CN115463094A - 一种口服放疗防护剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种口服放疗防护剂及其制备方法和应用，属于放疗防护技术领域，解决了现有技术中十二指肠放疗防护剂在胃酸环境中稳定性差，在胃肠道环境中停留时间短，防护效果较差的问题。上述口服放疗防护剂的组分包括纳米蒙脱石和富勒醇，其中，纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇，形成稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。上述口服放疗防护剂的制备方法，包括：将纳米蒙脱石和富勒醇混合并机械球磨，得到以纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇的稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够作为十二指肠放射防护的口服放疗防护剂，给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。

Description

一种口服放疗防护剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及放疗防护技术领域，尤其涉及一种口服放疗防护剂及其制备方法和应用。
背景技术
十二指肠是对x射线最敏感的器官之一，并且十二指肠在上腹部或者胸腔放疗过程中往往过于接近辐照区域，因此在上腹部肿瘤或者胸腔的放疗中，十二指肠的损伤几乎不可避免。尤其在不能手术的胰腺癌患者中，放疗后约50％的患者出现十二指肠损伤，严重影响患者的治疗。因此，十二指肠的辐射脆弱性极大地限制了上腹部肿瘤放射剂量的增加，从而大大减少了辐射对肿瘤细胞的杀伤。此外，由于放疗引起的十二指肠损伤恢复时间长，生活质量差，甚至危及生命，是一种棘手的并发症，可能会因患者的疼痛和恐惧而导致暂停或终止治疗。然而，十二指肠放射损伤的防治仍是一个难题，主要是由于以下两个原因。第一个原因是十二指肠复杂的肠液环境，十二指肠是胃酸、胰液和胆汁交汇的地方，因此有丰富的胃蛋白酶和胰蛋白酶，因此，它需要具有一定的环境耐受性和稳定性的口服药物，以免被胃液等消化液分解。另一个原因是胃酸、胰液、胆汁对十二指肠的冲刷使药物难以在十二指肠停留足够长的时间，极大地限制了其治疗效果。然而，由于大多数临床批准的辐射防护药物如amifostine(氨磷汀)、超氧化物歧化酶(SOD)或其他分子药物因其在恶劣的胃酸环境中稳定性差和在十二指肠中停留时间短，因此不合适口服给药用于胃肠辐射防护。因此，设计十二指肠放射防护药物的关键不仅要满足较好的自由基清除效果，同时也需要具有良好的稳定性和在胃肠道环境中具有较长滞留时间。
发明内容
鉴于上述的分析，本发明旨在提供一种口服放疗防护剂及其制备方法和应用，至少能解决以下技术问题之一：(1)现有的十二指肠放射防护药物(放疗防护剂)在胃酸环境中稳定性差；(2)现有的十二指肠放射防护药物(放疗防护剂)在胃肠道环境中停留时间短，防护效果较差。
本发明的目的主要是通过以下技术方案实现的：
一方面，本发明提供了一种口服放疗防护剂，所述口服放疗防护剂的组分包括纳米蒙脱石和富勒醇，其中，纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇，形成稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
另一方面，本发明提供了一种口服放疗防护剂的制备方法，包括：将纳米蒙脱石和富勒醇混合并机械球磨，得到以纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇的稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
进一步的，上述口服放疗防护剂的制备方法，包括：
S1、将蒙脱石在溶胀剂中完全溶胀后，将溶胀后的蒙脱石采用机械球磨，然后用乙醇冲洗分离得到蒙脱石-乙醇悬浊液；
S2、用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液，然后离心分离得到纳米蒙脱石；
S3、将纳米蒙脱石和富勒醇混合，进行机械球磨得到混合物，将混合物用去离子水冲洗、离心，除去未负载上的富勒醇，得到富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
进一步的，所述S1中，溶胀剂为水或乙醇。
进一步的，所述S1中，溶胀剂为乙醇。
进一步的，所述S1中，蒙脱石与乙醇的质量比为1:1～5。
进一步的，所述S2中，纳米蒙脱石的直径为100～900nm。
进一步的，所述S3中，富勒醇的平均羟基数为18～26。
进一步的，所述S3中，纳米蒙脱石和富勒醇的质量比为1～50:1。
本发明还提供了一种口服放疗防护剂的应用，将上述口服放疗防护剂用作十二指肠放疗防护剂。
与现有技术相比，本发明至少可实现如下有益效果之一：
(1)本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料由于富勒醇具有良好的水溶性和较强的离域π共轭结构，这决定了富勒醇@纳米蒙脱石复合材料具有有效的自由基清除能力和细胞辐射防护能力；而且富勒醇的结构即使在胃液等恶劣环境中也保持稳定，这使得它适合口服给药胃肠道疾病。富勒醇@纳米蒙脱石复合材料采用具有较强肠道黏附能力的纳米蒙脱石作为药物载体，延长富勒醇在十二指肠的停留时间。因此，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能利用富勒醇和纳米蒙脱石这两种成分的协同作用缓解辐射引起的十二指肠组织氧化应激和病理损伤。因此，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够作为十二指肠放射防护的口服放疗防护剂，给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。
本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料有良好的模型自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除效果，能够保护细胞免受辐射造成的氧化损伤，还可以长时间黏附于十二指肠部位，实现药物与创伤部位长时间直接接触，达到更好的治疗效果，给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。
本发明的制备方法简单易行，不需要复杂的操作过程，简单、绿色、环保，产量高，适用范围广。
在本发明中，上述各技术方案之间还可以相互组合，以实现更多的优选组合方案。本发明的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在所写的说明书以及附图中所特别指出的来实现和获得。
附图说明
附图仅用于示出具体实施例的目的，而并不认为是对本发明的限制，在整个附图中，相同的参考符号表示相同的含义。
图1为本发明实施例1的富勒醇浓度与其对ABTS自由基的清除率的示意图；其中，a为富勒醇浓度与其对ABTS自由基的清除率的示意图；b为羟基自由基的清除效果，c为超氧阴离子的清除效果；
图2为本发明实施例1的纳米蒙脱石在十二指肠的停留时间示意图；
图3为本发明实施例1的富勒醇(Fullerenol)、纳米蒙脱石(NMMT)和富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)的红外图谱；
图4为本发明实施例1的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)对十二指肠和胃的治疗效果图；
图5为不同治疗后，十二指肠和胃组织中SOD、GSH-Px和MDA水平；其中，a为不同治疗后十二指肠组织中的SOD水平，b为不同治疗后胃组织中的SOD水平，c为不同治疗后十二指肠组织中的GSH-Px水平，d为不同治疗后胃组织中的GSH-Px水平，e为不同治疗后十二指肠组织中的MDA水平，f为不同治疗后胃组织中的MDA水平；
图6为本发明实施例1的富勒醇的红外图谱和XPS(X射线光电子能谱)，其中，a为富勒醇的红外图谱，b为XPS(X射线光电子能谱)；
图7为本发明实施例1的富勒醇和富勒烯的zeta电位图；
图8为本发明实施例1的富勒醇在不同生物溶液中的溶解照片。
具体实施方式
下面结合附图来具体描述本发明的优选实施例，其中，附图构成本发明一部分，并与本发明的实施例一起用于阐释本发明的原理，并非用于限定本发明的范围。
目前，通过口服给药来进行胃肠辐射防护的放疗防护剂的研究较少。尤其是由于十二指肠复杂的肠液环境，十二指肠是胃酸、胰液和胆汁交汇的地方，因此有丰富的胃蛋白酶和胰蛋白酶，它需要独特的口服药物，口服药物需要具有一定的环境耐受性和稳定性，以免被胃液等消化液分解。另一个原因是胃酸、胰液、胆汁对十二指肠的冲刷使药物难以在十二指肠停留足够长的时间，极大地限制了其治疗效果。发明人经过长期的深入研究发现：须选用合适的载体载带具有有效的自由基清除能力和细胞辐射防护能力的富勒醇(富勒醇即羟基化富勒烯)作为口服放疗防护剂可以克服现有的十二指肠放疗防护剂在胃酸环境中稳定性差，在胃肠道环境中停留时间短，防护效果较差的应用缺点。
发明人经过长期的深入研究发现：基于纳米蒙脱石具有较强的肠道黏附能力，选用纳米蒙脱石为载体，通过物理作用吸附富勒醇，形成稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(即富勒醇和纳米蒙脱石复合物)，下文中也可将富勒醇@纳米蒙脱石复合材料简写为FNMT，将富勒醇@纳米蒙脱石复合材料作为口服放疗防护剂。
本发明提供了一种口服放疗防护剂，口服放疗防护剂的组分包括纳米蒙脱石和富勒醇，其中，纳米蒙脱石为载体，富勒醇作为放疗防护的有效成分，在机械球磨的作用下纳米蒙脱石通过物理吸附富勒醇，形成稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
本发明提供了一种口服放疗防护剂的制备方法，包括：将纳米蒙脱石和富勒醇混合并机械球磨，得到以纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇的稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
具体的，上述口服放疗防护剂的制备方法包括：
S1、将蒙脱石在溶胀剂中完全溶胀后，将溶胀后的蒙脱石采用机械球磨，然后用乙醇冲洗分离得到蒙脱石-乙醇悬浊液；
S2、用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液，然后离心分离得到纳米蒙脱石(纳米蒙脱石简写为NMMT)；
S3、将纳米蒙脱石和富勒醇混合，进行机械球磨得到混合物，将混合物用去离子水冲洗、离心，除去未负载上的富勒醇，得到富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(富勒醇@纳米蒙脱石复合材料简写为FNMT)。
具体的，上述S1中，溶胀剂可以为水或乙醇。考虑到乙醇可以缩短蒙脱石溶胀的时间，使用乙醇作为溶胀剂可以提高蒙脱石的剥离效率，更容易制备纳米蒙脱石。优选的，上述S1中，溶胀剂为乙醇。
具体的，上述S1中，以溶胀剂是乙醇为例，溶胀过程中为了加快蒙脱石的溶胀，溶胀过程中进行搅拌。考虑到搅拌转速过低增加溶胀的时间，转速过高并不会缩短溶胀的时间。因此，控制搅拌转速为200-1000rpm。示例性的，转速为200rpm、300rpm、400rpm、500rpm、600rpm、700rpm、800rpm、900rpm。
具体的，上述S1中，考虑到乙醇的量过多不利于后续球磨，乙醇过少，蒙脱石溶胀不充分，影响后续纳米蒙脱石的产率，并且增加球磨的时间。因此，控制蒙脱石与乙醇的质量比为1:1～5。示例性的，如1:1、1:2、1:3、1:4、1:5。
具体的，上述S1中，采用的蒙脱石可以为钠基蒙脱石或钙基蒙脱石等，考虑到口服的安全性，此处的蒙脱石使用医用蒙脱石散。
具体的，上述S1中，采用的乙醇为无水乙醇。
具体的，上述S1中，考虑到机械球磨的转速过大容易导致球磨机过热，仪器损坏；转速过小达不到使蒙脱石剥离的效果；机械球磨的时间过长并不能进一步减小纳米蒙脱石的粒径，球磨时间过短达不到蒙脱石剥离的效果。因此，控制机械球磨的转速为100～300rpm(例如，100rpm、150rpm、200rpm、250rpm)，机械球磨的时间为8～12h(例如，9h、10h、11h)。
具体的，上述S1中，考虑到机械球磨后，研磨体(研磨体为玛瑙)与蒙脱石粉末不容易分离，因此，球磨后，需要采用乙醇冲洗分离，进而得到蒙脱石-乙醇悬液。
具体的，上述S2中，用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液的过程中，考虑到超声功率太小达不到破碎的效果，超声功率过大纳米蒙脱石尺寸进一步减小并不明显。因此，控制超声参数为：功率180～390W，破碎5秒后停止5秒，破碎时间8～12h。
具体的，上述S2中，离心分离的工艺参数为离心转速为10000～13000rpm，优选的，离心转速为12000rpm。
具体的，上述S2中，纳米蒙脱石的直径过大，比表面积较小不利于纳米蒙脱石吸附在十二指肠；纳米蒙脱石的直径过小容易进入细胞，引入生物安全性风险。因此，纳米蒙脱石的直径可调控为100～900nm。
具体的，上述S2中，纳米蒙脱石呈现层状结构。
具体的，上述S2中，为了防止纳米蒙脱石变质，并提高纳米蒙脱石的纯度，可以将制得的纳米蒙脱石冻干，然后室温保存。
具体的，上述S3中，富勒醇的平均羟基数为18～26，富勒醇具有较好的水溶性，富勒醇在不同的生理溶液中都具有很好的溶解性。
具体的，上述S3中，考虑到纳米蒙脱石和富勒醇的质量比过大富勒醇的负载量太小，质量比过小也不会增加纳米蒙脱石对富勒醇的吸附量，会有较多的未负载的富勒醇。因此，控制纳米蒙脱石和富勒醇的质量比为1～50:1。
具体的，上述S3中，离心的工艺参数为离心转速为4000～13000rpm，优选的，离心转速为12000rpm。
具体的，上述S3中，上述制备方法制备得到的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(即富勒醇纳米蒙脱石复合物)以纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇。富勒醇@纳米蒙脱石复合材料具有良好的自由基清除作用，保护细胞免受辐射造成的氧化损伤，还可以长时间黏附于十二指肠部位，实现药物与创伤部位长时间直接接触，达到更好的治疗效果。
具体的，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够作为十二指肠放射防护的口服放疗防护剂。
具体的，上述S3中，富勒醇可以是市售的，满足平均羟基数为18～26，富勒醇具有较好的水溶性，如在不同的生理溶液中都具有很好的溶解性即可。
需要说明的是，上述S3中，富勒醇也可以采用下述方法制备：将固体富勒烯与少量固体碱金属或碱土金属的氢氧化物原料球磨混合后，优选地，在高速行星球磨装置中球磨混合，加入少量过氧化氢溶液继续球磨，即可得到富勒醇。
具体的，上述S3中，富勒醇的制备方法包括：
步骤1、将固体富勒烯与固体碱金属或碱土金属的氢氧化物在高速行星球磨装置中球磨混合；
步骤2、在上述混合后的物质中添加过氧化氢溶液，继续球磨，得到混合物；
步骤3、将混合物加水水解，然后离心分离取上清液；
步骤4、采用铂丝去除上清液中残存的H2O2；然后将上清液冻干即可得到富勒醇。
具体的，上述步骤1中，富勒烯的通式为Ci，其中i为60≤m≤540的偶数；优选的，i为60或70，下文中，以i为60为例。
具体的，上述步骤1中，固体碱金属或碱土金属的氢氧化物可以是KOH、NaOH、Ba(OH)2或Ca(OH)2等，优选的固体碱金属或碱土金属的氢氧化物是KOH或NaOH。下文中，碱土金属的氢氧化物以NaOH为例。
具体的，上述步骤1中，碱金属或碱土金属的氢氧化物的作用是作为步骤2中的羟基化反应的催化剂，上述步骤2中，在以H2O2为羟基化试剂的氧化反应中，NaOH起到催化反应进行的作用，对形成的富勒醇产物的分子结构和产率有着较大的影响。此处富勒醇生成的可能机理如下：以少量H2O2作为羟基化试剂，NaOH提供碱性并使H2O2去质子化，产生的H2O2的共轭碱比其本身更加亲核，与C60反应促进C60(O)m生成。继而C60(O)m被羟基亲核攻击生成C60(O)m -(OH)n，所得产物经水解得到水溶性富勒醇。在此基础上，通过步骤1和2的机械球磨，反应物充分接触，在少量催化剂NaOH的作用下仅需要少量的羟基化试剂H2O2即可使反应发生，进一步也提高了产率。
具体的，上述步骤1中，控制富勒烯与碱金属或碱土金属的氢氧化物的质量比为20～2:1。优选的，富勒烯与碱金属或碱土金属的氢氧化物的质量比为10:1。
具体的，上述步骤2中，考虑到反应生成的富勒醇分子的羟基数随着H2O2量的增加而持续增加，产率亦呈增长趋势，至H2O2到达一定量时产率差异不大。本着少量引入杂质的原则，控制富勒烯与过氧化氢的摩尔比为0.14:1～4。
与现有技术相比，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料由于富勒醇具有良好的水溶性和较强的离域π共轭结构，这决定了富勒醇@纳米蒙脱石复合材料具有有效的自由基清除能力和细胞辐射防护能力；而且富勒醇的结构即使在胃液等恶劣环境中也保持稳定，这使得它适合口服给药胃肠道疾病。富勒醇@纳米蒙脱石复合材料采用具有较强肠道黏附能力的纳米蒙脱石作为药物载体，延长富勒醇在十二指肠的停留时间。因此，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能利用富勒醇和纳米蒙脱石这两种成分的协同作用缓解辐射引起的十二指肠组织氧化应激和病理损伤。因此，本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够作为十二指肠放射防护的口服放疗防护剂，给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。
本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料有良好的模型自由基(ABTS)、羟基自由基和超氧阴离子清除效果，能够保护细胞免受辐射造成的氧化损伤，还可以长时间黏附于十二指肠部位，实现药物与创伤部位长时间直接接触，达到更好的治疗效果，给临床上放疗的防护提供了新思路和新方法。
本发明的制备方法简单易行，不需要复杂的操作过程，简单、绿色、环保，产量高，适用范围广。
本发明的富勒醇的制备方法中以固体富勒烯、少量固体碱金属或碱土金属的氢氧化物和少量过氧化氢溶液为原料，利用球磨法，合成方法简单，引入杂质少，纯化过程简单，全链条时间短，无有机溶剂，绿色环保。另外，在固体富勒烯投入量相当的情况下，本发明所需的碱金属或碱土金属的氢氧化物和过氧化氢溶液的加入量极少，能够显著提高碱金属或碱土金属的氢氧化物和过氧化氢溶液的利用率，有效节约成本，并最大可能地减少后续反应产物的处理成本和时效。本发明的富勒醇的制备方法制备的富勒醇在不同的生理溶液中都具有很好的溶解性，能够满足本发明富勒醇@纳米蒙脱石复合材料中对富勒醇的要求。
实施例1
本实施例提供了一种放疗防护剂，制备方法如下：
将1g蒙脱石在5mL乙醇中完全溶胀(溶胀过程中进行搅拌，搅拌转速为300rpm)后，被转移到高速行星球磨机槽中，球磨10小时(球磨的转速为200rpm)后取出，用15mL乙醇冲洗分离；然后用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液10小时(390W,on/off,5s/5s)，在12000rpm下离心得到纳米蒙脱石。纳米蒙脱石经冻干，室温保存；将NMMT(200mg)和富勒醇(200mg)加入玛瑙瓶中，经3小时球磨后；然后用10ml去离子水冲洗，离心，除去未负载上的富勒醇，得到富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。最终，富勒醇@纳米蒙脱石复合材料被冻干并在室温下保存。
其中，富勒醇是采用下述方法制备的：
步骤1、将固体富勒烯与固体NaOH在高速行星球磨装置中球磨混合；
步骤2、在上述混合后的物质中添加过氧化氢溶液，继续球磨，得到混合物；
步骤3、将混合物加水水解，然后离心分离取上清液；
步骤4、采用铂丝去除上清液中残存的H2O2；然后将上清液冻干即可得到富勒醇。
具体的，其中富勒烯为C60，C60的质量为20g，过氧化氢溶液的质量浓度为30％。C60与碱金属或碱土金属的氢氧化物的质量比为10:1，C60与H2O2的物质的量比为0.14:2。步骤1中，球磨转速为300rpm，球磨1h；步骤2中，球磨转速为300rpm，球磨1h；步骤3中，离心分离的转速为12000rpm，离心分离时间为10分钟。
如下图6所示为制备得到的富勒醇的红外图谱和XPS(X射线光电子能谱)，其中，a为富勒醇的红外图谱，b为XPS(X射线光电子能谱)；由图6的a可以看出，在3400cm-1左右有一个较宽而且吸收强度很强的吸收峰为O-H的伸缩振动(νO-H)，另外在1620cm-1，1370cm-1，和1080cm-1左右的3个吸收峰分别对应于C＝C的伸缩振动(νC＝C)，O-H的面内变形振动(δsC-O-H)和C-O的伸缩振动(νC-O)。上述的4个峰位是富勒醇的特征红外吸收峰；并且根据XPS图谱中的碳氧比计算出富勒醇表面羟基的含量为约22个。
如下图7所示，为富勒醇(Fullerenol)和富勒烯(Fullerene)的zeta电位图，可见富勒醇的水溶性较好。下图8为富勒醇在不同生物溶液中的溶解照片，其中H2O是水，PBS是磷酸缓冲液，DMEM是细胞培养基，FBS是胎牛血清蛋白，说明富勒醇在不同的生理溶液中都具有很好的溶解性。
实施例2
本实施例提供了一种放疗防护剂，制备方法如下：
将1g蒙脱石在5mL乙醇中完全溶胀后，被转移到玛瑙球磨机槽中，球磨10小时后取出，用15mL乙醇冲洗分离；然后用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液10小时(390W,on/off,5s/5s)，在12000rpm下离心得到纳米蒙脱石。纳米蒙脱石经冻干，室温保存；将NMMT(200mg)和富勒醇(200mg)加入玛瑙瓶中，经3小时球磨后；然后用10ml去离子水冲洗，离心，除去未负载上的富勒醇，得到富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。最终，富勒醇@纳米蒙脱石复合材料被冻干并在室温下保存。
其中，富勒醇是市售的。
具体的，实施例1中的富勒醇、纳米蒙脱石(NMMT)、富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)的各种相关检测结果如下：
测试例1
富勒醇对ABTS自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除效果。
如图1所示，a为本发明实施例1的富勒醇浓度与其对ABTS自由基的清除率的示意图；b为羟基自由基的清除效果，c为超氧阴离子的清除效果。其中，对照组是未加富勒醇的自由基清除效果曲线。由图1可知，富勒醇具有广泛且良好的自由基清除效果，并且呈现出随着富勒醇浓度的增加，自由基的清除效果越好的趋势。
测试例2
纳米蒙脱石在十二指肠的停留时间。
图2为本发明实施例1的纳米蒙脱石在十二指肠的停留时间示意图，因为这个实验需要用到荧光素，而富勒醇又不带荧光，所以我们使用一个荧光素来替代富勒醇进行荧光成像的研究。图中，对照组是未口服任何材料的小鼠组织；荧光素组是单纯口服荧光素的小鼠组织；蒙脱石@荧光素组是口服负载了荧光素的蒙脱石的小鼠组织；纳米蒙脱石@荧光素组是口服负载了荧光素的纳米蒙脱石的小鼠组织。由图2可知，使用蒙脱石作为药物载体确实可以延长药物在胃和十二指肠的停留时间，但是纳米蒙脱石在胃和十二指肠的黏附时间更长。
测试例3
富勒醇(Fullerenol)、纳米蒙脱石(NMMT)和富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)的红外图谱。
图3为本发明实施例1的富勒醇(Fullerenol)、纳米蒙脱石(NMMT)和富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)的红外图谱，由图3可以看出，富勒醇@纳米蒙脱石复合材料在1482cm-1处出现明显的红外吸收峰，说明富勒醇有效的负载在了纳米蒙脱石上。
测试例4
富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)对于十二指肠和胃的治疗效果。
图4为本发明实施例1的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料(FNMT)对于十二指肠和胃的治疗效果图，其中，对照组是没有给予任何材料和辐照的小鼠，辐射组是腹部局部X-ray照射的小鼠，富勒醇+辐照组是在X-ray照射后给予富勒醇的小鼠，纳米蒙脱石+辐照组是在X-ray照射后给予纳米蒙脱石的小鼠，富勒醇@纳米蒙脱石复合物+辐照组是在X-ray照射后给予富勒醇@纳米蒙脱石复合物的小鼠。此图可以看出，经过X-ray照射后的小鼠的胃和十二指肠组织都有不同程度的损伤，但是口服富勒醇，纳米蒙脱石和富勒醇@纳米蒙脱石复合材料组的小鼠的胃和十二指肠组织损伤都较单纯辐照组的损伤轻，其中富勒醇@纳米蒙脱石复合材料组效果最好。
测试例5
不同治疗后，十二指肠和胃组织中SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)和MDA(丙二醛)水平。
图5为不同治疗后，十二指肠和胃组织中SOD、GSH-Px和MDA水平；a为不同治疗后十二指肠组织中的SOD水平，b为不同治疗后胃组织中的SOD水平，c为不同治疗后十二指肠组织中的GSH-Px水平，d为不同治疗后胃组织中的GSH-Px水平，e为不同治疗后十二指肠组织中的MDA水平，f为不同治疗后胃组织中的MDA水平。可见，富勒醇@纳米蒙脱石复合材料可以维持胃和十二指肠组织的抗氧化能力，减少有害物质的生成。
通过上述测试表明本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料不仅有良好的ABTS自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除效果；而且还可以延长药物在十二指肠部位的停留时间，进而发挥更好的放疗防护效果并且可以维持组织中抗氧化物酶的水平，降低有害物质的产生。因此富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够用于十二指肠放疗防护。给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。本发明的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料能够作为十二指肠放射防护的口服放疗防护剂，给临床上组织的放疗防护提供了新思路和新方法。
经过实验，实施例2的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料的效果与实施例1的相当，在此不再赘述。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种口服放疗防护剂，其特征在于，所述口服放疗防护剂的组分包括纳米蒙脱石和富勒醇，其中，纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇，形成稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
2.一种口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，包括：将纳米蒙脱石和富勒醇混合并机械球磨，得到以纳米蒙脱石为载体，纳米蒙脱石吸附富勒醇的稳定的富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
3.根据权利要求2所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，包括：
S1、将蒙脱石在溶胀剂中完全溶胀后，将溶胀后的蒙脱石采用机械球磨，然后用乙醇冲洗分离得到蒙脱石-乙醇悬浊液；
S2、用超声波破碎蒙脱石-乙醇悬浊液，然后离心分离得到纳米蒙脱石；
S3、将纳米蒙脱石和富勒醇混合，进行机械球磨得到混合物，将混合物用去离子水冲洗、离心，除去未负载上的富勒醇，得到富勒醇@纳米蒙脱石复合材料。
4.根据权利要求3所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S1中，溶胀剂为水或乙醇。
5.根据权利要求4所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S1中，溶胀剂为乙醇。
6.根据权利要求5所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S1中，蒙脱石与乙醇的质量比为1:1～5。
7.根据权利要求3所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S2中，纳米蒙脱石的直径为100～900nm。
8.权利要求3所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S3中，富勒醇的平均羟基数为18～26。
9.权利要求3所述的口服放疗防护剂的制备方法，其特征在于，所述S3中，纳米蒙脱石和富勒醇的质量比为1～50:1。
10.一种口服放疗防护剂的应用，其特征在于，将权利要求1所述的口服放疗防护剂或权利要求2-9所述制备方法制得的口服放疗防护剂用作十二指肠放疗防护剂。
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