CN115820375A - 一种提高食用酒精风味的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高食用酒精风味的方法，所述方法为：向体积浓度为90‑40％的食用酒精水溶液中，加入有机酸和固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，25‑35℃静置催化反应2‑5天，反应结束后，过滤，分离出固定化脂肪酶，滤液即为提高风味的食用酒精；所述固定化脂肪酶是将脂肪酶用大孔吸附树脂吸附固定。尽管液态发酵生产食用酒精粮食利用率高，生产成本低，是今后的发展方向，但食用酒精风味差。因而，本发明采用酿酒真菌生产的食品级脂肪酶，并将其固定化后，用于食用酒精中催化乙醇与有机酸酯化，提高食用酒精的风味，食品安全性高，经济成本低，在我国有理想的应用价值。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种提高食用酒精风味的方法。
(二)背景技术
食用酒精采用粮食为原料，液体深层发酵生产，食品安全性有保障。与固态发酵生产白酒相比，食用酒精生产成本低，产量大，但风味较固态发酵白酒差距明显。白酒行业常采用添加香精的方法，增强食用酒精的风味，配制成系列酒精浓度的液体发酵白酒，但添加香精的方法不利于食品安全。为此，酿酒企业将含有酿酒酵母的白酒发酵窑泥，用于食用酒精催化乙醇与有机酸酯化，提高食用酒精的风味，制成风味较好的液体发酵白酒。但固态发酵白酒的窑泥只能在酿酒企业内部应用，无法推广。
我国白酒消费量大，而粮食液态发酵生产食用酒精食品安全有保障，生产成本低，配制成系列酒精浓度的液体发酵白酒适合大众消费，但风味淡薄使其市场竞争力差。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种提高食用酒精风味的方法，采用酿酒真菌发酵得到的食品级脂肪酶，并将脂肪酶固定化后，用于食用酒精催化乙醇与有机酸酯化，模拟固态发酵生产白酒风味形成的机制，从而大幅提高食用酒精风味，生产成本低，保障食用安全性，有良好的应用前景，易于推广应用。
本发明采用的技术方案是：
本发明提供一种提高食用酒精风味的方法，所述方法为：向体积浓度为90-40％的食用酒精水溶液中，加入有机酸和固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，25-35℃静置催化反应2-5天，反应结束后，过滤，分离出固定化脂肪酶，滤液即为提高风味的食用酒精；所述固定化脂肪酶是将脂肪酶用大孔吸附树脂吸附固定；所述有机酸包括己酸、乳酸或乙酸。
优选的，所述有机酸加入量以食用酒精水溶液体积计为2.0-8.0g/L(加入酸的量按乙酸分子量计)；所述固定化脂肪酶加入量以食用酒精水溶液体积计为1-6g/L。
优选的，所述固定化脂肪酶中脂肪酶包括黑曲霉脂肪酶、米曲霉脂肪酶，酶活19-30万单位/克。
优选的，所述固定化脂肪酶按如下方法制备：将预处理后的大孔吸附树脂加入脂肪酶酶液中，在25-35℃保温，60-100转/分钟搅拌下吸附3-6h，过滤，滤饼用蒸馏水洗涤后(优选洗涤3次，每次蒸馏水用量为树脂质量的6-7倍)，真空干燥(优选在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h)，控制含水量10％以下，获得固定化脂肪酶；所述脂肪酶酶液是将脂肪酶溶于0.05mol/LpH7.5的磷酸钠缓冲液中，150W超声3分钟助溶，过滤，收集滤液即为脂肪酶酶液；所述脂肪酶酶液的浓度为5.0-15.0mg/mL。
优选的，所述脂肪酶酶酶液体积用量以大孔吸附树脂质量计为9-34ml/g，优选12.5ml/g。
优选的，所述大孔吸附树脂的型号包括D4006、D3520、D1300。
优选的，所述大孔吸附树脂预处理方法为：将大孔吸附树脂加入95％乙醇中，于室温、150r/min的条件下震荡洗涤24小时，并于中途两次更换乙醇，震荡结束后，用蒸馏水洗涤(优选五次，每次蒸馏水用量以大孔吸附树脂质量计为2ml/g)，抽滤，滤饼即为预处理后的大孔树脂，滤液蒸馏回收乙醇。所述95％乙醇体积用量以大孔吸附树脂质量计为10ml/g。
与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在：尽管液态发酵生产食用酒精粮食利用率高，生产成本低，是今后的发展方向，但食用酒精风味差。因而，本发明采用酿酒真菌生产的食品级脂肪酶，并将其固定化后，用于食用酒精中催化乙醇与有机酸酯化，提高食用酒精的风味，食品安全性高，经济成本低，在我国有理想的应用价值。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
本发明所述室温是指25-30℃。本发明食用酒精达到国标的食品级要求。
实施例1：
1、固定化脂肪酶的制备
(1)树脂预处理：称取天津浩聚树脂科技有限公司生产的D4006型大孔树脂150g置于2500mL的烧杯中，加入1500ml 95％乙醇，于室温、150r/min的条件下震荡洗涤24小时，并于中途两次更换95％乙醇。震荡结束后，每次用300ml蒸馏水洗涤五次，抽滤，滤饼即为预处理后的树脂，备用。滤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶的制备：称取17克黑曲霉脂肪酶(Aspergillus niger lipase，深圳绿微康生物工程有限公司生产，30万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为10.2mg/ml。将1491mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂120克，在30℃保温，100转/分钟搅拌吸附5h，过滤，获得滤饼和滤液。滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为94.6％。滤饼用720ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到86.5克固定化脂肪酶，质量含水量9.7％。
脂肪酶含量的测定采用考马斯亮兰分光光度法：以考马斯亮兰试剂与酶蛋白溶液显色，在595nm处测定吸光度。以牛血清白蛋白为标准品作标准曲线，以标准曲线法得到配制的酶液中酶蛋白含量。在树脂吸附脂肪酶后，测定过滤出树脂后的滤液中酶蛋白的量，计算固定化脂肪酶的固定化率，具体方法如下：
准确称取100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50mL95％乙醇中，加入100mL85％磷酸，用蒸馏水稀释至1000mL，配制得到考马斯亮蓝试剂。配制牛血清蛋白(BSA)标准溶液，在595nm处测定吸光度，并制作标准曲线。BSA标准曲线的制作见表1。
表1牛血清蛋白标准曲线制作
各试管配制完毕，摇匀，室温下显色2min。在595nm处测定溶液的吸光度，并以吸光度A为纵坐标，蛋白含量为横坐标作图。
标准曲线方程为Y＝6.3014X-0.0062，R2＝0.9948。
固定化率的计算：测定初始配制的酶液和树脂吸附后过滤得到的酶液的吸光值A1和A2，根据标准曲线分别计算蛋白含量X1和X2，继而算出各自的总蛋白含量b1和b2。
b(mg)＝蛋白含量(X)/取样体积(ml)×酶液体积(mL)
固定化率计算公式如下：固定化率％＝(b1-b2)/b1×100％
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中己酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入己酸27g，18g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应4天，反应结束后，过滤，滤饼分离出固定化脂肪酶；滤液即为完成酯化的食用酒精水溶液，按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定，总酯含量(按乙酸乙酯计)3.35g/L，总酸含量(按乙酸计)1.57g/L。
国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定，具体操作如下：
吸取滤液2份，各10.00mL，分别于2个250mL磨口锥形瓶中，加2滴酚酞指示剂(0.5％水溶液)，以标定好的0.10mol/L氢氧化钠标准溶液(去离子水配制)滴定至粉红色，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再准确加入氢氧化钠标准溶液(去离子水配制)5.00mL(总酯含量高的，可加至10.00mL)，摇匀，装上冷凝管，于油浴110℃上回流30min，取下，冷却。然后用标定好的0.05mol/L盐酸标准溶液(去离子水配制)进行滴定，使微红色刚好消失为其终点，记录消耗盐酸标准溶液的体积V。
样品中总酸含量(按乙酸计，分子量60.05)的计算公式为：
样品中总酯含量(按乙酸乙酯计，分子量88.11)的计算公式为：
根据检测得到的总酸与总酯含量，评价固定化脂肪酶提高食用酒精风味的效果。
实施例2：
1、固定化脂肪酶
(1)称取南开大学化工厂生产的D3520型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取9克黑曲霉脂肪酶(Aspergillus nigerlipase，南宁庞博生物工程有限公司生产，30万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为5.5mg/ml。将1492mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂45克，在35℃保温，60转/分钟搅拌吸附6h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为90.7％。滤饼用300ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到32.8克固定化脂肪酶，质量含水量9.1％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中己酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为40％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入己酸13.5g，6g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于35℃静置催化反应5天，反应结束后过滤分离出固定化酶，滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定，总酯含量(按乙酸乙酯计)2.11g/L，总酸含量(按乙酸计)0.55g/L。
实施例3：
1、固定化脂肪酶
(1)树脂预处理：称取天津浩聚树脂科技有限公司生产的D1300型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取24克黑曲霉脂肪酶(Aspergillus nigerlipase，山东正升生物科技有限公司生产，30万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为15.1mg/ml。将1492mL酶液加入步骤)(1)预处理后的树脂136克，在25℃保温，80转/分钟搅拌吸附4h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为91.5％。滤饼用820ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到95.3克固定化脂肪酶，质量含水量9.6％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中己酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为90％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入己酸21g，20g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应2天，反应结束后过滤分离出固定化酶，取滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.56g/L，总酸含量(按乙酸计)1.33g/L。
实施例4：
1、固定化脂肪酶
(1)树脂预处理：称取南开大学化工厂生产的D3520型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂，备用。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取19克黑曲霉脂肪酶(Aspergillus nigerlipase，南宁庞博生物工程有限公司生产，30万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为11.3mg/ml。将1491mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂150克，在25℃保温，90转/分钟搅拌吸附3h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为92.8％。滤饼用1000ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到98.6克固定化脂肪酶，质量含水量9.8％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中乙酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为50％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入乙酸12.5g，16g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于25℃静置催化反应4天，反应结束后过滤分离出固定化酶，滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.75g/L，总酸含量(按乙酸计)1.63g/L。
实施例5：
1、固定化脂肪酶
(1)树脂预处理：称取天津浩聚树脂科技有限公司生产的D4006型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂，备用。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取18克黑曲霉脂肪酶(Aspergillus nigerlipase，山东正升生物科技有限公司生产，28万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为10.7mg/ml。将1491mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂120克，在30℃保温，70转/分钟搅拌吸附5h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为92.6％。滤饼用720ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到81.9克固定化脂肪酶，质量含水量9.4％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中乳酸与乙醇酯化：将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入乳酸18g，19g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应5天，反应结束后过滤分离出固定化酶，滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.75g/L，总酸含量(按乙酸计)1.52g/L。
实施例6：
1、固定化脂肪酶
(1)树脂预处理：称取天津浩聚树脂科技有限公司生产的D4006型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂，备用。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取22克米曲霉脂肪酶(Aspergillus oryzaelipase，南京通盈生物科技有限公司生产，18万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/LpH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为13.2mg/ml。将1492mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂140克，在30℃保温，90转/分钟搅拌吸附4h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为93.1％。滤布用840ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到94.5克固定化脂肪酶，质量含水量9.6％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中己酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入己酸19g，18g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应4天，反应结束后过滤分离出固定化酶，取滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.72g/L，总酸含量(按乙酸计)0.92g/L。
实施例7：
1、固定化脂肪酶
(1)树脂预处理：称取南开大学化工厂生产的D3520型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的树脂，备用。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取16克米曲霉脂肪酶(Aspergillus oryzaelipase，泰州聚丰源生物科技有限公司生产，20万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/LpH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为9.7mg/ml。将1492mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂150克，在35℃保温，100转/分钟搅拌吸附3h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为91.7％。滤饼用900ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到94.3克固定化脂肪酶，质量含水量9.8％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中乙酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入乙酸11g，13g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应3天，反应结束后过滤分离出固定化酶，取滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.36g/L，总酸含量(按乙酸计)1.48g/L。
实施例8：
1、固定化脂肪酶
(1)脂肪酶预处理：称取天津浩聚树脂科技有限公司生产的D1300型大孔树脂150g，按实施例1的预处理方法用乙醇洗涤处理，获得预处理后的脂肪酶，备用。洗涤液蒸馏回收乙醇。
(2)固定化脂肪酶：称取20克米曲霉脂肪酶(Aspergillus oryzaelipase，南京通盈生物科技有限公司生产，18万单位/克)溶解在1.5升浓度0.05mol/LpH7.5的磷酸钠缓冲液中(去离子水配制)，150W超声3分钟助溶，使脂肪酶充分溶解，有不溶成分漏斗滤纸过滤去除，得到澄清的脂肪酶磷酸钠缓冲液溶液(简称酶液)，采用考马斯亮兰分光光度法检测，酶浓度为12.8mg/ml。将1491mL酶液加入步骤(1)预处理后的树脂150克，在25℃保温，60转/分钟搅拌吸附6h，过滤，获得滤液和滤饼；滤液采用考马斯亮兰分光光度法检测残余的酶量，计算得到脂肪酶固定化率为93.9％。滤饼用900ml去离子水分三次洗涤后，在0.1大气压真空度40℃的真空干燥箱中干燥8h，得到97.8克固定化脂肪酶，质量含水量9.7％。
2、固定化脂肪酶催化食用酒精中乳酸与乙醇酯化：
将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入乳酸18g，20g固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，置于35℃静置催化反应4天，反应结束后过滤分离出固定化酶，取滤液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)2.71g/L，总酸含量(按乙酸计)1.53g/L。
对比例1：
脂肪酶催化食用酒精中己酸与乙醇酯化：将3500mL体积浓度为60％的食用酒精去离子水溶液置于5000mL锥形瓶中，加入己酸20g，20g黑曲霉脂肪酶(Aspergillusnigerlipase，山东正升生物科技有限公司生产，28万单位/克)，搅拌均匀，将其密封，置于30℃静置催化反应5天，反应结束后过滤分离出脂肪酶，取完成酯化的食用酒精水溶液按白酒总酸与总酯检测的国家标准GB/T10345-2007方法进行总酸、总酯含量测定。总酯含量(按乙酸乙酯计)0.76g/L，总酸含量(按乙酸计)2.38g/L。
Claims (10)
1.一种提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述方法为：向体积浓度为90-40％的食用酒精水溶液中，加入有机酸和固定化脂肪酶，搅拌均匀，将其密封，25-35℃静置催化反应2-5天，反应结束后，过滤，分离出固定化脂肪酶，滤液即为提高风味的食用酒精；所述固定化脂肪酶是将脂肪酶用大孔吸附树脂吸附固定。
2.如权利要求1所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述有机酸包括己酸、乳酸或乙酸。
3.如权利要求1所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述有机酸加入量以食用酒精水溶液体积计为2.0-8.0g/L；所述固定化脂肪酶加入量以食用酒精水溶液体积计为1-6g/L。
4.如权利要求1所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述固定化脂肪酶中脂肪酶包括黑曲霉脂肪酶、米曲霉脂肪酶。
5.如权利要求1所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述固定化脂肪酶按如下方法制备：将预处理后的大孔吸附树脂加入脂肪酶酶液中，在25-35℃保温，60-100转/分钟搅拌下吸附3-6h，过滤，滤饼用蒸馏水洗涤后，真空干燥，控制含水量10％以下，获得固定化脂肪酶；所述脂肪酶酶液是将脂肪酶溶于0.05mol/L pH7.5的磷酸钠缓冲液中，过滤，收集滤液即为脂肪酶酶液。
6.如权利要求5所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述脂肪酶酶液的浓度为5.0-15.0mg/mL。
7.如权利要求5所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述脂肪酶酶酶液体积用量以大孔吸附树脂质量计为9-34ml/g。
8.如权利要求1或5所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂的型号包括D4006、D3520、D1300。
9.如权利要求5所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于，所述大孔树脂预处理方法为：将大孔吸附树脂加入95％乙醇中，于室温、150r/min的条件下震荡洗涤24小时，并于中途两次更换乙醇，震荡结束后，用蒸馏水洗涤，抽滤，滤饼即为预处理后的大孔树脂，滤液蒸馏回收乙醇。
10.如权利要求9所述提高食用酒精风味的方法，其特征在于所述95％乙醇体积用量以大孔吸附树脂质量计为10ml/g。
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