链(Fc4h)还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))具有D221R、P228R和K409R突变;更优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))具有S228R和K409R突变;更优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))具有D221E、P228E和L368E突变;更优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))具有S228E和L368E突变;更优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))具有L351K和T366K突变;更优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))具有L351K和T366K突变;更优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))具有L351D和L368E突变;更优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))还具有C220S、D356E和L358M突变。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))具有L351D和L368E突变;更优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))还具有G230S突变。
在一些优选地实施方式中,所述扣式Fc链(Fc1k)包含与SEQ ID NO.9所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)具有SEQ ID NO.9所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.9上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述扣式Fc链(Fc4k)包含与SEQ ID NO.11所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)具有SEQ ID NO.11所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.11上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述扣式Fc链(Fc1k(KiH))包含与SEQ ID NO.130所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc1k(KiH))具有SEQ ID NO.130所示氨基酸序列或者具有在SEQ IDNO.130上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述锁式Fc链(Fc1h)包含与SEQ ID NO.12所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)具有SEQ ID NO.12所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.12上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述锁式Fc链(Fc4h)包含与SEQ ID NO.13所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)具有SEQ ID NO.13所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.13上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述锁式Fc链(Fc1h(KiH))包含与SEQ ID NO.131所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h(KiH))具有SEQ ID NO.131所示氨基酸序列或者具有在SEQ IDNO.131上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))包含与SEQ IDNO.14所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))具有SEQ ID NO.14所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.14上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))包含与SEQ IDNO.15所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))具有SEQ ID NO.15所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.15上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))包含与SEQ IDNO.16所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))具有SEQ ID NO.16所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.16上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))包含与SEQ IDNO.17所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))具有SEQ ID NO.17所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.17上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))包含与SEQ IDNO.18所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))具有SEQ ID NO.18所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.18上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))包含与SEQ IDNO.19所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))具有SEQ ID NO.19所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.19上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))包含与SEQ IDNO.20所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))具有SEQ ID NO.20所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.20上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))包含与SEQ IDNO.21所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))具有SEQ ID NO.21所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.21上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些具体实施方式中,其中所述Gnα亚基与Gnβ亚基通过接头间接连接在Fc链上。
在一些优选地实施方式中,所述接头是柔性多肽;优选地,所述柔性多肽由柔性氨基酸组成,优选地,所述柔性多肽由柔性2-20个氨基酸组成,所述柔性氨基酸选自Gly、Ser、Ala和Thr中的至少一种。
在一些优选地实施方式中,所述柔性多肽为(G4S)n,(SG4)n或G4(SG4)n,其中,n是1和10之间的整数,优选地,n是1和4之间的整数,特别是3或4。
在一些优选地实施方式中,所述接头选自GGGGS(SEQ ID NO.136)、GGGGSGGGGS(SEQ ID NO.137)、SGGGGSGGGG(SEQ ID NO.138)、GGGGGSGGGGSSGGGGS(SEQ ID NO.139)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.140)、GGGGSGGGGSGGGG(SEQ ID NO.141)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.142)、GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)、GSPGSSSSGS(SEQID NO.144)、GSGSGSGS(SEQ ID NO.145)、GSGSGNGS(SEQ ID NO.146)、GGSGSGSG(SEQ ID NO.147)、GGSGSG(SEQ ID NO.148)、GGSG(SEQ ID NO.149)、GGSGNGSG(SEQ ID NO.150)、GGNGSGSG(SEQ ID NO.151)和GGNGSG(SEQ ID NO.152)。
在一些优选地实施方式中,所述柔性多肽选自GGGGSGGGGS(SEQ ID NO.137)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.142)和GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)。
在一些具体实施方式中,其中重组Fc融合蛋白包含选自下列包含Fc链与Gn亚基的肽链的组合:
(a)所述Gnα亚基和Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连;
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.22所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.23所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.22所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.22上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.23所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.23上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.24所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.24所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.25所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.24所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.24上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.25所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.25上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.26所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.26所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.27所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.26所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.26上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.27所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.27上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.28所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.28所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.29所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.28所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.28上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.29所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.29上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.30所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.30所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.31所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.30所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.30上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.31所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.31上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.32所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.32所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.33所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.32所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.32上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.33所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.33上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.46所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.46所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.47所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.46所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.46上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.47所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.47上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.48所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.48所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.49所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.48所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.48上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.49所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.49上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.50所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.50所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.51所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.50所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.50上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.51所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.51上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.52所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.52所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.53所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.52所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.52上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.53所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.53上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.54所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.54所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.55所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.54所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.54上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.55所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.55上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.56所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.56所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.57所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.57所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.56所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.56上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.57所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.57上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.70所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.70所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.71所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.71所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.70所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.70上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.71所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.71上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.72所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.72所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.73所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.73所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.72所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.72上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.73所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.73上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.74所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.74所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.75所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.75所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.74所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.74上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.75所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.75上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.76所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.76所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.77所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.77所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.76所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.76上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.77所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.77上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.78所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.78所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.79所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.79所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.78所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.78上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.79所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.79上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.80所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.80所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.81所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.81所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.80所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.80上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.81所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.81上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.94所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.94所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.95所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.95所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.94所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.94上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.95所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.95上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.96所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.96所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.97所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.97所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.96所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.96上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.97所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.97上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.98所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.98所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.99所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.99所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.98所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.98上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.99所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.99上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.100所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.100所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.101所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.101所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.100所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.100上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.101所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.101上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.102所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.102所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.103所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.103所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.102所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.102上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.103所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.103上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.104所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.104所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.105所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.105所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.104所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.104上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.105所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.105上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.94所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.94所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.118所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.118所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.94所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.94上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.118所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.118上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.96所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.96所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.119所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.119所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.96所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.96上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.119所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.119上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.98所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.98所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.120所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.120所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.98所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.98上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.120所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.120上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.100所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.100所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.121所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.121所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.100所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.100上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.121所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.121上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.102所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.102所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.122所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.122所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.102所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.102上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.122所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.122上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.104所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.104所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.123所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.123所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.104所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.104上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.123所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.123上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(b)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连。
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.34所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.23所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.34所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.34上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.23所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.23上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.35所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.25所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.35所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.35上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.25所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.25上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.36所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.27所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.36所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.36上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.27所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.27上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.37所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.29所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.37所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.37上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.29所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.29上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.38所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.38所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.31所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.38所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.38上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.31所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.31上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.39所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.33所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.39所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.39上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.33所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.33上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.58所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.58所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.47所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.58所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.58上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.47所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.47上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.59所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.59所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.49所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.59所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.59上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.49所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.49上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.60所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.60所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.51所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.60所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.60上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.51所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.51上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.61所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.61所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.53所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.61所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.61上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.53所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.53上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.62所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.62所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.55所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.62所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.62上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.55所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.55上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.63所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.63所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.57所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.57所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.63所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.63上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.57所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.57上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.82所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.82所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.71所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.71所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.82所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.82上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.71所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.71上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.83所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.83所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.73所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.73所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.83所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.83上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.73所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.73上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.84所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.84所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.75所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.75所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.84所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.84上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.75所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.75上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.85所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.85所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.77所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.77所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.85所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.85上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.77所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.77上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.86所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.86所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.79所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.79所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.86所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.86上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.79所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.79上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.87所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.87所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.81所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.81所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.87所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.87上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.81所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.81上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.95所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.95所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.95所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.95上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.97所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.97所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.97所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.97上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.99所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.99所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.99所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.99上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.101所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.101所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.101所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.101上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.103所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.103所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.103所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.103上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.105所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.105所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.105所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.105上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.118所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.118所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.118所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.118上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.119所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.119所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.119所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.119上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.120所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.120所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.120所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.120上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.121所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.121所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.121所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.121上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.122所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.122所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.122所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.122上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.123所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.123所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.123所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.123上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(c)所述Gnα亚基和Gnβ亚基的N端与Fc链的C端相连;
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.34所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.40所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.40所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.34所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.34上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.40所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.40上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.35所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.41所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.35所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.35上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.41所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.41上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.36所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.42所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.42所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.36所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.36上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.42所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.42上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.37所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.43所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.43所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.37所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.37上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.43所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.43上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.38所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.38所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.44所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.44所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.38所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.38上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.44所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.44上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.39所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.45所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.39所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.39上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.45所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.45上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.58所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.58所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.64所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.64所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.58所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.58上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.64所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.64上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.59所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.59所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.65所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.65所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.59所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.59上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.65所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.65上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.60所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.60所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.66所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.66所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.60所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.60上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.66所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.66上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.61所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.61所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.67所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.67所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.61所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.61上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.67所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.67上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.62所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.62所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.68所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.68所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.62所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.62上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.68所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.68上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.63所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.63所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.69所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.69所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.63所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.63上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.69所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.69上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.82所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.82所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.88所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.88所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.82所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.82上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.88所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.88上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.83所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.83所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.89所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.89所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQID NO.83所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.83上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQID NO.89所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.89上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.84所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.84所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.90所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.90所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.84所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.84上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.90所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.90上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.85所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.85所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.91所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.91所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.85所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.85上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.91所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.91上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.86所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.86所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.92所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.92所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.86所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.86上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.92所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.92上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.87所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.87所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.93所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.93所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.87所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.87上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.93所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.93上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.112所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.112所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.112所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.112上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.113所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.113所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.113所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.113上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.114所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.114所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.114所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.114上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.115所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.115所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.115所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.115上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.116所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.116所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.116所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.116上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.117所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.117所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.117所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.117上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.124所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.124所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.124所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.124上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.125所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.125所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.125所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.125上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.126所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.126所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.126所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.126上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.127所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.127所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.127所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.127上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.128所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.128所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.128所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.128上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.129所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.129所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.129所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.129上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(31)所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.132所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ IDNO.132所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.133所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ IDNO.133所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.132所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.132上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.133所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.133上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(32)所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.134所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ IDNO.134所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.135所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ IDNO.135所示。
在一些优选地实施方式中,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.134所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.134上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在一些优选地实施方式中,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.135所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.135上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
在另一方面,本公开提供了编码前述重组Fc融合蛋白的重组Fc融合蛋白的核酸。
在另一方面,本公开提供了制备前述重组Fc融合蛋白的方法,其步骤包括:
(1)构建表达重组Fc融合蛋白的表达载体:
在一些优选地实施方式中,所述表达载体是原核表达载体或表达载体。
在一些优选地实施方式中,所述原核表达载体选自pcDNA II、pSL301、pSE280、pSE380、pSE420、pTrcHisA、B和C、pRSET A、B和C,pGEMEX-1和pGEMEX-2、pET载体,pTrc99A、pKK223-3、pGEX载体、pEZZ18、pRIT2T和pMC1871,pKK233-2和pKK388-1,和pProEx-HT和其变体和衍生物。
在一些优选地实施方式中,所述真核表达载体选自pFastBac、pFastBacHT、pFastBacDUAL、pSFV、pTet-Splice、pEUK-C1、pPUR、pMAM、pMAMneo、pBI101、pBI121、pDR2、pCMVEBNA、pYACneo,pSVK3、pSVL、pMSG、pCH110、pKK232-8、,p3′SS、pXT1、pSG5、pPbac、pMbac、pMC1neo、pOG44、pYES2、pAC360、pBlueBacHis A、B和C、pVL1392、pBsueBacIII、pCDM8、pcDNA1、pZeoSV、pcDNA3、pREP4、pCEP4、和pEBVHi、和其变体或衍生物;优选地,所述pcDNA3为pcDNA3.1。
(2)将步骤(1)构建的所述表达载体导入宿主细胞。
在一些优选地实施方式中,采用选自以下的方法将表达载体导入宿主细胞:电穿孔转染法、磷酸钙转染法、脂质体转染、原生质融合转染法、显微注射法、电穿孔法、基因枪法、阳离子聚合物和病毒载体感染法。
(3)在适合所述重组Fc融合蛋白表达的条件下培养所述宿主细胞。
所述宿主细胞为原核宿主细胞或真核宿主细胞。
在一些优选地实施方式中,所述原核宿主细胞为细菌细胞、枯草芽孢杆菌和分枝杆菌中的任一种;优选地,所述细菌细胞为大肠杆菌。
在一些优选地实施方式中,所述真核宿主细胞选自动物细胞、植物细胞或真菌任一种。
在一些优选地实施方式中,所述真核宿主细胞选自酵母、昆虫、禽类、植物、秀丽隐杆线虫和哺乳动物宿主细胞中的任一种。
在一些优选地实施方式中,所述昆虫细胞选自草地夜蛾细胞(例如Sf9、Sf21)、粉纹夜蛾细胞(例如High Five细胞)和果蝇S2细胞中的任一种。
在一些优选地实施方式中,所述真菌选自酿酒酵母、乳克鲁维酵母、假丝酵母属物种(例如白色假丝酵母或光滑假丝酵母)、构巢曲霉、粟酒裂殖酵母、巴斯德毕赤酵母、和解脂耶罗酵母中的任一种。
在一些优选地实施方式中,所述哺乳动物细胞选自COS细胞、小鼠L细胞、LNCaP细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、人胚肾(HEK)细胞(例如HEK293细胞)、633细胞、Vero、BHK细胞、非洲绿猴细胞、CV1细胞、HeLa细胞、MDCK细胞、Hep-2、NS0和Sp2/0细胞中的任一种。
在一些优选地实施方式中,所述方法还包括步骤(4)分离表达的重组Fc融合蛋白。
在一些优选地实施方式中,所述分离表达的重组Fc融合蛋白包括以下步骤:
(i)离心所述宿主细胞的发酵液,收集上清,获得澄清发酵液;
(ii)将澄清的发酵液经ProteinA柱层析,洗脱,获得洗脱液;
(iii)将洗脱液经阳离子层析柱纯化。
在一些优选地实施方式中,所述阳离子层析柱选自填料为SP SepharoseC25、SPFF、SPSepharoseC50、SE52、SE92、Souece15S、CaptoMMC、Souece30S、SynChropak S300或UltrasilCX的阳离子层析柱,优选为CaptoMMC。
另一方面,本公开还提供一种药物组合物,其包含权利要求1-6任一项所述的重组Fc融合蛋白或权利要求7所述的核酸,以及任选地药学上可接受的载体。
另一方面,本公开提供前述的重组Fc融合蛋白、前述的核酸、前述的药物组合物在制备用于人的辅助生殖、治疗多囊性卵巢综合征和不排卵疾病、动物超数排卵、动物同期发情、受胎产仔、治疗动物不孕不育、促进动物繁殖、胚胎移植、促排精排卵、刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮以及治疗动物不孕不育、治疗母畜卵巢疾病、促进家畜繁殖、提高公畜精液品质、诱导母畜发情、卵母细胞的体外成熟和体外受精的药物中的用途;其中所述动物包括猪、鱼、牛、羊、马或狗。
在一些优选地实施方式中,前述动物为猪或鱼。
为了达到清楚和简洁描述的目的,本文中作为相同的或分开的一些实施方案的一部分来描述特征,然而,将要理解的是,本公开的范围可包括具有所描述的所有或一些特征的组合的一些实施方案。
实施例
实施例1:异二聚体表达载体的构建
1.1Gn片段的获取
1.1.1pFSHα亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P01219的猪FSH(pFSH)α亚基的氨基酸序列,获得如下pFSHα亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.1)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.1.2pFSHβ亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P01228的猪FSH(pFSH)β亚基的氨基酸序列,获得如下pFSHβ亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.2)。
CELTNITITVEKEECNFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.1.3hFSHα亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P01215的人FSH(hFSH)α亚基的氨基酸序列,获得如下hFSHα亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.3)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.1.4hFSHβ亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P01225的人FSH(hFSH)β亚基的氨基酸序列,获得如下hFSHβ亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.4)。
NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.1.5鲤鱼GtHα亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P18857的鲤鱼GtHα亚基的氨基酸序列,获得如下鲤鱼GtHα亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.5)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.1.6鲤鱼GtH Iβ亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为O13050的鲤鱼GtH Iβ亚基的氨基酸序列,获得如下鲤鱼GtH Iβ亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.6)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.1.7鲤鱼GtH IIβ亚基成熟肽
根据UniProt数据库中登记号为P01235的鲤鱼GtH IIβ亚基的氨基酸序列,获得如下鲤鱼GtH IIβ亚基成熟肽氨基酸序列(SEQ ID NO.7)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFCMSQREDFL
1.2Fc区的改造
1.2.1扣式Fck
根据UniProt数据库中登记号为P01857的人IgG1(hIgG1)的氨基酸序列,获得如下野生型IgG1 Fc区氨基酸序列(SEQ ID NO.8)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得扣式Fc1k(SEQ ID NO.9)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,扣式Fc1k与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的S354C和T366W突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的GtHα和Gnβ亚基更容易相互结合。
根据UniProt数据库中登记号为P01861的人IgG4(hIgG4)的氨基酸序列,获得如下野生型IgG4 Fc区氨基酸序列(SEQ ID NO.10)。
ESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得扣式Fc4k(SEQ ID NO.11)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,扣式Fc4k与野生型IgG4 Fc区相比具有根据EU编号的S354C和T366W突变。同时,其还对部分侧链氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S,增加氨基酸侧链基团的相互作用力,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.2锁式Fch
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得锁式Fc1h(SEQ ID NO.12)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,锁式Fc1h与野生型IgG1Fc区相比具有根据EU编号的Y349C、T366S、L368A和Y407V突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得锁式Fc4h(SEQ ID NO.13)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,锁式Fc4h与野生型IgG4 Fc区相比具有根据EU编号的Y349C、T366S、L368A和Y407V突变。同时,其还对部分侧链氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S,增加氨基酸侧链基团的相互作用力,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.3静电转向T型正电荷链(Fc(T+))
对野生型IgG1Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))(SEQ ID NO.14)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的D221R、P228R和K409R突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))(SEQ ID NO.15)。
ESKYSPPCPRCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与野生型IgG4Fc区相比具有根据EU编号的S228R和K409R突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S。
对野生型IgG4 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.4静电转向T型负电荷链(Fc(T-))
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))(SEQ ID NO.16)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的D221E、P228E和L368E突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得静电转向T型正电荷链(Fc4(T-))(SEQ ID NO.17)。
ESKYSPPCPECPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与野生型IgG4 Fc区相比具有根据EU编号的S228E和L368E突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S。
对野生型IgG4 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.5静电转向D型正电荷链(Fc(D+))
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))(SEQ ID NO.18)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与野生型IgG1Fc区相比具有根据EU编号的L351K和T366K突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))(SEQ ID NO.19)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSQEEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,静电转向T型正电荷链(Fc4(D+))与野生型IgG4 Fc区相比具有根据EU编号的L351K和T366K突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S。
对野生型IgG4 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.6静电转向D型负电荷链(Fc(D-))
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))(SEQ ID NO.20)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的L351D和L368E突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据EU编号的C220S,D356E,L358M。
对野生型IgG1 Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
对野生型IgG4 Fc区(SEQ ID NO.10)进行改造,获得静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))(SEQ ID NO.21)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
其中,静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与野生型IgG4 Fc区相比具有根据EU编号的L351D和L368E突变。同时,其还对部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,具有根据Kabat编号的G230S。
对野生型IgG4Fc链中部分侧链位阻较大的氨基酸进行了改造,改变两条链的距离,使相连的Gnα和Gnβ亚基更容易相互结合。
1.2.7扣式Fc1k(KiH)
对野生型IgG1 Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得扣式Fc1k(KiH)(SEQ IDNO.130)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,扣式Fc1k(KiH)与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的S354C和T366W突变。
1.2.8锁式Fc1h(KiH)
对野生型IgG1Fc区(SEQ ID NO.8)进行改造,获得锁式Fc1h(KiH)(SEQ IDNO.131)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
其中,锁式Fc1h(KiH)与野生型IgG1 Fc区相比具有根据EU编号的Y349C、T366S、L368A和Y407突变。
1.3肽链的制备
1.3.1肽链pFSHα-L-Fc1k
将pFSHα亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.22)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.2肽链pFSHβ-L-Fc1h
将pFSHβ亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.23)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.3肽链pFSHα-L-Fc1h
将pFSHα亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.24)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.4肽链pFSHβ-L-Fc1k
将pFSHβ亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.25)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.5肽链pFSHα-L-(Fc1(T+))
将pFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.26)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.6肽链pFSHβ-L-(Fc1(T-))
将pFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.27)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.7肽链pFSHα-L-(Fc1(T-))
将pFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.28)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.8肽链pFSHβ-L-(Fc1(T+))
将pFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.29)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.9肽链pFSHα-L-(Fc1(D+))
将pFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.30)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.10肽链pFSHβ-L-(Fc1(D-))
将pFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.31)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.11肽链pFSHα-L-(Fc1(D-))
将pFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链pFSHα-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.32)。
FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.12肽链pFSHβ-L-(Fc1(D+))
将pFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链pFSHβ-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.33)。
CELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.13肽链Fc1k-L-pFSHα
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-pFSHα(SEQ ID NO.34)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.14肽链Fc1h-L-pFSHα
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-pFSHα(SEQ ID NO.35)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.15肽链(Fc1(T+))-L-pFSHα
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-pFSHα(SEQ ID NO.36)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.16肽链(Fc1(T-))-L-pFSHα
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-pFSHα(SEQ ID NO.37)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.17肽链(Fc1(D+))-L-pFSHα
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-pFSHα(SEQ ID NO.38)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.18肽链(Fc1(D-))-L-pFSHα
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和pFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-pFSHα(SEQ ID NO.39)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.19肽链Fc1h-L-pFSHβ
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-pFSHβ(SEQ ID NO.40)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.20肽链Fc1k-L-pFSHβ
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-pFSHβ(SEQ ID NO.41)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.21肽链(Fc1(T-))-L-pFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-pFSHβ(SEQ ID NO.42)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.22肽链(Fc1(T+))-L-pFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-pFSHβ(SEQ ID NO.43)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.23肽链(Fc1(D-))-L-pFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-pFSHβ(SEQ ID NO.44)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.24肽链(Fc1(D+))-L-pFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和pFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-pFSHβ(SEQ ID NO.45)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.25肽链hFSHα-L-Fc1k
将hFSHα亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.46)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.26肽链hFSHβ-L-Fc1h
将hFSHβ亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.47)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.27肽链hFSHα-L-Fc1h
将hFSHα亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.48)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.28肽链hFSHβ-L-Fc1k
将hFSHβ亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.49)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.29肽链hFSHα-L-(Fc1(T+))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.50)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.30肽链hFSHβ-L-(Fc1(T-))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.51)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.31肽链hFSHα-L-(Fc1(T-))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.52)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.32肽链hFSHβ-L-(Fc1(T+))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.53)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.33肽链hFSHα-L-(Fc1(D+))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.54)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.34肽链hFSHβ-L-(Fc1(D-))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.55)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.35肽链hFSHα-L-(Fc1(D-))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.56)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.36肽链hFSHβ-L-(Fc1(D+))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.57)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.37肽链Fc1k-L-hFSHα
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-hFSHα(SEQ ID NO.58)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.38肽链Fc1h-L-hFSHα
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-hFSHα(SEQ ID NO.59)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.39肽链(Fc1(T+))-L-hFSHα
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-hFSHα(SEQ ID NO.60)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.40肽链(Fc1(T-))-L-hFSHα
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-hFSHα(SEQ ID NO.61)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.41肽链(Fc1(D+))-L-hFSHα
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-hFSHα(SEQ ID NO.62)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.42肽链(Fc1(D-))-L-hFSHα
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-hFSHα(SEQ ID NO.63)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.43肽链Fc1h-L-hFSHβ
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-hFSHβ(SEQ ID NO.64)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.44肽链Fc1k-L-hFSHβ
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-hFSHβ(SEQ ID NO.65)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.45肽链(Fc1(T-))-L-hFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.66)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.46肽链(Fc1(T+))-L-hFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.67)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.47肽链(Fc1(D-))-L-hFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.68)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.48肽链(Fc1(D+))-L-hFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.69)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.49肽链hFSHα-L-Fc4k
将hFSHα亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc4k)依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-Fc4k(SEQ ID NO.70)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.50肽链hFSHβ-L-Fc4h
将hFSHβ亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc4h)依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-Fc4h(SEQ ID NO.71)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.51肽链hFSHα-L-Fc4h
将hFSHα亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc4h)依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-Fc4h(SEQ ID NO.72)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.52肽链hFSHβ-L-Fc4k
将hFSHβ亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc4k)依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-Fc4k(SEQ ID NO.73)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.53肽链hFSHα-L-(Fc4(T+))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc4(T+))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc4(T+))(SEQ ID NO.74)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPRCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.54肽链hFSHβ-L-(Fc4(T-))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc4(T-))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc4(T-))(SEQ ID NO.75)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPECPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.55肽链hFSHα-L-(Fc4(T-))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc4(T-))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc4(T-))(SEQ ID NO.76)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPECPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.56肽链hFSHβ-L-(Fc4(T+))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc4(T+))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc4(T+))(SEQ ID NO.77)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPRCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.57肽链hFSHα-L-(Fc1(D+))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc4(D+))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc4(D+))(SEQ ID NO.78)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSQEEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.58肽链hFSHβ-L-(Fc4(D-))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc4(D-))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc4(D-))(SEQ ID NO.79)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.59肽链hFSHα-L-(Fc4(D-))
将hFSHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc4(D-))依次连接,人工合成肽链hFSHα-L-(Fc4(D-))(SEQ ID NO.80)。
APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.60肽链hFSHβ-L-(Fc4(D+))
将hFSHβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc4(D+))依次连接,人工合成肽链hFSHβ-L-(Fc4(D+))(SEQ ID NO.81)。
NSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKEGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSQEEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
1.3.61肽链Fc4k-L-hFSHα
将扣式Fc链(Fc4k)、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc4k-L-hFSHα(SEQ ID NO.82)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.62肽链Fc1h-L-hFSHα
将锁式Fc链(Fc4h)、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc4h-L-hFSHα(SEQ ID NO.83)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.63肽链(Fc4(T+))-L-hFSHα
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc4(T+))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(T+))-L-hFSHα(SEQ ID NO.84)。
ESKYSPPCPRCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.64肽链(Fc4(T-))-L-hFSHα
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc4(T-))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(T-))-L-hFSHα(SEQ ID NO.85)。
ESKYSPPCPECPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.65肽链(Fc4(D+))-L-hFSHα
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc4(D+))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(D+))-L-hFSHα(SEQ ID NO.86)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSQEEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.66肽链(Fc4(D-))-L-hFSHα
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc4(D-))、接头(L)和hFSHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(D-))-L-hFSHα(SEQ ID NO.87)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.67肽链Fc4h-L-hFSHβ
将锁式Fc链(Fc4h)、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc4h-L-hFSHβ(SEQ ID NO.88)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.68肽链Fc4k-L-hFSHβ
将扣式Fc链(Fc4k)、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc4k-L-hFSHβ(SEQ ID NO.89)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.69肽链(Fc4(T-))-L-hFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc4(T-))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(T-))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.90)。
ESKYSPPCPECPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.70肽链(Fc4(T+))-L-hFSHβ
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc4(T+))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(T+))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.91)。
ESKYSPPCPRCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.71肽链(Fc4(D-))-L-hFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc4(D-))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(D-))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.92)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSQEEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.72肽链(Fc4(D+))-L-hFSHβ
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc4(D+))、接头(L)和hFSHβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc4(D+))-L-hFSHβ(SEQ ID NO.93)。
ESKYSPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSQEEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.3.73肽链GtHα-L-Fc1k
将GtHα亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链GtHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.94)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.74肽链GtH Iβ-L-Fc1h
将GtH Iβ亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.95)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.75肽链GtHα-L-Fc1h
将GtHα亚基、接头(L)和锁式Fc链(Fc1h)依次连接,人工合成肽链GtHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.96)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.76肽链GtH Iβ-L-Fc1k
将GtH Iβ亚基、接头(L)和扣式Fc链(Fc1k)依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.97)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.77肽链GtHα-L-(Fc1(T+))
将GtHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链GtHα-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.98)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.78肽链GtH Iβ-L-(Fc1(T-))
将GtH Iβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.99)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.79肽链GtHα-L-(Fc1(T-))
将GtHα亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))依次连接,人工合成肽链GtHα-L-(Fc1(T-))(SEQ ID NO.100)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.80肽链GtH Iβ-L-(Fc1(T+))
将GtH Iβ亚基、接头(L)和静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-(Fc1(T+))(SEQ ID NO.101)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.81肽链GtHα-L-(Fc1(D+))
将GtHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链GtHα-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.102)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.82肽链GtH Iβ-L-(Fc1(D-))
将GtH Iβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.103)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.83肽链GtHα-L-(Fc1(D-))
将GtHα亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))依次连接,人工合成肽链GtHα-L-(Fc1(D-))(SEQ ID NO.104)。
YPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.84肽链GtH Iβ-L-(Fc1(D+))
将GtH Iβ亚基、接头(L)和静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))依次连接,人工合成肽链GtH Iβ-L-(Fc1(D+))(SEQ ID NO.105)。
GSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAHGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.85肽链Fc1k-L-GtHα
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-GtHα(SEQ ID NO.106)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.86肽链Fc1h-L-GtHα
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-GtHα(SEQ ID NO.107)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.87肽链(Fc1(T+))-L-GtHα
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-GtHα(SEQ ID NO.108)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.88肽链(Fc1(T-))-L-GtHα
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-GtHα(SEQ ID NO.109)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.89肽链(Fc1(D+))-L-GtHα
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-GtHα(SEQ ID NO.110)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.90肽链(Fc1(D-))-L-GtHα
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和GtHα亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-GtHα(SEQ ID NO.111)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYPRNDMNNFGCRECRLRRNNITSRPGAPVYQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVPKNITSEATCCVAKEVKRVLVNDVKLVNHTDCHCSTCYYHKS
1.3.91肽链Fc1h-L-GtH Iβ
将锁式Fc链(Fc1h)、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-h-GtH Iβ(SEQ ID NO.112)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.92肽链Fc1k-L-GtH Iβ
将扣式Fc链(Fc1k)、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-GtH Iβ(SEQ ID NO.113)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.93肽链(Fc1(T-))-L-GtH Iβ
将静电转向T型改造的Fc1负电荷链(Fc1(T-))、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T-))-L-GtH Iβ(SEQ ID NO.114)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.94肽链(Fc1(T+))-L-GtH Iβ
将静电转向T型改造的Fc1正电荷链(Fc1(T+))、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(T+))-L-GtH Iβ(SEQ ID NO.115)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.95肽链(Fc1(D-))-L-GtH Iβ
将静电转向D型改造的Fc1负电荷链(Fc1(D-))、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D-))-L-GtH Iβ(SEQ ID NO.116)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.96肽链(Fc1(D+))-L-GtH Iβ
将静电转向D型改造的Fc1正电荷链(Fc1(D+))、接头(L)和GtH Iβ亚基依次连接,人工合成肽链(Fc1(D+))-L-GtH Iβ(SEQ ID NO.117)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSECRSSCRLTNISITVESEECGSCITIDTTACAGLCKTQESVYRSPLMLSYQNTCNFREWTYETYEFKGCPARADSVFTYPVALSCECSKCNSDITDCGALSQQTLSCNAH
1.3.97肽链GtH IIβ-L-Fc1h
将GtH IIβ、接头(L)和锁式Fc1h依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1h(SEQ IDNO.118)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.98肽链GtH IIβ-L-Fc1k
将GtH IIβ、接头(L)和扣式Fc1k依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1k(SEQ IDNO.119)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.99肽链GtH IIβ-L-Fc1(T-)
将GtH IIβ、接头(L)和T型Fc1(T-)依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.120)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.100肽链GtH IIβ-L-Fc1(T+)
将GtH IIβ、接头(L)和T型Fc1(T+)依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.121)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.101肽链GtH IIβ-L-Fc1(D-)
将GtH IIβ、接头(L)和D型Fc1(D-)依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.122)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.102肽链GtH IIβ-L-Fc1(D+)
将GtH IIβ、接头(L)和D型Fc1(D+)依次连接,人工合成肽链GtH IIβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.123)。
SYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFLGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
1.3.103肽链Fc1h-L-GtH IIβ
将锁式Fc1h、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1h-L-GtH IIβ(SEQ IDNO.124)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.104肽链Fc1k-L-GtH IIβ
将扣式Fc1k、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1k-L-GtH IIβ(SEQ IDNO.125)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.105肽链Fc1(T-)-L-GtH IIβ
将T型Fc1(T-)、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1(T-)-L-GtH IIβ(SEQ ID NO.126)。
EPKSSEKTHTCPECPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.106肽链Fc1(T+)-L-GtH IIβ
将T型Fc1(T+)、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1(T+)-L-GtH IIβ(SEQ ID NO.127)。
EPKSSRKTHTCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.107肽链Fc1(D-)-L-GtH IIβ
将D型Fc1(D-)、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1(D-)-L-GtH IIβ(SEQ ID NO.128)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTDPPSREEMTKNQVSLTCEVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.108肽链Fc1(D+)-L-GtH IIβ
将D型Fc1(D+)、接头(L)和GtH IIβ依次连接,人工合成肽链Fc1(D+)-L-GtH IIβ(SEQ ID NO.129)。
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLKCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSYLPPCEPVNETVAVEKEGCPKCLVLQTTICSGHCLTKEPVYKSPFSTVYQHVCTYRDVRYETVRLPDCPPGVDPHITYPVALSCDCSLCTMDTSDCTIESLQPDFC1MSQREDFL
1.3.109肽链Fc1k(KiH)-L-pFSHα
将扣式Fc1k(KiH)、接头(L)和pFSHα依次连接,人工合成肽链Fc1k(KiH)-L-pFSHα(SEQ ID NO.132)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKS
1.3.110肽链Fc1h(KiH)-L-pFSHβ
将锁式Fc1h(KiH)、接头(L)和pFSHβ依次连接,人工合成肽链Fc1h(KiH)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.133)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSCELTNITITVEKEECNFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE
1.3.111肽链Fc1h(KiH)-L-hFSHα
将锁式Fc1h(KiH)、接头(L)和hFSHα依次连接,人工合成肽链Fc1h(KiH)-L-hFSHα(SEQ ID NO.134)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKS
1.3.112肽链Fc1k(KiH)-L-hFSHβ
将扣式Fc1k(KiH)、接头(L)和hFSHβ依次连接,人工合成肽链Fc1k(KiH)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.135)。
EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSNSCELTNITIAIEKEECRFC1ISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE
1.4表达载体的构建
由UniProt数据库登记号为P01219、P01228、P01215、P01225、P01857和P01861的蛋白,从数据库获得其编码核酸序列。根据实施例1中上述肽链的氨基酸序列,分别人工合成上述肽链相应的编码核苷酸序列,然后通过同源重组的方式,插入表达载体pcDNA3.1中,获得相应的Fc-FSH异二聚体表达载体,并进行DNA测序验证插入序列的正确性。
同时参考相关专利或专利申请,合成了CMPR1(hFSH-IgG1-hFC,CN110041435A),CMPR2(hFSH-IgG2-hFC,CN103539862B),CMPR3(pFSH-IgG1-hFC,CN103554269B),CMPR4(pFSH-IgG2-hFC,CN103554269B),CMPR5(pFSH-pFC,CN103554269B)的核苷酸序列,并插入表达载体pcDNA3.1中,DNA测序验证插入序列的正确性。
实施例2:重组Fc融合蛋白的表达纯化
图2示出了本公开重组Fc融合蛋白的结构。
将实施例1构建成功的含有相应肽链的编码核苷酸的表达载体按照表1所示,两两配对一起分别通过电转的方式,转染进入CHO细胞中,进行摇瓶培养,表达蛋白,其所表达的蛋白构成的异二聚体也在表1中示出。
表1:表达异二聚体蛋白的成对表达载体和异二聚体蛋白的简称
Figure BDA0003872234880000491
Figure BDA0003872234880000501
Figure BDA0003872234880000511
其中:
pFSHα-L-Fc1k表达载体和pFSHβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.22)和肽链pFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.23),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK1。
Fc1k-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链Fc1k-L-pFSHα(SEQ ID NO.34)和肽链pFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.23),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK2。
Fc1k-L-pFSHα表达载体和Fc1h-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1k-L-pFSHα(SEQ ID NO.34)和肽链Fc1h-L-pFSHβ(SEQ ID NO.40),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK3。
pFSHα-L-Fc1h表达载体和pFSHβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.24)和肽链pFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.25),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK4。
Fc1h-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链Fc1h-L-pFSHα(SEQ ID NO.35)和肽链pFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.25),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK5。
Fc1h-L-pFSHα表达载体和Fc1k-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1h-L-pFSHα(SEQ ID NO.35)和肽链Fc1k-L-pFSHβ(SEQ ID NO.41),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pK6。
pFSHα-L-Fc1(T+)表达载体和pFSHβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.26)和肽链pFSHβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.27),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT1。
Fc1(T+)-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-pFSHα(SEQ ID NO.36)和肽链pFSHβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.27),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT2。
Fc1(T+)-L-pFSHα表达载体和Fc1(T-)-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-pFSHα(SEQ ID NO.36)和肽链Fc1(T-)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.42),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT3。
pFSHα-L-Fc1(T-)表达载体和pFSHβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.28)和肽链pFSHβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.29),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT4。
Fc1(T-)-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-pFSHα(SEQ ID NO.37)和肽链pFSHβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.29),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT5。
Fc1(T-)-L-pFSHα表达载体和Fc1(T+)-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-pFSHα(SEQ ID NO.37)和肽链Fc1(T+)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.43),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pT6。
pFSHα-L-Fc1(D+)表达载体和pFSHβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.30)和肽链pFSHβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.31),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD1。
Fc1(D+)-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-pFSHα(SEQ ID NO.38)和肽链pFSHβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.31),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD2。
Fc1(D+)-L-pFSHα表达载体和Fc1(D-)-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-pFSHα(SEQ ID NO.38)和肽链Fc1(D-)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.44),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD3。
pFSHα-L-Fc1(D-)表达载体和pFSHβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链pFSHα-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.32)和肽链pFSHβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.33),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD4。
Fc1(D-)-L-pFSHα表达载体和pFSHβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-pFSHα(SEQ ID NO.39)和肽链pFSHβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.33),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD5。
Fc1(D-)-L-pFSHα表达载体和Fc1(D+)-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-pFSHα(SEQ ID NO.39)和肽链Fc1(D+)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.45),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白pD6。
hFSHα-L-Fc1k表达载体和hFSHβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.46)和肽链hFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.47),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK1。
Fc1k-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链Fc1k-L-hFSHα(SEQ ID NO.58)和肽链hFSHβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.47),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK2。
Fc1k-L-hFSHα表达载体和Fc1h-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1k-L-hFSHα(SEQ ID NO.58)和肽链Fc1h-L-hFSHβ(SEQ ID NO.64),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK3。
hFSHα-L-Fc1h表达载体和hFSHβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.48)和肽链hFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.49),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK4。
Fc1h-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链Fc1h-L-hFSHα(SEQ ID NO.59)和肽链hFSHβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.49),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK5。
Fc1h-L-hFSHα表达载体和Fc1k-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1h-L-hFSHα(SEQ ID NO.59)和肽链Fc1k-L-hFSHβ(SEQ ID NO.65),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK6。
hFSHα-L-Fc1(T+)表达载体和hFSHβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.50)和肽链hFSHβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.51),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT1。
Fc1(T+)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.60)和肽链hFSHβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.51),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT2。
Fc1(T+)-L-hFSHα表达载体和Fc1(T-)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.60)和肽链Fc1(T-)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.66),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT3。
hFSHα-L-Fc1(T-)表达载体和hFSHβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.52)和肽链hFSHβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.53),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT4。
Fc1(T-)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.61)和肽链hFSHβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.53),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT5。
Fc1(T-)-L-hFSHα表达载体和Fc1(T+)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.61)和肽链Fc1(T+)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.67),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT6。
hFSHα-L-Fc1(D+)表达载体和hFSHβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.54)和肽链hFSHβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.55),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD1。
Fc1(D+)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.62)和肽链hFSHβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.55),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD2。
Fc1(D+)-L-hFSHα表达载体和Fc1(D-)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.62)和肽链Fc1(D-)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.68),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD3。
hFSHα-L-Fc1(D-)表达载体和hFSHβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.56)和肽链hFSHβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.57),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD4。
Fc1(D-)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.63)和肽链hFSHβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.57),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD5。
Fc1(D-)-L-hFSHα表达载体和Fc1(D+)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.63)和肽链Fc1(D+)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.69),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD6。
hFSHα-L-Fc4k表达载体和hFSHβ-L-Fc4h表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4k(SEQ ID NO.70)和肽链hFSHβ-L-Fc4h(SEQ ID NO.71),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK1-4。
Fc4k-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4h表达载体分别表达肽链Fc4k-L-hFSHα(SEQ ID NO.82)和肽链hFSHβ-L-Fc4h(SEQ ID NO.71),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK2-4。
Fc4k-L-hFSHα表达载体和Fc4h-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4k-L-hFSHα(SEQ ID NO.82)和肽链Fc4h-L-hFSHβ(SEQ ID NO.88),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK3-4。
hFSHα-L-Fc4h表达载体和hFSHβ-L-Fc4k表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4h(SEQ ID NO.72)和肽链hFSHβ-L-Fc4k(SEQ ID NO.73),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK4-4。
Fc4h-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4k表达载体分别表达肽链Fc4h-L-hFSHα(SEQ ID NO.83)和肽链hFSHβ-L-Fc4k(SEQ ID NO.73),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK5-4。
Fc4h-L-hFSHα表达载体和Fc4k-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4h-L-hFSHα(SEQ ID NO.83)和肽链Fc4k-L-hFSHβ(SEQ ID NO.89),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hK6-4。
hFSHα-L-Fc4(T+)表达载体和hFSHβ-L-Fc4(T-)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4(T+)(SEQ ID NO.74)和肽链hFSHβ-L-Fc4(T-)(SEQ ID NO.75),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT1-4。
Fc4(T+)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4(T-)表达载体分别表达肽链Fc4(T+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.84)和肽链hFSHβ-L-Fc4(T-)(SEQ ID NO.75),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT2-4。
Fc4(T+)-L-hFSHα表达载体和Fc4(T-)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4(T+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.84)和肽链Fc4(T-)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.90),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT3-4。
hFSHα-L-Fc4(T-)表达载体和hFSHβ-L-Fc4(T+)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4(T-)(SEQ ID NO.76)和肽链hFSHβ-L-Fc4(T+)(SEQ ID NO.77),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT4-4。
Fc4(T-)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4(T+)表达载体分别表达肽链Fc4(T-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.85)和肽链hFSHβ-L-Fc4(T+)(SEQ ID NO.77),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT5-4。
Fc4(T-)-L-hFSHα表达载体和Fc4(T+)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4(T-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.85)和肽链Fc4(T+)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.91),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hT6-4。
hFSHα-L-Fc4(D+)表达载体和hFSHβ-L-Fc4(D-)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4(D+)(SEQ ID NO.78)和肽链hFSHβ-L-Fc4(D-)(SEQ ID NO.79),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD1-4。
Fc4(D+)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4(D-)表达载体分别表达肽链Fc4(D+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.86)和肽链hFSHβ-L-Fc4(D-)(SEQ ID NO.79),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD2-4。
Fc4(D+)-L-hFSHα表达载体和Fc4(D-)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4(D+)-L-hFSHα(SEQ ID NO.86)和肽链Fc4(D-)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.92),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD3-4。
hFSHα-L-Fc4(D-)表达载体和hFSHβ-L-Fc4(D+)表达载体分别表达肽链hFSHα-L-Fc4(D-)(SEQ ID NO.80)和肽链hFSHβ-L-Fc4(D+)(SEQ ID NO.81),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD4-4。
Fc4(D-)-L-hFSHα表达载体和hFSHβ-L-Fc4(D+)表达载体分别表达肽链Fc4(D-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.87)和肽链hFSHβ-L-Fc4(D+)(SEQ ID NO.81),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD5-4。
Fc4(D-)-L-hFSHα表达载体和Fc4(D+)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc4(D-)-L-hFSHα(SEQ ID NO.87)和肽链Fc4(D+)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.93),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白hD6-4。
GTHα-L-Fc1k表达载体和GTH Iβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1k(SEQID NO.94)和肽链GTH Iβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.95),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K1。
Fc1k-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链Fc1k-L-GTHα(SEQID NO.106)和肽链GTH Iβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.95),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K2。
Fc1k-L-GTHα表达载体和Fc1h-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1k-L-GTHα(SEQID NO.106)和肽链Fc1h-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.112),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K3。
GTHα-L-Fc1h表达载体和GTH Iβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1h(SEQID NO.96)和肽链GTH Iβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.97),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K4。
Fc1h-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链Fc1h-L-GTHα(SEQID NO.107)和肽链GTH Iβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.97),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K5。
Fc1h-L-GTHα表达载体和Fc1k-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1h-L-GTHα(SEQID NO.83)和肽链Fc1k-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.89),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-K6。
GTHα-L-Fc1(T+)表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.98)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.99),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T1。
Fc1(T+)-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-GTHα(SEQ ID NO.108)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.99),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T2。
Fc1(T+)-L-GTHα表达载体和Fc1(T-)-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-GTHα(SEQ ID NO.108)和肽链Fc1(T-)-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.114),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T3。
GTHα-L-Fc1(T-)表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.100)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.101),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T4。
Fc1(T-)-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-GTHα(SEQ ID NO.109)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.101),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T5。
Fc1(T-)-L-GTHα表达载体和Fc1(T+)-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-GTHα(SEQ ID NO.109)和肽链Fc1(T+)-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.115),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-T6。
GTHα-L-Fc1(D+)表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.102)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.103),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D1。
Fc1(D+)-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-GTHα(SEQ ID NO.100)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.103),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D2。
Fc1(D+)-L-GTHα表达载体和Fc1(D-)-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-GTHα(SEQ ID NO.100)和肽链Fc1(D-)-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.116),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D3。
GTHα-L-Fc1(D-)表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.104)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.105),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D4。
Fc1(D-)-L-GTHα表达载体和GTH Iβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-GTHα(SEQ ID NO.101)和肽链GTH Iβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.105),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D5。
Fc1(D-)-L-GTHα表达载体和Fc1(D+)-L-GTH Iβ表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-GTHα(SEQ ID NO.111)和肽链Fc1(D+)-L-GTH Iβ(SEQ ID NO.117),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH I融合蛋白GtH I-D6。
GTHα-L-Fc1k表达载体和GTH IIβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1k(SEQ ID NO.94)和肽链GTH IIβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.118),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K1。
Fc1k-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1h表达载体分别表达肽链Fc1k-L-GTHα(SEQ ID NO.106)和肽链GTH IIβ-L-Fc1h(SEQ ID NO.118),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K2。
Fc1k-L-GTHα表达载体和Fc1h-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1k-L-GTHα(SEQ ID NO.106)和肽链Fc1h-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.124),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K3。
GTHα-L-Fc1h表达载体和GTH IIβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1h(SEQ ID NO.96)和肽链GTH IIβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.119),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K4。
Fc1h-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1k表达载体分别表达肽链Fc1h-L-GTHα(SEQ ID NO.107)和肽链GTH IIβ-L-Fc1k(SEQ ID NO.119),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K5。
Fc1h-L-GTHα表达载体和Fc1k-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1h-L-GTHα(SEQ ID NO.107)和肽链Fc1k-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.125),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-K6。
GTHα-L-Fc1(T+)表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.98)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.120),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T1。
Fc1(T+)-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(T-)表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-GTHα(SEQ ID NO.108)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.120),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T2。
Fc1(T+)-L-GTHα表达载体和Fc1(T-)-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1(T+)-L-GTHα(SEQ ID NO.108)和肽链Fc1(T-)-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.126),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T3。
GTHα-L-Fc1(T-)表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(T-)(SEQ ID NO.100)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.121),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T4。
Fc1(T-)-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(T+)表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-GTHα(SEQ ID NO.109)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(T+)(SEQ ID NO.121),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T5。
Fc1(T-)-L-GTHα表达载体和Fc1(T+)-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1(T-)-L-GTHα(SEQ ID NO.109)和肽链Fc1(T+)-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.127),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-T6。
GTHα-L-Fc1(D+)表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.102)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.122),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D1。
Fc1(D+)-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(D-)表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-GTHα(SEQ ID NO.100)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.122),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D2。
Fc1(D+)-L-GTHα表达载体和Fc1(D-)-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1(D+)-L-GTHα(SEQ ID NO.100)和肽链Fc1(D-)-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.128),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D3。
GTHα-L-Fc1(D-)表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链GTHα-L-Fc1(D-)(SEQ ID NO.104)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.123,两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D4。
Fc1(D-)-L-GTHα表达载体和GTH IIβ-L-Fc1(D+)表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-GTHα(SEQ ID NO.101)和肽链GTH IIβ-L-Fc1(D+)(SEQ ID NO.123),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D5。
Fc1(D-)-L-GTHα表达载体和Fc1(D+)-L-GTH IIβ表达载体分别表达肽链Fc1(D-)-L-GTHα(SEQ ID NO.111)和肽链Fc1(D+)-L-GTH IIβ(SEQ ID NO.129),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的GTH II融合蛋白GtH II-D6。
Fc1k(KiH)-L-pFSHα表达载体和Fc1h(KiH)-L-pFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1k(KiH)-L-pFSHα(SEQ ID NO.132)和肽链Fc1h(KiH)-L-pFSHβ(SEQ ID NO.133),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的pFSH融合蛋白Fc1(KiH)-L-pFSH。
Fc1h(KiH)-L-hFSHα表达载体和Fc1k(KiH)-L-hFSHβ表达载体分别表达肽链Fc1h(KiH)-L-hFSHα(SEQ ID NO.134)和肽链Fc1k(KiH)-L-hFSHβ(SEQ ID NO.135),两者可以形成正确组装的稳定的异二聚体形式的hFSH融合蛋白Fc1(KiH)-L-hFSH。
作为对照的CMPR1、CMPR2、CMPR3、CMPR4、CMPR5也分别电转入CHO细胞,摇瓶培养,表达相应蛋白。
对于收获的发酵液采用离心的方式去除细胞及细胞碎片,获得澄清发酵液。将上清液直接加样至经磷酸盐缓冲液(PBS)平衡的ProteinA柱,用10倍柱体积的PBS洗涤柱子,再用100mM pH为3.5的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱目的蛋白。随后将洗脱液调至pH 3.5-4.0,孵育1小时,然后用pH9.0的1MTris-HCl缓冲液中和目的蛋白收集液。将中和的目的蛋白收集液加样至经20mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)平衡过的CaptoMMC层析柱,先用相同的20mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)作为平衡液淋洗,然后用20mM PBS-0.5M NaCl(pH6.0)缓冲液梯度洗脱,收集得到纯化蛋白。SDS-PAGE结果如图3所示。
由图3A-3I可见,本公开发明人所设计的蛋白分子量相近,单链分子量50kDa左右,而实施例1中给出的相关专利或专利申请中的蛋白单链比本公开发明人所设计的蛋白分子量大20kDa左右。
实施例3:重组Fc融合蛋白的体内活性检测
3.1重组Fc与FSH融合蛋白的体内活性检测
因为改造的FSH属于长效蛋白,参考《中国兽药质量标准》中的血促性素PMSG(具有长效FSH活性)生物检定法,采用大鼠卵巢增重法,以参考PMSG标准品标定的自制长效FSH为标准品,测定所表达FSH融合蛋白的生物学活性。34个样品按照活性预试验得到的不同估价,和自制长效FSH标准品一起,分别配制成80、40、20iu/mL高中低三个梯度的浓度。取21-23日龄,体重40-55g,同一来源的雌性大鼠,按体重分成105组,每组8只,对大鼠注射各种浓度的皮下注射标准品或供试品溶液0.5mL。于注射后第6日将动物处死,称体重,解剖,取出卵巢,剥离附着的组织及输卵管,吸去表面液体,直接称重,并换算成每100g体重的卵巢重。使用《中国药典生物检定统计程序BS2000》软件计算,各样品的比活如图4和表3所示。
表2:重组Fc与FSH融合蛋白的体内活性
Figure BDA0003872234880000551
Figure BDA0003872234880000561
由图4A、4B和表3可见,本公开发明人所设计的蛋白活性远远高于示例专利中的蛋白活性。图4A中的Fc-L-pFSH(KiH+Mut)对应于表3中的pK3蛋白,Fc-L-hFSH(KiH+Mut)对应于表3中的hK3蛋白,Fc4-L-hFSH(KiH+Mut)对应于表3中的hK3-4蛋白。
3.2重组Fc与GtH I融合蛋白的体内活性
以hCG做为标准品,测定所表达的GtH I-K1、GtH I-K2、GtH I-K3、GtH I-D1、GtHI-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3蛋白在斑马鱼中的生物学活性。挑选月龄7-8个月的,形态上体质健壮、体形端正、无伤无病、发育较好,体重为350-500mg的斑马鱼,分成30组,每组10只。GtH I-K1、GtH I-K2、GtH I-K3、GtH I-D1、GtH I-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3样品按照活性预试验得到的不同估价,和hCG标准品一起,分别配制成高中低三个梯度的浓度,按照15,7.5和3.75IU/kg体重注射剂量进行注射。水温控制在25℃左右,注射3天后将动物处死,称取斑马鱼的体重,并进行解剖,取出卵巢,剥离附着的组织及输卵管,吸去表面液体,直接称重,并换算成卵巢体重比,使用《中国药典生物检定统计程序BS2000》软件计算,各样品的比活如图4C和表4所示。
表3:重组GtH I融合蛋白的体内活性
Figure BDA0003872234880000562
由图3和表4可见,在K、T、D三个系列中,GtH I-K3、GtH I-T3、GtH I-D3的生物活性最好。
3.3重组Fc与GtH II融合蛋白的体内活性
以人绒毛膜促性腺激素hCG作为标准品,测定所表达的GtH II-K1、GtH II-K2、GtHII-K3、GtH II-D1、GtH II-D2、GtH II-D3、GtH II-T1、GtH II-T2、GtH II-T3蛋白在斑马鱼中的生物学活性。取体重80-120g,体长15-20cm,体质健壮、体形端正、体色正常、无伤无病、发育较好、腹部卵巢轮廓明显的雌性泥鳅,将上述雌鳅分为30组,每组10只。将9种不同组成的样品和标准品按照高中低三个梯度的剂量,分别注射三组雌鳅。样品和hCG标准品按照15、7.5和3.75IU/kg体重的剂量分别对每组雌鳅进行背部肌肉注射。水温控制在23℃左右,注射10小时后,将雌鳅卵挤出计数,换算成每100g体重的卵数,使用《中国药典生物检定统计程序BS2000》软件计算,各样品的比活如图4D和表5所示:
表4:重组LH融合蛋白在泥鳅体内的活性
Figure BDA0003872234880000563
Figure BDA0003872234880000571
实施例4:重组Fc融合蛋白药代动力学研究
4.1重组Fc与FSH融合蛋白药代动力学研究
按照400iu/kg体重,单次给与200g左右的雄性大鼠皮下注射hK1、hK2、hK3、hD1、hD2、hD3、hT1、hT2、hT3、pK1、pK2、pK3、pD1、pD2、pD3、pT1、pT2、pT3、hK1-4、hK2-4、hK3-4、hD1-4、hD2-4、hD3-4、hT1-4、hT2-4和hT3-4融合蛋白,分别于1h、2h、4h、8h、12h、24h、2d、3d、4d、5d、7d、9d、11d和14d,眼眶采血0.5mL,静置离心后取血清于-80℃冻存待分析。采用FSHELISA试剂盒,同时测定各采血点的FSH浓度,每个样品测定三次,使用WinNonlin软件计算,hK1、hK2、hK3、hD1、hD2、hD3、hT1、hT2、hT3、pK1、pK2、pK3、pD1、pD2、pD3、pT1、pT2、pT3、hK1-4、hK2-4、hK3-4、hD1-4、hD2-4、hD3-4、hT1-4、hT2-4和hT3-4蛋白的半衰期分别为41-165h不等,和活性相对应。具体数据见表5。
表5:重组Fc与FSH融合蛋白在大鼠体内的半衰期
Figure BDA0003872234880000572
Figure BDA0003872234880000581
4.2重组Fc与GtH I融合蛋白药代动力学研究
按照10μg/kg体重,单次给与500g左右的鲫鱼皮下注射GtH I-K1、GtH I-K2、GtHI-K3、GtH I-D1、GtH I-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3九种融合蛋白,分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、120h、168h,尾静脉采血0.5mL,静置离心后取血清于-80℃冻存待分析。采用GtH I ELISA试剂盒,同时测定各采血点的GtH I浓度,每个样品测定三次,使用WinNonlin软件计算,GtH I-K1、GtH I-K2、GtH I-K3、GtH I-D1、GtHI-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3的消除半衰期为42-72h之间,具体数据见表7。
表6:重组GtH I融合蛋白在鲫鱼体内的半衰期
简称 组成 半衰期/h
GtH I-K1 GtHα-L-Fck、GtH Iβ-L-Fch 72
GtH I-K2 Fck-L-GtHα、GtH Iβ-L-Fch 48
GtH I-K3 Fck-L-GtHα、Fch-L-GtH Iβ 68
GtH I-D1 GtHα-L-Fc(D+)、GtH Iβ-L-Fc(D-) 70
GtH I-D2 Fc(D+)-L-GtHα、GtH Iβ-L-Fc(D-) 47.5
GtH I-D3 Fc(D+)-L-GtHα、Fc(D-)-L-GtH Iβ 65
GtH I-T1 GtHα-L-Fc(T+)、GtH Iβ-L-Fc(T-) 69
GtH I-T2 Fc(T+)-L-GtHα、GtH Iβ-L-Fc(T-) 42
GtH I-T3 Fc(T+)-L-GtHα、Fc(T-)-L-GtH Iβ 60
4.3重组Fc与GtH II融合蛋白药代动力学研究
按照10μg/kg体重,单次给与500g左右的鲫鱼皮下注射K1、K2、K3、D1、D2、D3、T1、T2、T3九种融合蛋白,分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、120h、168h,通过尾静脉采血0.5mL,静置离心后取血清于-80℃冻存待分析。采用ELISA试剂盒,同时测定各采血点的GtH II浓度,每个样品测定三次,使用WinNonlin软件计算,K1、K2、K3、D1、D2、D3、T1、T2、T3融合蛋白的半衰期分别为40-68h不等,具体数据见表8。
表7:重组GtH II融合蛋白在泥鳅体内的活性
简称 组成 半衰期/h
GtH II-K1 GtHα-L-Fck、GtH IIβ-L-Fch 68
GtH II-K2 Fck-L-GtHα、GtH IIβ-L-Fch 43
GtH II-K3 Fck-L-GtHα、Fch-L-GtH IIβ 57
GtH II-D1 GtHα-L-Fc(D+)、GtH IIβ-L-Fc(D-) 65
GtH II-D2 Fc(D+)-L-GtHα、GtH IIβ-L-Fc(D-) 41
GtH II-D3 Fc(D+)-L-GtHα、Fc(D-)-L-GtH IIβ 55
GtH II-T1 GtHα-L-Fc(T+)、GtH IIβ-L-Fc(T-) 61
GtH II-T2 Fc(T+)-L-GtHα、GtH IIβ-L-Fc(T-) 40
GtH II-T3 Fc(T+)-L-GtHα、Fc(T-)-L-GtH IIβ 54
实施例5:重组Fc与FSH融合蛋白促进小鼠超数排卵
选择5周左右,体重相近的ICR雌性小鼠40只,分成5组,每只小鼠分别注射10iuPMSG,或者10iu重组Fc-FSH融合蛋白+0.4iu hCG,两天后继续注射10iu hCG,间隔16h后,颈椎脱臼法处死实验小鼠,切开腹膜,剪开输卵管系膜,剪断卵巢和输卵管之间的联系结构,再剪断子宫与输卵管联结处,即得到输卵管部分。将输卵管转移到盛有PBS的表面皿中,除去输卵管上的脂肪,并冲洗干净。将表面皿置于体视显微镜载物台上,在20或40倍镜下找到输卵管膨大部(壶腹部),用一支眼科异物针固定输卵管,用另一支异物针撕开壶腹部。将自动移出的卵母细胞团移到含透明质酸酶的液体中,待卵母细胞分散成单个细胞后,用较细的吸管检出卵母细胞到检卵杯中,用PBS洗3次,计算卵母细胞数结果如表9所示。各试验组与对照组相比,排卵数更多,除hK1、hD1、hT1、pK1、pD1、pT1外,其余均有显著性差异(P<0.05);hK3与pK3、hK3-4相比,差异不显著(P>0.05);0811-3与0811-4相比,差异不显著(P>0.05);pK3与0811-3相比,差异极其显著(P<0.01)。各组卵母细胞典型图片如图5-1至5-25所示。
表8:重组Fc与FSH融合蛋白促进小鼠超数排卵
Figure BDA0003872234880000582
Figure BDA0003872234880000591
实施例6:重组Fc-pFSH融合蛋白促进母猪同期发情与排卵
选择在初情期,年龄相近,并且体重125kg以上的后备三元母猪20只,随机分成两组,连续饲喂烯丙孕素5mL(20mg)18天以后,转移至定位栏。烯丙孕素停喂42h以后,分别肌肉注射Fc-L-pFSH(pK3)1000iu+100iu hCG,或者PMSG 1000iu。注射PMSG及重组Fc-FSH融合蛋白后,每天上下午各喷公猪诱情喷雾一次,持续到第5天,并进行发情检测,记录发情状况,如阴户红肿、有无粘液,爬跨和静立行为等。注射PMSG及重组Fc-FSH融合蛋白后80h注射GnRH,注射GnRH后第3天屠宰,拍照并记录卵巢状态,计算排卵数。结果如表10所示,PMSG组和重组Fc-FSH融合蛋白组发情率均为90%,排卵数平均为13个和15.3个,无显著性差异(P>0.05)。
表9:重组Fc-FSH融合蛋白促进母猪同期发情与排卵
同情发情药物 发情率 排卵数
PMSG 90% 13.0±3.6
重组猪Fc-FSH融合蛋白 90% 15.3±2.5
实施例7:重组Fc-pFSH融合蛋白母猪配种与产仔
选择在初情期,年龄相近,并且体重125kg以上的后备三元母猪20只,随机分成两组,连续饲喂烯丙孕素5mL(20mg)18天以后,转移至定位栏。烯丙孕素停喂42h以后,分别肌肉注射Fc-L-pFSH(pK3)1000iu+100iuhCG,或者PMSG 1000iu。注射PMSG及重组猪Fc-FSH融合蛋白后,每天上下午各喷公猪诱情喷雾一次,持续到第5天。注射PMSG及重组猪Fc-FSH融合蛋白后80h注射GnRH,注射GnRH后24h进行第一次定时输精,GnRH注射后40h进行第二次定时输精,1个月后使用B超仪检查母猪受孕情况,两组均为90%。小猪出生后,统计产仔数,PMSG组每胎产仔11.7±0.6头,重组猪Fc-FSH融合蛋白组每胎产仔12.7±0.6头,两组无显著性差异(P>0.05)。
实施例8:重组Fc与GtH I融合蛋白对鱼类的催产效果
8.1鞍带石斑鱼催产实验
选择来自于海南晨海水产有限公司网箱养殖基地,经强化培育后的鞍带石斑鱼亲鱼。选择2年龄,体重2.0~3.0kg,健康无伤、腹部柔软软膨大、性腺轮廓明显的雌鱼;选择3年龄,体重3.5kg以上,健康无伤、挤压腹部有精液流出的雄鱼。
随机选取雌鱼和雄鱼各1500尾,雌雄亲鱼按1∶1的比例搭配,随机分成10组。对照组雌鱼用800iuHCG+10μgLRH-A2/kg体重;试验组雌鱼用GtH I-K1、GtH I-K2、GtH I-K3、GtHI-D1、GtH I-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3 7IU/kg体重,各组雄亲鱼剂量均减半进行注射催产。与对照组比,催产率和孵化率均优于对照组,产苗数均有不同程度的增加。具体数据见表11。
表10:鞍带石斑鱼催产试验
Figure BDA0003872234880000601
8.2大黄鱼催产实验
选择来自于福建宁德市官井洋大黄鱼养殖有限公司网箱养殖基地,经强化培育后的亲鱼。选择2年龄,体重0.5-0.8kg,健康无伤、腹部柔软软膨大、性腺轮廓明显的雌鱼;选择2年龄,体重0.8kg以上,健康无伤、较压腹部有精液流出的雄鱼。
随机选取雌鱼200和雄鱼各400尾,雌雄亲鱼按1∶2的比例搭配,随机分成10组。对照组雌鱼用5.0μgLRH-A3/kg体重;试验组雌鱼用GtH I-K1、GtH I-K2、GtH I-K3、GtH I-D1、GtH I-D2、GtH I-D3、GtH I-T1、GtH I-T2、GtH I-T3 7IU/kg体重,各组雄亲鱼剂量均减半进行注射催产。与对照组比,催产率和孵化率均优于对照组,产苗数均有不同程度的增加。具体数据见表12。
表11:大黄鱼催产试验结果
Figure BDA0003872234880000602
实施例9:重组Fc与GtH II融合蛋白对鱼类的催产效果
9.1鞍带石斑鱼催产实验
鞍带石斑鱼亲鱼来自于海南晨海水产有限公司网箱养殖基地,选择经强化培育后的亲鱼。选择2年龄,体重2.0~3.0kg,健康无伤、腹部柔软膨大、性腺轮廓明显的雌鱼;和3年龄,体重3.5kg以上,健康无伤、较压腹部有精液流出的雄鱼。
在上述亲鱼中随机选取雌鱼和雄鱼各150尾,雌雄亲鱼按1∶1的比例搭配,随机分成10组。对照组雌鱼注射2个鲤鱼脑垂体/kg体重(参考中国淡水鱼类养殖学(第二版)P125页);试验I-IX组雌鱼按照7.0IU/kg体重的剂量注射重组GtH II融合蛋白GtH II-K1、GtHII-K2、GtH II-K3、GtH II-D1、GtH II-D2、GtH II-D3、GtH II-T1、GtH II-T2、GtH II-T3;各组雄亲鱼剂量均减半。与对照组比,催产率和孵化率均优于对照组,产苗数均有不同程度的增加。
表12:鞍带石斑鱼催产试验结果
Figure BDA0003872234880000603
Figure BDA0003872234880000611
9.2大黄鱼催产实验
大黄鱼亲鱼来自于福建宁德市官井洋大黄鱼养殖有限公司网箱养殖基地,选择经强化培育后的亲鱼。选择2年龄,体重0.5-0.8kg,健康无伤、腹部柔软膨大、性腺轮廓明显的雌鱼;和2年龄,体重0.8kg以上,健康无伤、较压腹部有精液流出的雄鱼。
在上述亲鱼中随机选取雌鱼200和雄鱼400尾,雌雄亲鱼按1∶2的比例搭配,随机分成10组。对照组雌鱼注射2个鲤鱼脑垂体/kg体重(参考中国淡水鱼类养殖学(第二版)P125页);试验I-IX组雌鱼按照7.0IU/kg体重的剂量注射重组GtH II融合蛋白GtH II-K1、GtHII-K2、GtH II-K3、GtH II-D1、GtH II-D2、GtH II-D3、GtH II-T1、GtH II-T2、GtH II-T3;各组雄亲鱼剂量均减半。与对照组比,产苗数均有不同程度的增加。
表13:大黄鱼催产试验结果
Figure BDA0003872234880000612

Claims (10)

1.一种重组Fc融合蛋白,所述Fc融合蛋白包含两条不同的肽链,其中一条为促性腺激素α亚基(Gnα亚基)根据一定的连接模式直接或者通过接头间接连接在Fc链上形成的肽链,另一条为促性腺激素β亚基(Gnβ亚基)根据一定的连接模式直接或者通过接头间接连接在Fc链上形成的肽链,所述肽链在促Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的异二聚体。
2.根据权利要求1所述的重组Fc融合蛋白,其中所述连接模式包含选自下列Fc链与Gnα亚基或Gnβ亚基之间的连接:
(1)所述Gnα亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnα-Fc;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Gnα-Fc和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(2)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连形成肽链Gnβ-Fc;所述肽链Fc-Gnα和Gnβ-Fc在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体;
(3)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnα;和所述Gnβ亚基的N端与Fc链的C端相连形成肽链Fc-Gnβ;所述肽链Fc-Gnα和Fc-Gnβ在Gnα亚基与Gnβ亚基之间的非共价结合、以及锁式和扣式Fc链上的锁扣结构或者正电荷和负电荷Fc链上的静电转向的双重作用下,折叠成稳定的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体。
3.根据权利要求1或2所述的重组Fc融合蛋白,其中所述锁扣结构或静电转向模式,其特征分别如下:
(1)所述锁扣结构包含两条不同的Fc链,其中一条为扣式Fc链(Fck),另一条为锁式Fc链(Fch);
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnα-Fck;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fch;所述肽链Gnα-Fck和Gnβ-Fch在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Gnα-Fck:Gnβ-Fch形式的异二聚体;
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnα-Fch;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fck;所述肽链Gnα-Fch和Gnβ-Fck在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Gnα-Fch:Gnβ-Fck形式的异二聚体;
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与锁式Fc链(Fch)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fch;所述肽链Fck-Gnα和Gnβ-Fch在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fck-Gnα:Gnβ-Fch形式的异二聚体;
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与扣式Fc链(Fck)的N端相连形成的肽链Gnβ-Fck;所述肽链Fch-Gnα和Gnβ-Fck在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fch-Gnα:Gnβ-Fck形式的异二聚体;
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnβ;所述肽链Fck-Gnα和Fch-Gnβ在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fck-Gnα:Fch-Gnβ形式的异二聚体;
优选地,所述在锁扣结构下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与锁式Fc链(Fch)的C端相连形成的肽链Fch-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与扣式Fc链(Fck)的C端相连形成的肽链Fck-Gnβ;所述肽链Fch-Gnα和Fck-Gnβ在锁扣结构的作用下,折叠成稳定的Fch-Gnα:Fck-Gnβ形式的异二聚体;
(2)所述静电转向模式包含两条不同的Fc链,其中一条为正电荷链(Fc(+)),另一条为负电荷链(Fc(-));
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnα-Fc(+);另一条肽链为Gnβ亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(-);所述肽链Gnα-Fc(+)和Gnβ-Fc(-)在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(+):Gnβ-Fc(-)形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(T+):Gnβ-Fc(T-)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(D+):Gnβ-Fc(D-)形式的异二聚体;
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Gnα-Fc:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnα-Fc(-);另一条肽链为Gnβ亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(+);所述肽链Gnα-Fc(-)和Gnβ-Fc(+)在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(-):Gnβ-Fc(+)形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(T-):Gnβ-Fc(T+)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Gnα-Fc(D-):Gnβ-Fc(D+)形式的异二聚体;
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα-Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与负电荷链(Fc(-))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(-);所述肽链Fc(+)-Gnα和Gnβ-Fc(-)在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(+)-Gnα:Gnβ-Fc(-)形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T+)-Gnα:Gnβ-Fc(T-)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D+)-Gnα:Gnβ-Fc(D-)形式的异二聚体;
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Gnβ-Fc形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的C端与正电荷链(Fc(+))的N端相连形成的肽链Gnβ-Fc(+);所述肽链Fc(-)-Gnα和Gnβ-Fc(+)在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(-)-Gnα:Gnβ-Fc(+)形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T-)-Gnα:Gnβ-Fc(T+)形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D-)-Gnα:Gnβ-Fc(D+)形式的异二聚体;
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnβ;所述肽链Fc(+)-Gnα和Fc(-)-Gnβ在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(+)-Gnα:Fc(-)-Gnβ形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T+)-Gnα:Fc(T-)-Gnβ形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D+)-Gnα:Fc(D-)-Gnβ形式的异二聚体;
优选地,所述在静电转向作用下折叠得到的Fc-Gnα:Fc-Gnβ形式的异二聚体,其中一条肽链为Gnα亚基的N端与负电荷链(Fc(-))的C端相连形成的肽链Fc(-)-Gnα;另一条肽链为Gnβ亚基的N端与正电荷链(Fc(+))的C端相连形成的肽链Fc(+)-Gnβ;所述肽链Fc(-)-Gnα和Fc(+)-Gnβ在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(-)-Gnα:Fc(+)-Gnβ形式的异二聚体;
更优选地,所述静电转向模式包含静电转向T型和静电转向D型:
(i)所述静电转向T型包含两条Fc链,其中一条为T型正电荷链(Fc(T+)),另一条为T型负电荷链(Fc(T-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(T-)-Gnα:Fc(T+)-Gnβ形式的异二聚体;
(ii)所述静电转向D型包含两条Fc链,其中一条为D型正电荷链(Fc(D+)),另一条为D型负电荷链(Fc(D-)),在静电转向作用下,折叠成稳定的Fc(D-)-Gnα:Fc(D+)-Gnβ形式的异二聚体。
4.根据权利要求1-3任一项所述的重组Fc融合蛋白,其中所述促性腺激素为脊椎动物促性腺激素;
优选地,所述脊椎动物选自人、猪、牛、羊、马、狗或鱼;
优选地,所述促性腺激素(Gn)选自人FSH(hFSH)、猪FSH(pFSH)、鲤鱼GtH I、鲤鱼GtHII;
更优选地,所述pFSHα亚基包含与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述pFSHα亚基具有SEQ IDNO.1所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.1上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
更优选地,所述pFSHβ亚基包含与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述pFSHβ亚基具有SEQ IDNO.2所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.2上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
更优选地,所述hFSHα亚基包含与SEQ ID NO.3所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述hFSHα亚基具有SEQ IDNO.3所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.3上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
更优选地,所述hFSHβ亚基包含与SEQ ID NO.4所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述hFSHβ亚基具有SEQ IDNO.4所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.4上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
更优选地,所述鲤鱼GtHα亚基包含与SEQ ID NO.5所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtHα亚基具有SEQ ID NO.5所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.5上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
更优选地,所述鲤鱼GtH Iβ亚基包含与SEQ ID NO.6所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtH Iβ亚基具有SEQ ID NO.6所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.6上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
优选地,所述鲤鱼GtH IIβ亚基包含与SEQ ID NO.7所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述鲤鱼GtH IIβ亚基具有SEQ ID NO.7所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.7上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
5.权利要求1-4任一项所述的重组Fc融合蛋白,其中所述Fc链包含IgG的铰链区以及CH2和CH3区;
优选地,所述IgG来自人、猪、牛、羊、马或狗;更优选地,所述IgG为人IgG;
优选地,所述Fc链为IgG1或IgG4的Fc链;更优选地,所述Fc链为人IgG1或IgG4的Fc链;
优选地,所述Fc链的铰链区以及CH2和CH3区包含与SEQ ID NO.8或10所示的野生型IgGFc区具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;
优选地,所述Fc链具有选自下述任何一个或多个根据EU编号的氨基酸突变:
C220S;
D221E;
D221R;
P228E;
S228E;
P228R;
S228R;
Y349C;
L351D;
L351K;
S354C;
D356E;
L358M;
T366K;
T366S;
T366W;
L368A;
L368E;
Y407V;
K409R;
优选地,所述Fc链具有选自根据Kabat编号的氨基酸突变:G230S;
优选地,所述Fc链还包含选自下述任何一个或多个根据EU编号的氨基酸突变:
E233缺失;
L234P或L234F;
L235V;
G236A;
H268Q;
K274Q;
N276K;
Y296F;
Y300F;
L309V;
A327G;
A330S;
P331S;
A339T;
R355Q;
N384S;
K392N;
V397M;
K409R;
Q419E;
V422I;
H435R;
Y436F;
P445L;
优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)具有S354C和T366W突变;更优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)具有S354C和T366W突变;更优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)还具有G230S突变;
优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)具有Y349C、T366S、L368A和Y407V突变;更优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述锁式Fc链(Fc4h)具有Y349C、T366S、L368A和Y407V突变;更优选地,所述锁式Fc链(Fc4h)还具有G230S突变;
优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))具有D221R、P228R和K409R突变;更优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))具有S228R和K409R突变;更优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))还具有G230S突变;
优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))具有D221E、P228E和L368E突变;更优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))具有S228E和L368E突变;更优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))还具有G230S突变;
优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))具有L351K和T366K突变;更优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))具有L351K和T366K突变;更优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))还具有G230S突变;
优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))具有L351D和L368E突变;更优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))还具有C220S、D356E和L358M突变;
优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))具有L351D和L368E突变;更优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))还具有G230S突变;
优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)包含与SEQ ID NO.9所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc1k)具有SEQ ID NO.9所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.9上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)包含与SEQ ID NO.11所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc4k)具有SEQ ID NO.11所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.11上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述扣式Fc链(Fc1k(KiH))包含与SEQ ID NO.130所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述扣式Fc链(Fc1k(KiH))具有SEQ ID NO.130所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.130上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)包含与SEQ ID NO.12所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)具有SEQ ID NO.12所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.12上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述锁式Fc链(Fc4h)包含与SEQ ID NO.13所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h)具有SEQ ID NO.13所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.13上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述锁式Fc链(Fc1h(KiH))包含与SEQ ID NO.131所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述锁式Fc链(Fc1h(KiH))具有SEQ ID NO.131所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.131上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))包含与SEQ ID NO.14所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))具有SEQ ID NO.14所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.14上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))包含与SEQ ID NO.15所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))具有SEQ ID NO.15所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.15上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))包含与SEQ ID NO.16所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))具有SEQ ID NO.16所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.16上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))包含与SEQ ID NO.17所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))具有SEQ ID NO.17所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.17上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))包含与SEQ ID NO.18所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))具有SEQ ID NO.18所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.18上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))包含与SEQ ID NO.19所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))具有SEQ ID NO.19所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.19上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))包含与SEQ ID NO.20所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))具有SEQ ID NO.20所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.20上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))包含与SEQ ID NO.21所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,更优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列;优选地,所述静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))具有SEQ ID NO.21所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.21上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
6.权利要求1-5任一项所述的重组Fc融合蛋白,其中所述Gnα亚基与Gnβ亚基通过接头间接连接在Fc链上;
优选地,所述接头是柔性多肽;优选地,所述柔性多肽由柔性氨基酸组成,优选地,所述柔性多肽由柔性2-20个氨基酸组成,所述柔性氨基酸选自Gly、Ser、Ala和Thr中的至少一种;
优选地,所述柔性多肽为(G4S)n,(SG4)n或G4(SG4)n,其中,n是1和10之间的整数,优选地,n是1和4之间的整数,特别是3或4;
优选地,所述接头选自GGGGS(SEQ ID NO.136)、GGGGSGGGGS(SEQ ID NO.137)、SGGGGSGGGG(SEQ ID NO.138)、GGGGGSGGGGSSGGGGS(SEQ ID NO.139)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.140)、GGGGSGGGGSGGGG(SEQ ID NO.141)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ IDNO.142)、GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)、GSPGSSSSGS(SEQ ID NO.144)、GSGSGSGS(SEQ ID NO.145)、GSGSGNGS(SEQ ID NO.146)、GGSGSGSG(SEQ ID NO.147)、GGSGSG(SEQ IDNO.148)、GGSG(SEQ ID NO.149)、GGSGNGSG(SEQ ID NO.150)、GGNGSGSG(SEQ ID NO.151)和GGNGSG(SEQ ID NO.152);
更优选地,所述柔性多肽选自GGGGSGGGGS(SEQ ID NO.137)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.142)和GGGGSGGGGSGGGSGGGGS(SEQ ID NO.143)。
7.权利要求1-6任一项所述的重组Fc融合蛋白,其中重组Fc融合蛋白包含选自下列包含Fc链与Gn亚基的肽链的组合:
(a)所述Gnα亚基和Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连;
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.22所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.23所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.22所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.22上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.23所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.23上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.24所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.24所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.25所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.24所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.24上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.25所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.25上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.26所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.26所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.27所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.26所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.26上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.27所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.27上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.28所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.28所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.29所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.28所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.28上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.29所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.29上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.30所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.30所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.31所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.30所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.30上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.31所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.31上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.32所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.32所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.33所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.32所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.32上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.33所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.33上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.46所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.46所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.47所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.46所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.46上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.47所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.47上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.48所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.48所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.49所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.48所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.48上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.49所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.49上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.50所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.50所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.51所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.50所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.50上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.51所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.51上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.52所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.52所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.53所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.52所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.52上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.53所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.53上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.54所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.54所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.55所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.54所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.54上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.55所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.55上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.56所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.56所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.57所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.57所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.56所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.56上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.57所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.57上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.70所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.70所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.71所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.71所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.70所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.70上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.71所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.71上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.72所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.72所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.73所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.73所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.72所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.72上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.73所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.73上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.74所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.74所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.75所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.75所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.74所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.74上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.75所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.75上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.76所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.76所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.77所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.77所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.76所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.76上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.77所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.77上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.78所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.78所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.79所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.79所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.78所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.78上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.79所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.79上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.80所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.80所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.81所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.81所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.80所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.80上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.81所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.81上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.94所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.94所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.95所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.95所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.94所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.94上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.95所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.95上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.96所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.96所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.97所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.97所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.96所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.96上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.97所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.97上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.98所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.98所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.99所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.99所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.98所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.98上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.99所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.99上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.100所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.100所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.101所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.101所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.100所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.100上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.101所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.101上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.102所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.102所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.103所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.103所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.102所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.102上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.103所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.103上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.104所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.104所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.105所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.105所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.104所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.104上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.105所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.105上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.94所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.94所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.118所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.118所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.94所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.94上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.118所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.118上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.96所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.96所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.119所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.119所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.96所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.96上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.119所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.119上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.98所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.98所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.120所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.120所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.98所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.98上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.120所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.120上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.100所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.100所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.121所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.121所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.100所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.100上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.121所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.121上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.102所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.102所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.122所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.122所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.102所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.102上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.122所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.122上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.104所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.104所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.123所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.123所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.104所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.104上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.123所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.123上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(b)所述Gnα亚基的N端与Fc链的C端相连;和所述Gnβ亚基的C端与Fc链的N端相连;
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.34所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.23所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.34所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.34上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.23所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.23上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.35所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.25所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.35所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.35上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.25所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.25上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.36所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.27所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.36所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.36上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.27所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.27上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.37所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.29所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.37所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.37上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.29所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.29上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.38所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.38所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.31所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.38所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.38上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.31所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.31上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.39所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.33所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.39所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.39上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.33所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.33上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.58所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.58所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.47所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.58所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.58上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.47所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.47上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.59所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.59所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.49所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.59所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.59上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.49所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.49上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.60所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.60所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.51所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.60所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.60上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.51所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.51上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.61所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.61所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.53所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.61所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.61上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.53所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.53上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.62所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.62所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.55所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.62所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.62上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.55所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.55上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.63所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.63所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.57所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.57所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.63所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.63上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.57所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.57上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.82所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.82所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.71所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.71所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.82所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.82上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.71所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.71上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.83所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.83所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.73所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.73所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.83所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.83上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.73所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.73上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.84所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.84所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.75所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.75所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.84所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.84上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.75所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.75上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.85所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.85所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.77所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.77所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.85所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.85上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.77所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.77上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.86所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.86所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.79所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.79所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.86所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.86上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.79所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.79上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.87所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.87所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.81所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.81所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.87所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.87上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.81所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.81上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.95所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.95所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.95所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.95上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.97所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.97所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.97所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.97上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.99所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.99所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.99所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.99上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.101所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.101所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.101所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.101上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.103所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.103所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.103所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.103上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.105所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.105所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.105所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.105上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.118所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.118所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.118所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.118上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.119所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.119所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.119所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.119上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.120所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.120所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.120所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.120上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.121所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.121所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.121所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.121上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.122所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.122所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.122所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.122上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.123所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.123所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.123所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.123上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(c)所述Gnα亚基和Gnβ亚基的N端与Fc链的C端相连;
(1)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.34所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.40所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.40所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.34所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.34上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.40所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.40上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(2)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.35所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.41所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.35所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.35上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.41所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.41上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(3)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.36所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.42所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.42所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.36所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.36上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.42所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.42上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(4)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.37所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.43所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.43所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.37所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.37上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.43所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.43上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(5)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.38所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.38所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.44所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.44所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.38所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.38上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.44所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.44上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(6)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.39所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.45所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.39所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.39上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.45所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.45上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(7)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.58所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.58所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.64所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.64所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.58所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.58上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.64所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.64上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(8)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.59所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.59所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.65所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.65所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.59所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.59上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.65所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.65上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(9)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.60所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.60所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.66所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.66所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.60所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.60上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.66所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.66上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(10)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.61所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.61所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.67所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.67所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.61所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.61上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.67所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.67上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(11)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.62所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.62所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.68所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.68所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.62所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.62上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.68所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.68上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(12)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.63所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.63所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.69所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.69所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.63所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.63上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.69所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.69上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
(13)所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.82所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.82所示;和所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.88所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.88所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.82所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.82上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.88所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.88上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(14)所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.83所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.83所示;和所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.89所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.89所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc4h)与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.83所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.83上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc4k)与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.89所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.89上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(15)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.84所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.84所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.90所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.90所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.84所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.84上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.90所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.90上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(16)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.85所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.85所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.91所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.91所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc4(T-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.85所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.85上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc4(T+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.91所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.91上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(17)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.86所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.86所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.92所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.92所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.86所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.86上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.92所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.92上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(18)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.87所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.87所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.93所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.93所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc4(D-))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.87所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.87上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc4(D+))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.93所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.93上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(19)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.112所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.112所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.112所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.112上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(20)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.113所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.113所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.113所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.113上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(21)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.114所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.114所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.114所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.114上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(22)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.115所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.115所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.115所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.115上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(23)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.116所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.116所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.116所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.116上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(24)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.117所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.117所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH Iβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.117所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.117上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(25)所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.106所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.106所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.124所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.124所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.106所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.106上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.124所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.124上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(26)所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.107所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.107所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.125所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.125所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h)与GtHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.107所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.107上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k)与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.125所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.125上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(27)所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.108所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.108所示;和所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.126所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.126所示;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.108所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.108上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.126所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.126上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(28)所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.109所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.109所示;和所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.127所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.127所示;
优选地,所述包含静电转向T型负电荷链(Fc1(T-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.109所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.109上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向T型正电荷链(Fc1(T+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.127所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.127上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(29)所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.110所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.110所示;和所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.128所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.128所示;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.110所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.110上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.128所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.128上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(30)所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链包含与SEQ IDNO.111所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.111所示;和所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.129所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.129所示;
优选地,所述包含静电转向D型负电荷链(Fc1(D-))与GtHα亚基的肽链具有SEQ IDNO.111所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.111上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含静电转向D型正电荷链(Fc1(D+))与GtH IIβ亚基的肽链具有SEQ IDNO.129所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.129上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(31)所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.132所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.132所示;和所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.133所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.133所示;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与pFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.132所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.132上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与pFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.133所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.133上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
(32)所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链包含与SEQ ID NO.134所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.134所示;和所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链包含与SEQ ID NO.135所示氨基酸序列具有80%或以上同一性的氨基酸序列,优选具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%以上同一性的氨基酸序列,优选具有98%或99%以上同一性的氨基酸序列,更优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.135所示;
优选地,所述包含锁式Fc链(Fc1h(KiH))与hFSHα亚基的肽链具有SEQ ID NO.134所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.134上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列;
优选地,所述包含扣式Fc链(Fc1k(KiH))与hFSHβ亚基的肽链具有SEQ ID NO.135所示氨基酸序列或者具有在SEQ ID NO.135上缺失、添加或取代1、2或3个残基所得到的氨基酸序列。
8.编码权利要求1-7任一项所述的重组Fc融合蛋白的核酸。
9.一种药物组合物,其包含权利要求1-7任一项所述的重组Fc融合蛋白或权利要求8所述的核酸,以及任选地药学上可接受的载体。
10.权利要求1-7任一项所述的重组Fc融合蛋白、权利要求8所述的核酸、权利要求9所述的药物组合物在制备用于人的辅助生殖、治疗多囊性卵巢综合征和不排卵疾病、动物超数排卵、动物同期发情、受胎产仔、治疗动物不孕不育、促进动物繁殖、胚胎移植、促排精排卵、刺激性腺组织分泌产生雌二醇和睾酮以及治疗动物不孕不育、治疗母畜卵巢疾病、促进家畜繁殖、提高公畜精液品质、诱导母畜发情、卵母细胞的体外成熟和体外受精的药物中的用途;其中所述动物包括猪、鱼、牛、羊、马或狗;优选猪或鱼。
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