CN115581803A - 一种聚酯基微球及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种聚酯基微球及其制备方法和应用。本发明将纳米银、聚乙烯亚胺、可降解人工合成聚酯和聚多巴胺结合使用，得到的聚酯基微球具有良好的银离子缓释效果，离子释放周期及抑菌效果可达28天以上，抗菌效果强，并具备良好的生物相容性和生物活性，能有效促进组织的修复和重建，尤其是存在细菌感染下的组织修复与重建。

Description

一种聚酯基微球及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物医学材料领域，尤其涉及一种聚酯基微球及其制备方法和应用。
背景技术
严重开放性骨折、骨科术后感染、急慢性骨髓炎所导致的感染性骨缺损的修复重建已成为临床医生面临的巨大挑战，常需要多次手术，早期局部抗生素的应用能有效减少开放伤骨感染，抗菌人工骨支架材料有望用于治疗感染性骨缺损。将抗菌性药物与载体结合的药物控释系统是有效解决骨感染难题的选择之一，药物控释系统可以在植入部位直接或间接地促进药物的延长释放，除了持续和可控的给药外，这些给药载体还可以保护活性因子和蛋白质分子免于解离或失活，提高整体生物利用度和临床疗效。与全身用药相比，局部给药降低了血浆药物浓度，从而避免了一些不良反应或一般毒性；而且靶向骨感染部位的局部给药载体通常具有一定的骨诱导活性，结合抗菌性药物和骨修复材料的局部给药系统在骨感染治疗中表现出显著的优势。
研究表明纳米银颗粒对数十种致病微生物都有强烈的抑制和杀灭作用，无耐药性，无细胞毒性，能够促进伤口的愈合。金属离子如银离子对细菌的影响是多方面的，它们通过改变正常生物膜内外的极化状态形成新的细胞内外离子浓度差，阻碍或破坏维持细胞生理功能的小分子和大分子物质的运输。一些金属离子如银离子也可以进入微生物细胞内，使大多数酶失活，发挥抗菌效能。但是，当金属离子如银离子的浓度过高时，会造成生物毒性。因此，需要生物材料作为银的载体材料，使之缓慢释放阴离子，在抗菌的同时不造成生物毒性。
但现有技术制得的纳米银颗粒易于被氧化，并且难以稳定控制银离子的释放速率。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明第一个方面提出一种聚酯基微球，能够抗菌、可降解且具有表面活性。
本发明的第二个方面提出了一种聚酯基微球的制备方法。
本发明的第三个方面提出了一种聚酯基微球在制备抗菌材料中的应用。
本发明的第四个方面提出了一种聚酯基微球在制备骨修复材料中的应用。
根据本发明的第一个方面，提出了一种聚酯基微球，包括负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒、可降解的聚酯和聚多巴胺；所述负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒被包裹于可降解的聚酯中；所述可降解的聚酯表面包覆有所述聚多巴胺。
在本发明中，聚乙烯亚胺包裹纳米银后，1)可保护纳米银不被氧化；2)可调控银离子从微球中的释放速率；表面的聚多巴胺层1)可促进细胞在微球表面的粘附与增殖；2)可与聚乙烯亚胺及可降解人工合成聚酯协同起到控制银离子的释放速率，从而达到同时抗菌和促组织再生修复的效果，所述聚酯基微球的银离子释放周期及抑菌效果可达28天以上。
在本发明的一些实施方式中，所述负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒中的聚乙烯亚胺的分子量为500Da～70k Da。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述聚乙烯亚胺的分子量包括但不限于600Da、1800Da、3000Da、10000Da、25000Da、70000Da。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒为球状或类球状，粒径为5nm～50nm。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述聚酯基微球的平均粒径为10μm～200μm。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述可降解的聚酯为可降解的人工合成聚酯，选自聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚己内酯、聚3-羟基烷酸酯、聚(3-羟基丁酸酯)、聚3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯、聚三亚甲基碳酸酯、聚丁二酸丁二酯中的任一种。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述可降解的聚酯的分子量为10k Da～100k Da。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述聚酯基微球的平均粒径为50μm～150μm。
根据本发明的第二个方面，提出了一种聚酯基微球的制备方法，包括如下步骤：
S1：将聚乙烯亚胺溶液与硝酸银溶液混合，调节pH，除去溶解氧，反应，冷却至室温，透析，干燥后得到负载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒；
S2：将S1所述颗粒与可降解的聚酯混合后滴加至表面活性剂中，固化，得到微球；
S3：将S2所述微球分散到聚多巴胺溶液中，得到第一方面所述的聚酯基微球。
在本发明的一些实施方式中，S1所述聚乙烯亚胺溶液与所述硝酸银溶液的浓度比为(0.5mg/mL～2mg/mL)：(100mg/mL～200mg/mL)，体积比为1：(5～20)。
在本发明的一些实施方式中，S1所述pH的值为3.5～4.5，优选pH的值为4。
在本发明的一些实施方式中，S1所述除去溶解氧包括：搅拌15min～60min后通入惰性气体。
在本发明的一些实施方式中，S1所述反应的温度为120℃～200℃，时间为5min～30min。
在本发明的一些实施方式中，S1所述透析的分子量为100Da～100k Da，时间为12h～72h。
在本发明的一些实施方式中，S1所述干燥为冷冻干燥，温度为-70℃～-60℃，时间为40h～50h。
在本发明的一些实施方式中，S2所述颗粒与可降解的聚酯的质量比为1：(50～400)。
在本发明的一些优选的实施方式中，S2所述颗粒与可降解的聚酯的质量比为1：(50～300)。
在本发明的一些优选的实施方式中，S2所述表面活性剂包括但不限于聚乙烯醇、明胶、甲基纤维素中的一种或几种。
在本发明的一些优选的实施方式中，S2所述表面活性剂的浓度为2.5mg/mL～10mg/mL。
在本发明的一些优选的实施方式中，S2所述固化为搅拌固化，搅拌的转速为300rpm～800rpm，时间为12h～24h。
在本发明的一些优选的实施方式中，S3所述聚多巴胺溶液的浓度为0.3mg/mL～3mg/mL。
在本发明的一些优选的实施方式中，S3所述微球与聚多巴胺的质量比为(100～500)：1。
在本发明的一些优选的实施方式中，S3具体包括将S2所述微球分散到聚多巴胺溶液中，搅拌，离心，清洗沉淀，得到第一方面所述聚酯基微球。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述搅拌的转速为300rpm～500rpm，时间为3h～24h。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述离心的转速为500rpm～2000rpm，时间为5min～10min。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述清洗为去离子水清洗，次数为1～6次。
根据本发明的第三个方面，提出了一种聚酯基微球在制备抗菌材料中的应用，所述聚酯基微球为第一方面所述的聚酯基微球。
根据本发明的第四个方面，提出了一种聚酯基微球在制备骨修复材料中的应用，所述聚酯基微球为第一方面所述的聚酯基微球。
本发明的有益效果为：
(1)本发明的聚乙烯亚胺包裹纳米银后，可保护纳米银不被氧化，及可调控银离子从微球中的释放速率；本发明的聚多巴胺层可促进细胞在微球表面的粘附与增殖，并可与聚乙烯亚胺及可降解人工合成聚酯协同起到控制银离子的释放速率，从而在不影响促组织再生修复性能的同时还兼具抗菌和抑菌效果，防止进一步感染影响恢复效果，保证了修复效果的高效性和稳定性，本发明的聚酯基微球中银离子释放周期及抑菌效果可达28天以上。
(2)本发明的制备方法工艺简单，对设备的要求不高，原料均已产业化、来源易得，成本低廉，易于实现产业化。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
图1为本发明实施例1制备的聚酯基微球的电镜图；
图2为本发明实施例1～5及对比例1、3制备的聚酯基微球的体外银离子释放性能检测结果；
图3为本发明实施例1～5及对比例1～3制备的聚酯基微球的体外诱导前成骨细胞成骨分化性能结果。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例制备了一种聚酯基微球，具体过程为：
取1mL含200mg聚乙烯亚胺(分子量：600Da)的水溶液分散于5mL含10mg硝酸银的水溶液，用稀硝酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌60min后通惰性气体除溶解氧，120℃下搅拌反应30min，自然冷却至室温，透析(500Da)12h，-60℃冷冻干燥48h，获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺颗粒。将20mg上述颗粒分散于20mL含1g聚3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯(分子量：80k Da)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒/聚3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯的共混液；配置200mL含2g聚乙烯醇1799的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到聚乙烯醇1799水溶液中，300rpm下持续搅拌固化24h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于1.67mL浓度为3mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌3h，1000rpm离心10min，去离子水清洗5次，获得所述聚酯基微球。
图1为本实施例制备的聚酯基微球的电镜图。
实施例2
本实施例制备了一种聚酯基微球，具体过程为：
取1mL含150mg聚乙烯亚胺(分子量：25k Da)的水溶液分散于20mL含10mg硝酸银的水溶液，用乙酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌45min后通惰性气体除溶解氧，180℃下搅拌反应20min，自然冷却至室温，透析(10k Da)72h，-60℃冷冻干燥48h，获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺颗粒。将10mg上述颗粒分散于13mL含1g聚乳酸(分子量：10k Da)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒/聚乳酸的共混液；配置400mL含5g明胶的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到明胶水溶液中，400rpm下持续搅拌固化15h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于2mL浓度为2mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌9h，500rpm离心10min，去离子水清洗6次，获得所述聚酯基微球。
实施例3
本实施例制备了一种聚酯基微球，具体过程为：
取1mL含100mg聚乙烯亚胺(分子量：10k Da)的水溶液分散于14mL含10mg硝酸银的水溶液，用稀盐酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌25min后通惰性气体除溶解氧，160℃下搅拌反应10min，自然冷却至室温，透析(5k Da)36h，-60℃冷冻干燥72h。获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺颗粒。将8mg上述颗粒分散于10mL含1g聚乳酸-羟基乙酸共聚物(分子量：30kDa)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒/聚乳酸-羟基乙酸共聚物的共混液；配置300mL含2g明胶的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到明胶水溶液中，350rpm下持续搅拌固化12h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于5mL浓度为0.5mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌12h，1000rpm离心10min，去离子水清洗6次，获得所述聚酯基微球。
实施例4
本实施例制备了一种聚酯基微球，具体过程为：
取1mL含100mg聚乙烯亚胺(分子量：3kDa)的水溶液分散于10mL含10mg硝酸银的水溶液，用氢氟酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌15min后通惰性气体除溶解氧，200℃下搅拌反应5min，自然冷却至室温，透析(2k Da)24h，-60℃冷冻干燥48h，获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺颗粒。将2.5mg上述颗粒分散于15mL含1g聚丁二酸丁二酯(分子量：100k Da)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒/聚丁二酸丁二酯的共混液；配置500mL含4g聚乙烯醇1788的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到聚乙烯醇1788水溶液中，300rpm下持续搅拌固化18h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于3.33mL浓度为0.3mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌24h，2000rpm离心5min，去离子水清洗6次，获得所述聚酯基微球。
实施例5
本实施例制备了一种聚酯基微球，具体过程为：
取1mL含180mg聚乙烯亚胺(分子量：1.8k Da)的水溶液分散于12mL含10mg硝酸银的水溶液，用硫酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌30min后通惰性气体除溶解氧，150℃下搅拌反应12min，自然冷却至室温，透析(1k Da)48h，-60℃冷冻干燥48h，获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺颗粒。将15mg上述颗粒分散于8mL含1g聚己内酯(分子量：60k Da)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒/聚己内酯的共混液；配置600mL含1.5g甲基纤维素的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到甲基纤维素水溶液中，800rpm下持续搅拌固化12h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于2.5mL浓度为1.5mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌15h，1000rpm离心10min，去离子水清洗6次，获得所述聚酯基微球。
对比例1
本对比例制备了一种聚酯基微球，与实施例3的主要区别在于，本对比例不使用聚乙烯亚胺，具体过程为：
将8mg硝酸银分散于10mL含1g聚乳酸-羟基乙酸共聚物(分子量：30k Da)的二氯甲烷溶液中，得到硝酸银/聚乳酸-羟基乙酸共聚物的共混液；配置300mL含2g明胶的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到明胶水溶液中，350rpm下持续搅拌12h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于5mL浓度为0.5mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌12h，1000rpm离心10min，去离子水清洗6次，所述聚酯基微球。
对比例2
本对比例制备了一种聚酯基微球，与实施例3的主要区别在于，本对比例不使用硝酸银，具体过程为：
配制1mL含120mg聚乙烯亚胺(分子量：10k Da)的水溶液，用盐酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌25min后通惰性气体除溶解氧，160℃下搅拌反应10min，自然冷却至室温，透析(5k Da)36h，-60℃冷冻干燥72h，获得聚乙烯亚胺颗粒。将8mg该颗粒分散于10mL含1g聚乳酸-羟基乙酸共聚物(分子量：30k Da)的二氯甲烷溶液中，得到聚乙烯亚胺颗粒/聚乳酸-羟基乙酸共聚物共混液；配置300mL含2g明胶的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到明胶水溶液中，350rpm下持续搅拌12h后将容器底部的微球分离出来，得到微球。将500mg微球分散于浓度为5mL含0.5mg/mL的聚多巴胺水溶液中，搅拌12h，1000rpm离心10min，去离子水清洗6次，获得所述聚酯基微球。
对比例3
本对比例制备了一种聚酯基微球，与实施例3的主要区别在于，本对比例不使用聚多巴胺，具体过程为：
取1mL含120mg聚乙烯亚胺(分子量：10k Da)的水溶液分散于14mL含10mg硝酸银的水溶液，用盐酸水溶液调节反应液pH至4.0，搅拌25min后通惰性气体除溶解氧，160℃下搅拌反应10min，自然冷却至室温，透析(5k Da)36h，-60℃冷冻干燥72h，获得包裹纳米银的聚乙烯亚胺粉体。将8mg该共混物分散于10mL含1g聚乳酸-羟基乙酸共聚物(分子量：30k Da)的二氯甲烷溶液中，得到装载纳米银的聚乙烯亚胺粉体/聚乳酸-羟基乙酸共聚物共混液；配置300mL含2g明胶的水溶液，然后将上述共混液缓慢滴加到明胶水溶液中，350rpm下持续搅拌12h后将容器底部的微球分离出来，1000rpm离心10min，用去离子水清洗6次，制得所述聚酯基微球。
试验例
1.体外细胞毒性评价
将实施例1～5和对比例1～3中制备得到的聚酯基微球按GB/T 16886.5-2017的要求进行细胞毒性评级，由L929小鼠成纤维细胞(丰晖生物Cat Number:CL0339)组成的哺乳动物单层细胞作为测试系统。结果见表1。
表1实施例及对比例所制得复合微球的体外细胞毒性评级
实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 对比例1 对比例2 对比例3
计分 0 0 0 0 0 3 0 0
由实施例及对比例的体外细胞毒性评级结果(表1)可知，本发明方法所制备的聚酯基微球均无细胞毒性。对比例1由于浸提液中的银离子浓度过高，导致其有细胞毒性。
2体外银离子释放性能检测
将实施例1～5和对比例1和3中制备得到的聚酯基微球进行体外溶质释放评价，具体步骤为：
(1)首先分别精密称取2mg上述各例中的聚酯基微球至离心管中，分别加入PBS缓冲液至总体积为5mL，密封后，保持温度在37±1℃，100rpm下置于摇床中振摇。
(2)隔一段时间点(分别于第1,3,7,14,21,28天)，停止振摇，停止振摇，取样，分别将取样样品(释放介质)经220nm孔径的微孔滤膜过滤，分别测定滤液中的银离子浓度，根据投入的银离子量(可根据将步骤(1)样品离心后溶液中的银离子浓度和离心后总溶液的体积，得到复合微球原始载银离子量，即本步骤中所述的投入的银离子量)及取样的体积可计算出此时银离子释放的百分比。
(3)往沉淀中加入新鲜PBS缓冲液至总体积为5mL，继续按第一步条件振摇，然后重复进行(2)、(3)步。
(4)释放总时间为28天，最后根据时间和累积释放百分比得到银离子释放曲线，结果见图1。
3.聚酯基微球抗菌性能检测
取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的斜面新鲜培养物，将菌液进行活菌计数，并用稀释液(1％蛋白胨的0.03mol/L PBS(pH＝7.2～7.4))配制成含菌量均为5×105～10×106CFU/mL的菌悬液。将实施例1～5和对比例1～3制备的聚酯基微球分别放入无菌平皿中，加菌悬液50μL于各皿中，并记录各皿加菌时间，于加菌后60min接种血平板，同时将样本放入5mL营养肉汤管内。将接种细菌的血平板及肉汤管放37℃培养48h，观察初步结果，在无菌生长管继续培养至第35天。若肉汤管浑浊及血平板有菌生长，记为阳性，以(+)表示；如第28天仍澄清，视为无菌生长，以(-)表示，反之则以(+)表示，结果见表2。
表2实施例及对比例所制得复合微球的杀菌效果
Figure BDA0003845588270000081
由体外银离子释放性能检测结果及杀菌效果可知(图1及表2)，实施例1～5都有长效的银离子释放性能及杀菌效果。实施例1与对比例1都是基于装载银离子的聚酯基微球，其中，实施例1在制备的过程中，使用聚乙烯亚胺预包裹纳米银，对比例1则不使用聚乙烯亚胺。在没有聚乙烯亚胺预包裹纳米银的情况下，复合微球中的银离子在72h内便释放出去，也达不到长效的抗菌效果。与实施例1相比，对比例2不装载银离子，没有杀菌效果。
4.体外诱导前成骨细胞成骨分化性能检测
将实施例1～5和对比例1～3制备的聚酯基微球分别辐照灭菌后按照10mg/mL的浓度分别浸泡在DMEM基础培养基内，放入37℃摇床内120rpm浸提24h。浸提完成后分别将微球及培养基1000rpm离心后收集上清。将收集的浸提液分别用相应的DMEM培养基稀释2倍，最后添加10％胎牛血清得到完全培养基。
将MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞前体细胞按照每孔1×105个的密度接种于24孔板，贴壁培养24h后分别更换上述完全培养基，在温度为37℃且5％二氧化碳气氛下的培养箱中培养。上述完全培养基每2d～3d更换一次，培养7天后，MC3T3-E1细胞的成骨分化性能通过其分泌的碱性磷酸酶(ALP)检测，采用LaboassayTMALP试剂盒，利用pNPP法进行测定，具体步骤如下：细胞用PBS溶液洗涤后，浸没于含有0.1M甘氨酸、1mM氯化镁以及0.05％曲拉通X-100的PBS溶液。待细胞溶解后，将20μL溶解液与100μL对硝基苯磷酸二钠盐(p-NPP)溶液均匀混合，将混合液置于37℃下反应15min，加入80μL的NaOH溶液终止反应。随后，将混合液滴加到96孔板，用酶标仪测定405nm波长下各孔的吸光值。总蛋白含量的测定采用Bradford蛋白检测试剂盒，采用Bradford蛋白检测试剂盒附带的BSA配制不同浓度的BSA水溶液，测定在595nm波长的吸光度值，绘制标准曲线；取细胞裂解液测定其在595nm波长的吸光度值，与标准曲线对应计算得到总蛋白含量。ALP的量除以总蛋白含量及反应时间，计算得到每种微球上细胞中实际的碱性磷酸酶含量，结果见图3。
由体外诱导前成骨细胞成骨分化性能可知(图3)，实施例1～5都有较好的诱导细胞分泌碱性磷酸酶的效果，但对比例1不使用聚乙烯亚胺预包裹银，材料浸提液中的银离子浓度较高，对细胞活性有不利的影响，因此也影响了细胞分泌碱性磷酸酶；对比例2不装载银离子，其体外诱导前成骨细胞成骨分化性能较好；对比例3由于缺少具有生物活性的聚多巴胺，该组细胞分泌的碱性磷酸酶也较低。
上面对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (10)

1.一种聚酯基微球，其特征在于，包括负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒、可降解的聚酯和聚多巴胺；所述负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒被包裹于可降解的聚酯中；所述可降解的聚酯表面包覆有所述聚多巴胺。
2.根据权利要求1所述的聚酯基微球，其特征在于，所述聚酯基微球的平均粒径为10μm～200μm。
3.根据权利要求2所述的聚酯基微球，其特征在于，所述负载有纳米银的聚乙烯亚胺颗粒中的聚乙烯亚胺的分子量为500Da～70k Da。
4.根据权利要求3所述的聚酯基微球，其特征在于，所述可降解的聚酯的分子量为10kDa～100k Da。
5.权利要求1～4任一项所述的聚酯基微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：将聚乙烯亚胺溶液与硝酸银溶液混合，调节pH，去除溶解氧，反应，冷却至室温，透析，干燥后得到负载纳米银的聚乙烯亚胺颗粒；
S2：将S1所述颗粒与可降解的聚酯混合后滴加至表面活性剂中，固化，得到微球；
S3：将S2所述微球分散到聚多巴胺溶液中，得到聚酯基微球。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，S1所述聚乙烯亚胺溶液与所述硝酸银溶液的浓度比为0.5～2：100～200，体积比为1：(5～20)。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，S2所述颗粒与可降解的聚酯的质量比为1：(50～400)。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，S3所述微球与聚多巴胺的质量比为(100～500)：1。
9.权利要求1～4任一项所述的聚酯基微球在制备抗菌材料中的应用。
10.权利要求1～4任一项所述的聚酯基微球在制备骨修复材料中的应用。
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