CN115887331B - 一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天然植物开发利用技术领域，具体涉及一种以澳洲坚果果油为基质的三七花精华液及其制备方法，包括以下步骤：将三七花提取物和澳洲坚果果油混合，经密封放置、加水和超声处理之后，获得第一乳化液；将澳洲坚果多肽和甘油混合，加入水，获得第二水分散液；将第二水分散液滴加入第一乳化液中，并同时超声处理第一乳化液；滴加完成后继续超声处理，获得第二乳化液；再加入甜菜碱和柠檬酸混匀；再加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶混匀即得。本方案的精华液稳定性好，且具有较好的酪氨酸酶抑制作用，具有一定的抑制黑色素和美白功能，可以解决现有技术中的药食同源的三七花未得到充分开发利用的技术问题，具有理想的开发应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及天然植物开发利用技术领域，具体涉及一种以澳洲坚果果油为基质的三七花精华液及其制备方法。
背景技术
三七花(Sanqi Flower Buds)为五加科人参属植物三七的花序，是中药三七的药食同源部位。中国专利CN112608949B提供了一种三七花提取物的制备方法及其应用，该专利将三七花制备成了一种具有美白功效的提取物。但是，三七花提取物仅仅是一种中间产品，尚不能直接用于具有美白功能的产品的制备，三七花提取物与其他原材料的相容性如何，和其他原料混合后，制备出来的产品是否稳定性合格，是否仍然具有理想的美白效果？这些都是三七花的产业化应用所面临的问题。如果不能解决上述问题，三七花资源的开发利用将会仍然存在较大的挑战。
发明内容
本发明意在提供一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液，以解决现有技术中的药食同源的三七花未得到充分开发利用的技术问题。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法，包括以下依次进行的步骤：
S1：将三七花提取物和澳洲坚果果油混合，经密封放置、加水和超声处理之后，获得第一乳化液；
S2：将澳洲坚果多肽和甘油混合，加入水，获得第二水分散液；
S3：将第二水分散液滴加入第一乳化液中，并同时超声处理第一乳化液；滴加完成后继续超声处理，获得第二乳化液；
S4：在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸混匀；再加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶混匀，获得澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液。
本技术方案还提供了一种根据含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法所制备的精华液。
进一步，在S1中，三七花提取物由如下方法制备：
每1g三七花粉碎后获得的药粉中加入20-40ml培养液，获得前培养体系；对前培养体系进行灭菌处理后，加入酿酒酵母，获得培养体系；酿酒酵母在培养体系中的质量分数为4-6％；将所述培养体系置于27-32℃恒温摇床中，在80-120rpm的转速下培养48-60h，然后取液相部分获得发酵液；
还包括纯化步骤：先使用氯仿萃取所述发酵液，取水相获得萃取液I；然后使用乙酸乙酯萃取所述萃取液I，取水相获得萃取液II；干燥处理所述萃取液II，获得干粉状的三七花提取物。
进一步，所述培养液的成分为：酵母提取物0.75-1.50g/L、蛋白胨2.5-3.5g/L、柠檬酸氢二铵1.00-1.50g/L、硫酸镁0.25-0.50g/L、乳糖2-3g/L、硫酸锰0.10-0.20g/L、氯化铁0.01-0.10g/L、氯化钙0.01-0.08g/L、磷酸氢二钾1.20-1.50g/L、乙酸钠3.5-4.5g/L、吐温80 0.5-0.8ml/L。
进一步，在S1中，水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍；超声处理的条件为：功率100W，时长20min；密封放置的时长为2h。
进一步，在S2中，澳洲坚果多肽由如下方法制备：取澳洲坚果果仁经冷榨处理后的果粕；无水乙醇脱脂后烘干，再粉碎，获得果粕粉；将果粕粉分散到沸水中，并保持10min，然后将沸水冷却至37℃，将pH值调整至7.0，再加入木瓜蛋白酶，获得酶解体系，然后酶解8h；然后离心取上清，并经减压蒸发和冷冻干燥后，获得澳洲坚果多肽；其中，果粕粉在酶解体系中的质量百分数为20％，木瓜蛋白酶的用量为果粕粉的0.5％。
进一步，在S2中，水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍。
进一步，在S3中，滴加时，超声处理的条件为：功率50W；滴加完成后，超声处理的条件为：功率50W，时长10min；滴加速度为1滴/秒。
进一步，以重量份计，其原料包括：三七花提取物5-10份、澳洲坚果果油3-5份、澳洲坚果多肽0.5-1份、甘油1-3份、甜菜碱0.3-0.5份、柠檬酸0.1-0.2份、海藻酸钠0.2-0.3份、透明质酸钠0.1-0.2份、黄原胶0.1-0.3份。
进一步，以重量百分数计，其原料包括：三七花提取物8％、澳洲坚果果油5％、澳洲坚果多肽1％、甘油2％、甜菜碱0.4％、柠檬酸0.1％、海藻酸钠0.3％、透明质酸钠0.2％、黄原胶0.2％，余量为水。
本技术方案的有益效果在于：
(1)本技术方案将在先专利开发的三七花提取物制备成为了可商业化推广的产品。通过三七花提取物和澳洲坚果多肽的联合使用，增加了产品的酪氨酸酶抑制效果，进而增加了产品的美白功效。并且三七花提取物和澳洲坚果多肽的协同增效的效果的充分发挥，需要在特定的原料以及工艺条件下实现。
(2)通过加入澳洲坚果果油，赋予了产品特殊香气，增加产品的受欢迎程度。通过加入澳洲坚果多肽，丰富了产品中的功效成分，提升了产品在美白、保湿和皮肤调理剂等方面的功效。
(3)同时含有澳洲坚果果油、三七花提取物和澳洲坚果多肽的产品，存在一定的体系稳定性问题，在长期储存过程中易产生沉淀现象。需要在制备过程中采用特定的工艺，才能保证产品的稳定性。澳洲坚果果油需要先与三七花提取物混合并超声处理，澳洲坚果多肽需要和甘油预先混合并滴加到果油和三七花提取物的混合物中。完成上述操作步骤，再进行一次超声处理。经过上述的操作过程，可以极大地提高体系稳定性，提升产品品质。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明，下述实施例以及实验例所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，且所用的材料、试剂等，均可从商业途径得到。
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
实施例1：三七花提取物的制备
本技术方案是在发明人在先专利“2020115051868一种三七花提取物的制备方法及其应用”的基础上进行进一步研发，三七花提取物的制备参照上述专利内容完成。按照上述专利方法，制备获得的三七花提取物具有美白以及抑制黑色素的效果。本技术方案将三七花提取物应用于精油的制备中，充分利用三七花的美白效果。
在本技术方案中，三七花提取物的制备的具体过程如下：
取三七花(饮片，即干制三七花，参照《云南省食品安全地方标准》DBS 53/023-2017制作)，破碎后过40目，获得药粉1kg。将药粉加入培养液中(获得前培养体系)，然后121℃、0.1MPa湿热灭菌30min，再进行酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，18824)的接种(需待培养液冷却)。其中，培养液的成分以及含量为：酵母提取物1.00g/L、蛋白胨3.0g/L、柠檬酸氢二铵1.3g/L、硫酸镁0.40g/L、乳糖2.5g/L、硫酸锰0.15g/L、氯化铁0.05g/L、氯化钙0.05g/L、磷酸氢二钾1.30g/L、乙酸钠4.0g/L、吐温80 0.7ml/L。药粉和培养液的质量体积比为1g：30ml，酿酒酵母的接种量为5％(酿酒酵母在培养体系中的质量分数)，完成接种后获得培养体系。将培养体系放置于30℃恒温摇床(100rpm)中培养54h。培养结束之后，将培养体系过滤取上清，然后以5000rpm的转速离心处理上清20min，弃沉淀部分，获得发酵液。用发酵液等体积的氯仿萃取发酵液，静置分层之后取水相，重复三次，获得萃取液Ⅰ。然后使用与萃取液Ⅰ等体积的乙酸乙酯对萃取液Ⅰ进行萃取分层，静置分层之后取水相，重复三次，获得萃取液Ⅱ。在温度为60℃、真空度为-0.06Mpa的条件下，使用旋转蒸发仪对萃取液Ⅱ进行减压蒸发处理5h，得到浸膏，然后对浸膏进行冷冻干燥，获得干粉状的三七花提取物(含水量达到5％以下)。
实施例2：三七花精华液的制备
三七花精华液的配方参见表1。
表1：三七花精华液配方
| 组分 | 质量份数范围 | 本实施例的百分含量(质量百分数) |
| 三七花提取物 | 5-10％ | 8％ |
| 澳洲坚果果油 | 3-5％ | 5％ |
| 澳洲坚果多肽 | 0.5-1％ | 1％ |
| 甘油 | 1-3％ | 2％ |
| 甜菜碱 | 0.3-0.5％ | 0.4％ |
| 柠檬酸 | 0.1-0.2％ | 0.1％ |
| 海藻酸钠 | 0.2-0.3％ | 0.3％ |
| 透明质酸钠 | 0.1-0.2％ | 0.1％ |
| 黄原胶 | 0.1-0.3％ | 0.2％ |
| 水 | 余量至100％ | 余量至100％ |
澳洲坚果果油是对澳洲坚果的果仁采用常规冷榨工艺进行油脂压榨，获得果油(果粕回收用于后续的多肽的制备)。在本实施例中，对获得的果油进行了含量检测，其中含有约45％的油酸，约15％的棕榈油酸。澳洲坚果果油(129811-19-4)本身具有清香味，在化妆品领域经常作为产品的天然赋香剂。在本技术方案中，澳洲坚果果油的使用还起到了提升美白效果以及稳定精华液体系的作用。
澳洲坚果多肽的制备方法如下：取上述经过冷榨工艺后剩下的果粕，使用无水乙醇浸泡10min脱脂，然后取出烘干至恒重。然后将烘干后的果粕粉碎，过80目筛，获得果粕粉。将果粕粉分散到沸水中，并保持10min，然后将沸水冷却至37℃，将pH值调整至7.0，再加入木瓜蛋白酶，获得酶解体系。果粕粉在酶解体系中的质量百分数为20％，木瓜蛋白酶(800u/mg，CAS：9001-73-4)占果粕粉的质量百分数为0.5％，恒温酶解8h。完成酶解后，加热至体系沸腾10min。然后，4000rpm离心15min，取上清液，使用旋转蒸发仪对上清液进行减压蒸发处理5h，得到浸膏，然后对浸膏进行冷冻干燥，获得干粉状的澳洲坚果多肽(含水量达到5％以下)。有文献报道，澳洲坚果多肽除了具有一定的营养价值，还具有美白、保湿、皮肤调理剂等功效。
三七花精华液的制备过程具体如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，然后再密封放置2h。再在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
将澳洲坚果多肽和甘油混合，然后加入去离子水，去离子水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍，充分混匀，获得第二水分散液。将第二水分散液以1滴/秒的速度滴加到第一乳化液中，同时对第一乳化液进行超声处理(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，滴加完成后继续超声处理10min(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，获得第二乳化液。
在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀，甜菜碱为保湿剂、抗静电、黏度控制剂。柠檬酸为PH调节剂、抗菌剂，还具有去角质的功能。然后，加入海藻酸钠(保湿剂)、透明质酸钠(保湿剂)、黄原胶(增稠剂)，余量水，搅拌均匀，获得本方案的含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液。
对比例1
本对比例基本同实施例2，不同点在于，配方中不含澳洲坚果多肽这一成分，制备工艺如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，然后再密封放置2h。再在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
将甘油加入第一乳化液，然后继续超声处理10min(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，获得第二乳化液。
在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀。然后，加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
对比例2
本对比例基本同实施例2，不同点在于，配方中不含三七花提取物这一成分，制备工艺如下：
在澳洲坚果果油中加入去离子水，去离子水的用量为澳洲坚果果油的质量的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
将澳洲坚果多肽和甘油混合，然后加入去离子水，去离子水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍，充分混匀，获得第二水分散液。将第二水分散液以1滴/S的速度滴加到第一乳化液中，同时对第一乳化液进行超声处理(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，滴加完成后继续超声处理10min(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，获得第二乳化液。
在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀。然后，加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的精华液。
对比例3
本对比例基本同实施例2，不同点在于，将澳洲坚果多肽更换为蚕丝蛋白(丝素蛋白)，其他同实施例2。
对比例4
本对比例基本同实施例2，不同点在于，将甘油等量替换为丙二醇，丙二醇为化妆品中常用的保湿剂。
对比例5
本对比例基本同实施例2，不同点在于，将甘油等量替换为聚乙二醇300，聚乙二醇300为化妆品中常用的保湿剂。
对比例6
本对比例基本同实施例2，不同点在于，三七花精华液的具体制备方法如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，然后再密封放置2h。再在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
在第一乳化液中加入澳洲坚果多肽、甘油、甜菜碱、柠檬酸、海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
对比例7
本对比例基本同实施例2，不同点在于，三七花精华液的具体制备方法如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油、澳洲坚果多肽、甘油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，然后再密封放置2h。再在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物、澳洲坚果果油、澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
在第一乳化液中加入甜菜碱、柠檬酸、海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
对比例8
本对比例基本同实施例2，不同点在于，三七花精华液的具体制备方法如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，然后再密封放置2h。再在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
将澳洲坚果多肽和甘油混合，然后加入去离子水，去离子水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍，充分混匀，获得第二水分散液。将第二水分散液一次性加到第一乳化液中，完成后继续超声处理10min(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，获得第二乳化液。
在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀。然后，加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
对比例9
本对比例基本同实施例2，不同点在于，三七花精华液的具体制备方法如下：
在三七花提取物中加入澳洲坚果果油，充分混合，使得三七花提取物被油完全浸润，不进行密封放置，直接在提取物-油混合物中加入去离子水，去离子水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍，充分混匀，获得第一水分散液。然后，再对第一水分散液进行超声处理(冰浴)，功率100W，频率25KHz，工作3s，间歇3s，共20min，获得第一乳化液。
将澳洲坚果多肽和甘油混合，然后加入去离子水，去离子水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍，充分混匀，获得第二水分散液。将第二水分散液以1滴/S的速度滴加到第一乳化液中，同时对第一乳化液进行超声处理(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，滴加完成后继续超声处理10min(冰浴，功率50W，频率25KHz，工作3s，间歇3s)，获得第二乳化液。
在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀。然后，加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
对比例10
本对比例基本同实施例2，不同点在于，三七花精华液的具体制备方法如下：
在去离子水中加入三七花提取物、澳洲坚果果油、澳洲坚果多肽和甘油，混合均匀，再加入甜菜碱和柠檬酸，搅拌均匀。然后，加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶，余量水，搅拌均匀，获得本对比例的三七花精华液。
实验例1：体系稳定性加速实验
将实施例和对比例制备的精油置于20mL透明瓶中，每瓶中含15mL精油，透明瓶密封。然后将透明瓶置于60℃环境中(避光)，每5天观测一次，记载透明瓶中出现沉淀的时间，最长观测时间为40天，若还未出现沉淀则记为无沉淀。实验结果参见表2。
表2：各实施例和对比例在加速实验中出现沉淀的时间统计
实施例1制备的精华液稳定性良好，在40天加速实验中未产生沉淀等现象。对比例1中未加入澳洲坚果多肽这一影响体系稳定性的大分子物质，对比例2未加入主要功效成分三七花提取物，两者在40天加速实验中均未产生沉淀等现象。对比例3将澳洲坚果多肽更换为蚕丝蛋白，采用实施例2的制备方法，获得的精华液稳定性良好，在40天加速实验中均未产生沉淀等现象。对比例4和对比例5将甘油换成了丙二醇、聚乙二醇300，虽然三者都是化妆品中常用的保湿剂，但是，使用哪一种作为与多肽混合的物质，对精华液的稳定性的影响比较大。只有使用甘油作为多肽的稳定助剂，才能保证精华液在40天加速实验中不出现沉淀现象，如果使用丙二醇或者聚乙二醇300，则会在40天内出现沉淀，影响产品品质。
对比例6没有预先将澳洲坚果多肽和甘油混合，也没有将澳洲坚果多肽和甘油的混合物滴加至第一乳化液，也未进行第二次乳化，导致精华液的稳定性变差。对比例7将三七花提取物、澳洲坚果果油、澳洲坚果多肽和甘油四者混合进行超声乳化处理，未进行分布混合和超声处理，导致精华液的稳定性变差。对比例8未将第二水分散液滴加到第一乳化液，而是采用一次性加入的方式，导致精华液的稳定性变差。对比例9未将三七花提取物和澳洲坚果果油的混合物密封孵育，导致精华液的稳定性变差。对比例10将所有成分依次混合，并未进行超声处理，导致精华液的稳定性变差。
实验例2：美白效果实验
本实验例对实施例和对比例制备的三七花精华液进行酪氨酸酶抑制实验(精华液制备完成立即进行实验)，实验过程参见发明人在先专利“2020115051868一种三七花提取物的制备方法及其应用”。本实验例具体测试了实施例2、对比例1-5、对比例9中制备的精华液(其他对比例体系稳定性稍差，未进行美白测试)，待测样品溶液即为实施例和对比例中获得的精华液，阴性对照是去离子水。在试管中加入1ml pH6.8的磷酸盐缓冲液和质量分数为0.15％的L-酪氨酸溶液，充分混匀后，在室温下孵育10min，然后在试管中加入1g马铃薯(使用切碎后的马铃薯肉，用以提供酪氨酸酶)，然后继续在室温下孵育10min，获得待测体系，转移待测体系到比色皿中，在475nm处测量吸光光度值(记为A1)。在试管中加入1mlpH6.8的磷酸盐缓冲液和质量分数为0.15％的L-酪氨酸溶液，充分混匀后，在室温下孵育20min，获得待测体系，转移待测体系到比色皿中，在475nm处测量吸光光度值(记为A2)。在试管中加入1ml pH6.8的磷酸盐缓冲液和质量分数为0.15％的L-酪氨酸溶液，以及1ml的待测样品溶液，充分混匀后，在室温下孵育10min，然后在试管中加入1g马铃薯(使用切碎后的马铃薯肉，用以提供酪氨酸酶)，然后继续在室温下孵育10min，获得待测体系，转移待测体系到比色皿中，在475nm处测量吸光光度值(记为A3)。在试管中1ml pH6.8的磷酸盐缓冲液和质量分数为0.15％的L-酪氨酸溶液，以及1ml的待测样品溶液，充分混匀后，在室温下孵育20min，获得待测体系，转移待测体系到比色皿中，在475nm处测量吸光光度值(记为A4)。酪氨酸酶的抑制率的计算方法为：抑制率(％)＝((A1-A2)-(A3-A4))/(A1-A2)×100％。针对实施例和对比例获得的精华液进行上述检测，对同一待测样品溶液重复测量3次，然后计算平均抑制率，检测结果如表3所示。
表3：酪氨酸酶抑制率检测结果(平均值±标准方差，n＝3)
由表3的实验数据可知，对于三七花提取物和澳洲坚果多肽，对比例1的精华液只含有三七花提取物，对比例2的精华液只含有澳洲坚果多肽，而实施例2含有三七花提取物和澳洲坚果多肽两种物质。实施例2的酪氨酸酶抑制率可达到40％左右，而对比例1仅有26％左右，对比例2仅有11％左右。对比例2和对比例1的抑制率之和比实施例2低，这说明了三七花提取物和澳洲坚果多肽的联合使用产生了一定的协同增效作用，提升了产品的美白效果。而这种协同增效作用并不是在三七花提取物和任意的蛋白类物质联合使用所能达到的。对比例3的蚕丝蛋白是现有技术中常用的用于美白的化妆品添加成分，但是，三七花提取物和蚕丝蛋白联合使用并未显示出比实施例2优异的效果。发明人将对比例2的澳洲坚果多肽等量替换为蚕丝蛋白，产品的酪氨酸酶抑制率与对比例2基本一致，在10％左右。对比例4和对比例5使用非甘油的其他成分与澳洲坚果多肽混合，获得的产品的酪氨酸酶抑制率较实施例2有所下降，三七花提取物和澳洲坚果多肽未显示出协同增效的现象。这说明，三七花提取物和澳洲坚果多肽的协同增效的作用发挥，需要在一定的制备工艺条件下产生。对比例9未将三七花提取物和澳洲坚果果油进行密封孵育，三七花提取物和澳洲坚果多肽未显示出协同增效的现象。这说明，三七花提取物和澳洲坚果多肽的协同增效的作用发挥，需要在一定的制备工艺条件下产生。
以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体技术方案和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。
Claims (4)
1.一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法，其特征在于，包括以下依次进行的步骤：
S1：将三七花提取物和澳洲坚果果油混合，经密封放置、加水和超声处理之后，获得第一乳化液；水的用量为三七花提取物和澳洲坚果果油的质量之和的两倍；超声处理的条件为：功率100W，时长20min；密封放置的时长为2h；
三七花提取物由如下方法制备：
每1g三七花粉碎后获得的药粉中加入20-40ml培养液，获得前培养体系；对前培养体系进行灭菌处理后，加入酿酒酵母，获得培养体系；酿酒酵母在培养体系中的质量分数为4-6％；将所述培养体系置于27-32℃恒温摇床中，在80-120rpm的转速下培养48-60h，然后取液相部分获得发酵液；先使用氯仿萃取所述发酵液，取水相获得萃取液I；然后使用乙酸乙酯萃取所述萃取液I，取水相获得萃取液II；干燥处理所述萃取液II，获得干粉状的三七花提取物；
所述培养液的成分为：酵母提取物0.75-1.50g/L、蛋白胨2.5-3.5g/L、柠檬酸氢二铵1.00-1.50g/L、硫酸镁0.25-0.50g/L、乳糖2-3g/L、硫酸锰0.10-0.20g/L、氯化铁0.01-0.10g/L、氯化钙0.01-0.08g/L、磷酸氢二钾1.20-1.50g/L、乙酸钠3.5-4.5g/L、吐温800.5-0.8ml/L；
S2：将澳洲坚果多肽和甘油混合，加入水，获得第二水分散液；水的用量为澳洲坚果多肽和甘油的质量之和的四倍；
澳洲坚果多肽由如下方法制备：取澳洲坚果果仁经冷榨处理后的果粕；无水乙醇脱脂后烘干，再粉碎，获得果粕粉；将果粕粉分散到沸水中，并保持10min，然后将沸水冷却至37℃，将pH值调整至7.0，再加入木瓜蛋白酶，获得酶解体系，然后酶解8h；然后离心取上清，并经减压蒸发和冷冻干燥后，获得澳洲坚果多肽；其中，果粕粉在酶解体系中的质量百分数为20％，木瓜蛋白酶的用量为果粕粉的0.5％；
S3：将第二水分散液滴加入第一乳化液中，并同时超声处理第一乳化液；滴加完成后继续超声处理，获得第二乳化液；滴加时，超声处理的条件为：功率50W；滴加完成后，超声处理的条件为：功率50W，时长10min；滴加速度为1滴/秒；
S4：在第二乳化液中加入甜菜碱和柠檬酸混匀；再加入海藻酸钠、透明质酸钠、黄原胶混匀，获得澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液。
2.根据权利要求1所述的一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法所制备的精华液。
3.根据权利要求2所述的一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法所制备的精华液，其特征在于，以重量份计，其原料包括：三七花提取物5-10份、澳洲坚果果油3-5份、澳洲坚果多肽0.5-1份、甘油1-3份、甜菜碱0.3-0.5份、柠檬酸0.1-0.2份、海藻酸钠0.2-0.3份、透明质酸钠0.1-0.2份、黄原胶0.1-0.3份。
4.根据权利要求3所述的一种含澳洲坚果果油和多肽的三七花精华液的制备方法所制备的精华液，其特征在于，以重量百分数计，其原料包括：三七花提取物8％、澳洲坚果果油5％、澳洲坚果多肽1％、甘油2％、甜菜碱0.4％、柠檬酸0.1％、海藻酸钠0.3％、透明质酸钠0.2％、黄原胶0.2％，余量为水。
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