CN115628958B - 一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品及其制备方法，制备方法包括以下步骤：步骤一，选择养殖至产蛋期的褐壳蛋鸡，通过饮水给药的方式进行施药，金刚乙胺施药浓度为0.2g/L，连续施药三天；步骤二，施药结束后的第3天，采集排泄物；步骤三，对采集的排泄物进行超声浸提、低温离心和净化处理，获得含有金刚乙胺成分的净化液；步骤四，采用人工破壳的方式收集蛋液，按1：1的重量比添加蒸馏水，制备稀释蛋液；步骤五，向稀释蛋液中添加净化液，获得全蛋液，利用复合酶对全蛋液进行酶解、配料，获得处理后的全蛋液。本发明制备的基质标准样品经过了严格的均稳性检验，具有均匀性好、稳定性高的优点。

Description

一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品及其制备方法，属于食品检测技术领域。

背景技术

金刚乙胺（RIM）是一种白色晶状粉末，可溶于水或甲醇、氯仿等有机溶剂，是一种金刚烷胺的衍生物。金刚乙胺可用于预防和治疗甲型流感，由于其价格低廉、效果良好，被大量用于动物疾病的预防和治疗。但金刚乙胺的使用具有一定的副作用，有研究表明，金刚乙胺药物残留通过食物链进入人体后，可在人体富集，会对机体造成一系列的毒副作用，例如头晕，抑郁，食欲减退等，也会对人的神经系统造成危害。我国自2005年起，已明令禁止金刚烷类药物的使用，但部分养殖场药物滥用情况仍时有发生。随着人们健康意识的提高，食品中的各种农药残留也成为全社会共同关注的食品安全问题。

我国是鸡蛋生产与消费第一大国，禽蛋总产量已连续10余年稳居世界首位，人均占有量也大大超过了世界平均水平。我国蛋制品加工生产起步较晚，绝大多数鸡蛋以满足内需市场为主。为对鸡蛋产品质量进行把控，因此对鸡蛋粉中金刚乙胺的检测是十分必要的。目前的检测中所用的质控手段是将鸡蛋样品添加纯度金刚乙胺标准物质后进行检测分析，但这种方式无法体现金刚乙胺在鸡蛋内部的富集状态，且金刚乙胺标物的配制、加标等过程根据不同检测人员的手法有所不同，检测方法的准确性不能得到保证。因此需要研发一种以鸡蛋为基体的金刚乙胺标准样品作为检测待测鸡蛋中金刚乙胺的质控手段。

发明内容

本发明的目的是，针对现有技术存在的问题，本发明提供一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品的制备方法，该法通过饮水给药的方式对蛋鸡进行施药，再收集排泄物中金刚乙胺成分，将金刚乙胺成分与蛋液混合后，经酶解、反渗透、冷冻干燥、粉碎混匀、过筛包装等一系列步骤制成，最终获得的标准样品经过了严格的均稳性检验，具有均匀性好、稳定性高的优点。

本发明的另一目的是，提供一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品，该标准样品经过了严格的均稳性检验，具有均匀性好、稳定性高的优点。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

本发明提供的含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品，所述标准样品的制备方法包括如下步骤：

步骤一，对褐壳蛋鸡采用进采用饮水给药，进行喂养，饮水给药浓度为0.2g/L的金刚乙胺水溶液，连续给药时间为3天。

步骤二，停药后第3天采集鸡的排泄物；排泄物包括鸡的尿液和粪便。

步骤三，对步骤二采集的排泄物进行处理，具体为超声浸提、低温离心、净化，获得含有金刚乙胺成分的净化液。

步骤四，采用人工破壳的方式收集蛋液，按1：1比例（重量比）添加蒸馏水，在400r/min下搅拌2小时，制备稀释蛋液。

鸡蛋采用市售褐壳蛋，不是通过给药的鸡收集的鸡蛋，极大的缩减样品制备时间。

步骤五，向稀释蛋液中添加步骤三获得的净化液，获得全蛋液，利用复合酶对全蛋液进行酶解，酶解12h后添加配料进行搅拌，1000r/min下搅拌3h，获得处理后的全蛋液；每kg步骤四获得的稀释蛋液中添加25mL净化液。

酶解温度为40℃，需要进行搅拌，搅拌转速为500r/min。

步骤六，对处理后的全蛋液进行反向渗透处理，获得减水全蛋液。

步骤七，将减水全蛋液在冻干盘上均匀铺开，进行冷冻干燥，冻干程序为-80℃冰箱预冻12h、-40℃冷冻干燥2h、-30℃冷冻干燥6h、-20℃冷冻干燥10h、-10℃冷冻干燥10h、0℃冷冻干燥8h、10℃冷冻干燥8h、20℃冷冻干燥8h，获得干燥蛋粉。

步骤八、将步骤七获得的干燥蛋粉移入刀质粉碎机中，以2000r/min，粉碎20-50min，粉碎成粉末，过30目筛子，筛下物用高效混合机以1000r/min混合20-60min，获得含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品。

步骤九，将步骤八获得的含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品用铝箔袋进行真空包装，置于-18℃下冷藏保存。

优选地，步骤三中，超声浸提所用的溶剂为0.1%甲酸水溶液，超声频率为100mHz，超声30min；0.1%甲酸水溶液的用量为2mL/g排泄物；超声浸提结束后，浸提液于7000r/min低温离心20min，低温离心的温度为2℃；离心完成后，取上清液（即离心液），在上清液中添加C18（即十八烷基键合相硅胶）和PSA混合填料净化；C18和PSA填料的比例为3：1（重量比），混合填料的添加量为40mg/mL离心液。

净化时间为30min，采用的方式为涡旋震荡。

优选地，步骤五中，所用的配料中包含比例为2:3:5（重量比）的氯化钠、氯化钙和黄原胶混合物，混合物的添加量相当于全蛋液的1.5%（重量比）。复合酶为葡萄糖氧化酶（10000U/g）和磷脂酶A1（5000U/g），复合酶添加量相当于全蛋液的0.25%（重量比），葡萄糖氧化酶和磷脂酶A1的比例为3：7（重量比）。

优选地，步骤六中，采用反渗透装置除去全蛋液中的部分水分，反设置的反渗透装置压力为3MPa，室温进行。

本发明具有以下有益效果：

本发明提供了一种鸡蛋中金刚乙胺基质标准样品的制备方法，通过饮水给药的方式对蛋鸡进行施药，再收集排泄物中金刚乙胺成分，将金刚乙胺成分与蛋液混合后，经酶解、反渗透、冷冻干燥、粉碎混匀、过筛包装等一系列步骤制成。本发明制备的基质标准样品经过了严格的均稳性检验，具有均匀性好、稳定性高的优点。经检验证明，本标准样品在不同情况下运输均可以保证产品质量，满足不同区域的运输要求，保质期长，是一种有效可靠的实体标准样品，可用于相关的检测分析领域的质量控制，还可作为一种手段对参加检测的实验室或技术人员的分析能力进行认证考核，具有显著的经济价值和市场竞争力。

本发明填补了我国目前没有含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品的空白，本发明的标准样品主要应用于实验室能力验证、内部质控、方法验证等活动；有助于实验室质量控制，使定量检测结果准确性得到保证；有助于加强鸡蛋生产质量安全控制，提升检验检测机构检测水平。

均匀性是标准物质的基本属性。真实的实物标准样品由于其制备方法困难，投入资金高，投入时间长，目标成分代谢规律不明确等等多种因素影响，要获得均匀性合格的标准样品比较困难。而本发明确定了在规定的前提条件下，在第三天进行样品采集，通过添加配料、复合酶酶解和反渗透工艺制备的样品能够获得较好的均匀性。

稳定性也是标准物质的基本属性，标准样品从制备到使用涉及贮存和运输过程，这可能会导致标准样品稳定性的变化，因此需要进行两方面的稳定性评估，一是依据样品包装和运输的形式，选择短期稳定性评估的温度。通常是在不同的温度条件下进行，考察温度对于标准物质特性值的影响；二是在规定的贮存条件下，在较长周期内定期对标准物质特性值进行检测，考察其保持在规定范围内的能力。按本发明制备的基质标准样品短期稳定性和长期稳定性均符合要求，在-18℃储存环境下有效期为6个月。

本发明实施例1样品经8家实验室检测，确定标准值为121.8μg/kg；本样品还可以用于考察实验室检测能力水平，通过34家实验室检测结果，并计算Z值，从而判定实验室检测能力是否达标。

附图说明

图1为金刚乙胺在鸡蛋粉基质标准样品中的MRM图谱；

图2为美金刚-D₆在鸡蛋粉基质标准样品中的MRM图谱。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

在不同工艺参数下制备含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品：

A组：一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品的制备方法，其具体制备方法如下：

选择目前饲养量最大的褐壳蛋鸡为对象，在养殖至产蛋期后，通过饮水给药的方法进行施药，金刚乙胺施药浓度为0.2g/L，连续施药三天。施药结束后的第3天进行采集排泄物，向排泄物中添加0.1%甲酸水溶液，0.1%甲酸水溶液的用量为2mL/g排泄物，在超声频率为100mHz下超声30min，冷冻离心机7000r/min于2℃低温离心20min，添加C18和PSA混合填料净化，净化时间为30min，采用的方式为涡旋震荡；C18和PSA填料的比例为3：1（重量比），混合填料的添加量为40mg/mL离心液。采用人工破壳收集蛋液于不锈钢容器内，按1：1比例（重量比）添加蒸馏水，在400r/min下搅拌2小时后，添加净化液，每kg稀释蛋液中添加25mL净化液，用重量比例为3:7的葡萄糖氧化酶（10000U/g）和磷脂酶A1（5000U/g）复合酶解12h，酶解温度为40℃，酶解时搅拌转速为500r/min，复合酶添加重量相当于全蛋液的0.25%，酶解12h后添加配料进行搅拌，1000r/min下搅拌3h，配料为比例为2:3:5（重量比）的氯化钠、氯化钙和黄原胶混合物，添加量相当于全蛋液的1.5%（重量比）。再对全蛋液进行反向渗透处理，反渗透装置压力为3MPa，室温进行。

将蛋液在冻干盘上均匀铺开，按-80℃冰箱预冻12h、-40℃冷冻干燥2h、-30℃冷冻干燥6h、-20℃冷冻干燥10h、-10℃冷冻干燥10h、0℃冷冻干燥8h、10℃冷冻干燥8h、20℃冷冻干燥8h的顺序对浆液进行冷冻干燥，将样品移入刀质粉碎机中以2000r/min，粉碎20min制成粉末，再过30目筛子，用高效混合机1000r/min混合40min，使样品充分均匀。用铝箔袋进行真空包装，每袋质量10g，置于-18℃下冷藏保存。

B组：与A组不同的是，B组的采样时间为7天。C组：与A组不同的是，C组样品不进行反渗透操作。

D组：将本标准样品与鸡蛋样品直接加标进行对照，具体做法为：鸡蛋样品为已验证不含金刚乙胺的空白样品，添加与本标准样品同浓度的金刚乙胺标准溶液，由10名不同的操作人员在重复性条件下进行6次平行测定，以精密度作为判断标准。

均匀性检验：

对上述各组样品进行均匀性检验。检测方法采用《SN/T出口动物组织中抗病毒类药物残留量的测定》。统计方法采用单因子方差统计分析法，通过采用F检验对三个水平样品进行均匀性检验。具体方法为从上述各组制备的样品中随机抽取30袋，每个样品作为独立子样进行检测，每个子样也需进行三次平行结果测定，实验结果取平行测量的平均值。所有样品以随机次序在重复性条件下进行测试。

检验结果见表1-表3。

表1 A组样品均匀性评估测量结果记录表

表2 B组样品均匀性评估测量结果记录表

表3 C组样品均匀性评估测量结果记录表

其中，B组的样品的检测结果低于测定限，表明金刚乙胺在该条件下（采样时间为7天）降解程度过大，因此不具备作为标准样品的价值。将上述数据进行单因素方差分析，可得出以下方差分析结果：在置信概率为0.95，自由度f1=29，f2=60情况下，通过F检验表可以得出，F0.05（29，60）=1.66，A组样品F值=1.35<临界值F0.05（29，60），表明A组样品的组内和组间没有显著性差异，样品是均匀的，具备作为质量控制样品的要求。而C组样品中的F值大于临界值F0.05（29，60），表明样品是不均匀的。

稳定性检验：

对满足均匀性要求的样品进行稳定性的检测，选择A组的样品进行实验。根据《JJF1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》确定稳定性检验的统计方法为t分析检验法，采用特性值随时间变化曲线来判断样品特性值是否具有单方向变化趋势，用线性拟合模型评估标准样品的稳定性。稳定性检测包含两个方面：长期稳定性（贮藏稳定性）和短期稳定性（运输稳定性）。按照先密后疏的抽样原则进行抽样，其中短期稳定性共设置6个取样时间点，4℃、20℃、50℃贮藏，长期稳定性检测共设置6个取样时间点，-18℃贮藏。每个取样时间点随机抽取A组的3个样品，每个样品做两次平行，取三个子样的平均值来分析A组样品中目标物的含量。

检验结果见表4-表7。

表4 4℃下A组样品中金刚乙胺残留量短期稳定性结果

表5 20℃下A组样品中金刚乙胺残留量短期稳定性结果

表6 50℃下A组样品中金刚乙胺残留量短期稳定性结果

表7 A组样品中金刚乙胺残留量长期稳定性结果

从表4-表7可以看出，采用本发明方法制备的含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品在短期稳定性和六个月的长期稳定性考察中|b1|均小于t_0.95，n-2×s(b1)，该基质标准样品中的金刚乙胺的含量趋于稳定，-18℃储存环境下可确定为该基质标准样品的保存环境，有效期为6个月。

定值：

依据《JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》的要求对A组的样品进行定值。采用8家实验室协同定值的方法进行该基质标准样品的定值，参加定值的实验室均为通过资质认定的实验室。定值实验室的检测结果通过夏皮洛-威尔克检验法检测数据是否服从正态分布，其次用格拉布斯检验各实验室内的数据是否有可疑值，采用科克伦检验判断各实验室间的数据是否具有同等精度，在满足上述要求的情况下，数据才具有代表性，方可参与定值结果统计分析。

检验结果见表8-表9。

表8 A组制备的基质标准样品实验室间测定数据

正态性检验采用夏皮洛-威尔克检验法，查表可得W(n，p)=0.842（其中n=10，p=0.95）。由于各家实验室数据的W值均大于0.842。因此可以认为接受各家实验室检测数据为正态分布。

采用格拉布斯检验法检验各实验室组内检测结果是否具有可疑值，由格拉布斯临界值表可知λ_{（0.05,10）}=2.290。结果表明检测结果最大残值绝对值均小于λ_{（0.05,10）}×S，表明各家实验室定值结果之间无异常值，不存在可疑值，因此所有数据予以保留，可参与定值结果统计。

采用科克伦检验判定各家实验室定值结果之间是否等精度。科克伦检验要求C小于等于C_(α,m,n)，表明各组数据平均值间为等精度，否则判定为离群值，计算定值结果时应去除该组数据。查临界表可知，C_(0.05,8,10)=0.2829。表8显示科克伦检验的C值为0.1988，小于临界值，则实验室检测结果组间数据为等精度，所有数据应予以保留，可参与定值结果统计。

表9 8家实验室平均值检验结果

根据《JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》的要求，在对各家实验室定值结果进行可疑值检验、等精度检验之后，还需对各家实验室定值结果的平均值检验是否存在显著性差异，是否满足数据分布的正态性。经计算，8家实验室平均值之间不存在显著性差异且符合正态性检验，数据满足统计要求，则A组制备的基质标准样品的标准值取各家实验室平均结果的均值，即A组制备的基质标准样品的标准值为121.8μg/kg。

不确定度：

根据《JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》，标准物质的定值结果的不确定度由3部分组成：标准物质不均匀性引起的不确定度U_bb、标准物质不稳定性引起的不确定度U_sts、标准物质定值过程引起的不确定度U_char。通过计算各部分的不确定度可以确定合成不确定度U_（y），置信度为95%水平，扩展不确定度U为两倍的合成不确定度：

均匀性引入的不确定度：

根据《JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》，A组样品的瓶内 方差小于样品的瓶间方差

，且由于U_bb＞s₂，因此可估计得到瓶间均匀性标准偏差 s_bb等同于瓶间不均匀性导致的不确定度分量U_bb。故U_bb=2.689μg/kg。

这里的U_bb与表1中的总标准偏差S相同。

稳定性引入的不确定度：

根据《JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理》的要求，A组样品稳定性变化趋势不明显。采用趋势分析法进行稳定性检验时，可按照公式：U_sts=s(β₁)·X计算稳定性引入的不确定度。已知本次标准物质稳定性监测的s(β₁)=0.2905，X=6个月，故U_sts=1.743μg/kg。

定值引入的不确定度：

A组样品定值采用的方式为使用多种已确证准确性的方法，由多个实验室合作定值。每个实验室仅提供一系列的观测值。根据标准要求，原则上，此种定值模式下平均值的标准偏差就是定值不确定度U_char。

A组样品中，s值是八家实验室定值结果均值的标准偏差，为0.5243，p值是参与定值定值实验室总数，为8。经计算，最终得出实验室联合定值引入的标准不确定度U_char=0.1854μg/kg。

故计算可得总合成不确定度为U_（y）为3.2099μg/kg，扩展不确定度U为6.4197μg/kg。A组的鸡蛋粉基质标准样品中金刚乙胺残留量的最终确定的特性值为121.8±6.4197μg/kg（k=2）。

D组样品对比实验结果见表10：

表10 基质加标与标准样品对比实验

通过10名具有资质的检测人员对比实验可以看出，本标准样品比传统的基质加标方法均具有更高的精密度，能够减少实验操作过程所带来的误差。

实验室检测能力验证：

依据ISO/IEC 17043:2010《合格评定-能力验证的通用要求》的要求运作能力验证计划，将A组的样品用于此次能力验证计划。本次计划共有34家实验室参加，各家实验室反馈结果如下表11：

表11 参加者结果和结果评价汇总表

本次能力验证计划按照ISO 13528:2015《利用实验室间比对进行能力验证的统计方法》和CNAS-GL002:2018《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》的要求处理检测结果和评价结果。以Z值反应各实验室检测结果的准确性：∣Z∣≤2.0为满意结果；2.0＜∣Z∣＜3.0为可疑结果；∣Z∣≥3.0为不满意结果（离群值）。各实验室可通过Z值大小来了解自己的技术能力，可通过查找原因达到提高实验室相应的检测能力的目的。

采用稳健统计的稳健平均值作为指定值，稳健标准差作为能力评定标准差。指定值X的不确定度为1.25×能力评定标准差/

。经计算，A组样品的指定值为121.2μg/kg，能力评定标准差为6.81μg/kg，与专家实验室定值结果相近。

采用同位素内标法定量，采用正离子模式进行电离，通过多反应监测（MRM）模式对目标化合物进行测定。

如图1所示，为金刚乙胺在鸡蛋粉基质标准样品中的MRM图谱。

如图2所示，为美金刚-D₆在鸡蛋粉基质标准样品中的MRM图谱。

应当理解，为了精简本公开并帮助理解各个发明方面中的一个或多个，在上面对本发明的示例性实施例的描述中，本发明的各个特征有时被一起分组到单个实施例、图、或者对其的描述中。然而，并不应将该公开的方法解释成反映如下意图：即所要求保护的本发明要求比在每个权利要求中所明确记载的特征更多特征。更确切地说，如权利要求书所反映的那样，发明方面在于少于前面公开的实施例的所有特征。因此，遵循具体实施方式的权利要求书由此明确地并入该具体实施方式，其中每个权利要求本身都作为本发明的单独实施例。

尽管根据有限数量的实施例描述了本发明，但是受益于上面的描述，本技术领域内的技术人员明白，在由此描述的本发明的范围内，可以设想其它实施例。此外，应当注意，本说明书中使用的语言主要是为了可读性和教导的目的而选择的，而不是为了解释或者限定本发明的主题而选择的。因此，在不偏离所附权利要求书的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。对于本发明的范围，对本发明所做的公开是说明性的，而非限制性的，本发明的范围由所附权利要求书限定。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，选择养殖至产蛋期的褐壳蛋鸡，通过饮水给药的方式进行施药，金刚乙胺施药浓度为0.2g/L，连续施药三天；

步骤二，施药结束后的第3天，采集排泄物；

步骤三，对步骤二采集的排泄物进行超声浸提、低温离心和净化处理，获得含有金刚乙胺成分的净化液；

超声浸提、低温离心和净化处理的工艺为：超声浸提所用的溶剂为0.1%甲酸水溶液，超声频率为100mHz，超声30min；0.1%甲酸水溶液的用量为2mL/g排泄物；超声浸提结束后，浸提液于7000r/min低温离心20min，低温离心的温度为2℃；离心完成后，取离心液，在离心液中添加十八烷基键合相硅胶和PSA混合填料净化；十八烷基键合相硅胶和PSA的重量比为3：1，混合填料的添加量为40mg/mL离心液；净化时间为30min，净化时采用涡旋震荡；

步骤四，采用人工破壳的方式收集鸡蛋的蛋液，按1：1的重量比添加蒸馏水，在400 r/min下搅拌2小时，制备稀释蛋液；

步骤五，向稀释蛋液中添加步骤三获得的净化液，每kg稀释蛋液中添加25mL净化液，获得全蛋液，利用复合酶对全蛋液进行酶解，酶解12h后添加配料进行搅拌，1000r/min下搅拌3h，获得处理后的全蛋液；

步骤五中，复合酶为10000U/g的葡萄糖氧化酶和5000U/g的磷脂酶A1，葡萄糖氧化酶和磷脂酶A1的重量比为3：7；复合酶添加量相当于全蛋液重量的0.25%；酶解温度为40℃，酶解时搅拌转速为500r/min；

步骤五中，配料包括重量比为2:3:5的氯化钠、氯化钙和黄原胶混合物，混合物的添加量相当于全蛋液重量的1.5%；

步骤六，对处理后的全蛋液进行反向渗透处理，获得减水全蛋液；

反渗透装置压力为3MPa，室温进行；

步骤七，将减水全蛋液进行冷冻干燥，获得干燥蛋粉；

步骤八，对干燥蛋粉进行粉碎、混匀，获得含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品；

步骤九，将步骤八获得的含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品进行真空包装，置于-18℃下冷藏保存。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，排泄物包括鸡的尿液和粪便。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤四中的鸡蛋为市售褐壳蛋。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤七中，将减水全蛋液在冻干盘上均匀铺开，进行冷冻干燥，冻干程序为-80℃冰箱预冻12h、-40℃冷冻干燥2h、-30℃冷冻干燥6h、-20℃冷冻干燥10h、-10℃冷冻干燥10h、0℃冷冻干燥8h、10℃冷冻干燥8h、20℃冷冻干燥8h，获得干燥蛋粉。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤八中，将干燥蛋粉移入刀质粉碎机中，以2000r/min，粉碎20-50min，粉碎成粉末，过30目筛子，筛下物用高效混合机以1000r/min混合20-60min，获得含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤九中，用铝箔袋进行真空包装。

7.根据权利要求1~6任意一项所述的制备方法获得的含有金刚乙胺的鸡蛋粉基质标准样品。

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