CN115772489A - 一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 - Google Patents
一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115772489A CN115772489A CN202211668351.0A CN202211668351A CN115772489A CN 115772489 A CN115772489 A CN 115772489A CN 202211668351 A CN202211668351 A CN 202211668351A CN 115772489 A CN115772489 A CN 115772489A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ccfm1285
- bifidobacterium adolescentis
- glucan
- product
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂,属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明提供了一株青春双歧杆菌CCFM1285,所述青春双歧杆菌CCFM1285保藏于广东省微生物菌种保藏中心。本发明青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β‑葡聚糖联合使用能够显著降低抗生素相关性腹泻小鼠的粪便含水量、缓解抗生素引起的结肠组织损伤并恢复结肠的粘液分布、降低结肠组织中促炎性细胞因子的含量、恢复盲肠内容物的短链脂肪酸含量以及有效调节肠道菌群的α和β多样性。本发明提供的复合微生态制剂在制备预防和/或治疗抗生素相关性腹泻的产品中具有巨大的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂,属于微生物技术领域以及医药技术领域。
背景技术
抗生素相关性腹泻(Antibiotic-associated diarrhea,AAD)是指在使用抗生素时发生的其他原因不明的腹泻。AAD的主要机制包括常驻胃肠道微生物群和粘膜完整性的破坏、病原体的过度生长以及代谢失衡。据估计,大约5-35%的患者在抗生素治疗期间或结束时会发生AAD,临床症状从无并发症的轻度腹泻到严重结肠炎、暴发伪膜性结肠炎,甚至死亡不等。任何抗生素都可能导致AAD,但主要针对厌氧菌且吸收不良的广谱抗生素(如克林霉素、头孢菌素和阿莫西林-克拉维酸盐)的AAD发病率较高。
当前,治疗AAD的方法主要是停用或更换抗生素。在已知AAD病因的情况下,可以使用针对这些病原体的特定抗生素。例如艰难梭菌感染相关AAD的患者,可以口服万古霉素和甲硝唑进行治疗。对于复发性艰难梭菌相关AAD的抗生素治疗策略包括使用延长的、逐渐减量的剂量方案或脉冲(每隔一天)方案重复抗生素疗程。但由于抗生素的频繁使用,易于导致耐药性菌株的出现,以及伴随一定的不良反应。鉴于传统治疗方法存在多种问题,探寻一种新的有效治疗AAD的方法显得尤为重要。
虽然现有技术当中有公开采用单形拟杆菌能够协同缓解AAD,但是其是不能用于食品药品的菌株,具有安全隐患,因此,提供一种具有治疗AAD功能的药品食品中可添加的微生态制剂,对于缓解或治疗AAD有重要的应用价值。
发明内容
本发明提供了一株青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285,所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:62967,保藏日期为2022年11月13日。
所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285采集自河南省郑州市管城回族区一位健康成年男性的粪便样本,提取所筛选青春双歧杆菌的基因组,将其16S rDNA进行扩增和测序(由上海生工生物工程股份有限公司完成),经测序分析,该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示,将该序列在GenBank中进行比对,与双歧杆菌属的同源度为:98.17%;结果显示菌株均为青春双歧杆菌,命名为青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285。
所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285的菌体特征:革兰氏染色阳性杆状细菌,极少以分叉状、弯杆状的形态呈现,无芽孢形成。
所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285的菌落特征:在改良MRS固体培养基上的菌落呈瓷白色,圆形凸起,湿润,边缘整齐光滑。
所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285的生长特性:该菌株为严格厌氧菌,对氧气敏感,在37℃生长最佳。
本发明提供了一种微生物制剂,所述微生物制剂中含有所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285或其发酵液或其冻干粉。
在本发明的一种实施方式中,所述微生物制剂中,青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285在微生物制剂中的活菌数为不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
在本发明的一种实施方式中,所述菌剂是将含有所述青春双歧杆菌CCFM1285的菌液通过常规冷冻干燥工艺制备或其他工艺制备所得到的粉剂。
本发明提供了一种复合微生态制剂,所述复合微生态制剂中含有所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285及酵母β-葡聚糖(市售);按质量百分比组成,所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285添加量为1%~10%,所述酵母β-葡聚糖添加量为90%~99%。
在本发明的一种实施方式中,所述酵母β-葡聚糖购自:安琪酵母股份有限公司。
本发明还提供了一种产品,所述产品中含有所述青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)CCFM1285或所述微生物制剂或所述复合微生态制剂。
在本发明的一种实施方式中,所述产品为食品、药品或保健品。
在本发明的一种实施方式中,所述青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)CCFM1285在产品中的活菌数不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
在本发明的一种实施方式中,所述药品是由上述复合微生态制剂及在药学上可接受的载体组成的。
在本发明的一种实施方式中,在所述药品中,所述复合微生态制剂的添加量是所述药品重量的15~35%,或20~30%。
在本发明的一种实施方式中,在药学上可接受的载体是一种或多种选自药学上通常使用的填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂及矫味剂的载体。
在本发明的一种实施方式中,所述填充剂应该理解为用于增加片剂重量和体积而便于压片的辅料稀释剂,或以吸收原料中多余液体成分的辅料吸收剂。
在本发明的一种实施方式中,所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、硫酸钙或微晶纤维素。
在本发明的一种实施方式中,所述粘合剂应该理解为原料药物本身无粘性或粘性不足,需加入粘性物质以便于制粒。所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮。
在本发明的一种实施方式中,所述润湿剂应该理解为原料药物本身无粘性,但可润湿其药物原辅料并诱发其粘性而制成颗粒的液体。所述润湿剂选自水、乙醇、淀粉或糖浆。
在本发明的一种实施方式中,所述崩解剂应该理解为一种能够加入片剂中而促进其片剂在胃肠液中快速崩解成细小粒子的辅料。
在本发明的一种实施方式中,所述崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羧丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠。
在本发明的一种实施方式中,所述润滑剂应该理解为一种有利于提高片剂在制粒过程中的流动性,有利于片剂脱模的化学物质。
在本发明的一种实施方式中,所述润滑剂选自滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、微粉硅胶或聚乙二醇。
在本发明的一种实施方式中,所述矫味剂应该理解为在药品中用以改善或屏蔽药物不良气味和味道的药用辅料。
在本发明的一种实施方式中,所述的矫味剂选自:如单糖浆、蔗糖、卵磷脂、橙皮糖浆或樱桃糖浆的甜味剂;柠檬、茴香或薄荷油的芳香剂;海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素或羧甲基纤维素钠的胶浆剂;柠檬酸、酒石酸或碳酸氢钠混合物的泡腾剂。
本发明还提供了一种青春双歧杆菌冻存剂,所述青春双歧杆菌冻存剂中,含有活菌数不少于1010CFU/mL的青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285。
在本发明的一种实施方式中,所述冻存剂是将上述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285接种至培养基中,培养至24~30h,用pH 7.0~7.2的磷酸盐缓冲液清洗2次后,加入保护剂,于80℃保存备用。
在本发明的一种实施方式中,所述保护剂含有半胱氨酸盐酸盐1g/L,甘油200g/L。
本发明还提供了上述青春双歧杆菌CCFM1285的培养方法,所述方法为将所述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285接种至培养基中,于37℃厌氧培养。
在本发明的一种实施方式中,培养24~30h菌株达稳定期。
在本发明的一种实施方式中,应用改良MRS培养基进行培养。
在本发明的一种实施方式中,所述改良MRS培养基中还加入半胱氨酸盐酸盐1g/L,氯化血红素0.01g/L,维生素K1 0.002g/L。
本发明还提供了上述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285或上述微生物制剂或所述复合微生态制剂在制备缓解和/或治疗抗生素相关性腹泻的产品中的应用。或在制备益生菌保健品,或在制备益生菌食品中的应用。
在本发明的一种实施方式中,所述产品为食品、药物或保健品。
在本发明的一种实施方式中,所述青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)CCFM1285在产品中的活菌数不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
本发明还提供了上述青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285或上述微生物制剂或所述复合微生态制剂在制备缓解和/或治疗抗生素相关性腹泻的益生菌保健品、益生菌食品中的应用。
本发明还提供所述复合微生态制剂在食品、保健品方面的应用。
有益效果
(1)本发明所述的复合微生态制剂含有所述青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)CCFM1285及酵母β-葡聚糖,具有下列性质:
1)能够显著降低AAD小鼠的粪便含水量。
2)能够保护由于抗生素引起的结肠组织损伤并恢复结肠的粘液分布。
3)能够降低抗生素导致的结肠组织中促炎性细胞因子的含量。
4)能够恢复盲肠内容物的短链脂肪酸含量。
5)能够有效调节肠道菌群的α和β多样性。
(2)本发明通过酵母β-葡聚糖与青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285协同发挥缓解AAD作用。由于酵母β-葡聚糖与青春双歧杆菌均是可用于食品的添加物,因此,本发明的复合微生态制剂应用范围广,安全性高。
生物材料保藏
一株青春双歧杆菌Bifidobacterium adolescentis CCFM1285,分类学命名为:Bifidobacterium adolescentis,已于2022年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:62967,保藏地址为:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,广东省微生物研究所。
附图说明
图1:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠粪便含水量的影响。
图2:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠结肠组织病理学结构的影响。
图3:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠结肠组织中促炎性细胞因子含量的影响。
图4:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠短链脂肪酸产量的影响。
图5:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠肠道菌群组成和多样性的影响。
具体实施方式
下述实施例中所涉及的酵母β-葡聚糖购自:安琪酵母股份有限公司,下述实施例中所涉及的单形拟杆菌FGDLZ48B1保藏于江南大学食品生物技术中心菌种保藏库。
下述实施例中涉及的培养基如下:
双歧杆菌特异性筛选培养基(1L):10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母提取物、20g葡萄糖、5g乙酸钠、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、2g柠檬酸二铵、0.1g七水硫酸镁、0.05g一水硫酸锰、蒸馏水:1000mL;pH:6.2-6.4;115℃灭菌20min。
配制固体培养基时,添加15g琼脂,并在倒平板前,分别按1‰、0.5‰培养基的体积加入无菌的莫匹罗星和无菌的制霉菌素,即终浓度分别为100μg/mL莫匹罗星、25U/mL制霉菌素。
改良MRS固体培养基(1L):蛋白胨10g、葡萄糖20g、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g、牛肉膏10g、磷酸二氢钾2g、无水乙酸钠2g、酵母粉5g、柠檬酸氢二铵2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、吐温80 1mL、琼脂20g。
改良MRS液体培养基(1L):蛋白胨10g、葡萄糖20g、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g、牛肉膏10g、磷酸二氢钾2g、无水乙酸钠2g、酵母粉5g、柠檬酸氢二铵2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、吐温80 1mL。
改良脑心浸液固体培养基(1L):脑心浸液38.5g、L-半胱氨酸盐酸盐1g、血晶质溶液10mL(1mg/mL)、维生素K1 1mL(2mg/mL)、琼脂20g。
改良脑心浸液液体培养基(1L):脑心浸液38.5g、L-半胱氨酸盐酸盐1g、血晶质溶液10mL(1mg/mL)、维生素K1 1mL(2mg/mL)。
实施例1:青春双歧杆菌CCFM1285的筛选及鉴定
1、样品采集
采集河南省郑州市管城回族区一位健康成年男性的粪便样本,置于装有30%甘油的样品采集管中,保存在装有冰袋的保温盒,带回实验室后迅速置于-80℃冰箱待分离筛选。
2、菌株的分离纯化
(1)稀释涂布:取保存于30%甘油管中的粪便样本约0.5g,无菌条件下与4.5mL生理盐水在10mL离心管中混匀,得到10-1稀释液,重复上述操作,依次得到10-2、10-3、10-4、10-5、10-6稀释液;
(2)涂布培养:分别吸取100μL步骤(1)中10-4、10-5、10-6三个梯度稀释液于双歧杆菌特异性筛选培养基上,用涂布棒涂布均匀,至37℃厌氧条件下培养48h,得到稀释涂布平板;
(3)纯化培养:取菌落数在30-300区间的稀释涂布平板,每个样本随机挑选10个瓷白色,表面光滑湿润,边缘整齐的菌落在改良MRS固体培养基上划线,然后置于37℃厌氧条件下培养48h,得到单菌落。接着将单菌落接种于改良MRS液体培养基中,置于37℃厌氧条件下培养24h,得到的即为纯化后的培养液。
3、菌种保藏与鉴定
提取所筛选青春双歧杆菌的基因组,将其16S rDNA进行扩增和测序(由上海生工生物工程股份有限公司完成),经测序分析,该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示,将该序列在GenBank中进行比对,与双歧杆菌属的同源度为:98.17%;结果显示菌株均为青春双歧杆菌,命名为青春双歧杆菌CCFM1285。
实施例2:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠粪便含水量的影响。
具体步骤如下:
(1)灌胃液的制备:
1)将保藏的青春双歧杆菌CCFM1285菌株划线接种在改良MRS固体培养基上,37℃厌氧培养48h后,挑取单菌落接种在MRS液体培养基中,继续厌氧培养24h,并连续活化三代。
将活化后的菌株进行菌落计数和传代培养,以6000g离心5~10min收集菌泥,并根据菌落计数结果,用无菌磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)将菌株重悬至指定浓度:2.5×109CFU/mL。
2)酵母β-葡聚糖用无菌PBS配置成浓度为80mg/mL的水溶液,静置12h,过夜水合。
3)将实验室保藏的单形拟杆菌FGDLZ48B1菌株划线接种在改良BHI固体培养基上,37℃厌氧培养48h后,挑取单菌落接种在改良BHI液体培养基中,继续厌氧培养18h,并连续活化三代。
将活化后的菌株进行菌落计数和传代培养,以6000g离心5~10min收集菌泥,并根据菌落计数结果用无菌PBS将菌株重悬至指定浓度:2.5×109CFU/mL。
(2)实验动物:
SPF级7周龄雄性BALB/C小鼠,购于北京维通利华实验动物有限公司,饲养在环境温度为23±2℃,相对湿度为50±10%的SPF级屏障环境中。
(3)实验方法:
新进SPF级BALB/c小鼠先进行7天的适应性喂养,然后将60只小鼠随机均分为6组,分别为:正常对照组、模型组、阳性参照(单形拟杆菌+青春双歧杆菌;Bu+Ba)组、CCFM1285(青春双歧杆菌;Ba)组、β-葡聚糖(Glu)组,β-葡聚糖+CCFM1285(β-葡聚糖+青春双歧杆菌;Glu+Ba)组。
适应期结束后,除正常对照组外,其它组的小鼠连续3天每天上午8:00和晚上20:00灌胃两次盐酸林可霉素(LH)溶液,恢复期每天给小鼠灌胃0.2mL的PBS或用PBS重悬的菌悬液;具体操作如表1所示。
表1:β-葡聚糖与青春双歧杆菌对AAD小鼠的缓解效果实验方案
灌胃七天后处死小鼠。
处死小鼠前一天收集小鼠的粪便,采用真空冻干机来测定粪便含水量,结果如图1所示。
结果显示,对AAD小鼠进行不同处理之后,正常对照组小鼠的粪便含水量为:57.29%;
阳性参照组、CCFM1285组(Ba组)、β-葡聚糖组(Glu组)以及和β-葡聚糖联用组(Glu+Ba组)小鼠的粪便含水量相对于模型组(为:68.20%)均有显著的下降,分别为:60.91%、68.16%、62.24%、61.95%,说明各组对小鼠的腹泻状态有所改善,其中CCFM1285和β-葡聚糖联用组(Glu+Ba组)的下降水平优于β-葡聚糖组,与阳性参照组作用相当。
由于阳性参照组中的单形拟杆菌不是可食用的菌株,不能直接用于食品、药品、保健品中,而本发明中的CCFM1285菌株和β-葡聚糖均是可食用产品,因此,本发明的CCFM1285和β-葡聚糖构成的复合微生态制剂应用广泛。
实施例3:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠结肠组织病理学结构的影响。
具体步骤如下:
具体实施方法同实施例2,处死小鼠并取部分它们的结肠组织置于4%卡诺氏固定液中用于结肠切片观察。采用AB-PAS染色法对抗生素刺激引起的小鼠结肠组织损伤以及微生态制剂干预对结肠组织的保护作用进行评价,结果如图2所示。
结果显示,正常对照组小鼠结构完整,肠绒毛整齐,杯状细胞丰富,而且粘液分布均匀且丰富;
而抗生素处理后的模型组小鼠肠上皮绒毛变短,粘液分布面积下降。
β-葡聚糖与CCFM1285联用(Glu+Ba组)可以显著恢复肠上皮绒毛长度,提高粘液的占比,恢复肠道的粘液屏障。
实施例4:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠结肠组织中促炎细胞因子含量的影响。
具体步骤如下:
具体实施方法同实施例2,处死小鼠,取它们的结肠组织并迅速保存在液氮,后续加入生理盐水研磨成组织匀浆,通过Elisa方法对于结肠组织的促炎性细胞因子含量进行测定。结果如图3所示。
结果显示,β-葡聚糖单独使用(Glu组)以及与CCFM1285联用(Glu+Ba组),与模型组(77.11pg/mg)相比,均显著降低了抗生素导致的结肠组织中IL-6水平的升高,分别为:40.90pg/mg、24.90pg/mg,其中CCFM1285和β-葡聚糖联用组低于阳性参照组,接近于正常对照组;而正常对照组、CCFM1285组干预后的小鼠的结肠组织中IL-6水平分别为:23.89pg/mg、61.24pg/mg。
此外,β-葡聚糖和CCFM1285联用(Glu+Ba组)还显著降低了IL-17的水平(为:21.77pg/mg)至接近正常对照组的水平(为:21.15pg/mg)。模型组、β-葡聚糖单独使用(Glu组)、CCFM1285组(Ba组)干预后的小鼠的结肠组织中IL-17水平分别为:71.94pg/mg、35.28pg/mg、55.39pg/mg。
综上所述,β-葡聚糖和CCFM1285联用对抗生素导致的结肠组织炎症有一定的调节作用。
实施例5:青春双歧杆菌CCFM与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠短链脂肪酸产量的影响。
具体步骤如下:
具体实施方法同实施例2,处死小鼠,收集小鼠的盲肠内容物并迅速保存在液氮中。提取内容物中的短链脂肪酸并用GC-MS进行测定,结果如图4及表2所示。
表2:不同组别处理小鼠后短链脂肪酸的含量(μmol/g)
结果显示,抗生素处理(模型组)后,AAD小鼠肠道内乙酸、丙酸、异戊酸、异丁酸水平均显著下降。
如图4A~D可知,阳性参照组、β-葡聚糖组以及和CCFM1285联用组的乙酸和丙酸水平均显著性上升。在图4D中,所有实验组的异丁酸水平与模型组相比均显著性上升。
综上所述,β-葡聚糖单用以及与CCFM1285联用也能一定程度恢复抗生素导致的盲肠内容物中SCFAs水平的下降,调节肠道内的微生态环境,接近阳性对照组的效果。
实施例6:青春双歧杆菌CCFM1285与酵母β-葡聚糖联用对AAD小鼠肠道菌群组成和多样性的影响。
具体步骤如下:
具体实施方法同实施例2,处死小鼠,收集小鼠的结肠内容物并迅速保存在液氮中,提取内容物中的DNA并进行上机测定。
结果如图5A、B所示,抗生素的灌胃(模型组)导致小鼠的香农指数和费雪指数显著降低。但是经过β-葡聚糖和CCFM1285的联合灌胃(Glu+Ba组)后,AAD小鼠肠道菌群的α-多样性得到显著提高,说明联合灌胃处理对菌群的组成的多样性有显著改善作用。
如图5C所示,基于Jaccard指数的距离聚类显示,β-葡聚糖组以及与CCFM1285联合使用组改善了小鼠的菌群紊乱,使得菌群的结构更接近于健康小鼠。
实施例7:制备含有本发明微生态制剂的胶囊制品
将本发明的青春双歧杆菌CCFM1285在改良MRS培养基中于37℃厌氧培养24小时,在4℃于5000rpm条件下离心15min,用无菌的磷酸盐缓冲液(pH 7.2)冲洗1~2次,使用保护剂重悬菌体使菌体终浓度达到1010CFU/mL。将菌悬液加入浓度为3%的海藻酸钠溶液中,使菌体浓度不小于1×106CFU/mL充分搅拌使得普通拟杆菌CCFM1285的细胞均匀分散于海藻酸钠溶液中得到混合液,然后将此混合液挤压到浓度为2%的氯化钙溶液中形成胶粒,待形成的胶粒静止固化30min后,过滤收集胶粒,将收集得到的胶粒进行冷冻干燥48小时,得到含青春双歧杆菌CCFM1285粉剂,将该粉剂与酵母β-葡聚糖一同装入市售的药用胶囊,即得胶囊制品。
保护剂的成分包含:100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L的L-谷氨酸钠。
实施例8:利用本发明微生态制剂制备片剂
分别称取采用冷冻干燥方法制备的青春双歧杆菌CCFM1285菌粉制剂25.7重量份、酵母β-葡聚糖55.0重量份、纤维素衍生物4.5重量份、羧甲基淀粉钠12.0重量份、滑石粉0.8重量份、蔗糖1.0重量份与水1.0重量份,混合,采用常规方法制成湿颗粒,然后使用中南制药机械厂生产的压片机进行压片,使用青州市益康中药机械有限公司生产的小型药物干燥机进行干燥,再包装得到本发明的片剂。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (10)
1.一株青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)CCFM1285,其特征在于,所述青春双歧杆菌CCFM1285保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:62967,保藏日期为2022年11月13日。
2.一种微生物制剂,其特征在于,所述微生物制剂中含有权利要求1所述的青春双歧杆菌CCFM1285或其发酵液或其冻干粉。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂,其特征在于,所述微生物制剂中,青春双歧杆菌CCFM1285在微生物制剂中的活菌数不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
4.一种复合微生态制剂,其特征在于,所述复合微生态制剂中含有权利要求1所述的青春双歧杆菌CCFM1285及酵母β-葡聚糖;按质量百分比组成,所述青春双歧杆菌CCFM1285添加量为1%~10%,所述酵母β-葡聚糖添加量为90%~99%。
5.一种产品,其特征在于,所述产品中含有权利要求1所述的青春双歧杆菌CCFM1285或权利要求2或3所述的微生物制剂或权利要求4所述的复合微生态制剂。
6.根据权利要求5所述的产品,其特征在于,所述产品为食品、药品或保健品。
7.根据权利要求6所述的产品,所述青春双歧杆菌CCFM1285在产品中的活菌数不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
8.权利所述1的青春双歧杆菌CCFM1285或权利要求2或3所述的微生物制剂或权利要求4所述的复合微生态制剂在制备缓解和/或治疗抗生素相关性腹泻的产品中的应用,或在制备益生菌保健品、益生菌食品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述产品为食品、药物或保健品。
10.根据权利要求9所述的应用,所述青春双歧杆菌CCFM1285在产品中的活菌数不低于5×108CFU/mL或5×108CFU/g。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211668351.0A CN115772489A (zh) | 2022-12-23 | 2022-12-23 | 一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211668351.0A CN115772489A (zh) | 2022-12-23 | 2022-12-23 | 一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115772489A true CN115772489A (zh) | 2023-03-10 |
Family
ID=85392998
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202211668351.0A Pending CN115772489A (zh) | 2022-12-23 | 2022-12-23 | 一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115772489A (zh) |
-
2022
- 2022-12-23 CN CN202211668351.0A patent/CN115772489A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN112322528B (zh) | 一株可干预代谢综合征的鼠李糖乳杆菌及应用 | |
CN113368139A (zh) | 一种具有缓解肠易激综合征功效的微生物复合物及其制备方法和应用 | |
WO2013127146A1 (zh) | 一种能够缓解铅毒性的植物乳杆菌及其用途 | |
CN110141585A (zh) | 一种用于调节肠道菌群的复合益生菌发酵菌剂及其制备方法 | |
CN112553117B (zh) | 一株能够抑制皮肤角质层增厚的罗伊氏乳杆菌及其应用 | |
US20210038655A1 (en) | Bacteroides fragilis for Relieving Endotoxin Infection and Application Thereof | |
CN110917174A (zh) | 调节女性阴道菌群平衡的口服益生菌胶囊剂及其制备方法 | |
CN116731891B (zh) | 一株短双歧杆菌b2798及其制备益生菌制剂的用途 | |
CN116121154B (zh) | 一种乳明串珠菌及其应用 | |
CN115607577B (zh) | 一种具有缓解口腔炎症功效的益生菌剂及其制备方法和应用 | |
US20130309212A1 (en) | Lactobacillus salivarius and method for preparing metabolite thereof, composition of lactobacillus salivarius and metabolite thereof and use of the composition | |
CN114540243A (zh) | 一种能够预防和或治疗幽门螺杆菌感染的鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
CN114657084B (zh) | 一种缓解溃疡性结肠炎的长双歧杆菌及其应用 | |
CN115119940A (zh) | 嗜酸乳杆菌LA85和乳双歧杆菌BLa80在抑制幽门螺旋杆菌上的应用 | |
CN111635874B (zh) | 一株能够调控肠道阿克曼菌属相对丰度的脆弱拟杆菌 | |
KR101833832B1 (ko) | 질염 예방 및 치료용 특정 유산균 함유 조성물 및 이의 용도 | |
CN116891810A (zh) | 具有降血糖功效的益生菌组合物、益生菌益生元复合制剂 | |
CN115772489A (zh) | 一种能够缓解抗生素相关性腹泻的复合微生态制剂 | |
US20210060091A1 (en) | Bacteroides ovatus for Relieving Endotoxin Infection and Application thereof | |
CN113041266B (zh) | 一株改善银屑病样小鼠病理特征的干酪乳杆菌及其应用 | |
CN116083286B (zh) | 一株婴儿双歧杆菌b8762及其制备益生菌制剂的用途 | |
CN117987330B (zh) | 具有清除自由基、缓解便秘作用的副干酪乳杆菌gf027冻干粉的制备方法及应用 | |
CN116396891B (zh) | 嗜酸乳杆菌la-g80、两歧双歧杆菌bb-g90的益生菌组合物及在护肝方面的应用 | |
CN116790402B (zh) | 一株具有抗炎特性的单形拟杆菌菌株、培养方法及应用 | |
CN115838662A (zh) | 一株具有缓解克罗恩病潜力的两歧双歧杆菌 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |