CN115607537A - 黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的用途 - Google Patents

黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的用途 Download PDF

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Abstract

提供了黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的用途。本文涉及活性成分或包含活性成分的组合物在制备用于治疗或预防2型炎症疾病的药物中的用途，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。

Description

黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的用途
技术领域
本发明涉及疾病治疗领域，具体涉及黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的用途。
背景技术
目前研究显示，慢性鼻窦炎、哮喘、皮肤湿疹、食管炎、炎性肠病等一系列呼吸道、皮肤、消化道等器官的慢性炎症疾病均表现出异质性，驱动疾病的免疫病理类型可以分为为1型免疫反应、2型免疫反应、3型免疫反应，其分别介导1型炎症、2型炎症和3型炎症。
2型炎症疾病的作为一个整体概念近年来刚被提出，发病机制复杂，尚未完全研究清楚，目前已知因素包括基因遗传背景、机体免疫反应和外界环境的相互作用及影响等。其患病率在世界人群中逐年升高，且在城市地区比乡村地区更高，提示可能与环境因素相关。这一系列疾病可以独立发生，也可以同时并存于人体中。
目前2型炎症疾病的主要治疗药物包括局部或者全身应用糖皮质激素，但是长期应用糖皮质激素可能引起潜在的多种潜在的副作用，包括但不限于血压血糖异常、肥胖、免疫抑制、骨质疏松等。此外，近年来开始出现新的生物制剂疗法，例如奥马珠单抗(人源化抗IgE单克隆抗体)、度普利尤单抗(抗IL-4受体亚基α(IL-4R-α)的全人单克隆抗体)等靶向药物，对难治的2型炎症性疾病的患者起到了积极的治疗作用，但缺点包括昂贵的价格，需冷冻保存、携带不便，以及疗效无法长期持续，需反复长期使用。因此，临床上急需开发新的价格合理、副作用相对小、保存及使用方便的新型药物疗法。
黄芩素(Baicalein)为传统中药材“黄芩(Scutellariae Radix)”的主要活性成分之一，也是黄芩含量最高的活性成分黄芩苷(Baicalin)的苷元。文献报道，黄芩苷由于极性大，口服难吸收、绝对生物利用度低，在肠道中被微生物菌群水解为黄芩素后才能吸收，黄芩素在体内再与葡糖醛酸结合形成黄芩苷。而黄芩素的吸收性和生物利用度均较高。因此，无论服用黄芩素还是黄芩苷，最终经过化学反应均以黄芩素形式吸收，吸收后在体内二者间可以相互转化。文献报道，黄芩素和黄芩苷有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化、保肝等多种作用。
中国专利CN112587516A涉及黄芩素在制备治疗恶性间皮瘤药物中的应用。该专利申请发现黄芩素可以增强恶性间皮瘤细胞对化疗药物(顺铂)的敏感性，从而增强抗肿瘤效果。
中国专利CN112755017A涉及黄芩素类化合物在制备促进神经干细胞分化的药物中的用途。该专利申请发现了黄芩素具有促进神经干细胞向神经元方向分化而非星形胶质细胞方向分化的作用，对神经损伤的修复有更直接更有效的作用，直接肯定了黄芩素作为神经治疗药物的作用。
中国专利CN114886888A涉及黄芩素作为GLP-1R蛋白激动剂对认知功能障碍治疗的应用。该专利申请证实黄芩素具有保护神经细胞免受高糖损伤的作用；利用黄芩素灌胃高脂联合STZ腹腔注射构建的小鼠模型，明确了黄芩素在体内不影响体重的情况下，降低小鼠的空腹血糖，改善胰岛素抵抗，增强胰岛素敏感性，改善小鼠认知功能。
中国专利CN1451387A曾提到中国传统中药黄芩的提取物可以治疗鼻炎、鼻窦炎，但并未明确是其中哪种物质作为有效成分及其作用机制。CN110198714A专利涉及用于预防或治疗例如哮喘或特应性的变应性疾病之包含黄芩素作为活性成分的药物组合物，但是，其未将哮喘等疾病进一步划分2型与非2型炎症的亚型，明确黄芩素对哪种亚型有效。
WO2019157304似乎暗示ALOX15基因与鼻息肉的相关性。该专利提到黄芩素，但该专利无任何实际数据证明黄芩素对任何一种特定呼吸道疾病的治疗作用。也未说明黄芩素具有以下作用，比如降低细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；降低IgE水平；减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润等等。但是，现有技术中没有关于特异性应用黄芩素或黄芩苷治疗2型炎症疾病的报道。
发明内容
虽然既往曾有相关专利广泛针对于哮喘、慢性鼻窦炎、皮炎等慢性炎症疾病开发抗炎药，但是，随着基础与临床研究的深入，大量证据证明，这些炎性疾病具有异质性，并将炎症类型划分为多种亚型，包括1型炎症，2型炎症，3型炎症等。不同亚型的炎症与免疫的关系不同，基本发病机制也相差甚远。
临床上使用的药物，例如糖皮质激素等广谱抗炎药物，对不同亚型炎症疾病的治疗效果不同。现有技术中对鼻窦炎等疾病广泛使用的这些药物缺乏针对性的精准治疗。
针对现有技术的缺陷，本发明人聚焦于2型炎症疾病，通过对机制的深入研究创新性的明确了黄芩素治疗2型炎症的作用机制及疗效，基于2型炎症的基本发病机制证实了应用黄芩素和/或黄芩苷作为药物有效成分之一治疗2型炎症疾病的特异性、先进性与可行性。
本发明基于发明人的以下发现，黄芩素或黄芩苷可以用于针对性治疗2型炎症疾病，以避免广谱抗炎药物的潜在的副作用。出乎意料的是，发明人发现了黄芩素不能有效治疗所有类型的慢性鼻窦炎，如非嗜酸性慢性鼻窦炎，但是能够通过如下方式治疗嗜酸性慢性鼻窦炎：抑制15-脂氧合酶(15-lipoxygenase,15-LO)代谢通路；降低细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；降低IgE水平；减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
在一方面，本发明提供了活性成分或包含活性成分的组合物在制备用于治疗和/或预防2型炎症疾病的药物中的用途，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。
在一个实施方案中，黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和/或黄芩苷或其药学可接受的盐可以是唯一的活性成分。
在一个实施方案中，2型炎症疾病选自下组：嗜酸性慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、嗜酸性哮喘、阿司匹林加重的呼吸道疾病、嗜酸性食管炎、嗜酸性胃肠炎、嗜酸性结肠炎或特应性皮炎。
在一个实施方案中，嗜酸性慢性鼻窦炎是伴有或不伴有鼻息肉的嗜酸性慢性鼻窦炎。
在一个实施方案中，治疗或预防通过以下一种或多种方式实现：
(1)降低细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；
(2)降低IgE水平；
(3)抑制15-脂氧合酶代谢通路；
(4)减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；和
(5)减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
在一个实施方案中，组合物还包含糖皮质激素、抗组胺药物、白三烯受体拮抗剂、针对IL-4或IL-5或IL-13或IgE及它们的受体的抑制剂或拮抗剂中的一种或多种。
在一个实施方案中，抑制剂或拮抗剂是抗体。在一个实施方案中，抗体是单克隆抗体。
在一个实施方案中，组合物还包含药学可接受的载体和/或赋形剂。
在一个实施方案中，药物是溶液、悬液、乳剂、丸剂、注射剂、片剂、胶囊、颗粒、控制释放或持续释放制剂、喷鼻剂、滴鼻剂、雾化吸入、皮肤外涂的形式。
在一个实施方案中，药物是溶液、悬液、乳剂、丸剂、注射剂、片剂、胶囊、颗粒、控制释放或持续释放制剂的形式。
在另一个方面，本发明提供了活性成分或包含活性成分的组合物在制备药物中的用途，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物；所述药物用于以下一种或多种：
(1)降低2型炎症疾病患者中的细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；
(2)降低2型炎症疾病患者中的IgE水平；
(3)抑制2型炎症疾病患者中的15-脂氧合酶代谢通路；
(4)减少2型炎症疾病患者中的趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；和
(5)减少2型炎症疾病患者中的嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
在一个实施方案中，2型炎症疾病选自下组：嗜酸性慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、嗜酸性哮喘、阿司匹林加重的呼吸道疾病、嗜酸性食管炎、嗜酸性胃肠炎、嗜酸性结肠炎或特应性皮炎。
在另一个方面，提供了用于治疗和/或预防2型炎症疾病的方法，其包括对患者施用活性成分，其选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。在另一个方面，提供了活性成分，用于治疗和/或预防2型炎症疾病的方法，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。上文描述的具体实施方案同样适用于这些方面。
本发明的优点包括：
1.由于炎症疾病的病理机制的异质性，本发明针对的疾病类型不是所有炎性疾病，而是特异性针对2型炎症亚型。本发明人首次发现黄芩素和/或黄芩苷可以特异性用于治疗2型炎症疾病。
2.令人惊讶地，本发明人首次发现黄芩素和/或黄芩苷不能有效治疗2型炎症疾病外的炎性疾病(例如非嗜酸性慢性鼻窦炎)，但是却尤其可以特异性治疗2型炎症的慢性鼻窦炎，嗜酸性慢性鼻窦炎(伴或不伴有鼻息肉)。这是意料不到的。
3.本发明人首次发现黄芩素和/或治疗2型炎症疾病的作用机制：黄芩素和/或黄芩苷治疗能降低关键2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13，降低IgE水平，抑制15-LO代谢通路相关炎症介质的产生，减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18、CCL24的表达，减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞、单核巨噬细胞等重要2型炎症细胞的浸润；从而抑制2型免疫的过度激活，起到免疫调节作用，促使炎症的缓解，针对性的治疗2型炎症疾病。
附图说明
图1显示了建立嗜酸性鼻窦炎的2型炎症疾病小鼠模型流程图。
图2：ELISA分析显示IL-4,IL-5,IL-13在各实验组小鼠的鼻黏膜中表达水平(n＝4)。
图3：ELISA分析显示15-LO在各实验组小鼠的鼻黏膜中表达水平(n＝4)。
图4：ELISA分析显示外周血总IgE在各实验组小鼠中的水平(n＝4)。
图5：流式细胞分析显示各种细胞类型数目在小鼠鼻黏膜所有细胞中所占的比例。包括总炎症细胞(CD45+)、上皮细胞(EpCAM+)、CD4+T细胞(CD45+CD3+CD4+)、嗜酸性粒细胞(CD45+Siglec-F+)、B细胞(CD45+B220+)、巨噬细胞(CD45+F4/80+)(n＝4)。
图6：建立非嗜酸性鼻窦炎的非2型炎症疾病小鼠模型流程图。
图7：ELISA分析显示IL-4,IL-5,IL-13在各实验组小鼠的鼻黏膜中表达水平(n＝4)。
图8：ELISA分析显示IL-8,IFN-γ在各实验组小鼠的鼻黏膜中表达水平(n＝4)。
图9：ELISA分析显示15-LO在各实验组小鼠的鼻黏膜中表达水平(n＝4)。
图10：ELISA分析显示外周血总IgE在各实验组小鼠中的水平(n＝4)。
图11：流式细胞分析显示各种细胞类型数目在鼻黏膜所有细胞中所占的比例。包括总炎症细胞(CD45+)、上皮细胞(EpCAM+)、CD4+T细胞(CD45+CD3+CD4+)、嗜酸性粒细胞(CD45+Siglec-F+)、中性粒细胞(CD45+LY6G+)、B细胞(CD45+B220+)、巨噬细胞(CD45+F4/80+)(n＝4)。
图12：人的鼻黏膜免疫荧光染色显示15-LO在免疫细胞中主要分布于嗜酸性鼻窦炎患者中的巨噬细胞(CD68+)和嗜酸性粒细胞(EMBP+)(n＝4)。
图13：黄芩素对于IL-4或IL-13刺激诱导的人原代巨噬细胞产生趋化因子CCL13、CCL17、CCL18、CCL24水平的影响(n＝4)。
图14：ALOX15 siRNA对IL-4或IL-13刺激诱导的人原代巨噬细胞产生趋化因子CCL13、CCL17、CCL18、CCL24水平的影响(n＝4)。
图15：黄芩素对CD4+T细胞和嗜酸性粒细胞向无血清培养基或各条件下的巨噬细胞培养基的迁移能力的影响(n＝4)。
具体实施方式
如本文所使用，术语“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，并且是包括端点在内或是开放式的，并且不排除额外的未叙述的要素或方法步骤。“包含”是权利要求语言中使用的技术术语，意思指存在所述要素，但也可以增加其它要素并且仍形成在所述权利要求范围内的构造或方法。
2型炎症疾病(Type 2 Inflammatory Disease)可以是一系列以2型炎症(Type 2Inflammation)为特征的炎性疾病。2型炎症疾病可以包括嗜酸性慢性鼻窦炎(伴或不伴有鼻息肉)(Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis with or without Nasal Polyps)、过敏性鼻炎(Allergic Rhinitis)、嗜酸性哮喘(Eosinophilic Asthma)、阿司匹林加重的呼吸道疾病(Aspirin Exacerbated Respiratory Disease,AERD)、嗜酸食管炎(Eosinophilic Esophagitis)、嗜酸性胃肠炎(Eosinophilic Gastroenteritis)、嗜酸性结肠炎(Eosinophilic Colitis)、特应性皮炎(Atopic Dermatitis)等。
慢性鼻窦炎：慢性鼻窦炎(chronicrhinosinusitis，CRS)是全球人群中最常见的慢性疾病之一。CRS是一种异质性的鼻腔鼻窦炎症疾病，以鼻腔鼻窦黏膜持续性炎症超过12周为特征。目前最新版《欧洲鼻窦炎和鼻息肉意见书2020》(EPOS 2020)提出，根据有无息肉，CRS在临床上可分为慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis with NasalPolyps,CRSwNP)和慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis without NasalPolyps,CRSsNP)。按CRS的炎症内在型不同，将CRS分类为嗜酸性粒细胞性慢性鼻窦炎(Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis,eCRS)，特点为2型特点为2型免疫反应介导的2型炎症，可见显著增多的嗜酸性粒细胞浸润；以及非嗜酸性慢性鼻窦炎(Non-eosinophilicChronic Rhinosinusitis,neCRS)，特点为非2型免疫反应介导的非2型炎症，无嗜酸性粒细胞浸润增多，通常可见显著增多的中性粒细胞浸润。其中CRSwNP为临床上较为关注的亚型，据上述同理可将其分为嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Eosinophilic ChronicRhinosinusitis with Nasal Polyps,eCRSwNP)，特点为2型炎症，和非嗜酸性慢性鼻窦炎(Non-eosinophilic Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps,eCRSwNP,neCRSwNP)，特点为非2型炎症。eCRS是鼻和鼻窦的炎症病理状态，eCRS是CRS的一种亚型，以持续的慢性2型炎症为主要特征，eCRS患者的鼻息肉手术后复发风险非常高，患者鼻息肉组织中有明显增多的嗜酸性粒细胞浸润。eCRS被认为是一种难治性疾病，鼻黏膜组织和外周血中嗜酸性粒细胞增加是其生物标志物之一。EPOS 2020指出，eCRS与neCRS由于炎症内在型不同，其治疗方案也应差异化、个性化，例如糖皮质激素的剂量与疗程，以及靶向2型炎症的单克隆抗体的使用等方面。
过敏性鼻炎：过敏性鼻炎是指特异性个体接触变应原(过敏原)后，引发鼻黏膜非感染性炎性的一种鼻科疾病。过敏性鼻炎临床以反复发作的阵发性鼻痒、喷嚏、清水样鼻涕、鼻塞为主要表现，一般病程较长，常伴有嗅觉减退，或伴有眼睛发痒等表现。过敏性鼻炎的病因比较复杂，一般认为是由基因与环境相互作用而诱发的多因素疾病。吸入性变应原是过敏性鼻炎的主要原因。
哮喘：哮喘是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症为特征的异质性疾病。根据GlobalInitiative for Asthma(GINA)2022,在哮喘患者中，可根据炎症反应的类型将其分为嗜酸性粒细胞性哮喘(2型炎症)和非嗜酸性粒细胞性哮喘(非2型炎症)。哮喘患者中痰液或血液中嗜酸性粒细胞增高是难治性哮喘的生物标志物之一。GINA 2022指出，嗜酸性粒细胞性哮喘和非嗜酸性粒细胞性哮喘由于炎症内在型不同，其治疗方案也应差异化、个性化，例如激素的剂量和疗程，及靶向2型炎症的单克隆抗体的使用等方面。
阿司匹林加重的呼吸道疾病：某些药物可以诱发呼吸道疾病的症状，常见的有阿司匹林和其他非甾体类抗炎药物，它们在特定的人群会诱发鼻炎和哮喘发作，这种现象被称为阿司匹林加重的呼吸道疾病，患者多同时有阿司匹林耐受不良、嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉和哮喘三联征。
嗜酸食管炎：又称嗜酸性粒细胞性食管炎(eosinophilic esophagitis，EoE)，是一种临床病理学疾病，表现为反流样症状、进食困难、食物阻塞、吞咽困难，同时食管嗜酸性粒细胞浸润显著增多。
嗜酸性胃肠炎：又称嗜酸细胞性胃肠炎，是一种少见病，以胃肠道的某些部位有弥散性或局限性嗜酸性粒细胞浸润为特征，常同时伴有周围血嗜酸粒细胞增多。
嗜酸性结肠炎：又称为嗜酸性粒细胞性结肠炎(EC)，是嗜酸性粒细胞性胃肠道疾病中罕见的一类，其以不明原因的结肠嗜酸性粒细胞浸润为特征。
特应性皮炎：是一种与遗传及外界环境有关的、具有产生IgE倾向、可能伴有嗜酸性粒细胞增高的慢性复发性、瘙痒性、炎症性皮肤病。
2型炎症疾病
本发明针对的疾病主要为2型免疫反应引起的2型炎症疾病，包括嗜酸性慢性鼻窦炎(伴或不伴有鼻息肉)、过敏性鼻炎、嗜酸性哮喘、阿司匹林加重的呼吸道疾病、嗜酸食管炎、嗜酸性胃肠炎、嗜酸性结肠炎、特应性皮炎等。
例如，根据慢性鼻窦炎的欧洲EPOS 2020指南和中国目前版本指南《中国慢性鼻窦炎诊断和治疗指南(2018)》，慢性鼻窦炎可以分为嗜酸性慢性鼻窦炎(2型炎症)和非嗜酸性慢性鼻窦炎(非2型炎症)，又可以根据是否伴发有鼻息肉，进一步分为伴鼻息肉和不伴鼻息肉两个亚型。
根据GINA 2022指南，哮喘是一类异质性疾病，可以根据炎症类型不同分为嗜酸性哮喘(2型炎症)和非嗜酸性哮喘(非2型炎症)。
皮肤湿疹(Eczema)可以由多种不同的病因引起，特应性皮炎是其中最常见的一种类型，根据目前版本《中国特应性皮炎诊疗指南(2020版)》，其炎症类型可分为Th2(即2型炎症)、Th17、Th22(即3型炎症)、Th1(即1型炎症)为主等不同类型。
由于疾病的病理机制的异质性，本发明所针对的疾病类型并不是所有上述炎性疾病，而是特异性的针对2型炎症亚型。
目前已知的2型炎症的核心病理特征与免疫病理机制包括：关键的2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13水平升高，Th2细胞和ILC2细胞增加与异常活化，IgE水平升高，关键的效应细胞—嗜酸性粒细胞数量显著增加。这些免疫病理机制可能在2型炎症疾病中表现为其中一种或多种同时存在。15-脂氧合酶(15-lipoxygenase，15-LO)由ALOX15基因编码表达，发明人发现，15-LO在嗜酸性慢性鼻窦炎伴或不伴有鼻息肉的患者的免疫细胞，尤其是巨噬细胞、嗜酸性粒细胞中含量异常升高(图12)。花生四烯酸代谢通路异常也是潜在的2型炎症疾病发病及病情加重的一个关键的病理生理学机制，对于干预15-LO相关代谢通路治疗以嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(eCRSwNP)为代表的2型炎症疾病的作用及疗效尚无研究报道。
在本发明中，与非嗜酸性鼻窦炎的非2型炎症疾病形成对比，在木瓜蛋白酶诱导的嗜酸性鼻窦炎的小鼠模型中验证了黄芩素对2型炎症疾病的治疗效果。
本发明的治疗或预防效果可以通过以下一种或多种方式实现：
(1)降低细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；
(2)降低IgE水平；
(3)抑制15-脂氧合酶代谢通路；
(4)减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；和
(5)减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
活性成分和包含活性成分的组合物
本文中的活性成分可以是黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和/或黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。活性成分可以制备成药物。黄芩素或黄芩苷可以是分离的或纯的。
药学上可接受的盐可以是有机酸盐或无机酸盐。无机酸可以为盐酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氢溴酸或硝酸。有机酸可以为乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、对甲苯磺酸、水杨酸或草酸。
药物的剂型可以为口服剂型或注射剂型。口服剂型可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。注射剂可以通过静脉内注射、动脉内注射、肌肉内注射或腹腔内注射、喷鼻剂、滴鼻剂、雾化吸入、皮肤外涂的方式给药。
药物组合物可以包含用于治疗2型炎症疾病的另一种活性成分，例如糖皮质激素、抗组胺药物、白三烯受体拮抗剂、针对IL-4或IL-5或IL-13或IgE及它们的受体的抑制剂或拮抗剂中的一种或多种。抑制剂或拮抗剂可以是抗体。抗体可以是单克隆抗体。
药物组合物还可以包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。该载体和/或赋形剂可以是对适于这种用途的本领域技术人员来说任何已知药学上可接受的载体和赋形剂。本说明书中所述的“药学上可接受的载体”具有本领域人员熟知的含义，其可包括任何及所有的溶剂、分散介质、涂层、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如，抗细菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、凝胶、粘结剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染料、类似物质及它们的组合。
给药的最佳剂量和频率将取决于所治疗的特定状况及其严重程度；特定患者的年龄、性别、体型和重量、饮食和一般身体状况；患者可能服用的其它药物；给药途径；配方；以及医生和其他本领域技术人员已知的各种其它因素。
本发明的活性成分可以单位剂量形式给药，给药途径可为经肠道或非肠道，如经口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。本发明的给药剂型优选是固体剂型。固体剂型可以是片剂，包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片；胶囊剂，包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊；颗粒剂；散剂；微丸；滴丸；栓剂；膜剂；贴片、气(粉)雾剂。本发明的活性成分也可以为喷雾剂等；喷鼻剂；滴鼻剂；雾化吸入；皮肤外涂的形式。本发明的活性成分可以制成普通制剂、也可制成缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将本发明黄芩素制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明黄芩素片剂的各种稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明黄芩素的胶囊剂。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。
本发明的活性成分或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明黄芩素与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及若干较佳实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，实施例中的试验方法均按照常规条件进行。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例
提供以下实施例来阐述本发明。本领域技术人员应当理解实施例仅仅是例示性的，而非限制性的。本发明仅仅由所附权利要求书的范围限定。
实施例1：使用黄芩素治疗由木瓜蛋白酶滴鼻诱导的嗜酸性鼻窦炎的2型炎症疾病小鼠模型
模型建立
动物实验对象为6-8周龄的雌性和雄性C57BL/6小鼠(体重20–22g)。所有研究分组中采用的小鼠年龄、性别、体重均相匹配。所有的小鼠均饲养于SPF级动物实验室，采用标准的小鼠饮食和饮水饲养，在研究开始前，经过7天的环境适应。
嗜酸性鼻窦炎的2型炎症疾病小鼠模型：首先通过木瓜蛋白酶滴鼻诱导建立嗜酸性鼻窦炎的2型炎症疾病小鼠模型(图1)。具体来说，分别在实验的第4、5、6、11、12、13、14、15天每日一次，根据实验分组不同，将20μg木瓜蛋白酶(Solarbio，目录号P8150)溶解于20μl生理盐水中滴鼻，或仅用20μl生理盐水滴鼻。根据实验分组不同，按照50mg/kg小鼠体重计算给药剂量，将黄芩素(Sigma-Aldrich，目录号465119)溶解于1ml的DPBS平衡盐溶液中，或仅有1ml的DPBS缓冲溶液，从实验的第1天开始每日一次灌胃，并在第16天处死小鼠，收集小鼠眼球静脉血，断头后解剖小鼠鼻腔，显微手术剪刀和剥离子刮取所有鼻腔、鼻窦黏膜用于后续的实验和检测。
三个试验分组的条件设置如下：
空白对照组小鼠：空白对照组小鼠为滴鼻20μl生理盐水造模；并灌胃DPBS平衡盐缓冲液治疗。
阳性对照小鼠：阳性对照为小鼠木瓜蛋白酶滴鼻造模嗜酸性鼻窦炎，并灌胃DPBS平衡盐缓冲液治疗。
黄芩素治疗组：黄芩素治疗组为小鼠木瓜蛋白酶滴鼻造模嗜酸性鼻窦炎，并灌胃上述黄芩素剂量溶解于DPBS平衡盐溶液中治疗。
ELISA分析
将收集到的小鼠鼻腔鼻窦黏膜用显微剪刀剪碎，每只小鼠的样本分别放入1ml的含有0.1％Triton X-100、蛋白酶抑制剂(Roche Diagnostics，目录号11836153001)、1mM苯甲基磺酰氟的PBS溶液中。将组织匀浆，并在15,000×g和4℃条件下离心2分钟。收集上清液，用于IL-4,IL-5,IL-13的ELISA(R&D Systems,目录号分别为DY404,DY405,DY413)和15-LO的ELISA(Abbexa,目录号abx353170)检测分析。将收集到的小鼠静脉血于室温25℃条件下3000rpm离心凝固10分钟，分层后抽取50ul上层血清，用于血清总IgE水平ELISA(Invitrogen,目录号88-50460-88)检测。
流式细胞分析
将收集到的小鼠鼻腔鼻窦黏膜用显微剪刀剪碎，每只小鼠的样本分别放入5ml含有3mg/ml胶原酶I,0.2mg/ml DNA酶I,0.5mg/ml透明质酸酶以及2mg/ml中性蛋白酶的DMEM培养基中进行消化，消化过程中放在37℃摇床上轻轻摇动20分钟。消化后的组织通过40μm细胞筛过滤，制备成单细胞悬液。然后把细胞平均分成两管，第一管用流式抗体CD3-FITC(BioLegend，目录号100203),CD4-PE/Cy7(BioLegend，目录号100527),CD45-APC/Cy7(BioLegend，目录号103116),CD326(EpCAM)-PE(BioLegend，目录号118205),B220-APC(BioLegend，目录号103212),进行染色，第二管用流式抗体CD45-APC/Cy7(BioLegend，目录号103116),F4/80-PE/Cy7(BioLegend，目录号123114),CD170(siglec-F)-APC(BioLegend，目录号155507)进行染色。然后用NovoCyte 3005流式细胞仪(ACEA Bioscience)进行检测和数据分析。
数据分析
所有数据统计采用非配对双侧t检验(unpaired two-sided t-tests)，当P<0.05时认为具有显著统计学差异。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,****P<0.0001。在柱状图中，数据以平均值±标准误(SEM)的形式展示。
结果
ELISA分析结果
发明人发现在木瓜蛋白酶诱导建立嗜酸性鼻窦炎模型后，ELISA分析显示阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜中的关键2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13在嗜酸性鼻窦炎中显著增高，而黄芩素治疗组中，这三种关键2型细胞因子水平显著下降(图2)。同样地，2型炎症相关分子15-LO在嗜酸性鼻窦炎阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜中显著增高，而黄芩素治疗后其表达显著下降(图3)。
ELISA分析显示血液中总IgE水平在嗜酸性鼻窦炎阳性对照组小鼠血液中显著增高，而黄芩素治疗后其水平显著下降(图4)。
流式细胞分析结果
流式细胞分析显示CD45+总炎症细胞数目、巨噬细胞(CD45+F4/80+)、嗜酸性粒细胞(CD45+Siglec-F+)、CD4+T细胞(CD45+CD3+CD4+)、B细胞(CD45+B220+)等炎症细胞数目在嗜酸性鼻窦炎阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜中显著增高，而黄芩素治疗后其均有显著减少(图5)。
ELISA分析和流式细胞分析结果证明，黄芩素在小鼠体内可以发挥显著抑制2型免疫，从而起到减轻2型炎症的作用。
实施例2：使用黄芩素治疗由阻塞和细菌感染诱导的非嗜酸性鼻窦炎的非2型炎症疾病小鼠模型
模型建立
通过海绵阻塞鼻窦以及细菌感染的方法诱导非嗜酸性鼻窦炎建立非2型炎症疾病的小鼠模型(图6)。具体来说，首先将小鼠麻醉后进行外科手术，在其鼻背部中线从眼球间平面到鼻尖方向切开5mm的切口。沿切口向两侧翻起皮瓣，显露骨质，使用显微手术电钻在每侧鼻腔上方磨除约3mm的骨窗。用11号手术刀片切开黏膜进入鼻腔，仔细止血后，根据实验分组不同，把50μl生理盐水滴入鼻腔，或把浸有细菌的高膨胀止血海绵(Merocel；Medtronic,Inc)(细菌类型为肺炎链球菌(ATCC49619)，50μl浓度为1.0×109CFU/ml的细菌溶液滴到高膨胀止血海绵中)仔细轻柔放入每侧鼻腔，并缝合手术切口皮瓣。
麻醉清醒后，小鼠被重新放回饲养笼中正常饲养15天，根据实验分组不同，按照50mg/kg小鼠体重计算给药剂量，将黄芩素(Sigma-Aldrich，目录号465119)溶解于1ml的DPBS平衡盐溶液中，或仅有1ml的DPBS缓冲溶液，从实验的第1天开始，每日一次灌胃给予黄芩素，并在第16天处死小鼠，收集小鼠眼球静脉血，断头后解剖小鼠鼻腔，显微手术剪刀和剥离子刮取所有鼻腔、鼻窦黏膜用于后续的实验和检测。
三个试验分组的条件设置如下：
空白对照组小鼠：空白对照组小鼠为进行假手术打开鼻腔并缝合关闭，不置入任何物质；并灌胃DPBS平衡盐缓冲液治疗。
阳性对照小鼠：阳性对照小鼠为小鼠手术置入浸有细菌的高膨胀止血海绵造模非嗜酸性鼻窦炎，并灌胃DPBS平衡盐缓冲液治疗。
黄芩素治疗组：黄芩素治疗组为小鼠手术置入浸有细菌的高膨胀止血海绵造模非嗜酸性鼻窦炎，并灌胃上述黄芩素剂量溶解于DPBS平衡盐溶液中治疗。
ELISA分析
将收集到的小鼠鼻腔鼻窦黏膜用显微剪刀剪碎，每只小鼠的样本分别放入1ml的含有0.1％Triton X-100、蛋白酶抑制剂(Roche Diagnostics，目录号11836153001)、1mM苯甲基磺酰氟的PBS溶液中。将组织匀浆，并在15,000×g和4℃条件下离心2分钟。收集上清液，用于IL-4,IL-5,IL-13，IL-8,IFN-γ的ELISA(R&D Systems,目录号分别为DY404,DY405,DY413，DY442,DY485)和15-LO的ELISA分析(Abbexa,目录号abx353170)检测分析。将收集到的小鼠静脉血于室温25℃条件下3000rpm离心凝固10分钟，分层后抽取50ul上层血清，用于血清总IgE水平ELISA(Invitrogen,目录号88-50460-88)检测。
流式细胞分析
将收集到的小鼠鼻腔鼻窦黏膜用显微剪刀剪碎，每只小鼠的样本分别放入5ml含有3mg/ml胶原酶I,0.2mg/ml DNA酶I,0.5mg/ml透明质酸酶以及2mg/ml中性蛋白酶的DMEM培养基中进行消化，消化过程中放在37℃摇床上轻轻摇动20分钟。消化后的组织通过40μm细胞筛过滤，制备成单细胞悬液。然后把细胞平均分成两管，第一管用流式抗体CD3-FITC(BioLegend，目录号100203),CD4-PE/Cy7(BioLegend，目录号100527),CD45-APC/Cy7(BioLegend，目录号103116),CD326(EpCAM)-PE(BioLegend，目录号118205),B220-APC(BioLegend，目录号103212),进行染色，第二管用流式抗体CD45-APC/Cy7(BioLegend，目录号103116),F4/80-PE/Cy7(BioLegend，目录号123114),LY6G-PE(BioLegend，目录号127607),CD170(siglec-F)-APC(BioLegend，目录号155507)进行染色。然后用NovoCyte3005流式细胞仪(ACEA Bioscience)进行检测和数据分析。
数据分析
所有数据统计采用非配对双侧t检验(unpaired two-sided t-tests)，当P<0.05时认为具有显著统计学差异。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,****P<0.0001。在柱状图中，数据以平均值±标准误(SEM)的形式展示。
结果
ELISA分析结果
发明人发现在非嗜酸性鼻窦炎小鼠模型中，ELISA分析显示阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜中的关键2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13水平并无显著增高，而黄芩素治疗组中，这三种关键2型细胞因子含量亦无显著变化(图7)；但是，阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜中，非2型炎症的关键细胞因子IL-8和INF-γ显著增高，而黄芩素治疗组与阳性对照组相比，这两种关键的非2型细胞因子含量亦无显著下降(图8)。ELISA分析显示2型炎症相关分子15-LO的表达在非嗜酸性鼻窦炎阳性对照组小鼠呼吸道鼻黏膜无明显升高，黄芩治疗亦对其含量无显著影响(图9)。
ELISA分析显示非嗜酸性鼻窦炎阳性对照组小鼠血液中总IgE水平无明显升高，黄芩治疗亦对其含量无显著影响(图10)。
流式细胞分析结果
流式细胞分析显示CD45+总炎症细胞数目、巨噬细胞(CD45+F4/80+)、中性粒细胞(CD45+LY6G+)、CD4+T细胞(CD45+CD3+CD4+)、B细胞(CD45+B220+)等炎症细胞数目在非嗜酸性鼻窦炎小鼠亦有明显升高，其中非2型炎症的标志性细胞--中性粒细胞(CD45+LY6G+)数量明显增高，而2型炎症标志性细胞--嗜酸性粒细胞(CD45+Siglec-F+)数目无明显变化；黄芩治疗组与阳性对照组相比，总炎症细胞数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数目无显著变化(图11)。
上述结果说明，黄芩素的治疗作用主要针对的是2型炎症，而对于非2型炎症疗效不明显。
实施例3：黄芩素抑制M2型巨噬细胞产生的2型炎症趋化因子
2型炎症疾病患者鼻黏膜：
所有对照和CRS患者均来自于北京协和医院就诊行鼻内镜手术的患者，研究经过医院伦理委员会批准，并取得患者的知情同意。对照患者的鼻黏膜来自于行脑脊液鼻漏修补、鼻窦囊肿、岩尖胆固醇肉芽肿、颞下窝肿瘤等患者，经过CT检查排除慢性鼻窦炎，其手术需要首先切除一部分筛窦正常黏膜作为手术显露病变部位所必需，因而收集部分正常黏膜作为对照组未对患者造成任何额外手术损伤。CRS患者包括：CRSsNP患者，收集部分手术中切除的筛窦病变的炎症鼻黏膜，eCRSwNP和neCRSwNP患者，收集部分手术中切除的来源于筛窦的炎症鼻息肉组织，用于后续的实验和检测。
免疫荧光：
将收集的鼻黏膜组织用4％多聚甲醛固定、脱水、用石蜡包埋。石蜡标本切成4μm的玻片，并脱蜡、水化。然后，通过抗原修复液(Dako)进行抗原修复，非特异性结合用5％山羊血清(Gibco)进行封闭。切片与一抗在4℃暗室共孵育过夜，然后用PBS清洗后，与二抗在室温环境下在暗室共孵育1小时。清洗后，封片检测。荧光图像通过ZEISS激光共聚焦显微镜(LSM 780)拍摄。使用的一抗包括:兔抗人ALOX15(ab244205,Abcam),鼠抗人CD68(MA5-12407,ThermoFisher Scientific),鼠抗人CD3(10981-MM06,Sino Biological),鼠抗人Syndecan-1(CD138)(ab34164,Abcam),鼠抗人TPSAB1(Tryptase)(MA5-11711,ThermoFisher Scientific),鼠抗人ALOX15(MA5-25891,ThermoFisher Scientific),兔抗人CD20(310340-T10,Sino Biological),兔抗人CD11c(310418-T08,Sino Biological),and兔抗人PRG2(Eosinophil major basic protein,EMBP)(PA5-102628,ThermoFisherScientific).使用的荧光素偶联的二抗包括：山羊抗兔IgG(H+L)-Alexa Fluor 488(A-11008,ThermoFisher Scientific),山羊抗鼠IgG(H+L)-Alexa Fluor 488(A-11001,ThermoFisher Scientific),山羊抗鼠IgG(H+L)-Alexa Fluor 555(A-21422,ThermoFisher Scientific)山羊抗兔IgG(H+L)-Alexa Fluor 555(A-21428,ThermoFisherScientific)。
人外周血来源的巨噬细胞的培养：
取来自于正常志愿者的外周血，通过Ficoll密度梯度离心获得外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)。从PBMC中进一步通过CD14磁珠(Miltenyi Biotec)阳性分选得到外周血单个核细胞。单个核细胞在含有5％胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基中培养，通过M-CSF(100ng/ml)(Pepro Tech)诱导5天，分化成巨噬细胞。巨噬细胞被种到24孔板中，每个孔1.5-2.5×105个细胞，然后分别用不同分组条件刺激48小时。具体条件为:对照组为PBS(空白对照)、IL-4(20ng/ml)(Pepro Tech)或IL-13(20ng/ml)(Pepro Tech)单独刺激巨噬细胞48小时；黄芩素抑制组为在前一组基础上加用黄芩素抑制炎症反应，用黄芩素(10μM)联合PBS(空白对照)、IL-4(20ng/ml)(Pepro Tech)或IL-13(20ng/ml)(Pepro Tech)应用，刺激巨噬细胞48小时。然后，收集培养基中细胞上清液，用于后续的Luminex趋化因子水平分析，或者Transwell趋化实验。
siRNA转染：
按上述方法步骤从健康志愿者外周血PBMC中分化培养得到人原代巨噬细胞。分别将终浓度为20nM的阴性对照(control scrambled)siRNA(ON-TARGETplus Non-targetingpool,D-001810-10-05,Dharmacon)或ALOX15 siRNA(ON-TARGETplus SMARTpool siRNA,L-003808-00-0005,Dharmacon)通过DharmaFECT 3转染液(Dharmacon)按说明书标准步骤转染至人原代巨噬细胞中。巨噬细胞在转染后24小时用PBS(空白对照),或IL-4(20ng/ml)(Pepro Tech)，或IL-13(20ng/ml)(Pepro Tech)进行刺激，收集培养基中细胞上清液，用于后续的Luminex趋化因子水平分析。
Luminex分析：
通过Luminex方法，按照说明书标准步分析上述实验收集的不同刺激条件的人原代巨噬细胞培养液上清中浓度趋化因子CCL13、CCL17、CCL18、CCL24的浓度(R&D Systems)。
Transwell趋化实验：
按上述方法步骤从健康志愿者外周血PBMC中，用CD4+T细胞磁珠分选试剂盒(Miltenyi Biotec，130-091-155)通过阴性选择法分离得到CD4+T细胞。将5×105CD4+T细胞用无血清的RPMI培养基重悬在24孔Transwell板(5.0μm聚碳酸酯膜,Corning)的上室中；下室中加入600μl无血清的RPMI培养基或者上述巨噬细胞经过不同条件刺激后的培养基上清。将整个Transwell板在37℃孵育14小时，然后收集穿越到下室的CD4+T细胞，并进行计数。通过与PBS刺激的巨噬细胞(空白对照)组比较，计算CD4+T细胞变化的倍数，得到趋化指数(chemotactic index)。类似的方法，采用人血液嗜酸性粒细胞磁珠分选试剂盒(Miltenyi Biotec，130-104-446)通过阴性选择法分离得到嗜酸性粒细胞，然后同法进行Transwell趋化实验，通过与PBS刺激的巨噬细胞(空白对照)组比较，计算嗜酸性粒细胞变化的倍数，得到趋化指数。
数据分析
所有数据统计采用非配对双侧t检验(unpaired two-sided t-tests)，当P<0.05时认为具有显著统计学差异。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,****P<0.0001。在柱状图中，数据以平均值±标准误(SEM)的形式展示。
结果
免疫荧光检测结果
通过免疫荧光检测到与正常对照、非2型炎症的CRSsNP和neCRSwNP患者的鼻黏膜相比，15-LO表达水平在2型炎症的eCRSwNP患者鼻黏膜中特异性升高，其中在多种免疫细胞中，15-LO与CD68+巨噬细胞和EMBP+嗜酸性粒细胞共定位的细胞数目比正常对照和非2型炎症的CRSsNP和neCRSwNP患者显著增加(图12)。
黄芩素体外治疗结果
通过把健康人外周血单个核细胞通过IL-4或IL-13刺激诱导分化成M2型巨噬细胞，模拟2型炎症疾病中的巨噬细胞状态，随后将黄芩素加入M2型巨噬细胞培养基，结果显示，与PBS空白对照相比，IL-4或IL-13刺激均能大福提高巨噬细胞产生CCL13、CCL17、CCL18、CCL24等2型炎症趋化因子的水平。与之相对应的，通过加入黄芩素治疗可以显著降低2型细胞因子IL-4或IL-13刺激诱导M2型巨噬细胞产生的CCL13、CCL17、CCL18、CCL24等2型炎症趋化因子水平(图13)。
siRNA转染结果
15-LO由ALOX15基因编码表达，通过向M2型巨噬细胞中转染靶向ALOX15的siRNA敲低15-LO的表达，降低2型细胞因子IL-4或IL-13刺激诱导M2型巨噬细胞产生CCL13、CCL17、CCL18、CCL24等2型炎症趋化因子的水平(图14)。CCL13、CCL17、CCL18、CCL24等2型炎症趋化因子是嗜酸性粒细胞、Th2细胞、单核巨噬细胞等2型炎症疾病中发挥重要作用的炎症细胞的主要趋化因子，对于炎症细胞向炎症组织募集迁移的过程发挥重要作用。靶向ALOX15的siRNA与黄芩素相比，对这四种2型炎症趋化因子的抑制作用基本一致，提示了黄芩素治疗2型炎症的疗效可能与其抑制15-LO并且降低此四种2型炎症趋化因子水平的作用相关。
Transwell趋化实验结果
体外Transwell趋化实验证实，黄芩素能显著抑制2型细胞因子IL-4或IL-13刺激诱导的M2巨噬细胞对于嗜酸性粒细胞和CD4+T细胞的趋化作用(图15)。因此，黄芩素可能抑制15-LO，并且调控巨噬细胞的2型炎症相关趋化因子的表达，减少机体中嗜酸性粒细胞、Th2细胞、单核巨噬细胞等2型炎症细胞的募集与浸润，从而起到调节2型免疫，减轻2型炎症的治疗作用。
尽管已参考说明性实施例描述了本发明，但所属领域的技术人员将理解，在不背离本发明的精神及范围的情况下可做出各种其它改变、省略及/或添加且可用实质等效物替代所述实施例的元件。另外，可在不背离本发明的范围的情况下做出许多修改以使特定情形或材料适应本发明的教示。因此，本文并不打算将本发明限制于用于执行本发明的所揭示特定实施例，而是打算使本发明将包含归属于所附权利要求书的范围内的所有实施例。

Claims (10)

1.活性成分或包含活性成分的组合物在制备用于治疗和/或预防2型炎症疾病的药物中的用途，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物。
2.根据权利要求1所述的用途，其中2型炎症疾病选自下组：嗜酸性慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、嗜酸性哮喘、阿司匹林加重的呼吸道疾病、嗜酸性食管炎、嗜酸性胃肠炎、嗜酸性结肠炎或特应性皮炎。
3.根据权利要求2所述的用途，其中嗜酸性慢性鼻窦炎是伴有或不伴有鼻息肉的嗜酸性慢性鼻窦炎。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中治疗或预防通过以下一种或多种方式实现：
(1)降低细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；
(2)降低IgE水平；
(3)抑制15-脂氧合酶代谢通路；
(4)减少趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；和
(5)减少嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其中组合物还包含糖皮质激素、抗组胺药物、白三烯受体拮抗剂、针对IL-4或其受体的抑制剂或拮抗剂、针对IL-5或其受体的抑制剂或拮抗剂、针对IL-13或其受体的抑制剂或拮抗剂和针对IgE或其受体的抑制剂或拮抗剂中的一种或多种，优选地，抑制剂或拮抗剂是抗体，优选单克隆抗体。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的用途，其中组合物还包含药学可接受的载体和/或赋形剂。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途，其中药物是口服、静脉内、肌肉内、皮下、鼻腔内或局部施用的药物。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的用途，其中药物是溶液、悬液、乳剂、丸剂、注射剂、片剂、胶囊、颗粒、控制释放或持续释放制剂、喷鼻剂、滴鼻剂、雾化吸入、皮肤外涂的形式。
9.活性成分或包含活性成分的组合物在制备药物中的用途，所述活性成分选自：黄芩素或其药学可接受的盐或水合物，和黄芩苷或其药学可接受的盐或水合物；所述药物用于以下一种或多种：
(1)降低2型炎症疾病患者中的细胞因子IL-4、IL-5和IL-13中的一种或多种；
(2)降低2型炎症疾病患者中的IgE水平；
(3)抑制2型炎症疾病患者中的15-脂氧合酶代谢通路；
(4)减少2型炎症疾病患者中的趋化因子CCL13、CCL17、CCL18和CCL24中的一种或多种的表达；和
(5)减少2型炎症疾病患者中的嗜酸性粒细胞、Th2细胞和单核巨噬细胞中的一种或多种的浸润。
10.根据权利要求9所述的用途，其中2型炎症疾病选自下组：嗜酸性慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、嗜酸性哮喘、阿司匹林加重的呼吸道疾病、嗜酸性食管炎、嗜酸性胃肠炎、嗜酸性结肠炎或特应性皮炎。
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