CN115918833B - 一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法，采用本发明的方法对刺梨汁进行处理，不仅能有效脱涩，且处理过程简洁，无需太长的处理时间，就能实现高效脱涩；同时，活性成分损失少。所述方法包括如下步骤：1)将冻力值为150‑180Bloom g的明胶用水溶解，得到明胶水溶液；2)向所述明胶水溶液中加入所述米曲霉粗蛋白酶液，在40℃保温酶解30‑60min，然后灭酶；3)向刺梨汁中加入步骤2)的明胶酶解液，搅拌后静置6hh，然后离心，收集上清液，得到脱涩刺梨汁；其中，步骤1)中所述明胶的质量为步骤3)中所用刺梨汁质量的0.02‑0.1％。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体涉及一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法。
背景技术
刺梨(Rosa rxoburhgii Tratt)，属于蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)植物缕丝花的果实。刺梨果实营养丰富，除含有糖类、蛋白质、维生素、微量元素及多种人体必需的氨基酸等主要营养成分外，还含有丰富的有机酸及抗坏血酸、黄酮、多糖、超氧化物歧化酶、三萜类等生物活性物质。由于刺梨鲜果含有高含量的单宁酸类物质(特别是果实从青转黄色的时期，单宁酸类含量高)，导致刺梨压榨原汁具有很强的苦涩味，极大地限制了刺梨果汁的质量口感和应用发展。
一般而言，去除苦涩味的方法主要有物理脱除法、化学脱除法和生物脱除法。目前关于刺梨果汁脱涩的方法主要有吸附脱除法、明胶沉降法、壳聚糖法、单宁酶法、β-环糊精或α-环糊精包埋法等，这些方法各有优缺点。但吸附脱除法吸附脱除法处理时间比较长，且脱除单宁酸后其他有效成分损失很高，使得营养价值大打折扣；明胶沉降法处理时间长(超过20h)，常需使用大量的明胶，造成大量的明胶残留，同时有微生物滋长的风险；壳聚糖法中壳聚糖本身涩味较重，在离心过滤等步骤下也不易去除干净；单宁酶属于酶制剂，成本比较高，仅限于实验窒的研究，目前还不适用于果汁的大规模生产；环糊精包埋法是在果汁液体中加入物料对单宁物质进行包埋，实际效果并不显著。
中国专利申请CN201710085079.6公开了“一种用于果汁脱涩除浊的试剂及方法”中，提到了一种用于果汁脱涩除浊的试剂，该试剂包括交联明胶和铝镁型层状双金属氢氧化物。不过，该试剂需要对明胶进行交联，且交联后的明胶分子量需要大于30万，步骤复杂，应用操作难度。中国专利申请CN202011499020.X公开了“一种刺梨汁的脱涩方法”，其中的脱涩剂为酪蛋白酸钠、乳清分离蛋白和大豆分离蛋白中的至少一种。该法需要用较大量的水来溶解蛋白，无可避免的会在脱涩过程中，使刺梨原汁浓度变稀，脱涩后的刺梨汁只能用于较低浓度的刺梨饮品，应用局限性大。另外，该法中的原料成本也比较高昂，尤其是乳清分离蛋白。文献《共固定化复合酶澄清刺梨汁工艺的优化》中，提到了一种以壳聚糖为载体制得的固定化酶，用于刺梨汁脱涩除浊。同样地，该固定化复合酶也需要经过复杂的制备步骤，该方法成本高昂，并不适于大规模的产业化使用。
因此，本领域亟待开发一种既能高效去除刺梨汁中苦涩味物质(单宁酸)，又对果汁中其他营养物质不造成较大损失的高效处理方法。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法。采用本发明的方法对刺梨汁进行处理，不仅能有效脱涩，且处理过程简洁，无需太长的处理时间，能实现高效脱涩；同时，采用本发明的方法对刺梨汁进行脱涩处理，对活性成分损失少。
本发明为达到其目的，提供如下技术方案：
本发明提供一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法，所述方法包括如下步骤：
1)将冻力值为150-180Bloom g的明胶用水溶解，得到明胶水溶液；
2)按照每2g明胶使用10-50U(以中性蛋白酶活计，U为酶活力单位)的米曲霉粗蛋白酶液的量，向所述明胶水溶液中加入所述米曲霉粗蛋白酶液，在40℃保温酶解30-60min，然后灭酶，得到明胶酶解液；
3)向刺梨汁中加入步骤2)所述的明胶酶解液，搅拌均匀后静置6h，然后离心，收集上清液，得到脱涩刺梨汁；
其中，步骤1)中所述明胶的质量为步骤3)中所用刺梨汁质量的0.02-0.1％。
采用本发明的刺梨汁脱涩方法，将150-180Bloom g的明胶预先用10-50U的米曲霉粗蛋白酶液酶解得到明胶酶解液后，再用于刺梨汁的脱涩处理，能够以较短的处理时间高效脱涩，且活性组分损失少。
较佳实施方式中，步骤2)中，所述米曲霉粗蛋白酶液的制备步骤包括：
将培养了米曲霉的培养基用磷酸缓冲液在40℃浸提1h，得到提取液，然后离心，得到的上清液为所述米曲霉粗蛋白酶液；所述培养基的组成包括：水、麸皮和面粉，其中基于10mL的水，麸皮为8g，面粉为2g。较佳实施方式中，所述培养了米曲霉的培养基和所述磷酸缓冲液的质量比为1：10；所述磷酸缓冲液的pH值为7.0。较佳实施方式中，将米曲霉孢子浓度为107cfu·mL-1的米曲霉孢子悬液按照所述培养基质量的0.1％的量接种至所述培养基中，于30℃、90％RH环境下培养48h，得到所述培养了米曲霉的培养基。采用优选方式制得的米曲霉粗蛋白酶液来酶解明胶，所获得的明胶酶解液能够发挥优异的刺梨汁脱涩效果，且所需处理工艺简单，所需处理时间短，对活性组分影响小。采用上述方式得到的米曲霉粗蛋白酶液可以置于4℃环境下避光保存，具有较高的稳定性；一些实施方式中，能够稳定保持4个月(酶活损失<10％)。
较佳实施方式中，步骤1)中，制备所述明胶水溶液时，水的用量为所述明胶质量的20倍。
较佳实施方式中，步骤2)中，所述米曲霉蛋白酶液的酶活力为550U/mL，以中性蛋白酶活计。
文中，酶活定义：以1mL酶液在中性溶液、40℃条件下每分钟水解酪蛋白产生1μg酪氨酸，定义为1个蛋白酶活力单位(U/mL)。
较佳实施方式中，步骤3)中，所述搅拌的时间为10-20min。
进一步的，步骤3)中，所述刺梨汁为刺梨原汁。
本发明还提供一种刺梨汁产品，所述刺梨汁产品中的刺梨汁采用了上文所述的刺梨汁脱涩方法进行处理。
本发明还提供上文所述的刺梨汁脱涩方法在降低刺梨汁中的单宁酸含量中的应用。
本发明所提供的刺梨汁脱涩方法，与现有技术相比，其有益的效果在于：
1、本方法对刺梨汁脱苦涩味和除浊效果好，优于直接使用明胶脱涩的方法；2、工艺上不需要调节刺梨汁的pH，同时脱涩步骤中，静置处理时间短、效率高，在较短的处理时间内就能使明胶蛋白分子中的带电荷基团与单宁酸分子相互络合并逐渐形成大分子沉淀，达到优异的脱涩效果；所需处理时间短，利于降低微生物污染风险和生产成本；3、本发明方法对刺梨果汁中的营养物质影响较小，经检测，总黄酮、维生素C和SOD的损失率均比较低，不超过10％(包含明胶酶解液加入后产生的稀释作用)；4、本发明工艺操作简单，原料均可用于食品生产加工且价格低廉，适合于大规模应用。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将结合实施例对本发明作进一步的说明。应当理解，下述实施例仅是为了更好的理解本发明，并不意味着本发明仅局限于以下实施例。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与本发明所属技术领域的技术人员通常理解的含义相同。
部分原料说明如下：
米曲霉Aspergillus oryzae购自中国工业微生物菌种保藏管理中心；刺梨原汁(购自贵州恒力源公司)、单宁酸(CAS号:1401-55-4，购自麦克林)、芦丁(CAS号:153-18-4，购自麦克林)、VC(CAS号:50-81-7，购自阿拉丁)、SOD试剂盒(南京建成生物生物工程研究所)、明胶(冻力值分别为120、150、180Bloom g，购自嘉莉达明胶公司)。如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售物料，均可以通过商业渠道购买获得。以下实施例或对比例和效果评价中涉及的刺梨原汁均来源于相同批次的刺梨原汁。
实施例1(制备米曲霉粗蛋白酶液)
米曲霉粗蛋白酶液的制备方法：①米曲霉活化：将PDA培养基灭菌后，无菌操作接种米曲霉(Aspergillus oryzae2026)1环，置30℃恒温箱内培养3d，待斜面上长满绿色孢子；②米曲霉孢子悬液制备：无菌操作挑取斜面培养好的米曲霉孢子2环，接入装有玻璃珠和100mL无菌水的三角瓶中，30℃、200rpm条件下振荡30min，制得孢子悬液。用血球计数板方法将孢子悬液用无菌水调整为孢子浓度107cfu·mL-1，作为步骤③放大培养所用的米曲霉孢子悬液；③米曲霉放大培养：培养基各组分的配比为：每10mL水，添加麸皮8g、面粉2g，基于该配方配置放大培养基5000g、灭菌，按培养基总质量接入质量分数为0.1％的米曲霉孢子悬液、混匀，于30℃、90％RH环境下培养48h，然后用无菌袋收集长满米曲霉的培养基；④米曲霉胞外蛋白酶提取：用0.2M pH 7.0的磷酸钠缓冲液以质量比1：10(培养基与缓冲液的质量比)提取步骤③中培养米曲霉后的培养基中的米曲霉胞外蛋白酶，提取条件为40℃水浴浸提1h、90rpm搅拌，然后将所得提取液在25℃条件下离心10min，所得上清液即为米曲霉粗蛋白酶液，然后用棕色瓶分装、4℃环境冰箱保存；⑤按文献方法测定蛋白酶酶活(全国食品工业标准化技术委员会.蛋白酶制剂GB/T 23527—2009[S].北京:中国标准出版社,2009.)，米曲霉粗蛋白酶液的中性蛋白酶活力为550U/mL。
实施例2
(1)称取明胶2g(冻力值为150Bloom g)，加40g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液20μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌10min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S2。
实施例3
(1)称取明胶2g(冻力值为180Bloom g)，加40g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液20μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌20min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S3。
实施例4
(1)称取明胶10g(冻力值为150Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液100μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解60min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌20min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S4。
实施例5
(1)称取明胶10g(冻力值180Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液450μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌20min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S5。
实施例6
(1)称取明胶2g(冻力值150Bloom g)，加40g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液90μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌20min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S6。
实施例7
(1)称取明胶6g(冻力值180Bloom g)，加120g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液164μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取刺梨原汁10000g，加入步骤(2)得到的明胶酶解液，搅拌20min后室温静置6h(洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为S7。
对照例1
(1)称取明胶2g(冻力值150Bloom g)，加40g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)取刺梨原汁10000g，加入上述明胶水溶液，搅拌20min后室温静置16h(过夜、洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为D1。
对照例2
(1)称取明胶10g(冻力值180Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)取刺梨原汁10000g，加入上述明胶水溶液，搅拌20min后室温静置16h(过夜、洁净环境操作)，然后以用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为D2。
对照例3
(1)称取明胶10g(冻力值120Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)取刺梨原汁10000g，加入上述明胶水溶液，持续搅拌20min后室温静置20h(过夜、洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为D3。
对照例4
(1)称取明胶10g(冻力值180Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)取刺梨原汁10000g，加入上述明胶水溶液，用2M NaOH溶液调节溶液pH为4.0、持续搅拌20min后室温静置20h(过夜、洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱涩刺梨汁，命名为D4。
对照例5
(1)称取明胶10g(冻力值180Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)取单宁酸对照品用蒸馏水溶解后配制成浓度为1200mg/100mL的单宁酸溶液，取100g单宁酸溶液，加入上述明胶水溶液2.1g，搅拌20min后室温静置16h(过夜、洁净环境操作)，然后用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱单宁酸溶液，命名为D5。
对照例6
(1)称取明胶10g(冻力值为150Bloom g)，加200g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述实施例1制备的米曲霉粗蛋白酶液100μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解60min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取单宁酸对照品用蒸馏水溶解后配制成浓度为1200mg/100mL的单宁酸溶液，取100g单宁酸溶液，加入上述明胶水溶液2.1g，搅拌20min后室温静置6h(过夜、洁净环境操作)，然后以用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱单宁酸溶液，命名为D6。
对照例7
(1)称取明胶2g(冻力值为150Bloom g)，加40g纯化水，水浴加热至42℃、持续搅拌至完全溶解，得明胶水溶液；
(2)酶解：取上述制备的米曲霉粗蛋白酶液20μL加入到上述明胶水溶液中，持续搅拌、40℃保温酶解30min，然后升温至80℃、保持30min灭酶，降温至40℃、保温待用；
(3)取单宁酸对照品用蒸馏水溶解后配制成浓度为1200mg/100mL的单宁酸溶液，取100g单宁酸溶液，加入上述明胶水溶液0.42g，搅拌20min后室温静置6h(过夜、洁净环境操作)，然后以用离心机离心10min，弃掉沉淀，收集离心上清液得到脱单宁酸溶液，命名为D7。
各处理工艺作用效果评价：
分别取刺梨原汁、上述实施例2-7(依次对应下表1-2中的S2-S7)和对照例1-7(依次对应下表1-2中的D1-D7)制备的脱涩刺梨汁样品，检测各样品中透光率，以及多酚、总黄酮、VC、SOD成分含量，比较各方法对刺梨原汁脱涩前后脱涩除浊效果和营养成分的保留情况。多酚的测定采用Folin-Ciocalteu法测定[1]，以单宁酸为对照品；刺梨汁透光率测定参照文献方法，选用波长为650nm，以蒸馏水对参照[2]；总黄酮采用硝酸铝—醋酸钾法[3]，以芦丁为对照品；VC按照《GB 5009.86-2016食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定》中的第一法—高效液相色谱法检测；SOD采用羟胺法，具体步骤参见试剂盒。检测时取平行三个样，检测结果以平均值±标准差表示，各组间比较采用单因素方差分析，Duncan法分析显著性(SPSS 22.0)。
结果与分析
为方便了解比较各样品的处理工艺情况，将样品处理信息汇总于表1。若存在下表1所列信息与前文中实施例和对照例的描述不符的情形，以前文描述为准。
表1各样品处理参数信息
注：D4样品脱涩步骤增加了调pH处理。
表2各样品检测结果
注：上标不同字母代表有显著性差异。下文涉及的脱除率，通过如下方式计算得到，脱除率＝(C0-C1)/C0×100％；C0指刺梨原汁(或单宁酸溶液)单宁酸浓度，C1指脱涩后刺梨汁(或单宁酸溶液)单宁酸浓度。
从表2结果可知，刺梨原汁的透光率数值较低，表明刺梨原汁比较浑浊，刺梨原汁经脱涩处理后(样品S2-S7和D1-D4)，透光率值都有极为显著的提升，其中实施例样品S2-S7达到87-90％的范围，但各组间没有差异；而S2-S7组与D1-D4组相比(D1-D4组间无明显差异)，透光率值有显著的差异，提示S2-S7组比D1-D4组的各样品澄清度更高，从而表明S2-S7所采用的处理工艺在提高刺梨原汁澄清度效果方面具有明显优势，进一步的分析表明，将明胶用米曲霉蛋白酶适度酶解后，能明显改善明胶对刺梨汁的除浊效果。
在脱刺梨汁单宁酸效果方面，从脱涩后刺梨汁液中所含单宁酸数值分析来看，S2-S7和D1-D4处理工艺均有脱除单宁酸的效果，其中S2-S7组脱除率约为60％-65％，且S2-S7组间脱除效果并无明显差异。D1-D4组脱除率约为43％-52％，脱除效率明显低于S2-S7组；特别地，D1-D3组间脱除效率排序为D2>D1>D3，提示明胶冻力值对单宁酸脱除效率有明显影响，冻力值越低则效果越差。从S2-S7与D1-D4组样品单宁酸浓度的显著差异，表明S2-S7组样品的处理工艺在脱除单宁酸效果方面明显优于D1-D4，进一步说明将冻力值150-180的明胶经过米曲霉蛋白酶一定程度酶解后，显著改善了明胶除单宁酸的效果。
D5样品(单宁酸脱除率约56％)vs.D2样品(单宁酸脱除率约50％)对比分析，说明是明胶成分与单宁酸的络合作用发挥了明胶对刺梨原汁的脱涩作用；D5样品的脱单宁酸效率弱于D6(约为62％)和D7(约为61％)样(p<0.05)，而D5样品所用明胶冻力值高于D6&D7样品的冻力值，根据D1-D3组的单宁脱除效率与明胶冻力值的排序，理论上脱单宁酸效率D5样应大于D6&D7样，然而，实际实验检测结果表明，脱单宁酸效率D5显著小于D6&D7样，进一步说明了米曲霉蛋白酶酶解作用提高了明胶的脱单宁酸作用特性，获得了一种出乎意料的效果。
对脱涩刺梨汁的VC、总黄酮和SOD含量的检测表明，各种脱涩方法对功效成分均造成一定的损失，然而采用常规明胶脱涩方法，会导致刺梨汁的VC、总黄酮、SOD损失更大(S2-S7 vs.D1-D4,p<0.05)。
由上述实验结果可见，采用本发明的方法进行刺梨汁的脱涩处理，将150-180冻力值的明胶经米曲霉蛋白酶在一定工艺条件下进行酶解处理后，再用于刺梨原汁脱涩，可实现比传统常规明胶脱涩方法，在处理时间上显著缩短，且刺梨汁功效成分损失更低，脱涩除浊效果更好。
文中涉及的参考文献列于下文：
[1]何中秋,程志强,康立娟,杨桂霞,许晓娟.明胶吸附单宁酸的机理探讨及其在蓝莓汁脱涩中的应用[J].食品科学,2015,36(01):104-108.
[2]安玉红,陆敏涛,黎代余,黄燕,彭永贤.共固定化复合酶澄清刺梨汁工艺的优化[J].贵州农业科学,2020,48(04):134-138.
[3]杜薇，刘国文.刺梨总黄酮的含量测定及资源利用[J].食品科学，2003，1：112-114.
容易理解的，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，并不意味着本发明仅局限于此。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (7)
1.一种高效脱涩并能减少活性成分损失的刺梨汁脱涩方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
1）将冻力值为150-180 Bloom g的明胶用水溶解，得到明胶水溶液；
2）按照每2g明胶使用以中性蛋白酶活计的10-50U米曲霉粗蛋白酶液的量，向所述明胶水溶液中加入所述米曲霉粗蛋白酶液，在40℃保温酶解30-60min，然后灭酶，得到明胶酶解液；
3）向刺梨汁中加入步骤2）所述的明胶酶解液，搅拌后静置6h，然后离心，收集上清液，得到脱涩刺梨汁；
其中，步骤1）中所述明胶的质量为步骤3）中所用刺梨汁质量的0.02-0.1%；
步骤2）中，所述米曲霉粗蛋白酶液的制备步骤包括：
将米曲霉孢子浓度为107cfu·mL-1的米曲霉孢子悬液按照培养基质量的0.1%的量接种至培养基中，于30℃、90%RH环境下培养48h，得到培养了米曲霉的培养基；将培养了米曲霉的培养基用磷酸缓冲液在40℃浸提1h，得到提取液，然后离心，得到的上清液为所述米曲霉粗蛋白酶液；所述培养基的组成包括：水、麸皮和面粉，其中基于10 mL的水，麸皮为8g，面粉为2g；所述米曲霉粗蛋白酶液的酶活力为550 U/mL，以中性蛋白酶活计。
2.根据权利要求1所述的刺梨汁脱涩方法，其特征在于，
所述培养了米曲霉的培养基和所述磷酸缓冲液的质量比为1：10；
所述磷酸缓冲液的pH值为7.0。
3.根据权利要求1-2任一项所述的刺梨汁脱涩方法，其特征在于，步骤1）中，制备所述明胶水溶液时，水的用量为所述明胶质量的20倍。
4.根据权利要求1-2任一项所述的刺梨汁脱涩方法，其特征在于，步骤3）中，所述搅拌的时间为10-20 min。
5.根据权利1-2任一项所述的刺梨汁脱涩方法，其特征在于，步骤3）中，所述刺梨汁为刺梨原汁。
6.一种刺梨汁产品，其特征在于，所述刺梨汁产品中的刺梨汁采用了权利要求1-5任一项所述的刺梨汁脱涩方法进行处理。
7.权利要求1-5任一项所述的刺梨汁脱涩方法在降低刺梨汁中的单宁酸含量中的应用。
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-
2022
- 2022-12-23 CN CN202211666549.5A patent/CN115918833B/zh active Active
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