CN115785048B - 一种gl-v9晶型及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种GL‑V9晶型及其制备方法，属于药物化学领域。所述的GL‑V9晶型命名为晶型Ⅰ，使用Cu‑Kα辐射检测的X射线粉末衍射图谱中在1.4.430°、5.366°、8.120°、8.824°、11.762°、12.901°、15.709°、16.315°、17.523°、19.290°、19.623°、20.916°、21.229°、26.982°、31.477°、36.707±0.2º（2θ）处有特征峰。本发明还提供GL‑V9晶型Ⅰ的制备方法，简便、重现性好，所得GL‑V9晶型Ⅰ稳定性好、纯度高、无引湿性且口服生物利用度较高，适于工业化生产。

Description

一种GL-V9晶型及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种GL-V9晶型及其制备方法，属于药物化学领域。

背景技术

GL-V9 属于黄酮类化合物汉黄芩素的衍生物，分子式为C₂₄H₂₇NO_5，化学名称为5-羟基-7-（4-四氢吡咯-1-基）丁氧基-8-甲氧基黄酮，其结构式如式（I）所示。

（I）

研究表明，GL-V9 具有广泛的药理活性，在制备预防和治疗肝纤维化、脓毒症、结肠炎等药物具有广阔的应用前景，同时研究发现，GL-V9 对肿瘤细胞的杀伤作用有其独特的作用机制。近年来随着国内外研究人员从不同方面对GL-V9在治疗白血病方面的深入研究，使得GL-V9 极有潜力成为新型治疗白血病的药物。

众所周知，同一药物的不同晶型往往导致药物溶解度存在差异，可造成药物溶出度和生物利用度的不同，从而影响药物在体内的吸收利用，继而使药物疗效产生差异。因此，晶型是药物开发中剂型选择时关注的首要问题之一，也是药物能否有效吸收的关键之一。此外，可以通过药物晶型特点确定制剂工艺，改善固体药物制剂的性能，有效保证生产的批间药物等效性。因此，筛选晶型对后续药物开发至关重要。

然而，目前尚无GL-V9晶型的相关报道，因此，有必要对GL-V9进行全面系统的多晶型筛选，选择最适合药物开发的晶型。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种GL-V9晶型及其制备方法。

本发明的晶型稳定性好，溶解度、引湿性符合药用要求，且制备方法简单，成本低廉，对未来该药物的优化和开发具有重要价值。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种GL-V9晶型，为晶型Ⅰ，使用Cu-Kα 辐射检测的X射线粉末衍射光谱中，2θ值在：4.430°、5.366°、8.120°、8.824°、11.762°、12.901°、15.709°、16.315°、17.523°、19.290°、19.623°、20.916°、21.229°、26.982°、31.477°、36.707°处有衍射峰，2θ值精确度为±0.2°。

根据本发明优选的，所述的晶型Ⅰ，其X射线粉末衍射图如图1所示。

根据本发明优选的，所述的晶型Ⅰ，加热至145.6℃开始出现吸热峰，其差示扫描量热分析图（DSC）如图2所示。

根据本发明优选的，所述的晶型Ⅰ，加热至142.13 ℃时，无重量损失，其热重分析图（TGA）如图3所示。

根据本发明优选的，所述的晶型Ⅰ，为无水物且是非溶剂合物。

本发明的第二个目的，是提供一种GL-V9晶型的制备方法。

一种GL-V9晶型的制备方法，按如下方法之一进行：

a、将GL-V9加热溶于溶剂a中；加热条件下，缓慢滴加溶剂b，保温搅拌；缓慢降温，析出固体，过滤干燥，得到GL-V9晶型Ⅰ。

或，

b、将GL-V9加热溶于溶剂c中，保温搅拌；缓慢降温，析出固体，过滤干燥得到GL-V9晶型Ⅰ。

根据本发明优选的，方法a中，溶剂a选自乙醇、甲醇、异丙醇或丙酮中的一种或两种以上的混合。

根据本发明优选的，方法a中，溶剂a为乙醇。

根据本发明优选的，方法a中，溶剂b选自水、异丙醚或甲基叔丁基醚中的一种或两种以上的混合。

根据本发明优选的，方法a中，溶剂b为水。

根据本发明优选的，方法a中，溶剂a与溶剂b的体积比为1:1-10。

最为优选的，方法a中，溶剂a与溶剂b的体积比为1:2。

根据本发明优选的，方法a中，GL-V9与溶剂a的质量体积比为：5：（100-300），单位，g /mL。

根据本发明优选的，方法b中，溶剂c选自乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮、DMF、DCM的一种两种以上的混合。

根据本发明优选的，方法b中，溶剂c为乙醇。

根据本发明优选的，方法b中，GL-V9与溶剂c的质量体积比为：5：（100-300），单位，g /mL。

根据本发明优选的，方法a、方法b中，加热温度为35~100℃，优选的，加热温度为50～90℃，最为优选的，加热温度为70～90℃。

根据本发明优选的，方法a、方法b中，析晶温度为-20~60℃，优选的，析晶温度为0～30℃。

根据本发明优选的，方法a、方法b中，保温搅拌时间为1~5小时。搅拌时间没有特殊的要求。

根据本发明优选的，方法a、方法b中，过滤可以用本领域常规方法过滤；所述的干燥可以为本领域常规方法干燥。

本发明的技术特点及优点：

1、本发明提供的晶型稳定性好，能很好地避免药物储存以及开发过程中发生转晶，从而避免生物利用度以及药效的改变。

2、本发明提供的晶型几乎无引湿性，满足生物利用度和药效要求，且不易受湿度影响，对储存条件要求不苛刻，便于长期贮存，大大降低了物料储存以及质量控制方面的成本，具有很强的经济价值。

附图说明

图1 为实施例1所得GL-V9的晶型Ⅰ的X射线粉末衍射谱图。

图2 为实施例1所得GL-V9的晶型Ⅰ的DSC谱图。

图3 为实施例1所得GL-V9的晶型Ⅰ的TGA谱图。

图4 为实施例1所得GL-V9晶型Ⅰ稳定性试验的XRPD叠加图。

具体实施方式

下面以具体实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。

本发明的分析检测条件如下：

本发明所述的X射线粉末衍射图在D8 ADVANCE X射线粉末衍射仪上采集。本发明所述的X射线粉末衍射的方法参数如下：

X射线反射参数：Cu，K-α辐射

Kα1 1.5406；Kα2 1.54443

Kα2/Kα1强度比例：0.50

电压：40千伏特( kV)

电流：40毫安培(mA)

扫描范围：自3 .0至40 .0度

步长：0.02°。

本发明所述的差示扫描量热分析( DSC )图在NETZSCH DSC 204上采集。本发明所述的差示扫描量热分析( DSC )的方法参数如下：

升温速率：10℃/min

扫描范围：40.0~350.0℃

保护气体：氮气。

本发明所述的热重分析( TGA )图在NETZSCH TG209上采集。本发明所述的热重分析( TGA )的方法参数如下：

升温速率：10℃/min

扫描范围：25.0~350.0℃

保护气体：氮气。

实施例1

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入150mL无水乙醇中，加热至70℃至完全溶解澄清，搅拌下缓慢滴加150m水，加毕，缓慢降温至20℃搅拌5小时，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

该实施例制得的GL-V9晶型Ⅰ固体进行X- 射线粉末衍射（XRPD）分析（见附图1）、DSC 分析（见附图2）和TGA 分析（附图3）。

实施例2

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入150mL 甲醇中，加热至60℃至完全溶解澄清，搅拌下缓慢滴加300mL水，加毕，缓慢降温至20℃搅拌5小时，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

实施例3

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入200mL无水乙醇中，加热至70℃至完全溶解澄清，搅拌下缓慢滴加200mL异丙醚，加毕，缓慢降温至20℃搅拌5小时，抽滤，用异丙醚洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

实施例4

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入150ml无水乙醇中，加热至65℃，加热搅拌至完全溶解澄清后保温半小时，缓慢降温至10℃搅拌5小时，抽滤，用乙醇洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

实施例5

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入100mL DMF中，加热至70℃，加热搅拌至完全溶解澄清后保温半小时，缓慢降温至10℃搅拌5小时，抽滤，用少量DMF洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

实施例6

GL-V9晶型的制备方法，步骤如下：

将5g GL-V9加入150mL丙酮中，加热至65℃，加热搅拌至完全溶解澄清后保温半小时，缓慢降温至10℃搅拌5小时，抽滤，用丙酮洗涤滤饼，干燥得GL-V9晶型Ⅰ。

实验例1

GL-V9晶型Ⅰ的引湿性实验：

取干燥的具塞玻璃称量瓶（外径为50mm，髙为15mm )，于试验前一天置于人工气候箱（设定温度为25℃±1℃，相对湿度为80%士2%）内，精密称定重量（20.0105g）。取实施例1制得的GL-V9晶型平铺于上述称量瓶中，厚度约为lmm，精密称定重量（20.9981g）。将称量瓶敞口，并与瓶盖同置于上述恒温恒湿条件下24小时。盖好称量瓶盖子，精密称定重量（20.9998g）。

增重百分率 = (20.9998g-20.9981g)/(20.9981g-20.0105g) ×100%= 0.17%

引湿性增重的界定(中国药典2020年版附录9103药物引湿性试验指导原则，实验条件：25℃±1℃，80%相对湿度)：

潮解：吸收足量水分形成液体。

极具引湿性：引湿增重不小于15%。

有引湿性：引湿增重小于15%但不小于2%。

略有引湿性：引湿增重小于2%但不小于0.2%。

无或几乎无引湿性：引湿增重小于0.2%。

结果表明，本发明的实施例1的晶型Ⅰ在80%相对湿度下平衡后增重0.17％，属于无或几乎无引湿性。

实验例2

GL-V9晶型Ⅰ的稳定性实验：

取实施例1制得的GL-V9晶型样品约200mg敞口分别放置25℃、60%RH以及 40℃、75%RH条件下，30天之后测晶型Ⅰ样品的XRPD和HPLC纯度。实验结果如表1所示。晶型Ⅰ不同条件下XRPD叠加图如图4所示。

结果表明，GL-V9晶型Ⅰ在 25℃、60%RH以及40℃、75%RH条件下放置30天之后样品晶型稳定，并且纯度几乎不变。XRPD谱图叠加如图4所示，可见，放置前后的谱图高度一致。

实验例3GL-V9晶型Ⅰ生物利用度试验

雄性SD大鼠3只、雌性SD大鼠3只，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供，许可证号：SCXK(苏)2017-0001。体重范围180g～220g，购入后在实验动物中心实验室饲养3天后使用，给药前12小时禁食，试验期间自由饮水。口服给药按50mg/kg灌胃给药，静注给药按5mg/kg尾静脉给药。

给药溶液的配制方法：

灌胃给药溶液以0.5%CMC-Na配制，给药前混合均匀；静脉注射给药溶液以0.3M羟丙基-β-环糊精/乳酸（99/1，v/v）配制。

灌胃给药分别于给药前和给药后5min、10min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h，取血约200 μl置含1%肝素钠的EP管中，于8000 rpm离心5 min, 分离出血浆，确定血浆药物浓度，计算药代动力学参数。

静注给药分别于给药前和给药后2min、15min、45min、2h、4h、8h、12h、24h取血约100 μl至含1%肝素钠的EP管中，于8000 rpm离心5 min, 分离出血浆，确定血浆药物浓度，计算药代动力学参数(PK参数使用WinNonlin version6.4计算)。

结果如以下表2所示：

结果表明，本发明的GL-V9晶型Ⅰ的口服生物利用度较高，为7.67%。

Claims (4)

1.一种GL-V9晶型，为晶型Ⅰ，使用Cu-Kα 辐射检测的X射线粉末衍射光谱中，2θ值在：4.430°、5.366°、8.120°、8.824°、11.762°、12.901°、15.709°、16.315°、17.523°、19.290°、19.623°、20.916°、21.229°、26.982°、31.477°、36.707°处有衍射峰，2θ值精确度为±0.2°。

2.根据权利要求1所述的GL-V9晶型，其特征在于，晶型Ⅰ加热至145.6℃开始出现吸热峰，加热至142.13 ℃时，无重量损失，为无水物且是非溶剂合物。

3.权利要求1所述的GL-V9晶型的制备方法，按如下方法之一进行：

a、将GL-V9加热溶于溶剂a中；加热条件下，缓慢滴加溶剂b，保温搅拌；缓慢降温，析出固体，过滤干燥，得到GL-V9晶型Ⅰ；溶剂a选自乙醇、甲醇、异丙醇或丙酮中的一种或两种以上的混合，溶剂b选自水、异丙醚或甲基叔丁基醚中的一种或两种以上的混合；溶剂a与溶剂b的体积比为1:1-10，GL-V9与溶剂a的质量体积比为：5：（100-300）g /mL；

或，

b、将GL-V9加热溶于溶剂c中，保温搅拌；缓慢降温，析出固体，过滤干燥得到GL-V9晶型Ⅰ；溶剂c选自乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮、DMF、DCM的一种两种以上的混合，GL-V9与溶剂c的质量体积比为：5：（100-300）g /mL。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，方法a、方法b中，加热温度为35~100℃，析晶温度为-20~60℃，保温搅拌时间为1~5小时。

Images