CN115769834A - 一种用于防治水果采后腐烂的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于防治水果采后腐烂的方法，属于果蔬贮藏保鲜技术领域。本发明将水果置于2μM/L～500μM/L松柏醇溶液中浸泡5～10min，晾干后包装，常温贮藏。采用本发明防治剂防治水果采后腐烂简单易行，安全高效，能在不影响水果正常品质的条件下，显著抑制水果因真菌侵染而引起的腐烂，抑制率达到50％以上。该方法可以用于多种水果及鲜切产品防腐。

Description

一种用于防治水果采后腐烂的方法

技术领域

本发明涉及采后水果保鲜技术领域，具体的说，涉及松柏醇在防治水果采后腐烂中的应用。

背景技术

水果采后在常温下放置，很容易发生变质和腐烂，尤其是受到机械损伤有明显伤口的水果，其防御能力会随着贮藏而逐渐下降，很快就会受到微生物侵袭和污染。引起水果腐败变质的微生物有细菌、酵母菌和霉菌等，其中霉菌最为典型，青霉、灰霉、毛霉等都是水果易染的真菌，它们在生长和繁殖过程中会产生各种酶类物质破坏细胞壁而进入细胞内部，使水果发生变质和腐烂。微生物随着水果的腐烂不断加快繁殖，并产生大量有毒物质，这些有毒物质又不断通过水果汁液从腐烂部分向未腐烂部分渗透、扩散，导致未腐烂部分同样含有微生物的代谢物，直到扩散至整个水果，使水果完全失去了食用价值。因此，抑制水果采后腐烂也成为了水果保鲜的重点。

目前，对水果采后因真菌侵染而导致腐烂的控制主要采用化学方法、物理方法等，但传统化学杀菌剂存在化学残留，环境污染，病原菌耐药性等问题，不符合我国绿色发展的趋势；物理杀菌需要特定的设备与场所，操作步骤多，时间长，成本高，并且无法和运输同时完成。因此，新型化学抑菌剂的探索和应用成为近年来水果保鲜主流方向和研究热点。目前已经发现肉桂精油、茶树精油以及茉莉酸甲酯等多种植物源抗菌活性物质可以抑制不同水果腐烂，但是我国对这些物质在水果防腐领域的研究较晚，其防腐机理与应用技术的研究不够深入和完善；对防腐效果的评价没有具体的、详细的科学标准；多数仍处于离体试验阶段，且部分在实际应用中往往不能对引起水果腐烂的全部因素起到作用，防腐效果有限。

松柏醇是形成复杂酚类聚合物——木质素的四种醇单体之一，作为一种天然的木质素单体，松柏醇被广泛用于阐明多种植物代谢物的生物合成过程和化学结构。有报道发现松柏醇体外处理能促进烟草BY-2细胞木质素类化合物生成，但松柏醇在水果采后防腐保鲜上的应用尚无报道。松柏醇作为一种醇类和植物源抗菌活性物质，具有抑制真菌和防治水果腐烂的潜质。

发明内容

针对上述现有的技术不足，本发明专利提供一种安全无毒操作方便且有效防治水果采后腐烂的制剂和应用方法；

所述制剂的有效成分为松柏醇；以1L计，包括：松柏醇0.00036g～0.090g；；助溶剂1mL；水1000mL；浸泡时间为5～10min。

所述助溶剂可使制剂在果实表面的湿润、分散、展着，显著增强制剂的渗透性，减少制剂的用量、延长制剂的有效期。

所述助溶剂可采用二甲基亚砜、甲醇或无水乙醇中的一种；优选为无水乙醇，无水乙醇价格更为低廉，且能使制剂更易被果实吸收。

更优选，所述的制剂，以1L计，包括：松柏醇0.009g～0.090g；助溶剂1mL；水1000mL。在上述各组分配比下制得的制剂中，松柏醇渗透性效果最佳；优选浸泡时间为5min。

所述的制剂通过如下方法进行制备：

(1)称取0.00036g～0.090g松柏醇于10mL烧杯中，加入1mL无水乙醇并轻微震荡至完全溶解；

(2)向烧杯中加入适量纯水摇匀并将烧杯中的溶液转移至1000mL容量瓶，润洗烧杯2～3次，润洗液均转移至容量瓶中；

(3)加入纯水定容至1000mL；即获得1000mL 2μM/L～500μM/L的松柏醇溶液。

本发明提出了一种有效防治水果采后腐烂中的方法，包括如下步骤：

首先选取大小、形状和颜色均匀，无机械损伤和病虫害，成熟度为八至十成熟左右的水果，使用75％乙醇擦拭表面消毒，晾干；鲜切水果用75％乙醇快速清洗表面，并沿水果纵切面将水果切成厚度为1cm左右的薄片；

随后将消毒过的水果放入2μM/L～500μM/L浓度的松柏醇溶液浸泡5～10min处理后晾干；

最后将水果用消毒过的保鲜盒分装，并用0.01mm厚的聚乙烯保鲜袋保湿，随后置于20～30℃、相对湿度60～99％的条件下贮藏。

本发明中所述松柏醇浓度为2μM/L～500μM/L，浸泡时间为5～10min。

与现有技术相比，本发明具备的有益效果：

(1)本发明中利用松柏醇溶液对水果进行浸泡处理增强了水果对真菌的抵抗能力，其机理主要通过提高贮藏期间水果果实总酚含量和抗坏血酸含量的积累、提高水果果实抗氧化相关酶活性来提高果实的抗氧化能力。此外，松柏醇对灰霉菌体外作用的试验结果表明松柏醇对灰霉菌的生长有显著的抑制作用。

(2)本发明所提供的防治水果采后腐烂的方法，操作简单，安全可靠，在不影响采后水果的正常品质的条件下，显著抑制了水果真菌侵染而造成的腐烂，抑制率达50％以上，具有广阔的应用前景。

附图说明

图1为实施例2中，500μM/L松柏醇对鲜切桃果实腐烂处理效果图；

图2为实施例2中，500μM/L松柏醇处理对鲜切桃果实腐烂率影响的柱状图；

图3为实施例3中，50μM/L松柏醇处理草莓果实腐烂处理效果图；

图4～5为实施例3中，50μM/L松柏醇处理草莓果实对腐烂率和病斑直径影响的柱状图；

图6～9为实施例3中，50μM/L松柏醇处理草莓果实对总酚含量、抗坏血酸含量、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性影响的柱状图；

图10为实施例4中，在含有不同浓度松柏醇PDA平板上培养灰霉菌72h、120h抑制效果图；

图11为实施例4中，在含有不同浓度松柏醇PDA平板上培养灰霉菌菌落直径的柱状图；

图中Control表示对照组，CA表示松柏醇处理组。网格柱代表对照组，实心柱代表处理组；所有图中的数据均对应于独立重复的平均值±标准误差。*代表显著性差异(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)。

具体实施方式

下面结合具体非限定实施例对本发明进一步进行描述。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。

实施例1

松柏醇溶液的配置方法

(1)称取0.090g松柏醇于10mL烧杯中，加入1mL乙醇并轻微震荡至完全溶解；

(2)向烧杯中加入适量纯水摇匀并将烧杯中的溶液转移至1000mL容量瓶，润洗烧杯2～3次，润洗液均转移至容量瓶中；

(3)加入纯水定容至1000mL；即获得1000mL 500μM/L的松柏醇溶液。

(4)取100mL 500μM的松柏醇溶液用纯水定容至1000mL；即获得1000mL 50μM/L的松柏醇溶液。

实施例2

制备的试剂在鲜切水果中的应用

本实施例提供了一种防治水果采后腐烂的方法，包括以下步骤：

首先将桃果实进行预处理，具体为选择大小均匀、成熟度一致，无机械伤及无病虫害的果实，将果实置于75％乙醇中快速清洗表面消毒，晾干，并沿水果纵切面切成厚度为1cm的均匀薄片。

处理组将鲜切桃果实放入500μM/L的松柏醇溶液中浸泡5min后取出，晾干；对照组将桃鲜切果实鲜放入纯水(每1000mL纯水中含有1mL无水乙醇)中浸泡5min后取出，晾干；

最后将鲜切桃果实用消毒过的保鲜盒分装，并用0.01mm厚的聚乙烯保鲜袋保湿，置于20±1℃、相对湿度80～90％的条件下贮藏。

结果显示，对照组1d后果肉颜色变暗，出现小面积腐烂出水现象，在第2d开始大面积腐烂出水，在第3d出现大面积霉变，霉变范围也随着贮藏时间不断扩大；采用500μM/L松柏醇处理能延缓鲜切桃果实的腐烂霉变1天，并能够明显抑制霉变范围的扩大，在第2～3d才出现小面积出水现象，在第4d才能观察到明显的霉变，且在贮藏2～5d的腐烂霉变率只有对照组的40％，腐烂霉变面积也均明显小于对照组，结果见图1～2。

实施例3

制备的试剂在整果中的应用

本实施例提供了一种防治水果采后腐烂的方法，包括以下步骤：

首先进行预处理，具体为选择大小均匀、成熟度一致(硬度5～6N，可溶性固形物7～8°Brix)，无机械伤及无病虫害的草莓果实，再用75％乙醇将预处理后的草莓果实表面擦拭消毒，晾干。

处理组将消毒过的草莓放入50μM/L的松柏醇溶液中浸泡5min后取出，晾干；对照组将草莓放入纯水(每1000mL纯水中含有1mL无水乙醇)中浸泡5min后取出，晾干；

最后将草莓果实用消毒过的保鲜盒分装，并用0.01mm厚的聚乙烯保鲜袋保湿，随后置于20±1℃、相对湿度80～90％的条件下贮藏。

结果显示，松柏醇处理后贮藏第5d草莓果实因真菌感染而腐烂的果实个数少于对照组，且草莓果实的病变范围和菌丝生长状况都明显优于对照组；草莓果实的腐烂率和真菌感染病斑直径在贮藏期第3d开始不断上升，但松柏醇处理组的腐烂率和真菌感染病斑直径始终低于对照组，在第3～5d松柏醇处理组的腐烂率仅为对照组的25.1％和53.3％和55.5％；同时5d松柏醇处理组的真菌感染病斑直径显著低于对照组。结果见图3～5。

此外，从贮藏第2d开始，松柏醇处理组草莓总酚含量均高于对照组，尤其是在第4d，松柏醇处理组的总酚含量显著高于对照组；在整个贮藏期间，松柏醇处理组的抗坏血酸含量均高于对照组，尤其是在第4d和第5d，松柏醇处理组的抗坏血酸含量显著高于对照组，说明松柏醇处理在贮藏期间可以有效抑制总酚含量和抗坏血酸含量下降。这表明松柏醇处理可以通过提高水果果实抗氧化物质累积来提高果实的抗氧化能力。结果见图6～7。

草莓果实在贮藏期间POD活性呈先上升后下降再上升趋势，自贮藏第2d开始松柏醇处理组POD活性均高于对照组，并且松柏醇处理组在贮藏第2d和第4d显著提升了POD活性。草莓果实在贮藏期间PPO活性呈先上升后下降再上升趋势，自贮藏第2d开始松柏醇处理组PPO活性均高于对照组，并且松柏醇处理组在贮藏中后期3～5d显著提升了PPO活性。这表明松柏醇处理可以通过提高水果果实抗氧化相关酶活性来提高果实的抗氧化能力。结果见图8～9。

实施例4

制备试剂对灰霉菌生长的影响

含松柏醇的PDA平板的配置方法

先配制800μL 100mM松柏醇溶液：称取0.0144g松柏醇于2mL离心管中，加入1mL无水乙醇轻微震荡至完全溶解，并用无菌过滤器过滤除菌；

(1)500μM/L组：用移液枪取400μL 100mM松柏醇加入80mL未凝固的PDA中，摇匀并倒入培养皿中；

(2)50μM/L组：用移液枪取40μL 100mM松柏醇和360μL无水乙醇加入80mL未凝固的PDA中，摇匀并倒入培养皿中；

(3)10μM/L组：用移液枪取8μL 100mM松柏醇和392μL无水乙醇加入80mL未凝固的PDA中，摇匀并倒入培养皿中；

(4)2μM/L组：用移液枪取1.6μL 100mM松柏醇和398.4μL无水乙醇加入80mL未凝固的PDA中，摇匀并倒入培养皿中；

(5)Control组(无水乙醇组)：用移液枪取400μL无水乙醇80mL加入80mL未凝固的PDA中，摇匀并倒入培养皿中；

用无菌枪头在培养5d的灰霉菌平板上选取菌丝长势基本相同处打孔，取得直径为5mm菌饼，将其接入含不同浓度松柏醇的平板中央(气生菌丝的一面朝下)，以不含松柏醇的平板作为对照，每组进行3次重复。

将所有封好的培养皿置于25℃恒温培养箱培养5d(黑暗条件)，在培养72h和120h拍照记录灰霉菌生长状况，每天使用游标卡尺测量菌落直径，以十字交叉法测量，取平均值。

结果显示，500μM/L的松柏醇对灰霉菌菌落直径有明显的的抑制作用，在72h和120h，其菌落直径均小于对照组，通过测量菌落直径并行进行数据分析，发现含500μM/L的松柏醇的PDA平板上灰霉菌的菌落直径在72h，96h，120h均显著小于对照组，且120h的抑制效果最为明显。此外，其他浓度的松柏醇对灰霉菌的菌落直径没有明显的抑制作用，但相较于对照组，可以明显地观察到其菌丝生长更为稀薄，推测是低浓度松柏醇改变了灰霉菌菌丝的生长状态。结果见图10～11。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的水果为草莓、鲜切桃。

2.一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的制剂，以1L计，包括以下组分：

松柏醇 0.00036g～0.090g

助溶剂 1mL

水 1000mL。

3.根据权利2所述，一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，优选所述的制剂，以1L计，包括以下组分：

松柏醇 0.009g～0.09g

助溶剂 1mL

水 1000mL。

4.根据权利2、3所述，一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的制剂中助溶剂可采用二甲基亚砜、甲醇或无水乙醇中的一种；优选为无水乙醇，无水乙醇价格更为低廉，且能使制剂更易被果实吸收。

5.根据权利要求5所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，优选松柏醇溶液浓度为50μM/L～500μM/L。

6.根据权利要求5所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，浸泡时间为5～10min。

7.根据权利要求5所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，常温贮藏条件下为温度20～30℃、相对湿度为60～99％。

8.根据权利要求5所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的水果为非呼吸跃变型果实和呼吸跃变型果实。

9.根据权利要求9所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的非呼吸跃变型果实包括荔枝、火龙果、龙眼、柑橘、葡萄、草莓、枇杷、菠萝、杨梅或樱桃。

10.根据权利要求9所述的一种用于防治水果采后腐烂的方法，其特征在于，所述的呼吸跃变型果实包括香蕉、芒果、苹果、桃、李、番木瓜、梨、番茄、猕猴桃或番石榴。

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