CN115537266A

CN115537266A - 一种稳定性植物调和油的制备方法及检测方法

Info

Publication number: CN115537266A
Application number: CN202211124944.0A
Authority: CN
Inventors: 张晓明
Original assignee: Hubei Manau River Ecological Agriculture Development Co ltd
Current assignee: Hubei Manau River Ecological Agriculture Development Co ltd
Priority date: 2022-09-15
Filing date: 2022-09-15
Publication date: 2022-12-30

Abstract

本发明提供了一种稳定性植物调和油的制备及检测方法，在调和过程中充氮，隔绝植物调和油调和过程中氧气同植物油的接触，降低植物调和油调和过程中氧化反应，并以电子自旋捕获技术(ESR)作为手段，通过对比植物调和油加工及贮藏前后自由基谱图总强度变化情况评价植物调和油在加工及贮藏过程中氧化稳定性。本发明建立了一种提高植物调和油氧化稳定性的加工技术，建立了加工及贮藏过程中自由基强度的实时检测技术，明确不同植物调和油在不同加工及贮藏阶段的氧化稳定性。

Description

一种稳定性植物调和油的制备方法及检测方法

技术领域

本发明涉及食品工程技术领域，更具体的说是涉及一种稳定性植物调和油的制备方法及检测方法。

背景技术

植物调和油在调和搅拌等过程中，由于原料油中富含的多不饱和脂肪酸在氧气等促氧化环境的胁迫下，发生脂质氧化自由基链式反应，生成氢过氧化物、α，β-多不饱和醛类等氧化产物，造成植物调和油发生劣变反应，导致其货架期下降。此外，传统检测油脂氧化的方法为过氧化值法、TBARS法等，此类方法耗时且准确度较低，氧化自由基作为油脂氧化反应的初始产物，对评价油脂氧化稳定性至关重要。因此本发明通过调和充氮技术提高植物调和油氧化稳定性，并通过检测植物调和油在加工、贮藏过程中氧化自由基的生成，进而反应植物调和油加工及贮藏过程中的氧化稳定性。

现有加工方法主要为搅拌调和，在此过程中由于存在搅拌的加工手段，油脂中的不饱和脂肪酸接触到氧气的几率变大，造成植物调和油中含氧率上升，且植物调和油中含有大量的多不饱和脂肪酸，导致植物调和油更容易发生氧化反应，生成氢过氧化物、小分子醛酮类等物质，造成调和油在贮藏和加工过程中产生哈败味道影响其货架期时间。

此外，现阶段评价植物油氧化稳定性的评价方法主要为过氧化值法、TBARS法等，但此类方法存在前处理麻烦、需要大量化学试剂、灵敏度不高的缺点。中国发明专利(专利号：ZL201610515761.X)公开了一种鉴别精炼植物油中地沟油掺假的方法。以PBN作为自旋捕获剂，然后用布鲁克自旋共振波谱仪检测简练植物油掺假前后自由基强度变化，采用波谱拟合方法，对植物油中地沟油掺假的比例进行定量。该方法具有一定的精确度，但是本方法所使用仪器较为贵重，且主要针对地沟油掺假造成油脂易发生氧化反应的状态，适用范围较小。

DMPO作为一种环状硝酮捕获剂，被广泛应用在生物体系中，对羟基自由基、请过氧自由基、超氧阴离子自由基等都具备良好的捕获效果，并且对碳中心和氧中心自由基都具有很高的反应活性。油脂发生自动氧化、光敏氧化等过程中容易生成烷基自由基、烷氧自由基等脂质氧化自由基，DMPO能够特异性的捕获此类自由基，基于DMPO实验谱图能够清晰的辨别出油脂氧化过程中生成的不同自由基的强度，并且通过自由基强度变化评价油脂氧化稳定性。

因此，本发明提供了一种新的调和油制备工艺能够在植物油调和过程中隔绝氧气，保证植物调和油在调和阶段的氧化稳定性，进而提高其货架期时间，以及一种通过添加DMPO作为捕获剂的ESR高效、高灵敏度检测方法来代替传统的初、次级氧化产物检测方法，为本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种稳定性植物调和油的制备及检测方法，在调和加工过程中在调和罐底部充入氮气，隔绝植物调和油调和过程中氧气同植物油的接触，降低植物调和油氧化反应，并以电子自旋捕获技术作为手段，通过对比植物调和油加工及贮藏前后DMPO自由基谱图强度变化情况评价植物调和油在加工及贮藏过程中氧化稳定性。本发明建立了一种提高植物调和油氧化稳定性的加工技术，建立了植物调和油加工及贮藏过程中氧化稳定性的快速实时检测技术，明确不同植物调和油在加工及贮藏阶段的氧化稳定性。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种稳定性植物调和油的制备方法，包括：

根据所需植物调和油配方，将植物油按所占比例从小到大依次加入搅拌罐中，搅拌均匀；

其中，所述搅拌罐底部接通有气管，将植物油加入到搅拌罐之后，持续充入氮气，待所述搅拌结束后，将气管升至植物油液面上方并持续通入氮气20-40min。

优选的，所述植物油为市售精炼植物油。

优选的，所述植物油包括但不限于菜籽油、大豆油、亚麻籽油、稻米油和核桃油等市售植物油中的任两种或两种以上组合。

优选的，所述搅拌速度为40-100r/min，搅拌时间为20-40min。

本发明的另一个目的在于提供一种稳定性植物调和油的检测方法，其特征在于，包括：将上述稳定性植物调和油的制备方法制得的植物调和油置于玻璃器皿顺磁管中，加入DMPO漩涡震荡混匀，用玻璃毛细管吸取混合物1cm，置于2mm顺磁管中，进行ESR检测，然后通过MATLAB软件对ESR检测得到的实验波谱进行分析，以实验波谱中对应的自由基峰强度作为评价植物调和油氧化稳定性指标。

优选的，所述DMPO为纯度为98.0％及以上的二甲基吡啶N-氧化物标准品。

优选的，所述植物调和油的用量为100mg，所述DMPO在检测体系中的终浓度为10％w/w。

优选的，ESR检测的条件为：检测温度：25-140℃，中心场强3450-3550G，扫描宽度200G，分辨率4723，微波功率0.32-0.40mW，调制幅度1.00G，调制频率100.00kHz，时间常数1.28ms。

其中，DMPO实验谱图解析是以谱图中烷基自由基强度和烷氧自由基强度之和来表明自由基生成规律(如图1所示总自由基强度为烷基自由基强度和烷氧自由基强度之和)，因此本实验图谱中总自由基强度为烷基自由基强度+烷氧自由基强度。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1.本发明能够解决富含多不饱和脂肪酸植物调和油在调和过程中由于搅拌步骤的存在导致植物调和油中混入大量气体，造成脂质氧化导致调和油货架期短的产业问题，且操作简单，成本较低，能够显著延长植物调和油货架期。

2.本发明提供的检测方法能够快速的实时检测植物调和油在加工、贮藏等过程中的氧化稳定性，且无溶剂、灵敏度高、操作更加简便。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为本发明植物调和油相对氧化稳定性(自由基强度)表示方法示例图(总自由基强度△APP＝烷基自由基强度+烷氧自由基强度)；

图2五味智宝^TM调和油(A)及非本工艺生产相同配方调和油(B)DMPO实验图谱。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种稳定性植物调和油的制备方法，包括：

(1)样品选择为市场选购亚麻籽油、一级菜籽油、一级大豆油、稻米油、核桃油。捕获剂为市场购入DMPO标准品，纯度为98.0％。

(2)通过20L/min的速率将核桃油(1-5％)、稻米油(5-10％)、亚麻籽油(10-20)、一级大豆油(30-40％)、一级菜籽油(30-40％)按照比例依次加入搅拌罐中，在搅拌罐底部冲入氮气进行保护，氮气流速为20L/min，并在75r/min的转速下30min完成调和，制备学生用五味智宝^TM调和油，待检测备用。

经湖北省疾控中心，采用正常动物模型，选择初断乳小鼠作为研究对象，给予五味智宝^TM配方调和油45天后，按照规范的跳台试验、避暗试验、水迷宫试验进行学习记忆功能的检测。试验结束后摘取眼球，提取总RNA，荧光定量PCR技术测定与视网膜发育相关基因Cd24、Tgfb2、Casp7、Bmp2水平。

结果表明：(1)五味智宝TM配方调和油对小鼠体重的影响。与溶媒对照组比较，各剂量组小鼠体重无明显改变(P>0.05)，提示该受试物对动物体重无影响。(2)五味智宝TM配方调和油对小鼠学习记忆的影响。

水迷宫试验：与溶媒对照组比较，记忆消退试验中，低、高剂量组小鼠到达终点的时间明显缩短(P<0.05)，低剂量组到达终点的错误次数明显减少(P<0.05)，水迷宫试验结果判定为阳性；

跳台试验：与溶媒对照组比较，测验期各剂量组错误次数均明显减少(P<0.05)，跳台试验结果判定为阳性；

避暗试验：与溶媒对照组比较，各剂量组潜伏期、错误次数及错误反应率均无明显改变(P>0.05)，避暗试验结果判定为阴性。

以上结果提示，五味智宝^TM配方调和油可增强正常小鼠的学习记忆功能。(3)五味智宝TM配方调和油对视网膜发育的影响。与溶媒对照组比较，中剂量组Cd24、Tgfbr2及Bmp2的mRNA表达量均上调(P<0.05)，各剂量组Casp7的mRNA表达量无明显改变(P>0.05)，提示五味智宝TM配方调和油可促进初断乳小鼠的视网膜发育。验证具有改善学习能力、增强视网膜发育的功效。

实施例2

对实施例1制得的调和油进行检测，包括：

(a)ESR检测：吸取五味智宝^TM调和油100mg，加入10％w/w DMPO置于样品管中旋涡震荡溶解，吸取入玻璃毛细管中，将毛细管置于内径为2mm的顺磁管中，进行ESR检测；

其中，步骤(a)中DMPO为纯度为98.0％及以上的二甲基吡啶N-氧化物标准品。

ESR检测所使用的ESR仪器为布鲁克NANO型号，ESR检测条件为：检测温度：25℃，中心场强3420，扫描宽度100G，分辨率4723，微波功率0.3162mW，调制幅度1.000G，调制频率100.00kHz，时间常数1.28ms；

(b)波谱解析：通过MATLAB对检测获得的实验波谱进行图谱解析，并分析其波谱强度，自由基强度表示方法如图1△APP所示。

本样品选取为五味智宝^TM调和油通过本工艺调和完成后，常温下封口保存6个月后产品，从实验图谱可以看出，五味智宝^TM调和油通过ESR检测后无明显自由基被检测到(同基线持平)，整体强度约为0.10左右，无脂质氧化自由基生成，说明五味智宝调和油在调和及调和后贮藏过程中能够保持稳定；非本发明中调配工艺所生产的相同配方调和油在贮藏6个月后，检测得到的实验谱图总自由基强度为0.63，远大于本发明调和工艺所生产的五味智宝^TM调和油，说明本发明中调和工艺能够显著提高调和油氧化稳定性，且以DMPO作为捕获剂的ESR自旋捕获方法能够快速准确的检测出油脂的氧化稳定性。

本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims

1.一种稳定性植物调和油的制备方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种稳定性植物调和油的制备方法，其特征在于，所述植物油为市售精炼植物油。

3.根据权利要求1所述的一种稳定性植物调和油的制备方法，其特征在于，所述植物油包括菜籽油、大豆油、亚麻籽油、核桃油、稻米油中的任两种或两种以上组合。

4.根据权利要求1所述的一种稳定性植物调和油的制备方法，其特征在于，所述搅拌速度为40-100r/min，搅拌时间为20-40min。

5.一种稳定性植物调和油的检测方法，其特征在于，包括：将权利要求1-4任一所述稳定性植物调和油的制备方法制得的植物调和油置于顺磁管中，氮气吹扫至干燥，加入DMPO漩涡震荡混匀，用毛细管吸取混合物，置于磁管中，进行ESR检测，然后通过MATLAB软件对ESR检测得到的实验波谱进行分析，以实验波谱中样品的自由基强度对应的峰强度作为评价植物调和油氧化稳定性指标。

6.根据权利要求5所述的一种稳定性植物调和油的检测方法，其特征在于，所述DMPO为纯度≥98％的二甲基吡啶N-氧化物标准品。

7.根据权利要求5所述的一种稳定性植物调和油的检测方法，其特征在于，所述植物调和油的用量为100mg，所述DMPO在检测体系的浓度为10％w/w。

8.根据权利要求5所述的一种稳定性植物调和油的检测方法，其特征在于，ESR检测的条件为：检测温度：25-140℃，中心场强3450-3550G，扫描宽度100-200G，分辨率4723，微波功率0.30-0.40mW，调制幅度1.00G，调制频率100.00kHz，时间常数1.28ms。