CN115531397A - 盐酸米诺环素在制备对光损伤视网膜色素上皮细胞具有保护作用的药物中的应用 - Google Patents

盐酸米诺环素在制备对光损伤视网膜色素上皮细胞具有保护作用的药物中的应用 Download PDF

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杨柳
宋蔚林
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赵亮
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Abstract

本发明公开了一种盐酸米诺环素的药物新用途。该新用途是盐酸米诺环素在制备预防和/或治疗视网膜光损伤性疾病的产品中的应用。所述视网膜光损伤性疾病可为视网膜色素上皮细胞光损伤引起的疾病；具体包括年龄相关性黄斑变性、视网膜光损伤等。本发明首次提出盐酸米诺环素对光损伤人视网膜上皮细胞具有保护作用，抑制蓝关造成的人视网膜色素上皮细胞的损伤及死亡，减轻了炎症反应，为光损伤人视网膜上皮细胞的具体机制研究及药物治疗提供了新的进展。

Description

盐酸米诺环素在制备对光损伤视网膜色素上皮细胞具有保护 作用的药物中的应用
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及盐酸米诺环素在制备对光损伤视网膜色素上皮细胞具有保护作用的药物中的应用。
背景技术
光照能够诱导人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium，RPE)损伤及死亡。光损伤视网膜色素上皮细胞与多种眼底疾病相关。年龄相关性黄斑变性是老年人群致盲的主要原因之一，而光损伤视网膜色素上皮细胞是其重要的发病机制之一。可见光部分(380-780nm)的光辐射能够抵达视网膜，400～500nm的蓝光部分具有较强的能量能造成视网膜光损伤。440nm波长附近的光对RPE细胞的损伤尤为严重。盐酸米诺环素是一种广谱抗菌的四环素类抗生素。既往的研究仅表明盐酸米诺环素能够抑制小胶质细胞的活化，对慢性退行性疾病有保护作用，关于光损伤这类急性损伤以及对人视网膜色素上皮细胞的保护作用并无相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种盐酸米诺环素的药物新用途。
本发明所提供的盐酸米诺环素的药物新用途是其在制备预防和/或治疗视网膜光损伤性疾病的产品中的应用。
其中，所述视网膜光损伤性疾病可为视网膜色素上皮细胞光损伤引起的视网膜相关疾病；具体包括年龄相关性黄斑变性、视网膜光损伤等。
所述光损伤是由蓝光引起的损伤。
所述蓝光的波长为400～500nm，更进一步可为440-445nm。
示例性的，所述产品可为药物或药物制剂。
本发明还保护一种产品。
所述预防和/或治疗视网膜光损伤性疾病的产品，其活性成分为盐酸米诺环素。
本发明所述产品除含有盐酸米诺环素外，还可含有适宜的载体或赋形剂，以及包含其他起配伍协同作用的有效成分。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。上述药物可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式；上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
上述药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。
本发明首次提出盐酸米诺环素对光损伤人视网膜上皮细胞具有保护作用，抑制蓝光造成的人视网膜色素上皮细胞的损伤及死亡，减轻了炎症反应，为光损伤人视网膜上皮细胞的具体机制研究及药物治疗提供了新的进展。
附图说明
图1为倒置相差显微镜观察ARPE-19细胞形态，其中，A)为对照组，B)为光照组，C)为光照+盐酸米诺环素组。
图2为Annexin V/PI流式检测细胞死亡情况，其中，A)为对照组，B)为光照组，C)为光照+盐酸米诺环素组。
图3为各组中ARPE-19细胞形态的电镜照片，其中，A)为对照组，B)为光照组，C)为光照+盐酸米诺环素组。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
实施例1、证实盐酸米诺环素能够减轻蓝光对视网膜色素上皮细胞的损伤，对人视网膜色素上皮细胞具有保护作用。
1、实验材料：
盐酸米诺环素
ARPE-19细胞系(人视网膜色素上皮细胞系)
Annexin V/PI试剂盒
电镜固定液
2、实验方法：
一、倒置相差显微镜观察细胞形态
1.将ARPE-19细胞分为三组：对照组、光照组、光照+盐酸米诺环素组。
2.光照+盐酸米诺环素组在蓝光光照前加入30uM盐酸米诺环素孵育30分钟；光照组、光照+盐酸米诺环素组接受440-445nm波长的2200Lux的蓝光照射2小时。照射结束后再等待2小时。
3.倒置相差显微镜拍照，观察三组细胞形态。
二、Annexin V/PI流式检测细胞死亡情况
1.将ARPE-19细胞分为三组：对照组、光照组、光照+盐酸米诺环素组。
2.光照+盐酸米诺环素组在蓝光光照前加入30uM盐酸米诺环素孵育30分钟。光照组、光照+盐酸米诺环素组接受440-445nm波长的2200Lux的蓝光照射2小时。照射结束后再等待2小时。
3.对照组、光照组、光照+盐酸米诺环素组三组细胞胰蛋白酶消化后，Annexin V/PI试剂盒染色。
4.流式上机分析三组细胞的死亡情况。
三、透射电镜检测细胞形态
1.将ARPE-19细胞分为三组：对照组、光照组、光照+盐酸米诺环素组。
2.光照+盐酸米诺环素组在蓝光光照前加入30uM盐酸米诺环素孵育30分钟。光照组、光照+盐酸米诺环素组接受440-445nm波长的2200Lux的蓝光照射2小时。照射结束后再等待2小时。
3.三组细胞胰蛋白酶消化后，固定染色，电镜拍照。
3、结果：
一、倒置相差显微镜观察ARPE-19细胞形态
结果见图1。由图1可知，光照组细胞明显皱缩、变形，加入盐酸米诺环素组的细胞在接受光照后，形态接近于正常对照组细胞。
二、Annexin V/PI流式检测细胞死亡情况
结果见图2。由图2可知，与对照组细胞相比较，光照组细胞位于右上象限的死亡细胞增加，而位于左下象限的存活细胞减少。接受了同样光照的盐酸米诺环素组右上象限的细胞较光照组大幅度减少，而左下象限的存活细胞大量增加。
三、电镜检测ARPE-19细胞形态
结果见图3。由图3可知，与对照组细胞相比，光照组细胞胞质内出现大量空泡，并且细胞绒毛消失。加入盐酸米诺环素组细胞形态与对照组细胞相似，且保留部分细胞绒毛。
4、结论：
盐酸米诺环素能够减轻光照对视网膜色素上皮细胞的损伤，对视网膜色素上皮细胞具有保护作用。

Claims (7)

1.盐酸米诺环素在制备预防和/或治疗视网膜光损伤性疾病的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述视网膜光损伤性疾病为视网膜色素上皮细胞光损伤引起的视网膜相关疾病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述疾病包括年龄相关性黄斑变性、视网膜光损伤。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于：所述光损伤是由蓝光引起的损伤。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述蓝光的波长为400～500nm，优选为440-445nm。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于：所述产品为药物或药物制剂。
7.一种预防和/或治疗视网膜光损伤性疾病的产品，其特征在于：所述产品的活性成分为盐酸米诺环素。
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WO2020198634A1 (en) * 2019-03-27 2020-10-01 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for treating age-related macular degeneration
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Non-Patent Citations (1)

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Title
赵素霞: "光损伤大鼠视网膜TNF-α的表达变化及米诺环素对其表达的影响", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》, no. 6, pages 073 - 81 *

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