CN115444071A - 混合型细胞培养肉及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物和食品领域,特别是涉及混合型细胞培养肉及其制备方法,所述混合型细胞培养肉包括非动物源结构化蛋白和与其物理结合的非人类动物细胞,所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维、组织蛋白或拉丝蛋白,所述蛋白丝状纤维为非动物源蛋白通过挤压技术或纺丝技术获得的纤维;所述混合型细胞培养肉的制备方法包括将非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞混合后定型即得到所述混合型细胞培养肉。本发明的混合型细胞培养肉可以极大程度地结合非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞,从而得到在外观、质地、风味、口感上与动物肌肉极为相近的细胞培养肉。
Description
技术领域
本发明涉及生物和食品领域,特别是涉及一种混合型细胞培养肉及其制备方法。
背景技术
以动物为基础的肉类生产已经发展了数千年,畜牧食品已成为全球蛋白质的主要来源。肉类蛋白质不仅可以提供与人体非常相似的所有必需氨基酸,而且能通过赋予产品特定功能(如凝胶化、乳化和保水性)来促进食品工业的发展。
但是,动物肉生产给地球环境、自然资源、人类健康带来极大的挑战。牲畜的大量养殖将导致放牧区退化、水和原材料枯竭以及环境污染问题。现有农牧生产模式很难可持续地生产出急剧增加的人口所需要的粮食。此外,集约化畜牧会产生抗生素、农药耐药性以及禽流感和微生物污染引起的中毒等新兴疾病。因此,降低肉类消费的同时,还需要寻找多种解决方案,以提供一系列产品来服务于肉类消费市场,从而促进环境可持续性和公众健康。
植物蛋白肉是目前减少肉类生产对环境影响的一种解决方案。植物蛋白肉用植物蛋白部分替代肉类蛋白,其主要以大豆、豌豆、小麦等作物中提取的植物蛋白为原料,经过加热、挤压、冷却、定型等一系列加工制成的、在质地和营养上接近动物肉的一种肉类替代品。但是现有的植物蛋白肉质构相对松散,多为肉糜、肉饼、香肠或炸鸡块的形态,在口感和风味上与动物肉差异较大。例如现有技术中有使用酶制剂结合以亲水凝胶、淀粉等组合的粘合剂,与复水脱水后的大豆组织蛋白和大豆拉丝蛋白进行混合,通过调整配方及优化成型工艺,制得质地紧实的植物肉,在一定程度上模拟了动物肉的质感和肉感,但也难以代替真实动物肉的组织结构和口感,并且需要额外添加肉味香精香料以模拟动物肉的风味。
细胞培养肉是减少肉类生产对环境影响的一种新兴的解决方案,不同于从动物身上取得肉类,细胞培养肉是利用生物组织工程技术在体外培养细胞,使其快速增殖、定向分化并收集加工而制得的一种新型肉类。细胞培养肉能节约99%的土地和96%的水,同时由于其在一个可控的环境中生长,可避免大量抗生素的使用问题,而且不需要额外添加香精香料,因此发展细胞培养肉,是解决未来人类蛋白质短缺问题的一个重要手段。但是现有关于细胞培养肉食品化的报道非常少,而且以目前技术制备的细胞培养肉难以模仿肌肉纤维的结构和质地,因此无法满足肉类给人带来的愉悦口感;市面上的细胞培养肉食品更是屈指可数,并且价格十分昂贵。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点,本发明的目的在于提供一种混合型细胞培养肉及其制备方法,用于解决现有技术中的问题。
为实现上述目的及其他相关目的,本发明提供一种混合型细胞培养肉,所述混合型细胞培养肉包括非动物源结构化蛋白和与其物理结合的非人类动物细胞,所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维、组织蛋白或拉丝蛋白,所述蛋白丝状纤维为非动物源蛋白通过挤压技术或纺丝技术获得的纤维。
本发明还提供所述混合型细胞培养肉的制备方法,所述制备方法包括将非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞混合后定型即得到所述混合型细胞培养肉。
如上所述,本发明的混合型细胞培养肉及其制备方法,具有以下有益效果:
1.利用非动物源的原料作为粘合剂,具有来源广泛、工艺简单、条件温和、稳定性强、无异味的优点,可以极大程度的结合非动物源结构化蛋白和非人类的动物细胞,从而模拟动物肌肉纤维的纹理和结构,具有接近动物肉的结构质地、口感和风味,克服了现有细胞培养肉口感较差的不足,更易于被人们所接受,得到在外观、质地、风味、口感上与动物肌肉极为相近的细胞培养肉。
2.本发明提供的混合型细胞培养肉的制备方法,利用粘合剂并通过物理机械力将非动物源结构化蛋白和体外培养的非人类动物细胞混合成型,减少了化学反应对细胞的损害,并可极大地减少细胞的使用量,在不影响产品口感的条件下能有效地降低细胞培养肉成本。
3.本发明提供的混合型细胞培养肉的制备方法,可以用于定制任意大小、类型、外观、风味和营养的可食用肉类,能够满足大众对不同肉类和营养的需求。
4.本发明中使用的原料除细胞外均为商业化的食品原料,适用于规模化生产混合型细胞培养肉工艺。
附图说明
图1为实施例1、对比例1和对比例2中使用的粘合剂外观图。
图2为实施例2使用的粘合剂外观图。
图3为实施例3制备的小酥肉样品。
图4为实施例4制备的葱烤大排样品。
图5-1为对比例4制备的样品。
图5-2为实施例5和对比例5制备的样品。
图6-1为实施例6制备的柠檬鸡丝样品。
图6-2为实施例6和对比例6制备的样品的两点检验测试表。
图6-3为实施例6和对比例6制备的样品的两点检验测试结果。
图7-1为实施例7制备的香酥鸡米花样品。
图7-2为实施例7制备的样品的感官评价。
图7-3为实施例7制备的样品的感官评价。
图8为实施例8制备的香菇鸡肉丸样品。
图9为实施例9制备的孜然猪肉条样品。
图10-1为实施例10制备的原味鸡胸肉样品。
图10-2为实施例10制备的样品在煎制过程的图片。
具体实施方式
本发明提供一种混合型细胞培养肉,所述混合型细胞培养肉包括非动物源结构化蛋白和与其物理结合的非人类动物细胞,所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维、组织蛋白或拉丝蛋白,所述蛋白丝状纤维为非动物源蛋白通过挤压技术或纺丝技术获得的纤维。
所述非动物源结构化蛋白均采用非动物源蛋白制备而成。
所述蛋白丝状纤维为利用非动物源蛋白等原料采用挤压工艺或纺丝工艺制备而成的丝状纤维,具有纤维结构;组织蛋白和拉丝蛋白的主要区别为:
1)设备不同:组织蛋白采用简单的单螺杆机器生产,而拉丝蛋白则采用更复杂的双螺杆机或三螺杆机生产;
2)原料不同:组织蛋白的原料简单,一般使用豆粉或豆片,而拉丝蛋白的原料一般为浓缩蛋白和分离蛋白;
3)组织结构不同:组织蛋白结构多为不规则蜂窝孔状,而拉丝蛋白拥有丰富的丝状纤维。
本发明中,所述蛋白丝状纤维为可食用的蛋白丝状纤维。
所述蛋白丝状纤维的纤维直径为200-600μm。
本发明中,所述非动物源蛋白为植物蛋白或者微生物蛋白。
所述植物蛋白为食用类植物的蛋白。所述食用类植物例如为农作物。
所述植物蛋白选自大豆蛋白、豌豆蛋白、土豆蛋白、绿豆蛋白、玉米蛋白、大米蛋白、玉米蛋白、小麦蛋白、扁豆蛋白、花生蛋白、藜麦蛋白、鹰嘴豆蛋白、燕麦蛋白、核桃蛋白、芝麻蛋白、蚕豆蛋白或火麻仁蛋白中的一种或几种。所述植物蛋白的形式不做具体限定,可以是分离蛋白或浓缩蛋白。例如,所述大豆蛋白可以是大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白或两者的混合物。
所述微生物蛋白选自藻类蛋白、蘑菇蛋白、真菌蛋白或酵母蛋白中的一种或几种。
所述挤压技术(extrusion technique)选自湿法挤压或干法挤压。
优选的,所述挤压技术选自湿法挤压,湿法挤压是一种热机械过程,原材料在挤出机中通过水分、压力、热量和机械剪切的组合进行熔化、重排,在挤出模头处固化形成纤维结构。
所述纺丝技术选自湿法纺丝、静电纺丝、熔融纺丝或浸渍旋转纺丝。
优选的,所述纺丝技术选自湿法纺丝。湿法纺丝是纺丝原液经过纺丝机喷丝头,在凝固液中析出形成纤维的技术。
所述非人类动物细胞为哺乳动物细胞、鸟类细胞、鱼类细胞。哺乳动物例如为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述非人类动物例如为鸡、猪、牛、羊、鱼、鸭、鹅、兔、马、驴、鹿。相应的,所述混合型细胞培养肉为鸡肉、猪肉、牛肉、羊肉、鱼肉、鸭肉、鹅肉、兔肉、马肉、驴肉、鹿肉。
所述非人类动物细胞选自肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、成骨细胞、成脂细胞、内皮细胞、造血干细胞、肝造血干细胞、骨髓干细胞、脂肪成纤维细胞、脂肪干细胞、间质干细胞、骨髓基质细胞、肌肉侧群细胞、血液来源的间质前体细胞、肌肉前体细胞、循环骨骼干细胞、多潜能成体祖细胞、中胚层祖细胞、脊髓祖细胞中的任一种或任何组合所组成的群组。
在一种实施方式中,所述物理结合为通过粘合剂粘合。所述粘合剂为非动物源粘合剂。
所述粘合剂包括如下重量份的物质:
所述非动物源蛋白的重量份例如可以是6~12份、12~18份、18~25份或25~35份。
所述增稠剂为食用增稠剂;所述增稠剂选自淀粉、食品胶或酶制剂。
所述淀粉选自玉米淀粉、木薯淀粉、绿豆淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、甘薯淀粉、菱角淀粉、荸荠淀粉或变性淀粉的一种或几种。所述变性淀粉选自醋酸酯淀粉、磷酸酯淀粉、醋酸酯木薯淀粉、羟丙基二淀粉磷酸酯、乙酰化二淀粉磷酸酯中的一种或几种。
所述食品胶选自中卡拉胶、海藻酸钠、果胶、刺槐豆胶、塔拉胶、瓜尔胶、黄原胶、结冷胶、琼脂、魔芋胶、可得然胶、阿拉伯胶、亚麻籽胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素的至少一种。
所述酶制剂选自谷氨酰胺转氨酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶中的至少一种。
所述增稠剂的重量份例如可以是0.5~1份、1~10份、10~15份、15~20份、20~25份。
所述植物油选自玉米油、橄榄油、菜籽油、芥花油、葵花籽油、葵花仁油、椰子油、花生油、大豆油、亚麻籽油、坚果油、胚芽油、芝麻油、棕榈油、稻米油中的一种或几种。
所述植物油的重量份例如为2~5份、5~10份、10~15份、15~20份、20~25份、25~30份。
在一种实施方式中,所述粘合剂中还包括磷酸盐0.1-0.7份。
所述磷酸盐包括但不限于三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠中的一种或几种。
在一种实施方式中,所述粘合剂中还包括调味料0.1-0.7份。
所述调味料选自食用盐、白砂糖、酱油、料酒、香葱粉、生姜粉、洋葱粉、辣椒粉、椒盐粉或胡椒粉中的至少一种或多种。
在一种实施方式中,所述粘合剂中还包括食品添加剂。所述食品添加剂包括凝固剂和/或着色剂。
在一种实施方式中,所述凝固剂为谷氨酰胺转氨酶(TG酶)。谷氨酰胺转氨酶可催化蛋白质多肽发生分子内和分子间发生共价交联,可改善食品质构。谷氨酰胺转氨酶的重量份为0.01-0.03份。
所述着色剂选自甜菜红、高粱红、红曲红、辣椒红、番茄红素、胡萝卜素、橙红色素、胭脂红、姜黄素、焦糖色素、麦芽提取物、二氧化钛中的一种或多种。着色剂的重量份为0.01-0.4份。
所述混合型细胞培养肉中蛋白丝状纤维、非人类动物细胞以及粘合剂之间的质量比为5:(0.4~11):(0.5~5)。所述质量比可以是5:(0.4~2):(0.5~1)、5:(2~4):(1~2)、5:(4~6):(2~3)、5:(6~8):(3~4)或5:(8~11):(4~5)。
所述混合型细胞培养肉可根据需要加工为生肉或熟肉。所述混合型细胞培养肉亦可根据需要制备成火腿肉、香肠、培根等等。在一些混合型细胞培养肉的实例中,混合型细胞培养肉的产品形式包括但不限于是非结构化的肉糜类、肉饼类和结构化的整块肉、部位肉等。
本发明中,如无特别说明,所用的各种材料均为可食用级别。
本发明还提供所述混合型细胞培养肉的制备方法,所述制备方法包括将非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞混合后定型即得到所述混合型细胞培养肉。
在一种实施方式中,还包括将粘合剂与非动物源结构蛋白和非人类动物细胞混合。在一种实施方式中,混合时的温度不超过25℃。
在一种实施方式中,粘合剂的制备方法为将水与其他原料按照重量份混合。
在一种实施方式中,当所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维时,所述制备方法中先将粘合剂与非人类动物细胞混合得到粘合剂-细胞混合体系,再将蛋白丝状纤维与粘合剂-细胞混合体系混合。
将蛋白丝状纤维与粘合剂-细胞混合体系混合的方法可以是将蛋白丝状纤维放入粘合剂-细胞混合体系中使其完全浸润,或者用注射器将粘合剂-细胞混合体系注射至蛋白丝状纤维中。
定型的作用是将非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞固定成型。在一种实施方式中,定型选自注射成型、挤压成型、模具成型、3D打印或真空成型的一种或多种。
当所述非动物源结构化蛋白选自组织蛋白或拉丝蛋白时,所述制备方法还包括将组织蛋白或拉丝蛋白吸水后处理为糜状,得到糜状蛋白,再将糜状蛋白和粘合剂以及非人类动物细胞混合。在一种实施方式中,所述糜状蛋白的温度不超过25℃;和/或,所述粘合剂的温度不超过25℃。
在一种实施方式中,所述制备方法还包括熟化步骤。
所述熟化可以是通过蒸煮、烘烤、煎炸等加热方式熟化。
在一种实施方式中,所述制备方法还包括烹饪步骤。
所述烹饪可以是现有技术中将食物加工为特定风味的任意方法。
本发明还提供挤压技术在制备细胞培养肉蛋白丝状纤维中的用途。优选的,所述细胞培养肉为混合型细胞培养肉。
本发明还提供挤压技术制备的蛋白丝状纤维在制备细胞培养肉中的用途。优选的,所述细胞培养肉为混合型细胞培养肉。
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式,本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用,本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用,在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
在进一步描述本发明具体实施方式之前,应理解,本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案;还应当理解,本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案,而不是为了限制本发明的保护范围;在本发明说明书和权利要求书中,除非文中另外明确指出,单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
当实施例给出数值范围时,应理解,除非本发明另有说明,每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义,本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外,根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载,还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
以下实施例中使用的感官评价测试方法如下:
感官评价是用于唤起、测量、分析和解释产品以视觉、嗅觉、触觉、味觉和听觉所引起的反应的一种科学方法。该方法尊重并观察主观意见的共通性与差异性,以样本的主观意见推估群体的主观想法,并辅以客观解释。
测试的样品需具有均一性、适当的数量及随机编码,同时外界环境条件需根据ISO8589:2007和GB/T13868-2009《感官分析建立感官分析实验室的一般导则》进行控制。感官评价小组成员通过相同的测试方法,给出各自的评价。分析员通过不同样本的主观意见推估出整个群体的主观想法,最终得出结论。
对于本发明的细胞培养肉的感官评价测试的方法如下:
品质测试,其中将两个或两个以上编码样本提供给感官评价小组的20名成员,针对样品的不同特性如:气味、色泽、外观结构、滋味、质地、喜爱度等进行打分(示例如表A)。感官评价小组按照GBT 23470.1-2009、GBT 23470.2-2009、GBT 16291.1-2012、GBT16291.2-2010管理。
表A:品质测试检验表
两点检验或成对比较检验,其中将两个编码样本提供给感官评价小组成员,测定两个样品间某个特定的感官性质是否有差异(示例如表B)。
表B:两点检验测试表
品质测试能较全面地同时评价多个产品的多个特性,是目前企业中产品研发中最常用的评价方法之一。两点检验是简便且应用广泛的差别检验方法,可以用于确定新旧产品是否存在差异。
实施例1:混合型细胞培养猪肉
细胞培养肉原料由大豆蛋白丝状纤维、粘合剂和猪肌细胞按质量比5:1.5:0.5组成,所述粘合剂由以下成分及其重量份组成:大豆分离蛋白8份、木薯淀粉20份、葵花仁油3份、三聚磷酸钠0.4份、食盐0.7份、水70份。
所述制作工艺,包括以下步骤:
(1)粘合剂制备:将大豆分离蛋白、木薯淀粉、葵花仁油、三聚磷酸钠、食盐和冰水在常温下用搅拌机斩拌至完全溶解,得到粘合剂;
(2)粘合:称取15g步骤(1)所得粘合剂和5g体外培养的猪肌细胞,1500rpm低速搅拌均匀,将50g排列整齐的大豆蛋白丝状纤维完全浸润;
(3)定型:将步骤(2)所得半成品转移至方型模具中,利用冲压机压实成型;
(4)熟化:将步骤(3)所得半成品于100℃蒸煮30分钟,室温冷却1小时;
(5)烹饪:平底锅加热,放入少许葵花仁油,将步骤(4)所得半成品煎制1分钟后,翻面继续煎制1分钟,得到成品。
对比例1:
细胞培养肉原料和制作工艺与实施例1相同,由大豆蛋白丝状纤维、粘合剂和猪肌细胞按质量比5:1.5:0.5组成,不同之处在于:粘合剂中三聚磷酸钠添加量为1.2份。
结果表明:细胞培养肉咸度过高,烹饪之后的感官评价品质测试中滋味的评分极低。
对比例2:
细胞培养肉原料和制作工艺与实施例1相同,由大豆蛋白丝状纤维、粘合剂和猪肌细胞按质量比5:1.5;0.5组成,不同之处在于:粘合剂中木薯淀粉添加量为30份。
结果表明:粘合剂粘度大、流动性极低(图1),在粘合过程中技术要求增加,得到产品的硬度和弹性增大,感官评价品质测试中质地的评分较低,实施例1和对比例2的质构数据如表1-1所示,实施例1、对比例1和对比例2的品质测试检验汇总如表1-2所示。
表1-1实施例1和对比例2的质构数据
硬度/g | 弹性 | |
实施例1 | 3115±218 | 0.48±0.04 |
对比例2 | 3630±195 | 0.56±0.06 |
表1-2实施例1、对比例1和对比例2的品质测试检验汇总表
品质测试检验汇总表
实施例2:一种混合型细胞培养猪肉的制备方法
所述混合型细胞培养猪肉的原料由非动物源结构化蛋白、粘合剂和体外培养的猪成纤维细胞按质量比5:3.3:1组成。结构化蛋白由大豆组织蛋白和小麦拉丝蛋白1:1组成。所述粘合剂由大豆分离蛋白、大豆油、谷朊粉、羟丙基二淀粉磷酸酯、大豆卵磷脂、甲基纤维素和饮用水组成。
所述制作方法包括以下步骤:
(1)复水脱水:将大豆组织蛋白和小麦拉丝蛋白用饮用水浸泡2小时以上,无硬心后脱水,使用搅拌机20000rpm高速搅拌至呈均匀肉糜状;
(2)粘合剂制备:称取10g大豆分离蛋白、10g大豆油、0.5g大豆卵磷脂、0.4g甲基纤维素、10g谷朊粉、5g羟丙基二淀粉磷酸酯和75g冰水在室温下用搅拌机15000rpm高速混合至无粉状态,得到粘合剂;粘合剂的外观如图2所示;加入猪成纤维细胞1500rpm低速混合均匀;
(3)混合搅拌:将步骤(2)得到的粘合剂和步骤(1)得到的肉糜状结构化蛋白按上述质量比1500rpm低速搅拌均匀,保持温度始终低于15℃;
(4)定型:将步骤(3)得到的混合物料在圆型模具中挤压成型;
(5)熟化:将步骤(4)得到的半成品置于蒸箱中100℃蒸煮20分钟,得到混合型细胞培养猪肉。
对比例3:仅使用小麦拉丝蛋白制备混合型细胞培养猪肉
所述混合型细胞培养猪肉的各部分质量比和制备方法与实施例2相同,由非动物源结构化蛋白、粘合剂和体外培养的动物细胞按质量比5:3.3:1组成,不同之处在于:结构化蛋白只选用小麦拉丝蛋白,未使用大豆组织蛋白。
实施例2和对比例3的混合型细胞培养肉的品质测试结果如表1-3所示。
表1-3
结果表明:对比例3中制备得到的混合型细胞培养猪肉质地较松散、嚼劲较低,在感官评价品质测试结果中组织形态和质地两个指标中的得分较实施例2的样本低。
实施例3:混合型细胞培养肉制备小酥肉的方法
所述小酥肉产品的原料由非动物源结构化蛋白、粘合剂和猪肌细胞按质量比5:3:2组成,所述粘合剂由5g蘑菇蛋白、5g玉米油、0.3g大豆卵磷脂、0.1g甲基纤维素、10g谷朊粉和35g冰水制得。
所述制备方法包括以下步骤:
(1)复水脱水:将蘑菇组织蛋白和小麦拉丝蛋白用饮用水浸泡2小时以上,无硬心后脱水,使用搅拌机17000rpm高速搅拌至呈均匀肉糜状;
(2)粘合剂制备:称取上述原料和冰水在室温下用搅拌机15000rpm高速混合至无粉状态,得到粘合剂,加入体外培养的猪肌细胞2000rpm低速混合均匀;
(3)混合搅拌:将步骤(2)得到的粘合剂和步骤(1)得到的肉糜状结构化蛋白混合物2000rpm低速搅拌,保持温度始终低于15℃;
(4)定型:将步骤(3)得到的混合物料手工捏制成长度约5厘米、直径约1.5厘米的圆柱状;
(5)熟化:将步骤(4)得到的半成品置于蒸箱中95℃蒸煮20分钟。
(6)烹饪:红薯粉加适量水拌成糊状,将步骤(5)得到的小酥肉半成品均匀裹浆。油炸锅中倒入玉米油加热,放葱、姜、蒜炸出香味捞出,依次放入裹好面糊的小酥肉半成品,炸至金黄捞出装盘(图3)。
实施例4:混合型细胞培养肉制备葱烤大排的方法
所述葱烤大排产品的原料由非动物源结构化蛋白、粘合剂和猪肌细胞按质量比5:1:4组成,所述粘合剂由4g大米蛋白、5g稻米油、1.5g木薯淀粉、0.3g大豆卵磷脂、0.1g微晶纤维素、20g谷朊粉和40g冰水制得。
所述制作工艺包括以下步骤:
(1)复水脱水:将酵母组织蛋白和豌豆拉丝蛋白用饮用水浸泡2小时以上,无硬心后脱水,使用搅拌机15000rpm高速搅拌2分钟至呈均匀肉糜状;
(2)粘合剂制备:称取上述原料和冰水在室温下用搅拌机15000rpm高速混合3分钟至无粉状态,加入料酒、香葱粉、生姜粉、白胡椒粉、白砂糖、食用盐混合1分钟,得到粘合剂,再加入体外培养的猪肌细胞3000rpm低速混合均匀0.5分钟;
(3)混合搅拌:将步骤(2)得到的粘合剂和步骤(1)得到的肉糜状结构化蛋白混合物2000rpm低速搅拌1分钟,保持温度始终低于15℃;
(4)定型:将步骤(3)得到的混合物料放置于直径约8厘米的圆形模具中,利用冲压机压实;
(5)熟化:将步骤(4)得到的半成品置于蒸箱中100℃蒸煮25分钟;
(6)烹饪:将步骤(5)得到的葱烤大排半成品均匀裹上玉米淀粉。热锅下油,放入步骤(5)熟化后的细胞培养肉煎制至变色,淋上少许生抽和老抽调味上色,得到葱烤大排(图4)。
实施例5:混合型细胞培养牛肉的制备方法
所述制作工艺,包括以下步骤:
(1)粘合剂配制:将豌豆浓缩蛋白12份、玉米淀粉15份、玉米油5份、六偏磷酸钠0.6份、食盐0.7份和冰水65份在常温下用搅拌机斩拌至完全溶解,得到粘合剂;
(2)粘合:称取40g步骤(1)所得粘合剂和25g体外培养的牛成纤维细胞,1500rpm低速搅拌均匀,将50g排列整齐的小麦蛋白丝状纤维完全浸润至粘合剂和细胞的混合物中;
(3)定型:将步骤(2)所得半成品转移至牛排造型模具中,放入真空箱中抽真空定型;
(4)熟化:将步骤(3)所得半成品于100℃蒸煮20分钟,室温冷却1小时;
(5)烹饪:平底锅加热,放入少许玉米油,将步骤(4)所得半成品煎制1分钟后,翻面煎制0.5分钟,得到成品。
对比例4:
制备步骤与实施例5相同,不同之处在于:熟化过程不使用蒸煮方式,改为烤箱150℃烤制20分钟。
结果表明:样品膨胀,表皮干脆,但内部湿润(图5-1),感官评价品质测试中外观结构和质地的评分极低(见表2)。
对比例5:
制备步骤与实施例5相同,不同之处在于:烹饪过程不使用煎制方式,改为烤箱150℃烤制5分钟。
结果表明:样品湿度极低,脆度大,内部有明显孔洞(图5-2),感官评价品质测试中外观结构和质地的评分极低(表2)。
表2实施例5、对比例4和对比例5的品质测试检验汇总表
品质测试检验汇总表
实施例6:混合型细胞培养肉制备柠檬鸡丝产品
所述柠檬鸡丝产品原料由花生蛋白丝状纤维、豌豆蛋白粘合剂和鸡平滑肌细胞按质量比5:5:2.5组成,所述粘合剂由以下成分及其重量份组成:绿豆蛋白10份、醋酸酯淀粉17份、花生油3份、三聚磷酸钠0.5份、食盐0.6份、水73份。
制作工艺包括以下步骤:
(1)粘合剂配制:将上述原料和冰水在常温下用搅拌机斩拌至完全溶解,得到粘合剂;
(2)粘合:称取40g步骤(1)所得粘合剂和20g鸡平滑肌细胞,低速搅拌均匀,将40g花生蛋白丝状纤维完全浸润;
(3)定型:将步骤(2)所得半成品均匀切割成厚度2mm,长度50mm的长条丝状;
(4)熟化:将步骤(3)所得半成品放于180℃烤箱烤制8min,室温冷却0.5小时;
(5)烹饪:平底锅加热,放入少许花生油,将步骤(4)所得半成品煎制10秒;
(6)调味:将蒜末、葱花、辣椒面、柠檬汁、芝麻、生抽、香醋和少许糖搅拌均匀,浇在步骤(5)所得半成品上,摆盘,得到成品柠檬鸡丝,如图6-1所示。
对比例6:
制备步骤与实施例6相同,不同之处在于:花生蛋白丝状纤维、豌豆蛋白粘合剂和鸡平滑肌细胞按质量比5:5:0.1组成,即只添加0.8g细胞。
结果从感官评价两点检验测试获得。
每位感官评价员获得一份测试表(图6-2)以及两个编码样本:样本647(即对比例6)和样本289(即实施例6),在品尝完两个样本后,采用两点检验评价两个样本间的鸡肉风味是否有差异。结果如图6-2和6-3所示,感官评价结果表明:大部分的感官评价员(78%)认为样本289(实施例6)更具有鸡肉风味,少部分感官评价员(22%)认为样本647(对比例6)更具有鸡肉风味。
实施例7:混合型细胞培养肉制备香酥鸡米花的方法
所述香酥鸡米花产品的原料由非动物源结构化蛋白、粘合剂和鸡成纤维细胞按质量比2:1:3组成组成,所述粘合剂由9g大豆分离蛋白、4g大豆浓缩蛋白、1.5g小麦中筋粉、12g葵花籽油、40g玉米油、3g乙酰化二淀粉磷酸酯、0.5g醋酸酯淀粉、1g阿拉伯胶、2g甲基纤维素、0.2g瓜尔豆胶、0.2g刺槐豆胶、0.2g谷氨酰胺转氨酶和100g冰水制得。
所述制作工艺包括以下步骤:
(1)复水脱水:将大豆组织蛋白和大豆拉丝蛋白用饮用水浸泡2小时后脱水,使用搅拌机18000rpm高速搅拌2分钟至呈均匀肉糜状;
(2)粘合剂制备:称取上述原料和冰水在室温下用搅拌机15000rpm高速混合3分钟至无粉状态,加入食用盐、白砂糖、椒盐粉、辣椒粉、料酒、生抽高速混合1分钟,得到粘合剂,再加入体外培养的鸡成纤维细胞2000rpm低速混合均匀0.5分钟;
(3)混合搅拌:将步骤(2)得到的粘合剂和步骤(1)得到的肉糜状结构化蛋白混合物按上述质量比混合2000rpm低速搅拌1分钟,保持温度始终低于15℃;
(4)定型:将步骤(3)得到的混合物料挤压成直径约1.5厘米的球状,冷藏12小时;
(5)熟化:置于蒸箱中100℃蒸煮30分钟;
(6)烹饪:将步骤(5)所得半成品放进面粉里拌匀,泡进水里几秒钟;再将其放进面粉里拌匀,抖落多余的面粉。油炸锅里加入稻米油,将鸡米花半成品下锅炸至色泽金黄捞出(图7-1)。
将本实施例制备得到的香酥鸡米花与纯鸡肉鸡米花、纯植物基鸡米花、鸡肉&植物基混合鸡米花进行感官评价。其中,所述纯鸡肉鸡米花、纯植物基鸡米花、鸡肉&植物基混合鸡米花的烹饪方式和调味均与实施例7中一致。所述纯鸡肉鸡米花由鸡里脊肉制备。所述纯植物基鸡米花由大豆组织蛋白和大豆拉丝蛋白制备。所述鸡肉&植物基混合鸡米花由鸡里脊肉与大豆组织蛋白和大豆拉丝蛋白共同制备。感官评价结果见图7-2和图7-3。
由感官评价结果可知:
大部分感官评价员(50%)最喜欢本实施例中制备的香酥鸡米花,多于纯鸡肉鸡米花(33%)、鸡肉&植物基鸡米花(17%)和纯植物基鸡米花(0%),并且有20%的评价员认为本实施例中制备的香酥鸡米花最像鸡肉。
实施例8:混合型细胞培养肉制备香菇鸡肉丸的方法
所述香菇鸡肉丸产品的原料由非动物源结构化蛋白、粘合剂和鸡成脂细胞按质量比5:1.3:6.5组成组成,所述粘合剂由15g豌豆浓缩蛋白、8g葵花仁油、5g乙酰化二淀粉磷酸酯、2g玉米淀粉、0.5g甲基纤维素、0.2g谷氨酰胺转氨酶和70g冰水制得。
所述制作工艺,包括以下步骤:
(1)复水脱水:将小麦组织蛋白和花生拉丝蛋白用饮用水浸泡2小时后脱水,使用搅拌机17000rpm高速搅拌2分钟至呈均匀肉糜状;
(2)粘合剂制备:称取上述原料和冰水在室温下用搅拌机15000rpm高速混合2分钟至无粉状态,加入少许食用盐、胡椒粉、生抽和切碎的香菇沫混合均匀,得到粘合剂,再加入体外培养的鸡成脂细胞1500rpm低速混合0.5分钟;
(3)混合搅拌:将步骤(2)得到的乳液和步骤(1)得到的肉糜状结构化蛋白混合物1500rpm低速混合搅拌1分钟,保持温度始终低于15℃;
(4)定型:将步骤(3)得到的混合物料挤压成直径约3厘米的球状,冷藏12小时;
(5)熟化:将步骤(4)得到的半成品置于蒸箱中60℃蒸煮30分钟,再100℃蒸煮30分钟,得到香菇鸡肉丸半成品。
(6)烹饪:将步骤(5)得到的香菇鸡肉丸半成品均匀裹上玉米淀粉。热锅下油,放入半成品油炸至变色,得到成品香菇鸡肉丸(图8)。
实施例9:混合型细胞培养肉制备孜然猪肉条产品
孜然猪肉条产品的原料由酵母蛋白丝状纤维、蘑菇蛋白粘合剂和猪成纤维细胞按质量比5:2.5:2.1组成,所述粘合剂由以下成分及其重量份组成:蘑菇蛋白7份、马铃薯淀粉12份、亚麻籽油6份、焦磷酸钠0.5份、食盐0.5份、水77份。
制作工艺包括以下步骤:
(1)粘合剂配制:将上述原料和冰水在常温下用搅拌机斩拌至完全溶解,加入少许调料,调料为生抽、料酒、白糖、盐,搅拌均匀,得到粘合剂;
(2)粘合:称取20g步骤(1)所得粘合剂和16.8g猪成纤维细胞,低速搅拌均匀,将40g酵母蛋白丝状纤维完全浸润,静置30分钟;
(3)定型:将步骤(2)所得半成品均匀切割成厚度15mm,长度50mm的长条状;
(4)熟化:将步骤(3)所得半成品于100℃蒸煮20分钟,室温冷却1小时;
(5)烹饪:平底锅加热,放入少许玉米油,将步骤(4)所得半成品煎制2分钟;
(6)调味:将孜然粉、辣椒粉、熟白芝麻混合搅拌均匀,撒在步骤(5)所得半成品上,摆盘,得到孜然猪肉条如图9所示。
实施例10:混合型细胞培养肉制备原味鸡胸肉产品
所述原味鸡胸肉产品原料由大豆蛋白丝状纤维、大豆蛋白粘合剂和鸡成纤维细胞按质量比5:1.7:2.5组成,所述粘合剂由以下成分及其重量份组成:大豆浓缩蛋白10份、木薯淀粉22份、葵花仁油3.5份、阿拉伯胶0.5份、甲基纤维素0.3份、瓜尔豆胶0.2份、三聚磷酸钠0.4份、食盐0.7份、水67份。
所述制作工艺,包括以下步骤:
(1)粘合剂配制:将上述原料和冰水在常温下用搅拌机斩拌至完全溶解,得到粘合剂;
(2)粘合:称取13.6g步骤(1)所得粘合剂和20g鸡成纤维细胞,低速搅拌均匀,将40g大豆蛋白丝状纤维完全浸润,静置30分钟;
(3)定型:将步骤(2)所得半成品置于鸡胸肉造型模具中,利用冲压机压实;
(4)熟化:将步骤(3)所得半成品于100℃蒸煮25分钟,室温冷却1小时;
(5)烹饪:平底锅加热,放入少许玉米油,将步骤(4)所得半成品煎制2分钟,摆盘,得到原味鸡胸肉如图10-1至10-2所示。
表3实施例10和烤鸡胸肉的质构数据
硬度/g | 弹性 | 咀嚼性 | |
实施例10 | 3548±234 | 0.51±0.02 | 692±108 |
鸡胸肉 | 3398±206 | 0.48±0.03 | 734±96 |
注:表3中鸡胸肉为购买的江苏泰森食品有限公司的鸡胸肉经煎制5分钟获得。
本发明利用非动物蛋白模拟动物肌肉纤维的纹理和结构,同时通过体外培养的非人类动物细胞丰富口感,提供了一种在外观、质地、风味、口感等方面与整块动物肌肉极为相近且具有成本效益的细胞培养肉。以上的实施例是为了说明本发明公开的实施方案,并不能理解为对本发明的限制。此外,本文所列出的各种修改以及发明中方法的变化,在不脱离本发明的范围和精神的前提下对本领域内的技术人员来说是显而易见的。虽然已结合本发明的多种具体优选实施例对本发明进行了具体的描述,但应当理解,本发明不应仅限于这些具体实施例。事实上,各种如上所述的对本领域内的技术人员来说显而易见的修改来获取发明都应包括在本发明的范围内。
Claims (20)
1.一种混合型细胞培养肉,其特征在于,所述混合型细胞培养肉包括非动物源结构化蛋白和与其物理结合的非人类动物细胞,所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维、组织蛋白或拉丝蛋白,所述蛋白丝状纤维为非动物源蛋白通过挤压技术或纺丝技术获得的纤维。
2.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述蛋白丝状纤维的纤维直径为200-600μm。
3.根据权利要求2所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述非动物源结构化蛋白采用非动物源蛋白制备而成;优选的,所述非动物源蛋白为植物蛋白或者微生物蛋白;更优选的,所述植物蛋白为食用类植物的蛋白,更优选的,所述食用类植物为农作物。
4.根据权利要求3所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,还包括以下中的任一项或多项:
1)所述植物蛋白选自大豆蛋白、豌豆蛋白、土豆蛋白、绿豆蛋白、玉米蛋白、大米蛋白、小麦蛋白、扁豆蛋白、花生蛋白、藜麦蛋白、鹰嘴豆蛋白、燕麦蛋白、核桃蛋白、芝麻蛋白、蚕豆蛋白或火麻仁蛋白中的一种或几种;
2)所述微生物蛋白选自藻类蛋白、蘑菇蛋白、真菌蛋白或酵母蛋白中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述挤压技术选自湿法挤压或干法挤压,和/或,所述纺丝技术选自湿法纺丝、静电纺丝、熔融纺丝或浸渍旋转纺丝中的任一种或多种。
6.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述非人类动物细胞为哺乳动物细胞、鸟类细胞、鱼类细胞;优选的,所述非人类动物为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物;更优选的,所述非人类动物为鸡、猪、牛、羊、鱼、鸭、鹅、兔、马、驴或鹿。
7.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述非人类动物细胞选自肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、成骨细胞、成脂细胞、内皮细胞、造血干细胞、肝造血干细胞、骨髓干细胞、脂肪成纤维细胞、脂肪干细胞、间质干细胞、骨髓基质细胞、肌肉侧群细胞、血液来源的间质前体细胞、肌肉前体细胞、循环骨骼干细胞、多潜能成体祖细胞、中胚层祖细胞、脊髓祖细胞中的任一种或任何组合所组成的群组。
8.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述物理结合为通过粘合剂粘合;优选的,所述粘合剂为非动物源粘合剂。
10.根据权利要求9所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,还包括以下中的任一项或多项:
1)所述增稠剂为食用增稠剂;所述增稠剂选自淀粉、食品胶或酶制剂;优选的,淀粉选自玉米淀粉、木薯淀粉、绿豆淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、甘薯淀粉、菱角淀粉、荸荠淀粉或变性淀粉中的一种或几种;和/或,所述食品胶选自中卡拉胶、海藻酸钠、果胶、刺槐豆胶、塔拉胶、瓜尔胶、黄原胶、结冷胶、琼脂、魔芋胶、可得然胶、阿拉伯胶、亚麻籽胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素的至少一种或多种;和/或,所述酶制剂选自谷氨酰胺转氨酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶中的至少一种或多种;
2)所述植物油选自玉米油、橄榄油、菜籽油、芥花油、葵花籽油、葵花仁油、椰子油、花生油、大豆油、亚麻籽油、坚果油、胚芽油、芝麻油、棕榈油、稻米油中的一种或几种;
3)所述粘合剂中还包括磷酸盐0.1-0.7份;优选的,所述磷酸盐选自三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠中的一种或几种;
4)所述粘合剂中还包括调味料0.1-0.7份;优选的,所述调味料选自食用盐、白砂糖、酱油、料酒、香葱粉、生姜粉、洋葱粉、辣椒粉、椒盐粉或胡椒粉中的至少一种或多种。
11.根据权利要求9所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述粘合剂中还包括食品添加剂;优选的,所述食品添加剂包括凝固剂和/或着色剂。
12.根据权利要求11所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,还包括以下中的任一项或多项:
1)所述凝固剂为谷氨酰胺转氨酶;
2)所述凝固剂的重量份为0.01-0.03份;
3)所述着色剂选自甜菜红、高粱红、红曲红、辣椒红、番茄红素、胡萝卜素、橙红色素、胭脂红、姜黄素、焦糖色素、麦芽提取物、二氧化钛中的一种或多种;
4)所述着色剂的质量浓度为0.005%~0.2%。
13.根据权利要求1所述的混合型细胞培养肉,其特征在于,所述混合型细胞培养肉中非动物源结构化蛋白、非人类动物细胞以及粘合剂之间的质量比为5:(0.4~11):(0.5~5)。
14.权利要求1-13任一所述的混合型细胞培养肉的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括将非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞混合后定型即得到所述混合型细胞培养肉。
15.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,还包括将粘合剂与非动物源结构化蛋白和非人类动物细胞混合。
16.根据权利要求15所述的制备方法,其特征在于,当所述非动物源结构化蛋白选自蛋白丝状纤维时,所述制备方法中先将粘合剂与非人类动物细胞混合得到粘合剂-细胞混合体系,再将蛋白丝状纤维与粘合剂-细胞混合体系混合;
和/或,
当所述非动物源结构化蛋白选自组织蛋白或拉丝蛋白时,所述制备方法还包括将组织蛋白或拉丝蛋白吸水后处理为糜状,得到糜状蛋白,再将糜状蛋白和粘合剂以及非人类动物细胞混合。
17.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,所述定型选自注射成型、挤压成型、模具成型、3D打印或真空成型的一种或多种。
18.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括熟化或烹饪步骤中的一种或多种。
19.挤压技术在制备细胞培养肉蛋白丝状纤维中的用途。
20.挤压技术制备的蛋白丝状纤维在制备细胞培养肉中的用途。
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