CN115918666A

CN115918666A - 一种1, 2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚复配的抗魔芋软腐病农药悬浮剂

Info

Publication number: CN115918666A
Application number: CN202211144701.3A
Authority: CN
Inventors: 罗林丽; 饶家瑞; 周雪; 周玉锋; 赵兴丽; 张欣; 孟泽洪; 李帅; 张金峰
Original assignee: Guizhou tea research institute; Guizhou Institute Of Biotechnology Guizhou Key Laboratory Of Biotechnology Guizhou Potato Research Institute Guizhou Food Processing Research Institute
Current assignee: Guizhou tea research institute; Guizhou Institute Of Biotechnology Guizhou Key Laboratory Of Biotechnology Guizhou Potato Research Institute Guizhou Food Processing Research Institute
Priority date: 2022-09-20
Filing date: 2022-09-20
Publication date: 2023-04-07

Abstract

本发明涉及一种农用杀菌剂组合物，特别是一种含1,2‑苯并异噻唑啉‑3‑酮和香荆芥酚杀菌剂组合物，其中1,2‑苯并异噻唑啉‑3‑酮和香荆芥酚质量比为95:5～20:80。与单剂相比，本发明的杀菌组合物对魔芋软腐病有较为明显的增效作用，提高了防效；降低用药和实现低毒、低残留，减少对环境的污染；因两种原药抗菌机制的不同，有利于减缓耐药性的产生。本发明对魔芋叶片和生长并无明显不良影响，符合农药制剂的安全性要求，对魔芋软腐病有良好的防效。

Description

一种1, 2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚复配的抗魔芋软腐病农药悬浮剂

技术领域

本发明涉及一种农药悬浮剂，具体涉及一种1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚复配的农药悬浮剂。

背景技术

细菌性魔芋软腐病是危害魔芋的重要病害，在贵州多地均有发生。其主要引起叶片、叶柄及块茎变软并腐化，一般可造成产量损失20％～30％，病情严重时最高可造成80％以上的产量损失，严重威胁和制约了我国魔芋产业的可持续发展。

1,2-苯并异噻唑啉-3-酮简称BIT，英文名1,2-Benzisothiazolin-3-One，化学式为C₇H₅NOS，熔点156℃，CAS号：2634-33-5。外观为白色或黄色针状结晶物质，其在酸性和碱性中效果稳定且热稳定性较好，对阴阳离子体系均适用，是一种具有低毒、高效和残留少特点的高效杀菌剂。其结构式为：

香荆芥酚化学式为C₁₀H₁₄O，英文名carvacrol，熔点0℃，CAS号：499-75-2。是一种存在于牛至、百里香、冬季香薄荷等唇形科植物中的单萜酚类化合物，外观为无色至淡黄色稠厚油状液体，具有微毒无残留、天然、环保等特点，能符合当下农业的有机生产标准。其结构式为：

以1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚为有效成分的杀菌剂组合物，用于魔芋软腐病的防治。但使用单独药剂用于防治病害，因其抗菌机制相同容易使得病害快速产生耐药性，从而迅速降低药剂的试剂防效，造成作物因病害爆发的大量经济损失。

发明内容

本发明的目的在于克服单一杀菌剂防效不足和易产生耐药性的问题，提供一种杀菌效果较好、成本较低且耐药性产生慢的杀菌组合物。

1,2-苯并异噻唑啉-3-酮的抗菌机制是通过影响细胞壁前体物质几丁质纤维体的形成，造成外膜损伤最终致其死亡。香荆芥酚主要通过表面活性和脂溶性迅速穿透病源微生物细胞膜，造成致病源微生物水失衡而死亡。本发明希望通过两种不同的抗菌机制，达到毒力强度增效的目的，以实现抗菌活性的提升并延缓耐药性的产生。

本发明另一目的，是通过引入植物源农药来进一步实现复配后的农药低毒、低残留。

本发明的另一目的，是提供将所述杀菌组合物用于防控细菌性魔芋软腐病(Pectobacterium aroidearum(XYmy-A1))。

为了实现上述目的，本发明提供一种杀菌组合物，所述杀菌组合物1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚的质量比为95:5～20:80。

上述杀菌组合物还包含防护剂、生长调节剂、植物营养素或土壤调节剂中的一种或几种的混合物。

本发明还提供一种杀菌剂，其中所述杀菌剂含有有效成分1,2-苯并异噻唑啉 -3-酮和香荆芥酚从0.5～30％；含有上述组合物0.1～50％，余量为农药上可接受的载体和助剂。

根据本发明所述杀菌剂的优选实施方式，其剂型为悬浮剂。

本发明还提供上述杀菌组合物在防治魔芋软腐病的应用。

本发明还提供一种防治作物病害的方法，在魔芋根茎或叶片感染病害之前或之后，向其生长或储存的场所施用上述杀菌组合物。

以下将更详细的说明本发明的技术方案：

本发明提供一种杀菌组合物，所述杀菌组合物含有1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚，其中1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚的质量比为95:5～20:80。

优选地，1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚的质量比为95:5。

对悬浮剂，使用FS3000(磷酸酯型阴离子表面活性剂)、NS-500LQ(非离子型羟基聚环氧乙烷嵌段共聚物)、0.1％黄原胶、0.1％硅酸镁铝、5％乙二醇和0.3％有机改性硅氧烷消泡剂，其余为去离子水加至100％，制成浆料后进行砂磨并得到产品。

除非另有说明，本发明所涉及的“％”均为“质量百分比”。

上述杀菌组合物还包含防护剂、生长调节剂、植物营养素或土壤调节剂中的一种或几种的混合物。所述防护剂、生长调节剂、植物营养素或土壤调节剂都是市场上能够购买获得的产品。

对于悬浮剂的加工助剂的选择，其分散剂选自：木质素磺酸盐、烷基萘磺酸盐、FS3000(磷酸酯型阴离子表面活性剂)；润湿剂选自：烷基酚聚氧乙烯聚基醚甲醛缩合物硫酸盐、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐、NS-500LQ(非离子型羟基聚环氧乙烷嵌段共聚物)；增稠剂选自：黄原胶、硅酸镁铝、膨润土；消泡剂为：有机改性硅氧烷消泡剂；防冻剂选自：乙二醇、丙二醇、甘油。

本发明所述的杀菌组合物可以以成品制剂形式提供，即组合物中各物质已经混合；也可以以单剂制剂提供，使用前在桶(罐)中直接混合。本发明的浓缩物通常与水混合得到所需要活性物质的浓度。

与现有技术相比，本发明产生的有益效果为：

(1)与单剂相比，复配后的杀菌组合物在同等质量浓度下，因不同抗菌机制的协同作用使得抗菌效果呈显著增效作用，可提高杀菌剂的防控效果。

(2)组成杀菌组合物的两种原药，其抗菌机制不同有利于延缓病菌耐药性的产生。

具体实施方式

下面结合具体实施例来对本发明进行进一步说明，但并不将本发明局限于这些具体实施方式。本领域技术人员应该认识到，本发明涵盖了权利要求书范围内所可能包括的所有备选方案、改进方案和等效方案。

一、制备实施例

所有制剂配比中百分含量均为质量百分比。

1、悬浮剂

按配方比例，以离子水水为介质，将原药、分散剂、助悬剂和防冻剂等加入到高剪切乳化机中剪切30min，再用砂磨机砂磨后得到悬浮剂。

实施例：30％1,2-苯并异噻唑啉-3-酮·香荆芥酚(有效成分比95:5)

称取28.5％1,2-苯并异噻唑啉-3-酮原药、1.5％香荆芥酚原药、3.5％FS3000 (磷酸酯型阴离子表面活性剂)、1％NS-500LQ(非离子型羟基聚环氧乙烷嵌段共聚物)、0.1％黄原胶、0.1％硅酸镁铝、5％乙二醇、0.3％有机改性硅氧烷消泡剂，去离子水加至100％后制成浆料并进行砂磨得到产品。

二、生物活性测试

生物活性测试分为室内毒力测试和活体防效测试

活性实验1：1,2-苯并异噻唑啉-3-酮与香荆芥酚复配杀菌剂对魔芋软腐病的室内毒力测定

魔芋软腐病病原菌病原菌(Pectobacterium aroidearum(XYmy-A1))由贵州省农业科学院生物技术研究所提供，试验采用共毒系数法评价不同复配配方的联合毒力强度，并明确较为合理的配比。

培养基配制和细菌活化方法：

使用NA固体培养基(葡萄糖：20g，牛肉膏：6g，蛋白胨：10g，酵母提取物：2g，琼脂：30g，二次水：2L；用5mol/L氢氧化钠溶液将培养基调节至pH＝7.0左右，并在121℃温度下灭菌20分钟)在28℃的培养箱中培育魔芋软腐病的单菌落。挑取NA固体培养基中生长良好的魔芋软腐单菌落到NB培养液(葡萄糖：20g，牛肉膏：6g，蛋白胨：10g，酵母提取物：2g，二次水： 2L；用5mol/L氢氧化钠溶液调节至pH＝7.0左右，在121℃温度下，灭菌20min) 中，于28℃、180rpm恒温摇床振荡培养到生长对数期备用。

药液配制和EC₅₀测试方法：

根据预测定的1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚EC₅₀值，确定复配测试浓度梯度分别为20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL和1.25μg/mL。1,2- 苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚测试的质量比为95:5～20:80。含有二甲基亚砜的培养基作空白对照CK，9组不同比例的复配配方都以上述浓度梯度进行实验，每个浓度配置一个含4mL二次水对应浓度的药液，分别取1mL加入三个平行试管中。后在28℃、180rpm恒温摇床振荡培养大约32h，用酶标仪测定各个浓度菌液的OD值(OD₅₉₅)。并根据以下公式计算出抑制率I(％)：

抑制率I(％)＝(C-T)/C×100％

未处理的NB培养基的校正吸光度值(OD₅₉₅)用C表示，而T表示处理后的NB培养基的校正吸光度值(OD₅₉₅)。

根据公式和药剂抑菌率，求出回归直线、EC₅₀和相关系数R²。根据孙云沛的计算方法，得出实际毒性指数(ATI)；根据复配的配比算出理论毒性指数(TTI)，并根据下列公式计算复配配方的共毒系数(CTC)。

S：标准杀菌剂的EC₅₀

M：混剂的EC₅₀

TTI＝TI_A×P_A+TI_B×P_B

TI_A为A药剂单剂毒力强度；P_A为A药剂在混剂中的百分含量

TI_B为B药剂单剂毒力强度；P_B为B药剂在混剂中的百分含量

若共毒系数大于120表明有增效作用；120～100表明有相加作用；低于100 则表明为拮抗作用

表1 BIT与香荆芥酚复配对魔芋软腐病的室内毒力测定结果^a

“^a”每组实验重复三次。

从表1结果可以看出，BIT与香荆芥酚混配，在质量比为95:5～90:10的范围内，对魔芋软腐病均表现为增效作用。结果表明，BIT与香荆芥酚按照质量比95:5表现增效作用明显，且EC₅₀值为相对最优。

活性实验2：魔芋软腐病的活体防效测试

将魔芋栽种于花盆中，待其生长高度大于20cm以后可开始实验。在大温室生长条件下，评估复配组合对盆栽魔芋接种魔芋软腐病以后的保护和治疗效果。第一天，治疗组：将魔芋根块洗净后切成厚度为0.5cm的片状，用棉花沾湿含魔芋软腐病的菌液，并贴于切面30min；保护组：使用浓度为50μg/mL的各药液均匀喷洒于切面；第二天，治疗组：使用浓度为50μg/mL的药液均匀喷洒于感菌后的切面；保护组：重复治疗组第一天的操作。最后，将魔芋置于培养皿中 (培养皿底部用少量水淹没切片)置于25℃恒温培养箱中培养7d。

DSA为切开根部截面并根据发病面积与其总面积之比来确定的病害百分比，分级系统对切面进行如下分类：

1级，DSA<5％；

3级，DSA在6-10％之间；

5级，DSA在11-20％之间；

7级，DSA在21-50％之间；

9级，DSA>50％。

疾病指数(C)计算公式如下：

疾病控制效率(I)计算公式如下：

其中，C代表对照组的疾病指数，而T代表复配组的疾病指数。

表2防治魔芋软腐病的活体防效结果

a:有效成分为BIT和香荆芥酚共占30％，其余部分为上述悬浮剂制备所含各种助剂

b:空白对照

从表2结果可以看出，总体保护活性要优于治疗活性。同时，复配制剂的保护防效也与BIT相近，表现出了较好的防效。

上述室内毒力测试和活体防效测试表明：

(1)本发明所述杀菌剂组合物，最终制成了有效含量为35％的悬浮剂。在同等质量浓度下，以35％含量分别达到了BIT 90％的防效。证明，两种具有不同抗菌机制的药物在抗魔芋软腐病实际防效上，起到了较为明显的增效作用。

(2)通过加入天然产物的方式，可降低用药成本并实现低毒低残留；

(3)组合物由不同抗菌作用机制的有效成分组成，可延缓耐药性的产生。本发明对作物叶片、长势并无不良影响，符合农药制剂的安全性要求。

发明所述杀菌组合物对魔芋软腐病有良好的防效。

Claims

1.一种杀菌组合物，其特征在于，其组分包含：1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚，二者的质量比为95:5～20:80。

2.一种适合农业使用的制剂，其特征在于：所述的制剂为含1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和香荆芥酚的杀菌组合物。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述的组合物剂型为悬浮液。

4.如权利要求1所述的组合物在防治魔芋软腐病中的应用。

5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述的悬浮液按质量分数比组分如下：

24％～28.5％1,2-苯并异噻唑啉-3-酮；

6％～1.5％香荆芥酚；

3.5％FS3000(磷酸酯型阴离子表面活性剂)；

1％NS-500LQ(非离子型羟基聚环氧乙烷嵌段共聚物)；

0.1％黄原胶；

0.1％硅酸镁铝；

5％乙二醇；

0.3％有机改性硅氧烷消泡剂；

去离子水加至100％，制成浆料后进行砂磨并得到产品。