CN115624114A - 一种鲟鱼包被发酵中草药制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于水产饲料添加剂技术领域，具体涉及一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，包括中草药组分，所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。本发明首先确定鲟鱼中草药配方，然后采用混菌异步发酵技术对其进行发酵，最后利用双包被技术对中草药发酵制剂进行包被处理。经实验验证，本发明对中草药中的活性物质起到良好的保护作用，防止不良外界因子的破坏，从而最大限度发挥其药理学功能，对鲟鱼具有良好的促生长和免疫增强的功效。
Description
技术领域
本发明属于水产饲料添加剂技术领域，具体涉及一种鲟鱼包被发酵中草药制剂及其制备方法。
背景技术
鲟鱼是世界上现有寿命长、体形大、最古老的一种淡水鱼类，起源于白垩纪时期，素有“水中活化石”和“水中熊猫”之称，系现存的最为古老生物种群。鲟鱼营养价值高，并具有一定的抗癌和美容效果等特点，其皮、鳍、肉的蛋白质含量高达38.7%、24.70%、19.60%，其鱼油中叶酸和不饱合脂肪酸含量为鱼类之最，具有很高的药用价值和经济效益。鲟鱼具有养殖经济效益好、饲料转化率高、生长快等特点，受到了广泛的关注。然而，随着养殖规模的不断增加，疾病也呈现日益增多的发展趋势，其主要原因在于养殖过程中存在养殖密度过大、过度投喂、病菌感染等因素，对肝脏等免疫器官造成伤害，引起鱼体出现食欲下降、抵抗力差、生长缓慢等临床表现，并滋生疾病造成抗生素和化学药物大量使用，很大程度上已成为制约鲟鱼产业健康发展的瓶颈难题。
中草药是中国医药的瑰宝，价格低廉、资源丰富、不易产生抗药性、能够与食物同源、同用和同体，且毒副作用小、具有提高机体免疫力和抗氧化能力、优化动物体内健康微生物菌群、抗菌抗病毒及改善机体肉质风味等作用，已成为畜牧水产饲料中用于替代化学药、激素、抗生素和改善肉质功能性饲料添加剂研究的新热点。而发酵后的中草药与未发酵的中草药相比，其优点在于可以大量的提高中草药中活性成分的含量，产生新的活性物质，降低毒副作用，节省中药资源等，因此发酵中草药受到广泛关注。然而，发酵后的中草药中活性物质容易受到外界环境因子影响，尤其是作为饲料添加剂与饲料原料混合后，在制粒过程中会产生高温高压的环境，破坏发酵中草药的一些活性成分，从而影响了发酵中草药的药理效果。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种鲟鱼包被发酵中草药制剂及其制备方法。
本发明的技术方案为：
一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，包括中草药组分，所述中草药组分以下重量份数：黄芩6-7、刺五加60-65、茵陈51-54、甘草16-21、黄连10-15、板蓝根13-20、牛蒡子4-6、贯众 9-13；
所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；
所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。
进一步的，所述有氧发酵的发酵菌为黑曲霉菌。
进一步的，所述厌氧发酵的发酵菌为植物乳杆菌。
进一步的，所述第一包被层包括油相、水相，所述第一包被层是将油相加入到水相中乳化分散制得；
所述油相包括以下组分：中草药制剂粉末、95%乙醇、植酸、柠檬酸、单甘酯；
所述中草药制剂粉末在乙醇溶液中的总的质量浓度为8-10g/L；按1000份质量浓度计算，所述植酸的浓度为0.01-0.5%、所述柠檬酸的浓度为0.01-0.5%；按5000份质量浓度计算，所述单甘酯的浓度为0.01-0.5%；
所述水相包括以下重量份数组分：乳化剂乳清蛋白 25-33、琥珀酰单甘脂11-17、卵磷脂12-18、磷酸盐缓冲溶液320-450，磷酸盐缓冲溶液的浓度为8-12 mmol/L、p H为6.8-7.2。
进一步的，所述第二包被层包括多孔淀粉、β-环糊精，所述多孔淀粉和β-环糊精的质量比为2:1-5。
本发明首先确定鲟鱼中草药配方，然后采用混菌异步发酵技术对其进行发酵，最后利用双包被技术对中草药发酵制剂进行包被处理。经实验验证，本发明对鲟鱼具有促生长和免疫增强的功效；对中草药中的活性物质起到良好的保护作用，防止不良外界因子的破坏，从而最大限度发挥其药理学功能。
本发明还提供一种鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.混菌异步发酵：按上述质量份数取各组分进行粉碎，过50-100目筛；各取30-50份粉碎好的中草药原料装入发酵罐中，加入1500份蒸馏水，并添加葡萄糖1-3份；升温至95~100℃浸泡 2-4 小时，降温后置于培养箱中，依次进行有氧发酵、厌氧发酵；
S2.双包被层制备：
S21.将发酵后的中草药制剂粉末溶于95%乙醇中，再分别加入植酸溶液和柠檬酸溶液，稳定后加入单甘酯溶液中，磁力搅拌至完全溶解，形成油相；
S22.称取乳化剂乳清蛋白、琥珀酰单甘脂、卵磷脂，溶解于磷酸盐缓冲溶液中，形成水相；
S23.将油相缓慢滴加到水相中，经高速分散机以18000-25000 r/min的转速分散2-6 min，乳化获得具有第一包被层的中草药制剂一次包被乳液，冷却至室温，放置待用；
S24.以多孔淀粉和β-环糊精作为壁材，中草药制剂一次包被乳液作为芯材，按芯材与壁材的质量比8-15∶1，经高速分散机在45-55 ℃温度下乳化，经高速分散机以18000-25000 r/min的转速分散2-6 min，在第一包被层外侧形成第二包被层，即为发酵中草药制剂产物。
进一步的，步骤S1中，有氧发酵阶段的温度为30-32℃，有氧发酵的发酵菌接种比例为1-3%，发酵过程pH保持在4-6；厌氧发酵阶段温度为 35-37℃，厌氧发酵的发酵菌接种比例为1-3%，发酵过程pH保持在4-6；有氧发酵与厌氧发酵的时间比为 1-3：1，总发酵时间为 80-120h。
进一步的，所述有氧发酵工序中，有氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜有氧发酵用发酵菌接种到上述培养基中培养 20-28h，25-30℃培养箱100-150r／min 振荡培养，然后以上培养的菌液中以5%-10%比例，再次转接到上述菌液体培养基中培养20-28h，制成有氧发酵种子液。
优选的，所述有氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：土豆200份，葡萄糖18-24份，琼脂18-23份，p H 自然，蒸馏水1000份。
进一步的，所述厌氧发酵工序中，厌氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜厌发酵用发酵菌接种到液体培养基中培养 20-28h， 35-39℃培养箱静置培养，然后以上培养的菌液中以3-8%比例，转接到液体培养基中培养20-28h，制成厌氧发酵种子液。
优选的，所述厌氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：牛肉膏 10份，蛋白胨 10份，酵母浸出膏 20份，无水乙酸钠 5份，柠檬酸二铵 2份，吐温80 1份，K2HPO4 2份，Mg SO4·H2O 0.05份，琼脂 15份，p H 6.5及蒸馏水 1000份。使用前121℃，灭菌20min。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
（1）本发明以黄芩、刺五加、茵陈、甘草、黄连、板蓝根、牛蒡子、贯众作为配方原料，其中：黄芩、茵陈具有保肝、利胆、抗菌抗氧化的作用；刺五加可调节肠道菌群，维护肠道健康；甘草具有良好的抗炎作用，并可提高饲料适口性；黄连、板蓝根、贯众对多种革兰氏阳性菌和阴性菌具有显著的抑制作用，并可提高机体抗应激能力；牛蒡子具有抗肾炎作用；通过各组分协效复配，作为饲料添加剂，提高鲟鱼肠道的消化吸收能力，进而提高鲟鱼生长性能以及免疫功能。
（2）采用混菌发酵可以使各菌种协同产生更大的优势，弥补单菌种发酵的不足之处。而选用黑曲霉有氧发酵和植物乳杆菌厌氧发酵，其优点在于可以产生丰富的纤维素酶，果胶酶等，极大的降解植物细胞壁成分，使药物活性成分大量地释放出来。
（3）采用双包被技术，可提高发酵中草药的包埋率和活性物质的稳定性。
（4）包被后的发酵中草药很好的掩盖了中草药自身的苦味，对饲料的适口性不会产生影响。
（5）包被发酵中草药乳液与中草药粉末状相比，更容易吸附在饲料或饲料原料上，受加工环境影响小，在拌料投喂或制粒过程中损失率低。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，包括中草药组分，所述中草药组分以下重量份数：黄芩6.5、刺五加63、茵陈52、甘草18、黄连12、板蓝根16、牛蒡子4.8、贯众 11；
所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；
所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。
进一步的，所述有氧发酵的发酵菌为黑曲霉菌。
进一步的，所述厌氧发酵的发酵菌为植物乳杆菌。
进一步的，所述第一包被层包括油相、水相，所述第一包被层是将油相加入到水相中乳化分散制得；
所述油相包括以下组分：中草药制剂粉末、95%乙醇、植酸、柠檬酸、单甘酯；
所述中草药制剂粉末在乙醇溶液中的总的质量浓度为9g/L；按1000份质量浓度计算，所述植酸的浓度为0.1%、所述柠檬酸的浓度为0.1%；按5000份质量浓度计算，所述单甘酯的浓度为0.1%；
所述水相包括以下重量份数组分：乳化剂乳清蛋白 30、琥珀酰单甘脂15、卵磷脂15、磷酸盐缓冲溶液405，磷酸盐缓冲溶液的浓度为10mmol/L、p H为7。
进一步的，所述第二包被层包括多孔淀粉、β-环糊精，所述多孔淀粉和β-环糊精的质量比为1:1。
实施例2
一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，包括中草药组分，所述中草药组分以下重量份数：黄芩6、刺五加60、茵陈51、甘草16、黄连10、板蓝根13、牛蒡子4、贯众 9；
所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；
所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。
进一步的，所述有氧发酵的发酵菌为黑曲霉菌。
进一步的，所述厌氧发酵的发酵菌为植物乳杆菌。
进一步的，所述第一包被层包括油相、水相，所述第一包被层是将油相加入到水相中乳化分散制得；
所述油相包括以下组分：中草药制剂粉末、95%乙醇、植酸、柠檬酸、单甘酯；
所述中草药制剂粉末在乙醇溶液中的总的质量浓度为8g/L；按1000份质量浓度计算，所述植酸的浓度为0.05%、所述柠檬酸的浓度为0.05%；按5000份质量浓度计算，所述单甘酯的浓度为0.05%；
所述水相包括以下重量份数组分：乳化剂乳清蛋白 25、琥珀酰单甘脂11、卵磷脂12、磷酸盐缓冲溶液320，磷酸盐缓冲溶液的浓度为8 mmol/L、p H为 6.8。
进一步的，所述第二包被层包括多孔淀粉、β-环糊精，所述多孔淀粉和β-环糊精的质量比为2:1。
实施例3
一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，包括中草药组分，所述中草药组分以下重量份数：黄芩7、刺五加65、茵陈54、甘草21、黄连15、板蓝根20、牛蒡子6、贯众13；
所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；
所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。
进一步的，所述有氧发酵的发酵菌为黑曲霉菌。
进一步的，所述厌氧发酵的发酵菌为植物乳杆菌。
进一步的，所述第一包被层包括油相、水相，所述第一包被层是将油相加入到水相中乳化分散制得；
所述油相包括以下组分：中草药制剂粉末、95%乙醇、植酸、柠檬酸、单甘酯；
所述中草药制剂粉末在乙醇溶液中的总的质量浓度为10g/L；按1000份质量浓度计算，所述植酸的浓度为0.4%、所述柠檬酸的浓度为0.4%；按5000份质量浓度计算，所述单甘酯的浓度为0.4%；
所述水相包括以下重量份数组分：乳化剂乳清蛋白 33、琥珀酰单甘脂17、卵磷脂18、磷酸盐缓冲溶液450，磷酸盐缓冲溶液的浓度为12 mmol/L、p H为 7.2。
进一步的，所述第二包被层包括多孔淀粉、β-环糊精，所述多孔淀粉和β-环糊精的质量比为2:5。
实施例4
本实施例提供一种实施例1-3任一项所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.混菌异步发酵：按上述质量份数取各组分进行粉碎，过80目筛；各取40份粉碎好的中草药原料装入发酵罐中，加入1500份蒸馏水，并添加葡萄糖2.5份；升温至100℃浸泡3 小时，降温后置于培养箱中，依次进行有氧发酵、厌氧发酵；
S2.双包被层制备：
S21.将发酵后的中草药制剂粉末溶于95%乙醇中，再分别加入植酸溶液和柠檬酸溶液，稳定后加入单甘酯溶液中，磁力搅拌至完全溶解，形成油相；
S22.称取乳化剂乳清蛋白、琥珀酰单甘脂、卵磷脂，溶解于磷酸盐缓冲溶液中，形成水相；
S23.将油相缓慢滴加到水相中，经高速分散机以20000 r/min的转速分散4 min，乳化获得具有第一包被层的中草药制剂一次包被乳液，冷却至室温，放置待用；
S24.以多孔淀粉和β-环糊精作为壁材，中草药制剂一次包被乳液作为芯材，按芯材与壁材的质量比10∶1，经高速分散机在50 ℃温度下乳化，经高速分散机以20000 r/min的转速分散4 min，在第一包被层外侧形成第二包被层，即为发酵中草药制剂产物。
进一步的，步骤S1中，有氧发酵阶段的温度为30℃，有氧发酵的发酵菌接种比例为2%，发酵过程pH保持在5；厌氧发酵阶段温度为 36℃，厌氧发酵的发酵菌接种比例为2%，发酵过程pH保持在5；有氧发酵与厌氧发酵的时间比为 2：1，总发酵时间为 100h。
进一步的，所述有氧发酵工序中，有氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜有氧发酵用发酵菌接种到上述培养基中培养 24h，28℃培养箱 120r／min振荡培养，然后以上培养的菌液中以8%比例，再次转接到上述菌液体培养基中培养24h，制成有氧发酵种子液。
所述有氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：土豆200份，葡萄糖21份，琼脂20份，p H 自然，蒸馏水1000份。
进一步的，所述厌氧发酵工序中，厌氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜厌发酵用发酵菌接种到液体培养基中培养 24h， 37℃培养箱静置培养，然后以上培养的菌液中以5%比例，转接到液体培养基中培养24h，制成厌氧发酵种子液。
所述厌氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：牛肉膏 10份，蛋白胨10份，酵母浸出膏 20份，无水乙酸钠 5份，柠檬酸二铵 2份，吐温80 1份，K2HPO4 2份，MgSO4·H2O 0.05份，琼脂 15份，p H 6.5及蒸馏水 1000份。使用前121℃，灭菌20min。
实施例5
本实施例提供一种实施例1-3任一项所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.混菌异步发酵：按上述质量份数取各组分进行粉碎，过100目筛；各取30份粉碎好的中草药原料装入发酵罐中，加入1500份蒸馏水，并添加葡萄糖1份；升温至95℃浸泡 4小时，降温后置于培养箱中，依次进行有氧发酵、厌氧发酵；
S2.双包被层制备：
S21.将发酵后的中草药制剂粉末溶于95%乙醇中，再分别加入植酸溶液和柠檬酸溶液，稳定后加入单甘酯溶液中，磁力搅拌至完全溶解，形成油相；
S22.称取乳化剂乳清蛋白、琥珀酰单甘脂、卵磷脂，溶解于磷酸盐缓冲溶液中，形成水相；
S23.将油相缓慢滴加到水相中，经高速分散机以18000r/min的转速分散6 min，乳化获得具有第一包被层的中草药制剂一次包被乳液，冷却至室温，放置待用；
S24.以多孔淀粉和β-环糊精作为壁材，中草药制剂一次包被乳液作为芯材，按芯材与壁材的质量比8∶1，经高速分散机在45 ℃温度下乳化，经高速分散机以18000r/min的转速分散6 min，在第一包被层外侧形成第二包被层，即为发酵中草药制剂产物。
进一步的，步骤S1中，有氧发酵阶段的温度为30℃，有氧发酵的发酵菌接种比例为1%，发酵过程pH保持在4.5；厌氧发酵阶段温度为 35℃，厌氧发酵的发酵菌接种比例为1%，发酵过程pH保持在4.5；有氧发酵与厌氧发酵的时间比为 1：1，总发酵时间为 90h。
进一步的，所述有氧发酵工序中，有氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜有氧发酵用发酵菌接种到上述培养基中培养 22h，26℃培养箱 110r／min振荡培养，然后以上培养的菌液中以6%比例，再次转接到上述菌液体培养基中培养22h，制成有氧发酵种子液。
所述有氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：土豆200份，葡萄糖19份，琼脂19份，p H 自然，蒸馏水1000份。
进一步的，所述厌氧发酵工序中，厌氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜厌发酵用发酵菌接种到液体培养基中培养 22h， 38℃培养箱静置培养，然后以上培养的菌液中以4%比例，转接到液体培养基中培养22h，制成厌氧发酵种子液。
所述厌氧发酵工序中，发酵培养基按质量份数计算，包括：牛肉膏 10份，蛋白胨10份，酵母浸出膏 20份，无水乙酸钠 5份，柠檬酸二铵 2份，吐温80 1份，K2HPO4 2份，MgSO4·H2O 0.05份，琼脂 15份，p H 6.5及蒸馏水 1000份。使用前121℃，灭菌20min。
实施例6
本实施例提供一种实施例1-3任一项所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.混菌异步发酵：按上述质量份数取各组分进行粉碎，过60目筛；各取50份粉碎好的中草药原料装入发酵罐中，加入1500份蒸馏水，并添加葡萄糖3份；升温至100℃浸泡2.5 小时，降温后置于培养箱中，依次进行有氧发酵、厌氧发酵；
S2.双包被层制备：
S21.将发酵后的中草药制剂粉末溶于95%乙醇中，再分别加入植酸溶液和柠檬酸溶液，稳定后加入单甘酯溶液中，磁力搅拌至完全溶解，形成油相；
S22.称取乳化剂乳清蛋白、琥珀酰单甘脂、卵磷脂，溶解于磷酸盐缓冲溶液中，形成水相；
S23.将油相缓慢滴加到水相中，经高速分散机以22000 r/min的转速分散3 min，乳化获得具有第一包被层的中草药制剂一次包被乳液，冷却至室温，放置待用；
S24.以多孔淀粉和β-环糊精作为壁材，中草药制剂一次包被乳液作为芯材，按芯材与壁材的质量比12∶1，经高速分散机在52 ℃温度下乳化，经高速分散机以22000 r/min的转速分散2.5 min，在第一包被层外侧形成第二包被层，即为发酵中草药制剂产物。
进一步的，步骤S1中，有氧发酵阶段的温度为32℃，有氧发酵的发酵菌接种比例为2.7%，发酵过程pH保持在5.5；厌氧发酵阶段温度为 36℃，厌氧发酵的发酵菌接种比例为2.7%，发酵过程pH保持在5.5；有氧发酵与厌氧发酵的时间比为 3：1，总发酵时间为110h。
进一步的，所述有氧发酵工序中，有氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜有氧发酵用发酵菌接种到上述培养基中培养 26h，28℃培养箱 140r／min振荡培养，然后以上培养的菌液中以8%比例，再次转接到上述菌液体培养基中培养26h，制成有氧发酵种子液。
进一步的，所述厌氧发酵工序中，厌氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜厌发酵用发酵菌接种到液体培养基中培养 26h， 38℃培养箱静置培养，然后以上培养的菌液中以7%比例，转接到液体培养基中培养26h，制成厌氧发酵种子液。
对比例1
本对比例采用一种与实施例1相同的鲟鱼包被发酵中草药制剂，所不同的是，本对比例仅包含中草药组分。
对比例2
本对比例采用一种与实施例1相同的鲟鱼包被发酵中草药制剂，所不同的是，本对比例不包含第一包被层、第二包被层。
对比例3
本对比例采用一种与实施例1相同的鲟鱼包被发酵中草药制剂，所不同的是，本对比例不包含第二包被层。
实验效果测试
选用现有技术的普通商品饲料（粗蛋白>45%、汉业2号鲟鱼料），按照实施例1、对比例1-3的配方，通过实施例4的方法制备中草药制剂，分别使用普通商品饲料、普通商品饲料（按0.5%质量百分比加入对比例1中草药制剂）、普通商品饲料（按0.5%质量百分比加入对比例2中草药制剂）、普通商品饲料（按0.5%质量百分比加入对比例3中草药制剂）、普通商品饲料（按0.5%加入实施例1中草药制剂）作为对照组和试验组1-4，以杂交鲟（西伯利亚鲟♂×施氏鲟♀）为试验对象，对杂交鲟（平均体重30g）饲喂30天，测试其生长性能（结果如表1所示）和免疫指标（结果如表2所示）。本发明实施例/对比例与普通商品饲料的混合方式为：先将普通商品饲料粉碎过80目筛，然后与实施例/对比例不同处理的中草药制剂进行混匀，并通过制粒机进行制粒，最后烘干4℃保存，直至用于试验开展。
表1 不同处理组对杂交鲟生长性能的影响
| 对照组 | 试验组1 | 试验组2 | 试验组3 | 试验组4 | |
| 初始平均体重（g） | 30 | 30 | 30 | 30 | 30 |
| 30天后平均体重（g） | 64 | 82 | 119 | 132 | 145 |
| 增重率（%） | 113.3 | 173.3 | 296.7 | 311.5 | 383.3 |
| 日采食量（g） | 1.9 | 2.6 | 3.9 | 4.4 | 5.2 |
| 饵料系数 | 1.72 | 1.48 | 1.35 | 1.31 | 1.23 |
表2 不同处理组对杂交鲟免疫指标的影响
| 对照组 | 试验组1 | 试验组2 | 试验组3 | 试验组4 | |
| 总抗氧化能力 | 10.3 | 12.9 | 13.1 | 13.9 | 15.3 |
| 总超氧化歧化酶 | 182.5 | 183.6 | 186.1 | 187.0 | 189.4 |
| 丙二醛 | 5.1 | 4.9 | 4.7 | 4.7 | 4.5 |
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。需注意的是，本发明中所未详细描述的技术特征，均可以通过任一现有技术实现。
Claims (9)
1.一种鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，包括中草药组分，所述中草药组分包括以下重量份数：黄芩6-7、刺五加60-65、茵陈51-54、甘草16-21、黄连10-15、板蓝根13-20、牛蒡子4-6、贯众 9-13；
所述中草药制剂是中草药组分依次经过有氧发酵、厌氧发酵制备而成；
所述中草药制剂还包括第一包被层、第二包被层，所述第一包被层、第二包被层依次包被在发酵后的中草药组分外侧。
2.根据权利要求1所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，所述有氧发酵的发酵菌为黑曲霉菌。
3.根据权利要求1所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，所述厌氧发酵的发酵菌为植物乳杆菌。
4.根据权利要求1所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，所述第一包被层包括油相、水相，所述第一包被层是将油相加入到水相中乳化分散制得；
所述油相包括以下组分：中草药制剂粉末、95%乙醇、植酸、柠檬酸、单甘酯；
所述中草药制剂粉末在乙醇溶液中的总的质量浓度为8-10g/L；按1000份质量浓度计算，所述植酸的浓度为0.01-0.5%、所述柠檬酸的浓度为0.01-0.5%；按5000份质量浓度计算，所述单甘酯的浓度为0.01-0.5%；
所述水相包括以下重量份数组分：乳化剂乳清蛋白 25-33、琥珀酰单甘脂11-17、卵磷脂12-18、磷酸盐缓冲溶液320-450，磷酸盐缓冲溶液的浓度为8-12 mmol/L、p H为 6.8-7.2。
5.根据权利要求1所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂，其特征在于，所述第二包被层包括多孔淀粉、β-环糊精，所述多孔淀粉和β-环糊精的质量比为2:1-5。
6.一种权利要求1-5任一项所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.混菌异步发酵：按上述质量份数取各组分进行粉碎，过50-100目筛；各取30-50份粉碎好的中草药原料装入发酵罐中，加入1500份蒸馏水，并添加葡萄糖1-3份；升温至95~100℃浸泡 2-4 小时，降温后置于培养箱中，依次进行有氧发酵、厌氧发酵；
S2.双包被层制备：
S21.将发酵后的中草药制剂粉末溶于95%乙醇中，再分别加入植酸溶液和柠檬酸溶液，稳定后加入单甘酯溶液中，磁力搅拌至完全溶解，形成油相；
S22.称取乳化剂乳清蛋白、琥珀酰单甘脂、卵磷脂，溶解于磷酸盐缓冲溶液中，形成水相；
S23.将油相缓慢滴加到水相中，经高速分散机以18000-25000 r/min的转速分散2-6min，乳化获得具有第一包被层的中草药制剂一次包被乳液，冷却至室温，放置待用；
S24.以多孔淀粉和β-环糊精作为壁材，中草药制剂一次包被乳液作为芯材，按芯材与壁材的质量比8-15∶1，经高速分散机在45-55 ℃温度下乳化，经高速分散机以18000-25000r/min的转速分散2-6 min，在第一包被层外侧形成第二包被层，即为发酵中草药制剂产物。
7.根据权利要求6所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，步骤S1中，有氧发酵阶段的温度为30-32℃，有氧发酵的发酵菌接种比例为1-3%，发酵过程pH保持在4-6；厌氧发酵阶段温度为 35-37℃，厌氧发酵的发酵菌接种比例为1-3%，发酵过程pH保持在4-6；有氧发酵与厌氧发酵的时间比为 1-3：1，总发酵时间为 80-120h。
8.根据权利要求6所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，所述有氧发酵工序中，有氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜有氧发酵用发酵菌接种到上述培养基中培养 20-28h，25-30℃培养箱 100-150r／min 振荡培养，然后以上培养的菌液中以5%-10%比例，再次转接到上述菌液体培养基中培养20-28h，制成有氧发酵种子液。
9.根据权利要求6所述的鲟鱼包被发酵中草药制剂的制备方法，其特征在于，所述厌氧发酵工序中，厌氧发酵种子液的制备，包括以下步骤：
取新鲜厌发酵用发酵菌接种到液体培养基中培养 20-28h， 35-39℃培养箱静置培养，然后以上培养的菌液中以3-8%比例，转接到液体培养基中培养20-28h，制成厌氧发酵种子液。
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