CN115916763A

CN115916763A - 抗病毒素1,3-二氧代茚化合物

Info

Publication number: CN115916763A
Application number: CN202180029219.2A
Authority: CN
Inventors: J·内伊特斯; D·普恩; K·B·普菲斯特; 郑永植; 韩水逢; Y·R·玛尔帕尼; P·查克拉萨里; 金天生; 申珍洙; 金海洙; 李钟娇; 李尚澔
Original assignee: Katholieke Universiteit Leuven; Novartis AG; Korea Research Institute of Chemical Technology KRICT
Current assignee: Katholieke Universiteit Leuven; Novartis AG; Korea Research Institute of Chemical Technology KRICT
Priority date: 2020-04-20
Filing date: 2021-04-20
Publication date: 2023-04-04
Also published as: WO2021214073A1; EP4139290A1; AU2021260048B2; TW202200555A; CA3176727A1; JP2023520819A; AU2021260048A1; US20210322362A1; KR20230024887A; TWI832045B

Abstract

本发明提供了式(I)的化合物如本文所述的(I)，以及药学上可接受的盐、含有此类化合物的药物组合物，以及使用这些化合物、盐和组合物治疗病毒感染的方法。

Description

抗病毒素1,3-二氧代茚化合物

技术领域

本发明涉及新型1,3-二氧代茚化合物，其是小核糖核酸病毒(包括柯萨奇病毒、肠道病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒和鼻病毒)的抑制剂，并且因此可用于治疗病毒感染，包括脊髓灰质炎、麻痹、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、感冒、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎或中耳炎。本发明提供了如本文所公开的新型四环吡啶酮化合物、含有此类化合物的药物组合物以及使用这些化合物和组合物治疗和预防病毒性疾病的方法。

背景技术

小核糖核酸病毒是无包膜阳性单链RNA病毒，具有7.2Kb-8.5Kb长的RNA基因组。这些病毒非常小且为球形，大小为约22nm～30nm，并且在很早以前首次被鉴定。属于小核糖核酸病毒科的病毒是肠病毒，包括鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒A、柯萨奇病毒B和埃可病毒和甲型肝炎病毒。

小核糖核酸病毒引起的疾病是多种多样的，从呼吸系统疾病到消化系统疾病，到循环系统疾病以及到皮肤疾病，其示例包括脊髓灰质炎、麻痹、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、感冒、疱疹性咽峡炎和口蹄疫。然而，没有用于治愈这些疾病的治疗剂。正在开发的大多数药物是未加包衣的抑制剂。属于小核糖核酸病毒科的病毒导致各种疾病，包括前述呼吸系统疾病，其引起卫生、社会和经济问题。小核糖核酸病毒是水传播病的主要致病物。由于RNA病毒非常稳定并难以消毒，所以其不断引起相关疾病。

人鼻病毒(hRV)最近与大多数哮喘恶化相关，并且已知甚至存在于许多稳定哮喘患者的支气管组织中。从哮喘和非哮喘患者中获取的相应支气管粘膜活检样本的比较显示，与非哮喘患者相比，哮喘患者下呼吸道中的人鼻病毒检测频率显著更高。还报道了人鼻病毒的存在与哮喘的临床严重程度之间存在相关性。此外，鼻病毒引起慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎和中耳炎以及哮喘。

鼻病毒是普通感冒的主要原因，而肠病毒诱导的疾病包括脑膜炎、呼吸道感染等。提供针对脊髓灰质炎病毒的疫苗接种的广泛努力已经显著降低了全世界脊髓灰质炎的发作，但在尼日尔、尼日利亚、埃及、印度、巴基斯坦和阿富汗仍然有该疾病的病例报告。由于针对甲型肝炎病毒的疫苗，甲型肝炎现在有可能在某种程度上得到控制。然而，迄今为止还没有开发出针对柯萨奇病毒、埃可病毒或鼻病毒的疫苗。

具体地讲，柯萨奇病毒B是心肌炎的主要原因，在严重的情况下，其可发展为需要心脏移植的特发性扩张型心肌病。

恩韦肟(Enviroxime)衍生物被认为是最有希望的具有广泛的抗肠病毒和抗鼻病毒活性的候选物。恩韦肟通过结合病毒复制过程中形成RNA中间体所需的病毒蛋白3A而干扰正链RNA的合成(Heinz B A和Vance L M:J Virol,1995,69(7),4189-97)。然而，在临床研究中，观察到该化合物具有不显著或很少的治疗效果，同时检测到不良的药代动力学和不希望的副作用(Miller F D等人：Antimicrob Agents Chemother,1985,27(1),102-6)。

基于关于病毒蛋白酶2C的精细结构和功能的知识已经开发出蛋白酶抑制剂AG7088。在纳摩尔浓度范围的细胞培养物中，AG 7088具有针对48种鼻病毒类型和柯萨奇病毒A21、B3、肠病毒70和埃可病毒11的作用(Pattick A K等人：Antimicrobila AgentsChemother,1999,43(10),2444-50)。

由于对病毒衣壳的分子结构的澄清，已经获得了用于衣壳阻滞剂“WIN物质”的有目的设计的前提条件(Diana G D:Curr Med Chem 2003,2,1-12)。它们抑制鼻病毒和肠病毒的吸附和/或脱壳。一些WIN物质仅针对小核糖核酸病毒的单个属或病毒类型具有高度特异性作用。其它衍生物抑制鼻病毒和肠病毒的复制。例如，阿立酮(Arildone)、二噁沙利(disoxaril)和吡罗达韦(pirodavir)属于WIN物质。这些化合物在细胞培养中显示出非常好的抗病毒作用。然而，溶解性差(阿立酮)、生物利用率低(阿立酮和二噁沙利)、快速代谢和排泄(二噁沙利和WIN 54954)以及副作用，诸如皮疹(WIN 54954)使得临床应用不可能。

普来可那利(Pleconaril)，一种WIN物质，具有非常好的口服生物利用率，并且在其结合到病毒衣壳中的疏水袋之后，其抑制鼻病毒、埃可病毒和柯萨奇病毒的渗透(PevearD C等人：Antimicrob Agents Chemother 1999,43(9),2109-15；McKinlay M A等人：AnnuRev Microbiol 1992,46,635-54)。因此，普来可那利可能对广谱病毒疾病有效，范围从普通感冒到病毒性脑膜炎或心肌炎。观察到对鼻病毒、肠病毒71和柯萨奇病毒B3的抗性(Ledford R M等人：J Virol 2004,78(7),3663-74；Groarke J M等人：J Infect Dis1999,179(6),1538-41)。然而，已证实的治疗效果不足以将普来可那利(Picovir,Viropharma,USA)注册为美国治疗鼻病毒感染的药剂。2002年3月，食品药品监督管理局(FDA)拒绝了相应的申请，因为治疗成功率太低，并且观察到了副作用。

发现BTA-798具有比普来可那利更高的抗病毒活性，如用鼻病毒在体外和体内所评估，并且现在正在进行临床试验(Ryan,J.等人，Antiviral Res[18th Intl ConfAntiviral Res(4月11-14日，Barcelona)2005]2005,65(3):Abst LB-11)。

然而，迄今为止还没有开发出批准用于治疗肠道病毒或鼻病毒的抗病毒药物。仍然需要针对肠道病毒或鼻病毒的新的治疗和疗法。

在本发明中，对针对小核糖核酸病毒(包括柯萨奇病毒、肠道病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒和鼻病毒)的有效抑制病毒药进行了深入和彻底的研究，最终发现新型1,3-二氧代茚衍生物针对小核糖核酸病毒(包括柯萨奇病毒、肠道病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒和鼻病毒)表现出高度抑制活性。

发明内容

本发明提供了具有抗病毒活性的化合物。本发明还提供了含有所述化合物的药物组合物以及使用所述化合物和组合物抑制病毒复制或再活化并治疗与病毒相关或由病毒引起的疾病病状的方法。在以下描述和示例中描述了本发明的其他目的。

在一个方面，本发明提供式(I)的化合物：

其中，

G¹和G²中的一者选自直链或支链C₁-C₅烷基；直链或支链C₁-C₅烷氧基；直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；卤基和3-7元环烷基；G¹和G²中的另一者为H；并且R¹选自H和直链或支链C_1-C₅烷基；并且任选地，该化合物呈光学纯形式。在另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的本发明的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体。在另一方面，本发明提供一种组合，特别是药物组合，其包含治疗有效量的本发明的化合物以及一种或多种治疗活性剂。

具体实施方式

出于解释本说明书的目的，将应用以下定义，并且每当适当时，以单数形式使用的术语也将包括复数。

除非上下文另外明确指出，否则说明书中使用的术语具有以下含义：

如本文所用，术语“受试者”是指动物。在某些方面，动物是哺乳动物。受试者还指例如灵长类动物(例如，人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施方案中，受试者是人。如本文所用，“患者”是指人类受试者。如本文所用，如果受试者将在生物学上、医学上或生活质量上受益于此类治疗，则该受试者“需要”治疗。

如本文所用，术语“抑制(inhibition)”或“抑制(inhibiting)”是指给定病状、症状或病症或疾病的减少或抑制，或生物活性或过程的基线活性的显著降低。

如本文所用，术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”任何疾病或病症在一个实施方案中是指改善疾病或病症(即，减缓或阻止或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是指减轻或改善至少一个身体参数，包括患者可能无法辨别的那些参数。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是指在身体上(例如稳定可辨别的症状)、生理上(例如稳定身体参数)或两者上调节疾病或病症。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是指预防或延迟疾病或病症的发作或发展或进展。

如本文所用，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾，否则在本发明的上下文中(尤其是在权利要求书的上下文中)使用的术语“一种(a)”、“一种(an)”、“所述(the)”和类似术语应解释为涵盖单数和复数两者。

除非本文另有说明或以其它方式与上下文明显矛盾，否则本文所述的所有方法都可以任何合适的顺序进行。本文提供的任何和所有实施例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅旨在更好地说明本发明，并且不对另外要求保护的本发明的范围构成限制。

如本文所用，“卤基”或“卤素”可以是氟、氯、溴或碘。

如本文所用，“C_1-6烷基”或“C₁-C₆烷基”表示具有1-6个碳原子的直链或支链烷基。如果指定了不同数目的碳原子，诸如C₄或C₃，则定义将被相应地修改，诸如“C_1-4烷基”将表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。

如本文所用，“C_1-6烷氧基”表示具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基(-O-烷基)。如果指定了不同数目的碳原子，诸如C₄或C₃，则定义将被相应地修改，诸如“C_1-4烷氧基”将表示甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。

如本文所用，“C_1-4卤代烷基”或“C₁-C₄卤代烷基”表示具有1-4个碳原子的直链或支链烷基，其中至少一个氢已被卤素替代。卤素取代的数目可以是一到至多未取代的烷基基团上的氢原子的数目。如果指定了不同数目的碳原子，诸如C₆或C₃，则定义将被相应地修改。因此，“C_1-4卤代烷基”将表示至少一个氢被卤素取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基，诸如其中卤素是氟：CF₃CF₂-、(CF₃)₂CH-、CH₃-CF₂-、CF₃CF₂-、CF₃、CF₂H-、CF₃CF₂CH(CF₃)-或CF₃CF₂CF₂CF₂-。

如本文所用，“C_3-8环烷基”是指3至8个碳原子的饱和单环烃环。此类基团的示例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。如果指定了不同数目的碳原子，诸如C₃-C₆，则定义将被相应地修改。

本文描述了本发明的各种实施方案。将认识到，在每个实施方案中指定的特征可以与其它指定特征组合以提供另外的实施方案。以下列举的实施方案代表本发明：

实施方案1。一种式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，

G¹和G²中的一者选自直链或支链C₁-C₅烷基；直链或支链C₁-C₅烷氧基；直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；卤基和3-7元环烷基；并且G¹和G²中的另一者为H；并且R¹选自H和直链或支链C_1-C₅烷基。

实施方案2。根据实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹选自直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；和3-7元环烷基。

实施方案3。根据实施方案1或实施方案2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为直链或支链C₁-C₅卤代烷基。

实施方案4。根据实施方案1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为CF₃。

实施方案5。根据实施方案1或实施方案2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基。

实施方案6。根据实施方案1、2和5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为OCF₃。

实施方案7。根据实施方案1或实施方案2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为3-7元环烷基。

实施方案8。根据实施方案1、2和7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为环丙基。

实施方案9。根据实施方案1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G²为H。

实施方案10。根据实施方案1或实施方案9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为甲基。

实施方案11。根据实施方案1或实施方案9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为OCH₃。

实施方案12。根据实施方案1或实施方案9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为异丙基。

实施方案13。根据实施方案1或实施方案9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为卤基。

实施方案14。根据实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为H。

实施方案15。根据实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G²为甲基。

实施方案16。根据实施方案1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(II)：

实施方案17。根据实施方案1至10和12至13中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，具有式(III)：

实施方案17a。根据实施方案1至9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IV)：

其中G¹选自直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；和3-7元环烷基。

实施方案17b。根据实施方案1至9和17a中任一项所述的化合物，其中G¹选自CF₃、OCF₃和环丙基。

实施方案17c。根据实施方案1至9、17a和17b中任一项所述的化合物，其中R¹选自H和甲基。

实施方案18。根据实施方案1至17中任一项所述的化合物，所述化合物选自：

或其药学上可接受的盐。

实施方案18a。一种化合物或其药学上可接受的盐或其光学异构体，其选自由以下项组成的组：N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(19)；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)-N-甲基乙酰胺；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺；或其药学上可接受的盐。

实施方案18b。根据实施方案1所述的化合物，所述化合物为

或其药学上可接受的盐。

实施方案19。根据实施方案1至18中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其光学异构体，用于预防或治疗病毒性疾病。

实施方案20。一种用于预防或治疗病毒性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含根据实施方案1至18中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其光学异构体以及药学上可接受的稀释剂或赋形剂。

实施方案21。一种组合，所述组合包含根据实施方案1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据实施方案20所述的药物组合物以及一种或多种治疗活性剂。

实施方案22。一种治疗病毒性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的根据实施方案1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据实施方案20所述的药物组合物或根据实施方案21所述的组合。

实施方案23。根据实施方案19所述的化合物或其药学上可接受的盐或其光学异构体或根据实施方案20所述的药物组合物或根据实施方案21所述的组合用于预防或治疗病毒性疾病的用途。

实施方案24。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由柯萨奇病毒引起。

实施方案25。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由脊髓灰质炎病毒引起。

实施方案26。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由埃可病毒引起。

实施方案27。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由肠病毒引起。

实施方案28。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由鼻病毒引起。

实施方案29。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病由小核糖核酸病毒引起。

实施方案30。根据实施方案19所述的化合物或根据实施方案20所述的药物组合物，或根据实施方案21所述的方法，或根据实施方案23所述的用途，其中所述病毒性疾病是脊髓灰质炎、麻痹、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、流感、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎或中耳炎。

式I、II或III的化合物是新型的并且可用作用于制备本文所述的式(I)-式(III)的化合物的中间体。

本发明的另一个实施方案提供了作为药物的如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐。

式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗或预防人的病毒性疾病和/或感染的药物的用途也在本发明的范围内。

包含式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物包括在本发明的范围内。

根据该实施方案的另一方面，根据本发明的药物组合物还包含治疗有效量的至少一种其它抗病毒剂。

本发明还提供了如上文所述的药物组合物用于治疗患有感染或处于患有感染风险的人的病毒感染的用途。

本发明还提供了如上文所述的药物组合物用于治疗患有疾病或处于患有疾病风险的人的病毒性疾病或感染的用途。

本发明的另一方面涉及一种通过单独或一起或分别施用的至少一种其它抗病毒剂组合向人施用抗病毒有效量的本发明的化合物、其药学上可接受的盐或如上所述的组合物来治疗或预防人的病毒性疾病和/或感染的方法。

本发明的另一方面是指一种制品，该制品包含有效治疗病毒性疾病和/或感染的组合物；和包含标签的包装材料，该标签指示所述组合物可用于治疗由病毒引起的疾病和/或感染；其中该组合物包含根据本发明的式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的又一方面涉及一种抑制病毒复制的方法，该方法包括在抑制病毒复制的条件下将病毒暴露于有效量的式I、II或III的化合物或其盐。该方法可在体外或体内实施。

式I、II或III的化合物或其盐抑制病毒复制的用途还包括在本发明的范围内。

在一个实施方案中，本发明提供了包含本发明的化合物和另一种治疗剂的药物组合物。任选地，该药物组合物可包含如上所述的药学上可接受的载体。在一些实施方案中，式I、II或III的化合物与选自以下项的至少一种另外的药剂共同施用：病毒抑制剂或疫苗。

这些另外的药剂可与本发明的化合物组合以产生单一药物剂型。另选地，这些另外的药剂可作为多剂型的一部分单独施用于患者，例如，使用试剂盒。此类另外的药剂可在施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐之前、同时或之后施用于患者。

每天适用的本发明化合物的剂量范围通常为体重的0.01mg/kg至100mg/kg，有时为体重的0.1mg/kg至50mg/kg。每个剂量单位可方便地含有5％至95％活性化合物(w/w)。有时此类制剂含有20％至80％活性化合物。

实际药学有效量或治疗剂量当然取决于本领域技术人员已知的因素，诸如患者的年龄和体重、施用途径和疾病严重程度。在任何情况下，组合将以允许基于患者的独特病状递送药学有效量的剂量和方式施用。

当本发明的组合物包含本发明的化合物和一种或多种另外的治疗剂或预防剂的组合时，该化合物和该另外的药剂两者可以在单一疗法方案中通常施用的剂量的约10％至100％之间，例如约10％至80％之间的剂量水平存在。

预期用于此类组合疗法的抗病毒剂包括有效抑制病毒在人中形成和/或复制的药剂(化合物或生物制剂)，包括但不限于干扰病毒在人中形成和/或复制所必需的宿主或病毒机制的药剂。

本发明的许多化合物含有一个或多个手性中心。这些化合物可以单一异构体或以异构体的混合物形式制备并使用。用于分离异构体(包括非对映体和对映体)的方法是本领域已知的，并且本文描述了合适方法的实施例。在某些实施方案中，本发明的化合物用作单一基本上纯的异构体，意味着该化合物的至少90％的样品是指定的异构体，并且小于10％的样品是任何其它异构体或异构体的混合物。在一些实施方案中，至少95％的样品是单一异构体。在异构体之间的体外活性差异相对较小，例如小于约4倍的情况下，可使用诸如本文所述的方法，基于细胞培养物中针对病毒复制的活性水平选择单一异构体：可选择IC-50或EC-50较低的异构体。

本发明的化合物可通过以下通用合成路线合成，其具体示例在实施例中更详细地描述。

本发明还提供了制备如本文所述的式I、II或III的化合物的方法和可用于制备式I、II或III的化合物的中间体。

本发明还包括本方法的任何变体，其中将在其任何阶段可获得的中间产物用作起始材料并进行其余步骤，或者其中起始材料在反应条件下原位形成，或者其中反应组分以它们的盐或光学纯材料的形式使用。

本发明还涉及所述方法的那些形式，其中将在所述方法的任何阶段作为中间体可获得的化合物用作起始材料并进行其余方法步骤，或者其中在反应条件下形成起始材料或以衍生物的形式使用，例如以保护形式或以盐的形式使用，或者可通过根据本发明的方法获得的化合物在工艺条件下制备并进一步原位处理。

术语“光学异构体”或“立体异构体”是指对于本发明的给定化合物可以存在并包括几何异构体的各种立体异构构型中的任一种。应理解，取代基可附接在碳原子的手性中心。术语“手性”是指在其镜像配偶体上具有不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指在其镜像配偶体上可重叠的分子。因此，本发明包括化合物的对映体、非对映体或外消旋体。“对映体”是一对立体异构体，其为彼此的不可重叠镜像。一对对映体的1:1混合物为“外消旋”混合物。该术语用于在适当时表示外消旋混合物。“非对映体”是具有至少两个不对称原子但不是彼此镜像的立体异构体。根据卡恩-英格尔-普雷洛格R-S体系(Cahn-lngold-PrelogR-S system)指定绝对立体化学。当化合物是纯对映体时，每个手性碳的立体化学可由R或S指定。绝对构型未知的拆分的化合物可根据它们在钠D线的波长下旋转平面偏振光的方向(右旋或左旋)指定为(+)或(-)。本文所述的某些化合物含有一个或多个不对称中心或轴，并且因此可产生对映体、非对映体和可根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-的其它立体异构形式。

根据起始材料和程序的选择，化合物可以一种可能的异构体的形式或作为它们的混合物，例如作为纯光学异构体，或作为异构体混合物，诸如外消旋体和非对映体混合物存在，这取决于不对称碳原子的数目。本发明旨在包括所有此类可能的立体异构体，包括外消旋混合物、非对映混合物和光学纯形式。光学活性(R)-异构体和(S)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。如果化合物含有双键，则取代基可以是E或Z构型。如果化合物含有二取代的环烷基，则环烷基取代基可具有顺式构型或反式构型。还旨在包括所有互变异构形式。

可基于成分的物理化学差异，例如通过色谱法和/或分级结晶将任何所得的异构体混合物分离成纯的或基本上纯的几何或光学异构体或非对映体。

可通过已知方法，例如通过分离它们用光学活性酸或碱获得的非对映盐，并释放光学活性酸性或碱性化合物将最终产物或中间体的任何所得外消旋体拆分成光学对映体。具体地，碱性部分因此可用于将本发明的化合物拆分成它们的光学对映体，例如通过与光学活性酸(例如酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二乙酰基酒石酸、二-O,O'-对甲苯酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸)形成的盐的分级结晶。外消旋产物还可通过手性色谱法，例如使用手性吸附剂的高压液相色谱(HPLC)来拆分。

此外，本发明的化合物(包括它们的盐)还可以它们的水合物的形式获得，或包括用于其结晶的其它溶剂。本发明的化合物可以固有地或通过设计与药学上可接受的溶剂(包括水)形成溶剂化物；因此，本发明旨在涵盖溶剂化和非溶剂化形式。术语“溶剂化物”是指本发明化合物(包括其药学上可接受的盐)与一种或多种溶剂分子的分子复合物。此类溶剂分子是已知对接受者无害的药物领域中常用的那些溶剂分子，例如，水、乙醇等。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。

本发明的化合物(包括它们的盐、水合物和溶剂化物)可以固有地或通过设计形成多晶型物。

如本文所用，术语“盐(salt)”或“盐(salts)”是指本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。“盐”具体地包括“药学上可接受的盐”。术语“药学上可接受的盐”是指保留本发明化合物的生物有效性和特性并且通常不是生物学上或以其它方式不期望的盐。在许多情况下，本发明的化合物能够借助于氨基基团和/或羧基基团或与其类似的基团形成酸盐和/或碱盐。

药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸形成，例如乙酸盐、天冬氨酸、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡萄糖庚酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。

可由其衍生盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。

可由其衍生盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。药学上可接受的碱加成盐可由无机碱和有机碱形成。

可由其衍生盐的无机碱包括例如铵盐和来自元素周期表第I列至第XII列的金属。在某些实施方案中，所述盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜；特别合适的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。

可由其衍生盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺、碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、苄星、胆碱盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨基丁三醇。

本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由碱性或酸性部分合成。通常，此类盐可通过使这些化合物的游离酸形式与化学计量的适当碱(诸如氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化镁、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、碳酸镁、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾等)反应，或通过使这些化合物的游离碱形式与化学计量的适当酸反应来制备。此类反应通常在水中或在有机溶剂中，或在两者的混合物中进行。通常，在可行的情况下，需要使用非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。另外的合适的盐的列表可例如在“Remington'sPharmaceutical Sciences”，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；和Stahl和Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,andUse”(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中找到。

本文给出的任何化学式旨在表示本发明化合物的未标记形式以及同位素标记形式，其具有至多三个具有非天然同位素分布的原子，例如富含氘或¹³C或¹⁵N的位点。同位素标记的化合物具有由本文给出的化学式描绘的结构，除了一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数而不是天然丰度质量分布的原子替代。可有用地过度掺入本发明化合物中的同位素的示例分别包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，诸如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、¹²⁵I。本发明包括各种同位素标记的本发明化合物，例如其中放射性同位素诸如³H和¹⁴C，或其中非放射性同位素诸如²H和¹³C以基本上高于正常同位素分布的水平存在的那些。此类同位素标记的化合物可用于代谢研究(例如用¹⁴C)、反应动力学研究(例如用²H或³H)、检测或成像技术，诸如正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射电子计算机断层扫描术(SPECT)，包括药物或底物的组织分布测定法，或者可用于患者的放射治疗。具体地，¹⁸F标记的本发明化合物对于PET或SPECT研究可能是特别期望的。同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与所附实施例和制备中所述的那些方法类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替通常采用的非标记试剂来制备。标记的样品可用于相当低的同位素掺入，诸如其中使用放射性标记来检测痕量的化合物。

此外，用较重的同位素，尤其是氘(即²H或D)的更广泛取代可提供由更大的代谢稳定性而产生的某些治疗优势，例如体内半衰期增长或剂量要求降低或治疗指数改善。应理解，本文中的氘被认为是本发明化合物的取代基，并且通常具有氘作为取代基的化合物的样品在标记位置处具有至少50％的氘掺入。此类较重同位素(特别是氘)的浓度可由同位素富集因子定义。如本文所用，术语“同位素富集因子”意指特定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比率。如果本发明化合物中的取代基表示为氘，则此类化合物对于每个指定氘原子的同位素富集因子为至少3500(在每个指定氘原子处掺入52.5％氘)、至少4000(掺入60％氘)、至少4500(掺入67.5％氘)、至少5000(掺入75％氘)、至少5500(掺入82.5％氘)、至少6000(掺入90％氘)、至少6333.3(掺入95％氘)、至少6466.7(掺入97％氘)、至少6600(掺入99％氘)或至少6633.3(掺入99.5％氘)。

根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括其中结晶溶剂可以被同位素取代的那些，例如D₂O、d⁶-丙酮、d⁶-DMSO。

含有能够充当氢键供体和/或受体的基团的本发明化合物可以能够与合适的共晶形成体形成共晶体。这些共晶体可通过已知的共晶形成程序由本发明的化合物制备。此类程序包括在溶液中将本发明化合物与共晶形成体在结晶条件下研磨、加热、共升华、共熔融或接触，以及分离由此形成的共晶体。合适的共晶形成体包括WO 2004/078163中描述的那些。因此，本发明进一步提供了包含本发明化合物的共晶体。

本发明的化合物可通过已知方法施用，包括口服、肠胃外、吸入等。在某些实施方案中，本发明的化合物以丸剂、锭剂、片剂、胶囊、溶液或悬浮液形式口服施用。在其它实施方案中，通过注射或输注施用本发明的化合物。输注通常通过静脉进行，通常在约15分钟至4小时之间的时间段内。在其它实施方案中，本发明的化合物经鼻内或通过吸入施用；吸入方法特别适用于治疗呼吸道感染。本发明的化合物表现出口服生物利用率，因此在一些实施方案中，可口服施用化合物。

本发明的化合物还可与用于治疗受试者的病毒感染的其它药剂(组合伴侣)(例如，是式I或不是式I的另外的抗病毒剂)组合使用。

术语“组合”意指一个剂量单位形式的固定组合，作为适用于同时或依序使用的单独剂型，或作为用于组合施用的成套试剂盒，其中本发明的化合物和组合伴侣可同时独立施用或在时间间隔内分开施用，该时间间隔尤其允许组合伴侣显示出协作，例如协同、效果或它们的任何组合。

在本发明的某些实施方案中，本发明的化合物与第二抗病毒剂(诸如本文命名的那些抗病毒剂)组合使用。

第二抗病毒剂可与本发明的化合物组合施用，其中第二抗病毒剂在一种或多种本发明的化合物之前、同时或之后施用。当需要同时施用本发明的化合物与第二药剂且施用途径相同时，则可将本发明的化合物与第二药剂配制成相同的剂型。含有本发明的化合物和第二药剂的剂型的示例是片剂或胶囊。

在一些实施方案中，本发明的化合物和第二抗病毒剂的组合可提供协同活性。本发明的化合物和第二抗病毒剂可一起、单独但同时或依序施用。

化合物的“有效量”是治疗或预防本文所述的病毒感染和/或疾病或病状所必需或足够的量。在一个示例中，式I的病毒抑制剂的有效量是足以治疗受试者的病毒感染的量。有效量可根据诸如受试者的体型和体重、疾病的类型或本发明的特定化合物的因素而变化。例如，本发明的化合物的选择可影响“有效量”的构成。本领域的普通技术人员将能够研究本文所含有的因素，并且在没有过度实验的情况下确定关于本发明的化合物的有效量。

施用方案可影响有效量的构成。本发明的化合物可以在病毒感染发作之前或之后施用于受试者。此外，可以每天或依序施用几个分开的剂量以及交错的剂量，或剂量可以连续输注，或可以是弹丸式注射。此外，本发明化合物的剂量可以如治疗或预防情况的紧急程度所指示成比例地增加或减少。

本发明的化合物可用于治疗如本文所述的状态、病症或疾病，或用于制造用于治疗这些疾病的药物组合物。本发明提供了使用本发明的化合物治疗这些疾病或制备用于治疗这些疾病的含有本发明化合物的药物组合物的方法。

术语“药物组合物”包括适用于施用于哺乳动物例如人的制剂。当本发明的化合物作为药物施用于哺乳动物(例如，人)时，它们可以本身给予或作为包含例如0.1％至99.5％(有时0.5％至90％)的至少一种式(I)化合物或其任何亚属作为活性成分与药学上可接受的载体，或任选地两种或更多种药学上可接受的载体的组合的药物组合物给予。

短语“药学上可接受的载体”是本领域公认的，并且包括适用于向哺乳动物施用本发明化合物的药学上可接受的材料、组合物或媒剂。载体包括涉及将主题试剂从身体的一个器官或部分携带或运输到身体的另一器官或部分的液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料。每种载体在与制剂的其它成分相容并且对患者没有伤害的意义上必须是“可接受的”。可以充当药学上可接受的载体的材料的一些示例包括：糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，诸如可可油和栓剂蜡；油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，诸如丙二醇；多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物制剂中所采用的其它无毒相容物质。通常，药学上可接受的载体是灭菌的和/或基本上不含热原。

润湿剂、乳化剂和润滑剂(诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)以及着色剂、释放剂、涂层剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于组合物中。

药学上可接受的抗氧化剂的示例包括：水溶性抗氧化剂，诸如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，诸如棕榈酸抗坏血酸酯、丁基化羟基苯甲醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，诸如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。

本发明的制剂包括适用于口服、鼻腔、吸入、局部、透皮、颊、舌下、直肠、阴道和/或肠胃外施用的那些。制剂可方便地以单位剂型提供，并且可通过药学领域熟知的任何方法来制备。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将通常是产生治疗效果的化合物的量。通常，在100％中，该量将在活性成分的约1％至约99％，有时约5％至约70％，有时约10％至约30％的范围内。

制备这些制剂或组合物的方法包括使本发明的化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分缔合的步骤。通常，通过使本发明的化合物与液体载体或细分散的固体载体或两者均匀且紧密地缔合，然后，如果需要，使产物成形来制备制剂。

适用于口服施用的本发明的制剂可呈胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味基质，例如，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、散剂、颗粒的形式，或呈水性或非水性液体中的溶液或悬浮液的形式，或呈水包油或油包水液体乳液的形式，或呈酏剂或糖浆的形式，或呈锭剂(使用惰性基质，诸如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)的形式和/或呈漱口剂的形式等，它们各自含有预定量的本发明的化合物作为活性成分。本发明的化合物还可以作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用。

在用于口服施用的本发明的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、散剂、颗粒等)中，将活性成分与一种或多种药学上可接受的载体(诸如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下项中的任一种混合：填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘结剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；湿润剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；溶液阻滞剂，诸如石蜡；吸收促进剂，诸如季铵化合物；润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；吸收剂，诸如高岭土和膨润土；润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠以及它们的混合物；和着色剂。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，药物组合物还可包含缓冲剂。类似类型的固体组合物也可用作使用诸如乳糖(lactose/milk sugar)等赋形剂，以及高分子量聚乙二醇等的软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂。

片剂可通过任选地与一种或多种辅助成分压制或模制来制备。可使用粘结剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，羟基乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备压制片剂。模制片剂可通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备。

本发明的药物组合物的片剂和其它固体剂型(诸如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒)可任选地用包衣和壳体诸如肠溶包衣和药物配制领域熟知的其它包衣进行刻痕或制备。还可使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素以提供所需的释放曲线、其它聚合物基质、脂质体和/或微球来调配它们以便在其中提供活性成分的缓慢或受控释放。它们可通过例如经细菌保持过滤器过滤，或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述无菌固体组合物可在使用前立即溶解在无菌水或一些其它无菌可注射介质中。这些组合物还可任选地含有遮光剂，并且可以是仅在或例如在胃肠道的某一部分任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的示例包括聚合物质和蜡。如果适当的话，活性成分还可以呈具有一种或多种上述赋形剂的微包封形式。

用于口服施用本发明化合物的液体剂型包括药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如，水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃基醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，以及它们的混合物。

除了惰性稀释剂，所述口服组合物还可包含佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。

除了活性化合物之外，悬浮液还可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶，以及它们的混合物。

用于直肠或阴道施用的本发明的药物组合物的制剂可以栓剂形式呈现，其可通过将一种或多种本发明的化合物与一种或多种合适的非刺激性赋形剂或载体混合来制备，所述非刺激性赋形剂或载体包括例如可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸酯，并且在室温下是固体，但在体温处是液体，并且因此将在直肠或阴道腔中溶化并释放活性化合物。

适用于阴道施用的本发明的制剂还包括含有如本领域已知适当的此类载体的阴道栓剂、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂。

用于局部或透皮施用本发明化合物的剂型包括散剂、喷剂、膏剂、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、贴剂和吸入剂。活性化合物可在无菌条件下与药学上可接受的载体以及与可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。

除了本发明的活性化合物之外，膏剂、糊剂、乳膏和凝胶还可含有赋形剂，诸如动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或它们的混合物。

除了本发明的化合物之外，散剂和喷剂还可含有赋形剂，诸如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷剂可另外含有常规推进剂，诸如氯氟烃和挥发性未取代的烃，诸如丁烷和丙烷。

透皮贴剂具有提供本发明的化合物向身体的受控递送的额外优点。此类剂型可通过将化合物溶解或分散在适当介质中来制备。还可使用吸收增强剂来增加所述化合物穿过皮肤的通量。此类通量的速率可通过提供速率控制膜或将活性化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制。

眼用制剂、眼膏剂、散剂、溶液等也被设想处于本发明的范围内。

适用于肠胃外施用的本发明的药物组合物可包含一种或多种本发明的化合物与一种或多种药学上可接受的载体的组合，该药学上可接受的载体诸如无菌等渗水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液，或可刚好在使用前重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌散剂，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质，或悬浮剂或增稠剂。

可用于本发明的药物组合物中的合适的水性和非水性载体的示例包括水、乙醇、乙二醇醚、多元醇(诸如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)以及它们的合适的混合物、植物油(诸如橄榄油)和可注射有机酯(诸如油酸乙酯)。可例如通过使用包衣材料(诸如卵磷脂)、在分散体的情况下通过维持所需的粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。

这些组合物还可含有佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可通过包括各种抗菌剂和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)来确保防止微生物的作用。还可能期望在这些组合物中包含等渗剂，诸如糖、氯化钠等。此外，可通过包含延迟吸收的试剂，诸如单硬脂酸铝和明胶来实现可注射药物形式的延长吸收。

在一些情况下，为了延长药物的作用，可能需要减缓药物从皮下或肌内注射的吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液来实现。药物的吸收速率则取决于其溶解速率，继而又可取决于晶体大小和结晶形式。另选地，通过将药物溶解或悬浮在油媒介物中实现以肠胃外方式施用的药物形式的延迟吸收。

通过在可生物降解的聚合物(诸如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成主题化合物的微囊基质来制备可注射长效形式。根据药物与聚合物的比率以及所采用的特定聚合物的性质，可控制药物释放速率。其它可生物降解的聚合物的示例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。也通过将药物包埋在与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备长效可注射制剂。

本发明的制剂可以口服、肠胃外、局部或直肠方式给药。它们当然以适用于每种施用途径的形式给药。例如，它们以片剂或胶囊形式，通过注射、吸入、眼洗剂、膏剂、栓剂等施用，通过注射、输注或吸入施用；通过洗剂或膏剂局部施用；以及通过栓剂直肠施用。

如本文所用，短语“肠胃外施用”和“以肠胃外方式施用”意指除了肠内和局部施用以外的施用模式(通常通过注射)，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心脏内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射和输注。静脉内输注有时是本发明的化合物的递送方法。输注可用于递送单个日剂量或多剂量。在一些实施方案中，本发明的化合物通过在15分钟至4小时之间，通常在0.5小时至3小时之间的间隔内输注来施用。此类输注可每天使用一次、每天使用两次或每天使用至多三次。

如本文所用，短语“全身施用”、“以全身方式施用”、“外周施用”和“以外周方式施用”意指化合物、药物或其它材料不直接施用到中枢神经系统中，使得其进入患者的系统，并且因此经受代谢和其它类似过程，例如皮下施用。

这些化合物可通过任何合适的施用途径施用于人和其它动物用于治疗，包括口服、经鼻(如通过例如喷剂)、直肠、阴道内、肠胃外、脑池内和局部，如通过散剂、膏剂或滴剂，包括颊和舌下。

无论所选择的施用途径如何，通过本领域技术人员已知的常规方法将可以合适的水合形式使用的本发明的化合物和/或本发明的药物组合物配制成药学上可接受的剂型。

可以改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便获得对于特定患者、组合物和施用模式有效实现所需治疗反应而对患者没有毒性的活性成分的量。

所选剂量水平将取决于多种因素，包括所采用的本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性；施用途径；施用时间；所采用的特定化合物的排泄速率；治疗的时间；与所采用的特定化合物组合使用的其它药物、化合物和/或材料；所治疗的患者的年龄、性别、体重、病状、一般健康状况和既往病史以及医学领域中熟知的类似因素。

具有本领域普通技术的医师或兽医可容易地确定和规定所需的药物组合物的有效量。例如，医师或兽医可以低于为了实现所需治疗效果所需要的水平开始药物组合物中所采用的本发明化合物的剂量，并逐渐增加剂量直到实现所需效果。

通常，本发明的化合物的合适日剂量将是有效产生治疗效果的最低剂量的化合物的量。这种有效剂量将通常取决于上述因素。通常，当用于指示效果时，用于患者的本发明的化合物的静脉内和皮下剂量将在约0.0001至约100mg/千克体重/天，有时约0.01至约50mg/kg/天，以及有时约0.1至约20mg/kg/天的范围内。有效量是预防或治疗病毒感染的量。

如果需要，活性化合物的有效日剂量可以每天单一剂量施用或在整个当天以适当间隔单独施用的两个、三个、四个、五个、六个或更多个子剂量任选地以单位剂型施用。口服或通过吸入递送的化合物通常以每天一次至四次剂量施用。通过注射递送的化合物通常每天施用一次，或每隔一天施用一次。通过输注递送的化合物通常以每天一次至三次剂量施用。当一天内施用多个剂量时，所述剂量可以约4小时、约6小时、约8小时或约12小时的间隔施用。

虽然可以单独施用本发明的化合物，但可将该化合物作为药物组合物，诸如本文所述的那些施用。因此，使用本发明的化合物的方法包括施用作为药物组合物的化合物，其中在施用前将至少一种本发明的化合物与药学上可接受的载体混合。

通用合成程序

如本文所述的化合物可通过以下通用合成路线合成，其具体示例在实施例中更详细地描述。

用于合成本发明化合物的所有起始材料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂都是可商购的或可通过本领域的普通技术人员已知的有机合成方法(Houben-Weyl第4版1952,Methods of Organic Synthesis,Thieme，第21卷)制备。

缩写列表

Ac 乙酰基

ACN或MeCN 乙腈

AcOEt/EtOAc 乙酸乙酯

AcOH 乙酸

Aq 水性

Bn 苄基

Bu 丁基(nBu＝正丁基，tBu＝叔丁基)

CDI 羰基二咪唑

CH₃CN 乙腈

DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯

Boc₂O 二碳酸二叔丁酯

DCE 1,2-二氯乙烷

DCM 二氯甲烷

DIAD 偶氮二甲酸二异丙酯

DiBAl-H 二异丁基氢化铝

DIPEA或DIEA N-乙基二异丙基胺

DMA N,N-二甲基乙酰胺

DMAP 二甲基氨基吡啶

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

EI 电喷雾电离

Et₂O 二乙醚

Et₃N 三乙胺

Ether 二乙醚

EtOAc或EA 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

FC 快速色谱法

h 小时

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐

HBTU O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐

HCl 盐酸

HMPA 六甲基磷酰胺

HOBt 1-羟基苯并三唑

HPLC 高效液相色谱法

H₂O 水

IPA 异丙醇

L 升

LC-MS 液相色谱质谱

LiHMDS 双(三甲基硅烷基)氨基锂

MgSO₄ 硫酸镁

Me 甲基

MeI 碘甲烷

MeOH 甲醇

mg 毫克

min 分钟

mL 毫升

MS 质谱

MsCl 甲磺酰氯

NaHCO₃ 碳酸氢钠

Na₂SO₄ 硫酸钠

NH₂OH 羟胺

Pd/C 钯/炭

Pd(OH)₂ 氢氧化钯

PG 保护基

Ph 苯基

Ph₃P 三苯基膦

Prep 制备型

Rf 比移值

RP 反相

Rt 保留时间

RT 室温

SFC 超临界流体色谱法

SiO₂ 硅胶

SOCl₂ 氯化亚砜

丙基膦酸酐

TBAF 四丁基氟化铵

TBDMS 叔丁基二甲基硅烷基

TBTU O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

TsCl 甲苯磺酰氯

TsOH 甲苯磺酸

考虑到本文提供的实施例和方案，使用本领域技术人员已知的程序由常见可获得的化合物制备本发明的化合物。

在该文本的范围内，除非上下文另有说明，否则仅将不是本发明化合物的特定所需最终产物的成分的可容易移除的基团指定为“保护基”。通过此类保护基保护官能团，保护基本身和它们的裂解反应描述于例如标准参考著作中，例如Science of Synthesis:Houben-Weyl Methods of Molecular Transformation.Georg Thieme Verlag,Stuttgart,Germany.2005.第41627页(URL:http://www.science-of-synthesis.com(电子版本，第48卷))；J.F.W.McOmie，“Protective Groups in Organic Chemistry”，PlenumPress,London and New York 1973，T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protective Groups inOrganic Synthesis”，第三版，Wiley,New York 1999，“The Peptides”；第3卷(编辑：E.Gross和J.Meienhofer)，Academic Press,London and New York 1981，“Methoden derOrganischen Chemie”(Methods of Organic Chemistry)，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974,H.-D.Jakubke和H.Jeschkeit,“

Peptide,Proteine”(Amino acids,Pep-tides,Proteins),Verlag Chemie,Weinheim,Deerfield Beach，和Basel 1982，以及Jochen Lehmann，“Chemie der Kohlenhydrate:Monosaccha-ride und Derivate”(Chemistry of Carbohydrates:Monosaccharides andDerivatives),Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974。保护基的特征在于它们可例如通过溶剂分解、还原、光解或另选地在生理条件下(例如，通过酶裂解)容易地去除(即，不发生不期望的副反应)。

具有至少一个成盐基团的本发明化合物的盐可以本身已知的方式制备。例如，具有酸基的本发明化合物的盐可例如通过用金属化合物，诸如合适的有机羧酸的碱金属盐，例如2-乙基己酸的钠盐；有机碱金属或碱土金属化合物，诸如对应的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，诸如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾；对应的钙化合物或用氨或合适的有机胺来处理这些化合物来形成，有时使用化学计量或仅少量过量的成盐剂。本发明化合物的酸加成盐以常规方式获得，例如通过用酸或合适的阴离子交换试剂处理化合物。含有酸和碱性成盐基团(例如游离羧基基团和游离氨基基团)的本发明化合物的内盐可例如通过例如用弱碱将盐(诸如酸加成盐)中和至等电点，或通过用离子交换剂处理来形成。

盐可以常规方式转化成游离化合物；金属盐和铵盐可例如通过用合适的酸处理来转化，并且酸加成盐例如通过用合适的碱性试剂处理来转化。

可根据本发明获得的异构体的混合物可以本身已知的方式分离成单独的异构体；非对映体可例如通过在多相溶剂混合物之间分配、重结晶和/或色谱分离(例如在硅胶上)或通过例如在反相柱上的中压液相色谱来分离，并且外消旋体可例如通过用光学纯成盐试剂形成盐并分离如此可获得的非对映体混合物，例如借助于分级结晶，或通过在光学活性柱材料上的色谱法来分离。

中间体和最终产物可根据标准方法，例如使用色谱方法、分配方法、(重)结晶等进行加工和/或纯化。

实施例

通过以下实施例进一步说明本发明，这些实施例不应解释为限制性的。在整个实施例中使用的测定在本领域中是充分确立的：这些测定中的功效证明通常被认为是受试者中功效的预测。

本发明的化合物可通过本领域的普通技术人员已知的有机合成方法，参考以下反应方案和实施例来制备。以下方案中提供了用于合成式(I)的化合物的通用方法。

LC-MS高分辨率质谱

使用具有电喷雾电离源的LTQ-XL Orbitrap质谱仪(ThermoFisher Scientific)记录ESI-MS数据。MS系统的分辨率为大约30000。通过UPLC(Acquity,Waters)将候选药物从样品探针输注到质谱仪中。在Acquity UPLC BEH C18 1×50mm柱上进行分离，流速为0.15mL/min，3min内梯度为5％至95％。溶剂A为含有0.1％三氟乙酸的水，并且溶剂B为含有0.1％三氟乙酸的75％甲醇和25％异丙醇。已经发现系统的质量准确度<5ppm。

实施例1和实施例2：N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10- 二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺

方案1：

4-硝基异苯并呋喃-1,3-二酮(2)：

将3-硝基邻苯二甲酸1(1.0kg，4.7摩尔)于Ac₂O(1Ltr)中的初始悬浮液在140℃下回流2.5小时。然后将其冷却至80℃并在剧烈搅拌下缓慢添加到乙醚(4Ltr)中。通过经布氏漏斗过滤收集沉淀物，并且将其用Et₂O洗涤，得到呈固体状的产物。

4-硝基-1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-茚-2-羧酸乙酯(3)：

在环境温度下，向酸酐2(50g，0.26摩尔)于无水DCM(260mL)中的悬浮液中添加乙酰乙酸乙酯(42mL，0.31摩尔)和Ac₂O(48.5mL，0.52摩尔)。在室温下，在30分钟的持续时间内，向该悬浮液中滴加Et₃N(108mL，0.78摩尔)。将其在相同温度下再搅拌15分钟，然后蒸发掉DCM。然后将获得的粗品溶解于2升水中并冷却至0℃。将其用顶置式搅拌器固定，并且在剧烈搅拌条件下，将300mL 2N HCl滴加到其中，保持低于0℃的温度。将其在0℃下再搅拌15分钟，然后经布氏漏斗过滤并用冰冷的水(500mL)洗涤。然后将其风干三天以得到产物。

4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮(4)：

将4-硝基-1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-茚-2-羧酸乙酯3(272.5g，1.04摩尔)溶于1升的MeCN：水(20:1，1.0M)中。在室温下向该悬浮液中缓慢加入TFA(60mL，1.14摩尔)，然后保持在50℃下加热。4小时后，将反应物料在旋转蒸发仪上浓缩，直到剩余大约100mL溶剂。然后将沉淀的固体经布氏漏斗滤出，并用(1:1)CHCl₃：己烷洗涤。这得到固体产物，并且再次浓缩滤液以在第二批中得到更多产物。

方案2：

2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮(5)：

将4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮(4)(250g，1.31摩尔)溶于1,4-二噁烷(2升)和AcOH(200ml)中。在室温下向其中添加SeO₂(291g，2.62摩尔)并在110℃下再保持回流4小时。将其在室温下再搅拌12小时。然后向其中加入500g-600g硅藻土。将其充分搅拌并经硅藻土垫过滤。将残余物用乙酸乙酯(300mL-500mL)洗涤。将获得的滤液浓缩，得到粗物料，然后将其原样用于下一步骤。

4b,9b-二羟基-7-异丙基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (7)：

将2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5(粗品，1.31摩尔)溶于冰AcOH(2升)中并加入3-异丙基苯酚6(196g，1.44摩尔)，并再保持回流10小时。然后将其完全浓缩并经硅胶柱色谱法(30％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

9b-氯-4b-羟基-7-异丙基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10- 酮(8)：

将4b,9b-二羟基-7-异丙基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮7(50g，0.147摩尔)溶于DCM(500mL)中，并且然后在单个批次中向该悬浮液中加入草酰氯(1.2当量)。然后向其中缓慢加入DMF(50mL)。然后将反应物料在室温下再搅拌6小时。将其用水(500mL)淬灭并分离各层。将水层用DCM(300mL×2)萃取。将合并的有机层用水(300mL)和盐水(300mL)洗涤。将其经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗物料，然后将该粗物料经短二氧化硅垫(30％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到纯产物。mp：¹H-NMR(300MHz,CDCl₃):δ1.18(dd,J＝3.6Hz,J＝6.9Hz,6H),2.84(七重峰，J＝6.9Hz,1H),6.34(s,1H),6.70(s,1H),6.94(dd,J＝1.0Hz,J＝7.8Hz,1H),7.45(d,J＝7.8Hz,1H),7.81-7.83(m,1H),8.21(m,1H),8.52(m,1H)。

9b-氨基-4b-羟基-7-异丙基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 10-酮(9)：

将9b-氯-4b-羟基-7-异丙基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮8(36.0g，0.1摩尔)溶于THF(350mL)中，并冷却至-40℃。使用滴液漏斗向其中添加NH₃于IPA(100mL，0.20摩尔)中的2.0M溶液，并且将温度保持低于-20℃。在-20℃下监测反应物料一小时，然后使其升温至室温。将其在室温下搅拌直至反应完成，然后完全浓缩。将粗品溶于乙酸乙酯(500mL)中并用水(200mL×2)和盐水(100mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥，然后浓缩，得到粗物料，将该粗物料经短二氧化硅垫纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ1.18(d,J＝6.9Hz,6H),2.84(七重峰，J＝6.9Hz,1H),3.46(s,1H),6.25(s,1H),6.74(s,2H),6.90(dd,J＝1.2Hz,J＝7.8Hz,1H),7.55(d,J＝7.8Hz,1H),7.77(t,J＝8.1Hz,1H),8.22(dd,J＝1.2Hz,J＝8.4Hz,1H),8.52(dd,J＝1.2Hz,J＝8.1Hz,1H)。

N-(4b-羟基-7-异丙基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(10)：

将9b-氨基-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮9(950mg，2.80mmol)溶于AcOH(10mL，0.1M)中，并且在环境温度下向其中添加乙酸酐(0.263mL，2.8mmol)。将其在80℃下再加热30分钟。将反应物料浓缩，然后溶于EA(100mL)中。将其用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将获得的粗品经硅胶柱色谱法(30％-40％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

N-(1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(11)：

将N-(4b-羟基-7-异丙基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺10(500mg，1.3mmol)溶于EtOH：水(10:1，15mL，0.1M)中，并且向其中添加Fe粉(0.219mg，3.92mmol)。向其中加入催化量的浓HCl(3滴)并使其在90℃下再回流3小时。将反应物料在热条件下经硅藻土过滤，并且使用EA洗涤残余物。将其浓缩，然后溶于EA(250mL)中。将其用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将获得的粗品经硅胶柱色谱法(1:1＝EA:己烷)纯化，得到纯产物。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2- b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(12)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b, 10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(13)：

将N-(1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(560mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，SFC＝100ml/min，CO2/EtOH＝70/30，236巴)纯化，得到243mg的N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺12(峰2，tR 4.33min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ7.41-7.50(m,1H),7.32-7.40(m,1H),6.94-7.03(m,1H),6.79-6.91(m,1H),6.58-6.74(m,2H),2.77-2.94(m,1H),1.96-2.05(m,3H),1.12-1.26(m,6H)和246mg的N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-异丙基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺13(峰1，tR 2.30min.)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ:7.39-7.46(m,1H),7.35(brd,J＝7.8Hz,1H),6.97(br d,J＝7.3Hz,1H),6.84(br d,J＝7.6Hz,1H),6.61-6.69(m,2H),2.82(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.98(s,3H),1.17(dd,J＝6.9,1.6Hz,6H)。

实施例3-实施例5：N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢- 9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(19)；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代- 7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(20)和N-((4bS, 9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 9b-基)乙酰胺(21)

将N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(19)(500mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，SFC＝100ml/min，CO2/IPA＝80/20，226巴)纯化，得到N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(20)(峰2，tR 4.50min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ7.58-7.70(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.26(br d,J＝7.80Hz,1H),6.97-7.11(m,2H),6.67-6.83(m,1H),2.02(s,3H)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(21)(峰1，tR2.49min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:-1.13(br d,J＝7.6Hz,1H),-1.29(br t,J＝7.6Hz,1H),-1.50(br d,J＝7.3Hz,1H),-1.79--1.69(m,2H),-2.09--1.95(m,1H),-6.75(s,3H)。

方案3：

4b,9b-二羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 10-酮(15)：

向4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮4(42.1g，0.22mol)于1,4-二噁烷：AcOH(10:1，330mL，0.6M)中的溶液中添加SeO₂(48.8g，0.44mol)。将所得溶液在130℃下回流3小时。然后将其冷却并且使用EA(～200mL)经硅藻土过滤。将滤液完全浓缩，并且将粗品2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5溶于MeSO₃H(350mL，0.6M)中。向其中滴加3-(三氟甲基)苯酚14(29mL，0.24mol)并使其在室温(30℃)下再搅拌24h。然后将反应物料在冰水(1500mL)中淬灭并且滤出固体。将残余物溶解于EA(500mL)中并用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩成粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-40％ EA的己烷溶液与5％-10％ DCM)纯化，得到纯产物。

9b-氯-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 10-酮(16)：

将4b,9b-二羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮15(25g，68mmol)溶于DCM(270mL，0.25M)中，并在室温下加入草酰氯(7.1mL，82mmol)。向其中缓慢添加DMF(26mL，340mmol)并使其在环境温度(20℃)下搅拌。然后将反应混合物在室温(20℃)下再搅拌6小时。再次向反应物中加入草酰氯(1.8mL，0.3当量)，并使其再搅拌12小时。将反应混合物用水(～300mL)稀释。将水层用DCM(～300mL×2)萃取。将合并的有机层用水(～300ml)和盐水(～300mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-25％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

9b-氨基-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(17)：

将9b-氯-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮16(20.5g，53mmol)溶于THF(350mL，0.15M)中，并冷却至-40℃。在10min的持续时间内向其中滴加2.0M NH₃的IPA溶液(65mL，0.13mol)。然后将反应混合物在-40℃下再搅拌3小时。然后将其用EA(～200mL-300mL)稀释并用10％盐水(～200mL×2)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。

N-(4b-羟基-4-硝基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(18)：

将9b-氨基-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮17(21g，50mmol)溶于冰AcOH(250mL，0.2M)中，并立即加入Ac₂O(9.5mL，0.1mol)。然后将反应混合物在80℃下再加热60分钟。将反应混合物浓缩得到粗品。将粗物料经硅胶柱色谱法(20％-40％EA/Hx与10％ DCM作为共溶剂)直接纯化，得到纯产物。

N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(19)：

将N-(4b-羟基-4-硝基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺18(9.0g，22mmol)溶于EtOH：水(10:1，110mL，0.2M)中，并且向其中加入Fe粉(3.7g，66mmol)，随后加入浓HCl(0.5mL)。将其在90℃下再回流3小时。在温热条件下使用热EA(～50mL-100mL)将反应物料经硅藻土过滤。将滤液浓缩并溶于EA(～600mL-800mL)中，并用水(400mL)洗涤。将水层用EA(～200mL×2)萃取。将合并的有机层用水(～300mL)和盐水(～200mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩到(～100mL-150mL)。然后将沉淀的固体充分超声处理并滤出，得到纯产物。将滤液浓缩得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(20％-50％ EA/Hx与DCM作为添加剂)纯化，得到附加量的纯产物。¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ2.0(s,3H),6.74(s,1H),7.00-7.02(m,2H),7.24(d,J＝7.8Hz,1H),7.43-7.48(m,1H),7.61(d,J＝7.8Hz,1H)。LCMS:378.6[M+H]⁺。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并 [1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(20)

将N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(19)(500mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，SFC＝100ml/min，CO2/IPA＝80/20，226巴)纯化，得到202mg的N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(20)(峰2，tR 4.50min.)；1HNMR(500MHz，甲醇-d4)δ7.58-7.70(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.26(br d,J＝7.80Hz,1H),6.97-7.11(m,2H),6.67-6.83(m,1H),2.02(s,3H)和205mg的N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(21)(峰1，tR 2.49min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:-1.13(br d,J＝7.6Hz,1H),-1.29(br t,J＝7.6Hz,1H),-1.50(br d,J＝7.3Hz,1H),-1.79--1.69(m,2H),-2.09--1.95(m,1H),-6.75(s,3H)。

实施例6：N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并 [1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(31)

方案4：

7-溴-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(23)：

将4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮4(10.0g，52.3mmol)溶于AcOH：二噁烷(1:10，105mL，0.5M)。向其中加入SeO₂(12.77g，115.1mmol)，并在105℃-110℃下回流5小时。然后将反应物料在热条件下经硅藻土过滤，然后将挥发物浓缩，得到粗品2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5。然后将该粗产物溶于冰AcOH(210mL，0.25mmol)中，并且向其中加入3-溴苯酚22(9.96g，57.5mmol)并在回流下再保持12小时。将反应物料浓缩并溶于EA(500mL-600mL)中。将其经硅藻土过滤并用EA洗涤残余物。将滤液用水(200mL×2)和盐水(100mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。将粗品经硅胶柱色谱法(35％-40％ EA的己烷溶液)纯化两次，得到纯产物。

7-溴-9b-氯-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (24)：

将7-溴-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮23(39.5g，0.105mol)溶于DCM(520mL，0.2M)中，并在室温下加入草酰氯(11mL，0.13mol)。向其中缓慢添加DMF(40mL，0.53mol)(30分钟内0.05mL/min，然后30分钟内0.1mL/min，然后剩余物)，并使其在环境温度(30℃)下搅拌。然后将反应混合物在室温(20℃)下再搅拌12小时。将反应混合物用水(～300mL)稀释。将水层用DCM(～500mL×2)萃取。将合并的有机层用水(～300ml)和盐水(～300mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-30％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

9b-氨基-7-溴-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (25)：

将9b-氯-4b-羟基-4-硝基-8-(三氟甲基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮24(21.2g，53.4mmol)溶于THF(530mL，0.1M)中，并冷却至-40℃。在相同温度下向其中加入2.0M NH₃的IPA溶液(54mL，0.11mmol)，并使其再搅拌3h。将反应混合物用水(～150mL)和盐水(150mL)稀释。将水层用EA(～300mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(～100mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。将粗品经硅胶柱色谱法(20％-30％EA的己烷溶液与20％ DCM作为共溶剂)纯化，得到纯产物。

(7-溴-4b-羟基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b- 基)氨基甲酸叔丁酯(26)：

将Boc酸酐(8.74g，40mmol)和分子I₂(0.69g，2.67mmol)添加到9b-氨基-7-溴-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮25(10.1g，31mmol)于THF(5.0mL，5.0M)中的外消旋混合物的溶液中并在室温(30℃)下再搅拌72h。将反应物料浓缩并纯化。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-30％ EA的己烷溶液与5％-10％ DCM)纯化，得到纯产物。

(1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b- 基)氨基甲酸叔丁酯(27)：

将外消旋混合物(7-溴-4b-羟基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯26(10.3g，21.5mmol)溶于EtOH：水(10:1，110.0mL，0.20M)中，并且向其中加入Fe粉(3.57g，63.9mmol)，随后加入浓HCl(0.8mL，催化剂)。将其在90℃下再回流3小时。在温热条件下使用热EA(50mL-100mL)将反应物料经硅藻土过滤。将滤液浓缩并溶于EA(～1000mL-1200mL)中，并用水(～300mL-500mL)和盐水(～300mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-30％ EA/hx)纯化，得到纯产物。

((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯(28)和((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10- 二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯(29)：

将(1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯(27)通过手性色谱法，使用(AD柱，HPLC＝20ml/min，庚烷/EtOH＝70/30，724psi)纯化，得到((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯(28)(峰2，tR 15.59min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.48(br t,J＝7.7Hz,1H),7.37(br s,1H),7.11(br s,1H),7.02(br d,J＝7.1Hz,1H),6.95(s,1H),6.72(br s,1H),1.42(br s,5H),1.13(br s,4H)LCMS：447.2/449.2[M+H]⁺和((4bS,9bS)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-9b,10-二氢-4bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯(29)(峰1，tR 8.97min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.48(br t,J＝7.6Hz,1H),7.37(br s,1H),7.11(br s,1H),7.02(br d,J＝6.9Hz,1H),6.95(s,1H),6.72(br s,1H),1.42(br s,5H),1.13(br s,4H)LCMS:447.2/449.2[M+H]⁺

(4bR,9bR)-1,9b-二氨基-7-溴-4b-羟基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(30)：

将((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)氨基甲酸叔丁酯28(112mg，0.25mmol)溶于DCM(2.5mL，0.1M)中，并立即加入4.0M HCl的二噁烷溶液(0.63mL，2.50mmol)。然后将反应混合物在室温(20℃)下再搅拌6小时。将反应混合物用EA(50mL)稀释并用饱和NaHCO₃(20mL)剧烈搅拌5分钟-10分钟。分离各层并将水层用EA(30mL×2)萃取。将合并的有机层用水(20ml)和盐水(20mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到产物。粗品无需进一步纯化即可原样用于下一步骤。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-溴-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(31)：

将(4bR,9bR)-1,9b-二氨基-7-溴-4b-羟基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮30(76mg，0.22mmol)溶于冰AcOH(2.2mL，0.1M)中，并立即加入Ac₂O(0.03mL，1.2mmol)。然后将反应混合物在80℃下再加热30分钟。然后添加10mL 2N HCl(水溶液)并在80℃下再搅拌2小时。将反应混合物浓缩得到粗品。将粗物料经硅胶柱色谱法(20％-50％EA/Hx与1％-2％ MeOH作为共溶剂)直接纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,MeOD)δ7.50-7.40(br,1H),7.40-7.25(br,1H),7.10(d,J＝7.4Hz,1H),7.05-6.85(m,2H),6.69(br,1H),1.99(s,3H)。

实施例7-实施例9：N-(1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(40)；N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(41)和N-((4bS,9bS)-1-氨基- 7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(42)

方案5：

(3-溴苯氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(32)：

将3-溴苯酚22(2.08g，12mmol)溶于无水DCM(40mL，0.3M)中。向其中加入TBDMS-Cl(2.0g，13mmol)。然后向其中加入咪唑(1.37g，20mmol)并使其在室温下再搅拌15小时。将反应物料直接滤出，并用DCM洗涤残余物。将滤液浓缩，并且将获得的粗品经硅胶柱色谱法(0％-5％ EA：己烷)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ0.20(s,6H),0.97(s,9H),6.74-6.78(m,1H),7.00(s,1H),7.07-7.09(m,1H)。

叔丁基(3-环丙基苯氧基)二甲基硅烷(34)：

将(3-溴苯氧基)(叔丁基)二甲基硅烷32(430mg，1.5mmol)溶于甲苯：水(先前用氮气吹扫)(7.33mL，0.2M)中。向其中加入环丙烷硼酸33(154mg，1.8mmol)。然后向其中加入PCy₃(42mg，0.15mmol)、K₃PO₄(1.1g，5.24mmol)和Pd(OAc)₂(17mg，0.07mmol)。然后使其在110℃下再回流3小时。使反应物料通过硅藻土并用乙醚洗涤。将有机层用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到粗品，将该粗品经硅胶柱色谱法(0％-5％EA：己烷)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ0.19(s,6H),0.63-0.68(m,2H),0.89-1.02(m,11H),1.79-1.88(m,1H),6.52-6.54(m,1H),6.59-6.68(m,2H),7.06-7.11(m,1H)。

3-环丙基苯酚(35)

将叔丁基(3-环丙基苯氧基)二甲基硅烷34(1.74g，7.0mmol)溶于THF(23mL，0.3M)中，并且向其中添加1.0M TBAF(9.1mL，9.1mmol)。将其在室温下再搅拌75分钟。将反应物料浓缩，然后溶于EA(200mL)中。将其用饱和NH₄Cl(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将获得的粗品经硅胶柱色谱法(5％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ0.69-0.73(m,2H),0.95-0.99(m,2H),1.85-1.90(m,1H),4.71(br,1H),6.56-6.57(m,1H),6.63(dd,J＝2.5Hz,J＝8.0Hz,1H),6.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.13-7.16(m,1H,ArH)。

7-环丙基-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (36)：

将2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5(1.80g，8.0mmol)和3-环丙基苯酚35(1.1g，8.0mmol)在冰AcOH(40mL，0.2M)中回流2小时。将反应物料浓缩并溶解于EA(200mL)中。将其用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。然后将获得的粗品溶于DCM:己烷(大约50mL)中，并且将获得的固体超声处理。将其滤出，得到纯产物。将滤液再次浓缩并经硅胶柱色谱法(30％ EA的己烷溶液)纯化，得到剩余产物。¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ0.65-0.67(m,2H),0.95-0.99(m,2H),1.81-1.86(m,1H),3.67(br,1H),6.22(br,1H),6.50(s,1H),6.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.78-7.82(m,1H),8.18(d,J＝7.5Hz,1H),8.50(d,J＝8.0Hz,1H)。

9b-氯-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10- 酮(37)：

将7-环丙基-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮36(1.70g，5.0mmol)溶于DCM(20mL，0.25M)中，并加入草酰氯(0.52mL，6.0mmol)。然后向其中缓慢加入DMF(2mL)。3小时后，添加另外的草酰氯(0.08mL)。然后将反应物在室温下再搅拌30min。将反应物料用DCM稀释至200mL。将其用水(100mL×2)洗涤。然后将其用饱和盐水(100mL)洗涤，并经无水Na₂CO₄干燥。将其浓缩，得到粗品，将该粗品经硅胶柱色谱法(10％-15％ EA/Hx)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ0.61-0.68(m,2H),0.93-0.99(m,2H),1.81-1.87(m,1H),6.28(br,1H),6.49(s,1H),6.78(d,J＝8.1Hz,1H,ArH),7.39(d,J＝8.1Hz,1H),7.78-7.823(m,1H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),8.49(d,J＝8.1Hz,1H)。

9b-氨基-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 10-酮(38)：

将9b-氯-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮37(715mg，2.0mmol)溶于无水THF(20.0mL，0.1M)中。将其冷却至-40℃，然后加入2.0MNH₃的IPA溶液(2.0mL，4.0mmol)。然后将其在-40℃至-30下再搅拌2小时。将反应物料在25℃下浓缩至一半体积，然后用水淬灭。将其再次浓缩以去除所有挥发物，然后溶于EA(150mL)中。将其用水(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将获得的粗品经先前用TEA去活化的硅胶柱色谱法(1:2＝EA：己烷)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ0.59-0.64(m,2H),0.85-0.90(m,2H),1.73-1.85(m,1H),6.56(s,1H),6.81(d,J＝7.8Hz,1H),7.46(d,J＝7.8Hz,1H),7.77-7.80(m,1H),8.25(d,J＝7.5Hz,1H),8.58(d,J＝8.1Hz,1H)。

9b-氯-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10- 酮(39)：

将2,4,6-三氯苯甲酸(168mg，0.75mmol)溶于THF(5mL，0.1M)中，并且在0℃下向其中添加NMM(0.083mL，0.75mmol)。向其中加入乙酰氯(0.054mL，0.75mmol)并使其在0℃下再搅拌30分钟。然后在单个批次中向其中加入9b-氨基-7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮38(170mg，0.5mmol)，并在0℃下再搅拌3小时。将反应物料浓缩，然后溶于EA(100mL)中。将其用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将获得的粗品经硅胶柱色谱法(1:1＝EA：己烷)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ0.59-0.64(m,2H),0.92-0.98(m,2H),1.77-1.85(m,1H),2.07(s,3H),6.06(br,1H),6.46(br,2H),6.76(dd,J＝7.8Hz,J＝1.2Hz,1H),7.38(d,J＝7.8Hz,1H),7.71-7.76(m,1H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),8.45(d,J＝7.8Hz,1H)。

N-(1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(40)：

将N-(7-环丙基-4b-羟基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺39(150mg，0.39mmol)溶于EtOH：水(10:1，8mL，0.05M)中，并且向其中添加Fe粉(66mg，1.18mmol)。向其中加入2滴浓HCl，然后将反应再回流2小时。将反应物料经硅藻土过滤，并且将残余物在热条件下用EA洗涤。将滤液浓缩，并且将粗品溶于EA(100mL)中。将其用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。然后将获得的粗品经硅胶柱色谱法(1:1＝EA/己烷)纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ0.59-0.61(m,2H),0.89-0.92(m,2H),1.79-1.85(m,1H),2.01(s,3H),6.44(s,1H),6.52-6.72(m,2H),6.95-7.02(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.39-7.44(m,1H)。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2- b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(41)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b, 10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(42)：

将N-(1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(40)(500mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，HPLC＝20ml/min，庚烷/EtOH＝70/30，722psi)纯化，得到N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(41)(峰2，tR 17.95min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.43(br s,1H),7.30(br s,1H),6.98(br s,1H),6.60-6.76(m,2H),6.45(brs,1H),1.99(s,3H),1.84(br s,1H),0.91(br d,J＝8.0Hz,2H),0.58-0.66(m,2H)。

和N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-环丙基-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(42)(峰1，tR 9.16min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.44(br d,J＝2.8Hz,1H),7.33(br d,J＝5.7Hz,1H),7.00(br d,J＝1.7Hz,1H),6.73(br d,J＝6.9Hz,1H),6.64-6.71(m,1H),6.47(br s,1H),2.00(s,3H),1.79-1.92(m,1H),0.86-0.99(m,2H),0.57-0.70(m,2H)。

实施例10-实施例12：N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(48)；N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(49)和N- ((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(50)

方案6：

4b,9b-二羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(44)：

将2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5(1.34g，6mmol)溶于TFA(24mL，0.25M)中。向其中加入3-(三氟甲氧基)苯酚43(1.07g，6mmol)，并且将其在室温(30℃)下再搅拌12小时。将反应物料浓缩。然后将其溶于EA(200mL)中并用水(100mL×2)和盐水(100mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗物料。然后将粗产物经硅胶柱色谱法(1:2＝EA/己烷)纯化，得到纯产物。

9b-氯-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(45)：

将4b,9b-二羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮44(385mg，1.0mmol)溶于DCM(4.0mL，0.25M)中。向其中加入草酰氯(0.103mL，1.21mmol)，随后加入DMF(0.4mL，5.0mmol)并在室温(30℃)下搅拌3小时。将反应物料用DCM(～100mL)稀释，并用水(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(10％-15％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

9b-氨基-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(46)：

将9b-氯-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮45(200mg，0.50mmol)溶于THF(5.0mL，0.1M)中。将其冷却至-40℃，并加入2.0MNH₃的IPA溶液(0.5mL，1.0mmol)，并在接下来的3小时内在-10℃下温热。将反应物料浓缩并用水(50mL)淬灭并用EA(100mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)和盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。将粗品经硅胶短垫柱色谱法(30％-40％ EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

N-(4b-羟基-4-硝基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(47)：

将2,4,6-三氯苯甲酸(89mg，0.40mmol)溶于THF(2.0mL，0.1M)中，并且将其冷却至0℃。向其中添加NMM(0.44mL，0.40mmol)，随后添加AcCl(0.021mL，0.30mmol)。将反应物料搅拌10分钟，并且向其中添加9b-氨基-4b-羟基-4-硝基-7-(三氟甲氧基)-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮46(76mg，0.2mmol)。将反应物料在0℃下再搅拌1.5小时。将反应物料浓缩，并且将残余物用水(50mL)淬灭并用EA(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。将粗产物经硅胶柱色谱法(30％-35％EA的己烷溶液)纯化，得到纯产物。

N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(48)：

将N-(4b-羟基-4-硝基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺47(21mg，0.05mmol)溶于EtOH：水(10:1，2.5mL，0.02M)中并加入Fe粉(8.3mg，0.15mmol)。向其中加入浓HCl(1滴)并在90℃下再回流3小时。将反应物料在热条件下经硅藻土过滤。将残余物用EA(～20mL)洗涤。将其浓缩，然后溶于EA(～50mL)中。将其用水(～20mL)和盐水(～20mL)洗涤。将其经无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗物料。将粗物料经反相HPLC(MeCN：水作为洗脱液)直接纯化，得到纯产物。¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ2.01(s,3H),6.71(s,1H),6.77(d,J＝8.4Hz,1H),6.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.02(d,J＝7.2Hz,1H),7.45-7.52(m,2H)。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(49)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(50)：

将N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(48)(200mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，SFC＝100ml/min，CO2/IPA＝85/15，206巴)纯化，得到N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(49)(峰2，tR 7.41min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.37-7.55(m,2H),7.00(d,J＝7.3Hz,1H),6.85(br d,J＝8.3Hz,1H),6.75(br d,J＝6.9Hz,1H),6.69(s,1H),1.99(s,3H)。

和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲氧基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(50)(峰1，tR 4.10min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.42-7.52(m,2H),7.00(d,J＝7.3Hz,1H),6.84(br d,J＝8.3Hz,1H),6.75(br d,J＝8.3Hz,1H),6.68(s,1H),1.99(s,3H)。

实施例13-实施例15：N-(1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并 [1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺和N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10- 二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺和N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-氯-4b-羟基- 10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺

方案7：

2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮(5)：

向4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮4(2.3g，12mmol)于二噁烷：AcoH(20mL/2mL)中的混合物中添加二氧化硒(2.7g，24mmol)。将所得反应物料在130℃下回流3h。将反应物料冷却至环境温度并用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土床过滤，并且用乙酸乙酯洗涤，蒸发溶剂，得到粗品。残余物无需纯化即可原样用于下一步骤。

7-氯-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (52)：

向2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5(3.7g，粗品)于乙酸(20mL)中的混合物中添加3-氯苯酚51(1.6g，12mmol)。将所得反应物料在110℃下回流12h。将反应物料冷却至环境温度并用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土床过滤，并且用乙酸乙酯洗涤，蒸发溶剂，得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(乙酸乙酯：己烷)纯化，得到产物。

7,9b-二氯-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (53)：

向7-氯-4b,9b-二羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮52(400mg，1.2mmol)于DCM(6mL)中的混合物中添加草酰氯(0.12mL，1.44mmol)，在1h内向所得反应物料中滴加DMF(0.4mL)，然后将反应物料在环境温度下搅拌15h。将反应物料用DCM稀释，并用水(50mL×2)洗涤，然后将有机层用盐水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且将溶剂蒸发，得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(乙酸乙酯：己烷)纯化，得到产物。

9b-氨基-7-氯-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (54)：

在-40℃下向7,9b-二氯-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮53(220mg，0.63mmol)于THF(3mL)中的混合物中添加氨的IPA溶液(0.8mL，1.6mmol)持续5分钟，将反应物料在-40℃下搅拌2h。将反应物料用乙酸乙酯稀释并用盐水溶液(50mL×2)洗涤。然后将有机层经Na₂SO₄干燥，并蒸发溶剂，得到(粗)产物。粗品原样无需纯化即可用于下一步骤。

N-(7-氯-4b-羟基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b- 基)乙酰胺(55)：

向9b-氨基-7-氯-4b-羟基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮54(210mg，0.63mmol)于AcoH(6mL)中的溶液中添加乙酸酐(0.07mL，0.76mmol)。将所得反应物料在80℃下搅拌1h。将反应物料蒸发至干，并且将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，将有机层用水(25mL×2)洗涤，将有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发溶剂，得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法(乙酸乙酯：己烷)纯化，得到产物。

N-(1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b- 基)乙酰胺(56)：

向N-(7-氯-4b-羟基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(100mg，0.26mmol)于EtOH:H₂O(9mL)中的溶液中添加Fe粉(45mg 0.8mmol)和浓HCl(1滴)。将所得反应物料在90℃下搅拌3h。将反应物料通过硅藻土床过滤并用乙酸乙酯洗涤。蒸发溶剂以得到残余物，并且将残余物溶解于乙酸乙酯(100mL)中。将有机层用水(50mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并蒸发溶剂，得到粗品。将粗品经硅胶柱色谱法使用(乙酸乙酯:己烷)纯化，得到产物。¹H NMR(300MHz，甲醇-d₄)δ7.62–7.24(m,2H),6.99(t,J＝8.8Hz,2H),6.82(d,J＝1.9Hz,1H),6.72(s,1H),2.01(s,3H)。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(57)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢- 9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(58)：

将N-(1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(56)(200mg)通过手性色谱法，使用(IC柱，SFC＝100ml/min，CO₂/MeOH＝85/15，206巴)纯化，得到N-((4bR,9bR)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(57)(峰2，tR 7.20min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.42-7.49(m,1H),7.39(br d,J＝3.8Hz,1H),6.99(br d,J＝4.5Hz,1H),6.90-6.96(m,1H),6.80(br s,1H),6.66-6.77(m,1H),1.99(br s,3H)。

和N-((4bS,9bS)-1-氨基-7-氯-4b-羟基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(58)(峰1，tR 4.92min.)；¹H NMR(500MHz，甲醇-d₄)δ:7.47(t,J＝7.8Hz,1H),7.41(br d,J＝8.3Hz,1H),7.01(d,J＝7.3Hz,1H),6.97(br d,J＝8.3Hz,1H),6.82(s,1H),6.76(br s,1H),2.01(s,3H)。

实施例16-实施例18：N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺和N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代- 4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基- 7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺

方案8：

4b,9b-二羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (60)

将2,2-二羟基-4-硝基-1H-茚-1,3(2H)-二酮5(6.3g，粗品，26.15mmol)悬浮于冰AcOH(44mL)中。添加间甲酚59(3.0mL，28.77mmol)。将该所得溶液在120℃下再回流6小时，然后浓缩。将该残余物经柱色谱法(50％ EA的己烷溶液与50％二氯甲烷)纯化，并再次沉淀，获得纯产物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.51(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),8.19(dd,J＝7.7,0.9Hz,1H),7.80(t,J＝7.8Hz,1H),7.45(d,J＝7.8Hz,1H),6.85(d,J＝7.8Hz,48H),6.67(s,1H),2.31(s,3H)。

9b-氯-4b-羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮 (61)

将4b,9b-二羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮60(5.3g，16.91mmol)悬浮于DCM(67mL)中。在环境温度下缓慢添加(5min)草酰氯(1.7mL，20.3mmol)，然后在环境温度下缓慢添加无水DMF(5mL)。将该反应混合物在环境温度下搅拌过夜，并用DCM稀释并用水洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，然后用柱色谱法(25％EA的Hex溶液与25％ DCM)纯化，并再沉淀(DCM/Hex＝1/2)，获得产物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.53(dd,J＝8.0,0.9Hz,1H),8.23(dd,J＝7.7,1.0Hz,1H),7.83(t,J＝7.9Hz,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,1H),6.89(d,J＝7.9Hz,1H),6.68(d,J＝7.2Hz,1H),6.34(s,1H),2.32(d,J＝6.1Hz,3H)。

9b-氨基-4b-羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10- 酮(62)

将9b-氯-4b-羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮61(2.29g，6.9mmol.)溶解于无水THF(69mL)中，然后在-40℃下添加NH₃于IPA中的2.0M溶液(6.9mL)。将反应混合物温热至-10℃，然后搅拌3小时，将该反应混合物用EA稀释并用水洗涤。该有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，然后用柱色谱法(33％ EA的Hex溶液与3.3％DCM)纯化，并再沉淀(DCM/Hex＝1/2)，然后获得产物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.52(d,J＝8.0Hz,1H),8.14(d,J＝7.6Hz,1H),7.75(t,J＝7.8Hz,1H),7.31(m,1H),6.83(t,J＝8.6Hz,1H),6.67(s,1H),2.30(d,J＝6.0Hz,3H)。

N-(4b-羟基-7-甲基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 9b-基)乙酰胺(63)

将9b-氨基-4b-羟基-7-甲基-4-硝基-4b,9b-二氢-10H-茚并[1,2-b]苯并呋喃-10-酮(310mg，1.0mmol)和乙酸酐(0.113mL，1.2mmol)溶解于乙酸(10mL)。将该所得溶液在80℃下搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，然后用EA稀释并用水洗涤。将有机层经无水MgSO₄干燥并浓缩，然后用柱色谱法(50％ EA的己烷溶液与5％ DCM)纯化，并再沉淀(DCM/Hex＝1/2)，获得产物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.47(dd,J＝8.1,0.8Hz,1H),8.22(d,J＝6.9Hz,1H),7.76(t,J＝7.8Hz,1H),7.42(d,J＝7.8Hz,1H),6.85(d,J＝7.9Hz,1H),6.64(s,1H),6.50(s,1H),6.08(s,1H),2.31(s,3H),2.10(s,3H)。

N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃- 9b-基)乙酰胺(64)

将N-(4b-羟基-7-甲基-4-硝基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺63(150mg，0.4233mmol)溶解于乙醇(8mL)。向该溶液中添加铁粉(70mg1.27mmol)、水(0.8mL)和浓HCl(2滴)。将该所得溶液在90℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。将滤液浓缩，然后用柱色谱法(50％～150％ EA的Hex溶液与5％DCM)纯化，并用EA再沉淀，然后获得产物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.83(s,0.5H),7.52(m,1.5H),7.23(m,1.6H),7.17(d,J＝7.5Hz,0.7H),6.85(m,1H),6.77(d,J＝7.8Hz,0.7H),6.66(m,1.5H),6.60(d,J＝8.1Hz,0.7H),6.54(brs,0.3H),5.76(d,J＝8.9Hz,1H),5.55(brs,1H),2.29(s,2H),2.26(s,1H),2.06(s,3H)。

N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b] 苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(65)和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10- 二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(66)

将N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(64)(200mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，HPLC＝20ml/min，庚烷/IPA＝70/30，759psi)纯化，得到N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(65)(峰2，tR 12.49min.)；1H NMR(500mHz，甲醇-d4)δ:7.38-7.47(m,1H),7.28-7.37(m,1H),6.97(br d,J＝6.6Hz,1H),6.79(br d,J＝6.9Hz,1H),6.66(br d,J＝7.3Hz,1H),6.59(br s,1H),2.27(s,3H),1.99(s,3H)。

和N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(66)(峰1，tR 7.77min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.44(brs,1H),7.34(br s,1H),6.99(br d,J＝5.7Hz,1H),6.80(br d,J＝6.1Hz,1H),6.68(br d,J＝4.0Hz,1H),6.61(br s,1H),2.28(s,3H),2.01(s,3H)。

实施例19：N-(1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b] 苯并呋喃-9b-基)乙酰胺。

上述化合物的程序遵循与实施例16-实施例18中所述类似的途径，不同的是使用对甲酚代替间甲酚，得到产物N-(1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺。¹H NMR(500MHz，甲醇-d₄)δ:7.44(br t,J＝7.2Hz,1H),7.30(br s,1H),7.09(br d,J＝7.8Hz,1H),6.99(br d,J＝6.9Hz,1H),6.67(br t,J＝9.2Hz,2H),2.30(br s,3H),2.01(s,3H)。

实施例20：N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺。

将外消旋物N-(1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(200mg)通过手性色谱法，使用(AD柱，SFC＝100ml/min，CO2/EtOH＝75/25，226巴)纯化，得到上述产物N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(峰2，tR 5.43min.)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ:7.42(br t,J＝7.1Hz,1H),7.27(br s,1H),7.06(br d,J＝7.9Hz,1H),6.97(brd,J＝6.8Hz,1H),6.64(br d,J＝8.1Hz,2H),2.28(s,3H),1.98(s,3H)以及N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-8-甲基-10-氧代-9b,10-二氢-4bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(峰1，tR 3.68min.)。

实施例21：N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并 [1,2-b]苯并呋喃-9b-基)-N-甲基乙酰胺

上述化合物的程序遵循与实施例3-实施例5中所述类似的途径，不同的是使用2.0M甲基胺的THF溶液代替2.0M氨的IPA溶液，得到产物N-(1-氨基-4b-羟基-10-氧代-7-(三氟甲基)-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)-N-甲基乙酰胺。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.63(br d,J＝7.6Hz,1H),7.44(br t,J＝7.8Hz,1H),7.31(br d,J＝8.0Hz,1H),7.10(s,1H),6.99(br d,J＝7.3Hz,1H),6.70(br d,J＝7.3Hz,1H),2.88(s,3H),2.19(s,3H)。

实施例22-实施例24：N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH- 茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(实施例22)，N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(实施例23)和N- ((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(实施例24)

上述化合物的程序遵循与实施例16-实施例18中所述类似的途径，不同的是使用3-甲氧基苯酚代替间甲酚，得到外消旋物N-(1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-9b,10-二氢-4bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(实施例22)(200mg)，将其通过手性色谱法，使用(AD柱，HPLC＝20ml/min，庚烷/IPA＝70/30，723psi)纯化，得到上述产物N-((4bR,9bR)-1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-4b,10-二氢-9bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(峰2，tR 24.20min.)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ:7.39-7.50(m,1H),7.31(brdd,J＝3.1,2.4Hz,1H),6.92-7.05(m,1H),6.62-6.74(m,1H),6.44-6.57(m,1H),6.34(s,1H),3.72(s,3H),1.99(s,3H)(实施例23)以及N-((4bS,9bS)-1-氨基-4b-羟基-7-甲氧基-10-氧代-9b,10-二氢-4bH-茚并[1,2-b]苯并呋喃-9b-基)乙酰胺(峰1，tR 9.78min.)(实施例24)。

使用以下方法测定本发明化合物的生物活性。

使用细胞病变效应(CPE)测定针对小核糖核酸病毒的药物功效

抑制测定

在测定中，使用HeLa(人宫颈癌细胞)、MRC-5(人胎儿肺成纤维细胞)和RD细胞(来源于人横纹肌肉瘤)。为了比较，利巴韦林(ribavirin)(Riv)、普来可那立(pleco)和BTA-798(BTA)用作对照。将试剂以10mg/ml-40mg/ml的浓度溶解于100％二甲基亚砜(DMSO)中。将水溶性试剂溶解于PBS(-)溶液中并在-20℃下储存。在实验当天，以3倍至5倍的浓度使用它们，使得每个孔中二甲基亚砜的浓度在0.5％与1％之间。

使用病毒诱导的细胞病变效应(CPE)抑制测定来测定药物功效。就这一点而言，在96孔板中生长适于病毒的细胞后，将病毒在补充有2％FBS的DME(DME/2％ FBS)或补充有2％ FBS的MEM(MEM/2％ FBS)中的稀释液以100μl的量以对应于100CCID₅₀(50％细胞培养感染剂量)的浓度接种到板的每个孔中，并且在33℃或37℃下温育30分钟-1小时以允许病毒吸附到细胞上。除去培养基，然后将各种浓度的药物稀释液的等分试样以100μl的量添加到每个孔中。当HRV(人鼻病毒)在33℃下生长时，将其它病毒在37℃CO2培养箱中温育2天-3天。另选地，在添加50μl浓度高2倍的每种药物稀释液，然后添加50μl病毒稀释液后，将细胞在不除去培养基的情况下培养2天-3天。将病毒在宿主HeLa细胞中在DME/2％或MEM/2％FBS中在37℃下温育2天-3天。

对于HeLa细胞，使用MTT测定测量药物的EC₅₀(50％最大有效浓度)，其是诱导基线和最大值之间一半的反应的药物浓度。关于RD和MRC-5细胞，使用FDA(荧光素二乙酸酯)或MTT测定CPE。为了确定药物毒性对功效结果的影响，在接种病毒时，还包括模拟感染。将无病毒培养基添加到细胞培养物中，然后对其进行与接种病毒的病毒感染细胞相同的处理。即，在温育一小时后除去培养基，并且再次添加药物于培养基中的稀释液。温育2天-3天后，在显微镜下观察细胞并且使用MTT测定来测定药物的CC₅₀(50％细胞毒性浓度)，在该浓度下50％的细胞被杀死，其中将含有药物的模拟感染孔中的活细胞计数与不含有药物的对照孔中的活细胞计数进行比较。在FDA水解测定中，在除去培养基之后将FDA添加到每个孔中，并温育20min-30min，然后使用分光荧光计以与MTT相同的方式测定CPE来测量荧光强度。

即，使用以下数学公式1计算用于细胞毒性测量的模拟感染细胞的存活率(存活％)：

细胞药物＝存活×[A(药物)–A(背景溶液)/A(细胞对照)-(背景×100％溶液)]

虽然100％细胞存活意指药物无细胞毒性，但最高细胞毒性由0％细胞存活反映。50％细胞毒性浓度定义为使细胞数减少50％所需的浓度。药物的这种浓度表示为CC₅₀。较高的值意指较低的细胞毒性。

此外，可使用以下数学公式2计算抗病毒效果：

抗病毒效果＝[A(药物/病毒)–A(病毒对照)/A(细胞对照)–A(病毒对照)]

如果存活率为100％，则其抗病毒效果为100％，而如果存活率为0％，则其没有抗病毒效果。尽管以EC₅₀计算被病毒感染的孔中的细胞可表现出50％存活率的药物浓度，但该值越低，抗病毒效果越好。

在下表1中列出了在一些实施例中表现出针对化合物的细胞毒性的CC₅₀浓度和表现出针对属于小核糖核酸病毒的多种鼻病毒的活性的EC₅₀浓度。

使用多周期细胞病变效应(CPE)减少测定确定针对小核糖核酸病毒的药物作用

多周期CPE减少测定用于进行针对小核糖核酸病毒的药物功效的测定。化合物的抗病毒活性最初由基于MIS[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑鎓的CPE减少测定来确定。

具体地，用100个50％细胞培养物感染剂量(CCID₅₀)的病毒感染在96孔板中生长至汇合的细胞。在37℃下吸附2小时后，除去病毒并且添加化合物的连续稀释。将培养物在37℃下进一步温育3天，直到在感染和未处理的病毒对照(VC)中观察到完全CPE。在除去培养基之后，向每个孔中添加90μl培养基和10μl MTS-吩嗪硫酸甲酯(Promega,Leiden,TheNetherlands)。在37℃下温育2小时后，在微板读数器中在498nm处读取每个孔的光密度(OD)。

使用以下数学公式3计算用于评估抗病毒活性的CPE％值：

CPE％＝100×[OD(CC)–OD(病毒+化合物)/OD(CC)–OD(VC)]

通过以下数学公式4计算用于测量药物的细胞毒性的CPE％值：

CPE％＝100×[OD(CC)–OD(病毒+化合物)/OD(CC)–OD(空白)]

在上述数学公式3和4中，

OD(CC)表示既不被病毒诱导也不被化学处理的背景细胞培养物的OD，

OD(VC)表示由病毒诱导但未经化学处理的对照细胞培养物的OD，

OD(病毒+化合物)表示已用浓缩的化合物处理的由病毒感染的细胞培养物的OD，

OD(化合物)表示仅用浓缩的化合物处理的细胞培养物的OD，并且OD(空白)表示仅添加细胞培养物的孔的OD。

有效浓度(EC₅₀)表示50％细胞被诱导病毒的CPE存活的药物浓度，并且细胞毒性浓度(CC₅₀)表示化合物杀死50％细胞的药物浓度，并且它们通过对数内插法计算。

在下表1中列出了实施例的一些化合物针对各种病毒的毒性浓度(CC₅₀)和有效浓度(EC₅₀)。

表1

如上表1所示，根据本发明的大多数化合物表现出高CC₅₀浓度，因此发现具有低细胞毒性。此外，根据本发明的新型化合物大部分被发现具有针对多种鼻病毒(HRV)的非常高的抗病毒活性。此外，发现根据本发明的新型化合物主要具有针对柯萨奇病毒B4(Cox B4)和脊髓灰质炎病毒1(PV1)的高抗病毒活性。

因此，由于根据本发明的化合物针对各种鼻病毒表现出低细胞毒性和高抗病毒活性，它们可有效地用于预防或治疗由它们所属的小核糖核酸病毒引起的疾病的药物组合物。

因此，由于根据本发明的化合物针对柯萨奇病毒、脊髓灰质炎病毒和鼻病毒所属的小核糖核酸病毒具有低细胞毒性并表现出优良的抗病毒活性，它们可有效地用于预防或治疗由此类病毒引起的疾病，例如，呼吸疾病、心循环疾病和神经系统疾病，包括脊髓灰质炎、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、流感、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎和中耳炎。

由于以彼此平衡的根据本发明的化学式表示的化合物不仅具有低细胞毒性，而且具有非常优异的针对小核糖核酸病毒(包括柯萨奇病毒、肠病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒和鼻病毒)的抗病毒活性，它们可有效地用作用于预防或治疗病毒性疾病的药物组合物，该病毒性疾病诸如脊髓灰质炎、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、流感、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎或中耳炎。

Claims

1.一种式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹选自直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；和3-7元环烷基。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为直链或支链C₁-C₅卤代烷基。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为CF₃。

5.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基。

6.根据权利要求1、2和5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为OCF₃。

7.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为3-7元环烷基。

8.根据权利要求1、2和7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为环丙基。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G²为H。

10.根据权利要求1或权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为甲基。

11.根据权利要求1或权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为OCH₃。

12.根据权利要求1或权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为异丙基。

13.根据权利要求1或权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为卤基。

14.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G¹为H。

15.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中G²为甲基。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(II)：

17.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物具有式(III)：

18.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IV)：

其中G¹选自直链或支链C₁-C₅卤代烷基；直链或支链C₁-C₅卤代烷氧基；以及3-7元环烷基。

19.根据权利要求1至9和18中任一项所述的化合物，其中G¹选自CF₃、OCF₃和环丙基。

20.根据权利要求1至15、18和19中任一项所述的化合物，其中R¹选自H和甲基。

21.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，所述化合物选自：

或其药学上可接受的盐。

22.根据权利要求1至17和21中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其光学异构体，其用于预防或治疗病毒性疾病。

23.一种用于预防或治疗病毒性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至17和21中任一项所述的化合物，其药学上可接受的盐或其光学异构体以及药学上可接受的稀释剂或赋形剂。

24.一种组合，所述组合包含根据权利要求1至17和21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求23所述的药物组合物以及一种或多种治疗活性剂。

25.一种治疗病毒性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至17和21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求23所述的药物组合物或根据权利要求24所述的组合。

26.根据权利要求22所述的化合物或其药学上可接受的盐或其光学异构体或根据权利要求23所述的药物组合物或根据权利要求24所述的组合用于预防或治疗病毒性疾病的用途。

27.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由柯萨奇病毒引起。

28.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由脊髓灰质炎病毒引起。

29.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由埃可病毒引起。

30.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由肠病毒引起。

31.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由鼻病毒引起。

32.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病由小核糖核酸病毒引起。

33.根据权利要求22所述的化合物或根据权利要求23所述的药物组合物，或根据权利要求24所述的方法，或根据权利要求26所述的用途，其中所述病毒性疾病是脊髓灰质炎、麻痹、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、流感、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎或中耳炎。

34.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物为

或其药学上可接受的盐。

35.根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其光学异构体，其用于预防或治疗病毒性疾病。

36.一种用于预防或治疗病毒性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物，其药学上可接受的盐或其光学异构体以及药学上可接受的稀释剂或赋形剂。

37.一种组合，所述组合包含根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求36所述的药物组合物以及一种或多种治疗活性剂。

38.一种治疗病毒性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求36所述的药物组合物或根据权利要求37所述的组合。

39.根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或其光学异构体或根据权利要求36所述的药物组合物或根据权利要求37所述的组合用于预防或治疗病毒性疾病的用途。

40.根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物或根据权利要求36所述的药物组合物，或根据权利要求38所述的方法，或根据权利要求39所述的用途，其中所述病毒性疾病由柯萨奇病毒、脊髓灰质炎病毒、埃可病毒、肠病毒、鼻病毒和小核糖核酸病毒中的一者引起。

41.根据权利要求18至21和34中任一项所述的化合物或根据权利要求36所述的药物组合物，或根据权利要求38所述的方法，或根据权利要求39所述的用途，其中所述病毒性疾病是脊髓灰质炎、麻痹、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、水泡病、甲型肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、糖尿病、流行性肌痛、脑炎、流感、疱疹性咽峡炎、口蹄疫、哮喘、慢性阻塞性肺病、肺炎、窦炎或中耳炎。