CN115487202A - 非达霉素在制备抗诺卡菌感染的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种非达霉素的新用途。该新用途是非达霉素或其药学上可接受的化合物在制备抗诺卡菌感染的产品中的应用。本发明采用微孔板二倍稀释法进行非达霉素抗诺卡菌活性进行测定,结果表明,非达霉素对临床常见分离的诺卡菌有较好的抑菌活性,有望发掘出非达霉素在治疗诺卡菌感染疾病中的新用途。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及非达霉素在制备抗诺卡菌感染的药物中的应用。
背景技术
诺卡菌属(Nocardia)是土壤、水和其他有机物中普遍存在的一类革兰阳性需氧放线菌。近年来,诺卡菌引起的感染呈逐渐上升趋势,威胁着人类健康。目前已确认110余种诺卡菌,其中50余种有临床意义。诺卡菌主要影响免疫功能低下或免疫功能正常的人群,引起人类器官(包括肺部、皮肤、中枢神经系统等)严重的机会性感染。磺胺类药物是大多数诺卡菌病患者单独使用或与阿米卡星或利奈唑胺联合使用的药物,近年来随着抗生素的广泛使用,相继有文献报道诺卡菌对磺胺类药物产生了不同程度的耐药水平,且不同种类诺卡菌对磺胺类药物的耐药水平也有着较大的差异。因此寻找诺卡菌治疗效果较佳的替代药物非常有必要。
非达霉素(Fidaxomicin)是美国食品和药物管理局(FDA)2011年批准上市的大环内酯类窄谱类抗菌药物,主要是通过抑制细菌的RNA聚合酶,阻止细菌转录,抑制芽孢的形成而产生迅速的抗感染作用。目前主要用于包括,但不限于艰难梭菌引起相关疾病。但尚未有非达霉素抑制诺卡菌的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供非达霉素的药物新用途。
第一方面,本发明要求保护a1)非达霉素,或a2)非达霉素药学上可接受的盐,或a3)以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在如下任一中的应用:
(A1)制备用于抑制诺卡菌活性的产品;
(A2)抑制诺卡菌活性。
第二方面,本发明要求保护a1)非达霉素,或a2)非达霉素药学上可接受的盐,或a3)以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在如下任一中的应用:
(B1)制备用于抗诺卡菌感染的产品;
(B2)抗诺卡菌感染。
第三方面,本发明要求保护a1)非达霉素,或a2)非达霉素药学上可接受的盐,或a3)以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在如下任一中的应用:
(C1)制备用于预防和/治疗由诺卡菌感染所致疾病的产品;
(C2)预防和/治疗由诺卡菌感染所致疾病。
第四方面,本发明要求保护a1)非达霉素,或a2)其药学上可接受的盐,或a3)以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在如下任一中的应用:
(D1)制备诺卡菌抑菌剂;
(D2)作为诺卡菌抑菌剂。
第五方面,本发明要求保护一种产品。
本发明所要求保护的产品,其活性成分为非达霉素或其药学上可接受的盐;所述产品具有如下任一用途:
(a1)抑制诺卡菌活性;
(a2)抗诺卡菌感染;
(a3)预防和/治疗由诺卡菌感染所致疾病。
本发明中所述产品具体可为药品。
需要的时候,在上述药品中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体;所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
上述药品可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式;上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
上述药品可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织;或是被其他物质混合或包裹后导入机体。
第六方面,本发明要求保护一种诺卡菌抑菌剂。
本发明所要求保护的诺卡菌抑菌剂,其活性成分为非达霉素或其药学上可接受的盐。
在上述各方面中,所述诺卡菌可为诺卡菌临床分离株或诺卡菌感染的患者携带的诺卡菌。
在本发明的一个具体实施方式中,所述诺卡菌为诺卡菌临床分离株。
在上述各方面中,所述产品均可为药品。
第七方面,本发明要求保护一种抑制诺卡菌活性的方法。
本发明所要求保护的抑制诺卡菌活性的方法,是使用非达霉素或其药学上可接受的盐或以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质抑制诺卡菌活性。
其中,所述诺卡菌可为诺卡菌临床分离株。
在所述方法中,所述非达霉素或其药学上可接受的盐或以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质的用量不小于其对待抑制的所述诺卡菌的最小抑菌浓度(MIC)。
所述方法为非疾病诊断治疗方法。如作为阳性对照用于开发诺卡菌敏感药物。
在上述各方面中,所述非达霉素的分子式为C52H74Cl2O18;结构式如式I所示。
本发明以采用微孔板二倍稀释法进行非达霉素抗诺卡菌活性测定,结果表明,非达霉素对临床常见分离的诺卡菌均有较好的抑菌活性,有望发掘出非达霉素在治疗诺卡菌感染疾病中的应用。
附图说明
图1为非达霉素(Fidaxomicin)对临床常见分离的诺卡菌菌株的MIC浓度分布。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述,但本发明并不限于以下实施例。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。
非达霉素(Fidaxomicin)(CAS 873857-62-6):购自于Topscience,货号:T6194;
分子式:C52H74Cl2O18;结构式如下:
实施例、非达霉素对诺卡菌临床常见分离菌株抑菌活性检测
临床常见分离菌株:51株从诺卡菌感染患者痰标本中分离培养出的菌株,经16SrRNA、hsp65、rpoB、16-23S rRNA间区测序鉴定为诺卡菌(见表1)。
待测药物:非达霉素
1、在96孔板的每孔中加入100μl Mueller Hinton(MH)培养基;
2、完成步骤1后,取所述96孔板,在第12列加入100μl浓度为32μg/mL的待测药物溶液(采用DMSO配制),混匀后吸出100μl加入第11列,依次梯度稀释至第2列后,抽出100μl弃掉,第1列不含药物,为阳性对照孔。每个浓度设置3个复孔。
3、完成步骤2后,取所述96孔板,每孔加入100μl诺卡菌临床常见分离菌株菌悬液,使每孔中最终容积均为200μl,菌液终浓度2.5×105CFU/mL;各孔内的最终药物浓度具体见表1。
诺卡菌临床常见分离菌株菌悬液制备方法:将诺卡菌临床常见分离菌株接种于哥伦比亚血琼脂平板上,37℃温箱中培养5-7天左右后刮取培养基上处于生长对数期的单个菌落,磨菌比浊后用Mueller Hinton(MH)培养基稀释。
表1 51株临床常见分离诺卡菌菌株的菌种分布统计结果
表2各列孔内的最终药物浓度
4、完成步骤3后,将所述96孔板放至37℃温箱中,培养3天。
5、完成步骤4后,取所述96孔板,每孔加入30μl Resazurin sodium salt溶液(50mg Resazurin sodium salt溶于50ml ddH2O),然后继续放至37℃温箱中培养24h。
6、完成步骤5后,取所述96孔板,读取最小抑菌浓度(MIC)并计算抑制率。
最小抑菌浓度(MIC)读取方法:最小抑菌浓度(MIC)即为能够抑制90%菌落生长的药物浓度。通过荧光检测(Ex/Em,530nm/600nm)抑制>90%还原型Resazurin sodium salt生成的最小药物浓度。则记录MIC。
抑制率%=100%-(检测孔荧光值-背景荧光值)/(生长对照孔荧光值-背景荧光值)×100%。
背景荧光值为阴性对照的荧光值,生长对照孔荧光值为阳性对照的荧光值。
阴性对照为未加药物和菌液的培养基,阳性对照为未加药物的含菌培养基。
MIC结果如表3所示。MIC浓度分布统计结果如表4和图1所示。
表3非达霉素对临床常见分离诺卡菌菌株的MIC
表4非达霉素对临床常见分离诺卡菌菌株的MIC浓度分布统计结果
结果表明,非达霉素对临床常见分离的诺卡菌有较好的抑菌活性,有望发掘出非达霉素在治疗诺卡菌感染疾病中的新用途。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说,在不脱离本发明的宗旨和范围,以及无需进行不必要的实验情况下,可在等同参数、浓度和条件下,在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例,应该理解为,可以对本发明作进一步的改进。总之,按本发明的原理,本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进,包括脱离了本申请中已公开范围,而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围,可以进行一些基本特征的应用。
Claims (10)
1.非达霉素或其药学上可接受的盐或以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在下述至少一种中的应用:
1)在制备诺卡菌抑菌剂中应用;
2)在制备抑制诺卡菌活性的产品中的应用;
3)在制备抗诺卡菌感染的产品中的应用;
4)在制备预防和/或治疗诺卡菌所致疾病的产品中的应用。
2.非达霉素或其药学上可接受的盐或以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在下述至少一种中的应用:
1)在抑制诺卡菌活性中应用;
2)在抗诺卡菌感染中的应用;
3)在预防和/或治疗诺卡菌所致疾病中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述诺卡菌为诺卡菌临床常见分离株,或诺卡菌感染的患者携带的诺卡菌;
所述产品为药品。
4.一种诺卡菌抑菌剂,其活性成分为非达霉素或其药学上可接受的盐。
5.根据权利要求4所述的抑菌剂,其特征在于:所述诺卡菌为诺卡菌临床常见分离株,或诺卡菌感染的患者携带的诺卡菌。
6.一种产品,其活性成分为非达霉素或其药学上可接受的盐;
所述产品具有下述至少一种功效:
a)抑制诺卡菌活性;
b)抗诺卡菌感染;
c)预防和/或治疗诺卡菌所致疾病。
7.根据权利要求6所述的产品,其特征在于:所述诺卡菌为诺卡菌临床常见分离株,或诺卡菌感染的患者携带的诺卡菌。
8.根据权利要求6或7所述的产品,其特征在于:所述产品为药品。
9.一种抑制诺卡菌活性的方法,包括下述步骤:使用以非达霉素或其药学上可接受的盐为活性成分的物质抑制诺卡菌活性。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述诺卡菌为诺卡菌临床常见分离株。
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