CN115475197A - 腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 - Google Patents
腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115475197A CN115475197A CN202110658562.5A CN202110658562A CN115475197A CN 115475197 A CN115475197 A CN 115475197A CN 202110658562 A CN202110658562 A CN 202110658562A CN 115475197 A CN115475197 A CN 115475197A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- granule
- group
- extract
- rotavirus
- fuan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000008187 granular material Substances 0.000 title claims abstract description 77
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 title claims abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 52
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 5
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 claims description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 206010012742 Diarrhoea infectious Diseases 0.000 claims description 3
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 3
- -1 accelerators Substances 0.000 claims description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 claims description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 claims description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003380 propellant Substances 0.000 claims description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims 1
- 239000000686 essence Substances 0.000 claims 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 1
- 239000010420 shell particle Substances 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 28
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 26
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 25
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 19
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 12
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 7
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 6
- 208000019637 Infantile Diarrhea Diseases 0.000 description 5
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 5
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 5
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 4
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 4
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000448435 Acalypha australis Species 0.000 description 3
- 244000307697 Agrimonia eupatoria Species 0.000 description 3
- 244000104272 Bidens pilosa Species 0.000 description 3
- 235000010662 Bidens pilosa Nutrition 0.000 description 3
- 244000281762 Chenopodium ambrosioides Species 0.000 description 3
- 235000000509 Chenopodium ambrosioides Nutrition 0.000 description 3
- 240000003109 Persicaria chinensis Species 0.000 description 3
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 3
- 206010067470 Rotavirus infection Diseases 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002953 anti-rotaviral effect Effects 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 235000000125 common agrimony Nutrition 0.000 description 3
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 241000617996 Human rotavirus Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 101100264172 Oryza sativa subsp. japonica XIAO gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 208000012873 acute gastroenteritis Diseases 0.000 description 2
- 238000002832 anti-viral assay Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N propranolol hydrochloride Chemical compound [H+].[Cl-].C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 2
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 240000004510 Agastache rugosa Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 238000001134 F-test Methods 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 208000032754 Infant Death Diseases 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 241000219099 Parthenocissus quinquefolia Species 0.000 description 1
- 235000009388 Parthenocissus quinquefolia Nutrition 0.000 description 1
- 241000702247 Reoviridae Species 0.000 description 1
- 241001137860 Rotavirus A Species 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000007427 paired t-test Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001543 purgative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 1
- 208000026775 severe diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005727 virus proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/47—Euphorbiaceae (Spurge family), e.g. Ricinus (castorbean)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
- A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供了腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,具体而言,涉及腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用。
背景技术
轮状病毒(Rotavirus,简称RV)是一种双链核糖核酸病毒,属于呼肠孤病毒科, 它是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一。轮状病毒腹泻是由轮状病毒引起的胃肠道感染 性腹泻。轮状病毒主要在每年夏秋冬季流行,临床表现为急性胃肠炎,呈渗透性腹泻病。 全世界每年因轮状病毒感染导致的婴幼儿死亡人数约为90万人,大多数发生在发展中 国家。轮状病毒感染性胃肠炎也是引起婴幼儿严重腹泻的最主要病原。目前轮状病毒感 染缺乏有效的治疗药物,临床上主要采取对症治疗和积极预防(疫苗接种)。
腹安颗粒是厦门中药厂有限公司的独家品种,具有清热解毒,燥湿止痢的功效,主要成分为仙鹤草、火炭母、铁苋菜、鬼针草和土荆芥,临床上主要用于痢疾、急性胃肠 炎、腹泻、腹痛等。
目前尚无腹安颗粒可用于抗轮状病毒的报道。
发明内容
本发明旨在提供一种腹安颗粒浸膏的新用途,为轮状病毒感染提供一种新的治疗药 物。
因此,一方面,本发明提供了腹安颗粒浸膏在制备抗轮状病毒的药物中的用途。
另一方面,本发明提供了腹安颗粒浸膏在制备用于治疗由轮状病毒引起的疾病的药 物中的用途。
本发明中,腹安颗粒浸膏是指按照腹安颗粒的中药处方,通过将用于制备腹安颗粒 的中药材原料煎煮后得到的提取液经浓缩后得到的浸膏。所述腹安颗粒浸膏可以由厦门 中药厂有限公司得到。
本发明中,用于制备腹安颗粒的主要中药材原料成分为仙鹤草、火炭母、铁苋菜、鬼针草和土荆芥。
在一个实施方式中,所述腹安颗粒浸膏可以通过包括以下步骤的制备方法得到:仙 鹤草160g,火炭母240g,铁苋菜240g,鬼针草480g,土荆芥480g,以上五味,加水 煎煮两次,第一次1.5小时,第二次1小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩成稠膏,即得。 但是,本领域技术人员可以参考上述配方和方法进行修改和替换,因此本发明不限于此。
本发明中,在一些实施方式中,所述由轮状病毒引起的疾病包括但不限于,由轮状病毒引起的胃肠道感染性腹泻、胃肠炎等。
本发明的药物可以为本领域常规的各种剂型,例如固体、半固体或液体的形式,可以为水溶液、非水溶液、混悬液、锭剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂和散剂等。
所述药物的给药途径可以为注射给药或口服给药,优选为口服给药。所述注射给药 可以包括静脉注射、肌肉注射、腹腔注射、皮内注射或皮下注射等途径。
基于质量百分比,所述药物可以包括0.01~99.99%腹安颗粒浸膏,以及99.99~0.01%的药学上可接受的辅料。
所述药学上可接受的辅料例如可以选自赋形剂、填充剂、稀释剂、表面活性剂、粘合剂、抗氧剂、防腐剂、矫味剂、甜味剂、风味剂、香精、吸附剂、润滑剂、包衣剂、 缓释剂、促进剂、推进剂、着色剂、颜料、染料等。
本发明中,优选地,所述药物是厦门中药厂有限公司生产的腹安颗粒,国药准字Z35020068。
本发明通过体外细胞实验,发现腹安颗粒浸膏具有显著的抗轮状病毒的作用。
在上文中已经详细地描述了本发明,但是上述实施方式本质上仅是例示性,且并不 欲限制本发明。此外,本文并不受前述现有技术或发明内容或以下实施例中所描述的任何理论的限制。
除非另有明确说明,在整个申请文件中的数值范围包括其中的任何子范围和以其中 给定值的最小子单位递增的任何数值。除非另有明确说明,在整个申请文件中的数值表示对包括与给定值的微小偏差以及具有大约所提及的值以及具有所提及的精确值的实 施方案的范围的近似度量或限制。除了在详细描述最后提供的工作实施例之外,本申请 文件(包括所附权利要求)中的参数(例如,数量或条件)的所有数值在所有情况下都 应被理解为被术语“大约”修饰,不管“大约”是否实际出现在该数值之前。“大约”表示所 述的数值允许稍微不精确(在该值上有一些接近精确;大约或合理地接近该值;近似)。 如果“大约”提供的不精确性在本领域中没有以这个普通含义来理解,则本文所用的“大 约”至少表示可以通过测量和使用这些参数的普通方法产生的变化。例如,“大约”可以 包括小于或等于10%,小于或等于5%,小于或等于4%,小于或等于3%,小于或等于 2%,小于或等于1%或者小于或等于0.5%的变化。
附图说明
图1为各组乳鼠小肠病理图(HE染色×250)。
具体实施方式
在下文中,将通过实施例详细描述本发明。然而,在此提供的实施例仅用于说明目的,并不用于限制本发明。
下述实施例所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1
1实验材料
1.1药物
(1)腹安颗粒浸膏,由厦门中药厂有限公司提供,批号190701-B,滤过,除菌分 装,4℃备用。
(2)利巴韦林颗粒,白色颗粒,由四川百利药业有限责任公司生产,批准文号: 国药准字H51023508,50mg/袋,作为本次试验阳性对照药物。
(3)小儿泻速停颗粒,规格:3g/袋,国药准字Z19991035,产品编号225326,批 号:2019031502,哈尔滨儿童制药厂有限公司。临床用药:1岁内幼儿18g/日。细胞内 抗病毒实验时用无菌双蒸馏水配成含生药200mg/mL水溶液,用10%NaOH溶液调pH 至6.0,60℃,30min隔水灭菌供试验用。
1.2细胞、病毒株及培养液
人轮状病毒(HRV wa株):由中国医学科学研究院北京疾病控制中心病毒研究所段招军教授赠送。
细胞:MA104细胞用于培养HRV,体内外抗病毒实验。
细胞培养液:细胞培养用DMEM液体培养基(USA.GIBCO);胎牛血清(sigma 公司产品,货号DL-1074),0.25%胰蛋白酶(Difco公司产品,货号:C125C1),PBS HyClone公司(货号:SH30256.01)。
细胞生长完全培养基:含10%小牛血清、0.29mg谷氨酰胺/ml、100u/ml青、链毒 素的Eagle’s MEM(日本日水制药株式会社出品);细胞生长维持液,除所含小牛血清 为2%外,其他含量均同完全培养液。
1.3试剂:
Na2CO3,规格500g/瓶,天津市大茂化学试剂厂生产,批号:20180826。
NaHCO3,规格500g/瓶,科密欧化学试剂有限公司,批号:20180814。
印度墨汁,进口分装,规格100ml/瓶,由Solarbio公司提供。
氯化钠,规格500g/瓶,国药集团化学试剂有限公司生产,批号20180525。
无水葡萄糖,规格500g/瓶,天津市科密欧化学试剂公司生产,批号250120314。
通用型组织固定液(批号:183218),武汉塞维尔生物科技有限公司。
HE染液(批号:G1005),武汉塞维尔生物科技有限公司。
人轮状病毒抗原(HRVAg)ELISA试剂盒(96T货号:40517),上海源叶生物科技有 限公司。
IFN-α/βELISA试剂检测盒96T购自Abcam公司(IFN-α编号Ab252352;IFN- β编号Ab252363),范围15.6ng/mL~1000ng/mL。
IL-1βMouse ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)kit货号Abcamab100704购于艾博抗(上海)贸易有限公司。
IL-4Mouse ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)kit货号Abcamab100710 购于艾博抗(上海)贸易有限公司。
TNF-αMouse ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)kit货号Abcamab208348购于艾博抗(上海)贸易有限公司。
IL-10Mouse ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)kit货号Abcamab255729购于艾博抗(上海)贸易有限公司。
5-HT Mouse ELISA购于上海古朵生物科技有限公司ZC37715。
1.4动物
C57BL/6母孕鼠:湖南中医药大学实验动物中心统一购自湖南斯莱克景达实验动物 供应公司,购回后置消毒鼠笼中饲养,待产(经ELISA法检测母孕鼠血液中HRVIgG 均为阴性)。乳鼠出生后由母鼠喂养5天,供实验用。
实验环境设施许可证号:SYXK(湘)2017-0001。
小鼠用全价颗粒饲料由长沙市开福区东创动物科技服务部提供。生产许可证号:SCXK(湘)2019-0013。
1.5主要设备
UV-1800紫外分光光度计,日本岛津;
DJ-10002电子天平,福州华志科学仪器有限公司;
DT-1000A电子天平,江苏常熟市意欧仪器仪表有限公司;
AY-120电子分析天平,日本岛津;
TG16-WS台式高速离心机,湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;
ELx800光吸收酶标仪,美国宝特公司产品;
ZQTY-70N振荡培养箱(上海知楚仪器有限公司);
SW-CJ-2FD超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司);
正置光学显微镜和NIKON DS-U3成像系统(日本尼康公司);
MULITSKAN Sky酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司);
MINIP-2500微孔板离心机(杭州米欧仪器有限公司);
MINI-4K微型离心机(杭州米欧仪器有限公司);
5418R低温高速离心机(德国Eppendorf公司);
XH-C旋涡混合器(金坛市白塔新宝仪器厂);
Nano-100微量分光光度计(杭州奥盛仪器有限公司)。
2.1体外抗病毒试验
2实验方法
“腹安颗粒”浸膏剂量与给药设置
试验药物均用无菌蒸馏水配置,因此对照为无菌蒸馏水。
“腹安颗粒浸膏”推荐70kg成人临床日用剂量为12.54g(12.54/70=0.179g/kg)。
20g小鼠相当于70kg成人日用剂量的0.0026倍,则“腹安颗粒”小鼠的等效剂量约为 1.630g/kg(按体表面积折算:(12.54×0.0026×50=1.630);
小鼠以“腹安颗粒”推荐临床用量的等效剂量作为低剂量:1.630g/kg,按体重折算为 9.1倍(1.630/0.179=9.1倍)。
小鼠“腹安颗粒”推荐临床用量的4倍剂量作为高剂量:6.520g/kg,按体重折算为36.42 倍(6.520/0.179=36.42倍)。
“小儿泻速停颗粒”推荐10kg 1岁婴幼儿临床日用剂量为18g(18/10=1.8g/kg),3.5g 体重5日龄乳鼠给药等效剂量约1.33g/kg,以等效剂量的2倍剂量作给药剂量为2.66g/kg (1.8g×0.0026÷0.035×=2.66g/kg)。
2.1.1HRV对50%培养细胞感染剂量(TCID50)的测定(CPE法)
在96孔细胞培养板接种5×105个/ml的MA104细胞悬液100μl,培养24h后吸去 培养板中的培养液,用PBS液洗涤细胞3次,加入用细胞维持液稀释的病毒液100μl (10–1至10–10),每个稀释度做6个复孔,37℃,5%CO2培养箱吸附1h,每孔补加 细胞维持液100μl,继续培养,逐日在倒置显微镜下观察CPE,并记录出现CPE的孔 数,以最高稀释度不再出现病变时为终点,并计算出病毒的半数致细胞病变量 (TCID50)。
2.1.2腹安颗粒浸膏对培养细胞的毒性试验
细胞对药物最大耐受剂量:用细胞维持液将腹安颗粒浸膏连续对倍稀释成1:5、1:10、1:20、1:40、1:80,将小儿泻速停颗粒同样对倍稀释为1:5、1:10、1:20、1:40、1:80 分别加入96孔板已长成单层的细胞中,每个稀释度接种4个复孔,每孔加入100μl, 同时设置不加药液正常细胞组,置于37℃,5%CO2培养,连续培养五天,每48h换一 次含相同剂量药液的细胞维持液,并每天倒置显微镜观察细胞形态,第五天收集各组细 胞,用0.4%台盼蓝染色,计算细胞总数以及被染细胞数,并计算药物对细胞生长抑制 率。
细胞生长抑制率=[1-(实验组活细胞数/对照组活细胞数)]×100%
以药物对细胞生长抑制率<10%的浓度,作为实验浓度。
2.1.3药物对病毒致细胞病变作用的影响
取已长成单层细胞培养板,倒掉培养液,接种100TCID50的不同病毒液50ul/孔,置37℃5%CO2培养箱中吸附1小时后,倒掉未吸附的病毒液,用不含小牛血清的1640 维持液洗细胞2次后,实验组(腹安颗粒浸膏)加入细胞生长抑制率≤10%浓度的含药 维持液100ul/孔。同时设病毒对照、利巴韦林阳性药物对照及正常细胞对照,每组做5 个复孔。置37℃5%CO2培养箱中培养,每日倒置微镜下观察细胞病变,当细胞病变 不再进展时,分别计算TCID50,计算抑制指数,抑制指数>2,表示药物有抗病毒作用。
抑制指数=对照组病毒LogTCID50/-实验组病毒LogTCID50
并计算药物对病毒增殖的抑制率(%)=(药物处理组A均值-病毒对照组A均值)/(细胞 对照组A均值-病毒对照组A均值)
2.2体内抗病毒试验
2.2.1HRV感染乳鼠方法
2.2.1HRV感染乳鼠方法:用细胞维持液将HRV原液分别稀释成10-4至10-10HRV 悬液,用移液器吸取HRV悬液,经口感染5日龄乳鼠,50μL/只。正常对照组乳鼠经 口滴入等量细胞维持液。每种稀释度感染8只乳鼠,感染24h后取乳鼠粪便加150μL 生理盐水稀释,ELISA法定性检测粪便标本内HRV,按试剂盒说明书进行操作,酶标 仪450nm读数,空白孔校零,OD值≥0.2为阳性,OD值<0.2为阴性(计算公式:实验孔 OD值/阴性对照孔OD值)。
2.2.2腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠的保护作用
(1)、HRV感染乳鼠模型制备:用移液器吸取稀释度为10-7的HRV悬液,经口感 染5日龄ICR乳鼠,50μL/只。正常对照组经口滴入等量细胞维持液。HRV感染24h 后检测乳鼠粪便中HRV。方法:取乳鼠粪便,加150μL生理盐水稀释,ELISA法定性 检测粪便标本内HRV,按试剂盒说明书进行操作,酶标仪450nm读数,空白孔校零, OD值≥0.2为阳性,OD值<0.2为阴性(计算公式:实验孔OD值/阴性对照孔OD值)。检 测结果显示各感染乳鼠粪便中HRV抗原OD值比较差异无统计学意义(p>0.05),提示 造模成功。经ELISA法检测确定造模成功后,将实验乳鼠按窝随机分为:模型组(MG)、 腹安颗粒浸膏组(高、中、低剂量组)、小儿泻速停颗粒(XEXST)、并设立正常对照组。
(2)、腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠腹泻程度影响:造模后各乳鼠窝垫上白色定 性滤纸,观察乳鼠排出的粪便颜色、形态,记录腹泻小鼠的稀便级、稀便率,连续测定 3天,计算各组腹泻指数。
腹泻指数=稀便率×平均稀便级
(3)、腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠粪便HRV抗原转阴率:给药第1日和第5 日,收集各组每只乳鼠大便分别置于1.5mL无菌EP管,按A群轮状病毒检测试剂盒 使用说明书进行检测HRV抗原,计算HRV抗原转阴率。
(4)、腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠小肠粘膜保护作用:末次给药1h后,断颈 处死乳鼠,冰上取乳鼠小肠,与4%多聚甲醛溶液中保存,送病理科进行石蜡包埋,切 片,HE染色,光学生物显微镜下,观察乳鼠小肠病理。生物光学显微镜下观察小肠黏 膜病变程度,并计分:
“一”:小肠绒毛结构正常,上皮细胞核排列整齐,固有膜正常,无炎症细胞浸润,无水肿,计“0”分;
“+”:小肠绒毛结构正常,游离面上皮细胞立方形改变,细胞核排列整齐,固有膜松散,少量炎症细胞浸润,轻度水肿,计“1”分;
“++”:小肠绒毛变形,柱状上皮立方形改变,细胞核排列紊乱,固有膜空泡样改变,较多炎症细胞浸润,水肿明显,计“2”分;
“+++”:小肠绒毛部分脱落,柱状上皮立方形改变,细胞核排列紊乱,固有膜空泡样改变,较多炎症细胞浸润,水肿明显,计“3”分;
“++++”:小肠绒毛大部分坏死脱落,无完整组织结构,计“4”分。
计分时,每张小鼠小肠病理切片随机选取5个视野进行计分,然后将该鼠所有病理计分相加除以5,即为该鼠的平均病理计分(每张病理切片由2人同时观察,计分)。
(5)、腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠血清IFN-α/β影响:乳鼠治疗第5日给药 1h后,断颈采血,于无菌EP管中,4℃1500g 8min离心,取血清,采用ELISA试 剂盒检测IFN-α/β。
3统计方法:采用SPSS 20.0进行统计分析,用Probit回归法计算药物半数细胞 毒性浓度。采用Graphpad Prism5软件作图。所有数据以均数±标准差(x±s)表示, 两组均数间比较用配对t检验,多组均数间比较采用单因素方差分析,各实验组与对 照组的比较用Dunnett-t检验,P<0.05为具有统计学意义。
4结果
4.1“腹安颗粒浸膏”体外对轮状病毒的抑制作用
4.1.1.HRV对50%培养细胞感染剂量(TCID50)
细胞的半数病毒感染量(TCID50)为10-6.87/0.1mL,见表1。
表1 HRV对MA104细胞中的半数感染量 n=6
细胞病变效应(cytopathic effect,CPE):病毒在培养细胞中所致CPE的特征:细胞变圆,变暗,部分脱壁,整个形状有如不规则的地图。
4.1.2.实验细胞对腹安颗粒浸膏的最大耐受浓度
从表2可以看出腹安颗粒浸膏在5.00mg/mL时,对实验细胞MA104生长抑制率<10%。小儿泻速停颗粒在2.25mg/mL时,对实验细胞MA104生长抑制率<10%。
表2腹安颗粒浸膏对MA104细胞生长抑制率 n=4
注:F检验p<0.05各不同浓度药物组对实验细胞生长抑制率差别有统计学意义。
4.1.3腹安颗粒浸膏对HRV的抑制作用
腹安颗粒浸膏组与小儿泻速停颗粒组对HRV的抑制指数与病毒对照组比较p<0.05,差别有统计学意义;腹安颗粒浸膏组对HRV的抑制指数与利巴韦林组比较差别 有统计学意义p<0.05(见表3)。
表3腹安颗粒浸膏对HRV抑制指数 n=5
注:*t检验与病毒对照组比较差别有统计学意义p<0.05。#与小儿泻速停颗粒组比较差别有统计学意义p<0.05。
4.2“腹安颗粒浸膏”乳鼠体内抗轮状病毒的作用
4.2.1.HRV病毒滴度测定:将细胞培养瓶中生长良好的MA104细胞用0.25%胰蛋白酶消化成单个细胞,DMEM细胞培养液悬浮后,接种96孔板,每孔100μL(密度l× 105/ml),24-48h长满单层。
将HRV原液作连续10倍几何级稀释备用(10-1至10-10)。吸去96孔细胞培养板中的培养液,加入不同稀释度的病毒液100μL/孔,每个稀释度7个复孔,于37℃,5%CO2培养箱吸附lh,每孔补加维持液100μL,继续培养。逐日在倒置显微镜下观察细胞病 变效应(CPE)并记录结果,连续观察5天,以最高稀释度HRV感染细胞病变不再发展, 而正常对照细胞仍完好为终点。
用Reed-Mueneh法计算HRV TCID50,见表4。
表4 HRV感染50%组织剂量(TCID50)
TCID50对数值=高于50%的感染百分数的低稀释度的对数值+距离比例
=Lg10-7+(79-50)/(79-46)×Lg10=-7+(-0.87)≈-7.9
4.2.2.HRV对乳鼠100%感染最低剂量的测定
由表5可以看出HRV对乳鼠100%感染最低剂量作为本实验中对乳鼠的造模剂量:稀释度为10-7HRV悬液50μL/只。
表5 HRV对乳鼠100%感染最低剂量的测定
4.2.3.感染乳鼠粪便中HRV抗原OD值
采用ELISA法定性检测实验检测感染乳鼠粪便标本HRV,检测结果显示各感染组乳鼠粪便中HRV抗原OD值比较差异无统计学意义(p>0.05),提示造模成功,见表6。
表6感染乳鼠粪便中HRV抗原OD值
经ELISA法检测确定造模成功后,将实验乳鼠按窝随机分为(共设6个组,每组7窝):模型组(MG)、腹安颗粒浸膏组(高、中、低剂量组)、小儿泻速停颗粒(XEXST)、设 立正常对照组)。
4.2.4.腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠的保护作用
1)HRV感染乳鼠临床表现:正常组乳鼠从实验开始到结束,大便呈黄棕色颗粒状。模型组和各给药组乳鼠腹部膨胀,体毛蓬松,活力下降,皮肤皱缩,腹泻水样大便。给 药第2日腹泻程度减轻或没有出现腹泻,精神明显好转,活动能力提升;在给药第2日 所有给药组乳鼠腹泻程度明显减轻,在给药第4日基本不再出现腹泻。
2)药物对HRV感染乳鼠体重的影响:与正常组相比,模型组乳鼠在造模后第1日 体重增长较正常组减轻(p<0.05),造模后第2~5日体重增长较正常组缓慢(p<0.05); 与模型组相比,给药第3日,腹安颗粒浸膏低剂量组、中剂量组和小儿泻速停颗粒组乳 鼠体重增长较模型组快(p<0.05),腹安颗粒浸膏高剂量组乳鼠体重增加不明显与腹安 颗粒浸膏低剂量组、腹安颗粒浸膏中剂量组差别有统计学意义(p<0.05),与模型组差 异无统计学意义(p>0.05)见表7。
表7不同治疗时间各组乳鼠体重比较 (n=8)
注:F检验p<0.05。“*”表示:与正常组比较p<0.05;“#”表示:与模型组比 较p<0.05;“△”表示:与腹安颗粒浸膏低、中剂量组比较p<0.05;“☆”表示:与腹 安颗粒浸膏高剂量组比较p<0.05。
3)药物对乳鼠腹泻程度的影响:与模型组相比,给药第3日各组乳鼠腹泻指数明显下降,差别有统计学意义P<0.05;从表8可以看出腹安颗粒浸膏低剂量组腹泻指数最 低,腹安颗粒浸膏低剂量组与腹安颗粒浸膏中剂量组腹泻指数差别无统计学意义 (p>0.05),腹安颗粒浸膏低、中剂量组与腹安颗粒浸膏高剂量组比较差别有统计学意 义(P<0.05);腹安颗粒浸膏高剂量组与小儿泻速停颗粒组比较(p>0.05)无统计学意 义。
表8各组乳鼠腹泻指数比较 (n=8)
注:F检验P<0.05;“*”表示:与模型组比较P<0.05;“#”表示:与腹安颗粒浸 膏低、中剂量组比较P<0.05。
4)药物对感染乳鼠粪便HRV抗原转阴率的影响:从表9可以看出腹安颗粒浸膏有较好的清除乳鼠粪便中轮状病毒作用,其中腹安颗粒浸膏低、中剂量组乳鼠HRV阴转 率达100%,与模型组比较差别有统计学意义P<0.05。
表9各组乳鼠粪便HRV抗原阴转率比较 (n=8)
注:χ2检验P<0.05。*表示与模型组比较差别有统计学意义P<0.05。
4.3腹安颗粒浸膏对HRV感染乳鼠血清IFN-α/β的影响:与模型组比较各药物治 疗组乳鼠血清IFN-α/β含量均明显上调P<0.05。腹安颗粒浸膏中、高剂量组乳鼠血清 IFN-α/β含量高于低剂量组P<0.05;腹安颗粒浸膏中、高剂量组乳鼠血清IFN-α/β含 量与小儿泻速停颗粒组差别无统计学意义p>0.05。见表10。
表10各治疗组组乳鼠血清IFN-α/β含量比较
注:F检验P<0.05。“*”表示:与正常组比P<0.05;“#”表示:与模型组比P<0.05;“△”表示:与腹安颗粒浸膏低剂量组比P<0.05。
4.4药物对HRV感染乳鼠小肠粘膜病理的改善作用:经Kruskal-wallisH检验结果:不同组乳鼠小肠黏膜病变程度的差异有统计学意义(P<0.05);Nemenyi法两两比较显示:模型组乳鼠小肠病理程度明显高于各治疗组;腹安颗粒浸膏低、中剂量组乳鼠小肠黏膜 病变程度较轻与高剂量组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);腹安颗粒浸膏低、中 剂量组与小儿泻速停颗粒组比较,乳鼠小肠病变程度差异有统计学意义,提示腹安颗粒 浸膏能明显减轻HRV感染乳鼠小肠秘膜病变,见表11、图1。
表11各组乳鼠小肠黏膜病变情况比较
图1为各组乳鼠小肠病理图(HE染色×250)。
从图1可以观察到正常组乳鼠:小肠绒毛结构正常,上皮细胞细胞核排列整齐,固有膜正常;模型组乳鼠小肠绒毛大部分坏死脱落,无完整组织结构;腹安颗粒浸膏低、 中剂量组乳鼠小肠绒毛上皮细胞立方形改变,细胞核排列整齐,空泡样改变,少量炎症 细胞浸润,轻度水肿;腹安颗粒浸膏高剂量组乳鼠小肠绒毛部分变形脱落,上皮细胞细 胞和排列紊乱,固有膜空泡改变。小儿泻速停颗粒组乳鼠小肠绒毛上皮细胞立方形改变, 症细胞浸润,轻度水肿。
4.5药物对HRV感染乳鼠腹泻死亡保护作用
用致死剂量的HRV(Wa株)感染五日龄C57乳鼠,通过连续5天经口给药治疗, 腹安颗粒高剂量组乳鼠生命延长率明显优于口服补液盐组,藿香口服液组,肠康片组乳 鼠。见表12。
表12药物对HRV感染致小鼠腹泻死亡的保护作用
注:F检验p<0.05。▲表示与模型组比较p<0.05;“*”表示与正常组比P<0.05。
Claims (10)
1.腹安颗粒浸膏在制备抗轮状病毒的药物中的用途。
2.腹安颗粒浸膏在制备用于治疗由轮状病毒引起的疾病的药物中的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途,其中,所述药物为固体、半固体或液体的形式。
4.根据权利要求1或2所述的用途,其中,所述药物为水溶液、非水溶液、混悬液、锭剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或散剂。
5.根据权利要求1或2所述的用途,其中,所述药物的给药途径为注射给药或口服给药。
6.根据权利要求5所述的用途,其中,所述注射给药包括静脉注射、肌肉注射、腹腔注射、皮内注射或皮下注射。
7.根据权利要求1或2所述的用途,其中,基于质量百分比,所述药物包括0.01~99.99%腹安颗粒浸膏,以及99.99~0.01%的药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的用途,其中,所述药学上可接受的辅料选自赋形剂、填充剂、稀释剂、表面活性剂、粘合剂、抗氧剂、防腐剂、矫味剂、甜味剂、风味剂、香精、吸附剂、润滑剂、包衣剂、缓释剂、促进剂、推进剂、着色剂、颜料、染料。
9.根据权利要求1或2所述的用途,其中,所述药物是厦门中药厂有限公司生产的腹安颗粒。
10.根据权利要求2所述的用途,其中,所述由轮状病毒引起的疾病包括由轮状病毒引起的胃肠道感染性腹泻、胃肠炎。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110658562.5A CN115475197B (zh) | 2021-06-15 | 2021-06-15 | 腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110658562.5A CN115475197B (zh) | 2021-06-15 | 2021-06-15 | 腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115475197A true CN115475197A (zh) | 2022-12-16 |
CN115475197B CN115475197B (zh) | 2024-03-19 |
Family
ID=84419728
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110658562.5A Active CN115475197B (zh) | 2021-06-15 | 2021-06-15 | 腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115475197B (zh) |
-
2021
- 2021-06-15 CN CN202110658562.5A patent/CN115475197B/zh active Active
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
于冬才等: ""鱼腥草治疗婴幼儿轮状病毒肠炎的疗效观察"", 《河北医学》, vol. 10, no. 2, pages 2042 - 2044 * |
李志浩等: ""腹安颗粒中有效成分的含量分析"", 《湖北中医药大学学报》, vol. 17, no. 1, pages 44 - 46 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN115475197B (zh) | 2024-03-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6294476B2 (ja) | 血球減少を予防又は治療するための薬物の製造におけるアンヒドロイカリチンの使用 | |
CN113244212B (zh) | 黄芩素在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染疾病的药物中的应用 | |
JP2016534074A5 (zh) | ||
CN111358776A (zh) | 二甲双胍及其衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗轮状病毒感染药物中的应用 | |
CN104436142A (zh) | 一种治疗猪流行性腹泻的中药组合物 | |
JP6139813B1 (ja) | 抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品 | |
CN113546089B (zh) | 1-乙基-3,7-二甲基黄嘌呤在制备治疗肺炎药物中的应用 | |
CN102302484B (zh) | 异黄酮类化合物的用途 | |
CN115475197A (zh) | 腹安颗粒浸膏在抗轮状病毒中的应用 | |
CN115844879A (zh) | 褪黑素在抗盖塔病毒中的应用 | |
CN110812357B (zh) | 比阿培南在制备防治牛肠道病毒感染药物中的应用 | |
JP5713484B2 (ja) | 植物抽出物からなるウイルス感染症の予防及び/又は治療用組成物、それらを有効成分とするウイルス感染症の予防及び/又は治療剤、並びにウイルスの細胞への吸着阻害剤 | |
JP7157253B2 (ja) | 潤腸便通の漢方薬組成物、その調製方法及びその用途 | |
KR101665016B1 (ko) | 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 항바이러스용 조성물 | |
KR101665015B1 (ko) | 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 항바이러스용 조성물 | |
CN104208089B (zh) | 一种用于治疗家禽腺胃炎的胃漂浮制剂及其制备方法 | |
CN106924329B (zh) | 一种艾迪制剂在制备治疗恶性滋养细胞肿瘤药物中的应用 | |
KR101679206B1 (ko) | 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 항바이러스용 조성물 | |
CN113288943A (zh) | 一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用 | |
CN113633652B (zh) | 甘草苷在制备治疗或预防肠道病毒71型感染药物中的应用 | |
EP3710025A1 (en) | Use of cyanobacterial biomass in treating hepatitis b virus infection | |
CN110974867B (zh) | 桂枝水提物在制备防治寨卡病毒感染的药物中的应用 | |
CN111643584B (zh) | 一种用于治疗急性腹泻的中药组合物及其制药应用 | |
CN115364129B (zh) | 九节茶或其提取物、清热消炎宁制剂在制备抗冠状病毒药物中的应用及其制备方法 | |
JPWO2017149858A1 (ja) | 抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |