CN115736112B - 一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂及其制备方法，属于畜牧技术领域。该降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂由以下质量份的组分组成：2‑3份三丁酸甘油酯/壳聚糖‑β‑环糊精、3‑4份丁酸梭菌、0.5‑1.5份硒化海藻多糖。本发明制备的饲料添加剂，降低了哺乳犊牛腹泻率。

Description

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及畜牧技术领域，更具体的涉及一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

腹泻是犊牛的常见疾病，一般多数犊牛在出生后的1～5d发病，表现为食欲下降，粪便为黄白色粥样，且带有酸臭气味。刚发病时，犊牛吃乳量明显减少，部分犊牛甚至拒绝吃乳，其体温升高至39～39.5℃，个别超过40℃。随着病情发展，表现出呼吸、脉搏加快、精神萎靡、食欲下降或绝食，站立不稳多喜卧、排便失禁、眼球凹陷、急剧脱水、全身肌肉不自主颤栗。到了发病后期，病牛体温逐渐恢复至正常，但是其四肢、鼻头以及耳朵等多个部位温度较低，病情严重时犊牛昏迷，最终导致死亡。

犊牛腹泻的发病原因主要有以下几方面：母牛在怀孕期，营养摄入量不均衡，导致微量元素等缺乏不能满足牛的正常生长，出现营养不良的现象，对母牛的健康和对胚胎内的小牛都会有影响，导致新生犊牛抵抗能力和体能差；母乳不足或初乳不足时，犊牛就无法从母乳中获取免疫球蛋白，导致犊牛的抗能力下降，出现生病、腹泻的情况；由于犊牛的身体较弱，免疫力严重不足，因此，对生活环境的卫生状况标准要求较高。养殖环节饲养管理水平低，牛场卫生不达标、不定期消毒等较差的环境下生活时，潮湿环境中病原菌大量繁殖会发生腹泻等病症。

抗生素是目前治疗犊牛腹泻的主要方法，可有效地抑制病原菌，预防病毒和寄生虫引起的感染，可以有效缓解犊牛腹泻，提高犊牛的生长性能，但病原微生物容易产生耐药性，且会造成抗生素残留，同时也抑制益生菌的生长，破坏肠道菌群结构，影响生长性能。因此，开发具有缓解犊牛腹泻以及改善犊牛胃肠道健康的产品尤为重要。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，以降低了犊牛的腹泻率。

本发明的第一个目的是提供一种降低犊牛的哺乳犊牛腹泻率用饲料添加剂，由以下质量份的组分组成：2-3份三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3-4份丁酸梭菌、0.5-1.5份硒化海藻多糖。

优选的，由以下质量份的组分组成：2份三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、4份丁酸梭菌、1份硒化海藻多糖。

优选的，饲喂方法是：将饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂与牛奶的比例为7-8g/L。

本发明的第二个目的是提供上述降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂的制备方法，按照以下步骤进行制备：

步骤1、将壳聚糖-β-环糊精加入到水中在50-60℃下混合均匀，加入三丁酸甘油酯和乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

将海藻粉碎后，以水为提取剂，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行后处理得到海藻多糖；采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

步骤2、按以下质量份称取下列组分：2-3份三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3-4份丁酸梭菌、0.5-1.5份硒化海藻多糖；

步骤3、将硒化海藻多糖、三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、丁酸梭菌混合得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。

优选的，海藻与水的比例为1g:15-20ml。

优选的，超声提取的功率为300-500W，超声时间为30-50min。

优选的，海藻为褐藻、红藻、蓝藻中的一种或多种。

优选的，壳聚糖-β-环糊精与水的比例为1g:3ml。

优选的，壳聚糖-β-环糊精与水的比例为1g:3ml。

优选的，壳聚糖-β-环糊精与水的比例为1g:3ml。

优选的，乳化剂与三丁酸甘油酯的质量比为0.2:1。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明以三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、丁酸梭菌、硒化海藻多糖制备得到了一种饲料添加剂，可以降低腹泻率，改善犊牛胃肠道健康。

三丁酸甘油酯不易被胃酸分解，主要在后肠道分解为甘油和三分子丁酸被吸收，能够改善肠道健康状态，基于此，本发明通过壳聚糖-β-环糊精对三丁酸甘油酯进行处理，首先制备了壳聚糖-β-环糊精，进一步提高β-环糊精的溶解性，在通过壳聚糖-β-环糊精对三丁酸甘油酯进行包合，改善了三丁酸甘油酯存在异味的问题，便于犊牛进行采食。丁酸梭菌作为一种厌氧的芽孢杆菌，定植于肠道后端，产生丁酸，减少有害菌在肠道粘膜上的附着；同时在辅以硒化海藻多糖，有效降低了犊牛的腹泻率，改善犊牛胃肠道健康。

附图说明

图1为实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛腹泻频率的影响；

图2为实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛腹泻率的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明所用的壳聚糖-β-环糊精按照陈树薇等人在《功能材料》发表的“壳聚糖交联β-环糊精对酸性染料吸附动力学和热力学研究”进行制备。具体方法如下：

称取2.80g壳聚糖溶解于280ml 0.1mol/L的盐酸水溶液中，另将16.3gβ-环糊精溶解在280ml蒸馏水中。将壳聚糖溶液倒入环糊精溶液中，搅拌，升温至60℃。向混合液中缓慢滴加16.5ml 25％的戊二醛溶液，升温至85℃，保温搅拌反应1.5h。调节混合液pH值到9，出现黄色絮状沉淀，继续反应45min后过滤，用蒸馏水将滤出物洗至中性，再分别用丙酮和乙醇洗涤、抽滤。滤出物于45℃烘干，得到壳聚糖-β-环糊精。

本发明所用乳化剂为吐温-80。

本发明中海藻多糖的后处理为脱蛋白和脱色处理，脱蛋白是通过Sevag方法进行脱蛋白处理，脱色是通过大孔树脂进行脱色处理。

硒化海藻多糖的制备参考王丽波等人在《食品科学》发表的“硒化蒲公英多糖的制备、结构表征及益生菌促增殖活性”。具体方法如下：

用50mL体积分数为0.5％的HNO₃溶液溶解海藻多糖(500mg)，在室温下搅拌30min，加入0.5g Na₂SeO₃和0.7g BaCl₂，将混合物在60℃下搅拌，反应4h。冷却至室温后，滴加1mol/L的NaOH溶液将pH值调节至7～8。加入0.5gNa₂SO₄。除去Ba²⁺，将反应物3500r/min离心5min，取上清液，用流水透析至加入抗坏血酸不显红色，再用去离子水透析12h，浓缩、冻干即得到硒化海藻多糖。

本发明所用丁酸梭菌来源于广东溢多利生物科技股份有限公司，菌株号为VTSJ-2，丁酸梭菌的有效活菌数为5×10⁸cfu/g。

实施例1

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，由以下质量份的组分组成：20g三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、40g丁酸梭菌、10g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、(1)硒化海藻多糖的制备

将褐藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:15ml称取水，在300W下超声时间为50min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

(2)将5g壳聚糖-β-环糊精加入到15ml水中，在50℃下混合均匀，加入20g三丁酸甘油酯和4g乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

步骤2、称取上述制备得到的三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精20g、硒化海藻多糖10g、丁酸梭菌40g混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7g/L。

实施例2

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，包括以下质量份的组分：30g三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、30g丁酸梭菌、15g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、(1)硒化海藻多糖的制备

将褐藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:15ml称取水，在300W下超声时间为50min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

(2)将5g壳聚糖-β-环糊精加入到15ml水中，在50℃下混合均匀，加入20g三丁酸甘油酯和4g乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

步骤2、称取上述制备得到的三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精30g、硒化海藻多糖15g、30g丁酸梭菌混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为8g/L。

实施例3

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，包括以下质量份的组分：25g三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、35g丁酸梭菌、5g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、(1)硒化海藻多糖的制备

将褐藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:15ml称取水，在300W下超声时间为50min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

(2)将5g壳聚糖-β-环糊精加入到15ml水中，在50℃下混合均匀，加入20g三丁酸甘油酯和4g乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

步骤2、称取上述制备得到的三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精25g、硒化海藻多糖5g、35g丁酸梭菌混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7.5g/L。

实施例4

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，包括以下质量份的组分：2.7g三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3.0g丁酸梭菌、1.2g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、(1)硒化海藻多糖的制备

将等量的蓝藻和褐藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:20ml称取水，在500W下超声时间为30min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

(2)将5g壳聚糖-β-环糊精加入到15ml水中，在50℃下混合均匀，加入20g三丁酸甘油酯和4g乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

步骤2、称取上述制备得到的三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精2.7g、硒化海藻多糖1.2g、3.0g丁酸梭菌混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7g/L。

实施例5

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，包括以下质量份的组分：3.0g三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3.0g丁酸梭菌、1.5g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、(1)硒化海藻多糖的制备

将红藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:17ml称取水，在400W下超声时间为40min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

(2)将5g壳聚糖-β-环糊精加入到15ml水中，在50℃下混合均匀，加入20g三丁酸甘油酯和4g乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

步骤2、称取上述制备得到的三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精3.0g、硒化海藻多糖1.5g、3.0g丁酸梭菌混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7g/L。

对比例1

一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，由以下质量份的组分组成：20g三丁酸甘油酯、40g丁酸梭菌、10g硒化海藻多糖。

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、硒化海藻多糖的制备

将褐藻粉碎后，按照海藻与水的比例为1g:15ml称取水，在300W下超声时间为50min，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行脱蛋白和脱色得到海藻多糖。

采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

步骤2、称取上述制备得到的硒化海藻多糖10g、三丁酸甘油酯20g、丁酸梭菌40g混合均匀后得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。在饲喂时，将该饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7g/L。

选取30头出生重相近的1日龄荷斯坦母犊牛，随机分为2组，每组15头。所有犊牛单栏饲喂、自由采食与饮水，试验期63天。试验处理如下：

对照组1：正常饲喂牛奶和开食料，记为CON；

对照组2：正常饲喂开食料，1日龄开始在牛奶中添加对比例1制备的饲料添加剂。

试验组：正常饲喂开食料，1日龄开始在牛奶中添加实施例1制备的饲料添加剂，记为TC。

腹泻率：每天晨饲前使用4分制法进行粪便评分(1分为条形紧实；2分为成形软粪；3分为粘稠、不成形、无粪水分离现象；4分为液体、不成形、分水分离)。当粪便评分≥2时记为一个腹泻日。根据粪便评分计算腹泻率和粪便指数：腹泻率＝腹泻头数/总头数×100％；粪便指数＝粪便评分之和/总头数。

采食量：每天记录采食量，最后以每周平均值进行统计分析。

体尺体重指标：在犊牛30和60日龄使用体重秤称量体重，并同时使用皮卷尺对体高、体斜长、胸围和腹围等指标进行测量。

瘤胃液样品：在犊牛60日龄使用口腔插管采集瘤胃液，并用pH计现场测定瘤胃液pH值，使用气相色谱仪测定瘤胃液挥发性脂肪酸含量。

血糖和血酮浓度：在犊牛30和60日龄，晨饲后2h，采集颈静脉血液，使用血糖仪和血酮仪，并结合相应试纸条测定血糖和血酮含量。

哺乳犊牛用药情况：每天观察并记录犊牛健康状况和药物使用情况。

表1实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛采食量的影响(g/d)

表2实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛生长性能的影响

表3实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛瘤胃液pH值和挥发性脂肪酸的影响

表4实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛血糖和血酮含量的影响

表5实施例1饲料添加剂对哺乳期犊牛用药情况的影响

从图1-图2及表1-表5可以看出，其中，*表示两组间比较差异显著(P<0.05)，相比于对照组，犊牛牛奶中添加实施例1中的饲料添加剂显著降低腹泻率，减少试验期药物使用情况，犊牛腹泻主要发生在1月龄内，且出生后前2周内腹泻率最高，随着犊牛日龄的增长，消化系统发育、免疫机能不断完善，腹泻率随之降低。混合添加实施例1的饲料添加剂虽然降低了第9周干物质采食量和60天胸围，但显著提高60日龄瘤胃液乙酸含量和比例，并有提高总挥发酸含量的趋势，对瘤胃液pH、血糖、血酮、日增重和其他体尺指标没有显著影响。

为了进一步说明壳聚糖-β-环糊精对三丁酸甘油酯的作用，本发明记录了对照组2中哺乳期犊牛采食量，第一周到第九周的平均值分别为10.34g/d、23.78g/d、34.63g/d、50.79g/d、64.83g/d、112.73g/d、207.46g/d、357.14g/d、885.52g/d，总体采食量平均值为194g/d，相比于试验组，对照组2的哺乳期犊牛采食量减少，进一步说明了壳聚糖-β-环糊精对三丁酸甘油酯进行包合，可以改善了三丁酸甘油酯存在异味的问题，提高了犊牛的采食量。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (7)

1.一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，由以下质量份的组分组成：2-3份三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3-4份丁酸梭菌、0.5-1.5份硒化海藻多糖；

降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂按照以下步骤进行制备：

步骤1、将壳聚糖-β-环糊精加入到水中在50-60℃下混合均匀，加入三丁酸甘油酯和乳化剂，剪切、均质、喷雾干燥得到三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精；

将海藻粉碎后，以水为提取剂，超声提取2次后，合并得到滤液，将滤液浓缩后进行醇沉，干燥、进行后处理得到海藻多糖；采用亚硒酸钠对海藻多糖进行改性处理，得到硒化海藻多糖；

步骤2、按以下质量份称取下列组分：2-3份三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、3-4份丁酸梭菌、0.5-1.5份硒化海藻多糖；

步骤3、将硒化海藻多糖、三丁酸甘油酯/壳聚糖-β-环糊精、丁酸梭菌混合得到降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂。

2.根据权利要求1所述的一种降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，饲喂方法是：将饲料添加剂添加到牛奶中进行饲喂，饲料添加剂在牛奶中的添加量为7-8g/L。

3.根据权利要求1所述的降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，海藻与水的比例为1g:15-20ml。

4.根据权利要求1所述的降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，超声提取的功率为300-500W，超声时间为30-50min。

5.根据权利要求1所述的降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，海藻为褐藻、红藻、蓝藻中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，壳聚糖-β-环糊精与水的比例为1g：3ml。

7.根据权利要求1所述的降低哺乳犊牛腹泻率的饲料添加剂，其特征在于，乳化剂与三丁酸甘油酯的质量比为0.2：1。