CN115948592A - 抗磺酰脲类除草剂胡麻的抗性基因及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了抗磺酰脲类除草剂胡麻的抗性基因及其应用,所述抗性基因为LusALS1R基因,其核苷酸序列为序列1中的第556位核苷酸为T的核苷酸序列,与其相关的SNP标记为位于胡麻基因组中序列1的第556位核苷酸,其为C或T。TT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CC基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性;所述CC基因型为所述SNP标记为C的纯合型;所述TC基因型为所述SNP标记为C和T的杂合型;所述TT基因型为所述SNP标记为T的纯合型。本发明首次为抗磺酰脲类除草剂胡麻品种的培育提供了SNP分子标记。可快速、准确地鉴定植株抗性,不会因遗传交换而产生误判。

Description

抗磺酰脲类除草剂胡麻的抗性基因及其应用
技术领域
本发明涉及植物基因工程领域,具体涉及抗磺酰脲类除草剂胡麻突变体的创制、抗磺酰脲类除草剂基因核酸序列的分离、抗性基因的检测引物与应用。
背景技术
胡麻是一种密植作物,以传统耕作方式为主。胡麻种子小,苗期生长缓慢,成株后难以形成大面积的遮阴,田间伴生杂草种类多、密度大、共生期长,以双子叶阔叶类杂草为主。有效控制田间杂草是提高胡麻产量与质量的重要环节。然而人工除草费时费力,常用的除草剂对阔叶类杂草防治效果不佳,并且易发生药害,目前生产上缺乏安全、高效的除草剂。
磺酰脲类除草剂是一种选择性内吸传导型除草剂,具有低量高效、杀草谱广、毒性低、土壤残留期短等优势,是生产上广泛使用的除草剂之一。磺酰脲类除草剂(SU)与咪唑啉酮类(IMI)、三唑嘧啶类(TP)、嘧啶水杨酸类(PB)、磺酰胺类(SCT)统称为ALS类除草剂,靶向植物体内的乙酰乳酸合酶(ALS)。ALS酶是合成支链氨基酸亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸的关键酶(McCourt et al.,.AminoAcids,2006,31:173-210)。ALS类除草剂通过与ALS酶形成复合物,阻断底物进入酶活性中心,抑制支链氨基酸合成,导致α-丁酮积累,破坏蛋白质合成,植株失绿、黄化、生长受阻而逐渐死亡(Jennifer et al.,PNAS,2006,103:569-573)。磺酰脲类除草剂能有效防除双子叶阔叶类杂草,在我国水稻、小麦等单子叶作物中广泛应用,而胡麻为双子叶作物,对磺酰脲类除草剂敏感,不能直接使用,因此创制对磺酰脲类除草剂具有选择抗性的胡麻新种质,是解决胡麻田间杂草防除的一种经济有效途径。
研究表明,抗ALS类除草剂的杂草大多数是靶标基因发生位点突变,引起靶标酶结构发生改变,导致除草剂与靶标酶的结合减弱或受阻,从而产生抗性。目前杂草中已发现ALS基因在8个保守位点处突变,发生29种不同氨基酸的取代会使生物体对ALS类除草剂产生抗性,分别是Ala122、Pro197、Ala205、Asp376、Arg377、Trp574、Ser653和Gly654(以模式植物拟南芥氨基酸位置计算,下同),并且有多个突变类型可以造成生物体对ALS抑制剂产生抗性(Powles et al.,Annual Review of Plant Biology,2010,61(1):317-347;Suzanne et al.,Weed Science,2008,56(6):p.797-806;Heap,2017),如Pro197被组氨酸、丝氨酸、苏氨酸等9种氨基酸取代后,植物对磺酰脲类除草剂产生高抗性,还可对不同类型的ALS类除草剂产生交互抗性(Hai L C et al.,Pesticide Biochemistry&Physiology,2012,102(3):229-232)。通过对目标作物进行诱变、基因编辑等手段,已获得多种对ALS类除草剂产生抗性的玉米、水稻等突变体,并相继克隆出具有抗性的突变基因(Tan S etal.,Pest Manag Sci,2005,61:246-257)。例如,国内首次报道了油菜抗IMI类除草剂基因BnALS1R(胡茂龙等,中国农业科学,2012,45(20):4326-4334);利用EMS诱变获得了甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂突变体M342,并克隆出抗性基因BnALS3R(胡茂龙等,一种甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂基因及其应用;中国专利ZL201310111739.5)。
发明内容
本发明的目的是用EMS诱变胡麻主栽品种陇亚10号,筛选抗SU类除草剂的突变体,获得抗SU类除草剂的胡麻突变体材料、克隆抗SU类除草剂基因的核酸序列、设计分子标记。
本发明要求保护检测胡麻基因组中是否含有基因LusALS1R的物质在制备鉴定或辅助鉴定胡麻磺酰脲类除草剂抗性产品中的应用,所述基因LusALS1R为序列1中的第556位核苷酸为T的核苷酸序列。
其中,所述检测胡麻基因组中是否含有基因LusALS1R的物质为检测胡麻基因组中的与LusALS1R基因相关的SNP标记C556T的物质,所述SNP标记C556T为胡麻基因组中SEQ IDNo.1的第556位核苷酸,其为C或T。
其中,所述检测胡麻基因组中CAPS分子标记C556T的多态性或基因型的物质包括:限制性内切酶BsaI或限制性内切酶EcoO109I和由序列表中SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列组成引物对。
本发明要求保护一种检测植物是否抗磺酰脲类除草剂方法,包括检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的步骤,TT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CC基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性;所述CC基因型为所述SNP标记C556T为C的纯合型;所述TC基因型为所述SNP标记C556T为C和T的杂合型;所述TT基因型为所述SNP标记C556T为T的纯合型。
其中,所述检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的方法为:以待测植物的DNA为模板,用权利要求3所示的引物进行PCR扩增,将PCR扩增的产物用限制性内切酶BsaI消化,若电泳检测表明的酶切产物含有405bp和177bp两种条带时,则SNP标记C556T的基因型为TT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的纯合型抗性植物;
若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、405bp和177bp三种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的杂合型抗性植物;
若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CC基因型,表现为不抗磺酰脲类除草剂的纯合型敏感性植物。
其中,所述检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的方法为:以待测植物的DNA为模板,用权利要求3所示的引物进行PCR扩增,将PCR扩增的产物用限制性内切酶EcoO109I消化,若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则SNP标记C556T的基因型为TT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的纯合型抗性胡麻;
若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、399bp和183bp三种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的杂合型抗性胡麻;
若电泳检测表明的酶切产物含有399bp和183bp两种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CC基因型,表现为不抗磺酰脲类除草剂的纯合型敏感性胡麻。
本发明要求保护一种用于检测植物是否抗磺酰脲类除草剂的产品,所述产品包括序列表中SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的引物对。
上述的方法在植物育种中的应用也应在本发明的保护范围之内。
所述植物育种为培育抗磺酰脲类除草剂的植物。
所述植物为胡麻。
该分子标记在选育抗除草剂胡麻品种中的应用:
所述应用其特征在于,用上述引物对以陇亚10号为母本、以含抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R的突变材料为父本进行杂交的F1单株自交获得的F2群体中的植株进行抗性基因PCR扩增检测,通过酶切产物条带大小来筛选F2群体中的抗性个体。
所述应用还可以其它胡麻品种为母本,以含抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R的突变材料为父本进行杂交选育,利用分子标记进行基因型检测,将杂合后代进行多次回交,结合分子标记鉴定,筛选出抗性基因纯合的单株。
与现有技术相比,本发明具有以下优点:
1)本发明是在胡麻中首次发现抗SU类除草剂基因及其相关的分子标记(SNP位点);
2)本发明的胡麻抗SU类除草剂基因能够应用于其它对SU类除草剂敏感的植物,提高其耐受性;
3)本发明提供了两种检测抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R的CAPS标记方法,结果可靠、操作简单;
本发明的分子标记位于抗性胡麻的乙酰乳酸合酶基因正义链起始密码子第一个核苷酸下游的+552至+557的对应序列为“GGTCTC”,能够被限制性内切酶BsaI识别并剪切,不能被限制性内切酶EcoO109I识别。而敏感性基因型在+552至+557的对应序列为“GGTCCC”,不能被限制性内切酶BsaI识别,能被限制性内切酶EcoO109I识别并剪切,因此,可开发两个能够检测胡麻抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R的CAPS分子标记BsaI-ALS1R和EcoO109I-ALS1R。
4)本发明提供的分子标记为共显性标记,该检测方法可有效应用于由抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R产生的胡麻对磺酰脲类除草剂抗性的标记辅助选择育种。
本发明首次为抗磺酰脲类除草剂胡麻品种的培育提供了PCR分子标记。该标记可快速、准确地鉴定植株抗性,不会因遗传交换而产生误判。
附图说明
图1为抗除草剂突变体R10(左)和野生型陇亚10号(右)对不同剂量SU类除草剂苯磺隆的抗性表现。
图2为以陇亚10号为母本、抗除草剂突变体R10为父本的F1单株自交获得F2群体,喷施田间推荐剂量苯磺隆表现出抗性分离:R为耐药型,M为中度耐药型,S为敏感型(不耐药)。
图3为胡麻乙酰乳酸合酶基因LusALS1氨基酸序列比较图:其中,LusALS1R-R10,表示野生型陇亚10号(LY10)的氨基酸序列;LusALS1-LY10,表示抗SU类除草剂胡麻突变体R10的氨基酸序列。“△”表示突变氨基酸。
图4为抗SU类除草剂突变体R10、野生型陇亚10号及F1代植株抗性基因分子标记鉴定图(用限制性内切酶BsaI消化)。
图5为抗SU类除草剂突变体R10、野生型陇亚10号及F1代植株抗性基因分子标记鉴定图(用限制性内切酶EcoO109I消化)。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南,并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
以下实施例中的胡麻陇亚10号由甘肃省农业科学院作物研究所培育,公众可以从甘肃省农业科学院获取或直接购买获得。
实施例1抗SU类除草剂突变体R10的获取
以推广品种陇亚10号为原始材料,利用0.9%EMS处理种子18个小时,将处理后的种子播种于大田,混收种子。将收获的M1代种子播种于大田,喷施0.5倍田间推荐剂量的磺酰脲类除草剂苯磺隆,收获潜在的抗性种子。收获的M2代种子于实验室播种,喷施0.5倍苯磺隆进行复筛,选择抗性明显的材料进行南繁,单株收获其M3代种子取部分于田间播种,喷施2倍田间推荐剂量的磺酰脲类除草剂苯磺隆,选择抗性稳定且农艺性状与陇亚10号相似的株系,命名R10,在温室种植并喷施不同剂量的苯磺隆,测定其抗性水平(如图1和表1所示)。
表1.磺酰脲类除草剂苯磺隆喷施剂量
Figure BDA0003769669490000051
实施例2抗SU类除草剂基因LusALS1R的获取
以陇亚10号为母本、抗除草剂突变体R10为父本杂交的F1单株自交获得F2群体,F2群体(203株)喷施田间推荐剂量的苯磺隆后出现三种反应表型:耐药型R(40株)、中度耐药型M(103株)和敏感型S(60株)(图2),性状分离比为1:2:1。其中,生长点与正常生长植株无明显差别的表明为耐药型R,生长点叶片卷曲、生长稍微滞缓的表明为中度耐药型M,生长点萎蔫黄化、生长停滞的表明为敏感型S(不耐药型)。取不同抗性表型的材料各10株,采用康为世纪DNA提取试剂盒提取叶片基因组DNA。根据拟南芥乙酰乳酸合酶蛋白序列(Gene ID:824015)在胡麻数据库(NCBI:txid4005)进行比对,根据序列差异分别设计扩增引物。按照南京诺唯赞生物科技有限公司高保真性DNA聚合酶说明书配置50μL PCR反应体系,在PCR仪进行扩增。以LusALS1为例,扩增引物为序列5:5'-ATGGCCGCCGCTAATTC-3'和序列4:5'-CTTAGGAACGTTAATCAACACAGGG-3'。扩增程序为95℃预变性5min;95℃变性30s,56℃退火30s,72℃延伸,共35个循环。将产物在1%琼脂糖凝胶电泳分离后,取大小正确的条带进行产物回收,送北京擎科生物科技有限公司测序。
测序结果表明,不同抗性表型的F2单株间存在一致的差异位点,即LusALS1基因突变C556T,导致蛋白序列第186位(拟南芥第197位)脯氨酸变为丝氨酸(图3)。将所述突变位点命名为SNP位点C556T,其对应序列表中的序列1所示的核苷酸序列的556位,为C或T,序列表中用Y表示。将突变体R10中的该基因命名为LusALS1R,即抗SU类除草剂基因,序列为序列表中序列1中的第556位核苷酸为T,其他序列不变的序列,由744个碱基组成,编码氨基酸残基序列为序列2。
实施例3检测胡麻抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R的CAPS分子标记的开发
通过比对突变体R10与野生型LY10(陇亚10号)的序列、酶切位点发现,突变体R10中(即包含SNP位点为T时的基因型)的LusALS1R在+552至+557的对应序列为“GGTCTC”,能够被限制性内切酶BsaI识别并剪切,不能被限制性内切酶EcoO109I识别。而野生基因型(即SNP位点为C时)在+552至+557的对应序列为“GGTCCC”,不能被限制性内切酶BsaI识别,能被限制性内切酶EcoO109I识别并剪切。在LusALS1基因上设计保守引物对(序列3:5'-TTCCTTCCCAATGCTACCAC-3'和序列4:5'-CTTAGGAACGTTAATCAACACAGGG-3'),预计PCR产物长度582bp。分别提取突变体、野生型和杂交F1单株基因组DNA,配置50μL PCR反应体系。扩增程序为95℃预变性5min;95℃变性30s,56.5℃退火30s,72℃延伸45s,共35个循环。部分扩增产物送测序,部分用南京诺唯赞公司产物回收试剂盒纯化回收,回收产物分别限制性内切酶BsaI或EcoO109I进行酶切。酶切反应体系包括:PCR产物1μg,内切酶10u,10×酶反应缓冲液5μL,加水至50μL。反应程序:37℃60min,65℃20min。取部分酶切产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。
用限制性内切酶BsaI进行消化,若电泳检测表明的酶切产物含有405bp和177bp两种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T为纯合突变(SNP位点对应的基因型为TT的纯合型);若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、405bp和177bp三种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T为杂合突变(SNP位点对应的基因型为CT的杂合型);若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T未发生突变(SNP位点对应的基因型为CC的纯合型)(如图4所示,其中:1泳道为2kMarker,2、3泳道敏感型LY10,4、5泳道为突变体R10,6、7泳道为F1(LY10×R10)杂交株)。
上述结果表明,若SNP位点C556T为TT基因型,则能够被限制性内切酶BsaI消化为405bp和177bp两种条带;SNP位点C556T为CT基因型,能够被限制性内切酶BsaI消化为582bp、405bp和177bp三种条带;SNP位点C556T为CC基因型,不能被限制性内切酶BsaI消化,酶切产物只含有582bp一种条带。结合胡麻的表型可以发现,TT基因型胡麻的表型为耐药型R,CT基因型胡麻的表型为中度耐药型M,CC基因型胡麻的表型为敏感型S;即TT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CC基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性。
用限制性内切酶EcoO109I进行消化,若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T为纯合突变;若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、399bp和183bp三种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T为杂合突变;若电泳检测表明的酶切产物含有399bp和183bp两种条带时,则抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R-C556T未发生突变(图5:1泳道为2kMarker,2、3泳道为敏感型LY10(对应表型为敏感型S),4、5泳道为突变体R10(对应表型为耐药型R),6、7泳道为F1(LY10×R10)杂交株(对应表型为中度耐药型M))。
也就是说,若SNP位点C556T为TT基因型,则不能够被限制性内切酶EcoO109I消化,酶切产物只含有582bp一种条带;若SNP位点C556T为CT基因型,能够被限制性内切酶EcoO109I消化为582bp、399bp和183bp三种条带;若SNP位点C556T为CC基因型,能够被限制性内切酶EcoO109I消化为399bp和183bp两种条带。结合胡麻的表型可以发现,TT基因型胡麻的表型为耐药型R,CT基因型胡麻的表型为中度耐药型M,CC基因型胡麻的表型为敏感型S;即TT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CC基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性。
实施例4:分子标记BsaI-ALS1R和EcoO109I-ALS1R在分离群体中对抗性基因LusALS1R基因型的检测鉴定
以陇亚10号为母本、抗除草剂突变体R10为父本,F1杂交单株自交获得F2群体,取苗期植株叶片,提取基因组DNA,进行PCR扩增,将扩增产物使用限制性内切酶BsaI酶切,电泳检测,操作方法同上。
F2群体共203株,取不同抗性表型(耐药型R、中度耐药型M和敏感型S)的材料各10株,测序同时用上述两个分子标记进行检测,结果表明:
耐药型R植株C556T为纯合突变,对应的SNP基因为TT,其使用上述引物对扩增的产物,能够被限制性内切酶BsaI消化为405bp和177bp两种条带;
中度耐药型M植株C556T为杂合突变,对应的SNP基因为CT,其使用上述引物对扩增的产物能够被限制性内切酶BsaI消化为582bp、405bp和177bp三种条带;
敏感型S植株556位核苷酸没有发生突变,对应的SNP基因为CC,其使用上述引物对扩增的产物,不能被限制性内切酶BsaI消化,酶切产物只含有582bp一种条带。
以陇亚10号为母本、抗除草剂突变体R10为父本,F1杂交单株自交获得F2群体,取苗期植株叶片,提取基因组DNA,进行PCR扩增,将扩增产物使用限制性内切酶EcoO109I酶切,电泳检测,操作方法同上。
F2群体共203株,取不同抗性表型(耐药型R、中度耐药型M和敏感型S)的材料各10株,测序同时用上述两个分子标记进行检测,结果表明:
耐药型R植株C556T为纯合突变,对应的SNP基因为TT,其使用上述引物对扩增的产物,不能被限制性内切酶EcoO109I消化,因此酶切产物只含有582bp一种条带;
中度耐药型M植株C556T为杂合突变,对应的SNP基因为CT,其使用上述引物对扩增的产物能够被限制性内切酶EcoO109I消化582bp、399bp和183bp三种条带;
敏感型S植株556位核苷酸没有发生突变,对应的SNP基因为CC,其使用上述引物对扩增的产物,能够限制性内切酶EcoO109I消化为399bp和183bp两种条带。
以上F2群体分子标记检测结果与苗期喷施磺酰脲类除草剂苯磺隆表型及测序结果一致。由此表明,使用本发明中的检测胡麻基因性的物质BsaI-ALS1R(限制性内切酶BsaI和序列3和序列4组成的引物对)和EcoO109I-ALS1R(限制性内切酶EcoO109I和序列3和序列4组成的引物对)及检测方法能够准确有效区分出胡麻抗磺酰脲类除草剂基因LusALS1R或者是SNP位点的三种不同基因型,提高对抗性基因的筛选效率。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说,在不脱离本发明的宗旨和范围,以及无需进行不必要的实验情况下,可在等同参数、浓度和条件下,在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例,应该理解为,可以对本发明作进一步的改进。总之,按本发明的原理,本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进,包括脱离了本申请中已公开范围,而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围,可以进行一些基本特征的应用。

Claims (10)

1.检测胡麻基因组中是否含有LusALS1R基因的物质在制备鉴定或辅助鉴定胡麻磺酰脲类除草剂抗性产品中的应用,所述LusALS1R基因为序列1中的第556位核苷酸为T的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述检测胡麻基因组中是否含有基因LusALS1R的物质为检测检测胡麻基因组中的与LusALS1R基因相关的SNP标记C556T的物质,所述SNP标记C556T为胡麻基因组中SEQ ID No.1的第556位核苷酸,其为C或T。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述检测胡麻基因组中CAPS分子标记C556T的多态性或基因型的物质包括:限制性内切酶BsaI或限制性内切酶EcoO109I和由序列表中SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列组成引物对。
4.一种检测植物是否抗磺酰脲类除草剂方法,其特征在于,包括检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的步骤,TT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CT基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性高于CC基因型植物的磺酰脲类除草剂抗性;所述CC基因型为所述SNP标记C556T为C的纯合型;所述TC基因型为所述SNP标记C556T为C和T的杂合型;所述TT基因型为所述SNP标记C556T为T的纯合型。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的方法为:以待测植物的DNA为模板,用权利要求3所示的引物进行PCR扩增,将PCR扩增的产物用限制性内切酶BsaI消化,若电泳检测表明的酶切产物含有405bp和177bp两种条带时,则SNP标记C556T的基因型为TT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的纯合型抗性植物;
若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、405bp和177bp三种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的杂合型抗性植物;
若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CC基因型,表现为不抗磺酰脲类除草剂的纯合型敏感性植物。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述检测待测植物的基因组中SNP标记C556T的基因型的方法为:以待测植物的DNA为模板,用权利要求3所示的引物进行PCR扩增,将PCR扩增的产物用限制性内切酶EcoO109I消化,若电泳检测表明的酶切产物只含有582bp一种条带时,则SNP标记C556T的基因型为TT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的纯合型抗性胡麻;
若电泳检测表明的酶切产物含有582bp、399bp和183bp三种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CT基因型,表现为抗磺酰脲类除草剂的杂合型抗性胡麻;
若电泳检测表明的酶切产物含有399bp和183bp两种条带时,则SNP标记C556T的基因型为CC基因型,表现为不抗磺酰脲类除草剂的纯合型敏感性胡麻。
7.一种用于检测植物是否抗磺酰脲类除草剂的产品,所述产品包括权利要求3所示的引物对。
8.权利要求1中所述的检测胡麻基因组中是否含有LusALS1R基因的物质、权利要求2或3中所述的检测胡麻基因组中CAPS分子标记C556T的多态性或基因型的物质或权利要求4-6任一所述的方法在植物育种中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,所述植物育种为培育抗磺酰脲类除草剂的植物。
10.根据权利要求4-6任一所述的方法或权利要求8-9任一所述的应用,所述植物为胡麻。
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