CN115957333A - 一种改性医用蛋白胶及其制备方法与在制备羊膜镜中的应用 - Google Patents

一种改性医用蛋白胶及其制备方法与在制备羊膜镜中的应用 Download PDF

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官习鹏
钟杏霞
韦晓慧
陈雨晴
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Abstract

本发明涉及眼科材料制备技术领域,具体公开了一种改性医用蛋白胶及其制备方法与在制备羊膜镜中的应用。所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其包含如下步骤:(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶。研究表明,本发明所述的改性医用蛋白胶,其具有优异的抗角膜炎作用;因此,将本发明所述的改性纤维蛋白胶复合于羊膜镜上,可以减轻使用羊膜镜在治疗眼表疾病过程中所产生的眼部不适和以及进一步降低角膜炎的发生。

Description

一种改性医用蛋白胶及其制备方法与在制备羊膜镜中的应用
技术领域
本发明涉及眼科材料制备技术领域,具体涉及一种改性医用蛋白胶及其制备方法与在制备羊膜镜中的应用。
背景技术
羊膜是胎膜与羊水接触的部分,其具有促进上皮修复、抑制角膜新生血管形成、抑制瘢痕形成、抑制免疫反应等作用,因此被广泛应用于治疗眼表疾病。羊膜镜是采用羊膜治疗眼表疾病过程中常用的医疗器具。
纤维蛋白胶作为一种生物蛋白制剂,包括纤维蛋白和凝血酶两个主要成分,当二者结合后能模拟人体内凝血的最后阶段形成稳定的凝胶物,具有止血、封闭和快速黏合伤口的特点。目前国外已普遍在眼表手术中使用纤维蛋白胶替代手术缝线,研究发现纤维蛋白胶对于黏合自体结膜和羊膜效果确切,明显缩短手术时间,减轻术后眼部不适和术后炎症反应,而且在随访中未见复发率增高,甚至较缝线组略低。
由于纤维蛋白胶在眼表手术中使用可以减轻眼部不适和炎症反应;因此,将纤维蛋白胶复合于羊膜镜上,可以减轻使用羊膜镜在治疗眼表疾病过程中所产生的眼部不适和炎症反应。不过,发明人在使用纤维蛋白胶的过程中发现,现有的纤维蛋白胶对于角膜炎的治疗作用有待进一步改善。
发明内容
为了解决现有技术中存在的至少之一的技术问题,本发明提供了一种改性医用蛋白胶的制备方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
一种改性医用蛋白胶的制备方法,其包含如下步骤:
(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶。
优选地,冻干人纤维蛋白胶与生理盐水的重量比为1:8~10。
最优选地,冻干人纤维蛋白胶与生理盐水的重量比为1:9。
优选地,所述的药物组合物由辛夷脂素和叶下珠脂素组成。
发明人在研究中惊奇的发现,在人纤维蛋白胶中加入由辛夷脂素和叶下珠脂素组成的组合物制备得到的改性医用蛋白胶,其抗角膜炎作用远远高于人纤维蛋白胶。
发明人在研究中还发现,在人纤维蛋白胶中必须加入由辛夷脂素和叶下珠脂素组成的组合物制备得到的改性医用蛋白胶,才能大幅提高人纤维蛋白胶的抗角膜炎作用;在人纤维蛋白胶中仅仅加入辛夷脂素或仅仅加入叶下珠脂素制备得到的改性医用蛋白胶,并不能大幅提高人纤维蛋白胶的抗角膜炎作用。这可能是在人纤维蛋白胶中同时加入辛夷脂素和叶下珠脂素产生协同作用的结果。
进一步优选地,辛夷脂素和叶下珠脂素的重量比为1~3:1~3。
最优选地,辛夷脂素和叶下珠脂素的重量比为1:1。
优选地,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.2~0.5。
最优选地,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.4。
本发明还提供了一种由上述制备方法制备得到的改性医用蛋白胶。
本发明还提供了一种上述改性医用蛋白胶在制备具有预防和/或治疗角膜炎作用的药物中的应用。
本发明还提供了一种上述改性医用蛋白胶在制备羊膜环中的应用。
有益效果:本发明提供了一种全新的改性医用蛋白胶的制备方法;研究表明,在人纤维蛋白胶中加入由辛夷脂素和叶下珠脂素组成的组合物制备得到的改性医用蛋白胶,其具有优异的抗角膜炎作用,其抗角膜炎作用远远高于人纤维蛋白胶。因此,将本发明所述的改性纤维蛋白胶复合于羊膜镜上,可以减轻使用羊膜镜在治疗眼表疾病过程中所产生的眼部不适和以及进一步降低角膜炎的发生。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明,但实施例并不限定本发明的保护范围。
以下实施例中的冻干人纤维蛋白胶采用的是康普欣牌外科用冻干人纤维蛋白胶;其余未注明来源的原料均为本领域技术人员可以通过常规途径购买或通过常规方法制备得到的常规原料。
实施例1改性医用蛋白胶的制备
(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到9倍重量的生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶;
其中,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.4;
所述的药物组合物由重量比为1:1的辛夷脂素和叶下珠脂素组成。
实施例2改性医用蛋白胶的制备
(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到8倍重量的生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶;
其中,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.2;
所述的药物组合物由重量比为3:1的辛夷脂素和叶下珠脂素组成。
实施例3改性医用蛋白胶的制备
(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到10倍重量的生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶;
其中,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.5;
所述的药物组合物由重量比为1:3的辛夷脂素和叶下珠脂素组成。
对比例1改性医用蛋白胶的制备
(2)将冻干人纤维蛋白胶加入到9倍重量的生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物化合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶;
其中,冻干人纤维蛋白胶与药物化合物的重量比为1:0.4;
所述的药物化合物为辛夷脂素。
对比例1与实施例1的区别在于,对比例1仅仅在人纤维蛋白胶中加入辛夷脂素制备改性医用蛋白胶;而实施例1则是在人纤维蛋白胶中同时加入辛夷脂素和叶下珠脂素制备改性医用蛋白胶。
对比例2改性医用蛋白胶的制备
(3)将冻干人纤维蛋白胶加入到9倍重量的生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物化合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶;
其中,冻干人纤维蛋白胶与药物化合物的重量比为1:0.4;
所述的药物化合物为叶下珠脂素。
对比例2与实施例1的区别在于,对比例2仅仅在人纤维蛋白胶中加入叶下珠脂素制备改性医用蛋白胶;而实施例1则是在人纤维蛋白胶中同时加入辛夷脂素和叶下珠脂素制备改性医用蛋白胶。
实验例1抗角膜炎实验
角膜炎小鼠模型的构建方法:
选取体重在20±2g的雄性KM小鼠,现将其放入相对湿度为50%,温度为25℃的环境中进行适应期培养2天;每隔12h进行黑暗和光照切换。培养结束后,将小鼠进行腹腔麻醉,用针头在小鼠右眼眼球角膜的表面划两条平行的切口,并在切口处滴加10μL浓度为1x108CFU/mL的铜绿假单胞菌菌液;滴加菌液完毕后停留5min,待小鼠苏醒后将小鼠送回动物房;继续喂养3天后选取角膜炎严重程度基本一致的小鼠作为角膜炎模型小鼠。
选取角膜炎模型小鼠70至,分成7组,每组10只;其中实验组6组;模型组1组;实验组每天涂抹含有待测药物的甘油(待测药物的含量为3%);连续涂抹2周后对各组小鼠的角膜炎进行评分,取各组的平均分,评分结果见表1。
角膜炎的评分标准如下:
0分;角膜透明,与左眼基本相同;
0~1分(不含0分):角膜轻度混浊,病灶部分或全部遮盖瞳孔区;
1~2分(不含1分):角膜轻度混浊,病灶部分或全部遮盖眼前段;
2~3分(不含2分):角膜浓厚混浊,病灶部分或全部遮盖瞳孔区;
3~4分(不含3分):角膜浓厚混浊,病灶部分或全部覆盖眼前段。
各组待测药物如下:
模型组不使用任何药物。
实验组1待测药物为冻干人纤维蛋白胶(未改性的);
实验组2待测药物为实施例1制备得到的改性医用蛋白胶;
实验组3待测药物为实施例2制备得到的改性医用蛋白胶;
实验组4待测药物为实施例3制备得到的改性医用蛋白胶;
实验组5待测药物为对比例1制备得到的改性医用蛋白胶;
实验组6待测药物为对比例2制备得到的改性医用蛋白胶。
表1.本发明改性医用蛋白胶抗角膜炎实验结果
组别 测试的药物 角膜炎评分
模型组 - 3.51
实验组1 冻干人纤维蛋白胶 2.62
实验组2 实施例1制备得到的改性医用蛋白胶 0.37
实验组3 实施例2制备得到的改性医用蛋白胶 0.45
实验组4 实施例3制备得到的改性医用蛋白胶 0.40
实验组5 对比例1制备得到的改性医用蛋白胶 2.16
实验组6 对比例2制备得到的改性医用蛋白胶 2.08
从表1实验结果可以看出,实验组1的角膜炎评分明显小于模型组;这说明冻干人纤维蛋白胶具有一定的抗角膜炎作用;但是作用不是非常强。
从表1实验结果可以看出,实验组2~4的角膜炎评分大幅小于实验组1;这说明:在人纤维蛋白胶中加入由辛夷脂素和叶下珠脂素组成的组合物制备得到的改性医用蛋白胶,其抗角膜炎作用远远高于人纤维蛋白胶;具有十分优异的抗角膜炎作用。
从表1实验结果还可以看出,实验组5和6的角膜炎评分与实验组1相比,并未得到大幅的降低,其角膜炎评分也远远高于实验组2。这说明:在人纤维蛋白胶中仅仅加入辛夷脂素或仅仅加入叶下珠脂素制备得到的改性医用蛋白胶,并不能大幅提高人纤维蛋白胶的抗角膜炎作用;在人纤维蛋白胶中必须同时加入辛夷脂素和叶下珠脂素制备得到的改性医用蛋白胶,才能大幅提高人纤维蛋白胶的抗角膜炎作用;才具有十分优异的抗角膜炎作用。

Claims (10)

1.一种改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)将冻干人纤维蛋白胶加入到生理盐水中,搅拌均匀得人纤维蛋白胶混合液;
(2)在人纤维蛋白胶混合液中加入药物组合物;继续搅拌均匀得改性医用蛋白胶混合液;
(3)将改性医用蛋白胶混合液冻干后即得所述的改性医用蛋白胶。
2.根据权利要求1所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,冻干人纤维蛋白胶与生理盐水的重量比为1:8~10。
3.根据权利要求所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,冻干人纤维蛋白胶与生理盐水的重量比为1:9。
4.根据权利要求1所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,所述的药物组合物由辛夷脂素和叶下珠脂素组成。
5.根据权利要求4所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,辛夷脂素和叶下珠脂素的重量比为1~3:1~3。
6.根据权利要求5所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,辛夷脂素和叶下珠脂素的重量比为1:1。
7.根据权利要求1所述的改性医用蛋白胶的制备方法,其特征在于,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.2~0.5;
最优选地,冻干人纤维蛋白胶与药物组合物的重量比为1:0.4。
8.权利要求1~7任一项所述的制备方法制备得到的改性医用蛋白胶。
9.权利要求8所述的改性医用蛋白胶在制备具有预防和/或治疗角膜炎作用的药物中的应用。
10.权利要求8所述的改性医用蛋白胶在制备羊膜环中的应用。
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