CN115429712B - 一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用 - Google Patents

一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物,包括五胜肽、六胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂、助表面活性剂与水。与现有技术相比,本发明提供的纳米组合物具有较高的稳定性,可提高多肽和富勒烯在皮肤深层的作用活性,具有可控、缓释、稳定的优点;同时还可进一步促进活性物质的皮肤渗透,使活性成分能够透过角质层进入真皮层,有利于其吸收进入皮肤并以储库形式释放,提高其在皮肤中的分配,直接作用于细胞靶部位,提高了生物利用度;并且多肽和富勒烯合理搭配,具有显著抗皮肤衰老功效。

Description

一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,尤其涉及一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用。
背景技术
富勒烯具有超强的吸收并消除自由基的能力,并且由于其强力吸收自由基、延缓细胞衰老的功效,已经在化妆品、生物制药等领域发挥了巨大的作用。
然而,富勒烯在水、大多数油脂以及极性溶剂中溶解度均极差,通常只能用芳香性溶剂,如甲苯、氯苯,或非芳香性溶剂二硫化碳溶解。而且富勒烯光稳定性差、生物利用度低、皮肤吸收性能差,这导致富勒烯在化妆品中的应用大大受到限制。目前,通过化学改性的富勒烯如水溶性富勒烯和油溶性富勒烯其抗氧化性等性能会受到很大的影响,因此需要通过其他更好的方法解决富勒烯的应用缺陷。
美容性多肽作为一类具有高活性、具备天然可用性、选择性作用方式和低副作用发生率的活性成分,且与人体生理成分结构十分相似,抗皱、抗氧化功效强大且更易被人体吸收,能有效对抗皮肤的衰老,在化妆品中的使用一直在稳步增长。
其中,乙酰基六肽-8作为一种著名的抗衰老产品的成分,主要用于化妆品中淡化表情纹。它又属于神经递质抑制肽,通过抑制神经传导素乙酰胆碱的释放,来减少肌肉的收缩,从而达到减少动态纹、表情纹的产生,其具有与肉毒杆菌神经毒素类似的作用机制,可模仿小体关联蛋白的N端结构,与小体关联蛋白竞争其在SNARE复合物中的位置,从而调节SNARE复合物的形成,减少乙酰胆碱的释放,达到放松肌肉的效果。与肉毒杆菌神经毒素相比,乙酰基六肽-8可以干扰复合物的形成和稳定性,不会产生不可逆的破坏,且显示出其极低的毒性(2000mg/kg)的巨大优势,安全性高,可以长期使用,因此其成为抗皱产品的明星成分。
棕榈酰五肽-4是胜肽系列应用最早、最广泛的多胜肽之一。棕榈酰五肽-4的作用机理为:通过作用于真皮成纤维细胞,促进大分子物质如I、III、IV型胶原蛋白、纤维连接蛋白和糖胺聚糖的合成,修复和重建细胞外基质及表皮-真皮连接部,达到改善皱纹的效果,同时棕榈酰五肽-4也可以促进伤口修复基因的表达,有利于皮肤组织的恢复。棕榈酰五肽-4的抗皱活性高于维生素A和维生素C,且无副作用,因此受到化妆品行业的追捧,在许多国内外著名品牌中均有添加。
但为有效作用于皮肤,美容性多肽必须以足够的浓度达到目标位置,而皮肤本身相当大的屏障特性限制了其在皮肤中的渗透,多肽到达皮肤目标位置的作用效率降低。并且抗衰活性物大都稳定性较差,对光、热敏感,直接添加于护肤品中一段时间后易失活或氧化降解,不仅导致护肤品功效降低还会引起皮肤刺激,导致抗衰老效果不佳。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用,该纳米组合物具有较高的稳定性,使活性成分能够透过角质层进入真皮层,直接作用于细胞靶部位,提高了生物利用度,并且多肽和富勒烯合理搭配,具有显著抗皮肤衰老功效。
本发明提供了一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物,包括五胜肽、六胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂、助表面活性剂与水;
所述五胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;
所述六胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;
所述富勒烯的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%~2.5%。
优选的,所述五胜肽选自棕榈酰五肽-4;所述六胜肽选自乙酰基六肽-8。
优选的,所述油脂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~10%。
优选的,所述油脂选自三油酸甘油酯、荷荷巴油、橄榄油、角鲨烯、大豆油与蓖麻油中的一种或多种。
优选的,所述表面活性剂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~20%。
优选的,所述表面活性剂选自吐温80、吐温20、PEG-40氢化蓖麻油、甘油硬脂酸酯、月桂醇聚氧乙烯醚3与月桂醇聚醚-4中的一种或多种。
优选的,所述助表面活性剂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的10%~30%。
优选的,所述助表面活性剂选自甘油、丁二醇、己基癸醇、聚乙二醇、丙二醇、二丙二醇、1,3-丙二醇与甲基丙二醇中的一种或多种。
本发明还提供了一种上述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物的制备方法,包括以下步骤:
S1)将六胜肽与水混合,得到水相;
将五胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂与助表面活性剂混合,得到油相;
S2)在搅拌的条件下,将油相滴加入水相中混合,剪切乳化后得到微米级分散体;
S3)将所述微米级分散体经高压均质处理后,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
本发明还提供了一种化妆品,包括上述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
本发明提供了一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物,包括五胜肽、六胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂、助表面活性剂与水;所述五胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;所述六胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;所述富勒烯的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%~2.5%。与现有技术相比,本发明提供的纳米组合物具有较高的稳定性,可提高多肽和富勒烯在皮肤深层的作用活性,具有可控、缓释、稳定的优点;同时还可进一步促进活性物质的皮肤渗透,使活性成分能够透过角质层进入真皮层,有利于其吸收进入皮肤并以储库形式释放,提高其在皮肤中的分配,直接作用于细胞靶部位,提高了生物利用度;并且多肽和富勒烯合理搭配,具有显著抗皮肤衰老功效。
附图说明
图1为本发明实施例1~3及对比例1~7中得到的富勒烯多肽水溶液体外透皮试验结果图;
图2为本发明实施例1~3及对比例1~7中得到的富勒烯多肽水溶液清除活性氧自由基ROS荧光强度结果图;
图3为本发明实施例1~3及对比例1~7中得到的富勒烯多肽水溶液促I型胶原蛋白合成结果图;
图4为本发明实施例1~3及对比例1~7中得到的富勒烯多肽水溶液平均表面皱纹减少量结果图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物,包括五胜肽、六胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂、助表面活性剂与水;所述五胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;所述六胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.01%~1%;所述富勒烯的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%~2.5%。
本发明提供的多肽和富勒烯共输送纳米组合物中以五胜肽与六胜肽为多肽活性物质,其中,所述五胜肽优选为棕榈酰五肽-4;所述五胜肽的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.02%~1%;在本发明提供的实施例中,所述五胜肽的质量具体为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%、1%或0.02%;所述六胜肽优选为乙酰基六肽-8;所述六胜肽的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%~1%;在本发明提供的实施例中,所述六胜肽的质量具体为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%、1%或0.08%。
本发明提供的多肽和富勒烯共输送纳米组合物以富勒烯与多肽活性物质合理搭配,所述富勒烯的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.5%~2.5%,更优选为1%~2%;在本发明提供的实施例中,所述富勒烯的质量具体为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%或2%。
本发明提供的多肽和富勒烯共输送纳米组合物除多肽活性物质与富勒烯外,使用的原料均为基础的化妆品护肤原料,包括溶剂、油脂、表面活性剂、助表面活性剂等,所选原料均为安全无刺激性原料,且添加量均在原料推荐添加量范围内。
其中,所述油脂的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~10%,更优选为2%~10%,再优选为5%~10%;在本发明提供的实施例中,所述油脂的质量具体为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的10%、5%或8%;所述油脂为本领域技术人员熟知的油脂即可,并无特殊的限制,本发明中优选为三油酸甘油酯、荷荷巴油、橄榄油、角鲨烯、大豆油与蓖麻油中的一种或多种。
所述表面活性剂的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~20%,更优选为5%~20%,再优选为10%~15%;所述表面活性剂的种类为本领域技术人员熟知的表面活性剂即可,并无特殊的限制,本发明中优选为吐温80、吐温20、PEG-40氢化蓖麻油、甘油硬脂酸酯、月桂醇聚氧乙烯醚3与月桂醇聚醚-4中的一种或多种。
所述助表面活性剂的质量优选为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的10%~30%,更优选为10%~25%,再优选为10%~20%;在本发明提供的实施例中,所述助表面活性剂的质量具体为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的20%、15%或10%;所述助表面活性剂优选为醇类助表面活性剂,更优选为甘油、丁二醇、己基癸醇、聚乙二醇、丙二醇、二丙二醇、1,3-丙二醇与甲基丙二醇中的一种或多种。
本发明提供的纳米组合物具有较高的稳定性,可提高多肽和富勒烯在皮肤深层的作用活性,具有可控、缓释、稳定的优点;同时还可进一步促进活性物质的皮肤渗透,使活性成分能够透过角质层进入真皮层,有利于其吸收进入皮肤并以储库形式释放,提高其在皮肤中的分配,直接作用于细胞靶部位,提高了生物利用度;并且多肽和富勒烯合理搭配,具有显著抗皮肤衰老功效。
本发明还提供了一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物的制备方法,包括以下步骤:S1)将六胜肽与水混合,得到水相;将五胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂与助表面活性剂混合,得到油相;S2)在搅拌的条件下,将油相滴加入水相中混合,剪切乳化后得到微米级分散体;S3)将所述微米级分散体经高压均质处理后,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
其中,本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制,为市售即可,所述六胜肽、五胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂与助表面活性剂的含量及种类均同上所述,在此不再赘述。
将六胜肽与水混合,得到水相;所述混合的温度优选为40℃~50℃,更优选为45℃。
将五胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂与助表面活性剂混合,得到油相;所述混合的温度优选为40℃~50℃,更优选为45℃。
在搅拌的条件下,将油相滴加入水相中混合;所述搅拌的速率优选为500~1000r/min,更优选为600~800r/min,再优选为700r/min;所述混合的温度优选为40℃~50℃,更优选为45℃。
混合后,剪切乳化,得到微米级分散体;所述剪切乳化优选为高速剪切乳化,其转速优选为5000~10000rpm,更优选为5000~8000rpm,再优选为6000~7000rpm;所述剪切乳化的时间优选为1~10min,更优选为2~6min,再优选为3~5min。
将所述微米级分散体经高压均质处理后;所述高压均质处理的压力优选为500~1000bar,更优选为600~900bar,再优选为700~800bar;所述高压均质处理的次数优选为3~5次;高压均质处理后,优选冷却至室温,即可得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
本发明还提供了一种化妆品,包括上述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
本发明提供的纳米组合物能够用于制备化妆品,可直接添加到不同类型的抗衰功效性化妆品中,使化妆品具有稳定性好、使用方便、提高化妆品的护肤功效等优点。
为了进一步说明本发明,以下结合实施例对本发明提供的一多肽和富勒烯共输送纳米组合物、其制备方法及应用进行详细描述。
以下实施例中所用的试剂均为市售。
实施例1
本实施例组成包括:
制备方法如下:
将乙酰基六肽-8和水混合,45℃水浴加热溶解得到水相;
将富勒烯、棕榈酰五肽-4、油脂、表面活性剂、助表面活性剂混合,45℃水浴加热溶解得到油相;
将油相滴加至水相中,45℃水浴加热搅拌,搅拌速率为700r/min,使油相与水相混合;
将混合物在6000rpm转速下高速剪切乳化3min,得到微米级分散体;
将微米级分散体在800bar条件下进行高压均质处理,循环5次,冷却至室温,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
实施例2
本实施例组成包括:
制备方法如下:
将乙酰基六肽-8和水混合,45℃水浴加热溶解得到水相;
将富勒烯、棕榈酰五肽-4、油脂、表面活性剂、助表面活性剂混合,45℃水浴加热溶解得到油相;
将油相滴加至水相中,45℃水浴加热搅拌,搅拌速率为700r/min,使油相与水相混合;
将混合物在6000rpm转速下高速剪切乳化3min,得到微米级分散体;
将微米级分散体在800bar条件下进行高压均质处理,循环5次,冷却至室温,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
实施例3
本实施例组成包括:
制备方法如下:
将乙酰基六肽-8和水混合,45℃水浴加热溶解得到水相;
将富勒烯、棕榈酰五肽-4、油脂、表面活性剂、助表面活性剂混合,45℃水浴加热溶解得到油相;
将油相滴加至水相中,45℃水浴加热搅拌,搅拌速率为700r/min,使油相与水相混合;
将混合物在6000rpm转速下高速剪切乳化3min,得到微米级分散体;
将微米级分散体在800bar条件下进行高压均质处理,循环5次,冷却至室温,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
稳定性试验
考察不同稀释倍数的多肽和富勒烯共输送纳米组合物的粒径随时间的变化关系,结果如表1所示。由表1可见,实施例1~3不同浓度的稀释液的粒径随时间的增长无较大改变,因此多肽和富勒烯共输送纳米组合物具有良好的稀释稳定性。
不同温度下,多肽和富勒烯共输送纳米组合物的粒径随储存时间变化的结果如表1所示。由表1可见,4℃和25℃下,实施例1~3的粒径维持在55nm左右。由此可以说明,多肽和富勒烯共输送纳米组合物在低温和常温下都具有良好的储存稳定性。
表1不同稀释度及温度下多肽和富勒烯共输送纳米组合物随时间的粒径变化结果
考察多肽和富勒烯共输送纳米组合物的pH值稳定性,得到结果如表2所示。由表2可见,实施例1~3中得到的多肽和富勒烯共输送纳米组合物的pH值为7.4,4℃保存90天后pH基本无变化。
表2多肽和富勒烯共输送纳米组合物随时间的pH变化
将实施例1~3制备得到的纳米组合物在密闭容器、室温条件下放置3、6、9、12个月后,对样品的粒径和多分散系数PDI进行检测,并观察样品性状,综合评价纳米组合物的稳定性。由实验结果可知样品在放置12个月后也未出现团聚、变色、分层现象,样品粒径、PDI未发生显著性变化,仍然满足实际应用需求,尤其在活性成分浓度高的情况下仍然较稳定,未发现结晶析出现象,因此,本发明制备的纳米组合物具有良好的稳定性。
采用超滤离心法测定实施例1~3制备得到的纳米组合物的初始包封率和在常温放置90天后的包封率,并观察样品性状变化。取实施例1~3制备所得纳米组合物400μL,加入超滤离心管样品池中,置于常温,18000r/min离心30min后收集滤液。用HPLC法检测滤液、离心前纳米组合物中富勒烯的含量,按下列公式计算,得到结果如表3所示。
其中,Wt为纳米粒悬液中药物的总量;Wf为游离药物的量。
表3多肽和富勒烯共输送纳米组合物随时间的包封率变化
由实验结果可知验产品包封率较高。
对比例1
将实施例3步骤1~3中提到的成分简单混合,不经过高速剪切乳化及高压均质处理。
对比例2
将实施例3中的成分“棕榈酰五肽-4”去掉,其余保持不变,将水补足至100%。后续处理方法不变。
对比例3
将实施例3中的成分“乙酰基六肽-8”去掉,其余保持不变,将水补足至100%。后续处理方法不变。
对比例4
将实施例3中的成分“富勒烯”去掉,其余保持不变,将水补足至100%。后续处理方法不变。
对比例5
将实施例3中的成分“棕榈酰五肽-4”使用“棕榈酰三肽-5”代替。
对比例6
将实施例3中的成分“乙酰基六肽-8”使用“乙酰基四肽-2”代替。
对比例7
将实施例3中的成分“富勒烯”的比例由1%调整为5%,其余成分比例保持不变,将水补足至100%。后续处理方法不变。
刺激性试验
取健康小鼠6只,随机分为3组,于实验前24h将家小鼠背部皮肤两侧去毛。每天涂抹使用实施例1~3制得的纳米组合物及对比例1~7制得的溶液3次,连续涂抹7天,同时涂抹空白溶液进行对照,观察试验结果,如表4所示。
表4纳米组合物皮肤刺激性观察结果
注:“+”小鼠皮肤充血、红肿;“++”表示充血、红肿现象仍在,但有增加趋势;“-”表示无充血、红肿现象。
根据试验结果可以看出,使用实施例1~3纳米组合物、对比例1~7及空白溶液涂抹于小鼠皮肤后均无充血、红肿现象,说明本发明提供的纳米组合物对皮肤没有刺激性,安全性高。
体外透皮试验
采用垂直式Franz扩散池法进行离体鼠皮的透皮实验,分别测试实施例1~3纳米组合物及对比例1~7溶液的透皮吸收情况。HPLC分析,计算不同时间特定药物单位面积累积透过量。12h后,取下皮肤,洗净后剪碎,研磨成匀浆液,加适量接收液离心,取上清液HPLC分析,计算特定药物的单位面积皮肤滞留量,得到结果如图1所示。
由图1实验结果可知实施例1~3纳米组合物与对比例1~7溶液相比具有较高的经皮吸收能力,可以缓慢控制释放。这说明经过纳米乳液载体化,富勒烯多肽的渗透能力明显增强,有利于富勒烯多肽在皮肤内积累并且在较长时间内维持较高浓度,进而提高富勒烯的生物利用度。
清除活性氧自由基ROS功效测试抗氧化实验
测试样品:将实施例1~3所得纳米组合物及对比例1~7制得的溶液用DMEM培养液稀释800倍得到的纳米组合物培养样品。将HSF细胞以每孔3×104个细胞的密度接种到24孔板中,置于37℃、5%CO2细胞培养箱中培养24h。培养结束后吸出细胞板中的培养基,对照组加入500μL的无血清培养基,用800μM H2O2处理24h的HSF细胞作为模型组,用测试样品在800μM H2O2条件下孵育24h的HSF细胞作为给药组。孵育结束后,用培养基洗涤3次,加入含有20μM DCFH-DA的培养基继续孵育20min。细胞用PBS洗涤1次后用1%Triton X-100裂解细胞,离心,并使用酶标仪检测活性氧自由基ROS荧光强度,实验结果见图2和表5。
表5活性氧自由基ROS荧光强度结果
组别 ROS荧光强度
对照组 22600
模型组 56200
实施例1 33400
实施例2 35800
实施例3 39700
对比例1 49800
对比例2 40250
对比例3 41390
对比例4 43740
对比例5 45890
对比例6 45230
对比例7 48550
由图2和表5可知,经H2O2诱导损伤后,ROS荧光强度显著上升,说明H2O2诱导的氧化应激刺激了HSF细胞内ROS的产生,且与模型组ROS的荧光强度比较,实施例1~3的纳米组合物均能显著降低ROS的活性,说明高压均质处理制备的纳米组合物能有效清除体内自由基;与对比例1~7溶液ROS荧光强度比较,实施例1~3制得的纳米组合物对ROS荧光强度的降低具有显著性差异,表明该活性物组合经纳米组合物包载后能更有效地清除HSF细胞中氧化应激的ROS,且几种成分的组合效果具有协同作用。
促胶原蛋白合成测试(胶原蛋白含量)
用ELISA检测试剂盒测定Ⅰ型胶原蛋白的含量,测试样品为实施例1~3及对比例1~7溶液。将HSF细胞以每孔8×103个细胞的密度接种到96孔板中,置于37℃、5%CO2细胞培养箱中培养24h。培养结束后吸出细胞板中的培养基,处理组中分别加入100μL测试样品,空白对照组加入等体积的DMEM完全培养基,继续培育72h。72h后收集细胞上清液,按照ELISA试剂盒说明书要求进行Ⅰ型胶原蛋白检测,计算细胞上清液Ⅰ型胶原蛋白的含量变化率,实验结果见图3和表6。
表6Ⅰ型胶原蛋白结果
组别 胶原蛋白含量(ng/mL)
对照组 50.6
模型组 79.4
实施例1 81.5
实施例2 76.4
实施例3 61.2
对比例1 65.9
对比例2 68.2
对比例3 70.8
对比例4 72.2
对比例5 70
对比例6 60.8
对比例7 50.6
由图3和表6可以看出,实施例1~3及富勒烯多肽水溶液均能显著提高Ⅰ型胶原蛋白的含量,说明高压均质处理制备的纳米组合物能够直接作用于成纤维细胞,加速细胞外基质蛋白的合成,促使皮肤恢复弹性;与对比例1~7溶液的Ⅰ型胶原蛋白含量相比,实施例1~3制得的纳米组合物对成纤维细胞分泌的Ⅰ型胶原蛋白含量增加具有显著性差异,表明该活性物组合经纳米组合物包载后能有效促进胶原蛋白的分泌,且几种成分的组合效果具有协同作用。
人体皱纹减少测试
选用皮肤分析测试仪VISIA进行抗衰纳米组合物的皮肤纹理测试,评价抗衰纳米组合物实施例1~3及对比例1~7中得到的富勒烯多肽水溶液的抗衰功效。选取4组每组30名皮肤健康、无化妆品过敏史、年龄在40~45岁之间的志愿者作为受试者,进行皮肤纹理测试。试用部位为脸部两颧,分别于试验前及连续使用样品1周、2周、4周和8周后,由同一个人测试试验部位的皮肤表面纹理,计算受试者不同时间段平均表面皱纹减少量,实验结果如图4、表7。
表7平均表面皱纹减少量结果
由图4和表7可以看出实施例1~3及对比例1~7溶液均能减少皮肤表面皱纹量,说明高压均质处理制备的抗衰纳米组合物能有效抑制皱纹的生长,并消除原有的皱纹,具有显著的抗衰效果。对比例1~7溶液与实施例1~3相比,实施例1~3对平均表面皱纹减少量具有显著性差异,表明该活性物组合经纳米组合物包载后能有效抑制皱纹的生长,对皱纹具有很好的改善作用,具有更优异的抗衰效果。由以上测试可知,富勒烯、棕榈酰五肽-4、乙酰基六肽-8三种特定的组分在特定的比例下有着更加优异的抗皮肤衰老效果。

Claims (9)

1.一种多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,包括五胜肽、六胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂、助表面活性剂与水;
所述五胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.02%~1%;
所述六胜肽的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.05%~1%;
所述富勒烯的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的0.1%~2%;
所述五胜肽选自棕榈酰五肽-4;所述六胜肽选自乙酰基六肽-8。
2.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述油脂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~10%。
3.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述油脂选自三油酸甘油酯、荷荷巴油、橄榄油、角鲨烯、大豆油与蓖麻油中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述表面活性剂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的1%~20%。
5.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述表面活性剂选自吐温80、吐温20、PEG-40氢化蓖麻油、甘油硬脂酸酯、月桂醇聚氧乙烯醚3与月桂醇聚醚-4中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述助表面活性剂的质量为多肽和富勒烯共输送纳米组合物质量的10%~30%。
7.根据权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物,其特征在于,所述助表面活性剂选自甘油、丁二醇、己基癸醇、聚乙二醇、丙二醇、二丙二醇、1,3-丙二醇与甲基丙二醇中的一种或多种。
8.一种权利要求1所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1)将六胜肽与水混合,得到水相;
将五胜肽、富勒烯、油脂、表面活性剂与助表面活性剂混合,得到油相;
S2)在搅拌的条件下,将油相滴加入水相中混合,剪切乳化后得到微米级分散体;
S3)将所述微米级分散体经高压均质处理后,得到多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
9.一种化妆品,其特征在于,包括权利要求1~7任意一项所述的多肽和富勒烯共输送纳米组合物或权利要求8所述制备方法制备的多肽和富勒烯共输送纳米组合物。
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Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101098684A (zh) * 2004-12-07 2008-01-02 维生素C60生化学研究公司 自由基疾病预防治疗用组合物
CN107438428A (zh) * 2015-02-19 2017-12-05 Elc 管理有限责任公司 新型皮肤重塑策略
CN108904303A (zh) * 2018-08-16 2018-11-30 苏州火睿新材料科技有限公司 富勒烯-精油-多肽复合化妆品原料及其制备方法
CN109395056A (zh) * 2018-07-18 2019-03-01 吕向阳 一种抗皱类皮肤外用制剂及制备方法和应用
CN109589297A (zh) * 2019-01-09 2019-04-09 广州灵润生物科技有限公司 一种富勒烯玻尿酸多肽补水面膜
CN110279608A (zh) * 2019-08-06 2019-09-27 无限极(中国)有限公司 具有延缓眼部皮肤衰老功能的多肽组合物及其纳米脂质体和化妆品
CN111166683A (zh) * 2019-12-28 2020-05-19 嘉汶化妆品(东莞)有限公司 一种富勒烯抗衰抗氧化美容护肤化妆品及其制备方法
CN112220696A (zh) * 2020-09-25 2021-01-15 东南大学 富勒烯纳米乳液及其制备方法和用途
CN112891241A (zh) * 2021-02-06 2021-06-04 武汉百思凯瑞生物科技有限公司 一种靶向线粒体皮肤抗衰纳米组合物及其制备方法和应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2677260A1 (en) * 2007-02-02 2008-07-14 Dvb Global, Llc Golden mean harmonized water and aqueous solutions

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101098684A (zh) * 2004-12-07 2008-01-02 维生素C60生化学研究公司 自由基疾病预防治疗用组合物
CN107438428A (zh) * 2015-02-19 2017-12-05 Elc 管理有限责任公司 新型皮肤重塑策略
CN109395056A (zh) * 2018-07-18 2019-03-01 吕向阳 一种抗皱类皮肤外用制剂及制备方法和应用
CN108904303A (zh) * 2018-08-16 2018-11-30 苏州火睿新材料科技有限公司 富勒烯-精油-多肽复合化妆品原料及其制备方法
CN109589297A (zh) * 2019-01-09 2019-04-09 广州灵润生物科技有限公司 一种富勒烯玻尿酸多肽补水面膜
CN110279608A (zh) * 2019-08-06 2019-09-27 无限极(中国)有限公司 具有延缓眼部皮肤衰老功能的多肽组合物及其纳米脂质体和化妆品
CN111166683A (zh) * 2019-12-28 2020-05-19 嘉汶化妆品(东莞)有限公司 一种富勒烯抗衰抗氧化美容护肤化妆品及其制备方法
CN112220696A (zh) * 2020-09-25 2021-01-15 东南大学 富勒烯纳米乳液及其制备方法和用途
CN112891241A (zh) * 2021-02-06 2021-06-04 武汉百思凯瑞生物科技有限公司 一种靶向线粒体皮肤抗衰纳米组合物及其制备方法和应用

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