CN115666511A - 用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液 - Google Patents

用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液 Download PDF

Info

Publication number
CN115666511A
CN115666511A CN202180034930.7A CN202180034930A CN115666511A CN 115666511 A CN115666511 A CN 115666511A CN 202180034930 A CN202180034930 A CN 202180034930A CN 115666511 A CN115666511 A CN 115666511A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polymer
composition
polymer composition
extended release
functional group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180034930.7A
Other languages
English (en)
Inventor
E.德朱安
S.埃里克森
A.阿尤布
K.法里纳斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Spiral Diagnosis And Treatment Co ltd
Original Assignee
Spiral Diagnosis And Treatment Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Spiral Diagnosis And Treatment Co ltd filed Critical Spiral Diagnosis And Treatment Co ltd
Publication of CN115666511A publication Critical patent/CN115666511A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L71/00—Compositions of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0046—Ear
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L77/00—Compositions of polyamides obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • C08L77/04—Polyamides derived from alpha-amino carboxylic acids

Abstract

本文提供了聚合物组合物和延长释放耳用药剂。在一个方面中，本文提供了一种聚合物组合物，其包含按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包含第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包含第二官能团；和水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。

Description

用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年5月13日提交的美国临时申请序列第63/024,232号的优先权，其通过引用以其整体并入本文。
对以电子方式提交的文本文件的描述
与本申请一起以电子方式提交的文本文件的内容通过引用以其整体并入本文：序列表的计算机可读格式副本，文件名：50051_0011WO1.txt，记录日期：2021年5月12日，文件大小约47千字节。
技术领域
本公开涉及用于治疗内耳病状或疾病的制剂，特别是处于体温时形成稳定水凝胶以在一段时间内提供治疗剂、预防剂和/或诊断剂的受控递送的溶液。
发明背景
内耳可能难以有效治疗。例如，内耳仅占平均循环血容量的0.004％，并且被包裹在体内最致密的骨骼之一中。这些与血迷路屏障(BLB)的存在组合限制了大多数治疗化合物进入内耳。口服、静脉内和肌内的施用途径可能效率低下，以及可能需要高剂量，存在全身副作用的风险。
发明内容
该文献至少部分地基于可以用于将活性剂递送至受试者的中耳和/或内耳的组合物。
本文提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少5天的停留时间。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶在37℃下具有至少5天的胶凝持续时间。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中所述聚合物组合物可以具有约5.5至约8.5的pH，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本发明还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续2天后溶胀小于100％。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶是弹性的。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶可以是粘膜粘附性的。
本文还提供了一种聚合物组合物，其包含：按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；以及水，其中所述聚合物组合物可以具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少5天的停留时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶在37℃下可以具有至少5天的胶凝持续时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约5.5至约8.5的pH。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡2天后膨胀小于100％。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶可以是弹性的。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶可以是粘膜粘附性的。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以包括按所述聚合物组合物的重量计约8％至约12％的所述官能聚合物。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以包括按所述聚合物组合物的重量计约10％的所述官能聚合物。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以包括按所述聚合物组合物的重量计约0.3％至约0.5％的所述交联剂。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以包括按所述聚合物组合物的重量计约0.4％至约0.6％的所述交联剂。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约5分钟至约20分钟的胶凝时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约8分钟至约12分钟的胶凝时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物在约37℃的温度下可以具有约10秒至约30分钟的胶凝时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物在约37℃的温度下可以具有约2分钟至约8分钟的胶凝时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少1周的停留时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少2周的停留时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少1个月的停留时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶当在中耳中形成时可以具有至少2个月的停留时间。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约6.4至约7.4的pH。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约6.0和7.0的pH。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续2天后膨胀小于80％。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续2天后膨胀小于60％。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约1mPa·s至约100mPa·s的粘度。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述聚合物组合物可以具有约1mPa·s至约50mPa·s的粘度。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶对内淋巴或外淋巴可以是低渗的。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶对内淋巴或外淋巴可以是等渗的。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶对内淋巴或外淋巴可以是高渗的。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶可以具有约6.0至约7.7的pH。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述凝胶可以具有约6.6至约6.8的pH。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团与所述第二官能团的比率可以为约0.9:1至约1:0.9。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团与所述第二官能团的比率可以是约1:1。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述官能聚合物可以是改性的PEG。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团包括亲电试剂并且所述第二官能团包括亲核试剂。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团包括琥珀酰亚胺酯。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第二官能团包括伯胺。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述官能聚合物可以是季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述交联剂包括聚赖氨酸。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述交联剂包括三赖氨酸。
在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团包括亲核试剂并且所述第二官能团包括亲电试剂。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第一官能团包括伯胺。在本文的任何聚合物组合物的一些实施例中，所述第二官能团包括琥珀酰亚胺酯。
本文还提供了一种延长释放耳用组合物(extended release oticcomposition)，其包含本文所述的任何一种或多种聚合物组合物和活性剂。
在一些实施例中，所述活性剂可以选自由治疗剂、预防剂、诊断剂或可视化剂(visualization agent)及其组合组成的组。在一些实施例中，治疗剂或预防剂可以选自由蛋白质、碳水化合物、核酸、小分子及其组合组成的组。在一些实施例中，蛋白质可以选自由酶、生长因子、抗体或其抗原结合片段及其组合组成的组。在一些实施例中，碳水化合物可以是糖胺聚糖。在一些实施例中，核酸可以选自由反义寡核苷酸、适体、微RNA、短干扰RNA、核酶及其组合组成的组。在一些实施例中，小分子可以选自由抗生素、抗肿瘤剂、局部麻醉剂、类固醇、激素、抗凋亡剂、血管生成剂、抗血管生成剂、神经递质、精神活性药物、抗炎剂及其组合组成的组。在一些实施例中，小分子可以是Apaf-1的抑制剂。
在一些实施例中，活性剂可以是酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施例中，活性剂可以是VEGF抑制剂。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以选自由阿戈拉非尼(agerafenib)、奥曲替尼(altiratinib)、阿帕替尼(apatinib)、阿昔替尼(axitinib)、卡博替尼(cabozantinib)、西地尼布(cediranib)、拉帕替尼(lapatinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、莫替沙尼(motesanib)、尼达尼布(nintedanib)、帕唑帕尼(pazopanib)、哌加他尼(pegaptanib)、瑞巴替尼(rebastinib)、瑞戈非尼(regorafenib)、司马沙尼(semaxanib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、妥拉尼布(toceranib)、替沃扎尼(tivozanib)、凡德他尼(vandetanib)及其组合组成的组。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段可以选自由阿拉赛珠单抗(alacizumab)、贝伐珠单抗(bevacizumab)、艾芦库单抗(icrucumab)、雷莫芦单抗(ramucirumab)、雷珠单抗(ranibizumab)及其组合组成的组。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括诱饵受体。在一些实施例中，诱饵受体可以是阿柏西普(aflibercept)。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括VEGFR的变构调节剂。在一些实施例中，变构调节剂可以是cyclotraxin B。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少10倍。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少20倍。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少50倍。
在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂或VEGF抑制剂可以以足以减轻受影响的耳朵中的积水和淋巴功能障碍的量存在。在一些实施例中，活性剂包括抗炎剂。在一些实施例中，活性剂包括类固醇。在一些实施例中，活性剂不包括类固醇。
在一些实施例中，活性剂包括诊断剂或可视化剂。在一些实施例中，诊断剂或可视化剂可以选自由染料、荧光团、MRI造影剂及其组合组成的组。
在一些实施例中，活性剂可以以微粒的形式存在于延长释放耳用组合物中。在一些实施例中，活性剂可以以纳米颗粒的形式存在于延长释放耳用组合物中。
在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约0.01％至约40％的量存在。在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约0.1％至约20％的量存在。在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约1％至约10％的量存在。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以进一步包括赋形剂。在一些实施例中，赋形剂可以选自由缓冲剂、张度剂、粘膜粘附剂、稳定剂、防腐剂、载体、渗透增强剂、稀释剂、分散剂、粘度调节剂、增溶剂、同渗浓度调节剂及其组合组成的组。
本文还提供了一种凝胶，其由本文所述的任何一种或多种聚合物组合物形成。本文还提供了一种凝胶，其由本文所述的任何一种或多种延长释放耳用组合物形成。
本文还提供了包含本文所述的任何一种或多种延长释放耳用组合物药物的制造，其用于治疗耳部疾病或病症。
本文提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含将官能聚合物的溶液或悬浮液(其中官能聚合物包括第一官能团)、交联剂的溶液或悬浮液(其中交联剂包括第二官能团)和活性剂组合以形成延长释放耳用组合物，使得所述官能聚合物可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.2％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本文提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；(b)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；和(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合以形成延长释放耳用组合物，使得所述官能聚合物可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.2％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本文提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；和(b)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合，其中所述交联剂包括第二官能团，使得所述官能聚合物可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.2％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本文还提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；(b)改变交联剂的溶液或悬浮液的pH，其中所述交联剂包括第二官能团；和(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本文还提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；和(b)将所述交联剂的溶液或悬浮液与官能聚合物的溶液或悬浮液组合，其中所述官能聚合物包括第一官能团，使得所述官能聚合物可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂可以以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.2％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
本文提供了一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包含(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；(b)改变官能聚合物的溶液或悬浮液的pH，其中所述官能聚合物包括第一官能团；和(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合，其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，活性剂可以存在于官能聚合物的溶液或悬浮液中。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，可以在制备官能聚合物的溶液或悬浮液之前将活性剂与官能聚合物组合。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，活性剂可以与官能聚合物的溶液或悬浮液组合。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合包括将官能聚合物的溶液或悬浮液、交联剂的溶液或悬浮液和活性剂组合。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，活性剂可以作为固体提供。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，活性剂可以作为溶液或悬浮液提供。在本文提供的任何制备方法的一些实施例中，延长释放耳用组合物可以是本文提供的任何一种或多种延长释放耳用组合物。
本文提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包含鉴定受试者患有耳部疾病或病症，以及将治疗有效量的本文提供的任何一种或多种延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。
本文还提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包含将治疗有效量的本文提供的任何一种或多种延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
本文还提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包含(i)通过本文提供的任何一种或多种方法制备延长释放耳用组合物，和(ii)将治疗有效量的延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
本文还提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包含(i)鉴定受试者患有耳部疾病或病症，(ii)通过本文所述的任何一种或多种方法制备延长释放耳用组合物，和(iii)将治疗有效量的延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。
在本文提供的任何治疗方法的一些实施例中，耳部疾病或病症可以是可以选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失(sensorineural hearing loss)、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组的耳部疾病或病症。在本文提供的任何治疗方法的一些实施例中，感觉神经性听力损失可以是突发性感觉神经性听力损失。在本文提供的任何治疗方法的一些实施例中，感觉神经性听力损失可能与糖尿病有关。
本文还提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含将治疗有效量的本文所述的任何一种或多种延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
本文提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含(i)鉴定受试者患有梅尼埃病，和(ii)将治疗有效量的本文所述的任何一种或多种延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。
本文另外提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含(i)通过本文所述的任何一种或多种方法制备延长释放耳用组合物，和(ii)将治疗有效量的延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
本文还提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含(i)鉴定受试者患有梅尼埃病，(ii)通过本文所述的任何一种或多种方法制备延长释放耳用组合物，和(iii)将治疗有效量的延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。
在本文提供的任何一种或多种治疗方法中，在将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合后少于10分钟进行所述施用。在本文提供的任何一种或多种治疗方法中，在将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合后少于5分钟进行所述施用。在本文提供的任何一种或多种治疗方法中，所述施用可以包括施用约5μL至约500μL的延长释放耳用组合物。在本文提供的任何一种或多种治疗方法中，所述施用可以包括施用约50μL至约200μL的延长释放耳用组合物。在本文提供的任何一种或多种治疗方法中，所述施用可以包括通过鼓膜注射。
本文提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包含鉴定受试者患有耳部疾病或病症，并且向受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
在一些实施例中，耳部疾病或病症可以选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组。在一些实施例中，感觉神经性听力损失可以是突发性感觉神经性听力损失。在一些实施例中，感觉神经性听力损失可能与糖尿病有关。
本文还提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含(i)鉴定受试者患有梅尼埃病，和(ii)向受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
本文提供了一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包含向有需要的受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
在一些实施例中，施用可以包括全身施用。在一些实施例中，施用可以包括施用至受试者的受影响的耳朵。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂可以包括VEGF抑制剂。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以选自由阿戈拉非尼、奥曲替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、卡博替尼、西地尼布、拉帕替尼、乐伐替尼、莫替沙尼、尼达尼布、帕唑帕尼、哌加他尼、瑞巴替尼、瑞戈非尼、司马沙尼、索拉非尼、舒尼替尼、妥拉尼布、替沃扎尼、凡德他尼及其组合组成的组。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段可以选自由阿拉赛珠单抗、贝伐珠单抗、艾芦库单抗、雷莫芦单抗、雷珠单抗及其组合组成的组。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括诱饵受体。在一些实施例中，诱饵受体可以是阿柏西普。在一些实施例中，VEGF抑制剂包括VEGFR的变构调节剂。在一些实施例中，VEGFR的变构调节剂可以是cyclotraxin B。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少10倍。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少20倍。在一些实施例中，VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性可以是相对于另一种VEGFR的至少50倍。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂可以以足以减轻受影响的耳朵中的积水和淋巴功能障碍的量存在。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂可以以本文所述的任何一种或多种延长释放耳用组合物的形式提供。
除非另外定义，否则本文中所使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的一般技术人员通常所理解相同的含义。尽管可以使用与本文中所述的方法和材料类似或等效的方法和材料来实践本发明，但以下描述合适的方法和材料。本文中所提到的所有出版物、专利申请、专利以及其它参考文献都通过引用以其整体并入本文中。在冲突的情况下，则将以本说明书(包含定义)为准。此外，材料、方法和实例仅仅是说明性的并且不打算作为限制。
本公开的一个或多个实施例的细节在以下附图和描述中阐述。本公开的其它特征、目的和优点将从描述和附图中以及从权利要求书中显而易见。根据专利法的标准惯例，权利要求中的词语“包括”可以用“基本上由……组成”或“由……组成”替换。
附图说明
图1A是季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯的结构。
图1B是三赖氨酸的结构。
图2A是含有0％(实心方块)、1％(空心方块)、3％(菱形)和6％(三角形)地塞米松(Dex)(n＝3)的经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物样品的溶胀概况(百分比)随时间(天)变化的图。
图2B是含有6％(三角形)、3％(菱形)或1％(正方形)地塞米松(n＝3)的经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物样品的累积药物释放(μg)的图。
图3是含有6wt％地塞米松(n＝6)适用期为67分钟(圆圈)、26分钟(正方形)或16分钟(三角形)的经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物样品的溶胀概况(溶胀百分比)随时间(天)变化的图。
图4是含有6wt％地塞米松(n＝6)、适用期为67分钟(圆圈)、26分钟(正方形)或16分钟(三角形)的经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物样品(含有6wt％地塞米松(n＝6))的药物释放(μg)随时间(天)变化的图。
图5A是在经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物中的6wt％地塞米松凝胶(圆圈)相对于在PBS溶液中的泊洛沙姆407(三角形)(n＝5)的药物释放(μg)随时间(天)变化的图。
图5B是在经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物中的6wt％地塞米松凝胶(圆圈)相对于泊洛沙姆407(三角形)(n＝3)透过膜的渗透(药物释放(μg))随时间(天)变化的图。
图6A是在体内研究中血浆中地塞米松浓度相对于时间的图。空心符号来自施用PEG-三赖氨酸聚合物制剂的受试者，并且实心符号来自施用P407制剂的受试者。
图6B是在体内研究中外淋巴液中地塞米松浓度相对于时间的图。点是单个受试者，用于左耳(L，圆形，正方形，六边形)和右耳(R，三角形和菱形)。空心符号来自施用PEG-三赖氨酸聚合物制剂的受试者，并且实心符号来自施用P407制剂的动物。箭头符号代表施用P407制剂的受试者A843，其地塞米松水平高于检测水平(限值9500ng/mL)。
图6C是与图6B相同的数据，将右耳和左耳组合在一起绘制。
图7是各种经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物组合物的凝胶时间(min)相对于pH的图。
图8是用0.23M 50:50稀释剂(圆圈)和0.25M 50:50稀释剂(三角形)制备的耳用组合物的凝胶时间(分钟)相对于自PEG-三赖氨酸试剂盒到期以来的年数的图。
图9是延长释放耳用组合物D1(圆形)、D2(三角形)、D3(正方形)和D4(菱形)的地塞米松(mg)的累积释放相对于时间(天)的图。
图10A是在体内研究中自基线的阈值偏移(dB)相对于治疗后天数的图。
图10B是在体内研究中自基线的阈值偏移(dB)相对于ABR刺激频率的图。
图10C是治疗后8周的体内研究中从基线的阈值偏移(dB)相对于ABR刺激频率的图。
图11A是在体内研究中受试者的群体血浆中地塞米松浓度(ng/mL)相对于时间的图。
图11B是在体内研究中个体受试者的血浆中地塞米松浓度(ng/mL)相对于时间的图。
具体实施方式
通过局部应用疗法可以避免全身治疗的潜在副作用和来自长期、更高剂量疗法的并发症。内耳治疗剂(例如，配制成生物相容性凝胶的药物)可以通过鼓膜内注射穿过鼓膜(TM)递送到中耳内。由于解剖学上的变化，例如覆盖圆窗膜的假膜的存在、注射的制剂接触圆窗膜的失败以及圆窗和椭圆窗膜的有限渗透性，在鼓膜内注射到内耳之后药剂从中耳到内耳的被动扩散具有可变的功效。这可能导致差的患者结果。此外，手术并发症的风险很高。此外，药剂从内耳的外淋巴液中的快速清除可能导致需要重复的鼓膜内注射，这对于受试者来说也是不希望的，并且除了较低的顺应性的风险之外，还与感染、炎症和鼓膜长期损伤的累积风险相关联。
将治疗剂局部递送到内耳中通常导致内耳流体中的浓度比全身应用的情况下更高。在存在与全身应用相关联的主要限制或甚至禁忌症的情况下，可以施用局部应用的物质(例如，以比将用于全身施用更低的剂量)；参见例如Salt等人，《今日药物发现(DrugDiscov Today)》，2005年10月1日；10(19):1299–1306。物质在鼓室内应用，例如通过鼓膜注射到中耳腔中。不受任何理论的约束，该程序基于这样的前提:药物将接触耳蜗的圆窗膜(RWM)，进入鼓阶(ST)并扩散到整个耳朵中。这类治疗的靶标组织可以包括感觉毛细胞、传入神经纤维和内耳的耳蜗(听觉)或前庭(平衡)部分的支持细胞。
麻醉剂、糖皮质激素和氨基糖苷类已经用于治疗内耳病症。目前，最广泛使用的鼓室内疗法形式是向患有梅尼埃病或突发性感觉神经性听力损失的受试者的中耳中注射糖皮质激素。也存在关于局部应用庆大霉素来治疗梅尼埃病的临床报告。庆大霉素对平衡系统的感觉细胞有毒性，因此通过部分消融一些受试者的前庭系统来抑制他们的眩晕。已经在人体中测试的其他物质包括局部麻醉剂、神经递质和神经递质拮抗剂。还对施用生长因子、抗氧化剂、细胞凋亡抑制剂和反义寡核苷酸感兴趣。动物实验已经显示了使用局部应用的药物来提供对来自噪音和药物毒性的耳部保护的有希望的结果。此类研究的一项扩展是用于内耳病症的持续治疗的局部病毒和非病毒基因转移。
梅尼埃病(MD)是内耳的慢性病症，其典型特征是反复发作的自发性头晕、波动性听力损失、耳鸣以及耳朵的发胀或充血的感觉。这些临床症状可能对个体的生活质量(QOL)产生显著的负面影响。MD无法治愈，并且目前没有适用于MD的经批准的药物治疗。
目前对MD的治疗主要集中在减少眩晕发作的频率和严重程度、减少耳鸣和耳胀以及保持或改善听力和QOL。存在开处方的多种治疗，其包括低盐饮食、利尿剂、倍他司汀、口服类固醇、抗病毒药、苯二氮卓类以及庆大霉素或皮质类固醇的鼓室内(IT)注射。并且在一些情况下，可以进行耳蜗或听觉神经的破坏性外科消融。
使用皮质类固醇作为MD患者的有前途的治疗选项源于使用皮质类固醇治疗其他听觉障碍(例如自身免疫性内耳疾病和突发性感觉神经性听力损失(SNHL))的既定临床益处，以及炎症和免疫机制在MD的病理生理学中的作用。除了它们在耳蜗中的抗炎和免疫抑制作用外，皮质类固醇在MD中的作用机制也显示出通过影响耳蜗流体稳态的离子或水转运机制来增加迷路循环和改善内耳功能。皮质类固醇地塞米松已经显示出通过抑制多种炎性细胞因子来抑制炎症，导致积水、纤维蛋白沉积、毛细血管渗漏和炎性细胞迁移的减少。
对于管理MD的症状，直接中耳药物注射可能存在显著的优势。紧密的血迷路屏障可以允许在IT施用后在内耳中达到治疗药物水平，同时最小化全身暴露和通常与全身施用相关联的不良作用。
皮质类固醇通过IT施用途径治疗MD和耳鸣患者的临床用途始于30多年前。在两个患者组中均报告了临床益处，且对治疗没有不良反应。地塞米松的局部施用(其被认为经由通过圆形和椭圆形窗膜的扩散进入内耳)已经显示出在改善患有MD的患者的听力结果方面发挥作用。
AAO 2020MD临床实践指南将IT类固醇疗法描述为用于患有对无创治疗(例如饮食和生活方式改变)无反应的活动性MD的患者的治疗选项，以及IT庆大霉素疗法的替代方案。作为系统综述和随机对照试验的结果，用地塞米松磷酸钠的局部治疗已经被确定为临床实践中的选项。结论是IT类固醇疗法导致比伤害更多的益处。
梅尼埃病是内耳的慢性病症，其特征为反复发作的自发性头晕(眩晕)、波动性听力丧失、耳鸣(耳鸣)和耳朵发胀或充血感(耳胀)。这些症状可能会使人虚弱，并对QOL产生重大影响。梅尼埃病通常表现为单侧(仅影响一只耳朵)，没有观察到在右耳与左耳的比率的差异，但最终在25-40％的病例中影响对侧耳(双侧MD)。双侧MD与前庭症状增加以及对健康相关QOL的负面影响增加有关(Espinosa-Sanchez JM和JA Lopez-Escamez，“梅尼埃病”，《临床神经病学手册(Handbook of Clinical Neurology)》，2016；137:257-77,nidcd.nih.gov/health/menieres-disease)。
在美国(US)，MD的患病率为每100,000名成年人约50至200人(Basura等人，“临床实践指南：梅尼埃病(Clinical Practice Guideline:Meniere’s Disease)”，《耳鼻喉科-头颈外科(Otolaryngology-Head and Neck Surgery)》，2020，第162卷(2S)S1-S55)，其中女性占少数(Lopez-Escamez JA，Carey J，Chung WH等人，(2015)，“梅尼埃病的诊断标准(Diagnostic criteria for Meniere’s disease)”，《前庭研究杂志(J Vestib Res)》25：1-7)。尽管MD可能发生在任何年龄，但它更有可能影响40至60岁之间的成年人。因此，儿童很少受到影响(Espinosa-Sanchez JM和JA Lopez-Escamez，“梅尼埃病”，《临床神经病学手册》，2016；137：257-77)。
MD无法治愈，并且目前也没有可用于治疗MD的经批准的药物治疗。MD的自然病程通常是听觉和前庭锐度波动，伴有周期性的严重眩晕发作，以及听觉和前庭功能的长期进行性下降(Basura等人，2020)。一些MD患者患有其他病症和合并症，包含过敏和自身免疫性病症(Espinosa-Sanchez JM和JA Lopez-Escamez，“梅尼埃病”，《临床神经病学手册》，2016；137:257-77)，尽管MD与这些合并症之间的因果关系尚未良好地确立(Gurkov R，Pyyko I，Zou J，Kentala E.“什么是梅尼埃病？(What is Meniere's disease？)”，“对内淋巴积水的当代重新评估(A contemporary re-evaluation of endolymphatic hydrops)”，《神经病学杂志(J Neurol.)》，2016；263(增刊1)：S71-81)。
1861年，Prosper Ménière指出，与MD相关的眩晕、平衡和听力损失症状是内耳损伤的结果(Basura等人，2020)。
尽管MD的潜在病因尚不完全清楚，但它与内耳流体(内淋巴)体积增加(积水)有关，最终导致发作性耳部症状(眩晕、波动性听力损失、耳鸣和耳胀)(Basura等人，2020)。
MD的诊断标准由Barany学会分类委员会(Classification Committee of theBarany Society)、日本平衡研究学会(Japan Society for Equilibrium Research)、欧洲耳科学和神经病学会(European Academy of Otology and Neurotology)(EAONO)、美国耳鼻喉科-头颈外科学会平衡委员会(Equilibrium Committee of the American Academyof Otolaryngology-Head and Neck Surgery)(AAO-HNS)和韩国平衡协会(KoreanBalance Society)联合制定。
分类包括两个类别：明确的MD和可能的MD(参见表B1)。
表B1：梅尼埃病的诊断标准
Figure BDA0003939295410000141
MD的管理通常旨在降低眩晕发作的频率和严重程度，减少耳鸣和耳张，保持或者甚至改善听力并改善QOL。存在开处方的多种治疗，其包括低盐饮食、利尿剂、倍他司汀、口服类固醇、抗病毒药物、苯二氮卓类和庆大霉素或皮质类固醇的IT注射。在难治性病例下，可以对耳蜗或听神经进行破坏性手术消融(Albu S，Chirtes F，Trombitas V等人(2015)，“鼓室内地塞米松相对于高剂量倍他司汀治疗难治性单侧梅尼埃病(Intratympanicdexamethasone versus high dosage of betahistine in the treatment ofintractable unilateral Meniere disease)”，《美国耳鼻喉科杂志(Am J Otolaryngol)》36：205-209；Coelho DH,Lalwani AK，“梅尼埃病的医疗管理(Medical management ofMeniere's disease)”，《喉镜(Laryngoscope)》,2008；118:1099-108；Alarcón AV,HidalgoLO,Arévalo RJ,Diaz MP，“用于顽固性眩晕症状的迷路切除术和前庭神经切除术(Labyrinthectomy and Vestibular Neurectomy for Intractable VertiginousSymptoms)”，Int Arch Otorhinolaryngol.2017年4月；21(2)184-190.doi:10.1055/s-0037-1599242.PMID:28382129；PMCID:PMC5375706)。
使用皮质类固醇来治疗其他听觉障碍(例如自身免疫性内耳疾病和突发SNHL)的既定临床益处(Li H,Feng G,Wang H,Feng Y(2015)，“鼓室内类固醇疗法作为常规治疗失败后突发性感觉神经性听力损失的补救治疗：随机化的对照试验的荟萃分析(Intratympanic steroid therapy as a salvage treatment for suddensensorineural hearing loss after failure of conventional therapy:a meta-analysis of randomized,controlled trials)”，《临床疗法(Clin Ther)》，37:178-187)，连同炎症和免疫机制在MD的病理生理学中的作用，导致皮质类固醇被认为是MD的有希望的治疗选项(Espinosa-Sanchez JM和JA Lopez-Escamez.“梅尼埃病”，《临床神经病学手册》，2016；137：257-77；Lopez-Escamez JA，Vilchez JR，Soto-Varela A等人，(2007)，“HLA-DRB1*1101等位基因可能与南欧人群的双侧梅尼埃病有关(HLA-DRB1*1101allele may beassociated with bilateral Meniere's disease in southern Europeanpopulation)”，《耳科学和神经病学(Otol Neurotol)》28：891-895；Lopez-Escamez JA，Saenz-Lopez P，Acosta L等人(2010)，“双侧梅尼埃病中编码淋巴蛋白磷酸酶的PTPN22的功能多态性的关联(Association of a functional polymorphism of PTPN22 encodinga lymphoid protein phosphatase in bilateral Meniere's disease)”，《喉镜》，120：103-107；Hamid M,Trune D(2008)，“关于鼓室内类固醇灌注的问题、适应症和争议(Issues,indications,and controversies regarding intratympanic steroidperfusion)”，《耳鼻咽喉科头颈外科的最新观点(Curr Opin Otolaryngol Head NeckSurg)》16：434-440；Hu A,Parnes LS，“用于内耳病症的鼓室内类固醇：综述(Intratympanic steroids for inner ear disorders:a review)”，《听力学和神经耳科学(Audiol Neurootol.)》，2009；14(6):373-82)。
地塞米松(一种皮质类固醇)已经被证明通过抑制多种炎症细胞因子来抑制炎症，导致积水、纤维蛋白沉积、毛细血管渗漏和炎症细胞的迁移的减少。除了它们在耳蜗中的抗炎和免疫抑制作用外，皮质类固醇在MD中的作用机制还显示出通过影响耳蜗流体稳态的离子或水运输机制增加迷路循环并改善内耳功能(Espinosa-Sanchez，2016,Nevoux J,Viengchareun S,Lema I等人(2015)，“糖皮质激素通过水通道蛋白3调节刺激内耳中的内淋巴水的重吸收(Glucocorticoids stimulate endolymphatic water reabsorption ininner ear through aquaporin 3regulation)”，Pflugers Arch 467:1931-1943)。
对于管理MD的症状，直接中耳药物注射存在显著的优势。紧密的血迷路屏障允许在IT施用后在内耳中达到治疗药物水平，同时最小化全身暴露。
动物研究表明，与全身施用相比，皮质类固醇的IT递送导致内耳中的类固醇水平显著更高。此外，可以避免许多与全身施用相关的不良作用，例如骨质疏松症、糖尿病、高血压、消化性溃疡、白内障和内分泌紊乱(Espinosa-Sanchez,2016)。
从历史的角度来看，通过IT施用途径临床使用皮质类固醇始于Sakata等人(1986)并且十年后Shea等人(Shea JJ Jr，Ge X，“地塞米松迷路灌注加上静脉注射地塞米松以用于治疗梅尼埃病(Dexamethasone perfusion of the labyrinth plus intravenousDexamethasone for Meniere's disease)”，《北美耳鼻喉科诊所(Otolaryngol ClinNorth Am)》，1996；29:353–358)使用它们来治疗MD和耳鸣患者。在两个患者组中均报告了临床益处，且对治疗没有不良反应。地塞米松的局部施用(其被认为经由通过圆形和椭圆形窗膜的扩散进入内耳)已被证明在改善患有MD的患者的听力方面发挥作用。认为地塞米松靶向内淋巴囊并作用于血管纹和螺旋韧带，它们是已知的内耳中的免疫应答的靶标。结果，观察到内淋巴积水(EH)的减少，并且内淋巴恢复了流体动力学(Shea等人，1996)。在IT注射后，估计外淋巴内的类固醇的浓度比口服施用高260倍(Devantier L,Djurhuus BD,Hougaard DD等人，“用于梅尼埃病的鼓室内类固醇：系统综述(Intratympanic Steroidfor Menière's Disease:A Systematic Review)”，《耳科学和神经病学(OtolNeurotol.)》，2019；40(6):806-812；Bird PA,Murray DP,Zhang M,Begg EJ，“鼓室内相对于静脉内递送地塞米松和地塞米松磷酸钠至耳蜗外淋巴(Intratympanic versusintravenous delivery of dexamethasone and dexamethasone sodium phosphate tocochlear perilymph)”，《耳科学和神经病学》，2011；32:933-6)。
通过IT递送的类固醇疗法似乎比IT庆大霉素疗法具有更低的治疗相关听力损失的风险，分别为0％至8％相对于12.5％至15.4％(Basura等人，2020；Casani AP,Piaggi P,Cerchiai N,Seccia V,Franceschini SS,Dallan I，“难治性单侧梅尼埃病的鼓室内治疗:庆大霉素还是地塞米松？(Intratympanic treatment of intractable unilateralMeniere disease:gentamicin or dexamethasone？)”，一项随机化的对照试验。《耳鼻咽喉科头颈外科(Otolaryngol Head Neck Surg)》，2012；146(3):430-437；ElBeltagy Y,Shafik A,Mahmoud A,Hazaa N，“梅尼埃病的鼓室内注射治疗：症状性和听性前庭；比较、前瞻性的随机化的1年对照研究(Intratympanic injection in Meniere's disease；symptomatic and audiovestibular；comparative,prospective randomized 1-yearcontrol study)”，《埃及耳鼻喉科杂志(Egypt J Otolaryngol.)》，2012；28(3):171-183；Sarafraz M,Saki N,Nikakhlagh S,Mashali L,Arad A，“鼓室内注射甲基强的松龙和庆大霉素对控制单侧梅尼埃病眩晕的疗效比较(Comparison the efficacy of intratympanicinjections of methylprednisolone and gentamicin to control vertigo inunilateral Meniere's disease)”，《生物医学和药理学杂志(Biomed Pharmacol J.)》，2015；8:705-709；Syed MI,Ilan O,Nassar J,Rutka JA，“梅尼埃综合征或疾病的鼓室内疗法：临床实践的最新证据(Intratympanic therapy in Meniere's syndrome or disease:up to date evidence for clinical practice)”，《临床耳鼻喉科(ClinOtolaryngol.)》，2015；40(6):682-690)。一项研究发现，在IT类固醇(38％)和IT庆大霉素疗法(31％)的情况下对耳胀的改善相似。
与突发性听力损失一样，2项系统综述表明，IT类固醇疗法可能在挽救继发于MD爆发的听力方面发挥作用(Basura等人，2020；Lavigne P，Lavigne F，Saliba I，“鼓室内皮质类固醇注射:文献的系统综述(Intratympanic corticosteroids injections:asystematic review of literature)”，Eur Arch Otorhinolaryngol.2016；273(9):2271-2278；Patel M，“梅尼埃病的鼓室内皮质类固醇：小型综述(Intratympaniccorticosteroids in Meniere's disease:a mini-review)”，《耳科学杂志(J Otol.)》，2017；12(3):117-124)，尽管1项随机化的对照试验没有发现关于听力挽救的益处(Basura等人，2020；Silverstein H,Isaacson JE,Olds MJ,Rowan PT,Rosenberg S，“地塞米松内耳灌注用于治疗梅尼埃病：前瞻性的、随机化的、双盲交叉试验(Dexamethasone inner earperfusion for the treatment of Meniere's disease:a prospective,randomized,double-blind,crossover trial)”，《美国耳科学杂志(Am J Otol.)》，1998；19(2):196-201)。
当在1随机对照试验中，与安慰剂或常规药物治疗进行比较时(Basura等人，2020；Paragache G,Panda NK,Ragunathan M,Sridhara，“梅尼埃病的鼓室内地塞米松应用—它是否优于常规的疗法？(Intratympanic dexamethasone application in Meniere'sdisease—is it superior to conventional therapy？)”，《印度耳鼻咽喉科头颈外科杂志(Indian J Otolaryngol Head Neck Surg.)》，2005；57(1):21-23)中和在3篇系统综述(Lavigne等人，2016；Patel，2017；Phillips JS，Westerberg B，“用于梅尼埃病或综合征的鼓室内类固醇(Intratympanic steroids for Meniere's disease or syndrome)”，《Cochrane系统综述数据库(Cochrane Database Syst Rev.)》，2011；(7):CD008514)中，与安慰剂或与常规药物疗法比较时，IT类固醇疗法通常显示对眩晕症状产生更大的改善(85％-90％相对于57％-80％)。在耳鸣和耳胀的相关症状的情况下发现了不同的益处，其中1项随机化的对照试验比较了IT类固醇相对于安慰剂(Garduno-Anaya MA,Couthino DeToledo H,Hinojosa-Gonzalez R,Pane-Pianese C,Rios-Castaneda LC，“通过鼓室内注射的地塞米松内耳灌注治疗单侧梅尼埃病：两年的前瞻性的、安慰剂对照的、双盲的随机试验(Dexamethasone inner ear perfusion by intratympanic injection in unilateralMeniere's disease:a two-year prospective,placebo-controlled,double-blind,randomized trial)”，《耳鼻咽喉科头颈外科》，2005；33:285-94)显示耳鸣(48％相对于20％)、听力损失(35％相对于10％)和饱腹感(48％相对于20％)的改善。
与安慰剂(42％)相比，使用缓释形式的地塞米松的初步研究记录了在3mg和12mg剂量的情况下眩晕频率降低(分别为56％和73％)，耳鸣具有类似的降低(Basura等人，2020；Lambert PR,Nguyen S,Maxwell KS等人，“一项随机化的、双盲、安慰剂对照的临床研究，以评估在患有单侧梅尼埃病的患者中作为单次鼓室内注射给予的OTO-104的安全性和临床活性(A randomized,double-blind,placebo-controlled clinical study toassess safety and clinical activity of OTO-104given as a single intratympanicinjection in patients with unilateral Meniere's disease)”，《耳科学和神经病学》，2012；33(7):1257-1265)。随后的一项研究报告，与安慰剂相比，眩晕的严重程度降低，但没有统计学意义，并且耳鸣感知没有差异(Basura等人，2020；Lambert等人，2016)。注意到每日眩晕发作的平均次数和每月眩晕天数的统计学显著减少(Basura等人，2020；Lambert等人，2016)。总体而言，IT类固醇疗法耐受性良好，并且副作用和/或并发症低。最常提及的并发症是术后中耳炎(7％)(Basura等人，2020；Patel等人,2016)和持续性鼓室穿孔(3％-38％)(Basura等人，2020；Lambert等人，2012；Lambert PR,Carey J,Mikulec AA,LeBel C，“用于梅尼埃病的症状的鼓室内持续暴露地塞米松热敏凝胶:随机化的2b期安全性和疗效试验(Intratympanic sustained-exposure dexamethasone thermosensitive gel forsymptoms of Meniere's disease:randomized phase 2b safety and efficacytrial)”，《耳科学和神经病学》，2016；37(10):1669-1676)。
如Basura等人(2020)所指出的，由于治疗方案的可变性，IT类固醇疗法的有效性一直难以评估。给药的次数、给药之间的时间、随访时间以及对眩晕控制、耳鸣和耳胀的影响差异很大(Syed MI,Ilan O,Nassar J,Rutka JA，“梅尼埃综合征或疾病的鼓室内疗法：临床实践的最新证据(Intratympanic therapy in Meniere's syndrome or disease:upto date evidence for clinical practice)”，《临床耳鼻喉科(Clin Otolaryngol.)》，2015；40(6):682-690)。
通过IT递送的类固醇疗法可能被认为是口服类固醇疗法的替代方案(Basura等人，2020；Morales-Luckie E,Cornejo-Suarez A,Zaragoza-Contreras MA,Gonzalez-Perez O，“口服施用强的松以控制梅尼埃病的难治性眩晕：一项初步研究(Oraladministration of prednisone to control refractory vertigo in Meniere'sdisease:a pilot study)”，《耳科学和神经病学》，2005；26(5):1022-1026；Phillips等人，2011；Doyle KJ，Bauch C，Battista R等人，“鼓室内类固醇治疗：综述”，《耳科学和神经病学》，2004；25(6):1034-1039；Morgan AE，Ismail EI，Ashraf B，“地塞米松鼓室内注射治疗迟发性内淋巴积水：一项前瞻性临床研究(Intratympanic injections of dexamethasonein delayed endolymphatic hydrops:a prospective clinical study)”，ORL JOtorhinolaryngol Relat Spec.2018；80(1):19-27)和IT庆大霉素疗法(Basura等人,2020；Casani AP,Piaggi P,Cerchiai N,Seccia V,Franceschini SS,Dallan I，“难治性单侧梅尼埃病的鼓室内治疗：庆大霉素还是地塞米松？”一项随机化的对照试验。《耳鼻咽喉科头颈外科》，2012；146(3):430-437；ElBeltagy等人，2012；Patel等人，2016；Sarafraz等人，2015)。
口服类固醇具有显著的副作用风险(Basura等人，2020；Stachler RJ,Chandrasekhar SS,Archer SM等人，“临床实践指南：突发性听力损失(Clinical practiceguideline:sudden hearing loss)”，《耳鼻咽喉科头颈外科》，2012；146(3):S1-S35；Doyle等人，2004)和具有可用听力的患者可能会犹豫是否接受消融性内耳疗法，例如IT庆大霉素，已知具有听力损失的可能性。因此，当提供IT类固醇疗法时，患者偏好具有重要作用(Basura等人，2020；Radtke A,Lempert T,Gresty MA,Brookes GB,Bronstein AM,Neuhauser H，“偏头痛和梅尼埃病：是否有联系？(Migraine and Meniere's disease:isthere a link？)”，《神经病学(Neurology)》，2002；59(11):1700-1704)。鼓室内递送可以是在办公室环境中进行的微创注射，其提供潜在的直接施用途径(Piu F,Wang X,FernandezR,Dellamary L,Harrop A,Ye Q,Sweet J,Tapp R,Dolan DF,Altschuler RA,Lichter J,LeBel C，“OTO-104：一种用于治疗耳部病症的缓释地塞米松水凝胶(OTO-104:asustained-release dexamethasone hydrogel for the treatment of oticdisorders)”，《耳科学和神经病学》，2011年1月；32(1):171-9)。
多年来，已经有几项临床研究评估了在MD患者中IT施用皮质类固醇的安全性和疗效。在最近两项针对患有单侧MD的患者的临床研究中，评估了单次IT注射12mg的地塞米松(n＝93)的安全性、耐受性和临床活性。结果表明，地塞米松(配制在含有乙二醇聚合物泊洛沙姆407的缓冲溶液中)是安全的、耐受良好的，并且显示眩晕终点的有前途的改善，这支持将该项目转入到目前正在进行的3期。(Lambert PR,Nguyen S,Maxwell KS等人，“一项随机化的、双盲、安慰剂对照的临床研究，以评估在患有单侧梅尼埃病的患者中作为单次鼓室内注射给予的OTO-104的安全性和临床活性(A randomized,double-blind,placebo-controlled clinical study to assess safety and clinical activity of OTO-104given as a single intratympanic injection in patients with unilateralMeniere's disease)”，《耳科学和神经病学》，2012；33(7):1257-1265；Lambert PR,CareyJ,Mikulec AA,LeBel C，“用于梅尼埃病的症状的鼓室内持续暴露地塞米松热敏凝胶:随机化的2b期安全性和疗效试验(Intratympanic sustained-exposure dexamethasonethermosensitive gel for symptoms of Meniere's disease:randomized phase 2bsafety and efficacy trial)”，《耳科学和神经病学》，2016；37(10):1669-1676)。
在一项1b期研究中，16名患者接受了单次IT注射12mg的地塞米松，14名患者接受了3mg的地塞米松，并且14名患者接受了安慰剂。没有死亡、没有严重不良事件(SAE)并且没有导致本研究中止的不良事件(AE)。在实验室测量、体格检查、生命体征或心电图(ECG)中也没有不良发现(Lambert等人，2012)。
在本研究中，大多数患者具有至少1次治疗中出现的不良事件(TEAE)。在多于1名患者中观察到的唯一预先指定的感兴趣的AE是鼓膜(TM)的穿孔。在本研究结束时，在接受地塞米松(3mg或12mg)的患者中TM穿孔的发生率为3％。在其他使用IT注射的研究中观察到TM的穿孔(Lambert等人，2012；Rauch SD，Halpin CF，Antonelli PJ等人，“对于特发性突发性感觉神经性听力损失的口服相对于鼓室内皮质类固醇疗法：一项随机试验(Oral vsintratympanic corticosteroid therapy for idiopathic sudden sensorineuralhearing loss:a randomized trial)”，JAMA 2011；305:2071-79；Herraiz C,Plaza G,Aparicio JM等人，“用于梅尼埃病的经鼓室类固醇(Transtympanic steroids forMeniere's disease)”，《耳科学和神经病学》，2010；31:162-7)，并且大多数穿孔自发消退(Lambert等人，2012；Muehlmeier G,Biesinger E,Maier H，“在患有急性内耳性耳鸣的患者中鼓室内注射AM-101的安全性(Safety of intratympanic injection of AM-101inpatients with acute inner ear tinnitus)”，《听力学与神经耳科学(AudiolNeurotol)》，2011；16:388-97)。
在一项2b期研究中，77名患者接受了单次IT注射12mg的地塞米松，并且77名患者接受了安慰剂。大多数AE的严重程度为轻度或中度，并且在本研究中没有TEAE导致患者中止。本研究中的安全性评估的结果(耳镜检查、听力测定、鼓室测量、生命体征、临床实验室评估、单词识别和哥伦比亚自杀评定量表(C-SSRS))支持继续评估IT注射皮质类固醇，因为它们似乎是耐受良好；没有鉴定到新的风险。在本研究结束时，在两名地塞米松治疗的患者中观察到持续的TM穿孔，这与在IT施用皮质类固醇后观察到的穿孔一致(Lambert等人，2016；Garduno-Anaya MA,Couthino De Toledo H,Hinojosa-Gonzalez R,Pane-PianeseC,Rios-Castaneda LC，“通过鼓室内注射的地塞米松内耳灌注治疗单侧梅尼埃病：两年的前瞻性的、安慰剂对照的、双盲的随机试验(Dexamethasone inner ear perfusion byintratympanic injection in unilateral Meniere's disease:a two-yearprospective,placebo-controlled,double-blind,randomized trial)”，《耳鼻咽喉科头颈外科》，2005；33:285-94；Silverstein H,Farrugia M,Van Ess M，“用于亚临床内淋巴积水的地塞米松内耳灌注(Dexamethasone inner ear perfusion for subclinicalendolymphatic hydrops)”，《耳鼻喉杂志(Ear Nose Throat J)》，2009；88:778-85；Kitahara T,Kubo T,Okumura S,Kitahara M，“内淋巴囊引流与类固醇对难治性梅尼埃病的影响：一项长期随访和随机对照研究(Effects of endolymphatic sac drainage withsteroids for intractable Meniere's disease:a long-term follow-up andrandomized controlled study)”，《喉镜(Laryngoscope)》，2008；118:854-61；Herraiz C,Plaza G,Aparicio JM等人，“用于梅尼埃病的经鼓室类固醇(Transtympanic steroidsfor Meniere's disease)”，《耳科学和神经病学》，2010；31:162-7；Rauch SD,Halpin CF,Antonelli PJ等人，“对于特发性突发性感觉神经性听力损失的口服相对于鼓室内皮质类固醇疗法：一项随机试验”，JAMA 2011；305:2071-79)。
EH通常被认为是MD的病理标志，尽管该疾病的病因仍不清楚。
2010年，Naganawa等人，(Naganawa,S等人，“使用重度T(2)加权3D-FLAIR使用单剂量静脉注射钆基造影剂可视化梅尼埃病中的内淋巴积水(Visualization ofendolymphatic hydrops in Meniere's disease with single-dose intravenousgadolinium-based contrast media using heavily T(2)-weighted 3D-FLAIR)”，《医学中的磁共振(Magn Reson Med Sci)》，9,237–242(2010))开发了一种IV-钆(Gd)增强型内耳MRI，其可视化患有MD的患者中的EH。IV-Gd增强型内耳MRI是微创的，具有相对短的等待时间(4小时)，并且可以同时可视化两个内耳，这使得能够识别对侧耳朵中的无症状EH。ChoYS等人，(Cho YS,Ahn JM,Choi JE等人，“静脉内钆内耳MR成像在梅尼埃病的诊断中的有用性(Usefulness of Intravenous Gadolinium Inner Ear MR Imaging in Diagnosis ofMénière's Disease)”，《科学报告(Sci Rep.)》，2018；8(1):17562，发表于2018年12月3日，doi:10.1038/s41598-018-35709-5)进行了一项临床研究，其旨在调查IV-Gd增强型内耳MRI在诊断MD中的有用性，以发现EH的程度与听觉前庭测试之间的相关性。结果证明了与听觉前庭功能测试的适当相关性，这表明IV-Gd内耳MRI作为用于可视化MD中的EH的诊断方法的有用性。尽管有这些发现，但EH目前不是明确的MD的诊断标准的一部分。
为了提高基于成像的患有疑似MD患者的诊断准确性，最近的研究引入了外淋巴增强(PE)作为额外的MD鉴别参数。然而，尚不清楚的是PE在其他眩晕相关内耳病理学(VAIEP)中的存在和价值。
在2020年2月，JM van Steekelenburg等人发表了对220名疑似患有MD的内耳病理学患者(中位年龄55.8岁)的回顾性分析。本研究的目的是评估EH的存在和PE在诊断患有MD的患者和在患有其他不归因于MD的VAIEP的患者中的附加价值(Van Steekelenburg JM,van Weijnen A,de Pont LMH,Vijlbrief OD,BommeljéCC,Koopman JP,Verbist BM,BlomHM,Hammer S，“在疑似梅尼埃病中内淋巴积水和外淋巴信号强度的值(Value ofEndolymphatic Hydrops and Perilymph Signal Intensity in Suspected MénièreDisease)”，《AJNR美国神经放射学杂志(AJNR Am J Neuroradiol.)》，2020年3月；41(3):529-534.doi:10.3174/ajnr.A6410.2020年2月6日电子出版)。结果表明，与其他VAIEP耳朵(分别为p<.001和p＝.003)和无症状耳朵(两者都为p<.001)相比，增加的PE在明确的和可能的MD耳朵中更为普遍。由于前庭或耳蜗EH或两者都存在于91.9％的明确的MD耳朵中，因此本研究强调EH作为明确的MD的标志的相关性。与无症状的耳朵相比，明确的MD耳朵在视觉和定量测量中都显示出增加的PE。
该研究还证明了延迟Gd增强3D-FLAIR MRI在具有广泛VAIEP的队列中诊断MD的价值，表明EH和增加的PE的组合在患有其他VAIEP的患者中并不常见。这些发现有可能帮助区分患有可归因于MD的眩晕的患者(van Steekelenburg等人，2020)。
在MD患者中经常施用标签外的IT类固醇注射。然而，治疗益处至少部分地受到溶液制剂从中耳中的快速清除、药物制剂的不确定的中耳位置(因为注射是“盲的”)以及在中耳中膜屏障和气穴的存在的限制。当前的MD治疗指南(Basura,2020)建议每3至7天分3至4次施用复方地塞米松磷酸钠或甲基强的松龙琥珀酸钠溶液。地塞米松的悬浮凝胶制剂已经在改善MD患者的眩晕症状方面显示出前景(Lambert 2012,2016)，但即使是这种热响应凝胶制剂也已经显示在施用后几天内从中耳清除(Piu 2011)。假膜(假膜)存在于42％的耳朵中(
Figure BDA0003939295410000221
B,Orhan KS,Aslιyüksek H,Kara E,Büyük Y,Güldiken Y，“尸检系列中中耳解剖变异的内窥镜评估：204只耳朵的分析(Endoscopic evaluation of middle ear anatomicvariations in autopsy series:analyses of 204ears)”，《巴西耳鼻喉科杂志(Braz JOtorhinolaryngol.)》，2020年1月至2月；86(1):74-82)，限制与快速清除和随机放置的制剂的圆窗膜的接触。
然而，目前可用的用于鼓室内递送的制剂具有短的中耳停留时间，并且通常需要多次施用以在内耳中达到所需的效果。这些制剂的短的停留可能导致缺乏均匀的药物分布和释放，且药代动力学较差。
因此，一个目的是提供具有有益效果的制剂，该制剂可以被施用以用于在数天内将治疗剂、预防剂或诊断剂持续鼓室内递送到内耳中，提供受控的释放和药代动力学，同时最小化全身暴露的风险并减少重复施用的需要。
I.定义
“活性剂”和“活性药物成分”可互换使用，并且是指在体内局部和/或全身作用的生理学和/或药理学活性物质。活性剂是施用于受试者以用于治疗(例如糖皮质激素或抗血管生成剂)、预防(例如抗凋亡剂)或诊断(例如钆)疾病或病症的物质。
药代动力学领域中的术语“AUC”或“曲线下面积”是血浆中活性剂浓度相对于时间的图中的定积分(definite integral)。在实践中，通常在某些离散的时间点测量活性剂浓度，并使用梯形法则来估计AUC。活性剂的AUC通常用于评估受试者随时间暴露于活性剂。
术语“听觉脑干应答”或“ABR”是指从大脑中正在进行的电活动中提取并通过放置在例如头皮上的电极记录的听觉诱发电位。ABR被认为是一种外源性应答，因为它依赖于外部因素。
术语“血迷路屏障”或“BLB”是指脉管系统和内耳流体(内淋巴或外淋巴)之间的屏障。BLB参与内耳流体离子稳态的维持。
术语“BLLQ”是“低于定量下限”的缩写，并且被定义为低于校准曲线上的最低标准。
术语“Cmax”是指在施用活性剂后活性剂达到的最大(或峰值)血清浓度(例如，系统地，或在受试者的指定隔室或测试区域中)。在一些实施例中，在施用第二剂量的活性剂之前测量Cmax。
术语“Cmin”是指在施用活性剂之后活性剂达到的最小(或谷)血清浓度(例如，全身地，或在受试者的指定隔室或测试区域中)。在一些实施例中，在施用第二剂量的活性剂之前测量Cmin。
术语“细胞耳蜗图”是指沿着Corti的器官的完整宽度和长度的毛细胞的解剖状态的图形表示。
缩写“DDI”是指药物-药物相互作用。
当提及可以参与交联的聚合物时，术语“官能化程度”是每个合适的聚合单元(例如，聚合物链、支链或单体)中适合于使用给定交联剂进行交联的官能团的数量。例如，如果聚合物的每个单体具有一个或多个官能团，则合适的聚合物单元是单体。作为另一个实例，如果聚合物的每个支链末端具有一个或多个官能团，则合适的聚合物基团是支链。将进一步理解，在一些情况下，例如，如果官能团的亚群已经降解，则官能化程度可以小于一。
术语“药物吸收”或“吸收”通常是指活性剂从局部施用部位移动到治疗效果部位的过程。在一些情况下，药物吸收可以通过耳蜗的圆窗微环境，并穿过屏障(例如圆窗膜)进入一个或多个内耳结构中。如本文所使用的，术语“共同施用”意在通常涵盖将两种或更多种活性剂施用于单个受试者，并且旨在包括其中活性剂通过相同或不同的施用途径或在相同或不同时间施用的预防方案。
如本文中关于凝胶使用的术语“弹性的”可以指凝胶表现出弹性，例如抵抗扭曲力并且当该力被去除时恢复到其原始尺寸和形状。在一些情况下，可以通过振荡流变学来测量弹性模量。
短语“有效量”或“有效浓度”是指当在作用部位时足以(i)治疗疾病或病症；(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病状或病症的一种或多种症状；或(iii)延迟本文所述的特定疾病、病状或病症的一种或多种症状的发作的活性剂的量。将对应于该量的活性剂的量将根据如特定活性剂、疾病状况及其严重程度、需要治疗的患者的特性(例如，年龄和/或体重)等因素而变化，但仍然可以由本领域技术人员常规确定。如本文所使用的，术语“有效量”或“治疗有效量”可以指活性剂在作用部位的足够量，其预期可在一定程度上缓解待治疗的疾病或病状的一种或多种症状。在一些实施例中，有效量的活性剂是在作用部位处产生期望的抗炎结果所必需的量。术语“治疗有效量”包括例如活性剂的“有效量”以实现期望的药理作用而没有过度的不利副作用。
短语“有效量”是指当施用于需要此类治疗的受试者时足以(i)治疗疾病或病症；(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病状或病症的一种或多种症状；或(iii)延迟本文所述的特定疾病、病状或病症的一种或多种症状的发作的活性剂的量。在一些实施例中，“有效剂量”是活性剂的量，当施用于需要这种治疗的患者时，在作用部位达到足够的浓度以(i)治疗疾病或病症，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病状或病症的一种或多种症状，或(iii)延迟本文所述的特定疾病、病状或病症的一种或多种症状的发作持续一段时间。将对应于该量的活性剂的剂量将根据如特定活性剂、疾病状况及其严重程度、需要治疗的患者的特性(例如，年龄和/或体重)等因素而变化，但仍然可以由本领域技术人员常规确定。如本文所使用的，术语“有效剂量”或“治疗有效剂量”可以指被施用的活性剂的足够量，其预期可在一定程度上缓解待治疗的疾病或病状的一种或多种症状。在一些实施例中，活性剂的有效剂量是产生期望的抗炎结果所必需的量。术语“治疗有效剂量”包括例如活性剂的“有效剂量”以实现期望的药理作用而没有过度的不利副作用。还应理解，基于药代动力学和/或药效学考虑，延长释放给药形式中的“有效剂量”可能不同于速释给药形式中的“有效剂量”。
术语“增强(enhance)”或“增强(enhancing)”可以指效力的增加或期望效果的延长。在一些情况下，“增强”或“增强”也可以指与活性剂相关的一种或多种副作用的减少。例如，关于增强本文公开的活性剂的作用，术语“增强”可以指通过抗炎剂增加活性剂的效力或延长活性剂的作用持续时间的能力。如本文所使用的，“增强有效量”是指足以增强活性剂在所需系统中的作用的量。将对应于该量的药剂的量将根据如特定活性剂、疾病状况及其严重程度、需要治疗的患者的特性(例如，年龄和/或体重)等因素而变化，但仍然可以由本领域技术人员常规确定。
术语“凝胶”是指半固体组合物。在一些实施例中，可以通过评估在重力下的流动来区分凝胶与液体，例如，通过在小瓶中进行凝胶化反应，然后倒置小瓶。在一些评估中，目视检查可以确认是否仍然存在组合物的流动。在一些情况下，可以在倒置小瓶并从插入件中的样品中擦去液体后进行重量评估。在一些情况下，凝胶可以通过组合物防止搅拌棒旋转的能力(例如，7×2mm PTFE搅拌棒与在2mL小瓶中的约0.2mL至约1mL的组合物)与液体区分开来。在一些实施例中，凝胶可以通过具有弹性模量而与液体区分开来。在一些实施例中，凝胶的形成可以通过当绘制储能模量与损耗模量的比率(G”/G')相对于时间(t)时纵坐标值的快速变化来确定。在一些实施例中，可以通过分析凝胶的内聚力，例如通过液滴重量或压缩力将凝胶与液体区分开来(参见，例如，Edsman,Katarina LM等人。“有没有可以测量内聚力的方法？与其他测试方法相比，通过感官评估的内聚力(Is there a method thatcan measure cohesivity？Cohesion by sensory evaluation compared with othertest methods)”，《皮肤外科(Dermatologic Surgery)》，41(2015)：S365-S372和Edsman,Katarina LM和
Figure BDA0003939295410000251
“透明质酸填充剂的内聚力：内聚力与其他物理化学性质之间的相关性(Cohesion of hyaluronic acid fillers:correlation between cohesion andother physicochemical properties)”，《皮肤外科》，44.4(2018):557，两者均通过引用以其整体并入本文)。
术语“胶凝化”是指凝胶的形成。通常，凝胶是通过液体组合物的胶凝化形成的。
术语“胶凝持续时间”是指凝胶在降解、溶解或变回溶液之前持续的时间量。在一些情况下，胶凝持续时间是通过将凝胶放入小瓶中并储存在室温下，在37℃下或在50℃的加速条件下来测量的。在一些情况下，胶凝持续时间通过将凝胶(例如至少1mL)置于37℃(或在50℃的加速条件下)的受体溶液(例如，pH 7.4PBS)中，任选地定期改变受体溶液来测量。
术语“胶凝时间”是指在将所有合适的组分组合之后组合物形成凝胶所用的时间量。在一些情况下，胶凝时间可以通过测量达到如本文定义的凝胶的一种或多种特性所花费的时间来确定。在一些实施例中，可以通过测量搅拌棒在其中发生胶凝化的容器中停止旋转所花费的时间来确定胶凝时间。
术语“GLP”是指“良好的实验室规范”，并且是一组旨在确保非临床实验室研究的质量和完整性的原则。
术语“hERG”可以指编码作为钾离子通道的α亚基的蛋白质的人类ether-a-go-go相关基因。在一些情况下，包括该亚基的离子通道也被称为hERG。
术语“IC50”是指测定的结果降低50％时的抑制剂的浓度。
术语“抑制”可以意指降低或减少活性(例如，信号传导活性)或表达(例如，基因或基因产物的)。该术语还可以包括预防、减缓或逆转受试者中的疾病或病状的发展或疾病或病状的进展。在一些情况下，抑制可以是部分的。在一些情况下，抑制可以是完全的。在一些实施例中，抑制水平可以基于与对照或标准水平的比较来确定。
术语“大分子”通常是指大于1500g/mol、大于约2000g/mol或大于约2500g/mol的分子。在一些形式中，大分子可以是聚合的和/或低聚的。
术语“MRSD”或“最大推荐起始剂量”是指在保持其疗效的同时，可以安全且无并发症地给予的药剂的最高量。
术语“MTD”或“最大耐受剂量”是指不引起不可接受的副作用的药物或预防措施的最高剂量。
如本文所使用的，术语“粘膜粘附”可以指两种材料之间的粘附，其中一种是粘膜表面。
术语“NOAEL”是指“未观察到不良作用水平”并且可以是非临床风险评估的重要部分。
术语“耳(otic)”和“耳(auris)”是指与耳朵有关。例如，耳用组合物可以是旨在用于施用于耳朵的组合物。
术语“药学上可接受的”表示化合物或其盐或组合物在化学和/或毒理学上与构成制剂的其它成分和/或用所述制剂治疗的患者相容。在一些实施例中，药学上可接受的盐可以是保持游离碱或游离酸的效率和/或生物学性质的盐。在一些实施例中，药学上可接受的盐可以是改变游离碱或游离酸的效率和/或生物学性质的盐；例如，药学上可接受的盐可以改善游离碱或游离酸的生物利用度。
如本文所使用的，术语“药物组合”是指由多于一种活性剂的混合或组合产生的药物疗法，并且包括活性剂的固定组合和非固定组合。术语“固定组合”是指第一活性剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物和至少一种另外的活性剂均以单一组合物或剂量的形式同时施用于患者。术语“非固定组合”是指将第一活性剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物和至少一种另外的活性剂配制成单独的组合物或剂量，使得它们可以使用相同或不同的施用途径，以可变的介入时间限制同时、并行或顺序地施用于有需要的受试者，其中这种施用在受试者的体内提供两种或更多种化合物的有效水平。在一个实施例中，将第一活性剂和第二活性剂配制成单独的单位剂型，其中单独的剂型适合于顺序或同时施用。这些也适用于混合物疗法，例如施用三种或更多种活性成分。
如本文中当提及含有包括可以与亲核试剂(例如琥珀酰亚胺酯官能化的PEG)形成交联的亲电试剂的部分的溶液或悬浮液时所使用的术语“适用期”是指自该部分被制成溶液或悬浮液(例如从粉末或固体)以来的时间。
术语“VEGF抑制剂”包括表现出血管内皮生长因子(VEGF)信号传导的抑制的任何药剂(例如，小分子、抗体或其抗原结合片段)。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以结合至血管内皮生长因子受体(VEGFR)。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以结合至血管内皮生长因子(例如，VEGFR的配体)。
术语“耳可接受的渗透增强剂”或“渗透增强剂”是指降低屏障抗性(例如，圆窗膜的阻隔抗性)的药剂。
术语“预防有效量”是指当施用于需要此类治疗的患者并在作用部位时，足以(i)预防疾病或病症，(ii)在特定疾病、病状或病症发生之前减轻、改善或消除其一种或多种症状的活性剂的量。在一些情况下，“预防有效量”是指在作用部位处的组合物的量，其已经被施用于易患特定疾病、病症或病状或以其他方式处于特定疾病、病症或病状的风险中的受试者，例如，活性剂的预防有效量可以是在作用部位处有效预防或减轻耳毒性的量。
术语“预防有效剂量”是指当施用于需要此类治疗的患者时足以(i)预防疾病或病症，(ii)在特定疾病、病状或病症发生之前减轻、改善或消除其一种或多种症状的活性剂的量。在一些情况下，“预防有效剂量”是指施用于易患特定疾病、病症或病状或以其他方式处于特定疾病、病症或病状的风险中的受试者的组合物的量，例如，活性剂的预防有效量可以是有效预防或减轻耳毒性的量。例如，可以在化疗前向个体施用细胞凋亡抑制制剂以防止随后施用的化疗剂导致的听力损失。
如本文所使用的术语“停留时间”可以指制剂停留在施用位置的时间量。在一些实施例中，停留时间可以是当在圆窗膜区域上没有凝胶可见的时间，例如在注射后的某个时间收集凝胶之后。
术语“室温”是指约15℃和小于约27℃之间的温度，优选地约20℃。
术语“体温”是指约36.5℃和约37.5℃之间的温度，优选地约37℃。
如本文所使用的，术语“受试者”、“个体”或“患者”可互换使用，是指任何动物，包含哺乳动物诸如小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马、灵长类动物和人类。在一些实施例中，所述患者是人。在一些实施例中，受试者已经经历和/或表现出待治疗和/或预防的疾病或病症的至少一种症状。
“小分子”通常是指小于约1500g/mol、小于约1000g/mol、小于约800g/mol或小于约500g/mol的分子。在一些形式中，小分子是非聚合的和/或非低聚的。在一些实施例中，小分子可以是有机的。在一些实施例中，小分子可以是无机的。在一些实施例中，小分子可以包括有机原子和无机原子。
“稳态”可以指当施用的药物的量(例如，中耳和/或内耳)等于在一个给药间隔内消除的药物的量时，导致靶向的结构内药物暴露的平稳或恒定水平。
如本文所使用的，“稳定的”可以指在定义的条件下在一段时间内的化学和/或物理稳定性。在一些实施例中，稳定的溶液可以保留高百分比或所有最初溶解在溶液中的物质。在一些实施例中，溶液可以在室温(约15-25℃，最优选地25℃)下保留超过60％、70％、80％、90％、95％、98％、99％或100％的最初溶解的溶质。
如本文所使用的，“持续释放”是指物质在延长的时间段内的释放。在一些实施例中，这可以与其中一次性使全部量的物质在生物学上可利用的推注型施用形成对比。
如本文所使用的，凝胶的“溶胀”可以指在用磷酸盐缓冲盐水(PBS)平衡后凝胶重量的百分比增加。凝胶的溶胀可以通过例如以下来测量：在插入物内制备凝胶、记录初始凝胶重量、允许凝胶在室温下形成持续约20至60分钟、浸入PBS(PBS体积为凝胶的至少5X体积)(例如，pH 7.4)并在37℃下储存、在1-3天后移除填充有凝胶的插入物并在擦去表面流体后记录重量、然后计算按初始凝胶重量归一化的凝胶重量的增加。
术语“Tmax”是指药物或其他物质达到最大浓度Cmax所花费的时间。
术语“经鼓室”或“鼓室内”施用是指经由鼓室，在一些情况下，经由通过穿过鼓膜(耳膜)而进入鼓室(tympanic cavity)(中耳)的皮下注射针来施用活性剂。
如本文所使用的，术语“治疗(treat或treatment)”是指治疗性或减缓性措施。有益或期望的临床结果包括但不限于完全或部分地缓解与疾病或病症或病状相关的症状、减轻疾病程度、稳定疾病状态(即，不恶化)、延迟或减慢疾病的进展、改善或减轻疾病状态(例如，一种或多种疾病症状)以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。
术语“单位剂型”是指适合作为人类受试者和其它患者的单位剂量的物理上离散的单位，每个单位含有预定量的活性材料(即，如本文提供的活性剂)，所述预定量的活性材料被计算以与合适的药物赋形剂一起产生期望的治疗效果。
如本文所使用的，术语“预防(prevent、preventing或prevention)”是指完全或部分地预防如本文所述的疾病或病状或其症状的发作、复发或扩散。
II.延长释放耳用组合物
本文提供了耳用组合物(例如，延长释放耳用组合物)，其包括本如文提供的聚合物组合物和活性剂。耳用(otic)(有时也被称为耳用(auris))组合物已经被开发用于治疗剂、预防剂和/或诊断剂在耳内的持续或以脉冲方式或两者的变体的延长释放。在一些实施例中，与不是延长释放耳用组合物的组合物相比，如本文所述的延长释放耳用组合物可以使在耳用流体(例如，内淋巴和/或外淋巴)中递送的药剂的曲线下面积(AUC)增加约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％。在一些情况下，与不是延长释放耳用组合物的组合物相比，延长释放组合物还可以使耳用流体(例如内淋巴和/或外淋巴)中的Cmax降低约40％、约30％、约20％或约10％。与不是延长释放耳用组合物的组合物相比，这可以降低Cmax与Cmin的比率。因此，在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以提供更恒定的活性剂释放。在某些实施方式中，Cmax与Cmin的比率可以是10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1或1:1。与不是延长释放耳用组合物的组合物相比，耳用药剂的浓度高于Cmin的时间长度可以增加约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％。在一些情况下，延长释放组合物可以延迟达到Cmax的时间，和/或延长的药物浓度保持在Cmin以上的时间。在一些形式中，延长释放耳用组合物延长药物在内耳中的停留时间。
在一些情况下，可以实现向中耳和/或内耳的持续递送，因为延长释放耳用组合物以凝胶的形式提供。在一些此类实施例中，凝胶可以在优选的位置(例如圆窗膜)处在延长的时间段内保持完整。在一些实施例中，与不是延长释放耳用组合物的组合物相比，凝胶形式的延长释放耳用组合物可以将停留时间延长至少约二倍、四倍、十倍或二十倍，并且这可以导致AUC增加约二倍、四倍、十倍或二十倍。
在一些实施例中，一旦药物在内淋巴或外淋巴中的浓度达到稳态，则活性剂在内淋巴或外淋巴中的浓度在延长的时间段(例如，一天、2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月)内保持在有效浓度或约有效浓度。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以具有至少两种组分:活性剂(例如，治疗剂、预防剂和/或诊断剂)；凝胶形成聚合物组合物(例如，包含官能聚合物、交联剂和水)；和任选地一种或多种赋形剂，它们一起形成延长释放耳用组合物。
A.治疗剂、预防剂和诊断剂
在一些实施例中，延长释放耳用组合物可用于局部疗法、预防和/或诊断。治疗活性剂、预防活性剂、诊断剂或可视化剂或其组合可以从延长释放耳用组合物递送，例如从在施用延长释放耳用组合物后形成的交联聚合物或凝胶递送。
活性剂可以是任何合适的活性剂。在一些实施例中，活性剂可以是治疗剂。在一些实施例中，活性剂可以是预防剂。在一些实施例中，活性剂可以是诊断剂或可视化剂。在一些实施例中，活性剂可以包括诊断剂或可视化剂和治疗剂。在一些实施例中，活性剂可以包括诊断剂或可视化剂和预防剂。活性剂可以包括例如蛋白质(例如酶、生长因子、抗体或其抗原结合片段)、碳水化合物(例如糖胺聚糖)、核酸(例如反义寡核苷酸、适体、微小RNA、短干扰RNA或核酶)、小分子或其组合。在一些实施例中，小分子可以包括抗生素、抗肿瘤剂(例如，阿霉素(doxorubicin))、局部麻醉剂、类固醇、激素、细胞凋亡抑制剂(例如，Apaf-1的抑制剂；参见，例如，美国专利第9,040,701号，其通过引用以其整体并入本文)、血管生成剂、抗血管生成剂(例如，VEGF抑制剂)、神经递质、精神活性药物、抗炎剂及其组合。在一些实施例中，活性剂可以包括抗血管生成剂。在一些实施例中，活性剂可以包括抗血管生成剂和类固醇。在一些实施例中，活性剂包括地塞米松。在一些实施例中，活性剂是地塞米松。
在一些实施例中，诊断剂或可视化剂可以包括染料、荧光团、MRI造影剂(例如，包含钆的药剂)或可通过超声、MRI或x射线检测的其他药剂。在一些实施例中，可视化剂可以在外科手术期间改善聚合物组合物或延长释放耳用组合物的可见性。可视化剂的非限制性实例可以包括适用于医疗可植入医疗装置的有色物质，例如FD&C染料1、3和6、曙红、亚甲基蓝、吲哚菁绿或通常在合成手术缝合线中发现的有色染料。在一些实施例中，可视化剂可以包括FD&C Blue#1。在一些实施例中，可视化剂可以以按质量计约0％至约0.5％(例如，约0％至约0.02％、约0％至约0.05％、约0％至约0.1％、约0％至约0.2％、约0.02％至约0.5％、约0.05％至约0.5％、约0.1％至约0.5％或约0.2％至约0.5％)的量存在于聚合物组合物或延长释放耳用组合物中。在一些实施例中，可视化剂可以以按质量计约0％至约0.05％(例如，约0.005％至约0.02％、约0.005％至约0.0015％、约0.009％，或约0.1％)的量存在于聚合物组合物或延长释放耳用组合物中。在一些实施例中，可视化剂是绿色或蓝色；不受任何特定理论的束缚，绿色或蓝色在血液的存在下或在粉色或白色组织背景上可能具有更好的可见性。
在一些实施例中，活性剂可以基本上呈微粒或纳米颗粒的形式。不受任何特定理论的束缚，据信在一些情况下，微粒形式可以有助于活性剂从如本文所述的延长释放耳用组合物中的受控释放。在一些情况下，纳米颗粒形式可以提高溶解速率并以高于微粒的受控释放速率递送活性剂。在一些实施例中，微粒可以是直径在约0.1μm和约100μm之间(例如，在约0.1μm和约1μm之间、在约0.1μm和约10μm之间、在约0.1μm和约50μm之间、在约1μm和约100μm之间、在约10μm和约100μm之间、在约50μm和约100μm之间、在约1μm和约50μm之间、或在约1μm和10μm之间)的颗粒，例如，如通过光学显微镜测量的。在一些实施例中，纳米颗粒可以是直径在约1nm和约100nm之间(例如，在约1nm和约10nm之间、在约1nm和约50nm之间、在约10nm和约100nm之间、或在约50nm和约100nm之间)的颗粒，例如，如通过电子显微镜测量的。
在一些实施例中，活性剂可以包括抗血管生成剂。在一些实施例中，抗血管生成剂可以是VEGF抑制剂。在一些情况下，VEGF抑制剂可以是抗体或其抗原结合片段、诱饵受体、VEGFR激酶抑制剂、VEGFR的变构调节剂或其组合。在一些情况下，VEGF抑制剂可以是抗体或其抗原结合片段。例如，在一些实施例中，VEGF抑制剂可以是阿拉赛珠单抗、贝伐珠单抗(
Figure BDA0003939295410000311
)、艾芦库单抗(IMC-18F1)、雷莫芦单抗(LY3009806、IMC-1121B、
Figure BDA0003939295410000312
)或雷珠单抗(
Figure BDA0003939295410000313
)。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以是诱饵受体(例如，阿柏西普)。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以是VEGFR激酶抑制剂，例如阿戈拉非尼、奥曲替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、卡博替尼、西地尼布、拉帕替尼、乐伐替尼、莫替沙尼、尼达尼布、帕唑帕尼、哌加他尼、瑞巴替尼、瑞戈非尼、司马沙尼、索拉非尼、舒尼替尼、妥拉尼布、替沃扎尼或凡德他尼。VEGF抑制剂的其他实例可以是本领域已知的。在一些实施例中，VEGFR抑制剂可以是VEGFR的变构调节剂(例如，cyclotraxin B)。
在一些实施例中，VEGF抑制剂可以相对于其他VEGFR对VEGFR2的选择性的。在一些实施例中，VEGF抑制剂可以表现出相对于另一种VEGFR对VEGFR2的至少10倍的选择性。例如，VEGF抑制剂可以表现出相对于另一种VEGFR对VEGFR2至少20倍的选择性、至少30倍的选择性、至少40倍的选择性；至少50倍的选择性；至少60倍的选择性；至少70倍的选择性；至少80倍的选择性；至少90倍的选择性；至少100倍的选择性；至少200倍的选择性；至少300倍的选择性；至少400倍的选择性；至少500倍的选择性；至少600倍的选择性；至少700倍的选择性；至少800倍的选择性；至少900倍的选择性；或至少1000倍的选择性。在一些实施例中，在酶测定中测量VEGFR2相对于另一种VEGFR的选择性。在一些实施例中，另一种VEGFR可以选自由VEGFR1、VEGFR3以及VEGFR1和VEGFR3两者组成的组。
血管内皮生长因子(VEGF)信号传导通路与许多疾病和病症(包含癌症、类风湿性关节炎和年龄相关性黄斑变性)有关。通常，VEGF信号传导通路的激活通常导致组织的血管生成。VEGF信号传导通路通过其组成的四种受体：VEGFR1(也被称为Flt-1；示例性的人VEGFR1序列显示在SEQ ID NO：1中)、VEGFR2(也被称为KDR或Flk-1；示例性的人VEGFR2序列显示在SEQ ID NO:2中)和VEGFR3(也被称为Flt4；示例性的人VEGFR3序列显示在SEQ IDNO:3中)，以及其五种生长因子：VEGF-A(示例性的人VEGF-A序列显示在SEQ ID NO:4中)、VEGF-B(示例性的人VEGF-B序列显示在SEQ ID NO:5中)、VEGF-C(示例性的人VEGF-C序列显示在SEQ ID NO:6中)、VEGF-D(示例性的人VEGF-D序列显示在SEQ ID NO:7中)和PlGF(胎盘生长因子；示例性的人PlGF序列显示在SEQ ID NO:8中)传递信号。VEGF对各种VEGFR具有不同的亲和力；参见，例如，Shibuya,Masabumi，“健康和疾病中的VEGF-VEGFR信号(VEGF-VEGFR signals in health and disease)”，《生物分子与治疗学(Biomolecules&Therapeutics)》22.1(2014):1,doi:10.4062/biomolther.2013.113，其通过引用以其整体并入本文)。与本文所示的序列相比，VEGF和VEGFR都具有变体同种型和/或可以被加工成成熟形式。尤其是VEGF-A在人类中具有几种同种型。VEGFR通常可以被剪接为可溶性形式或膜结合形式。在一些情况下，VEGFR与血小板衍生生长因子受体(PDGFR)一起归为酪氨酸激酶受体的超家族。
SEQ ID NO：1，来自Uniparc ID UPI000013DCDD的人VEGFR1序列
MVSYWDTGVL LCALLSCLLL TGSSSGSKLK DPELSLKGTQ HIMQAGQTLH LQCRGEAAHKWSLPEMVSKE SERLSITKSA CGRNGKQFCS TLTLNTAQAN HTGFYSCKYL AVPTSKKKET ESAIYIFISDTGRPFVEMYS EIPEIIHMTE GRELVIPCRV TSPNITVTLK KFPLDTLIPD GKRIIWDSRK GFIISNATYKEIGLLTCEAT VNGHLYKTNY LTHRQTNTII DVQISTPRPV KLLRGHTLVL NCTATTPLNT RVQMTWSYPDEKNKRASVRR RIDQSNSHAN IFYSVLTIDK MQNKDKGLYT CRVRSGPSFK SVNTSVHIYD KAFITVKHRKQQVLETVAGK RSYRLSMKVK AFPSPEVVWL KDGLPATEKS ARYLTRGYSL IIKDVTEEDA GNYTILLSIKQSNVFKNLTA TLIVNVKPQI YEKAVSSFPD PALYPLGSRQ ILTCTAYGIP QPTIKWFWHP CNHNHSEARCDFCSNNEESF ILDADSNMGN RIESITQRMA IIEGKNKMAS TLVVADSRIS GIYICIASNK VGTVGRNISFYITDVPNGFH VNLEKMPTEG EDLKLSCTVN KFLYRDVTWI LLRTVNNRTM HYSISKQKMA ITKEHSITLNLTIMNVSLQD SGTYACRARN VYTGEEILQK KEITIRDQEA PYLLRNLSDH TVAISSSTTL DCHANGVPEPQITWFKNNHK IQQEPGIILG PGSSTLFIER VTEEDEGVYH CKATNQKGSV ESSAYLTVQG TSDKSNLELITLTCTCVAAT LFWLLLTLFI RKMKRSSSEI KTDYLSIIMD PDEVPLDEQC ERLPYDASKW EFARERLKLGKSLGRGAFGK VVQASAFGIK KSPTCRTVAV KMLKEGATAS EYKALMTELK ILTHIGHHLN VVNLLGACTKQGGPLMVIVE YCKYGNLSNY LKSKRDLFFL NKDAALHMEP KKEKMEPGLE QGKKPRLDSV TSSESFASSGFQEDKSLSDV EEEEDSDGFY KEPITMEDLI SYSFQVARGM EFLSSRKCIH RDLAARNILL SENNVVKICDFGLARDIYKN PDYVRKGDTR LPLKWMAPES IFDKIYSTKS DVWSYGVLLW EIFSLGGSPY PGVQMDEDFCSRLREGMRMR APEYSTPEIY QIMLDCWHRD PKERPRFAEL VEKLGDLLQA NVQQDGKDYI PINAILTGNSGFTYSTPAFS EDFFKESISA PKFNSGSSDD VRYVNAFKFM SLERIKTFEE LLPNATSMFD DYQGDSSTLLASPMLKRFTW TDSKPKASLK IDLRVTSKSK ESGLSDVSRP SFCHSSCGHV SEGKRRFTYD HAELERKIACCSPPPDYNSV VLYSTPPI
SEQ ID NO:2，来自Uniparc条目UPI000003AE04的人VEGFR2序列
MQSKVLLAVA LWLCVETRAA SVGLPSVSLD LPRLSIQKDI LTIKANTTLQ ITCRGQRDLDWLWPNNQSGS EQRVEVTECS DGLFCKTLTI PKVIGNDTGA YKCFYRETDL ASVIYVYVQD YRSPFIASVSDQHGVVYITE NKNKTVVIPC LGSISNLNVS LCARYPEKRF VPDGNRISWD SKKGFTIPSY MISYAGMVFCEAKINDESYQ SIMYIVVVVG YRIYDVVLSP SHGIELSVGE KLVLNCTART ELNVGIDFNW EYPSSKHQHKKLVNRDLKTQ SGSEMKKFLS TLTIDGVTRS DQGLYTCAAS SGLMTKKNST FVRVHEKPFV AFGSGMESLVEATVGERVRI PAKYLGYPPP EIKWYKNGIP LESNHTIKAG HVLTIMEVSE RDTGNYTVIL TNPISKEKQSHVVSLVVYVP PQIGEKSLIS PVDSYQYGTT QTLTCTVYAI PPPHHIHWYW QLEEECANEP SQAVSVTNPYPCEEWRSVED FQGGNKIEVN KNQFALIEGK NKTVSTLVIQ AANVSALYKC EAVNKVGRGE RVISFHVTRGPEITLQPDMQ PTEQESVSLW CTADRSTFEN LTWYKLGPQP LPIHVGELPT PVCKNLDTLW KLNATMFSNSTNDILIMELK NASLQDQGDY VCLAQDRKTK KRHCVVRQLT VLERVAPTIT GNLENQTTSI GESIEVSCTASGNPPPQIMW FKDNETLVED SGIVLKDGNR NLTIRRVRKE DEGLYTCQAC SVLGCAKVEA FFIIEGAQEKTNLEIIILVG TAVIAMFFWL LLVIILRTVK RANGGELKTG YLSIVMDPDE LPLDEHCERL PYDASKWEFPRDRLKLGKPL GRGAFGQVIE ADAFGIDKTA TCRTVAVKML KEGATHSEHR ALMSELKILI HIGHHLNVVNLLGACTKPGG PLMVIVEFCK FGNLSTYLRS KRNEFVPYKT KGARFRQGKD YVGAIPVDLK RRLDSITSSQSSASSGFVEE KSLSDVEEEE APEDLYKDFL TLEHLICYSF QVAKGMEFLA SRKCIHRDLA ARNILLSEKNVVKICDFGLA RDIYKDPDYV RKGDARLPLK WMAPETIFDR VYTIQSDVWS FGVLLWEIFS LGASPYPGVKIDEEFCRRLK EGTRMRAPDY TTPEMYQTML DCWHGEPSQR PTFSELVEHL GNLLQANAQQ DGKDYIVLPISETLSMEEDS GLSLPTSPVS CMEEEEVCDP KFHYDNTAGI SQYLQNSKRK SRPVSVKTFE DIPLEEPEVKVIPDDNQTDS GMVLASEELK TLEDRTKLSP SFGGMVPSKS RESVASEGSN QTSGYQSGYH SDDTDTTVYSSEEAELLKLI EIGVQTGSTA QILQPDSGTT LSSPPV
SEQ ID NO:3，来自Uniparc条目UPI00001488E7的人VEGFR3序列
MQRGAALCLR LWLCLGLLDG LVSGYSMTPP TLNITEESHV IDTGDSLSIS CRGQHPLEWAWPGAQEAPAT GDKDSEDTGV VRDCEGTDAR PYCKVLLLHE VHANDTGSYV CYYKYIKARI EGTTAASSYVFVRDFEQPFI NKPDTLLVNR KDAMWVPCLV SIPGLNVTLR SQSSVLWPDG QEVVWDDRRG MLVSTPLLHDALYLQCETTW GDQDFLSNPF LVHITGNELY DIQLLPRKSL ELLVGEKLVL NCTVWAEFNS GVTFDWDYPGKQAERGKWVP ERRSQQTHTE LSSILTIHNV SQHDLGSYVC KANNGIQRFR ESTEVIVHEN PFISVEWLKGPILEATAGDE LVKLPVKLAA YPPPEFQWYK DGKALSGRHS PHALVLKEVT EASTGTYTLA LWNSAAGLRRNISLELVVNV PPQIHEKEAS SPSIYSRHSR QALTCTAYGV PLPLSIQWHW RPWTPCKMFA QRSLRRRQQQDLMPQCRDWR AVTTQDAVNP IESLDTWTEF VEGKNKTVSK LVIQNANVSA MYKCVVSNKV GQDERLIYFYVTTIPDGFTI ESKPSEELLE GQPVLLSCQA DSYKYEHLRW YRLNLSTLHD AHGNPLLLDC KNVHLFATPLAASLEEVAPG ARHATLSLSI PRVAPEHEGH YVCEVQDRRS HDKHCHKKYL SVQALEAPRL TQNLTDLLVNVSDSLEMQCL VAGAHAPSIV WYKDERLLEE KSGVDLADSN QKLSIQRVRE EDAGRYLCSV CNAKGCVNSSASVAVEGSED KGSMEIVILV GTGVIAVFFW VLLLLIFCNM RRPAHADIKT GYLSIIMDPG EVPLEEQCEYLSYDASQWEF PRERLHLGRV LGYGAFGKVV EASAFGIHKG SSCDTVAVKM LKEGATASEH RALMSELKILIHIGNHLNVV NLLGACTKPQ GPLMVIVEFC KYGNLSNFLR AKRDAFSPCA EKSPEQRGRF RAMVELARLDRRRPGSSDRV LFARFSKTEG GARRASPDQE AEDLWLSPLT MEDLVCYSFQ VARGMEFLAS RKCIHRDLAARNILLSESDV VKICDFGLAR DIYKDPDYVR KGSARLPLKW MAPESIFDKV YTTQSDVWSF GVLLWEIFSLGASPYPGVQI NEEFCQRLRD GTRMRAPELA TPAIRRIMLN CWSGDPKARP AFSELVEILG DLLQGRGLQEEEEVCMAPRS SQSSEEGSFS QVSTMALHIA QADAEDSPPS LQRHSLAARY YNWVSFPGCL ARGAETRGSSRMKTFEEFPM TPTTYKGSVD NQTDSGMVLA SEEFEQIESR HRQESGFSCK GPGQNVAVTR AHPDSQGRRRRPERGARGGQ VFYNSEYGEL SEPSEEDHCS PSARVTFFTD NSY
SEQ ID NO：4，来自Uniparc条目UPI0000030866的人VEGF-A序列
MNFLLSWVHW SLALLLYLHH AKWSQAAPMA EGGGQNHHEV VKFMDVYQRS YCHPIETLVDIFQEYPDEIE YIFKPSCVPL MRCGGCCNDE GLECVPTEES NITMQIMRIK PHQGQHIGEM SFLQHNKCECRPKKDRARQE KKSVRGKGKG QKRKRKKSRY KSWSVYVGAR CCLMPWSLPG PHPCGPCSER RKHLFVQDPQTCKCSCKNTD SRCKARQLEL NERTCRCDKP RR
SEQ ID NO:5，来自Uniparc条目UPI0000001047的人VEGF-B序列
MSPLLRRLLL AALLQLAPAQ APVSQPDAPG HQRKVVSWID VYTRATCQPR EVVVPLTVELMGTVAKQLVP SCVTVQRCGG CCPDDGLECV PTGQHQVRMQ ILMIRYPSSQ LGEMSLEEHS QCECRPKKKDSAVKPDRAAT PHHRPQPRSV PGWDSAPGAP SPADITHPTP APGPSAHAAP STTSALTPGP AAAAADAAASSVAKGGA
SEQ ID NO:6，来自Uniparc条目UPI0000001C2A的人VEGF-C序列
MHLLGFFSVA CSLLAAALLP GPREAPAAAA AFESGLDLSD AEPDAGEATA YASKDLEEQLRSVSSVDELM TVLYPEYWKM YKCQLRKGGW QHNREQANLN SRTEETIKFA AAHYNTEILK SIDNEWRKTQCMPREVCIDV GKEFGVATNT FFKPPCVSVY RCGGCCNSEG LQCMNTSTSY LSKTLFEITV PLSQGPKPVTISFANHTSCR CMSKLDVYRQ VHSIIRRSLP ATLPQCQAAN KTCPTNYMWN NHICRCLAQE DFMFSSDAGDDSTDGFHDIC GPNKELDEET CQCVCRAGLR PASCGPHKEL DRNSCQCVCK NKLFPSQCGA NREFDENTCQCVCKRTCPRN QPLNPGKCAC ECTESPQKCL LKGKKFHHQT CSCYRRPCTN RQKACEPGFS YSEEVCRCVPSYWKRPQMS
SEQ ID NO：7，来自Uniparc条目UPI00000012B2的人VEGF-D序列
MYREWVVVNV FMMLYVQLVQ GSSNEHGPVK RSSQSTLERS EQQIRAASSL EELLRITHSEDWKLWRCRLR LKSFTSMDSR SASHRSTRFA ATFYDIETLK VIDEEWQRTQ CSPRETCVEV ASELGKSTNTFFKPPCVNVF RCGGCCNEES LICMNTSTSY ISKQLFEISV PLTSVPELVP VKVANHTGCK CLPTAPRHPYSIIRRSIQIP EEDRCSHSKK LCPIDMLWDS NKCKCVLQEE NPLAGTEDHS HLQEPALCGP HMMFDEDRCECVCKTPCPKD LIQHPKNCSC FECKESLETC CQKHKLFHPD TCSCEDRCPF HTRPCASGKT ACAKHCRFPKEKRAAQGPHS RKNP
SEQ ID NO:8，来自Uniparc条目UPI0000131BEF的人PlGF前体序列
MPVMRLFPCF LQLLAGLALP AVPPQQWALS AGNGSSEVEV VPFQEVWGRS YCRALERLVDVVSEYPSEVE HMFSPSCVSL LRCTGCCGDE NLHCVPVETA NVTMQLLKIR SGDRPSYVEL TFSQHVRCECRHSPGRQSPD MPGDFRADAP SFLPPRRSLP MLFRMEWGCA LTGSQSAVWP SSPVPEEIPR MHPGRNGKKQQRKPLREKMK PERCGDAVPR R
B.聚合物组合物
本文还提供了聚合物组合物。通常，如本文所述的聚合物组合物包括官能聚合物、交联剂和水。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物可注射到中耳和/或内耳中，其中官能聚合物离子地和/或共价地交联，以产生凝胶(例如，水凝胶)形式的交联的聚合物组合物。通过改变pH、暴露于离子和/或暴露于光交联剂，可以在混合和注入聚合物组合物时发生交联。
在一些实施例中，如本文所述的聚合物组合物可以具有一种或多种有利于施用于受试者(例如施用于受试者的中耳和/或内耳)的功能特性。
在一些情况下，聚合物组合物的特征可以在于例如原位交联和形成耐用凝胶(例如水凝胶)的能力。从溶液到凝胶的转变的现象通常被称为溶胶-凝胶转变。聚合物组合物的溶胶-凝胶转变可以通过多种技术(例如小瓶倒置法、光谱法、差示扫描量热法(DSC)和流变学)进行实验验证。
在一些实施例中，当在室温(例如20℃)下储存在倒置的小瓶中时，由本文所述的聚合物组合物形成的凝胶可以具有至少20天(例如，至少30天、至少40天、至少50天、至少60天、至少70天、至少80天、至少90天、至少100天或更长)的胶凝持续时间。在一些实施例中，当在体温(例如37℃)下储存时，由如本文所述的聚合物组合物形成的凝胶可以具有至少5天(例如，至少7天、至少10天、至少14天、至少18天、至少21天、至少25天、至少28天或更长)的胶凝持续时间，如通过将凝胶(例如200μL)置于受体溶液(例如，pH 7.4的PBS)中测量的。在原位，由如本文所述的聚合物组合物形成的凝胶(例如水凝胶)的降解可以取决于聚合物组合物的组分(例如官能聚合物和/或交联剂)的特性，以及施用的准确性和受试者的代谢。在一些实施例中，当施用于受试者的中耳时，由如本文所述的聚合物组合物形成的凝胶可以具有至少5天(例如，至少7天、至少10天、至少14天、至少18天、至少21天、至少25天、至少28天、至少42天、至少56天或更长)的停留时间。
在一些情况下，聚合物组合物可以通过例如原位交联和形成保形凝胶(shapeconforming gel)(例如水凝胶)的能力来表征。在一些实施例中，当与1mL的PBS一起储存在37℃的直立小瓶中时，由本文所述的聚合物组合物(例如，200μL的凝胶)形成的凝胶可以保持其形状持续至少20天(例如，至少30天、至少40天、至少50天、至少60天、至少70天、至少80天、至少90天、至少100天或更长)；小瓶的倒置可以用于确定聚合物组合物是否仍然是凝胶。
在一些实施例中，如本文所述的聚合物组合物可以形成显著弹性而不是显著粘弹性的凝胶。不受任何特定理论的束缚，据信弹性凝胶在施用位置将具有比粘弹性凝胶更长的停留时间，粘弹性凝胶可能会流走。例如，在一些实施例中，由本文所述的聚合物组合物形成的凝胶可以具有约0.01至约100kPa(例如，约0.1至约100kPa、约1至约100kPa、约5至约100kPa、约10至约100kPa、约25至约100kPa、约50至约100kPa、约75至约100kPa、约0.01至约0.1kPa、约0.01至约1kPa、约0.01至约5kPa、约0.01至约10kPa、约0.01至约25kPa、约0.01至约50kPa或约0.01至约75kPa)的弹性模量。
在一些实施例中，聚合物组合物可以具有宽的粘度转变，例如，如本文所述的一些聚合物组合物可以流动(例如，作为溶液或悬浮液)至靶标部位并且例如原位形成凝胶(例如，水凝胶)。在一些实施例中，聚合物组合物可以以溶液或悬浮液的形式注射，通过重力流过整个中耳或流动至中耳中的一个或多个部位，然后形成凝胶(例如水凝胶)。在一些此类实施例中，聚合物组合物润湿(例如，完全润湿)圆窗膜。在一些实施例中，聚合物组合物的递送可以在没有气泡(例如，凝胶中的气泡和/或截留在凝胶和圆窗膜之间的气泡)的情况下完成。在一些实施例中，聚合物组合物的粘度(例如，在组合官能聚合物、交联剂和水之后立即)在约1和约100mPa*s之间(例如，在约2和约100mPa*s、约5和约100mPa*s、约10和约100mPa*s、约25和约100mPa*s、约50和约100mPa*s、约75和约100mPa*s、约1和约2mPa*s、约1和约5mPa*s、约1和约10mPa*s、约1和约25mPa*s、约1和约50mPa*s、或1和约75mPa*s之间)。在一些情况下，如本文所述的聚合物组合物可以使用23规格(23G)针或高规格(较小直径)的针注射，例如，不会明显堵塞针。
在一些情况下，聚合物组合物的特征可以在于例如在原位交联和形成凝胶(例如水凝胶)的能力，其中胶凝时间适合于施用于受试者的部位(例如中耳和/或内耳)。一些聚合物组合物(例如
Figure BDA0003939295410000381
)可以在3秒或更短的时间内形成凝胶，这对于如本文所公开的延长释放耳用组合物的递送可能是不期望的。
在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约45秒至约60分钟(例如，约1分钟至约60分钟、约45秒至约45分钟、约45秒至约30分钟、约45秒至约20分钟、约45秒至约10分钟、约45秒至约8分钟、约45秒至约5分钟、约45秒至约3分钟、约45秒至约2分钟、约45秒至约1分钟、约1分钟至约60分钟、约2分钟至约60分钟、约3分钟至约60分钟、约4分钟至约60分钟、约5分钟至约60分钟、约8分钟至约60分钟、约10分钟至约60分钟、约20分钟至约60分钟、约30分钟至约60分钟、约45分钟至约60分钟、约1分钟至约5分钟、约5分钟至约20分钟、约8分钟至约12分钟、约4分钟至约12分钟、或约1分钟至约8分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约8分钟至约16分钟(例如，约9分钟至约15分钟、约10分钟至约14分钟、或约11分钟至约13分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约9分钟至约11分钟的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有至少约45秒(例如，至少约1分钟、至少约2分钟、至少约3分钟、至少约5分钟或至少约10分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约20℃的温度下可以具有约8分钟、9分钟、10分钟、11分钟或12分钟的胶凝时间。
在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约37℃下可以具有约10秒至约30分钟(例如，约10秒至约30秒、约10秒至约1分钟、约10秒至约2分钟、约10秒至约3分钟、约10秒至约4分钟、约10秒至约5分钟、约10秒至约8分钟、约30秒至约10分钟、约30秒至约15分钟、约30秒至约20分钟、约1分钟至约30分钟、约2分钟至约30分钟、约3分钟至约30分钟、约4分钟至约30分钟、约5分钟至约30分钟、约8分钟至约30分钟、约10分钟至约30分钟、约15分钟至约30分钟、约20分钟至约30分钟、约30秒至约3分钟、约1分钟至约2分钟、约2分钟至约8分钟、约3分钟至约8分钟、约2分钟至约6分钟、约4分钟至约6分钟、约3分钟至约5分钟或约1分钟至约4分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约37℃下可以具有约30秒至约2分钟(例如，约45秒至约1分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约37℃下可以具有至少约10秒(例如，至少约30秒、至少约1分钟、至少约2分钟、至少约3分钟、至少约4分钟、至少约5分钟、至少约8分钟或至少约10分钟)，并且任选地少于30分钟(例如少于15分钟)的胶凝时间。在一些实施例中，本文所述的聚合物组合物在约37℃的温度下可以具有约3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟或8分钟的胶凝时间。
不受任何特定理论的束缚，据信聚合物组合物或延长释放耳用组合物的胶凝时间可以影响其在临床环境中的有用性，因为胶凝过快的组合物可以减少组合物可以施用于受试者的耳朵(例如，通过经鼓膜注射)的时间量。在一些实施例中，本文提供的聚合物组合物或延长释放耳用组合物在官能聚合物和交联剂组合后可通过27规格(或更大直径)针注射持续至少10分钟。在一些实施例中，本文提供的聚合物组合物或延长释放耳用组合物在官能聚合物和交联剂组合后可通过27规格(或更大直径)针注射持续至少2分钟(例如，2至4分钟、2至6分钟、2至8分钟、2至10分钟)。
交联反应的速率可以通过选择聚合物组合物的性质来影响；例如，pH、交联剂和官能化聚合物的量以及缓冲液的选择可以影响胶凝时间。在冷却时混合组分也可以减慢交联反应以允许用于注射的时间。在一些情况下，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以粘附到中耳的组织并产生充分交联的凝胶，该凝胶在降解成液体之前将在中耳中保持持续长的持续时间。
通过分子与交联的水凝胶网络的可降解的共价连接，利用该系统还可以获得活性剂递送的受控速率。可以控制共价连接的性质，从而能够控制数小时至数周或更长时间的释放速率。通过使用由具有一定水解时间范围的连接物(linkages)制成的复合物，受控释放概况可以延长持续更长的持续时间。
在一些情况下，例如，当在过量的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中在37℃下孵育(例如，持续约1天，或持续约2天)时，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以表现出小于约150％(例如，小于约140％，小于约120％，小于约100％，小于约80％，小于约70％，小于约60％，小于约50％，或小于约40％)的溶胀。在一些情况下，例如，当在过量的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中在37℃下孵育1天后，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以表现出约25％至约45％(例如，约30％至约40％)的溶胀。在一些情况下，例如，当在过量的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中在37℃下孵育7天后，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以表现出约40％至约80％(例如，约50％至约70％)的溶胀。在一些实施例中，由聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以具有约5天至约30天(例如，约5天至约10天、约5天至约15天、约5天至约20天、约5天至约25天、约10天至约30天、约15天至约30天、约20天至约30天、约25天至约30天、约7天至约9天或约7天至约15天)的再吸收时间(例如，在50℃下在过量的PBS中孵育的凝胶的质量小于凝胶的起始质量的时间)。在一些实施例中，由本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以通过在胶凝化期间表现出对与聚合物组合物接触的表面的粘附来表征。在一些实施例中，粘附可以是机械粘附、凝胶粘附、化学粘附、粘膜粘附或其组合。在一些情况下，聚合物组合物可以证明对耳朵内的组织(例如，圆窗膜)的粘附。这可以例如通过聚合物制剂的一种或多种组分的交联来实现，所述组分可以包括与组织形成共价交联的组分。作为实例，聚合物组合物可以包括胺反应性基团和/或硫醇反应性基团，其可以结合至组织。在一些实施例中，由本文所述的聚合物组合物形成的凝胶可以通过在胶凝化期间表现出对与聚合物组合物接触的粘膜表面(例如，圆窗膜)的粘膜粘附性来表征。在一些实施例中，可以通过在组织中蛋白质的胺基团和官能聚合物的活化的酯之间形成共价键来实现粘附。
活性剂(例如，治疗剂、预防剂和/或可视化剂或诊断剂)，例如本文所述的一种或多种活性剂中的任何一种，可以被包括在本文所述的任何聚合物组合物中。通常，当活性剂存在于本文所述的聚合物组合物中时，这种组合物被称为延长释放耳用组合物。
活性剂可以以任何合适的量或浓度存在于如本文所述的聚合物组合物中。在一些实施例中，活性剂可以以足以将治疗有效浓度递送至作用部位(例如，通过圆窗膜)持续一段时间的量存在于聚合物组合物中。在一些实施例中，一段时间可以小于或等于延长释放耳用组合物在施用部位中的停留时间。例如，在一些实施例中，一段时间可以是约5天至约6个月(例如，约5天至约1周、约5天至约2周、约5天至约3周、约5天至约1个月、约5天至约2个月、约5天至约3个月、约5天至约4个月、约5天至约5个月、约1周至约6个月、约2周至约6个月、约3周至约6个月、约1个月至约6个月、约2个月至约6个月、约3个月至约6个月、约4个月至约6个月、约5个月至约6个月，约2周至约2个月，或约1个月至约3个月)。在一些实施例中，例如，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约0.01％至约40％(例如，约0.01％至约0.1％、约0.01％至约1％、约0.01％至约2％、约0.01％至约3％、约0.01％至约5％、约0.01％至约8％、约0.01％至约10％、约0.01％至约12％、约0.01％至约15％、约0.01％至约20％、约0.01％至约20％、约0.01％至约40％、约0.1％至约40％、约1％至约40％、约2％至约40％、约3％至约40％、约5％至约40％、约8％至约40％、约10％至约40％或约12％至约40％)的量存在。在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约1％至约10％(例如，约2％至约9％、约3％至约8％、或约4％至约6％)的量存在。在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约4％、5％、6％、7％或8％的量存在。在一些实施例中，例如，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约8％至约18％(例如，约8％至约10％、约8％至约12％、约8％至约14％、约8％至约16％、约10％至约18％、约12％至约18％、约14％至约18％、约16％至约18％、约9％至约16％、或约10％至约15％)的量存在。在一些实施例中，活性剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约10％、11％、12％、13％、14％或15％的量存在。
活性剂可以任何合适的形式存在于聚合物组合物中。在一些实施例中，活性剂可以作为溶液或作为悬浮液存在于聚合物组合物中。在一些实施例中，活性剂可以微粒或纳米颗粒的形式存在于聚合物组合物中。在一些实施例中，在组合延长释放耳用组合物的组分之后，活性剂可以从溶液变为悬浮液，从一种形式的微粒或纳米颗粒变为另一种微粒或纳米颗粒。
药物悬浮液组合物的一般优选的特征是施用均匀剂量的能力。对于在储存期间不形成致密沉淀物并且在手动搅拌容器时可以容易地重新分散的组合物，这可以更容易实现。在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以包括活性剂的颗粒，所述颗粒易于通过手动搅拌分散并具有低粘度使得它们易于注射。在一些情况下，这可以通过添加促进药物颗粒聚集成松散的絮状物的絮凝剂来实现。絮凝效率可以被定义为最终沉积物体积(例如，作为总体积的百分比)与颗粒浓度的比率。最终沉积物体积不能大于100％，从而限制了絮凝效率的上限值。在一些实施例中，如本文所述的延长释放耳用组合物具有大于约3(例如，大于约4，或大于约5)的絮凝效率。在一些实施例中，官能聚合物和/或交联剂的选择可以影响给定活性剂在溶液中的絮凝效率。例如，在一些实施例中，使用聚赖氨酸(例如，三赖氨酸或四赖氨酸)或其盐作为交联剂可以在不添加其他分散剂的情况下提供高度的絮凝。可能希望交联剂还用作絮凝剂以最小化延长释放制剂中赋形剂的数量。其他两亲交联剂(如四赖氨酸)也可以用于交联和絮凝药物颗粒的双重目的。
在一些实施例中，活性剂以干粉形式储存，直到与延长释放耳用组合物的其他组分组合(例如，在使用时或接近使用时)。例如，通过喷雾干燥和/或超临界流体加工制备的微粒和纳米颗粒可以形成松散的聚集体，这些聚集体具有良好的流动性和处理性能，并且很容易以低能量输入分散成初级颗粒。当组合延长释放耳用组合物的组分时，可以通过经由引入空气和/或延长释放耳用组合物的其他组分产生的剪切将聚集体分离成初级颗粒。
如上所述，如本文所述的聚合物组合物通常包括官能聚合物、交联剂和水。凝胶(例如，水凝胶)可以由官能聚合物和具有官能团(例如亲电或亲核官能团)的交联剂的反应形成。
如本文所使用的，“官能聚合物”可以是包含一个或多个官能团的聚合物，该官能团可以与交联剂上的一个或多个官能团反应以形成键(例如，共价键)。
如本文所使用的，“交联剂”可以是包含一个或多个官能团的分子，该官能团可以与官能聚合物上的一个或多个官能团反应以形成键(例如，共价键)。在一些情况下，交联剂是聚合物(例如，三赖氨酸或四赖氨酸，或其盐)。在一些情况下，交联剂不是聚合物。
通常，官能聚合物和交联剂是水溶性的、无毒的和生物学上可接受的。在一些实施例中，交联剂是小分子。在一些实施例中，交联剂在水溶液中具有至少1g/100mL的溶解度。在一些实施例中，官能聚合物是大分子。示例性类别的官能聚合物和交联剂描述在美国专利号6,566,406、6,887,974、7,332,566和8,535,705中，其每一个都通过引用以其整体并入本文。
在一些实施例中，官能聚合物或交联剂可以是多官能的，意味着它包括两个或更多个官能团。在一些实施例中，多官能的官能聚合物或交联剂仅具有一种类型的官能团(例如，所有亲核或所有亲电子官能团)。在一些情况下，官能聚合物或交联剂可以包括至少三个(例如，至少四个、至少五个或更多个)官能团，使得作为反应(例如，亲电-亲核反应)的结果，官能聚合物和交联剂组合以形成交联的凝胶(例如水凝胶)。这类反应通常被称为“交联反应”。
官能聚合物可以包括多个第一官能团。交联剂可以包括多个第二官能团。在一些这类实施例中，聚合物的第一官能团可以与交联剂的第二官能团形成共价键，从而产生凝胶(例如水凝胶)。官能团的分布可以是任何合适的分布。在一些实施例中，官能聚合物是支化聚合物，其中每个支链的末端被第一官能团官能化。在一些实施例中，官能聚合物可以包括第一类型的单体，其中官能聚合物是第一类型的单体的均聚物。在一些实施例中，官能聚合物可以包括第一类型的单体，其中第一类型的单体中的每一个都包括第一官能团。在一些情况下，第一类型的单体可以被随机分布在官能聚合物中。在一些情况下，第一类型的单体可以规则地分布(例如，作为嵌段共聚物或作为交替共聚物)在官能聚合物中。在一些情况下，第一类型的单体可以是官能聚合物中接枝共聚物的一部分(例如，作为主链或作为支链)。官能聚合物可以具有任何合适的尺寸。在一些实施例中，官能聚合物是大分子，例如，具有5,000、10,000、20,000、30,000或更多的Mn的大分子。
在一些实施例中，交联剂可以包括第二类型的单体，其中官能聚合物是第二类型的单体的均聚物。在一些实施例中，交联剂是支化聚合物，其中每个支链的末端被第二官能团官能化。在一些实施例中，交联剂可以包括第二类型的单体，其中第二类型的单体中的每一个包括第二官能团。在一些情况下，第二类型的单体可以被随机分布在交联剂中。在一些情况下，第二类型的单体可以规则地分布(例如，作为嵌段共聚物或作为交替共聚物)在交联剂中。在一些情况下，第二类型的单体可以是交联剂中接枝共聚物的一部分(例如，作为主链或作为支链)。交联剂可以具有任何合适的尺寸。在一些实施例中，交联剂是小分子。在一些实施例中，交联剂是低聚物，例如二聚体、三聚体、四聚体或五聚体。
应当理解，第一官能团(例如，在官能聚合物上)和第二官能团(例如，在交联剂上)应当使得可以发生交联反应。因此，官能聚合物的选择可以基于交联剂的选择，或者反之亦然。在一些实施例中，第一官能团可以是NHS基团并且第二官能团可以是胺(例如伯胺)，或者反之亦然。
在一些情况下，官能聚合物仅包括亲电或亲核官能团，而交联剂分别仅包括亲核或亲电子官能团。因此，例如，如果交联剂具有诸如胺(例如伯胺)的亲核官能团，则官能聚合物在一些情况下可能仅具有诸如N-羟基琥珀酰亚胺的亲电子官能团。例如，如果交联剂具有诸如磺基琥珀酰亚胺的亲电子官能团，则在一些情况下，该官能聚合物可以具有诸如胺(例如伯胺)的亲核官能团。
如本文所述，官能聚合物可以以任何合适的浓度存在于聚合物组合物中。在一些实施例中，官能聚合物可以以按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％(例如，约5％至约7％、约5％至约9％、约5％至约11％、约5％至约13％、约7％至约15％、约9％至约15％、约11％至约15％、约13％至约15％、约7％至约13％、约8％至约11％、约6％至约12％或约7％至约10％)的浓度存在。在一些实施例中，官能聚合物可以以按所述聚合物组合物的重量计的约6％、约7％、约8％、约9％、约10％或约11％的浓度存在。在一些实施例中，官能聚合物可以以按所述聚合物组合物的重量计的约8.3％的浓度存在。在一些实施例中，官能聚合物可以存在于延长释放耳用组合物中，如在本文所述的聚合物组合物中。
如本文所述，交联剂可以以任何合适的浓度存在于如本文所述的聚合物组合物中。在一些实施例中，交联剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％(例如，约0.2％至约0.4％、约0.4％至约0.6％或约0.3％至约0.5％)的浓度存在。在一些实施例中，交联剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％(例如，约0.05％至约0.2％、约0.05％至约0.4％、约0.05％至约0.5％、约0.1％至约0.6％、约0.2％至约0.6％、约0.4％至约0.6％或约0.1％至约0.3％)的浓度存在。在一些实施例中，交联剂可以以按所述聚合物组合物的重量计的约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％或0.6％的浓度存在。在一些实施例中，交联剂可以以按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％(例如，约0.05％至约0.5％、约0.05％至约1％、约0.05％至约2％、约0.05％至约3％、约0.05％至约5％、约0.05％至约7％、约0.05％至约9％、约0.5％至约10％、约1％至约10％、约2％至约10％、约3％至约10％、约5％至约10％、约7％至约10％、约9％至约10％或约0.5％至约2％)的浓度存在。在一些实施例中，交联剂可以存在于延长释放耳用组合物中，如在本文所述的聚合物组合物中。
在一些实施例中，交联剂可以包括胺(例如，伯胺)基团，或其盐(例如，乙酸盐)。在一些实施例中，交联剂可以是聚赖氨酸(例如三赖氨酸)，或其盐(例如乙酸盐)。应当理解，当处于盐形式时，交联剂的重量百分比将对应于当不处于盐形式(例如作为游离碱)时交联剂的较小重量百分比，因为盐提供了额外的摩尔质量。作为说明性的实例，如果交联剂是三赖氨酸乙酸酯，则对于三赖氨酸游离碱，交联剂在聚合物组合物或延长释放耳用组合物中的重量百分比为三赖氨酸乙酸酯重量百分比的约69％，所有其它均相同。
官能团可以以任何合适的比率存在。在一些实施例中，在使用第一官能团和第二官能团(例如亲电子官能团和亲核官能团)的情况下，第一官能团与第二官能团的比率可以在约1.2当量第一官能团:0.8当量第二官能团至约0.8当量第一官能团:1.2当量第二官能团之间。在一些实施例中，第一官能团与第二官能团的比率可以在约1当量第一官能团:0.9当量第二官能团至约0.9当量第一官能团:1当量第二官能团之间。在一些实施例中，第一官能团与第二官能团的比率为约1:1。应当理解，官能聚合物和交联剂的摩尔比或重量比将分别基于每个官能聚合物或交联剂的官能团的相对数量。
在一些实施例中，官能聚合物可以是改性的聚乙二醇(PEG)聚合物。示例性的改性的PEG聚合物包括直链、支链或多臂水溶性聚合物，其包含多个聚乙二醇单元和(例如，作为单体的一部分或作为封端)两个或更多个实例的官能团(例如，琥珀酰亚胺酯(例如，N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS))、磺基琥珀酰亚胺酯、环氧化物或类似的反应性基团)。多臂官能聚合物可以包括水溶性核，例如糖(木糖醇、赤藓糖醇)、甘油或三羟甲基丙烷。水溶性核可以被延伸，任选地在它和每个末端基团之间具有至少一个可生物降解的键，在一些情况下末端基团可以是官能团。在一些情况下，可生物降解的键可以是单键或可吸收聚合物如多羟基酸或聚内酯的共聚物或均聚物。
在一些实施例中，官能聚合物可以包括酶促和/或水解可裂解的连接。例如，可以使用肽合成领域中的技术人员已知的方法来合成被酶如胶原酶切割的分子并将其插入到聚合物中。在一些实施例中，羧基封端的、胺封端的或羟基封端的聚乙二醇可以用作构建用于酶促切割的合适的肽序列的起始材料，并且通过使琥珀酸酐与合适的氨基酸反应将肽序列的末端转化为羧酸。然后可以通过与N-羟基琥珀酰亚胺反应将产生的酸基团转化为NHS酯。
在某些情况下，官能聚合物可以购买或使用各种合成方法制备。
在一些实施例中，官能聚合物或交联剂上的官能团可以是也是水溶性的反应性官能团，例如进一步用PEG或磺酸酯基团官能化的琥珀酰亚胺酯基团。离子基团，如磺酸的金属盐(例如，钠盐)，或非离子基团，如琥珀酰亚胺环上的聚环氧乙烷，可以改善水溶性，而NHS酯提供对胺的化学反应性。
用诸如琥珀酰亚胺酯基团的反应性官能团官能化的官能聚合物(如聚乙二醇)可从例如MilliporeSigma(威斯康星州密尔沃基(Milwaukee,Wis.))和Creative PEGWorks(北卡罗来纳州教堂山(Chapel Hill,NC))商购获得。用反应性官能团如伯胺和硫醇官能化的官能聚合物(如聚乙二醇)可从例如MilliporeSigma(威斯康星州密尔沃基)和JenKem(德克萨斯州普莱诺(Plano,Texas))商购获得。在一些实施例中，具有末端羟基基团的商业上可获得的聚合物可以通过本领域中已知的方法被转化成具有胺基团的官能聚合物。类似地，与官能聚合物互补的交联剂通常可从诸如MilliporeSigma的公司商购获得。
在一些实施例中，官能聚合物是多臂(例如，3臂、4臂、6臂或8臂)聚乙二醇(PEG)，包含多个(例如，两个以上)琥珀酰亚胺基官能团(例如，琥珀酰亚胺基琥珀酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酸酯、琥珀酰亚胺基己二酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酰胺、琥珀酰亚胺基碳酸酯或琥珀酰亚胺基羧甲基酯)或磺基-琥珀酰亚胺酯官能团，并且交联剂包括多个胺(例如，伯胺)官能团。在一些实施例中，官能聚合物是具有季戊四醇核心的4臂PEG。在一些实施例中，官能聚合物是具有六甘油核心的8臂PEG。在一些实施例中，官能聚合物是具有三季戊四醇核心的8臂PEG。在一些实施例中，多臂PEG可以具有终止于琥珀酰亚胺基官能团的两个或更多个臂。在一些实施例中，多臂PEG的一种或多种单体可以包括琥珀酰亚胺基官能团。在一些实施例中，交联剂可以是聚赖氨酸(例如ε-聚赖氨酸)(例如三赖氨酸、四赖氨酸或五赖氨酸)或其盐(例如乙酸盐)。例如，在一些实施例中，官能聚合物可以是季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯，并且交联剂可以是三赖氨酸或其盐(分别如图1A和1B所示)。在一些实施例中，官能聚合物(例如，季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯)可以具有约10kDa至约25kDa(例如，约10kDa至约15kDa、约10kDa至约20kDa、约15kDa至约25kDa或约20kDa至约25kDa)的分子量(MN)。在一些实施例中，官能聚合物(例如，季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯)可以具有约10kDa至约25kDa(例如，约10kDa至约15kDa、约10kDa至约20kDa、约15kDa至约25kDa或约20kDa至约25kDa)的分子量(MW)。分子量可以例如通过气相色谱法或基质辅助激光解吸色谱法来确定。在一些实施例中，官能聚合物(例如，季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯)可以具有1.5±0.5的多分散性(PD)。
在一些实施例中，官能聚合物是多臂(例如，3臂、4臂、6臂或8臂)聚乙二醇，其包含两个或更多个胺(例如，伯胺)官能团，并且交联剂包括多个琥珀酰亚胺酯(例如，琥珀酰亚胺基琥珀酸酯或琥珀酰亚胺基戊二酸酯)或磺基-琥珀酰亚胺酯官能团。在一些实施例中，多臂PEG可以具有终止于胺(例如，伯胺)官能团的两个或更多个臂。在一些实施例中，多臂PEG的一种或多种单体可以包括胺(例如，伯胺)官能团。在一些实施例中，交联剂可以是戊二酸二琥珀酰亚胺酯、辛二酸二琥珀酰亚胺酯、辛二酸二(磺基琥珀酰亚胺)酯或琥珀酸二琥珀酰亚胺酯。
交联反应
通常，交联反应可以在生理条件下发生。在一些实施例中，交联反应可以“原位”发生，意味着它们发生在局部部位，例如发生在活的动物或人体的器官或组织上。在一些实施例中，交联反应不释放聚合热。
官能聚合物和交联剂之间的交联可以在任何合适的条件下引发。在一些实施例中，官能聚合物和交联剂之间的交联在添加催化剂(例如，引发剂分子)时引发。在一些实施例中，交联由刺激引发，例如pH、温度或辐射的变化(例如，使用光引发)。交联的速率和胶凝时间可以受诸如以下的因素影响：pH、温度、赋形剂、官能团的比率、官能聚合物的官能化程度以及官能聚合物和交联剂的浓度。
在一些实施例中，官能聚合物和交联剂之间的交联在混合官能聚合物和交联剂时引发。在一些这类实施例中，胶凝时间足以允许将聚合物组合物或延长释放耳用组合物以显著的流体形式(例如，通过经由23G针注射)施用至施用部位(例如，中耳和/或内耳的区域)。在一些实施例中，可以在施用之前或在施用时引发交联，但聚合物组合物在流入施用部位(例如，中耳和/或内耳的区域)之前不显著胶凝化。粘度通常随着交联而增加，因此通常希望在发生显著交联之前施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物。因此，在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物在约20℃的温度下可以具有小于约1000mPa·s(例如，小于约800mPa·s、500mPa·s、300mPa·s、100mPa·s、75mPa·s、50mPa·s或25mPa·s)的粘度。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物在约20℃的温度下可以具有约1mPa·s至约100mPa·s(例如，约1mPa·s至约80mPa·s、约1mPa·s至约60mPa·s、约1mPa·s至约50mPa·s、约1mPa·s至约40mPa·s、约1mPa·s至约20mPa·s、约1mPa·s至约10mPa·s、约10mPa·s至约100mPa·s、约20至约100、约40至约100、约50至约100mPa·s、约60mPa·s至约100mPa·s或约80mPa·s至约100mPa·s)的粘度。
在一些实施例中，pH用于影响胶凝时间。作为脊柱密封剂销售的参考产品
Figure BDA0003939295410000471
包括季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀亚胺基戊二酸酯和三赖氨酸。根据制造商的说明制备的
Figure BDA0003939295410000472
具有约10的pH，并且交联通常迅速发生，并且该产品可以在3秒或更短的时间内形成凝胶(参见例如实例1)。如本文所述，将三赖氨酸组分调节至约5.5至约8.5(例如，约5.5至约8.0、约5.5至约7.5、约5.5至约7.0、约5.5至约6.5、约5.5至约6.0、约6.5至约7.0、约6.5至约7.5、约6.5至约8.0、约7.0至约8.5、约7.5至约8.5或约8.0至约8.5)的pH可以导致更长的胶凝时间，例如上文所述的那些。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以具有约5.5至约8.5(例如，约5.5至约8.0、约5.5至约7.5、约5.5至约7.0、约5.5至约6.5、约5.5至约6.0、约6.5至约7.0、约6.5至约7.5、约6.5至约8.0、约7.0至约8.5、约7.5至约8.5或约8.0至约8.5)的pH。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以具有约5.0至约7.7(例如，约5.0至约5.5、约5.0至约6.0、约5.0至约6.5、约5.0至约7.0、约5.0至约7.5、约5.5至约7.7、约6.0至约7.7、约6.5至约7.7、约7.0至约7.7、约6.0至约7.0、约6.6至约7.7、约6.8至约7.7、约6.6至约6.8)的pH。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以具有约7.2的pH。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以具有约5.5至约6.5(例如，约5.7至约6.2，或约6.0)的pH。聚合物组合物或延长释放耳用组合物的pH可以通过添加酸(例如HCl、磷酸)、碱(例如NaOH、KOH)和/或缓冲剂(例如磷酸盐(例如呈磷酸盐(例如磷酸钠(例如一元和/或二元)、磷酸或其组合的形式)、硼酸盐(例如硼酸钠(例如十水合物))或其组合)来适当地调节。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物在胶凝化时的pH可以通过用纯化的蒸馏水平衡来间接测量。在一些实施例中，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以具有约5.5至约8.5(例如，约5.5至8.0、约5.5至约7.5、约5.5至约7.0、约5.5至约6.5、约5.5至约6.0、约6.5至约7.0、约6.5至约7.5、约6.5至约8.0、约7.0至约8.5、约7.5至约8.5或约8.0至约8.5)的pH。在一些实施例中，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶可以具有约6.0至约7.7(例如，约6.0至约7.0、约6.6至约7.7、约6.8至约7.7、约6.6至约6.8)的pH。在一些这类实施例中，胶凝化的聚合物组合物或延长释放耳用组合物的pH可以为约6.0至约6.5(例如，约6.1至约6.4)。
在一些实施例中，温度用于影响胶凝时间。在一些这类实施例中，聚合物组合物可以作为冷冻的组合物制备和/或由一种或多种冷冻的组分制备。
凝胶的交联密度可能受到交联剂和官能聚合物的总分子量以及每个分子可用的官能团的数量的影响。与较高的分子量(例如10,000Da)相比，较低分子量的官能聚合物(例如约600Da)通常将产生更高的交联密度。交联密度也可能受到交联剂和官能聚合物溶液的总固体百分比的影响。增加固体百分比增加了亲电子基团在通过水解的失活之前与亲核基团组合的可能性。另一种影响交联密度的方法是通过调节亲核基团与亲电子基团的化学计量比。一比一的比率通常导致最高的交联密度。
赋形剂
如本文所述的延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括赋形剂，例如pH缓冲剂、张度剂、粘膜粘附剂、稳定剂、防腐剂、载体和渗透增强剂。在一些实施例中，可以并入到聚合物组合物或延长释放耳用组合物中的赋形剂包括稀释剂、缓冲剂、分散剂或粘度调节剂、增溶剂、稳定剂和同渗浓度调节剂。
术语“稀释剂”是指可以用于稀释聚合物组合物或延长释放耳用组合物的组分(例如，官能聚合物、交联剂和/或活性剂)的化学化合物(例如，在递送之前)。在一些实施例中，稀释剂与中耳和/或内耳一起使用。
术语“分散剂”和/或“粘度调节剂”和/或“增稠剂”是指增强颗粒物质在溶液中的分散或改变溶液或悬浮液的粘度的材料。分散剂/材料的实例包括但不限于亲水性聚合物、电解质、
Figure BDA0003939295410000481
60或
Figure BDA0003939295410000482
80、PEG、聚乙烯吡咯烷酮(PVP；也被称为聚维酮并且在商业上被称为
Figure BDA0003939295410000483
和
Figure BDA0003939295410000484
)，和基于碳水化合物的分散剂，诸如例如改性的纤维素，例如羟丙基纤维素(例如，HPC、HPC-SL和HPC-L)、羟丙基甲基纤维素(例如，HPMCK100、HPMC K4M、HPMC K15M和HPMC K100M)、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素乙酸硬脂酸酯(HPMCAS)、聚乙烯醇(PVA)、乙烯基吡咯烷酮/乙酸乙烯酯共聚物(S630)、4-(1,1,3,3-四甲基丁基)-苯酚与环氧乙烷和甲醛的聚合物(也被称为泰洛沙泊(tyloxapol))、聚乙烯吡咯烷酮K12、聚乙烯吡咯烷酮K17、聚乙烯吡咯烷酮K25或聚乙烯吡咯烷酮K30、聚乙烯吡咯烷酮/乙酸乙烯酯共聚物(S-630)和聚乙二醇，其具有约300至约6000，或约3350至约4000，或约7000至约5400的分子量。在一些实施例中，增稠剂的量为组合物的总重量的约1％、5％、约10％或约15％。在一些情况下，分散剂通过抑制药物结晶来改善组合物的物理稳定性。
术语“增溶剂”是指耳可接受的化合物，例如甘油三乙酸酯(triacetin)、柠檬酸三乙酯(triethylcitrate)、油酸乙酯、辛酸乙酯、月桂基硫酸钠、多库酯钠(sodiumdoccusate)、维生素E TPGS、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N-羟乙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、羟丙基环糊精和其他环糊精、乙醇、正丁醇、异丙醇、胆固醇、胆汁盐、聚乙二醇200-600、糖原质(glycofurol)、
Figure BDA0003939295410000491
丙二醇和二甲基异山梨醇、乙醇和其他有机溶剂。两亲分子如泊洛沙姆和吐温也可以用作增溶剂。在一些实施例中，当这些增溶剂的浓度高于临界胶束浓度(CMC)或高于它们的溶解度(例如胆汁盐)时，可以获得增溶剂的持续储库。在一些实施例中，增溶剂包括丙二醇、PEG300、乙醇和环糊精、泊洛沙姆407和泊洛沙姆188中的一种或多种。
各种物理或粘度调节剂可以用于增强聚合物组合物或延长释放耳用组合物的机械强度和稳定性。在一些实施例中，活性剂的颗粒(例如，微粒或纳米颗粒)可以用于增加水凝胶的机械稳定性。颗粒可以悬浮在水凝胶中，或通过离子或疏水相互作用共价或偶联到聚合物上。
在一些实施例中，其他粘度调节剂、稳定剂和/或渗透增强剂可以被包括在聚合物组合物或延长释放耳用组合物中。粘度调节剂的非限制性实例包括聚合物，例如葡聚糖或其他多糖、PLURONIC(也被称为泊洛沙姆)是一类由亲水性聚(环氧乙烷)(PEO)和疏水性聚(环氧丙烷)(PPO)组成的合成嵌段共聚物(PPO)，其以A-B-A三嵌段结构排列，从而得到PEO-PPO-PEO)、乳化剂和胶束。在一些实施例中，渗透增强剂和/或增溶剂的胶束可以用于在制剂中实现持续浓度。在一些实施例中，泊洛沙姆407和/或泊洛沙姆188的胶束可以用作增溶剂，例如浓度为按所述聚合物组合物或延长释放耳用组合物的重量计的约1％至约10％(例如，约1％至约2％、约1％至约3％、约1％至约5％、约1％至约8％、约2％至约10％、约3％至约10％、约5％至约10％、或约8％至约10％)。在一些实施例中，泊洛沙姆的浓度不有助于凝胶形成或不产生高粘度。在一些实施例中，如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物不包括泊洛沙姆。
在一些情况下，活性剂可以以亚稳态固体形式存在，例如无定形颗粒、多晶型物或盐形式，其中不同的固体形式具有较低的溶解度；例如，游离碱结晶形式。在一些实施例中，诸如聚乙烯吡咯烷酮和泊洛沙姆407的赋形剂可以用作增溶剂和分散剂以抑制药物结晶。
术语“稳定剂”是指通常与中耳和/或内耳的环境相容的化合物，例如抗氧化剂、缓冲剂、酸和防腐剂。稳定剂可以包括改善赋形剂与容器或递送系统(包含注射器或玻璃瓶)的相容性的药剂，其改善延长释放耳用组合物或聚合物组合物的组分的稳定性，或改善组合物的稳定性，例如，以避免相变。
在一些实施例中可以包括张度剂以便实现特定的张度。一般来说，内淋巴的摩尔渗透压质量浓度(osmolality)高于外淋巴。例如，内淋巴具有约304mOsm/kg H2O的摩尔渗透压质量浓度，而外淋巴具有约294mOsm/kg H2O的摩尔渗透压质量浓度。
在一些形式中，本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物提供约100mOsm/kg至约1000mOsm/kg(例如，约200mOsm/kg至约400mOsm/kg、约240mOsm/kg至约350mOsm/kg、约250mOsm/kg至约350mOsm/kg、约270mOsm/kg至约320mOsm/kg、约280mOsm/kg至约320mOsm/kg、约100mOsm/kg至约200mOsm/kg、约100mOsm/kg至约300mOsm/kg、约100mOsm/kg至约500mOsm/kg、约100mOsm/kg至约700mOsm/kg、约100mOsm/kg至约900mOsm/kg、约200mOsm/kg至约1000mOsm/kg、约300mOsm/kg至约1000mOsm/kg、约500mOsm/kg至约1000mOsm/kg、约700mOsm/kg至约1000mOsm/kg、约900mOsm/kg至约1000mOsm/kg或约300至约600mOsmol/kg)的摩尔渗透压质量浓度。在一些形式中，本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物提供约550mOsm/kg至约600mOsm/kg(例如，约560至约590mOsm/kg)的摩尔渗透压质量浓度。在一些形式中，本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物具有约280mOsm/kg的摩尔渗透压质量浓度。在一些形式中，本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物具有约100mOsm/L至约1000mOsm/L(例如，约200mOsm/L至约400mOsm/L、约240mOsm/L至约350mOsm/L、约250mOsm/L至约350mOsm/L、约270mOsm/L至约320mOsm/L、约280mOsm/L至约320mOsm/L、约100mOsm/L至约200mOsm/L、约100mOsm/L至约300mOsm/L、约100mOsm/L至约500mOsm/L、约100mOsm/L至约700mOsm/L、约100mOsm/L至约900mOsm/L、约200mOsm/L至约1000mOsm/L、约300mOsm/L至约1000mOsm/L、约500mOsm/L至约1000mOsm/L、约700mOsm/L至约1000mOsm/L或约900mOsm/L至约1000mOsm/L)的同渗浓度(osmolarity)。在一些形式中，组合物的同渗浓度被设计成使得凝胶与靶向的耳部结构(例如，内淋巴、外淋巴等)是低渗的。在一些形式中，组合物的同渗浓度被设计成使得凝胶与靶向的耳部结构(例如，内淋巴、外淋巴等)是等渗的。在一些形式中，组合物的同渗浓度被设计成使得凝胶与靶向的耳部结构(例如，内淋巴、外淋巴等)是高渗的。
同渗浓度/摩尔渗透压质量浓度可以例如通过使用适当的盐浓度(例如钾盐的浓度)或使用张度剂来调节，这使得组合物是内淋巴相容的和/或外淋巴相容的(例如，凝胶与内淋巴和/或外淋巴是等渗的)。在一些情况下，内淋巴相容和/或与外淋巴相容的延长释放耳用组合物或聚合物组合物在施用时可以对内耳的环境造成最小的干扰并对受试者(例如哺乳动物)造成最小的不适(例如眩晕和/或恶心)。
在一些形式中，由延长释放耳用组合物或聚合物组合物形成的凝胶可以与外淋巴等渗。在一些情况下，等渗组合物可以通过在延长释放耳用组合物或聚合物组合物中包括张度剂来形成。合适的张度剂包括但不限于任何药学上可接受的糖、盐或它们的任何组合或混合物，例如但不限于右旋糖、甘油、甘露醇、山梨糖醇、氯化钠和其他电解质。如果需要，可以任选地使用氯化钠或其他张度剂来调节张度。代表性的盐包括具有钠、钾或铵阳离子和氯离子、柠檬酸根、抗坏血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根、硫酸根、硫代硫酸根或亚硫酸氢根阴离子的那些；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。在磷酸盐缓冲剂的情况下，可以理解的是，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠通常组合使用以达到特定的pH，并且它们被统称为“磷酸钠”。在一些情况下，例如，当还使用硼酸盐时，可以使用磷酸来进一步改变pH。在一些实施例中，张度剂可以是氯化钠。
在一些实施例中，由延长释放耳用组合物或聚合物组合物形成的凝胶可以是轻微低渗的，使得水从制剂中被拉入组织中以增加与组织的接触和粘附。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括一种或多种pH调节剂或缓冲剂。pH调节剂或缓冲剂的非限制性实例包括乙酸盐、碳酸氢盐、氯化铵、柠檬酸盐、磷酸盐、硼酸盐、它们的药学上可接受的盐以及它们的组合或混合物。水溶性的缓冲剂的非限制性实例是碱金属或碱土金属碳酸盐、磷酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、硼酸盐、醋酸盐、琥珀酸盐等，例如钠的磷酸盐、柠檬酸盐、硼酸盐、醋酸盐、碳酸氢盐、碳酸盐和HEPES。在一些实施例中，氨基丁三醇(TRIS)不用于其中伯胺为官能团的聚合物组合物或延长释放耳用组合物。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.01％至约3.0％(例如，约0.01％至约0.1％、约0.01％至约0.5％、约0.01％至约1.0％、约0.01％至约2.0％、约0.1％至约3.0％、约0.5％至约3.0％、约1.0％至约3.0％、约2.0％至约3.0％、约0.05％至约2.0％或约0.5％至约1.5％)的量的十水合硼酸钠。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.05％至约2.0％(例如，约0.5％至约1.5％，或约1.2％)的量的十水合硼酸钠。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.01％至约3.0％(例如，约0.01％至约0.1％、约0.01％至约0.5％、约0.01％至约1.0％、约0.01％至约2.0％、约0.1％至约3.0％、约0.5％至约3.0％、约1.0％至约3.0％、约2.0％至约3.0％、约0.05％至约2.0％或约0.5％至约1.5％)的量的磷酸钠。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.05％至约2.0％(例如，约0.5％至约1.5％，或约1.1％)的量的磷酸钠。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.01％至约3.0％(例如，约0.01％至约0.1％、约0.01％至约0.5％、约0.01％至约1.0％、约0.01％至约2.0％、约0.1％至约3.0％、约0.5％至约3.0％、约1.0％至约3.0％、约2.0％至约3.0％、约0.05％至约2.0％或约0.5％至约1.5％)的量的磷酸。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括按重量计约0.05％至约2.0％(例如，约0.5％至约1.5％，或约0.9％)的量的磷酸。
在一些形式中，组合物包括粘膜粘附剂。在一些情况下，粘膜粘附剂有助于粘附到耳朵的一部分，例如圆窗膜。粘膜粘附剂包括但不限于卡波姆，例如
Figure BDA0003939295410000521
934P、聚乙烯吡咯烷酮聚合物(PVP)；水可溶胀但水不溶性的交联的羧基官能聚合物；交联的聚(丙烯酸)(例如
Figure BDA0003939295410000522
947P)；卡波姆均聚物；卡波姆共聚物；亲水性多糖胶；麦芽糖糊精；交联的藻酸盐胶凝胶、羟丙基甲基纤维素和水分散性聚羧酸化乙烯基聚合物。粘膜粘附剂在授予Lichter等人的美国专利8,828,980中描述，该专利通过引用以其整体并入本文。
表面活性剂的实例包括但不限于月桂基硫酸钠、多库酯钠、
Figure BDA0003939295410000524
60(聚乙二醇脱水山梨糖醇单硬脂酸酯)或
Figure BDA0003939295410000523
80(聚乙二醇脱水山梨糖醇单油酸酯)、甘油三乙酸酯、D-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(维生素E TPGS)、磷脂、卵磷脂、磷脂酰胆碱(c8-c18)、磷脂酰乙醇胺(c8-c18)、磷脂酰甘油(c8-c18)、脱水山梨糖醇单油酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、聚山梨醇酯、胆汁盐和甘油单硬脂酸酯。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括渗透增强剂，其允许将活性剂递送穿过屏障，例如耳的椭圆形窗或圆形窗。通常，渗透增强剂是耳兼容的。渗透增强剂包括月桂基硫酸钠、辛基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、辛基-三甲基溴化铵、十二烷基-三甲基溴化铵、月桂酸钠、聚氧乙烯-20-十六烷基醚、月桂醇聚醚-9(laureth-9)、十二烷基硫酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、聚氧乙烯-9-月桂基醚(PLE)、
Figure BDA0003939295410000525
20、
Figure BDA0003939295410000526
80、壬基苯氧基聚乙烯(NP-POE)、聚山梨醇酯、胆汁盐、脂肪酸及衍生物、螯合剂(如EDTA、柠檬酸和水杨酸盐、亚砜(如二甲基亚砜(DMSO)和癸基甲基亚砜)和醇(如乙醇、异丙醇、甘油和丙二醇)。在一些情况下，渗透增强剂是部分可溶的脂肪酸，例如油酸，其以高到足以形成悬浮液并且因此形成持续存在渗透增强剂的微储库的浓度存在。在一些实施例中，延长释放组合物包括在提供活性剂的初始更高释放后耗尽的渗透增强剂。
在一些形式中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括防腐剂。示例性的防腐剂也描述于授予Lichter等人的美国专利8,828,980中，该专利通过引用以其整体并入本文。合适的防腐剂包括但不限于苯甲酸、硼酸、对羟基苯甲酸盐、醇类、季铵化合物、稳定的二氧化氯、汞，例如硼酸苯汞(merfen)和硫柳汞，或它们的组合。在一些实施例中，防腐剂可以包括丁基化羟基甲苯(BHT)。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括约0％至约0.01％(例如，约0.0005％至约0.01％、约0.001％至约0.01％或约0.005％至约0.01％)的量的BHT。在一些实施例中，防腐剂可以包括丁基化羟基甲苯(BHT)。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括约0％至约0.01％(例如，约0.0005％至约0.01％、约0.001％至约0.01％或约0.005％至约0.01％)的量的BHT。在一些实施例中，延长释放耳用组合物或聚合物组合物可以包括约0％至约0.005％(例如，约0.001％至约0.003％或约0.002％)的量的BHT。
III.聚合物的施用和交联
聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以使用任何合适的方法施用。
本文还提供了制备聚合物组合物或延长释放耳用组合物的方法。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些实施例中，在施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物期间(例如，当使用双注射器设备时)，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合，使得该组合具有约5.5至约8.5的pH。
在一些情况下，官能聚合物是固体(例如，冻干的粉末)并且在使用时或接近使用时被重构。因此，在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可通过以下来制备：(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，(b)制备交联剂的溶液或悬浮液，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些情况下，交联剂作为溶液提供。因此，在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，和(b)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，(b)改变交联剂的溶液或悬浮液的pH，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些实施例中，制备官能聚合物或交联剂的溶液或悬浮液可以包括调节溶液或悬浮液的pH。在一些实施例中，调节官能聚合物的溶液或悬浮液的pH可以包括将pH调节到约1.6至约4.0。在一些实施例中，调节交联剂的溶液或悬浮液的pH可以包括将pH调节到约5.5至约8.5。在一些实施例中，在施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物期间(例如，当使用双注射器设备时)，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。
在一些情况下，官能聚合物作为溶液或悬浮液提供。因此，在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可通过以下来制备：(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，和(b)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些情况下，交联剂作为溶液提供。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合来制备。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，(b)改变官能聚合物溶液或悬浮液的pH，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。在一些实施例中，制备官能聚合物或交联剂的溶液或悬浮液可以包括调节溶液或悬浮液的pH。在一些实施例中，调节官能聚合物的溶液或悬浮液的pH可以包括将pH调节到约1.6至约4.0。在一些实施例中，调节交联剂的溶液或悬浮液的pH可以包括将pH调节到约5.5至约8.5。在一些实施例中，在施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物期间(例如，当使用双注射器设备时)，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以由以下组分制备：(i)活性剂(例如地塞米松)的固体形式(例如粉末)，(ii)稀释剂溶液，(iii)官能聚合物(例如NHS-PEG)的固体形式(例如粉末)，和(iv)交联剂(例如三赖氨酸)的溶液。在一些实施例中，延长释放耳用组合物可以通过以下来制备：(a)将活性剂(例如地塞米松)与交联剂(例如三赖氨酸)的溶液组合以形成第一混合物，(b)将官能聚合物与稀释剂溶液组合以形成第二混合物，和(c)将第一混合物与第二混合物组合。
在一些实施例中，活性剂可以被包括在官能聚合物的溶液或悬浮液中；被包括在交联剂的溶液或悬浮液中；以单独的溶液或悬浮液形式提供；作为单独的固体(例如干粉)提供；作为固体(例如干粉)提供并与官能聚合物组合(例如，在形成官能聚合物的溶液或悬浮液之前)、作为固体(例如干粉)提供并与交联剂组合(例如，在形成交联剂的溶液或悬浮液之前)或其组合。在其中活性剂以单独的溶液、悬浮液或作为固体(例如干粉)提供的一些实施例中，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合可以进一步包括将活性剂的溶液、悬浮液或固体形式(例如干粉)组合。
在一些实施例中，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合发生在制备官能聚合物的溶液或悬浮液之后少于60分钟(例如，少于50分钟、少于40分钟、少于30分钟、少于20分钟或少于10分钟)。
本文还提供了施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物的方法。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)制备聚合物组合物或延长释放组合物，例如通过本文所述的任何方法，和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。
在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合来制备聚合物组合物或延长释放耳用组合物，和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合来制备聚合物组合物或延长释放耳用组合物，使得所述组合具有约5.5至约8.5的pH，和(ii)将所述聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物的制备发生在施用期间，例如，当使用包括官能聚合物和交联剂的单独储器的双注射器设备时。
在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过以下来制备聚合物组合物或延长释放耳用组合物:(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，(b)制备交联剂的溶液或悬浮液，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合；和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过以下来制备聚合物组合物或延长释放组合物:(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，和(b)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合；和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过以下来制备聚合物组合物或延长释放组合物：(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，(b)改变交联剂的溶液或悬浮液的pH，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合；和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。
在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过以下来制备聚合物组合物或延长释放耳用组合物：(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，和(b)将交联剂的溶液或悬浮液与官能聚合物的溶液或悬浮液组合；和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。在一些实施例中，聚合物组合物或延长释放耳用组合物可以通过以下来施用：(i)通过以下来制备聚合物组合物或延长释放组合物：(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，(b)改变官能聚合物的溶液或悬浮液的pH，和(c)将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合；和(ii)将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者。
在施用聚合物组合物或延长释放耳用组合物的一些实施例中，活性剂可以被包括在官能聚合物的溶液或悬浮液中；被包括在交联剂的溶液或悬浮液中；以单独的溶液或悬浮液的形式提供；作为单独的固体(例如干粉)提供；或者作为与官能聚合物组合的固体(例如干粉)(例如在形成官能聚合物的溶液或悬浮液之前)或其组合提供。在其中活性剂以单独的溶液、悬浮液或作为固体(例如干粉)提供的一些实施例中，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合可以进一步包括将活性剂的溶液、悬浮液或固体形式(例如干粉)组合。
在一些实施例中，将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合发生在制备官能聚合物的溶液或悬浮液之后少于60分钟(例如，少于50分钟、少于40分钟、少于30分钟、少于20分钟或少于10分钟)。在一些实施例中，步骤(ii)在将官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合后少于10分钟(例如，少于9分钟、少于8分钟、少于7分钟、少于6分钟、少于5分钟、少于4分钟、少于3分钟、少于2分钟或少于1分钟)发生。
在由于交联剂的存在而导致固有胶凝化的情况下，控制化学交联和施用的时间可能很重要。应当理解，步骤(ii)的时间与如上述的延长释放耳用组合物或聚合物组合物的胶凝时间有关。通常，步骤(ii)的时间是使得延长释放耳用组合物或聚合物组合物的施用还不是凝胶。
在一些实施例中，胶凝化可以在施用之前、期间或之后在施加外部因素(例如光或其他外部能量)时引发。在一些实施例中，可以将聚合物组合物或延长释放耳用组合物施用于受试者，然后引发交联反应。
可以将延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的中耳，例如通过经鼓室注射。在一些实施例中，通过经鼓室注射在圆窗膜上或在圆窗膜附近施用延长释放耳用组合物。在一些实施例中，延长释放耳用组合物也可以通过经由耳后切口和外科手术操作进入圆窗或耳蜗窗嵴区域或其附近而在圆窗或耳蜗窗嵴上或其附近施用。在一些实施例中，当施用于受试者的耳朵时，延长释放耳用组合物不吞没任何听小骨。在一些实施例中，当施用于受试者的耳朵时，延长释放耳用组合物不接触任何听小骨。
在一些情况下，施用可以包括使用注射器和小直径针(例如，23G至30G或更小)，其中针穿过鼓膜插入并被引导至圆窗或耳蜗窗嵴的区域。然后将该组合物沉积在圆窗或耳蜗窗嵴上或附近。在一些实施例中，当被施用时，延长释放耳用组合物是液体。在一些实施例中，在施用之前，延长释放耳用组合物不暴露于高于约26℃的温度。在一些实施例中，在施用期间，延长释放耳用组合物具有约20℃至约25℃的温度。
在一些实施例中，延长释放耳用组合物也可以通过注射、内耳区室的直接滴注或灌注、或在包含内耳开窗术(cochleostomy)、迷路切开术(labyrinthotomy)、乳突切除术(mastoidectomy)、镫骨切除术(stapedectomy)或内淋巴球囊切开术(endolymphaticsacculotomy)的外科手术中被施用到鼓室中或施加到鼓膜上或施加到耳道上或耳道中。
在一些实施例中，施用可以包括施用治疗有效剂量。在一些实施例中，施用可以包括施用预防有效剂量。在一些实施例中，施用可以包括施用约5至约500微升(例如，约5μL至约400μL、约5μL至约300μL、约5μL至约200μL、约5μL至约100μL、约5μL至约50μL、约5μL至约25μL、约5μL至约10μL、约10μL至约500μL、约25μL至约500μL、约50μL至约500μL、约100μL至约500μL、约200μL至约500μL、约300μL至约500μL、约400μL至约500μL、约25μL至约300μL、约50μL至约200μL、约30μL至约70μL或约40μL至约60μL)。在一些实施例中，施用可以包括施用约50μL、约100μL或约200μL。
在一些实施例中，施用可以包括施用在50μL体积的包含按重量计6％地塞米松的延长释放耳用组合物中的3mg地塞米松。
在一些情况下，由如本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物形成的凝胶在施用于受试者的耳后1天内可以表现出小于约100％(例如，小于约80％、小于约70％、小于约60％、小于约50％或小于约40％)的溶胀。
在一些实施例中，施用可以包括使用特定的仪器，例如双注射器注射器下游的直列式混合器(有时也被称为静态混合器)，其在一些情况下混合组分并最小化初始混合与施用至靶标部位之间的时间。在一些实施例中，为其它粘合剂或密封剂体系如纤维蛋白胶或密封剂应用开发的用于进行原位胶凝化的方法和装置可以与本文所述的聚合物组合物或延长释放耳用组合物一起使用。参见，例如，美国专利号4,874,368；4,631,055；4,735,616；4,359,049；4,978,336；5,116,315；4,902,281；4,932,942；PCT WO 91/09641；和R.A.Tange，“手术医学中的“纤维蛋白密封剂”：耳鼻喉科(“Fibrin Sealant”in OperativeMedicine：Otolaryngology)”，第1卷(1986)，其每一个都通过引用以其整体并入本文。
在一些实施例中，在施用如本文提供的聚合物组合物或延长释放耳用组合物之前，可以将麻醉剂施加到受试者的耳鼓和/或耳道。例如，在施用之前，麻醉剂(例如，
Figure BDA0003939295410000581
乳膏)可以在施用前约5分钟至约1小时(例如，约5分钟至约50分钟、约5分钟至约40分钟、约5分钟至约30分钟、约5分钟至约20分钟、约5分钟至约10分钟、约10分钟至约1小时、约20分钟至约1小时、约30分钟至约1小时、约40分钟至约1小时或约50分钟至约1小时)施加至受试者的耳鼓和/或耳道。在一些实施例中，在施用之前，将麻醉剂(例如，
Figure BDA0003939295410000582
乳膏)可以在施用前立即施加至受试者的耳鼓和/或耳道。
在一些实施例中，施用可以例如使用内窥镜来可视化。不受任何特定理论的束缚，据信可视化可以有助于将延长释放耳用组合物放置在所需的位置(例如，圆窗膜上)和/或有助于避免将延长释放耳用组合物放置在不期望的位置(例如，吞没一个或多个听小骨)。
在一些实施例中，可以以单剂量或多剂量施用延长释放耳用组合物。某些因素可能会影响有效治疗或预防病症所需的剂量，包含但不限于疾病或病症的严重程度、先前的预防措施、受试者的一般健康和/或年龄，以及存在的其他疾病。还应当理解，用于预防的延长释放耳用组合物的有效剂量可以在特定预防的过程中增加或减少。剂量的变化可能会导致并从测定的结果中变得明显。
在施用之前、期间或之后，聚合物组合物或延长释放耳用组合物实现从液态到凝胶态的转变。在一些实施例中，凝胶在约5天至约6个月(例如，约5天至约1周、约5天至约2周、约5天至约3周、约5天至约1个月、约5天至约2个月、约5天至约3个月、约5天至约4个月、约5天至约5个月、约1周至约6个月、约2周至约6个月、约3周至约6个月、约1个月至约6个月、约2个月至约6个月、约3个月至约6个月、约4个月至约6个月、约5个月至约6个月、约2周至约2个月或约1个月至约3个月)的时间段内提供治疗有效浓度的活性剂。在一些实施例中，凝胶在至少1周(例如，至少约2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月)内提供治疗有效浓度的活性剂。
在一些情况下，待治疗的受试者是正在经历可以导致听力损失的治疗的成年人或儿童，所述治疗例如化疗、由于衰老导致的听力损失、由于重复暴露于嘈杂的噪音导致的听力损失，以及其它损害内耳中的纤毛的病症，例如自身免疫性病症、感染、过量的液体或压力。
在一些实施例中，待治疗的受试者是成年人。在一些实施例中，待治疗的受试者被诊断患有单侧明确的梅尼埃病，该梅尼埃病由Bárány学会或美国耳鼻喉科-头颈外科学会(AAO-HNS)的分类委员会定义。在一些实施例中，在筛选施用延长释放耳用组合物之前的一个月中，待治疗的受试者已报告两次或更多次确定性眩晕发作(持续20分钟或更长时间)。在一些实施例中，受试者已记录了获得性不对称感觉神经性听力损失，如由患者所报告的或由听力测定测试(audiometric testing)所记录的。在一些实施例中，如果受试者患有进行性慢性炎性或感染性中耳疾病，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者在耳、窦或上呼吸系统中具有活性感染，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者当前患有鼓膜穿孔，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有活动性良性阵发性位置性眩晕(BPPV)症状，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有上耳道裂开史，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有跌落发作史(Tumarkin耳石危象)，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有前庭偏头痛病史，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有内淋巴囊手术史，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有中耳手术史(除了鼓室造口管外)，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者患有影响听觉或前庭系统的耳蜗后病变(例如，听神经瘤、多发性硬化症)，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有会妨碍IT注射的耳道或鼓膜的显著异常，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，如果受试者具有免疫缺陷疾病或自身免疫性疾病史，则受试者不施用如本文提供的延长释放耳用组合物。
因此，本文提供了治疗患有耳部疾病或病症的受试者的方法。在一些实施例中，本文提供了治疗患有耳部疾病或病症的受试者的方法，其包含施用治疗有效剂量的如本文所述的延长释放耳用组合物。在一些实施例中，本文提供了治疗患有耳部疾病或病症的受试者的方法，其包含将治疗有效剂量的如本文所述的延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。在一些实施例中，本文提供了治疗患有耳部疾病或病症的受试者的方法，其包含(i)鉴定受试者患有耳部疾病或病症，和(ii)将治疗有效剂量的如本文所述的延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。在一些实施例中，耳部疾病或病症可以选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组。
此外，本文提供了治疗梅尼埃病的方法，该方法包含向有需要的受试者的耳朵施用治疗有效剂量的如本文所述的延长释放耳用组合物。还提供了治疗梅尼埃病的方法，该方法包含(i)鉴定受试者患有梅尼埃病；和(ii)将治疗有效剂量的如本文所述的延长释放耳用组合物施用于受试者的受影响的耳朵。
在一些实施例中，在施用延长释放耳用组合物之前，评估受试者。例如，在施用延长释放耳用组合物之前，可以评估受试者的内淋巴积水、外淋巴增强或两者的基线水平，例如如通过延迟静脉内钆对比增强的3T MRI所评估的。在一些情况下，评估受试者的内淋巴积水的基线水平。在一些实施例中，评估受试者的外淋巴增强的基线水平。在一些实施例中，评估受试者的内淋巴积水和外淋巴增强的基线水平。在一些实施例中，在施用延长释放耳用组合物之前，可以评估受试者的眩晕发作的严重程度和/或频率的基线水平。在一些实施例中，在施用延长释放耳用组合物之前，可以针对基线评估受试者的听力(例如，使用听力测定评估)。在一些实施例中，在施用延长释放耳用组合物之前，可以评估受试者的基线眩晕障碍量表(DHI)评分和/或耳鸣障碍量表(THI)评分。在一些情况下，在施用延长释放耳用组合物的同一天对受试者进行评估。在一些情况下，在施用延长释放耳用组合物前约1天至约6周(例如，约1天至约1周、约1天至约2周、约1天至约3周、约1天至约4周、约1天至约5周、约1周至约6周、约3周至约6周、约4周至约6周、约5周至约6周或约3周至约5周)对受试者进行评估。
在一些实施例中，在施用延长释放耳用组合物之后对受试者进行评估。例如，在施用延长释放耳用组合物后，可以评估受试者的内淋巴积水、外淋巴增强或两者的水平，例如如通过延迟静脉内钆对比增强的3T MRI所评估的。在一些情况下，评估受试者的内淋巴积水的水平。在一些实施例中，评估受试者的外淋巴增强的水平。在一些实施例中，评估受试者的内淋巴积水和外淋巴增强的水平。在一些实施例中，可以评估受试者的眩晕发作的严重程度和/或频率的水平。在一些实施例中，可以评估受试者的听力(例如，使用听力测定评估)。在一些实施例中，可以评估受试者的眩晕障碍量表(DHI)评分和/或耳鸣障碍量表(THI)评分。在一些情况下，在施用延长释放耳用组合物之后约1周至约4周(例如，约1周至约2周、约1周至约3周、约2周至约4周、或约3周至约4周)对受试者进行评估。在一些情况下，在施用延长释放耳用组合物约2周后评估受试者。
在一些实施例中，受试者在施用本文提供的延长释放耳用组合物后在一项或多项评价中表现出改善。例如，在一些实施例中，受试者可以表现出内淋巴积水、外淋巴增强或两者的水平的改善，例如，如通过延迟静脉内钆对比增强的3T MRI评估的。在一些情况下，受试者可以表现出内淋巴积水水平的改善，例如，与基线水平相比。在一些实施例中，受试者可以表现出例如与基线水平相比在外淋巴增强水平方面的改善。在一些实施例中，例如与基线水平相比，受试者可以表现出内淋巴积水和外淋巴增强水平的改善。在一些实施例中，受试者可以表现出眩晕发作的严重程度和/或频率的改善，例如，与基线水平相比。在一些实施例中，例如与基线水平相比，受试者可以表现出听力改善(例如，使用听力评估)。在一些实施例中，例如与基线评分相比，受试者可以表现出眩晕障碍库存(DHI)评分和/或耳鸣障碍库存(THI)评分的改善。
在一些实施例中，眩晕发作可以通过受试者保持眩晕发作的严重程度和频率的每日眩晕日记来评估。在一些实施例中，可以将施用后平均眩晕严重程度和频率(例如，在前4周内平均)与基线眩晕严重程度和频率(例如，在施用前4周内平均)进行比较。
在一些实施例中，听力可以通过听力测定检查来评估。在一些实施例中，听力可以使用125、250、500、1000、2000、4000和8000Hz的纯音听力测定和/或单词识别分数来评估。在一些实施例中，可以使用描述性统计来表征通过在125、250、500、1000、2000、4000和8000Hz的纯音听力测定和单词识别分数的听力的自基线的变化。
在一些实施例中，患者DHI和THI评分从基线到施用后评价(例如，在约第29天和/或约第85天)的变化可以使用描述性统计来评价和表征。
对于接受MRI的受试者，可以在施用后(例如，在约第15天)评估如通过延迟静脉内钆对比增强的3T MRI扫描评估的内淋巴积水和外淋巴增强自基线的变化。
也可以评估聚合物组合物或延长释放耳用组合物在施用后(例如，在约第15天)在受试者的中耳中的分布的量和程度。
IV.耳部疾病和病症
具有潜在微血管病因的耳部病症，包含梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失以及类似的耳病症，除了某些症状外，没有治疗方法也无法治愈。
梅尼埃病是一种慢性、不可治愈的内耳病症，伴有影响听力和平衡的复发性虚弱症状。它是以法国医生Prosper Ménière的名字命名的，Prosper Ménière在1861年首次发现并描述了这种医学病状的症状。研究人员不确定是什么原因导致流体在内耳积中的积累，其导致MD。一些人认为这与血管功能不全有关，另一些人认为这可能是由于自身免疫性病状，病毒感染，过敏反应或疾病可能始于创伤。MD似乎具有遗传组分，因此基因突变可能与内耳流体的调节有关。
自身免疫性内耳疾病是一种罕见的病症，出现在成人和儿童中，由免疫系统应答引起。内耳可能是免疫应答的直接靶标，但它可能因循环免疫复合物的沉积或全身免疫介导的疾病而受到额外损害。免疫介导的内耳疾病的临床表现显示出进行性双侧和不对称的SNHL概况。耳蜗症状经常与前庭病症相关联。在约50％的AIED患者中，听力损失还与前庭症状(例如失衡和运动不耐受、共济失调和位置性或发作性眩晕)相关联。
感觉神经性听力损失是由于耳蜗有效地将压力波转换为神经信号传导的能力受损。SNHL通常与暴露于嘈杂的噪音、衰老、头部创伤、暴露于耳毒性药物、感染、自身免疫性疾病、梅尼埃病、遗传突变和听神经的肿瘤相关联。
噪音引起的听力损失是由暴露于响亮和/或持久的声音引起的。听力损失可以是由于长时间暴露于嘈杂的噪音(例如重型机械、嘈杂的音乐、飞机或枪声)造成的。长时间、重复或脉冲暴露于85分贝或以上的声音会导致听力损失。NIHL对毛细胞和/或听神经造成损害。
MD、AIED、SNHL、NIHL和其他耳部病症的症状包括眩晕、听力损失、耳鸣(耳鸣)和耳压。眩晕可能导致严重的恶心和失衡。听力损失可能会成为永久性的。
除了一些症状外，没有治疗方法，也无法治愈。晕车或恶心的药物可能有助于控制症状。
本公开还提供了使用酪氨酸激酶抑制剂(例如，VEGF抑制剂)治疗耳部疾病和病症的方法。因此，本文提供了一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，该方法包含鉴定受试者患有耳部疾病或病症，以及向受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
耳部疾病和病症的非限制性实例包括梅尼埃病、自身免疫性内耳疾病(AIED)、感觉神经性听力损失(例如，突发性感觉神经性听力损失或与糖尿病相关的感觉神经性听力损失)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤和由于化疗引起的听力损失。
在一些情况下，酪氨酸激酶抑制剂可以是VEGF抑制剂(例如，本文所述的任何VEGF抑制剂。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂以足以减少受影响的耳朵中的积水和淋巴功能障碍的量施用。
可以以任何合适的形式或通过任何合适的途径来施用酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂可以全身施用。在一些实施例中，酪氨酸激酶抑制剂可以局部施用(例如，施用于中耳或内耳，例如，通过经鼓室注射)。在一些情况下，可以以水凝胶的形式提供酪氨酸激酶抑制剂。美在国专利第9,066,865号和第10,561,736号中提供了水凝胶的非限制性实例，其每一个都通过引用以其整体并入本文。作为另一个实例，酪氨酸激酶抑制剂可以以本文所述的任何延长释放耳用组合物的形式提供。
示例性的实施例
实施例1是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。
实施例2是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约10秒至约30分钟的胶凝时间。
实施例3是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少5天的停留时间。
实施例4是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且所述凝胶在37℃下具有至少5天的胶凝持续时间。
实施例5是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述聚合物组合物具有约5.5至约8.5的pH，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例6是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续1天后溶胀小于100％。
实施例7是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物的量，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶是弹性的。
实施例8是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶是粘膜粘附性的。
实施例9是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例10是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。
实施例11是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约10秒至约30分钟的胶凝时间。
实施例12是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少5天的停留时间。
实施例13是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且所述凝胶在37℃下具有至少5天的胶凝持续时间。
实施例14是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中所述聚合物组合物具有约5.5至约8.5的pH，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例15是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持1天后溶胀小于100％。
实施例16是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物的量，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶是弹性的。
实施例17是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述凝胶是粘膜粘附性的。
实施例18是一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约10％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中所述第一官能团和所述第二官能团以约1.2:0.8至约0.8:1.2的比率存在，并且
其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例19是实施例9至16中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约1％至约10％的交联剂。
实施例20是实施例9至16中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约1％至约5％的交联剂。
实施例21为根据实施例2至9或11至20中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。
实施例22是实施例1、2、4至11或13至21中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少5天的停留时间。
实施例23是实施例1至3、5至12或14至22中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在37℃下具有至少5天的胶凝持续时间。
实施例24为根据实施例1至4、6至13或15至23中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约5.5至约8.5的pH。
实施例25是实施例1至5、7至14或15至24中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续1天后溶胀小于100％。
实施例26是实施例1至6、8至15或17至25中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶是弹性的。
实施例27是实施例1至7、9至16或18至26中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶是粘膜粘附性的。
实施例28为根据实施例1至8、10至17或19至27中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度。
实施例29为根据实施例1至28中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约6％至约12％的所述官能聚合物。
实施例30是实施例1至28中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约7％至约10％的所述官能聚合物。
实施例31是实施例1至28中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约8.3％的所述官能聚合物。
实施例32为根据实施例1至28中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约8％至约12％的所述官能聚合物。
实施例33为根据实施例1至28中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约10％的所述官能聚合物。
实施例34是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.5％的所述交联剂。
实施例35是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.1％至约0.3％的所述交联剂。
实施例36是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.2％的所述交联剂。
实施例37是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.2％至约0.6％的所述交联剂。
实施例38是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.3％至约0.5％的所述交联剂。
实施例39是实施例1至33中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.4％至约0.6％的所述交联剂。
实施例40是实施例1至39中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约5分钟至约20分钟的胶凝时间。
实施例41是实施例1至40中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约4分钟至约12分钟的胶凝时间。
实施例42是实施例1至41中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约8分钟至约12分钟的胶凝时间。
实施例43是实施例1、2至11或13至42中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约10秒至约30分钟的胶凝时间。
实施例44是实施例1至43中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约1分钟至约4分钟的胶凝时间。
实施例45是实施例1至44中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约2分钟至约8分钟的胶凝时间。
实施例46是实施例1至45中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少1周的停留时间。
实施例47是实施例1至46中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少2周的停留时间。
实施例48是实施例1至47中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少1个月的停留时间。
实施例49是实施例1至48中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少2个月的停留时间。
实施例50是实施例1至49中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在50℃下在PBS中具有约5天至约30天的再吸收时间。
实施例51是实施例1至50中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在50℃下在PBS中具有约7天至约15天的再吸收时间。
实施例52是实施例1至51中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约6.4至约7.4的pH。
实施例53是实施例1至52中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约6.0和7.0的pH。
实施例54是实施例1至53中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约5.5至约8.0的pH。
实施例55是实施例1至54中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续1天后溶胀小于80％。
实施例56是实施例1至55中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续1天后溶胀小于60％。
实施例57是实施例1至56中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约100mPa·s的粘度。
实施例58是实施例1至57中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约50mPa·s的粘度。
实施例59是实施例1至58中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶对内淋巴或外淋巴是低渗的。
实施例60是实施例1至58中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶对内淋巴或外淋巴是等渗的。
实施例61是实施例1至58中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶对内淋巴或外淋巴是高渗的。
实施例62是实施例1至61中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约300mOsmol/kg至约600mOsmol/kg的摩尔渗透压质量浓度。
实施例63是实施例1至62中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约6.0至约7.7的pH。
实施例64是实施例1至63中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约6.6至约6.8的pH。
实施例65是实施例1至64中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约6.0至约6.5的pH。
实施例66是实施例1至9或21至65中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团与所述第二官能团的比率为约0.8:1.2至约1.2:0.8。
实施例67是实施例1至66中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团与所述第二官能团的比率为约0.9:1至约1:0.9。
实施例68是实施例1至67中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团与所述第二官能团的比率为约1:1。
实施例69是实施例1至68中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述官能聚合物为改性的PEG。
实施例70是实施例1至69中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团包括亲电试剂并且所述第二官能团包括亲核试剂。
实施例71是实施例1至70中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团包括琥珀酰亚胺酯。
实施例72是实施例1至70中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述官能团选自由琥珀酰亚胺基琥珀酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酸酯、琥珀酰亚胺基己二酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酰胺、琥珀酰亚胺基碳酸酯、琥珀酰亚胺基羧甲基酯或其组合组成的组。
实施例73是实施例1至72中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第二官能团包括伯胺。
实施例74是实施例1至73中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述官能聚合物为季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯。
实施例75是实施例1至74中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述交联剂包括聚赖氨酸或其盐。
实施例76是实施例1至75中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述交联剂包括三赖氨酸或其盐。
实施例77为根据实施例1至76中任一实施例所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团包括亲核试剂并且所述第二官能团包括亲电试剂。
实施例78是实施例77所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团包括伯胺。
实施例79是实施例77或实施例78所述的聚合物组合物，其中所述第二官能团包括琥珀酰亚胺酯。
实施例80是一种延长释放耳用组合物，其包括：
实施例1至79中任一实施例所述的聚合物组合物；和
活性剂。
实施例81是实施例80所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂选自由治疗剂、预防剂、诊断剂或可视化剂及其组合组成的组。
实施例82是实施例81所述的延长释放耳用组合物，其中所述治疗剂或预防剂选自由蛋白质、碳水化合物、核酸、小分子及其组合组成的组。
实施例83是实施例82所述的延长释放耳用组合物，其中所述蛋白质选自由酶、生长因子、抗体或其抗原结合片段以及它们的组合组成的组。
实施例84是实施例82或实施例83所述的延长释放耳用组合物，其中所述碳水化合物是糖胺聚糖。
实施例85是实施例82至84中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述核酸选自由反义寡核苷酸、适体、微小RNA、短干扰RNA、核酶及其组合组成的组。
实施例86是实施例82至85中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述小分子选自由抗生素、抗肿瘤剂、局部麻醉剂、类固醇、激素、抗凋亡剂、血管生成剂、抗血管生成剂、神经递质、精神活性药物、抗炎剂及其组合组成的组。
实施例84是实施例82至86中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述小分子是Apaf-1的抑制剂。
实施例88是实施例82至84中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂是酪氨酸激酶抑制剂。
实施例89是实施例80至88中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂为VEGF抑制剂。
实施例90是实施例89所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂选自由阿戈拉非尼、奥曲替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、卡博替尼、西地尼布、拉帕替尼、乐伐替尼、莫替沙尼、尼达尼布、帕唑帕尼、哌加他尼、瑞巴替尼、瑞戈非尼、司马沙尼、索拉非尼、舒尼替尼、妥拉尼布、替沃扎尼、凡德他尼及其组合组成的组。
实施例91是实施例89或实施例90所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂包括抗体或其抗原结合片段。
实施例92是实施例91所述的延长释放耳用组合物，其中所述抗体或其抗原结合片段选自由阿拉赛珠单抗、贝伐珠单抗、艾芦库单抗、雷莫芦单抗、雷珠单抗及其组合组成的组。
实施例93是实施例89至92中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂包括诱饵受体。
实施例94是实施例92所述的延长释放耳用组合物，其中所述诱饵受体是阿柏西普。
实施例95是实施例89至94中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂包括VEGFR的变构调节剂。
实施例96是实施例95所述的延长释放耳用组合物，其中所述变构调节剂是cyclotraxin B。
实施例97是实施例89至96中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少10倍。
实施例98是实施例89至97中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少20倍。
实施例99是实施例89至98中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少50倍。
实施例100是实施例88至99中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述酪氨酸激酶抑制剂或VEGF抑制剂以足以减轻受影响的耳朵中的积水和淋巴功能障碍的量存在。
实施例101是实施例82至100中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括抗炎剂。
实施例102是实施例82至101中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括类固醇。
实施例103是实施例102所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括糖皮质激素。
实施例104是实施例103所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括地塞米松。
实施例105是实施例80至101中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂不包括类固醇。
实施例106是实施例80至105中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括诊断剂或可视化剂。
实施例107是实施例106所述的延长释放耳用组合物，其中所述诊断剂或可视化剂选自由染料、荧光团、MRI造影剂及其组合组成的组。
实施例108是实施例80至107中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以微粒的形式存在于所述延长释放耳用组合物中。
实施例109是实施例80至108中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以纳米颗粒的形式存在于所述延长释放耳用组合物中。
实施例110是实施例80至109中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以按所述聚合物组合物的重量计约0.01％至约40％的量存在。
实施例111是实施例80至110中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以按所述聚合物组合物的重量计约0.1％至约20％的量存在。
实施例112是实施例80至111中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以按所述聚合物组合物的重量计约1％至约15％的量存在。
实施例113是实施例80至112中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其中当在37℃下针对过量的PBS平衡时，所述延长释放耳用组合物在约3周具有约30％至约50％的活性剂累积释放。
实施例114是实施例80至113中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括赋形剂。
实施例115是实施例114所述的延长释放耳用组合物，其中所述赋形剂选自由缓冲剂、张度剂、粘膜粘附剂、稳定剂、防腐剂、载体、渗透增强剂、稀释剂、分散剂、粘度调节剂、增溶剂、同渗浓度调节剂及其组合组成的组。
实施例116是一种延长释放耳用组合物，其包括：
约5％至约15％的季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯；
按重量计约0.05％至约0.6％的三赖氨酸或其盐；
按重量计约0.01％至约40％的地塞米松；和
水。
实施例117是一种延长释放耳用组合物，其包括：
约7％至约9％的季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯；
按重量计约0.1％至约0.3％的三赖氨酸；
按重量计约1％至约10％的地塞米松；和
水。
实施例118是一种延长释放耳用组合物，其包括：
约8.3％的季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯；
按重量计约0.2％的三赖氨酸或其盐；
按重量计约6％的地塞米松；和
水。
实施例119是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约0.01％至约3.0％的十水合硼酸钠；
按重量计约0.01％至约3.0％的磷酸钠；
按重量计约0.01％至约3.0％的磷酸；
约0％至约0.5％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0％至约0.01％的丁基化羟基甲苯。
实施例120是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约0.05％至约2.0％的十水合硼酸钠；
按重量计约0.05％至约2.0％的磷酸钠；
按重量计约0.05％至约2.0％的磷酸；
约0％至约0.05％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0％至约0.005％的丁基化羟基甲苯。
实施例121是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约1.2％的十水合硼酸钠；
按重量计约1.1％至约3.0％的磷酸钠；
按重量计约0.9％至约3.0％的磷酸；
约0.01％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0.002％的丁基化羟基甲苯。
实施例122是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约0.01％至约6.0％的磷酸钠；
约0％至约0.5％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0％至约0.01％的丁基化羟基甲苯。
实施例123是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约0.05％至约6.0％的磷酸钠；
约0％至约0.05％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0％至约0.005％的丁基化羟基甲苯。
实施例124是实施例116至118中任一实施例所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约2.0％至约6.0％的磷酸钠；
约0.01％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0.002％的丁基化羟基甲苯。
实施例125是一种凝胶，其由实施例1至79中任一实施例所述的聚合物组合物或实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物形成。
实施例126是制造包括实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物的药物以用于治疗耳部疾病或病症。
实施例127是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
将官能聚合物的溶液或悬浮液(其中所述官能聚合物包括第一官能团)、交联剂的溶液或悬浮液(其中所述交联剂包括第二官能团)和活性剂组合以形成延长释放耳用组合物，使得所述官能聚合物以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.05％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，并且其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间发生交联反应以形成凝胶。
实施例128是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
(b)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；和
(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合以形成延长释放耳用组合物，使得所述官能聚合物以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.05％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例129是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；和
(b)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与交联剂的溶液或悬浮液组合，其中所述交联剂包括第二官能团，使得所述官能聚合物以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.05％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例130是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
(a)制备官能聚合物的溶液或悬浮液，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
(b)改变交联剂溶液或悬浮液的pH，其中所述交联剂包括第二官能团；和
(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例131是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；和
(b)将所述交联剂的溶液或悬浮液与官能聚合物的溶液或悬浮液组合，其中所述官能聚合物包括第一官能团，使得所述官能聚合物以按所述延长释放耳用组合物的重量计约5％至约15％的量存在，并且所述交联剂以按所述延长释放耳用组合物的重量计约0.05％至约0.6％的量存在于所述延长释放耳用组合物中，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例132是一种制备延长释放耳用组合物的方法，所述方法包括：
(a)制备交联剂的溶液或悬浮液，其中所述交联剂包括第二官能团；
(b)改变官能聚合物溶液或悬浮液的pH，其中所述官能聚合物包括第一官能团；和
(c)将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶。
实施例133是实施例127至132中任一实施例所述的方法，其中活性剂存在于所述官能聚合物的溶液或悬浮液中。
实施例134是实施例133所述的方法，其中在制备所述官能聚合物的溶液或悬浮液之前将所述活性剂与所述官能聚合物组合。
实施例135是实施例133所述的方法，其中将所述活性剂与所述官能聚合物的溶液或悬浮液组合。
实施例136是实施例127至135中任一实施例所述的方法，其中将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合包括将所述官能聚合物的溶液或悬浮液和所述交联剂的溶液或悬浮液与活性剂组合。
实施例137是实施例136所述的方法，其中所述活性剂作为固体提供。
实施例138是实施例136所述的方法，其中所述活性剂作为溶液或悬浮液提供。
实施例139是实施例127至138中任一实施例所述的方法，其中所述延长释放耳用组合物是实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物。
实施例140是一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
鉴定受试者患有耳部疾病或病症；并且
将治疗有效量的实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
实施例141是一种治疗有需要的受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
将治疗有效量的实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的耳朵。
实施例142是一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
(i)通过实施例127至139中任一实施例所述的方法来制备延长释放耳用组合物；和
(ii)将治疗有效量的所述延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
实施例143是一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
(i)鉴定受试者患有耳部疾病或病症；
(ii)通过实施例127至139中任一实施例所述的方法来制备延长释放耳用组合物；和
(iii)将治疗有效量的所述延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
实施例144是实施例140至125中任一实施例所述的方法，其中所述耳部疾病或病症选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组。
实施例145是实施例126所述的方法，其中所述感觉神经性听力损失是突发性感觉神经性听力损失。
实施例146是实施例126所述的方法，其中所述感觉神经性听力损失与糖尿病相关。
实施例147是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
将治疗有效量的实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
实施例148是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
(i)鉴定受试者患有梅尼埃病；
(ii)将治疗有效量的实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
实施例149是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
(i)通过实施例127至139中任一实施例所述的方法来制备延长释放耳用组合物；和
(ii)将治疗有效量的所述延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
实施例150是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
(i)鉴定受试者患有梅尼埃病；
(ii)通过实施例127至139中任一实施例所述的方法来制备延长释放耳用组合物；和
(iii)将治疗有效量的所述延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
实施例151是实施例140至150中任一实施例所述的方法，其中在将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合后少于10分钟进行所述施用。
实施例152是实施例140至151中任一实施例所述的方法，其中在将所述官能聚合物的溶液或悬浮液与所述交联剂的溶液或悬浮液组合后少于5分钟进行所述施用。
实施例153是实施例140至152中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用约5μL至约500μL的所述延长释放耳用组合物。
实施例154是实施例140至153中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用约50μL至约200μL的所述延长释放耳用组合物。
实施例155是实施例140至153中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用约40μL至约60μL的所述延长释放耳用组合物。
实施例156是实施例140至153中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用约50μL的所述延长释放耳用组合物。
实施例157是实施例140至156中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用使得所述延长释放耳用组合物与圆窗膜接触。
实施例158是实施例140至157中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用使得所述延长释放耳用组合物不吞没任何听小骨。
实施例159是实施例140至158中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括施用使得所述延长释放耳用组合物不接触任何听小骨。
实施例160是实施例140至159中任一实施例所述的方法，其中所述延长释放耳用组合物在所述施用期间为液体。
实施例161是实施例140至160中任一实施例所述的方法，其中所述延长释放耳用组合物在所述施用之前不暴露于高于约26℃的温度。
实施例162是实施例140至161中任一实施例所述的方法，其中所述延长释放耳用组合物在施用期间具有约20℃至约25℃的温度。
实施例163是实施例140至162中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括通过鼓膜注射。
实施例164是一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
鉴定受试者患有耳部疾病或病症；并且
向所述受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
实施例165是实施例164所述的方法，其中所述耳部疾病或病症选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组。
实施例166是实施例165所述的方法，其中所述感觉神经性听力损失是突发性感觉神经性听力损失。
实施例167是实施例165所述的方法，其中所述感觉神经性听力损失与糖尿病相关。
实施例168是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
(i)鉴定受试者患有梅尼埃病；和
(ii)向所述受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
实施例169是一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
向有需要的受试者施用治疗有效量的酪氨酸激酶抑制剂。
实施例170是实施例168至169中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括全身施用。
实施例171是实施例168至169中任一实施例所述的方法，其中所述施用包括向所述受试者的受影响的耳朵施用。
实施例172是实施例168至171中任一实施例所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂包括VEGF抑制剂。
实施例173是实施例172所述的方法，其中所述VEGF抑制剂选自由阿戈拉非尼、奥曲替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、卡博替尼、西地尼布、拉帕替尼、乐伐替尼、莫替沙尼、尼达尼布、帕唑帕尼、哌加他尼、瑞巴替尼、瑞戈非尼、司马沙尼、索拉非尼、舒尼替尼、妥拉尼布、替沃扎尼、凡德他尼及其组合组成的组。
实施例174是实施例172或实施例173所述的方法，其中所述VEGF抑制剂包括抗体或其抗原结合片段。
实施例175是实施例174所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段选自由阿拉赛珠单抗、贝伐珠单抗、艾芦库单抗、雷莫芦单抗、雷珠单抗及其组合组成的组。
实施例176是实施例172至175中任一实施例所述的方法，其中所述VEGF抑制剂包括诱饵受体。
实施例177是实施例176所述的方法，其中所述诱饵受体是阿柏西普。
实施例178是实施例172至177中任一实施例所述的方法，其中所述VEGF抑制剂包括VEGFR的变构调节剂。
实施例179是实施例178所述的方法，其中VEGFR的所述变构调节剂是cyclotraxinB。
实施例180是实施例172至179中任一实施例所述的方法，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少10倍。
实施例181是实施例172至180中任一实施例所述的方法，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少20倍。
实施例182是实施例172至181中任一实施例所述的方法，其中所述VEGF抑制剂对VEGFR2的选择性是相对于另一种VEGFR的至少50倍。
实施例183是实施例168至182中任一实施例所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂的量足以减轻受影响的耳朵中的积水和淋巴功能障碍。
实施例184是实施例168至169或171至183中任一实施例所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂以实施例80至124中任一实施例所述的延长释放耳用组合物的形式提供。
通过参考以下非限制性实例将进一步理解本发明。
实例
实例1：pH对PEG-三赖氨酸聚合物的胶凝时间的影响
材料与方法
在混合等体积的三赖氨酸胺溶液和PEG酯溶液后，商业PEG-三赖氨酸聚合物系统(COVIDIEN Ref DS-D-5005)在大约3秒内形成凝胶。为了减慢交联反应以便有时间注射到中耳中，如表1中所述，通过添加HCl(1N HCl，Millipore)来改变三赖氨酸溶液的pH。PEG酯溶液按照包装插页的说明书制备，并在重构后一小时内使用。在室温下通过监测搅拌棒旋转停止的时间来测量胶凝时间。
结果
如表1所示，将PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸溶液从pH 10调节至pH 8.4成功地将胶凝时间从3秒减慢至约1分钟。在早期的筛选研究中，用进一步调节至pH 6.8的三赖氨酸溶液制备的样品在观察25分钟后未形成凝胶。
表1：pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物的胶凝时间和降解
Figure BDA0003939295410000831
实例2：pH对PEG-三赖氨酸聚合物胶凝持续时间的影响
材料与方法
监测来自实例1中胶凝时间测量的小瓶以观察凝胶何时降解并变成液体。将带有搅拌棒的小瓶在室温下倒置保存，并记录发现样品为液体时的时间，如表1所示。
结果
未改性的PEG-三赖氨酸聚合物(即pH 10的三赖氨酸)在室温下密封在玻璃小瓶中储存1.5天后为液体，而用调节至pH 8.4的三赖氨酸制备的样品在超过三个月后仍为凝胶。
除了影响交联形成反应外，pH还影响水解降解反应。用于注射到中耳的优选的制剂具有在6和8.4之间，更优选在6.5和8之间的三赖氨酸溶液pH。从组织生物相容性的角度来看，这些pH值也是有利的。
实例3：药物颗粒浓度对胶凝时间的影响
材料与方法
如实例1所述，用1N HCl对PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸溶液进行pH调节。然后将微粉化的地塞米松(Dex；Spectrum Chemical DE121)添加到经pH调节的三赖氨酸溶液中并涡旋。然后将一百微升的经pH调节的三赖氨酸药物悬浮液添加到玻璃小瓶中的100微升的PEG-三赖氨酸聚合物PEG溶液中，用于胶凝时间的搅拌棒测试。记录添加后搅拌棒停止旋转的时间。
结果
虽然将HCl添加到三赖氨酸聚合物溶液中稀释了三赖氨酸并且当添加到PEG-三赖氨酸聚合物PEG溶液中时产生小于1:1的化学计量比，但药物颗粒的添加进一步稀释和降低了化学计量比。
表2：含有至多6wt％地塞米松的经pH调节的三赖氨酸的胶凝时间
Figure BDA0003939295410000841
如表2所示，在pH 8.4的改性的三赖氨酸中原始三赖氨酸溶液的级分含有85％的原始三赖氨酸溶液，并且添加12wt％的地塞米松将原始三赖氨酸溶液的量降低至75％。
还如表2所示，向pH 8.4的三赖氨酸溶液中添加至多12wt％的地塞米松对通过搅拌棒测试测量的胶凝时间没有显著影响。
实例4：0至6wt％地塞米松在pH改性的PEG-三赖氨酸聚合物中的药物释放和侵蚀测试
材料与方法
使用在插入物(具有0.4μm孔聚碳酸酯膜的CORNING
Figure BDA0003939295410000842
3414插入物)中的200μL的凝胶样品进行药物释放和凝胶侵蚀的体外测试。将插入物浸没在37℃的培养箱中的45mL的受体液体(pH 7.4PBS,
Figure BDA0003939295410000843
P5368)中，以模拟药物向中耳中的潜在液体的递送。选择大的受体体积以保持药物浓度低(即下沉条件)，使得受体溶液的饱和不限制药物释放速率。该测试测量了测试配置对PBS的最大药物释放速率：直接暴露于PBS的0.33cm2面积和药物通过具有0.33cm2面积的膜释放。此外，通过重量法来监测溶胀和侵蚀。
如实例3中所述，使用经pH调节的三赖氨酸溶液和0、1wt％、3wt％和6wt％地塞米松，以一式三份制备PEG-三赖氨酸聚合物样品。将这两种组分在微量离心管中组合，并在将等分试样分配到每个插入物中之前通过涡旋混合。在研究开始时，将样品浸入受体溶液中并储存在37℃。定期地取出受体溶液的样品并测定药物浓度以确定药物释放。在不超过9天的间隔内，样品也被移动到新的受体溶液的小瓶中。在取样或移动插入物之前，将受体小瓶手动倒置几次以确保均匀的受体流体。
在用实验室组织去除多余的液体后定期记录样品重量。溶胀百分比被计算为样品重量的变化除以初始样品重量。初始样品重量反映溶胀和初始交联度。
结果
随着研究的进行，样品重量受到由于通过水解的降解引起的变化的影响。随着最初含90％水的凝胶由于与受体液体接触而吸水，样品重量首次增加。随着凝胶因较少的交联而降解和溶胀，样品的重量继续增加，而凝胶侵蚀有助于重量的减少。最终，凝胶完全侵蚀并溶解到受体流体中。随着凝胶的侵蚀，如果插入物被定向在其侧面上，并且在手动混合过程期间，在将插入物移动到新的小瓶之前，剩余的固体药物颗粒倾向于沉降并流出插入物。
图2A中的结果显示，第4天的样品具有64％至95％的初始溶胀，并且这些值并不强烈地依赖于地塞米松的量。所有十二个插入物都含有凝胶持续至少15天。到第19天，四个样品因严重侵蚀而具有重量损失。另外的评估表明，具有较短的胶凝持续时间的样品似乎与PEG溶液的适用期(自PEG重构后的时间)相关，而不是与地塞米松含量相关；例如，自PEG重构以来具有较长时间的样品具有较少的交联并且更容易降解(参见例如实例7)。
从含有地塞米松的样品中的药物释放在图2B中示出。到第15天，1％ Dex样品的药物完全耗尽，而3％和6％凝胶分别为具有48％和30％的累积释放。一旦凝胶已经被降解为流体稠度，剩余的药物颗粒就沉降并从插入物扩散到受体流体中。这导致更大量的药物释放到受体流体中，如在第19天6％ Dex样品之一的药物释放增加所证明的。
透明凝胶相对于混浊凝胶的观察结果与测得的药物释放的量一致。1％ Dex样品最初主要在直接暴露于PBS的表面具有透明凝胶，而在膜表面侧则较少。最终在这些样品中没有凝胶的混浊区域。在另一个极端情况下，在6％ Dex样品的PBS暴露表面上仅观察到少量透明凝胶。
实例5：0至6wt％地塞米松在pH改性的PEG-三赖氨酸聚合物中的组织粘附
材料与方法
通过将样品应用于生火鸡胸肉，对组织的粘附性进行定性评估。在实例4中制备样品的同时，用移液管将剩余的材料吸移到火鸡肉的表面上，并在顶部施加小木棒。在胶凝时间几分钟后，通过拉动木棒来评估粘附性。
使用在调节至pH 8.4的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸中具有0、1wt％、3wt％和6wt％的最终地塞米松含量的样品以一式三份进行测试。
结果
与0和1wt％的Dex样品相比，发现3wt％和6wt％的Dex样品具有更好的粘附性。此外，具有较高的药物含量的凝胶具有更好的内聚力，这表明药物颗粒可以改善凝胶的机械性能，类似于可以增强粘弹性材料的填料颗粒。
实例6：较高的地塞米松含量PEG-三赖氨酸聚合物的胶凝时间
材料与方法
通过搅拌棒试验测试由在pH 8.4的经调节的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸中的20％地塞米松制备的PEG-三赖氨酸聚合物样品的胶凝时间。样品制备和测试程序与实例1中描述的相似。
结果
如表3所示，10％ Dex样品的胶凝时间略长于6％ Dex样品。
表3：含有6wt％或10wt％的地塞米松的经pH调节的三赖氨酸的胶凝时间
在最终凝胶中的地塞米松wt％ 6 10
在三赖氨酸溶液中的地塞米松wt％ 12 20
改性的三赖氨酸溶液的pH 8.4 8.4
pH改性的三赖氨酸药物悬浮液中原始三赖氨酸溶液的百分比 75％ 68％
胶凝时间(秒)，n＝3 73,62,66 74,82,83
通过添加1N HCl和地塞米松稀释的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸相当于经pH调节的三赖氨酸药物悬浮液中原始三赖氨酸的约68％。与1:1化学计量的相应偏差可能接近不足以形成稳健凝胶的水平。
实例7：pH改性的PEG-三赖氨酸聚合物中6wt％地塞米松的药物释放和侵蚀测试材 料与方法
如实例4所述进行药物释放和凝胶侵蚀的体外测试。样品由pH 8.4的调节的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸和12wt％的地塞米松制备，并且最终样品含有6wt％的地塞米松。使用带有静态混合器的混合连接器(Nordson
Figure BDA0003939295410000861
SA-3678)将pH改性的三赖氨酸药物悬浮液与PEG-三赖氨酸聚合物PEG溶液组合。每个混合连接器用于用样品填充六个插入物。
结果
每六个一组的数据由PEG溶液在使用时的适用期指定；即，自PEG重构以来的时间。
与适用期小于30分钟的组相比，适用期为67分钟的组具有更高的初始溶胀和更短的胶凝持续时间，如图3所示。图4所示的累积药物释放是非常可再现的，与适用期无关，直到在第17天在67分钟适用期组中发现凝胶被侵蚀。PEG-三赖氨酸聚合物包装插页指定在适用期为60分钟之前使用PEG溶液，以便在一些PEG降解之前发生交联。这些结果表明测试能够区分具有不同交联程度的样品。
由适用期少于30分钟的PEG制备的所有样品具有至少24天的胶凝持续时间，并且在下一个时间点被完全侵蚀。在37℃储存期间，将它们浸没在PBS受体溶液中。制剂的等分试样在没有PBS的情况下在37℃下储存在潮湿室内的封闭微量离心管中以避免脱水。用30分钟的适用期的PEG制备的两个样品在样品不与PBS接触时具有60天和超过80天的胶凝持续时间。
实例8：
Figure BDA0003939295410000871
407热敏凝胶中的6wt％地塞米松与相对于经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物化学交联凝胶的体外比较
材料与方法
通过汇集三赖氨酸溶液的五个PEG-三赖氨酸聚合物注射器来制备在pH 8.4的经调节的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸中的较大批次的12wt％地塞米松。三赖氨酸溶液的体积由溶液的重量和1.02g/mL的密度来计算。三赖氨酸溶液的体积乘以0.08以计算待添加的2N HCl的体积。在加入酸后确认等分试样的pH。然后加入地塞米松并将小瓶涡旋以产生在经pH调节的三赖氨酸中具有12wt％的药物悬浮液。
将经pH调节的PEG-三赖氨酸聚合物三赖氨酸与适用期不超过30分钟的PEG溶液组合。最终制剂具有6wt％的地塞米松。
制备含有6wt％的地塞米松的
Figure BDA0003939295410000879
407凝胶以用作比较物。由PBS pH7.4(Sigma-Aldrich)和注射用水(CalbioChem)来制备0.01M PBS的缓冲溶液。通过在搅拌下将
Figure BDA0003939295410000872
407(BASF)缓慢地添加到冷磷酸盐缓冲液中来制备16wt％的
Figure BDA0003939295410000873
407储备溶液。
将地塞米松添加到
Figure BDA0003939295410000874
407储备溶液的等分试样中，以在15wt％
Figure BDA0003939295410000875
407中产生6wt％的地塞米松；该最终制剂被表示为
Figure BDA0003939295410000878
407-Dex。进行了小瓶倒置测试以确认
Figure BDA0003939295410000876
407-Dex在置于30℃的培养箱中时会胶凝化。
结果
PEG-三赖氨酸聚合物-Dex相对于
Figure BDA0003939295410000877
407-Dex的侵蚀可视化
在部分地填充有样品并且然后填充有PBS的UV一次性微量比色池(microcuvettes)中观察到凝胶侵蚀。用250μL的样品填充重复的比色皿。在PEG-三赖氨酸聚合物的情况下，首先将两部分组合并在微量离心管中涡旋并转移到比色皿中。在加入2mL的预热至37℃的PBS之前，将比色皿置于37℃的培养箱中持续10分钟以用于进行胶凝化。用石蜡膜(parafilm)密封比色皿，然后在37℃下在水平位置中储存。
在加入PBS后，
Figure BDA0003939295410000881
407-Dex样品的表面立即开始侵蚀。随着
Figure BDA0003939295410000882
407溶解，药物颗粒沉降并流入比色皿的下部。
Figure BDA0003939295410000883
407-Dex样品在不到2小时内被完全侵蚀。
相比之下，在一天后，在pH改性的PEG-三赖氨酸聚合物中制备的PEG-三赖氨酸聚合物-Dex样品的外观几乎没有变化。即使在第14天，大部分凝胶仍然完好无损。
PEG-三赖氨酸聚合物-Dex相对于
Figure BDA0003939295410000884
407-Dex的药物释放
测量在pH 8.4的改性的PEG-三赖氨酸聚合物(PEG-三赖氨酸聚合物-Dex)中相对于在
Figure BDA0003939295410000885
407(407-Dex)中6wt％地塞米松的药物释放。如实例4所述，将插入物浸没在50mL的PBS受体流体中。将PEG-三赖氨酸聚合物-Dex的两个部分首先在微量离心管中组合并涡旋，然后转移到插入物中。在加入预热的PBS之前，将样品在37℃放置持续45分钟以形成凝胶。
在第一天内，所有407-Dex样品已完全侵蚀，并且剩余的药物颗粒已经从插入物中扩散出来并进入到受体小瓶中(图5A)。50mL的受体流体在1天内与药物固体平衡，因此释放的药物的量取决于受体流体的体积(50mL)。将可变量的游离固体药物与插入物一起被转移到下一小瓶的受体流体中，并且最终插入物中无药物颗粒。
相比之下，化学交联的PEG-三赖氨酸聚合物-Dex样品以恒定速率将药物递送到受体流体持续11天。随后，样品降解和侵蚀，其中药物颗粒扩散到受体流体中，并且导致更快地递送到受体流体。
PEG-三赖氨酸聚合物-Dex相对于407-Dex通过仿生膜的渗透
使用在两个纤维素层之间具有脂质层的仿生膜(PermeaPad屏障膜)来评估两种制剂的体外药物渗透。该方法利用平衡透析池(Harvard设备)来创建与膜接触的500uL的PTFE室。填充有480uL的制剂并在37℃下加热持续45分钟以胶凝化的供体细胞。然后将细胞浸入到含有75mL的PBS受体流体的瓶子中，并在37℃下储存。平衡透析池的受体侧保持开放，以使膜暴露于大量的受体流体。在手动混合后定期对受体流体进行取样，以便测量递送的药物的累积量。在该测试配置中，所有药物递送都是通过穿过仿生膜的渗透进行的，这不同于插入物中先前的药物释放配置，其允许药物直接释放到PBS中以及穿过插入物的多孔膜。通过仿生膜的药物渗透旨在更接近地模拟通过诸如圆窗膜的生物组织的药物渗透。
地塞米松的药物递送速率略高于泊洛沙姆凝胶(图5B)。不受任何特定理论的束缚，据信泊洛沙姆凝胶的胶束结构可以帮助溶解药物如地塞米松并有助于从药物颗粒向膜的运输。
在渗透研究期间凝胶的完整性也在渗透研究期间通过寻找沉降的药物颗粒的外观来监测。对于407-Dex和PEG-三赖氨酸聚合物-Dex样品，分别在第4天和第14天观察到这种液体供体的证据。虽然渗透装置和无孔膜不允许像在侵蚀和药物释放研究中那样与PBS直接接触，但如通过膨胀膜所暗示的那样，水能够穿过仿生膜。到第4天，这种吸水量足以导致热敏凝胶的溶解。
在37℃下分离的PEG-三赖氨酸聚合物-Dex相对于407-Dex的胶凝持续时间
将这些制剂的等分试样在37℃下储存在潮湿室内的密闭微量离心管中，以避免脱水。当在体温下与液体隔离储存时，此配置评估凝胶的完整性。两种制剂都具有大于21天的长胶凝持续时间。
在多项体外测试中，将化学交联的制剂PEG-三赖氨酸聚合物-Dex与热敏泊洛沙姆制剂407-Dex进行了比较。结果的组合说明了当将这两种制剂注射到中耳中时在侵蚀和凝胶完整性方面预期的差异。如果制剂保持与圆窗膜接触，则两者都有望实现穿过圆窗膜的零级药物递送。具有物理交联的泊洛沙姆凝胶当与诸如粘液的流体接触时或当水因与组织接触而被吸收时会立即开始侵蚀。一旦凝胶变成流体，它就有可能从圆窗流出并排出，导致靶标组织处的短且可变的胶凝持续时间。另一方面，原位化学交联的制剂在靶标组织处具有更长的可再现保留时间，因此应提供更持久的药物递送性能。
实例9：交联剂和絮凝剂的双重作用
药物悬浮液产品的一般优选的特征是施用均匀剂量的能力。对于在储存期间不形成致密的沉淀物并且可以在手动搅动小瓶时容易地重新分散的制剂，这可以更容易实现。通过目测来评估实例8中所述的pH改性的三赖氨酸药物悬浮液和泊洛沙姆制剂中药物颗粒的沉降。
在超过14天后，经pH调节的三赖氨酸药物悬浮液具有不超过40％体积的透明顶层。这对应于>60/12或5的絮凝效率。当该组分与PEG溶液组合时，三赖氨酸除了起到重要的交联作用外，还提供了容易分散的地塞米松的松散絮凝物。
在几个小时内，Dex-407中的地塞米松颗粒已经沉淀，并且超过90％是透明的上清液。这对应于<10/6或1.7的絮凝效率。
实例10：PEG-三赖氨酸聚合物-Dex相对于407-Dex的体内测试
在绿猴模型中对由pH改性的PEG-三赖氨酸聚合物制备的化学交联的凝胶和由泊洛沙姆407(P407)制备的热敏凝胶进行了体内测试。如实例8中所述制备具有6wt％地塞米松的制剂。施用制剂直到它在TM穿孔处可见，其中最终注射体积在30μL至100μL的范围内。
证明这些制剂的停留时间的结果示于表4A中。
表4A：
Figure BDA0003939295410000902
407凝胶与PEG-三赖氨酸聚合物凝胶相比的持久性。
Figure BDA0003939295410000901
由在非洲绿猴(绿猴(Chlorocebus sabaeus))中进行的药代动力学(PK)和耐受性研究获得了关于通过耳部施用的PEG-三赖氨酸聚合物制剂的吸收、分布和药代动力学的信息。
在单次IT注射后评估PEG-三赖氨酸聚合物制剂的外淋巴和血浆浓度。在1、10和22天后测量测试和对照品的外淋巴和血浆水平。鉴于较小的研究规模(N＝9登记)和治疗的耳朵总数，PK数据仅作为描述性统计数据呈现。
在给药前和在终止时评估听觉脑干应答阈值，并在尸检时收集耳蜗用于分析耳蜗毛细胞组织学。ABR测试测量动物的耳蜗、耳蜗神经和脑干是否对每种声音刺激作出应答，并且通常用作耳朵的健康的度量。这种相同的基本测试通常用于在医院测试新生儿的听力，并且是在实验室动物中使用的标准听力测试。
使用用于刺激产生的紧凑的听觉电诊断系统进行ABR，并且神经应答被放大100,000倍，并且在300-3,000赫兹(Hz)之间被带通滤波，具有附加的60Hz陷波滤波器。然后在被绘制在屏幕上之前，在10毫秒(ms)时期内对于平均512个无伪影平均值对放大和过滤的信号进行平均。阈值的初始主观估计是在测试时确定的。阈值被定义为受试者的脑干可以可靠地处理的每个刺激频率的最低强度。
在这项研究中，共有9只动物接受了双侧鼓室内注射制剂，其中随访间隔为1、10和22天。在18个治疗的耳朵中，12个接受PEG-三赖氨酸聚合物制剂，并且6个接受P407制剂。
表4B提供了治疗组和研究程序的总结。
表4B：PEG-三赖氨酸聚合物制剂在非洲绿猴治疗中的22天安全性和药代动力学研究的研究设计的总结
Figure BDA0003939295410000911
*注射体积由视觉终点决定，以确保填充圆窗龛
学习程序：
a＝听觉脑干应答(ABR)
b＝药物含量的血浆采集
c＝药物含量的外淋巴收集
d＝毛细胞计数的耳蜗组织学(每只动物的一只耳朵)
x＝鼓室内注射
总体而言，如通过电生理听力测量、耳蜗组织学和行为观察所评估的，两种制剂均具有良好的耐受性。基线ABR阈值与在其他非人类灵长类动物ABR研究中观察到的阈值相似或比其更好。听觉脑干应答阈值偏移通常最小并且与两组中在较高频率下的阈值增加一致。此外，通过细胞耳蜗图和免疫荧光染色进行的毛细胞分析表明，几乎没有缺失的毛细胞，其水平与正常衰老一致，并且与治疗不太可能相关。
在研究期间没有观察到受试者健康和福利的明显变化。大部分PEG-三赖氨酸聚合物制剂在第10天保留在中耳，其中在第22天检测到残留制剂。制剂在第22天将持续浓度的地塞米松递送至外淋巴，具有相对较低的全身暴露。
该研究的结果将非洲绿猴确立为使用IT注射将PEG-三赖氨酸聚合物制剂的长效储库制剂递送至内耳的模型。此外，该研究成功建立了非洲绿猴模型，其被用于新型耳科治疗药物的PK和耐受性研究。
地塞米松的吸收和分布也在非洲绿猴中进行了研究。在血浆、外淋巴和耳蜗中评估地塞米松浓度。
随着时间的推移，地塞米松的血浆水平下降，但在第22天(研究的最后时间点)期间保持在可检测的限度内。PEG-三赖氨酸聚合物制剂处理的动物的水平似乎更持久，这与相对于P407的来自中耳的延迟的凝胶清除的观察结果一致。图6A示出了在血浆中观察到的地塞米松的总量。在图6A中，纵轴是地塞米松的浓度ng/mL。水平轴是自给药以来的时间。分数是单独的受试者。空心符号来自施用PEG-三赖氨酸聚合物制剂的受试者，并且实心符号来自施用P407制剂的受试者。
在整个研究中，外淋巴地塞米松浓度仍远高于血浆水平，与从储库制剂中的持续释放一致。地塞米松水平的可变性在每个时间点在受试者之间都是明显的(图6B和6C)，但在22天的研究过程中，表现出了淋巴液浓度的总体进行性下降。在图6B和6C中，纵轴是地塞米松的浓度ng/mL。水平轴是自给药以来的时间。图6B：点是单独的受试者，用于左耳(L，圆形，正方形，六边形)和右耳(R，三角形和菱形)。空心符号来自施用PEG-三赖氨酸聚合物制剂的受试者，并且实心符号来自施用P407制剂的动物。箭头符号代表施用P407制剂的受试者A843，其地塞米松水平高于检测水平(限制9500ng/mL)。图6C：左耳和右耳分组在一起的相同数据。符号与图6B中的相同。
在耳蜗中，地塞米松水平的可变性在每个时间点都很明显。尽管有一些变化，但随着时间的推移，浓度也与从储库制剂的缓慢释放一致，特别是对于PEG-三赖氨酸聚合物制剂。
在靶向的外淋巴区室中观察到地塞米松的持续暴露，具有相对较低的全身暴露，如通过外淋巴和耳蜗中的地塞米松水平高于血浆所证明的。
整个耳蜗制剂中的地塞米松浓度通常低于外淋巴中的浓度。在每个时间点，耳朵之间地塞米松水平的可变性都很明显。尽管存在一些差异，但随着时间的推移，组的平均浓度也与从储库制剂的缓慢释放一致。
实例11：延长胶凝时间的PEG缓冲液组合物
代替用盐酸降低实例1中的三赖氨酸溶液的pH，通过改变用于重构PEG的溶液的组成(即PEG稀释剂)来减少胶凝时间。
材料与方法
制备在注射用水中含有0.13、0.14、0.15和0.16M磷酸(Spectrum Chemical)的稀释剂。将2.6mL的每种稀释剂添加到PEG酯粉末小瓶中并手动搅动直至实现重构。
将一百微升的PEG酯溶液与一百微升的三赖氨酸溶液组合用于胶凝时间的搅拌棒测试。此外，还测量了新的稀释剂和三赖氨酸的等体积混合物的pH；在不存在PEG酯的情况下测量pH以避免在pH测量期间凝胶的形成。为了测量最终耳用组合物的pH，可以在与最终耳用组合物平衡后测量水(例如，蒸馏的或低阻抗)的pH。
结果
当与三赖氨酸以等体积混合时，将稀释溶液中磷酸的浓度从0.13M增加到0.16M导致pH降低，从7.44到6.78。如图7所示，通过改变稀释剂磷酸浓度和所得混合物的pH来实现在3到11分钟之间的胶凝时间。
鼓室内注射所需的1至10分钟的胶凝时间可以通过用降低pH的组分改变三赖氨酸或PEG酯溶液来实现。
设想了用于鼓室内注射的另外的实施例，其涉及用含有三赖氨酸和所有pH调节组分的单一溶液重构PEG酯粉末。
实例12：PEG官能度对胶凝时间和胶凝持续时间的影响
凝胶特性(如胶凝时间和胶凝持续时间)可能会受到官能度变化的影响，例如，从每个多臂PEG接近4NHS减少到每个PEG接近3NHS，PEG的官能度可能在储存期间降低，并且在本研究中通过自到期以来的时间来跟踪。
材料与方法
与实例11类似地制备样品，除了PEG的等分试样用基于PEG等分试样的重量按比例减少量的稀释剂重构。对试剂盒进行测试，其中有效期在从测试日期后的1.1年到测试日期前的3.6年的范围内。制备在注射用水中含有0:100、50:50和100:0比率的磷酸二氢钠(Millipore)和磷酸(Spectrum Chemical)的PEG稀释剂。测量单独的稀释剂、在稀释剂中重构的PEG酯以及稀释剂和三赖氨酸的等体积混合物的pH。
在室温(约20℃)下，通过将一百微升的PEG酯溶液与一百微升的三赖氨酸溶液组合，通过搅拌棒测试来测量胶凝时间。通过在2mL玻璃小瓶的底部制备0.2mL的耳用组合物凝胶，加入1mL的PBS并储存在37℃或50℃来评估胶凝持续时间；通过定期倒置小瓶并注意凝胶何时变成液体来检查样品。此外，凝胶的体积被定性评估为交联密度的度量。
结果
50:50的稀释剂以在0.20至0.27M范围内的强度进行测试；这些稀释剂的pH为约2.0，对于重配到这些稀释剂中的PEG，增加到约2.3，并且对于加入到三赖氨酸溶液(无PEG)中的稀释剂，增加到约6.5至7.1。
在使用0.23M 50:50稀释剂的情况下，对于过期后长达1.7年测试的试剂盒，获得了3.5到5分钟的胶凝时间(参见图8)。当稀释剂的强度增加到0.25M时，胶凝时间增加到约5到6分钟。大多数在过期后超过三年测试的试剂盒具有约12到15分钟的胶凝时间，这归因于这些旧试剂盒中PEG酯的降低的官能度。
在由具有较长胶凝时间的较旧试剂盒制备的耳用组合物中观察到较高量的溶胀，这与降低的官能度和较低的交联密度一致。
用50:50稀释剂制备的耳用组合物在50℃加速条件下的胶凝持续时间，对于具有较高官能度PEG的试剂盒为3至4周，并且对于具有较低官能度PEG的试剂盒为约1周。在37℃下，对于较低PEG官能度组合物，胶凝持续时间为2-3周；测试正在进行中并且对于用较高官能度的PEG制备的耳用组合物将具有大于5周的胶凝持续时间。
实例13：固体含量对胶凝时间的影响
通过向凝胶组合物中添加水来探索通过改变固体含量来微调胶凝时间的能力。
材料与方法
如实例12中所述从证明具有较高官能度的批次制备样品。PEG等分试样在浓度为0.30M的含有50:50磷酸二氢钠(Millipore)和磷酸(Spectrum Chemical)的稀释剂中重构。通过将等体积的三赖氨酸和PEG溶液以及任选地另外的注射用水组合以将最终体积增加10％或20％并且因此将固体含量降低至多20％来制备耳用组合物。
通过将一百微升的PEG酯溶液与一百微升的三赖氨酸溶液和任选的另外的水组合，在室温(约20℃)下通过搅拌棒测试来测量胶凝时间。通过在室温下用凝胶平衡1mL的蒸馏水过夜并测量平衡的溶液的pH来测量最终凝胶的pH。
样品也在插入物中制备并浸没在37℃的PBS中，以用于溶胀的重量评估。
结果
与实例12中0.23和0.25M稀释剂的4.6和5.6分钟的胶凝时间相比，将稀释剂强度增加到0.30M将胶凝时间增加到9.5分钟。通过将固体含量降低10％和20％，胶凝时间被进一步增加到10.7和11.8分钟。
这些最终的耳用凝胶组合物的pH在6.68至6.75的范围内。在37℃的PBS中浸没2天后，最高固含量凝胶具有45％的溶胀百分比。将固体含量降低20％将溶胀百分比降低至36％。
实例14：凝胶形成和溶胀的再现性
制备三种聚合物组合物(C1-C3)并评估凝胶形成参数和溶胀，如表5中所述。在37℃下，使用置于含有200mL的PBS的瓶中的含有0.20mL的组合物的插入物，通过重量法来确定溶胀百分比。使用旋转搅拌棒测试来确定胶凝化环境温度，其中胶凝化被确定为样品涂覆搅拌棒(例如，搅拌棒和凝胶作为一个单元旋转)，或搅拌棒旋转容器。通过在透明盖的外部用外部磁体探测搅拌棒来确定37℃下的胶凝化；如果用外部磁铁从上方探测时，搅拌棒没有离开样品，则样品是凝胶。可注射性由测试者对注射器阻力的感知来确定。
表5.
C1 C2 C3
PEG-三赖氨酸批次ID A B A
适用期(分钟) 2 2 2
％PEG相对于靶标 100 101 101
％缓冲液相对于靶标 100 101 96
％三赖氨酸相对于靶标 100 101 102
三赖氨酸/PEG 100 100 101
平均实验室温度(℃) 24.7 24.8 22.9
在10分钟时的可注射性 是 是 是
在37℃下的胶凝时间(分钟) 0.9 0.8 1.4
在室温下的胶凝时间 10.0 9.2 10.3
在第1天的溶胀％ 36.8 35.8 32.4
如表5所示，在多次测试中由不同批次的PEG-三赖氨酸制备的聚合物组合物显示出一致的胶凝时间和溶胀特性。
实例15：药物释放数据的重现性
制备类似于C1-C3的聚合物组合物D1-D4，其包含活性剂地塞米松(12mg/0.2mL)。为了确定药物释放，将含有0.2mL的样品的插入物置于200mL的PBS(“受体流体”)中，并在37℃下温育。所有样品均使用n＝6运行。在第1天，然后在每周的时间点，收集受体流体用于通过反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测量活性剂浓度。图9使用利用不同批次的PEG-三赖氨酸的四个独立实验证明了药物释放概况是一致的。
实例16：pH、摩尔渗透压质量浓度和再吸收
确定了聚合物组合物D1-D8的胶凝化和化学特性。如实例14中所述确定胶凝时间、可注射性和溶胀。再吸收通过重量法测量，并且当插入物中的样品重量小于初始样品重量时确定再吸收。通过在室温下用1mL纯化的蒸馏水平衡0.2mL的样品过夜，然后测量水的pH，来间接测量凝胶的pH。使用蒸汽压渗透压法来测量样品的摩尔渗透压质量浓度。
这些测量的结果在表6中示出。
表6
Figure BDA0003939295410000961
ND＝未确定
实例17.示例性的制剂
延长释放耳用组合物的示例性的制剂在下表7中示出。生成了所有组分均具有示例性的值C的制剂。
表7.
Figure BDA0003939295410000962
实例18：鼓室内PEG-三赖氨酸聚合物在Hartley豚鼠中的8周安全性和药代动力学研究
进行了8周的毒理学研究，以评估在Hartley豚鼠中鼓室内施用PEG-三赖氨酸聚合物制剂的安全性和药代动力学。如实例8中所述制备具有6wt％地塞米松的制剂。在这项研究中，收集并分析血浆和外淋巴药物水平以及对RW膜的制剂定位的视觉观察，以确认暴露。对于研究，使用了两种性别的Hartley豚鼠[n＝46(23只雄性和23只雌性)]。在适应3到7天后，所有豚鼠都接受了4、10和20kHz的基线ABR测试。在基线ABR测试三天后，将豚鼠分为如下4个治疗组：1)PEG-三赖氨酸聚合物制剂(其包含地塞米松)，2)PEG-三赖氨酸聚合物制剂-媒介物，3)盐水，和4)庆大霉素IT注射液。包括庆大霉素作为具有已知耳毒性概况的阳性对照。
表8总结了研究设计。组1-3被进一步分成具有长达8周的不同存活时间的亚组。在本研究中4周和8周时间点的耳朵数量被激活，以检测到在三个测试频率中每一个频率的ABR阈值测量值自基线的20dB偏移(单向t检验；独立平均值；先验；功效＝0.95)，使用样品数据来估计来自试点研究的可变性。在指定的生命时间点(包含终点)收集听觉脑干应答和血液取样。在终点处对指定的动物进行外淋巴取样、中耳可视化和组织学样品制备。
表8.PEG-三赖氨酸聚合物在豚鼠体内的8周安全性和药代动力学研究的研究设计的总结
Figure BDA0003939295410000971
学习程序：
a＝听觉脑干应答(ABR)
b＝药物含量的血浆采集
c＝药物含量的外淋巴收集
d＝毛细胞计数的耳蜗组织学
e＝中耳组织学准备
x＝鼓室内注射
在测试的所有时间点，在IT注射5μL的含和不含6％地塞米松的PEG-三赖氨酸聚合物媒介物后，如通过ABR评估的听力变化最小(图10A)，并且与盐水对照组相比没有统计学差异。阳性对照庆大霉素治疗在第3天和第14天产生了稳健的55+dB阈值偏移。在其他治疗组中看到的小阈值升高与啮齿动物鼓室内注射程序的后遗症一致，该注射程序可以产生由最近的TM穿孔导致的ABR阈值的短暂轻度升高。
功效最高的两个时间点是注射后4周和8周的测量值。在4周的时间点(图10B)，统计分析显示治疗组或ABR测试频率没有显著的主要影响，并且在治疗组和频率之间没有相互作用。没有一个随访多重比较是显著性的。类似地，在8周的时间点(图10C)，对ABR测试频率没有主要影响，F(1.85，76.0)＝0.365，p＝0.679，也没有治疗组x测试频率相互作用，F(4,82)＝1.18,p＝0.325。治疗组没有显著的主要影响，F(2,41)＝3.65,p＝0.035。这些结果表明，无论ABR测试频率如何，在治疗组之间在8周时间点的ABR阈值偏移显著不同。然而，随访Tukey的多重比较表明，在任何组之间都没有显著差异。在10kHz测试频率(p＝0.062)下、在4kHz测试频率(p＝0.126)下在PEG-三赖氨酸聚合物制剂媒介物相对于PEG-三赖氨酸聚合物制剂(包含6％ Dex)之间，以及在10kHz测试频率(p＝0.151)下在盐水和PEG-三赖氨酸聚合物制剂媒介物之间，发现了最接近达到统计学显著性的趋势。
外耳耳镜检查揭示了TM注射后通常将预期的情况；注射后3天出现轻微的TM红斑和积水，其在较长的时间点逐渐消失，直到到第56天几乎在所有耳朵中都基本消失。在末端的中耳空间的视觉观察显示，在注射后3-7天始终观察到在注射位置存在PEG-三赖氨酸聚合物制剂凝胶，但在最后8周时间点没有观察到。
豚鼠血浆和外淋巴样品中的地塞米松水平总结在表9中。在8周内在10只动物中收集了血浆中纵向地塞米松浓度。在施用后第3天、第1周、第4周和第8周在终点收集外淋巴样品。通过高效液相色谱质谱法(HPLC-MS)测定地塞米松水平，其中血浆和外淋巴的定量限制分别约为1ng/mL和7ng/mL。
表9.血浆和外淋巴中地塞米松水平的总结
Figure BDA0003939295410000981
BLQ＝低于定量限制
*在3天组中的一只耳朵中的注射不成功，并且另外一只动物进入研究。对侧耳朵被向前推进，导致该组中n＝5，而不是计划的n＝4。
在所有动物中，血浆地塞米松浓度在注射后3天始终最高，并且随着时间的推移而降低，到8周时降至低于定量限制(BLQ)(图11A和11B)。
处理后3天的外淋巴样品显示出比血浆中显著更高的水平：在第3天和第7天的平均水平分别高20倍和500倍，与实例10中的先前结果一致。在这项研究中，外淋巴的浓度变化很大，这至少部分地是因为低的样品体积(低至1.5微升，其占鼓阶体积的低于40％)和尸检样品收集。尸检收集是必要的，以使对安全性解释的影响最小化，但会在组织解剖期间引入由于CSF进入鼓阶中而引起的可变样品稀释的风险。鉴于这些因素，在解剖鼓膜大疱时记录中耳观察结果，以确认产品的准确放置。在第3天和第7天时间点，在所有样本中的圆窗龛中很容易观察到PEG-三赖氨酸聚合物制剂和PEG-三赖氨酸聚合物制剂媒介物样品。这些观察结果与外淋巴地塞米松水平一起支持耳蜗预期暴露于施用的药物产品。
序列表
<110> 斯皮拉尔诊疗有限公司
<120> 用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液
<130> 50051-0011WO1
<150> US 63/024,232
<151> 2020-05-13
<160> 8
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1338
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Met Val Ser Tyr Trp Asp Thr Gly Val Leu Leu Cys Ala Leu Leu Ser
1 5 10 15
Cys Leu Leu Leu Thr Gly Ser Ser Ser Gly Ser Lys Leu Lys Asp Pro
20 25 30
Glu Leu Ser Leu Lys Gly Thr Gln His Ile Met Gln Ala Gly Gln Thr
35 40 45
Leu His Leu Gln Cys Arg Gly Glu Ala Ala His Lys Trp Ser Leu Pro
50 55 60
Glu Met Val Ser Lys Glu Ser Glu Arg Leu Ser Ile Thr Lys Ser Ala
65 70 75 80
Cys Gly Arg Asn Gly Lys Gln Phe Cys Ser Thr Leu Thr Leu Asn Thr
85 90 95
Ala Gln Ala Asn His Thr Gly Phe Tyr Ser Cys Lys Tyr Leu Ala Val
100 105 110
Pro Thr Ser Lys Lys Lys Glu Thr Glu Ser Ala Ile Tyr Ile Phe Ile
115 120 125
Ser Asp Thr Gly Arg Pro Phe Val Glu Met Tyr Ser Glu Ile Pro Glu
130 135 140
Ile Ile His Met Thr Glu Gly Arg Glu Leu Val Ile Pro Cys Arg Val
145 150 155 160
Thr Ser Pro Asn Ile Thr Val Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr
165 170 175
Leu Ile Pro Asp Gly Lys Arg Ile Ile Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe
180 185 190
Ile Ile Ser Asn Ala Thr Tyr Lys Glu Ile Gly Leu Leu Thr Cys Glu
195 200 205
Ala Thr Val Asn Gly His Leu Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg
210 215 220
Gln Thr Asn Thr Ile Ile Asp Val Gln Ile Ser Thr Pro Arg Pro Val
225 230 235 240
Lys Leu Leu Arg Gly His Thr Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Thr Thr
245 250 255
Pro Leu Asn Thr Arg Val Gln Met Thr Trp Ser Tyr Pro Asp Glu Lys
260 265 270
Asn Lys Arg Ala Ser Val Arg Arg Arg Ile Asp Gln Ser Asn Ser His
275 280 285
Ala Asn Ile Phe Tyr Ser Val Leu Thr Ile Asp Lys Met Gln Asn Lys
290 295 300
Asp Lys Gly Leu Tyr Thr Cys Arg Val Arg Ser Gly Pro Ser Phe Lys
305 310 315 320
Ser Val Asn Thr Ser Val His Ile Tyr Asp Lys Ala Phe Ile Thr Val
325 330 335
Lys His Arg Lys Gln Gln Val Leu Glu Thr Val Ala Gly Lys Arg Ser
340 345 350
Tyr Arg Leu Ser Met Lys Val Lys Ala Phe Pro Ser Pro Glu Val Val
355 360 365
Trp Leu Lys Asp Gly Leu Pro Ala Thr Glu Lys Ser Ala Arg Tyr Leu
370 375 380
Thr Arg Gly Tyr Ser Leu Ile Ile Lys Asp Val Thr Glu Glu Asp Ala
385 390 395 400
Gly Asn Tyr Thr Ile Leu Leu Ser Ile Lys Gln Ser Asn Val Phe Lys
405 410 415
Asn Leu Thr Ala Thr Leu Ile Val Asn Val Lys Pro Gln Ile Tyr Glu
420 425 430
Lys Ala Val Ser Ser Phe Pro Asp Pro Ala Leu Tyr Pro Leu Gly Ser
435 440 445
Arg Gln Ile Leu Thr Cys Thr Ala Tyr Gly Ile Pro Gln Pro Thr Ile
450 455 460
Lys Trp Phe Trp His Pro Cys Asn His Asn His Ser Glu Ala Arg Cys
465 470 475 480
Asp Phe Cys Ser Asn Asn Glu Glu Ser Phe Ile Leu Asp Ala Asp Ser
485 490 495
Asn Met Gly Asn Arg Ile Glu Ser Ile Thr Gln Arg Met Ala Ile Ile
500 505 510
Glu Gly Lys Asn Lys Met Ala Ser Thr Leu Val Val Ala Asp Ser Arg
515 520 525
Ile Ser Gly Ile Tyr Ile Cys Ile Ala Ser Asn Lys Val Gly Thr Val
530 535 540
Gly Arg Asn Ile Ser Phe Tyr Ile Thr Asp Val Pro Asn Gly Phe His
545 550 555 560
Val Asn Leu Glu Lys Met Pro Thr Glu Gly Glu Asp Leu Lys Leu Ser
565 570 575
Cys Thr Val Asn Lys Phe Leu Tyr Arg Asp Val Thr Trp Ile Leu Leu
580 585 590
Arg Thr Val Asn Asn Arg Thr Met His Tyr Ser Ile Ser Lys Gln Lys
595 600 605
Met Ala Ile Thr Lys Glu His Ser Ile Thr Leu Asn Leu Thr Ile Met
610 615 620
Asn Val Ser Leu Gln Asp Ser Gly Thr Tyr Ala Cys Arg Ala Arg Asn
625 630 635 640
Val Tyr Thr Gly Glu Glu Ile Leu Gln Lys Lys Glu Ile Thr Ile Arg
645 650 655
Asp Gln Glu Ala Pro Tyr Leu Leu Arg Asn Leu Ser Asp His Thr Val
660 665 670
Ala Ile Ser Ser Ser Thr Thr Leu Asp Cys His Ala Asn Gly Val Pro
675 680 685
Glu Pro Gln Ile Thr Trp Phe Lys Asn Asn His Lys Ile Gln Gln Glu
690 695 700
Pro Gly Ile Ile Leu Gly Pro Gly Ser Ser Thr Leu Phe Ile Glu Arg
705 710 715 720
Val Thr Glu Glu Asp Glu Gly Val Tyr His Cys Lys Ala Thr Asn Gln
725 730 735
Lys Gly Ser Val Glu Ser Ser Ala Tyr Leu Thr Val Gln Gly Thr Ser
740 745 750
Asp Lys Ser Asn Leu Glu Leu Ile Thr Leu Thr Cys Thr Cys Val Ala
755 760 765
Ala Thr Leu Phe Trp Leu Leu Leu Thr Leu Phe Ile Arg Lys Met Lys
770 775 780
Arg Ser Ser Ser Glu Ile Lys Thr Asp Tyr Leu Ser Ile Ile Met Asp
785 790 795 800
Pro Asp Glu Val Pro Leu Asp Glu Gln Cys Glu Arg Leu Pro Tyr Asp
805 810 815
Ala Ser Lys Trp Glu Phe Ala Arg Glu Arg Leu Lys Leu Gly Lys Ser
820 825 830
Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Gln Ala Ser Ala Phe Gly
835 840 845
Ile Lys Lys Ser Pro Thr Cys Arg Thr Val Ala Val Lys Met Leu Lys
850 855 860
Glu Gly Ala Thr Ala Ser Glu Tyr Lys Ala Leu Met Thr Glu Leu Lys
865 870 875 880
Ile Leu Thr His Ile Gly His His Leu Asn Val Val Asn Leu Leu Gly
885 890 895
Ala Cys Thr Lys Gln Gly Gly Pro Leu Met Val Ile Val Glu Tyr Cys
900 905 910
Lys Tyr Gly Asn Leu Ser Asn Tyr Leu Lys Ser Lys Arg Asp Leu Phe
915 920 925
Phe Leu Asn Lys Asp Ala Ala Leu His Met Glu Pro Lys Lys Glu Lys
930 935 940
Met Glu Pro Gly Leu Glu Gln Gly Lys Lys Pro Arg Leu Asp Ser Val
945 950 955 960
Thr Ser Ser Glu Ser Phe Ala Ser Ser Gly Phe Gln Glu Asp Lys Ser
965 970 975
Leu Ser Asp Val Glu Glu Glu Glu Asp Ser Asp Gly Phe Tyr Lys Glu
980 985 990
Pro Ile Thr Met Glu Asp Leu Ile Ser Tyr Ser Phe Gln Val Ala Arg
995 1000 1005
Gly Met Glu Phe Leu Ser Ser Arg Lys Cys Ile His Arg Asp Leu
1010 1015 1020
Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu Ser Glu Asn Asn Val Val Lys Ile
1025 1030 1035
Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp Ile Tyr Lys Asn Pro Asp Tyr
1040 1045 1050
Val Arg Lys Gly Asp Thr Arg Leu Pro Leu Lys Trp Met Ala Pro
1055 1060 1065
Glu Ser Ile Phe Asp Lys Ile Tyr Ser Thr Lys Ser Asp Val Trp
1070 1075 1080
Ser Tyr Gly Val Leu Leu Trp Glu Ile Phe Ser Leu Gly Gly Ser
1085 1090 1095
Pro Tyr Pro Gly Val Gln Met Asp Glu Asp Phe Cys Ser Arg Leu
1100 1105 1110
Arg Glu Gly Met Arg Met Arg Ala Pro Glu Tyr Ser Thr Pro Glu
1115 1120 1125
Ile Tyr Gln Ile Met Leu Asp Cys Trp His Arg Asp Pro Lys Glu
1130 1135 1140
Arg Pro Arg Phe Ala Glu Leu Val Glu Lys Leu Gly Asp Leu Leu
1145 1150 1155
Gln Ala Asn Val Gln Gln Asp Gly Lys Asp Tyr Ile Pro Ile Asn
1160 1165 1170
Ala Ile Leu Thr Gly Asn Ser Gly Phe Thr Tyr Ser Thr Pro Ala
1175 1180 1185
Phe Ser Glu Asp Phe Phe Lys Glu Ser Ile Ser Ala Pro Lys Phe
1190 1195 1200
Asn Ser Gly Ser Ser Asp Asp Val Arg Tyr Val Asn Ala Phe Lys
1205 1210 1215
Phe Met Ser Leu Glu Arg Ile Lys Thr Phe Glu Glu Leu Leu Pro
1220 1225 1230
Asn Ala Thr Ser Met Phe Asp Asp Tyr Gln Gly Asp Ser Ser Thr
1235 1240 1245
Leu Leu Ala Ser Pro Met Leu Lys Arg Phe Thr Trp Thr Asp Ser
1250 1255 1260
Lys Pro Lys Ala Ser Leu Lys Ile Asp Leu Arg Val Thr Ser Lys
1265 1270 1275
Ser Lys Glu Ser Gly Leu Ser Asp Val Ser Arg Pro Ser Phe Cys
1280 1285 1290
His Ser Ser Cys Gly His Val Ser Glu Gly Lys Arg Arg Phe Thr
1295 1300 1305
Tyr Asp His Ala Glu Leu Glu Arg Lys Ile Ala Cys Cys Ser Pro
1310 1315 1320
Pro Pro Asp Tyr Asn Ser Val Val Leu Tyr Ser Thr Pro Pro Ile
1325 1330 1335
<210> 2
<211> 1356
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Met Gln Ser Lys Val Leu Leu Ala Val Ala Leu Trp Leu Cys Val Glu
1 5 10 15
Thr Arg Ala Ala Ser Val Gly Leu Pro Ser Val Ser Leu Asp Leu Pro
20 25 30
Arg Leu Ser Ile Gln Lys Asp Ile Leu Thr Ile Lys Ala Asn Thr Thr
35 40 45
Leu Gln Ile Thr Cys Arg Gly Gln Arg Asp Leu Asp Trp Leu Trp Pro
50 55 60
Asn Asn Gln Ser Gly Ser Glu Gln Arg Val Glu Val Thr Glu Cys Ser
65 70 75 80
Asp Gly Leu Phe Cys Lys Thr Leu Thr Ile Pro Lys Val Ile Gly Asn
85 90 95
Asp Thr Gly Ala Tyr Lys Cys Phe Tyr Arg Glu Thr Asp Leu Ala Ser
100 105 110
Val Ile Tyr Val Tyr Val Gln Asp Tyr Arg Ser Pro Phe Ile Ala Ser
115 120 125
Val Ser Asp Gln His Gly Val Val Tyr Ile Thr Glu Asn Lys Asn Lys
130 135 140
Thr Val Val Ile Pro Cys Leu Gly Ser Ile Ser Asn Leu Asn Val Ser
145 150 155 160
Leu Cys Ala Arg Tyr Pro Glu Lys Arg Phe Val Pro Asp Gly Asn Arg
165 170 175
Ile Ser Trp Asp Ser Lys Lys Gly Phe Thr Ile Pro Ser Tyr Met Ile
180 185 190
Ser Tyr Ala Gly Met Val Phe Cys Glu Ala Lys Ile Asn Asp Glu Ser
195 200 205
Tyr Gln Ser Ile Met Tyr Ile Val Val Val Val Gly Tyr Arg Ile Tyr
210 215 220
Asp Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly Ile Glu Leu Ser Val Gly Glu
225 230 235 240
Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr Glu Leu Asn Val Gly Ile
245 250 255
Asp Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys His Gln His Lys Lys Leu
260 265 270
Val Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gln Ser Gly Ser Glu Met Lys Lys Phe
275 280 285
Leu Ser Thr Leu Thr Ile Asp Gly Val Thr Arg Ser Asp Gln Gly Leu
290 295 300
Tyr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met Thr Lys Lys Asn Ser Thr
305 310 315 320
Phe Val Arg Val His Glu Lys Pro Phe Val Ala Phe Gly Ser Gly Met
325 330 335
Glu Ser Leu Val Glu Ala Thr Val Gly Glu Arg Val Arg Ile Pro Ala
340 345 350
Lys Tyr Leu Gly Tyr Pro Pro Pro Glu Ile Lys Trp Tyr Lys Asn Gly
355 360 365
Ile Pro Leu Glu Ser Asn His Thr Ile Lys Ala Gly His Val Leu Thr
370 375 380
Ile Met Glu Val Ser Glu Arg Asp Thr Gly Asn Tyr Thr Val Ile Leu
385 390 395 400
Thr Asn Pro Ile Ser Lys Glu Lys Gln Ser His Val Val Ser Leu Val
405 410 415
Val Tyr Val Pro Pro Gln Ile Gly Glu Lys Ser Leu Ile Ser Pro Val
420 425 430
Asp Ser Tyr Gln Tyr Gly Thr Thr Gln Thr Leu Thr Cys Thr Val Tyr
435 440 445
Ala Ile Pro Pro Pro His His Ile His Trp Tyr Trp Gln Leu Glu Glu
450 455 460
Glu Cys Ala Asn Glu Pro Ser Gln Ala Val Ser Val Thr Asn Pro Tyr
465 470 475 480
Pro Cys Glu Glu Trp Arg Ser Val Glu Asp Phe Gln Gly Gly Asn Lys
485 490 495
Ile Glu Val Asn Lys Asn Gln Phe Ala Leu Ile Glu Gly Lys Asn Lys
500 505 510
Thr Val Ser Thr Leu Val Ile Gln Ala Ala Asn Val Ser Ala Leu Tyr
515 520 525
Lys Cys Glu Ala Val Asn Lys Val Gly Arg Gly Glu Arg Val Ile Ser
530 535 540
Phe His Val Thr Arg Gly Pro Glu Ile Thr Leu Gln Pro Asp Met Gln
545 550 555 560
Pro Thr Glu Gln Glu Ser Val Ser Leu Trp Cys Thr Ala Asp Arg Ser
565 570 575
Thr Phe Glu Asn Leu Thr Trp Tyr Lys Leu Gly Pro Gln Pro Leu Pro
580 585 590
Ile His Val Gly Glu Leu Pro Thr Pro Val Cys Lys Asn Leu Asp Thr
595 600 605
Leu Trp Lys Leu Asn Ala Thr Met Phe Ser Asn Ser Thr Asn Asp Ile
610 615 620
Leu Ile Met Glu Leu Lys Asn Ala Ser Leu Gln Asp Gln Gly Asp Tyr
625 630 635 640
Val Cys Leu Ala Gln Asp Arg Lys Thr Lys Lys Arg His Cys Val Val
645 650 655
Arg Gln Leu Thr Val Leu Glu Arg Val Ala Pro Thr Ile Thr Gly Asn
660 665 670
Leu Glu Asn Gln Thr Thr Ser Ile Gly Glu Ser Ile Glu Val Ser Cys
675 680 685
Thr Ala Ser Gly Asn Pro Pro Pro Gln Ile Met Trp Phe Lys Asp Asn
690 695 700
Glu Thr Leu Val Glu Asp Ser Gly Ile Val Leu Lys Asp Gly Asn Arg
705 710 715 720
Asn Leu Thr Ile Arg Arg Val Arg Lys Glu Asp Glu Gly Leu Tyr Thr
725 730 735
Cys Gln Ala Cys Ser Val Leu Gly Cys Ala Lys Val Glu Ala Phe Phe
740 745 750
Ile Ile Glu Gly Ala Gln Glu Lys Thr Asn Leu Glu Ile Ile Ile Leu
755 760 765
Val Gly Thr Ala Val Ile Ala Met Phe Phe Trp Leu Leu Leu Val Ile
770 775 780
Ile Leu Arg Thr Val Lys Arg Ala Asn Gly Gly Glu Leu Lys Thr Gly
785 790 795 800
Tyr Leu Ser Ile Val Met Asp Pro Asp Glu Leu Pro Leu Asp Glu His
805 810 815
Cys Glu Arg Leu Pro Tyr Asp Ala Ser Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asp
820 825 830
Arg Leu Lys Leu Gly Lys Pro Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Gln Val
835 840 845
Ile Glu Ala Asp Ala Phe Gly Ile Asp Lys Thr Ala Thr Cys Arg Thr
850 855 860
Val Ala Val Lys Met Leu Lys Glu Gly Ala Thr His Ser Glu His Arg
865 870 875 880
Ala Leu Met Ser Glu Leu Lys Ile Leu Ile His Ile Gly His His Leu
885 890 895
Asn Val Val Asn Leu Leu Gly Ala Cys Thr Lys Pro Gly Gly Pro Leu
900 905 910
Met Val Ile Val Glu Phe Cys Lys Phe Gly Asn Leu Ser Thr Tyr Leu
915 920 925
Arg Ser Lys Arg Asn Glu Phe Val Pro Tyr Lys Thr Lys Gly Ala Arg
930 935 940
Phe Arg Gln Gly Lys Asp Tyr Val Gly Ala Ile Pro Val Asp Leu Lys
945 950 955 960
Arg Arg Leu Asp Ser Ile Thr Ser Ser Gln Ser Ser Ala Ser Ser Gly
965 970 975
Phe Val Glu Glu Lys Ser Leu Ser Asp Val Glu Glu Glu Glu Ala Pro
980 985 990
Glu Asp Leu Tyr Lys Asp Phe Leu Thr Leu Glu His Leu Ile Cys Tyr
995 1000 1005
Ser Phe Gln Val Ala Lys Gly Met Glu Phe Leu Ala Ser Arg Lys
1010 1015 1020
Cys Ile His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu Ser Glu
1025 1030 1035
Lys Asn Val Val Lys Ile Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp Ile
1040 1045 1050
Tyr Lys Asp Pro Asp Tyr Val Arg Lys Gly Asp Ala Arg Leu Pro
1055 1060 1065
Leu Lys Trp Met Ala Pro Glu Thr Ile Phe Asp Arg Val Tyr Thr
1070 1075 1080
Ile Gln Ser Asp Val Trp Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu Ile
1085 1090 1095
Phe Ser Leu Gly Ala Ser Pro Tyr Pro Gly Val Lys Ile Asp Glu
1100 1105 1110
Glu Phe Cys Arg Arg Leu Lys Glu Gly Thr Arg Met Arg Ala Pro
1115 1120 1125
Asp Tyr Thr Thr Pro Glu Met Tyr Gln Thr Met Leu Asp Cys Trp
1130 1135 1140
His Gly Glu Pro Ser Gln Arg Pro Thr Phe Ser Glu Leu Val Glu
1145 1150 1155
His Leu Gly Asn Leu Leu Gln Ala Asn Ala Gln Gln Asp Gly Lys
1160 1165 1170
Asp Tyr Ile Val Leu Pro Ile Ser Glu Thr Leu Ser Met Glu Glu
1175 1180 1185
Asp Ser Gly Leu Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Ser Cys Met Glu
1190 1195 1200
Glu Glu Glu Val Cys Asp Pro Lys Phe His Tyr Asp Asn Thr Ala
1205 1210 1215
Gly Ile Ser Gln Tyr Leu Gln Asn Ser Lys Arg Lys Ser Arg Pro
1220 1225 1230
Val Ser Val Lys Thr Phe Glu Asp Ile Pro Leu Glu Glu Pro Glu
1235 1240 1245
Val Lys Val Ile Pro Asp Asp Asn Gln Thr Asp Ser Gly Met Val
1250 1255 1260
Leu Ala Ser Glu Glu Leu Lys Thr Leu Glu Asp Arg Thr Lys Leu
1265 1270 1275
Ser Pro Ser Phe Gly Gly Met Val Pro Ser Lys Ser Arg Glu Ser
1280 1285 1290
Val Ala Ser Glu Gly Ser Asn Gln Thr Ser Gly Tyr Gln Ser Gly
1295 1300 1305
Tyr His Ser Asp Asp Thr Asp Thr Thr Val Tyr Ser Ser Glu Glu
1310 1315 1320
Ala Glu Leu Leu Lys Leu Ile Glu Ile Gly Val Gln Thr Gly Ser
1325 1330 1335
Thr Ala Gln Ile Leu Gln Pro Asp Ser Gly Thr Thr Leu Ser Ser
1340 1345 1350
Pro Pro Val
1355
<210> 3
<211> 1363
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
Met Gln Arg Gly Ala Ala Leu Cys Leu Arg Leu Trp Leu Cys Leu Gly
1 5 10 15
Leu Leu Asp Gly Leu Val Ser Gly Tyr Ser Met Thr Pro Pro Thr Leu
20 25 30
Asn Ile Thr Glu Glu Ser His Val Ile Asp Thr Gly Asp Ser Leu Ser
35 40 45
Ile Ser Cys Arg Gly Gln His Pro Leu Glu Trp Ala Trp Pro Gly Ala
50 55 60
Gln Glu Ala Pro Ala Thr Gly Asp Lys Asp Ser Glu Asp Thr Gly Val
65 70 75 80
Val Arg Asp Cys Glu Gly Thr Asp Ala Arg Pro Tyr Cys Lys Val Leu
85 90 95
Leu Leu His Glu Val His Ala Asn Asp Thr Gly Ser Tyr Val Cys Tyr
100 105 110
Tyr Lys Tyr Ile Lys Ala Arg Ile Glu Gly Thr Thr Ala Ala Ser Ser
115 120 125
Tyr Val Phe Val Arg Asp Phe Glu Gln Pro Phe Ile Asn Lys Pro Asp
130 135 140
Thr Leu Leu Val Asn Arg Lys Asp Ala Met Trp Val Pro Cys Leu Val
145 150 155 160
Ser Ile Pro Gly Leu Asn Val Thr Leu Arg Ser Gln Ser Ser Val Leu
165 170 175
Trp Pro Asp Gly Gln Glu Val Val Trp Asp Asp Arg Arg Gly Met Leu
180 185 190
Val Ser Thr Pro Leu Leu His Asp Ala Leu Tyr Leu Gln Cys Glu Thr
195 200 205
Thr Trp Gly Asp Gln Asp Phe Leu Ser Asn Pro Phe Leu Val His Ile
210 215 220
Thr Gly Asn Glu Leu Tyr Asp Ile Gln Leu Leu Pro Arg Lys Ser Leu
225 230 235 240
Glu Leu Leu Val Gly Glu Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Val Trp Ala
245 250 255
Glu Phe Asn Ser Gly Val Thr Phe Asp Trp Asp Tyr Pro Gly Lys Gln
260 265 270
Ala Glu Arg Gly Lys Trp Val Pro Glu Arg Arg Ser Gln Gln Thr His
275 280 285
Thr Glu Leu Ser Ser Ile Leu Thr Ile His Asn Val Ser Gln His Asp
290 295 300
Leu Gly Ser Tyr Val Cys Lys Ala Asn Asn Gly Ile Gln Arg Phe Arg
305 310 315 320
Glu Ser Thr Glu Val Ile Val His Glu Asn Pro Phe Ile Ser Val Glu
325 330 335
Trp Leu Lys Gly Pro Ile Leu Glu Ala Thr Ala Gly Asp Glu Leu Val
340 345 350
Lys Leu Pro Val Lys Leu Ala Ala Tyr Pro Pro Pro Glu Phe Gln Trp
355 360 365
Tyr Lys Asp Gly Lys Ala Leu Ser Gly Arg His Ser Pro His Ala Leu
370 375 380
Val Leu Lys Glu Val Thr Glu Ala Ser Thr Gly Thr Tyr Thr Leu Ala
385 390 395 400
Leu Trp Asn Ser Ala Ala Gly Leu Arg Arg Asn Ile Ser Leu Glu Leu
405 410 415
Val Val Asn Val Pro Pro Gln Ile His Glu Lys Glu Ala Ser Ser Pro
420 425 430
Ser Ile Tyr Ser Arg His Ser Arg Gln Ala Leu Thr Cys Thr Ala Tyr
435 440 445
Gly Val Pro Leu Pro Leu Ser Ile Gln Trp His Trp Arg Pro Trp Thr
450 455 460
Pro Cys Lys Met Phe Ala Gln Arg Ser Leu Arg Arg Arg Gln Gln Gln
465 470 475 480
Asp Leu Met Pro Gln Cys Arg Asp Trp Arg Ala Val Thr Thr Gln Asp
485 490 495
Ala Val Asn Pro Ile Glu Ser Leu Asp Thr Trp Thr Glu Phe Val Glu
500 505 510
Gly Lys Asn Lys Thr Val Ser Lys Leu Val Ile Gln Asn Ala Asn Val
515 520 525
Ser Ala Met Tyr Lys Cys Val Val Ser Asn Lys Val Gly Gln Asp Glu
530 535 540
Arg Leu Ile Tyr Phe Tyr Val Thr Thr Ile Pro Asp Gly Phe Thr Ile
545 550 555 560
Glu Ser Lys Pro Ser Glu Glu Leu Leu Glu Gly Gln Pro Val Leu Leu
565 570 575
Ser Cys Gln Ala Asp Ser Tyr Lys Tyr Glu His Leu Arg Trp Tyr Arg
580 585 590
Leu Asn Leu Ser Thr Leu His Asp Ala His Gly Asn Pro Leu Leu Leu
595 600 605
Asp Cys Lys Asn Val His Leu Phe Ala Thr Pro Leu Ala Ala Ser Leu
610 615 620
Glu Glu Val Ala Pro Gly Ala Arg His Ala Thr Leu Ser Leu Ser Ile
625 630 635 640
Pro Arg Val Ala Pro Glu His Glu Gly His Tyr Val Cys Glu Val Gln
645 650 655
Asp Arg Arg Ser His Asp Lys His Cys His Lys Lys Tyr Leu Ser Val
660 665 670
Gln Ala Leu Glu Ala Pro Arg Leu Thr Gln Asn Leu Thr Asp Leu Leu
675 680 685
Val Asn Val Ser Asp Ser Leu Glu Met Gln Cys Leu Val Ala Gly Ala
690 695 700
His Ala Pro Ser Ile Val Trp Tyr Lys Asp Glu Arg Leu Leu Glu Glu
705 710 715 720
Lys Ser Gly Val Asp Leu Ala Asp Ser Asn Gln Lys Leu Ser Ile Gln
725 730 735
Arg Val Arg Glu Glu Asp Ala Gly Arg Tyr Leu Cys Ser Val Cys Asn
740 745 750
Ala Lys Gly Cys Val Asn Ser Ser Ala Ser Val Ala Val Glu Gly Ser
755 760 765
Glu Asp Lys Gly Ser Met Glu Ile Val Ile Leu Val Gly Thr Gly Val
770 775 780
Ile Ala Val Phe Phe Trp Val Leu Leu Leu Leu Ile Phe Cys Asn Met
785 790 795 800
Arg Arg Pro Ala His Ala Asp Ile Lys Thr Gly Tyr Leu Ser Ile Ile
805 810 815
Met Asp Pro Gly Glu Val Pro Leu Glu Glu Gln Cys Glu Tyr Leu Ser
820 825 830
Tyr Asp Ala Ser Gln Trp Glu Phe Pro Arg Glu Arg Leu His Leu Gly
835 840 845
Arg Val Leu Gly Tyr Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Ser Ala
850 855 860
Phe Gly Ile His Lys Gly Ser Ser Cys Asp Thr Val Ala Val Lys Met
865 870 875 880
Leu Lys Glu Gly Ala Thr Ala Ser Glu His Arg Ala Leu Met Ser Glu
885 890 895
Leu Lys Ile Leu Ile His Ile Gly Asn His Leu Asn Val Val Asn Leu
900 905 910
Leu Gly Ala Cys Thr Lys Pro Gln Gly Pro Leu Met Val Ile Val Glu
915 920 925
Phe Cys Lys Tyr Gly Asn Leu Ser Asn Phe Leu Arg Ala Lys Arg Asp
930 935 940
Ala Phe Ser Pro Cys Ala Glu Lys Ser Pro Glu Gln Arg Gly Arg Phe
945 950 955 960
Arg Ala Met Val Glu Leu Ala Arg Leu Asp Arg Arg Arg Pro Gly Ser
965 970 975
Ser Asp Arg Val Leu Phe Ala Arg Phe Ser Lys Thr Glu Gly Gly Ala
980 985 990
Arg Arg Ala Ser Pro Asp Gln Glu Ala Glu Asp Leu Trp Leu Ser Pro
995 1000 1005
Leu Thr Met Glu Asp Leu Val Cys Tyr Ser Phe Gln Val Ala Arg
1010 1015 1020
Gly Met Glu Phe Leu Ala Ser Arg Lys Cys Ile His Arg Asp Leu
1025 1030 1035
Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu Ser Glu Ser Asp Val Val Lys Ile
1040 1045 1050
Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp Ile Tyr Lys Asp Pro Asp Tyr
1055 1060 1065
Val Arg Lys Gly Ser Ala Arg Leu Pro Leu Lys Trp Met Ala Pro
1070 1075 1080
Glu Ser Ile Phe Asp Lys Val Tyr Thr Thr Gln Ser Asp Val Trp
1085 1090 1095
Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu Ile Phe Ser Leu Gly Ala Ser
1100 1105 1110
Pro Tyr Pro Gly Val Gln Ile Asn Glu Glu Phe Cys Gln Arg Leu
1115 1120 1125
Arg Asp Gly Thr Arg Met Arg Ala Pro Glu Leu Ala Thr Pro Ala
1130 1135 1140
Ile Arg Arg Ile Met Leu Asn Cys Trp Ser Gly Asp Pro Lys Ala
1145 1150 1155
Arg Pro Ala Phe Ser Glu Leu Val Glu Ile Leu Gly Asp Leu Leu
1160 1165 1170
Gln Gly Arg Gly Leu Gln Glu Glu Glu Glu Val Cys Met Ala Pro
1175 1180 1185
Arg Ser Ser Gln Ser Ser Glu Glu Gly Ser Phe Ser Gln Val Ser
1190 1195 1200
Thr Met Ala Leu His Ile Ala Gln Ala Asp Ala Glu Asp Ser Pro
1205 1210 1215
Pro Ser Leu Gln Arg His Ser Leu Ala Ala Arg Tyr Tyr Asn Trp
1220 1225 1230
Val Ser Phe Pro Gly Cys Leu Ala Arg Gly Ala Glu Thr Arg Gly
1235 1240 1245
Ser Ser Arg Met Lys Thr Phe Glu Glu Phe Pro Met Thr Pro Thr
1250 1255 1260
Thr Tyr Lys Gly Ser Val Asp Asn Gln Thr Asp Ser Gly Met Val
1265 1270 1275
Leu Ala Ser Glu Glu Phe Glu Gln Ile Glu Ser Arg His Arg Gln
1280 1285 1290
Glu Ser Gly Phe Ser Cys Lys Gly Pro Gly Gln Asn Val Ala Val
1295 1300 1305
Thr Arg Ala His Pro Asp Ser Gln Gly Arg Arg Arg Arg Pro Glu
1310 1315 1320
Arg Gly Ala Arg Gly Gly Gln Val Phe Tyr Asn Ser Glu Tyr Gly
1325 1330 1335
Glu Leu Ser Glu Pro Ser Glu Glu Asp His Cys Ser Pro Ser Ala
1340 1345 1350
Arg Val Thr Phe Phe Thr Asp Asn Ser Tyr
1355 1360
<210> 4
<211> 232
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
Met Asn Phe Leu Leu Ser Trp Val His Trp Ser Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Tyr Leu His His Ala Lys Trp Ser Gln Ala Ala Pro Met Ala Glu Gly
20 25 30
Gly Gly Gln Asn His His Glu Val Val Lys Phe Met Asp Val Tyr Gln
35 40 45
Arg Ser Tyr Cys His Pro Ile Glu Thr Leu Val Asp Ile Phe Gln Glu
50 55 60
Tyr Pro Asp Glu Ile Glu Tyr Ile Phe Lys Pro Ser Cys Val Pro Leu
65 70 75 80
Met Arg Cys Gly Gly Cys Cys Asn Asp Glu Gly Leu Glu Cys Val Pro
85 90 95
Thr Glu Glu Ser Asn Ile Thr Met Gln Ile Met Arg Ile Lys Pro His
100 105 110
Gln Gly Gln His Ile Gly Glu Met Ser Phe Leu Gln His Asn Lys Cys
115 120 125
Glu Cys Arg Pro Lys Lys Asp Arg Ala Arg Gln Glu Lys Lys Ser Val
130 135 140
Arg Gly Lys Gly Lys Gly Gln Lys Arg Lys Arg Lys Lys Ser Arg Tyr
145 150 155 160
Lys Ser Trp Ser Val Tyr Val Gly Ala Arg Cys Cys Leu Met Pro Trp
165 170 175
Ser Leu Pro Gly Pro His Pro Cys Gly Pro Cys Ser Glu Arg Arg Lys
180 185 190
His Leu Phe Val Gln Asp Pro Gln Thr Cys Lys Cys Ser Cys Lys Asn
195 200 205
Thr Asp Ser Arg Cys Lys Ala Arg Gln Leu Glu Leu Asn Glu Arg Thr
210 215 220
Cys Arg Cys Asp Lys Pro Arg Arg
225 230
<210> 5
<211> 207
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
Met Ser Pro Leu Leu Arg Arg Leu Leu Leu Ala Ala Leu Leu Gln Leu
1 5 10 15
Ala Pro Ala Gln Ala Pro Val Ser Gln Pro Asp Ala Pro Gly His Gln
20 25 30
Arg Lys Val Val Ser Trp Ile Asp Val Tyr Thr Arg Ala Thr Cys Gln
35 40 45
Pro Arg Glu Val Val Val Pro Leu Thr Val Glu Leu Met Gly Thr Val
50 55 60
Ala Lys Gln Leu Val Pro Ser Cys Val Thr Val Gln Arg Cys Gly Gly
65 70 75 80
Cys Cys Pro Asp Asp Gly Leu Glu Cys Val Pro Thr Gly Gln His Gln
85 90 95
Val Arg Met Gln Ile Leu Met Ile Arg Tyr Pro Ser Ser Gln Leu Gly
100 105 110
Glu Met Ser Leu Glu Glu His Ser Gln Cys Glu Cys Arg Pro Lys Lys
115 120 125
Lys Asp Ser Ala Val Lys Pro Asp Arg Ala Ala Thr Pro His His Arg
130 135 140
Pro Gln Pro Arg Ser Val Pro Gly Trp Asp Ser Ala Pro Gly Ala Pro
145 150 155 160
Ser Pro Ala Asp Ile Thr His Pro Thr Pro Ala Pro Gly Pro Ser Ala
165 170 175
His Ala Ala Pro Ser Thr Thr Ser Ala Leu Thr Pro Gly Pro Ala Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Asp Ala Ala Ala Ser Ser Val Ala Lys Gly Gly Ala
195 200 205
<210> 6
<211> 419
<212> PRT
<213> 智人
<400> 6
Met His Leu Leu Gly Phe Phe Ser Val Ala Cys Ser Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ala Leu Leu Pro Gly Pro Arg Glu Ala Pro Ala Ala Ala Ala Ala Phe
20 25 30
Glu Ser Gly Leu Asp Leu Ser Asp Ala Glu Pro Asp Ala Gly Glu Ala
35 40 45
Thr Ala Tyr Ala Ser Lys Asp Leu Glu Glu Gln Leu Arg Ser Val Ser
50 55 60
Ser Val Asp Glu Leu Met Thr Val Leu Tyr Pro Glu Tyr Trp Lys Met
65 70 75 80
Tyr Lys Cys Gln Leu Arg Lys Gly Gly Trp Gln His Asn Arg Glu Gln
85 90 95
Ala Asn Leu Asn Ser Arg Thr Glu Glu Thr Ile Lys Phe Ala Ala Ala
100 105 110
His Tyr Asn Thr Glu Ile Leu Lys Ser Ile Asp Asn Glu Trp Arg Lys
115 120 125
Thr Gln Cys Met Pro Arg Glu Val Cys Ile Asp Val Gly Lys Glu Phe
130 135 140
Gly Val Ala Thr Asn Thr Phe Phe Lys Pro Pro Cys Val Ser Val Tyr
145 150 155 160
Arg Cys Gly Gly Cys Cys Asn Ser Glu Gly Leu Gln Cys Met Asn Thr
165 170 175
Ser Thr Ser Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Phe Glu Ile Thr Val Pro Leu
180 185 190
Ser Gln Gly Pro Lys Pro Val Thr Ile Ser Phe Ala Asn His Thr Ser
195 200 205
Cys Arg Cys Met Ser Lys Leu Asp Val Tyr Arg Gln Val His Ser Ile
210 215 220
Ile Arg Arg Ser Leu Pro Ala Thr Leu Pro Gln Cys Gln Ala Ala Asn
225 230 235 240
Lys Thr Cys Pro Thr Asn Tyr Met Trp Asn Asn His Ile Cys Arg Cys
245 250 255
Leu Ala Gln Glu Asp Phe Met Phe Ser Ser Asp Ala Gly Asp Asp Ser
260 265 270
Thr Asp Gly Phe His Asp Ile Cys Gly Pro Asn Lys Glu Leu Asp Glu
275 280 285
Glu Thr Cys Gln Cys Val Cys Arg Ala Gly Leu Arg Pro Ala Ser Cys
290 295 300
Gly Pro His Lys Glu Leu Asp Arg Asn Ser Cys Gln Cys Val Cys Lys
305 310 315 320
Asn Lys Leu Phe Pro Ser Gln Cys Gly Ala Asn Arg Glu Phe Asp Glu
325 330 335
Asn Thr Cys Gln Cys Val Cys Lys Arg Thr Cys Pro Arg Asn Gln Pro
340 345 350
Leu Asn Pro Gly Lys Cys Ala Cys Glu Cys Thr Glu Ser Pro Gln Lys
355 360 365
Cys Leu Leu Lys Gly Lys Lys Phe His His Gln Thr Cys Ser Cys Tyr
370 375 380
Arg Arg Pro Cys Thr Asn Arg Gln Lys Ala Cys Glu Pro Gly Phe Ser
385 390 395 400
Tyr Ser Glu Glu Val Cys Arg Cys Val Pro Ser Tyr Trp Lys Arg Pro
405 410 415
Gln Met Ser
<210> 7
<211> 354
<212> PRT
<213> 智人
<400> 7
Met Tyr Arg Glu Trp Val Val Val Asn Val Phe Met Met Leu Tyr Val
1 5 10 15
Gln Leu Val Gln Gly Ser Ser Asn Glu His Gly Pro Val Lys Arg Ser
20 25 30
Ser Gln Ser Thr Leu Glu Arg Ser Glu Gln Gln Ile Arg Ala Ala Ser
35 40 45
Ser Leu Glu Glu Leu Leu Arg Ile Thr His Ser Glu Asp Trp Lys Leu
50 55 60
Trp Arg Cys Arg Leu Arg Leu Lys Ser Phe Thr Ser Met Asp Ser Arg
65 70 75 80
Ser Ala Ser His Arg Ser Thr Arg Phe Ala Ala Thr Phe Tyr Asp Ile
85 90 95
Glu Thr Leu Lys Val Ile Asp Glu Glu Trp Gln Arg Thr Gln Cys Ser
100 105 110
Pro Arg Glu Thr Cys Val Glu Val Ala Ser Glu Leu Gly Lys Ser Thr
115 120 125
Asn Thr Phe Phe Lys Pro Pro Cys Val Asn Val Phe Arg Cys Gly Gly
130 135 140
Cys Cys Asn Glu Glu Ser Leu Ile Cys Met Asn Thr Ser Thr Ser Tyr
145 150 155 160
Ile Ser Lys Gln Leu Phe Glu Ile Ser Val Pro Leu Thr Ser Val Pro
165 170 175
Glu Leu Val Pro Val Lys Val Ala Asn His Thr Gly Cys Lys Cys Leu
180 185 190
Pro Thr Ala Pro Arg His Pro Tyr Ser Ile Ile Arg Arg Ser Ile Gln
195 200 205
Ile Pro Glu Glu Asp Arg Cys Ser His Ser Lys Lys Leu Cys Pro Ile
210 215 220
Asp Met Leu Trp Asp Ser Asn Lys Cys Lys Cys Val Leu Gln Glu Glu
225 230 235 240
Asn Pro Leu Ala Gly Thr Glu Asp His Ser His Leu Gln Glu Pro Ala
245 250 255
Leu Cys Gly Pro His Met Met Phe Asp Glu Asp Arg Cys Glu Cys Val
260 265 270
Cys Lys Thr Pro Cys Pro Lys Asp Leu Ile Gln His Pro Lys Asn Cys
275 280 285
Ser Cys Phe Glu Cys Lys Glu Ser Leu Glu Thr Cys Cys Gln Lys His
290 295 300
Lys Leu Phe His Pro Asp Thr Cys Ser Cys Glu Asp Arg Cys Pro Phe
305 310 315 320
His Thr Arg Pro Cys Ala Ser Gly Lys Thr Ala Cys Ala Lys His Cys
325 330 335
Arg Phe Pro Lys Glu Lys Arg Ala Ala Gln Gly Pro His Ser Arg Lys
340 345 350
Asn Pro
<210> 8
<211> 221
<212> PRT
<213> 智人
<400> 8
Met Pro Val Met Arg Leu Phe Pro Cys Phe Leu Gln Leu Leu Ala Gly
1 5 10 15
Leu Ala Leu Pro Ala Val Pro Pro Gln Gln Trp Ala Leu Ser Ala Gly
20 25 30
Asn Gly Ser Ser Glu Val Glu Val Val Pro Phe Gln Glu Val Trp Gly
35 40 45
Arg Ser Tyr Cys Arg Ala Leu Glu Arg Leu Val Asp Val Val Ser Glu
50 55 60
Tyr Pro Ser Glu Val Glu His Met Phe Ser Pro Ser Cys Val Ser Leu
65 70 75 80
Leu Arg Cys Thr Gly Cys Cys Gly Asp Glu Asn Leu His Cys Val Pro
85 90 95
Val Glu Thr Ala Asn Val Thr Met Gln Leu Leu Lys Ile Arg Ser Gly
100 105 110
Asp Arg Pro Ser Tyr Val Glu Leu Thr Phe Ser Gln His Val Arg Cys
115 120 125
Glu Cys Arg His Ser Pro Gly Arg Gln Ser Pro Asp Met Pro Gly Asp
130 135 140
Phe Arg Ala Asp Ala Pro Ser Phe Leu Pro Pro Arg Arg Ser Leu Pro
145 150 155 160
Met Leu Phe Arg Met Glu Trp Gly Cys Ala Leu Thr Gly Ser Gln Ser
165 170 175
Ala Val Trp Pro Ser Ser Pro Val Pro Glu Glu Ile Pro Arg Met His
180 185 190
Pro Gly Arg Asn Gly Lys Lys Gln Gln Arg Lys Pro Leu Arg Glu Lys
195 200 205
Met Lys Pro Glu Arg Cys Gly Asp Ala Val Pro Arg Arg
210 215 220

Claims (42)

1.一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约45秒至约60分钟的胶凝时间。
2.一种聚合物组合物，其包括：
按所述聚合物组合物的重量计约5％至约15％的官能聚合物，其中所述官能聚合物包括第一官能团；
按所述聚合物组合物的重量计约0.05％至约0.6％的交联剂，其中所述交联剂包括第二官能团；和
水，
其中在所述第一官能团和所述第二官能团之间可以发生交联反应以形成凝胶，并且其中所述聚合物组合物在约37℃的温度下具有约10秒至约30分钟的胶凝时间。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的聚合物组合物，其中所述凝胶当在中耳中形成时具有至少5天的停留时间。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在37℃下具有至少5天的胶凝持续时间。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约5.5至约8.5的pH。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中平衡持续1天后溶胀小于100％。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶是弹性的。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶是粘膜粘附性的。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物具有约1mPa·s至约1000mPa·s的粘度。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约6％至约12％的所述官能聚合物。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物包括按所述聚合物组合物的重量计约0.1％至约0.3％的所述交联剂。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的聚合物组合物，其中所述聚合物组合物在约20℃的温度下具有约8分钟至约12分钟的胶凝时间。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约300mOsmol/kg至约600mOsmol/kg的摩尔渗透压质量浓度。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的聚合物组合物，其中所述凝胶具有约6.0至约6.5的pH。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团与所述第二官能团的比率为约0.8∶1.2至约1.2：0.8。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团与所述第二官能团的比率为约1∶1。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的聚合物组合物，其中所述第一官能团包括琥珀酰亚胺酯。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的聚合物组合物，其中所述官能团选自由琥珀酰亚胺基琥珀酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酸酯、琥珀酰亚胺基己二酸酯、琥珀酰亚胺基戊二酰胺、琥珀酰亚胺基碳酸酯、琥珀酰亚胺基羧甲基酯或其组合组成的组。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的聚合物组合物，其中所述第二官能团包括伯胺。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的聚合物组合物，其中所述官能聚合物为季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的聚合物组合物，其中所述交联剂包括聚赖氨酸或其盐。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的聚合物组合物，其中所述交联剂包括三赖氨酸或其盐。
23.一种延长释放耳用组合物，其包括：
根据权利要求1至22中任一项所述的聚合物组合物；和
活性剂。
24.根据权利要求23所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂选自由治疗剂、预防剂、诊断剂或可视化剂及其组合组成的组。
25.根据权利要求24所述的延长释放耳用组合物，其中所述治疗剂或预防剂选自由蛋白质、碳水化合物、核酸、小分子及其组合组成的组。
26.根据权利要求23至25中任一项所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂是酪氨酸激酶抑制剂。
27.根据权利要求23至26中任一项所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括糖皮质激素。
28.根据权利要求27所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂包括地塞米松。
29.根据权利要求23至28中任一项所述的延长释放耳用组合物，其中所述活性剂以按所述聚合物组合物的重量计约1％至约15％的量存在。
30.一种延长释放耳用组合物，其包括：
约5％至约15％的季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯；
按重量计约0.05％至约0.6％的三赖氨酸或其盐；
按重量计约0.01％至约40％的地塞米松；和
水。
31.一种延长释放耳用组合物，其包括：
约8.3％的季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亚胺基戊二酸酯；
按重量计约0.2％的三赖氨酸或其盐；
按重量计约6％的地塞米松；和
水。
32.根据权利要求30或权利要求31所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约0.01％至约3.0％的十水合硼酸钠；
按重量计约0.01％至约3.0％的磷酸钠；
按重量计约0.01％至约3.0％的磷酸；
约0％至约0.5％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0％至约0.01％的丁基化羟基甲苯。
33.根据权利要求30或权利要求31所述的延长释放耳用组合物，其进一步包括：
按重量计约1.2％的十水合硼酸钠；
按重量计约1.1％至约3.0％的磷酸钠；
按重量计约0.9％至约3.0％的磷酸；
约0.01％的FD&C Blue#1；和
按重量计约0.002％的丁基化羟基甲苯。
34.一种根据权利要求1至22中任一项所述的聚合物组合物或根据权利要求23至33中任一项所述的延长释放耳用组合物形成的凝胶。
35.一种包括根据权利要求23至33中任一项所述的延长释放耳用组合物的药物的制造，用于治疗耳部疾病或病症。
36.一种治疗受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
鉴定受试者患有耳部疾病或病症；并且
将治疗有效量的根据权利要求23至33中任一项所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
37.一种治疗有需要的受试者的耳部疾病或病症的方法，所述方法包括：
将治疗有效量的根据权利要求23至33中任一项所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的耳朵。
38.根据权利要求36至37中任一项所述的方法，其中所述耳部疾病或病症选自由梅尼埃病(MD)、自身免疫性内耳疾病(AIED)、突发性感觉神经性听力损失(SSNHL)、噪声引起的听力损失(NIHL)、年龄相关的听力损失、与糖尿病相关的感觉神经性听力损失、耳鸣、由自身免疫性病症引起的纤毛损伤、由感染引起的纤毛损伤、由过多的流体或压力引起的纤毛损伤、由于化疗引起的听力损失及其组合组成的组。
39.一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
将治疗有效量的根据权利要求23至33中任一项所述的延长释放耳用组合物施用于有需要的受试者的耳朵。
40.一种治疗受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括：
(i)鉴定受试者患有梅尼埃病；
(ii)将治疗有效量的根据权利要求80至124中任一项所述的延长释放耳用组合物施用于所述受试者的受影响的耳朵。
41.根据权利要求36至40中任一项所述的方法，其中所述施用包括施用约40μL至约60μL的所述延长释放耳用组合物。
42.根据权利要求36至40中任一项所述的方法，其中所述施用包括施用使得所述延长释放耳用组合物与圆窗膜接触。
CN202180034930.7A 2020-05-13 2021-05-12 用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液 Pending CN115666511A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063024232P 2020-05-13 2020-05-13
US63/024,232 2020-05-13
PCT/US2021/031977 WO2021231563A1 (en) 2020-05-13 2021-05-12 Gelling solutions for administration of compounds to the inner ear

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115666511A true CN115666511A (zh) 2023-01-31

Family

ID=78524937

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180034930.7A Pending CN115666511A (zh) 2020-05-13 2021-05-12 用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20230183475A1 (zh)
EP (1) EP4149431A1 (zh)
JP (1) JP2023526244A (zh)
CN (1) CN115666511A (zh)
WO (1) WO2021231563A1 (zh)

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6703047B2 (en) * 2001-02-02 2004-03-09 Incept Llc Dehydrated hydrogel precursor-based, tissue adherent compositions and methods of use
JP2007513083A (ja) * 2003-11-10 2007-05-24 アンジオテック インターナショナル アーゲー 医療用移植片および繊維誘発剤
WO2006135479A2 (en) * 2005-05-10 2006-12-21 Angiotech International Ag Anti-scarring agents, therapeutic compositions, and use thereof
CA2635374C (en) * 2006-01-11 2015-12-08 Hyperbranch Medical Technology, Inc. Crosslinked gels comprising polyalkyleneimines, and their uses as medical devices
US8496957B2 (en) * 2008-07-21 2013-07-30 Otonomy, Inc Controlled release auris sensory cell modulator compositions and methods for the treatment of otic disorders
CN102112112A (zh) * 2008-07-21 2011-06-29 奥德纳米有限公司 用于治疗耳部病症的受控释放抗微生物组合物和方法
CA2730598C (en) * 2010-03-16 2018-03-13 Confluent Surgical, Inc. Modulating drug release rate by controlling the kinetics of the ph transition in hydrogels
RU2593755C2 (ru) * 2011-01-04 2016-08-10 Бендер Аналитикал Холдинг Б.В. Сшитые полимеры и имплантаты, произведенные из электрофильно активированного полиоксазолина
US10561736B1 (en) * 2019-01-09 2020-02-18 Spiral Therapeutics, Inc. Apoptosis inhibitor formulations for prevention of hearing loss
US20200214976A1 (en) * 2019-01-09 2020-07-09 Spiral Therapeutics, Inc. Self-gelling solutions for administration of therapeutics to the inner ear

Also Published As

Publication number Publication date
US20230183475A1 (en) 2023-06-15
JP2023526244A (ja) 2023-06-21
WO2021231563A9 (en) 2023-05-11
EP4149431A1 (en) 2023-03-22
WO2021231563A1 (en) 2021-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2016261925B2 (en) Drug delivery from hydrogels
JP7092502B2 (ja) ハイドロゲル薬物送達インプラント
AU2017331444B2 (en) Intracameral drug delivery depots
JP6199883B2 (ja) 医療用オルガノゲルプロセス及び組成物
JP7023461B2 (ja) 耳の疾病の処置のためのｔｒｋｂ又はｔｒｋｃアゴニスト組成物及び方法
US10195212B2 (en) Glucocorticoid-loaded nanoparticles for prevention of corneal allograft rejection and neovascularization
CN115461040A (zh) 含有酪氨酸激酶抑制剂的眼用植入物
Creber et al. Adjuvant agents enhance round window membrane permeability to dexamethasone and modulate basal to apical cochlear gradients
ES2952213T3 (es) Composiciones y métodos para tratar enfermedades oculares
Ghezzi et al. Hyaluronic acid–PVA films for the simultaneous delivery of dexamethasone and levofloxacin to ocular tissues
CN115666511A (zh) 用于将化合物施用于内耳的胶凝化溶液
P Venkatesh et al. In situ gels based drug delivery systems
CN114222589A (zh) 耳内给药用药物组合物
CN116133664A (zh) 含有糖皮质激素的眼部插入物
EP4103197A1 (en) Treatment of otic diseases and conditions

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination