CN1153591C - 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法 - Google Patents

一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1153591C
CN1153591C CNB021001324A CN02100132A CN1153591C CN 1153591 C CN1153591 C CN 1153591C CN B021001324 A CNB021001324 A CN B021001324A CN 02100132 A CN02100132 A CN 02100132A CN 1153591 C CN1153591 C CN 1153591C
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
vaccine
joint
multivalence
water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB021001324A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1370575A (zh
Inventor
张勇飞
任继林
董希德
张树方
程桂珍
武洁梅
赵冰
许建民
高英杰
蒋玉文
杨百亮
张安洲
沈泽江
张朝兴
李显军
张安文
邵文爱
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhang Anzhou
Zhang Yongfei
Original Assignee
张勇飞
张安洲
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 张勇飞, 张安洲 filed Critical 张勇飞
Priority to CNB021001324A priority Critical patent/CN1153591C/zh
Publication of CN1370575A publication Critical patent/CN1370575A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1153591C publication Critical patent/CN1153591C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Abstract

本发明是一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂，其特点是将多联多价抗体、抗体增效保护剂、果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖以及由黄柏、侧柏叶、黄连、秦皮、白头翁、苍术、木香、苦参、车前草、泽泻中草药经水煎提取后喷雾干燥制得的干粉混匀后加入无菌去离子水，然后乳化、过滤和高速离心喷雾干燥机喷雾干燥、过3-5号筛即得到所需产品。本发明的复合制剂是一种用于防止幼畜腹泻的兽药，它将现有的免疫防治、药物防治和微生态学防治有效的集合为一体，直接服用可提高幼畜成活率10-30%，使幼畜成活率达95%以上，缩短幼畜哺乳期21-28天，腹泻幼畜治愈率90%以上，而且怀孕母畜可免打防治幼畜腹泻的各种疫苗，是生产有机食品和绿色食品畜产品的药品，可降低劳动工作量，降低生产成本，提高综合经济效益。

Description

一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于兽用药，更具体地说是一种防治幼畜腹泻的抗体中药双歧因子复合制剂及其制备方法。
背景技术
目前防治幼畜腹泻主要有三种方法：
1.怀孕母畜免疫防治法
在怀孕母畜临产前30-40天、15-20天分别注射引起幼畜腹泻的多种菌苗和疫苗，产后幼畜迅速哺吸初乳获得母源抗体，母源抗体通过新生幼畜的胃肠道直接进入血液和体液中，从而达到防治幼畜腹泻的目的。但是，此法容易引起怀孕母畜产生应激反应，导致精神沉郁、食欲减退，进而引起弱胎、流产、早产、初生体重下降和产后缺乳等不良反应，影响到幼畜腹泻的综合防治效果。
2.幼畜腹泻母畜防治法
给产后母畜投药，如苍术香连散、母仔灵等药，通过乳汁将药物有效成份传递给幼畜，达到防治幼畜腹泻的目的。但是由于中药散剂有效成份含量低，用药量大，幼畜吸乳量不均匀等原因，防治效果不够理想。
上述两种方法均受到母畜体况的影响，特别是母畜缺乳的时候，这些方法都没有任何的防治效果。
3.幼畜直接给药法
(1)给幼畜直接内服或注射抗生素和化学合成药物，如庆大霉素、链霉素、青霉素、氯霉素、卡那霉素、红霉素、先锋霉素、土霉素、新霉素、联磺散、氟哌酸、环丙沙星、恩诺沙星、痢特灵等。但由于多年来反复大量地使用这些药品，产生了不同程度的耐药性，其防治效果不够理想，如常见抗生素对大肠杆菌的敏感率一般在15-70％之间；再者人用药品与兽药交叉使用，畜产品中的药残增加，人类食用了这些高残留药物的食品，诱发人的抗药性，给人类抵抗疾病、治疗疾病带来了极大的困难，因此目前世界范围内都逐步限制和禁止在畜禽养殖业中使用抗生素和化学合成药物。
(2)给幼畜内服各种中药散剂，如黄白止痢散、乌梅散、苍术香连散、白头翁散等。由于这类散剂均由原药直接粉碎加工而成，用量大、药效低、使用不方便等原因，因此防治幼畜腹泻的效果也不好。
(3)给幼畜内服或注射高免鸡卵黄抗体达到防治幼畜腹泻的目的。本法效果好，不产生耐药性，无药残及毒副作用，但目前都处于实验阶段，没有形成稳定的制剂，不能批量地生产。例如肖驰等人“鸡抗猪大肠埃希氏菌卵黄抗体的研制与应用”(中国兽医科技，1998年，第28卷，第4期)；李国平等人“猪大肠杆菌高免鸡卵黄抗体的研制”(福建畜牧兽医，1998年第2期)。
在生产工艺技术方面，还有黄抗体的提取工艺，常见的有“利用苯酚从卵黄中提纯卵黄抗体的研究”(中国兽医科技，1998年第28卷，第10期)；“聚7二醇提取卵黄IgG的研究“(中国畜禽传染病1989年第2期，总期45期)；”“水提法”、“PEG提取法”等(Jqurnal of ImmuologuicalMethods 160(1993)207-214)。上述方法产量低，难以形成工业化批量生产。
发明内容
本发明的目的是克服已有技术的缺点，提出一种纯天然、无药残、无污染、无耐药性、无毒副作用的绿色兽用药一用于防治幼畜腹泻的抗体中药双岐因子复合制剂及其制备方法。
本发明的主要技术原理和方案：在现代分子免疫学和中医学相结合的基础上，采用现代生物工程技术，从高免疫鸡蛋中提取抗幼畜腹泻的多联多价抗体，然后将其与多种中药有效成份、双岐因子混合、喷雾干燥、过筛等，制得所需的产品。
本发明的复合制剂组成成份及其含量(以重量份数计)：
多联多价抗体2-15份；抗体增效保护剂5-25份；选自果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖中的一种或两种以上的双岐因子糖类，其中果寡糖0.5-5份、甘露低聚糖0.5-5份、酵母多糖0.5-5份；以及下述经水煎喷雾干燥后的中药干粉中的五种以上干粉：黄柏0.5-10份、侧柏叶0.5-10份、黄连0.5-15份、秦皮0.5-8份、白头翁0.5-8份、苍术0.5-10份、木香0.5-10份、苦参0.5-10份、车前草0.5-5份、泽泻0.5-5份。
本发明的复合制剂的制备方法包括以下过程：
(1)制取多联多价高免疫鸡蛋
a.无特定病原体蛋鸡(SPF鸡)在洁净养殖场隔离饲养；
b.开始产蛋前两个月对蛋鸡初次免疫，其方法：每只鸡分别同时注射以下疫苗和菌苗；沙门氏杆菌多价菌、大肠肝菌多价菌、魏氏梭菌多价菌(或者兔瘟-巴氏杆菌-魏氏梭菌三联灭活菌或羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-肠毒血-黑疫五联苗)、传染性胃肠炎疫苗、轮状病毒性腹泻苗，每种疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只鸡；
c.两周后对蛋鸡第二次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗：大肠杆菌多价苗和伪狂犬灭活苗，每种疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只鸡；
d.四周后对蛋鸡第三次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗：传染性胃肠炎疫苗、流行性腹泻疫苗、轮状病毒性腹泻苗，每种疫苗注射量0.5ml/只鸡；
e.六周后对蛋鸡第四次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗和菌苗：沙门氏杆菌多价苗、大肠肝菌多价菌、魏氏梭菌多价菌(或兔瘟-巴氏杆菌-魏氏梭菌三联灭活菌或羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-肠毒血-黑疫五联苗)、传染性胃肠炎疫苗、伪狂犬灭活菌、轮状病毒腹泻苗，每种疫苗和菌苗的注射量为0.5ml-1.0/只鸡；
f.八周后进行卵黄抗体免疫学检测为多联多价抗体中K88、K99、987P抗体凝集效价达标1∶160-1∶640后收集多联多价高免疫鸡蛋，在16℃条件下保存待用，如果检测不合格，重复步骤(e)，重新免疫，直至检测合格；
(2)多联多价抗体提纯
a.将步骤(1)得到的多联多价高免疫鸡蛋先进行消毒，再打碎鸡蛋进行分离，得到卵清和卵黄，其中卵清经喷雾干燥，制得卵清粉；
b.在(a)步卵黄中加入卵黄重量的2-10倍的无菌去离子水和0.1-1.0NHCl，使PH值至5.0-5.8，加NaCl，浓度至0.5-0.9％(W/W)，再加聚乙二醇-6000(PEG-6000)，浓度至3.5-5.0％(W/V)，然后搅拌10-20分钟后静置0.5-24小时，控制液体温度为4-20℃时，在3000-15000转/分下离心10-30分钟，得到上清液和沉淀物，沉淀物经喷雾干燥，得到卵黄粉；
c.在(b)步的上清液中加入PEG-6000，浓度至12-15％(W/V)，再加0.1-1.0N NaOH，使PH值至6.8-7.5，搅拌10-20分钟，静置0.5-24小时，液体达4℃时，在3000-15000转/分下离心20-40分钟，弃去上清液，沉淀物即为多联多价抗体粗制品；
d.将多联多价抗体粗制品溶于无菌去离子水中，再重复(c)步过程，取沉淀，进行抗体效价测定为K88、K99、987P抗体凝集效价达1∶320∽1∶2560即得到精制的多联多价抗体，所述的无菌去离子水的量为多联多价抗体粗制品重量的2-10倍；
(3)制取中药干粉
选自黄柏、侧柏叶、黄连、秦皮、白头翁、苍术、木香、苦参、车前草、泽泻中的五种或五种以上中草药分别按下述过程提取，制得干粉：
a.中药原料切碎、洗净后用冷水浸泡1-5小时，至药心充分浸透后加入原料重量的5-8倍的水，加热至沸腾后文火煎煮，第一次煎煮30-60分钟，倒出药液，然后再进行两次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的5倍水，煎煮1-2小时，然后将三次药液混合得到混合药液，剩下的药渣中再加入原料重量的3倍水，煎煮30分钟，药液用于下一批药煎煮使用；
b.将步聚(a)混合药液，在负压3-8千帕、温度40-80℃下减压浓缩，至干物质的含水量为10-15％，再离心除去土；
c.步骤(b)除去土后的物质进行在离心喷雾干燥机上喷雾干燥，即得到中药干粉，所述的喷雾干燥机操作条件：进口温度150-280℃、出口温度70-90℃、转速12000-30000转/分；
(4)制取抗体中药双岐因子复合制剂
将步骤(2)制得的精制的多联多价抗体、抗体增效保护剂、步骤(3)分别制提的中药干粉以及包括果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖在内的双岐因子糖类经混匀后，加无菌去离子水，至混合物的重量浓度达25-30％，然后在高速乳化机或匀质机上乳化、过滤，然后在离心喷雾干燥机上喷雾干燥后过3-5号筛，最后进行质量检查、分装、入库，所述的喷雾干燥机操作条件：进口温度150-220℃、出口温度65-90℃、转速12000-30000转/分、负压10-80帕。
所述的产品多联多价抗体K88、K99、987P抗体凝集效价达1∶320以上，小檗碱薄层色谱法检查阳性，杂菌总数≤1000个/克，致病菌和大肠杆菌阴性，酵母和霉菌数≤100个/克，水份含量≤8％；
本发明所述的其它成份果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖以及所有的中草药都是市售产品，所述的抗体增效保护剂包括以下三种，它们的配方是：(1)内消旋环乙醇5％、健马血清95％；(2)牛血清白蛋白10克、谷氨酸钠0.83克、磷酸二氢钾0.52克、磷酸氢二钠1.64克、蔗糖76.62克、无菌去离子水1000毫升；(3)聚乙烯吡咯烷酮K30-35 1克、乳糖10克、无菌去离子水100毫升(王明俊等，《兽医生物制品学》，中国农业出版社，1997年第一版，第345页和邢钊等，《兽医生物学制品实用技术》，中国农业出版社，2000年7月第1版第125页)。
本发明制备过程所用的喷雾干燥器、高速乳化机或匀质机都是已知的常用设备。
本发明K88、K99、987P抗体效价测定方法参见胡子信等的“鸡抗猪大肠菌卵黄抗体的研制”(中国畜禽传染病，1994年第2期，第26-27页)；所述的小檗碱薄层色谱法鉴别方法见“中华人民共和国兽药典，2000年版，附录25页”。
本发明的主优点和效果：
1.本发明的复合制剂将现有的免疫防治、药物防治和微生态学防治，有效地集合为一体，克服三者分别使用带来的多种缺点和弊端。例如给怀孕母猪注射大肠杆菌三价苗，防治仔猪黄白痢；注射魏氏梭菌多价苗，防治仔猪红痢，给怀孕母牛和母羊注射大肠杆菌，防治犊牛和羔羊大肠杆菌痢疾病等等。而本发明的复合制剂含有抗致病性大肠杆菌多价抗体、抗魏氏梭菌多价抗体、抗轮状病毒腹泻多价抗体、抗伪狂犬病毒抗体、抗沙门氏杆菌多价抗体、抗传染性胃肠类抗体、抗流行性腹泻抗体等，组成了多联多价抗体，直接给幼畜灌服，不仅摆脱了主动免疫母畜给母畜带来的种种应激反应，进而影响到胚胎和幼畜，而且可精确地将各种防治腹泻的抗体直接给幼畜，这种被动免疫，最确切、最有效地防治了幼畜腹泻；
本发明的复合制剂幼畜直接服用，可将精制的中药抗感染的有效成份送入畜体，克服抗生素和化学合成药物的耐药性和高药残的缺点，也克服了现有的中药散剂用量大、药效低、使用不方便的缺点；另外幼畜直接服用本发明的复合制剂可将各种双岐因子送入畜体，有效地培育幼畜肠道双岐杆菌和乳酸菌等有益细菌，建立良好的微生态系统，抑制和杀灭幼畜肠道内的多种致病菌，有效地防治了幼畜腹泻。
2.本发明的复合制剂的抗体增效保护剂、中药有效成份和双岐因子，对多联多价抗体具有良好的保护和增加效价的作用，克服了高免卵黄抗体加工、贮藏、运输和使用时等条件下的不稳定性而造成抗体的失效弊病，形成了稳定的一种中药型抗体生物制剂。
3.本发明中的生产工艺技术，对抗体提纯方面在脱脂上用0.1-1.0N HCl调PH值至5.0-5.8，并加NaCl使高免卵黄水液液中NaCl的浓度达0.5-0.9％；在抗体沉淀上用0.1-1.0N NaOH调PH至6.8-7.5，使抗体的提纯回收率增加1倍以上。另外在成品合成工艺上，高速离心喷雾时，控制进口温度150-220℃，出口温度65-90℃，喷头转速12000-30000转/分，负压15-80帕是本发明的重要保障条件。
4.本发明中的复合制剂在预防方面，每头新生幼畜出生后，哺乳前立即灌服0.5-1.0克，流行区幼畜、弱仔、寄养仔每头灌服1.0-2.0克，可预防新生幼畜在7-21天内不发生腹泻疾病；在开食补喂饲料或断奶饲料中添加本制剂0.2-0.5％，可预防补饲幼畜和断奶幼畜发生腹泻疾病，在治疗方面，1-2周令幼畜每头每次服2克，3-4周令幼畜每头每次服2-4克，5周以上4-8克，每日两至三次，三日为一疗程，可均匀混合在饲料中喂服，或用生理盐水或凉开水适量稀释灌服，根据病情遵医嘱增减用药量。本制剂稀释后立即灌服，切勿高温加热使用，并在密闭、干燥处保存，保存期为12-18个月。
使用本发明听复合制剂，比常见的怀孕母畜免疫防治法，幼畜腹泻母畜防治法和幼畜直接给药法提高幼畜成活率10-30％，使幼畜成活率达到95％以上，缩短幼畜哺乳期21-28天，增加断奶幼畜体重8-25％左右，腹泻幼畜治愈率90％以上，怀孕母畜免打防治幼畜腹泻的各种疫苗，降低劳动工作量，降低生产成本，提高综合经济效益。
综上所述，本发明的抗体中药双歧因子复合制剂是在现代分子免疫学和中医学相结合的理论基础上，采用现代卵巢生物反应器工程技术和高新理化加工技术，精制而成的一种集免疫防治、药物防治和微生态学防治于一体的纯天然、无药残、无污染，无耐药性、无毒副作用的新型绿色兽药。
附图说明
图1为猪用多联多价抗体高免鸡蛋生产工艺流程图；
图2为黄连、黄柏、秦皮中草药提取工艺流程图；
图3为白头翁、侧柏叶中草药提取工艺；
图4为兔用多联多价高免鸡蛋生产技术流程图；
图5为羊用多联多价高免鸡蛋生产技术流程程图。
具体实施方式
下面通过具体实施例进一步说明本发明的特点。
实例1
本实例是制备猪用抗体中药双岐因子复合制剂。
(一)本实例的复合制剂配方：
猪用多联多价抗体                 6.5公斤
抗体增效保护剂                   15.0公斤
果寡糖                           0.5公斤
黄柏                             1.5公斤
侧柏叶                           1.5公斤
黄连                             2.0公斤
秦皮                             0.5公斤
白头翁                           0.5公斤
上述所有中草药重量均为水煎提取、喷雾干燥物重量。
所述的抗体增效保护剂配方(重量)：内消旋环乙醇5％、健马血清95％。
(二)制备过程如下：
1.按图1流程生产猪用多联多价抗体高免鸡蛋；
2.猪用多联多价抗体提纯工艺
(1)猪用多联价抗体高免鸡蛋，清毒、打蛋、分离，纯卵清喷雾干燥得卵清粉；
(2)多联多价抗体高免卵黄加4倍无菌去离子水、加0.1-1.0N HCl，PH值至5.0、加NaCl，浓度至0.5％(W/W)、加PEG-6000，浓度至3.5％(W/V)，搅拌10分钟、静置30分钟、液体温度10℃，14000转/分，离心10分钟后，弃沉淀、喷雾干燥提卵黄粉；
(3)上清液中加PEG-6000，最终浓度至12％(W/V)，加0.1-1.0N NaOH，PH值至7.2，搅拌10分钟、静置8小时，液体温度达4℃时，在14000转/分，离心25分钟后，弃去上清液，沉淀即为多联多价抗体粗制品；
(4)在多联多价抗体粗制品加入无菌去离子水、重复步骤(3)取沉淀进行抗体效价测验定，K88、K99、987P抗体效价均达到1∶1280，即得到精制猪用多取多价抗体；
3.中药水煎提取喷雾干燥工艺
A.按图2流程对黄连、黄柏、秦皮中草药水煎提取、喷雾干燥；
B.按图3流程对白头翁、侧柏叶中草药水煎提取、喷雾干燥；
4.猪用抗体中药双歧因子复合制剂成品合成生产工艺
将配方原料混合，加无菌去离子水，使干物质浓度达28％；→在高速乳化机中，4000转/分；→高速乳化20分钟；→通过4号筛过滤；→在高速离心喷雾干燥机(进口温度165-170℃、出口温度70-75℃、喷雾头转速13200转/分、负压20帕)；→喷雾干燥→出口物料温度≤65℃→过4号筛→进行质量检查→①K88·K99·987P抗体效价达到1∶320；②小檗碱薄层色谱法检查阳性；③杂菌总数≤1000个/克；④致病菌和大肠杆菌阴性；⑤酵母和霉菌数≤100个/克；⑥水份含量≤8％；→分装→贴标→包装→成品→入库。
(三).猪用抗体中药双歧因子复后制剂的使用效果
①作用与用途
本制剂特异抑制和杀灭猪致病性大肠杆菌、魏氏梭菌、仔猪副伤寒沙门氏杆菌和和致泻性轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒以及伪狂犬病毒，同时对其它病原性微生物也具有抑制和杀灭作用，激发仔猪自身免疫系统，延长免疫作用，提高免疫力，促进肠道益生菌增殖和胃肠粘膜细胞生长。特效防治仔猪黄白痢、红痢、绿痢、水样痢等多种传染性腹泻。
②用法与用量
预防方面，每头新生猪仔猪0.5克，疾病流行区仔猪、弱仔、寄养仔每头1.0克，每克用6-8毫升生理盐水或凉开水稀释，摇匀，仔猪出生后奶前立即灌服或在开食补畏饲料和断奶仔猪饲料中添加本制品0.2-0.5％，预制哺乳仔猪和断奶仔猪病原性腹泻。
治疗方面，1-2周令仔猪每头每次2克，3-4周令仔猪每头每次2-4克，断奶后仔猪每头每次4-8克，每日两至三次，三日为一疗程，可均匀混合在饮料中喂服，或用生理盐水或凉开水稀释灌服。
切勿高温加热使用，稀释后立即灌服，密闭、凉暗干燥处保存，有效期18个月。
③防治效果
a.使用本制剂预防新生仔猪腹泻比其它常见的方法提高成活率10-20％，即每窝猪接10头新生仔猪计算，可多成活1-2头，增加效益至少到80-160元以上。详见下表：
组别 用法与用量 试验头数 发病率 死亡率 成活率          成活率提高，％
比免疫 比抗生素 比空白
本制剂 每头新生仔猪出生后立即服0.5克 1294 9.3％ 3.2％ 96.8％ 9.6 12.7 26.1
大杆肠菌三价苗(K88，K99，987P)红痢AC苗、传染性胃肠炎一流行性腹泻二联苗 怀孕母猪产前40，20天各免疫一次，一次2ml 606 39.1％ 12.8％ 87.2％ 2.5 17.0
庆大或氟哌酸(针剂) 每头新生仔猪出生后立即服用2-3ml 236 34.3％ 15.3％ 84.7 14.5
空白对照 429 71.3％ 29.8％ 70.2％
b、使用本制剂治疗猪仔腹泻比其它常用的方法提高治愈率10-20％以上。详见下表：
    组别  治疗头数  治愈头数    治愈率
  本制剂     213     208    97.8％*
  庆大霉素     200     156    77.9％
  痢特灵     301     210    69.8％
  白头翁散剂     124     105    84.7％
*与其它3组相比，差异极显著(P＜0.01)
实例2
本实例为兔用抗体中药双岐因子复合制剂
1.配方：
兔用多联多价抗体                        2公斤
抗体增效保护剂(同实例1)                 5公斤
甘露低聚糖                              0.5公斤
酵母多糖                                1.0公斤
黄柏                                    0.5公斤
侧柏叶                                  0.5公斤
黄连                                    0.5公斤
秦皮                                    0.5公斤
苍术                                    0.5公斤
苦参                                    0.5公斤
泽泻                                    0.5公斤
上述所有中草药重量均为水煎提取、喷雾干燥物重量。
2.生产工艺
(1)按图4工艺流程生产兔用多联多价高免鸡蛋
(2)兔用多联价抗体提纯工艺
同实例1猪用多联多价抗体提纯工艺。
(3)中药水煎提取喷雾干燥工艺
同实例1猪用中药水煎提取喷雾干燥工艺，其中苦参、泽泻工艺同图2工艺流程，苍术工艺同图3工艺流程。
(4)兔用抗体中药双岐因子复合制剂合成工艺
同实例1猪用工艺。
3.作用与用途
特效防治兔大肠杆菌病、魏氏梭菌病、轮状病毒性腹泻病等多种传染性腹泻。
4.用法与用量
每公斤体重0.4-0.6克，每日两至三次，三日为一疗程，用生理盐水或凉开水适量稀释灌服。
预防使用，每百公斤饲料添加200-500克本制剂。
5.使用效果
本制剂比青链雷素抗生素治疗组治愈率提高9.1％，比白头翁散煎剂治疗组治愈率提高30％以上。详见下表：
药物组别  发病只数  治愈只数   治愈率
本制剂     115     110   96.0％*
青霉素+链霉素     99     86   86.9％
白头翁散剂     24     15   60.5％
*本制剂治愈率比其它两组效果极显著P＜0.01。
实例3
本实例为羊用抗体中药双岐因子复合制剂。
羊用多联多价抗体                      15公斤
抗体增效保护剂                        25公斤
甘露低聚糖                            5公斤
果寡糖                                5公斤
黄柏                                  10公斤
侧柏叶                                10公斤
黄连                                  15公斤
秦皮                                  8公斤
白头翁                                8公斤
木香                                  10公斤
车前草                                5公斤
上述所有中草药重量均为水煎提取、喷雾干燥物重量。
所述的抗体增效保护剂配方：聚乙烯吡咯烷酮K30-35 1克、乳糖10克、无菌去离子水100毫升。
2.生产工艺
(1)按图5工艺流程生产羊用多联多价高免鸡蛋
(2)羊用多联多价抗体提纯工艺
同实例1猪用多联多价抗体提纯工艺。
(3)中药水煎提取喷雾干燥工艺
同实例1猪用中药水煎提取喷雾干燥工艺，其中木香工艺同图2工艺流程，车前草工艺同图3工艺流程。
(4)羊用抗体中药双岐因子复合制剂合成工艺
同实例1猪用工艺。
3.作用与用途
特效防治羊大肠杆菌病、魏氏梭菌病、轮状病毒性腹泻病等多种传染性腹泻。
4.用法与用量
每公斤体重0.5-0.8克，每日两至三次，三日为一疗程，用生理盐水或凉开水适量稀释灌服。
预防使用，每百公斤饲料添加200-500克本制剂。
5.使用效果
使用本制剂治疗羔羊病原性腹泻比常用抗生素和白头翁散煎剂治疗率分别提高10％和20％左右。详见下表：
 药物组别     发病只数     治愈头数     治愈率
 本制剂     88     84     95.5％*
 庆大霉素+痢菌净     125     105     84.0％
 白头翁散剂     32     24     75.5％
*本制剂治愈率比其它两组效果极显著P＜0.01。

Claims (2)

1一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂，其特征在于组成成份及其重量份数：
(1)多联多价抗体2-15份，其K88、K99、987P抗体凝集效价为1∶320-1∶2560；
(2)抗体增效保护剂5-25份，选自(a)内消旋环乙醇5％、健马血清95％，(b)牛血清白蛋白10克、谷氨酸钠0.83克、磷酸二氢钾0.52克、磷酸氢二钠1.64克、蔗糖76.62克，无菌去离子水1000毫升，和(c)聚乙烯吡咯烷酮K30-351克、乳糖10克、无菌去离子水1000毫升；
(3)双歧因子糖类，选自果寡糖0.5-5份、甘露低聚糖0.5-5份、酵母多糖0.5-5份中的一种或两种以上；
(4)中药水提取物干粉，所述中药为黄柏0.5-10份、侧柏叶0.5-10份、黄连0.5-15份、秦皮0.5-8份，以及选自白头翁0.5-8份、苍术0.5-10份、木香0.5-10份、苦参0.5-10份、车前草0.5-5份、泽泻0.5-5份中的一种或两种以上。
2权利要求1所述的复合制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)制取多联多价高免疫鸡蛋
a.无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养；
b.开始产蛋前两个月对蛋鸡初次免疫，其方法：每只鸡分别同时注射以下疫苗和菌苗，沙门氏杆菌多价菌，大肠肝菌多价菌，魏氏梭菌多价菌或者兔瘟-巴氏杆菌-魏氏梭菌三联灭活菌、羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-肠毒血-黑疫五联苗，传染性胃肠炎疫苗，轮状病毒性腹泻苗，每种疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只鸡；
c.两周后对蛋鸡第二次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗：大肠杆菌多价苗和伪狂犬灭活苗，每种疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只鸡；
d.四周后对蛋鸡第三次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗：传染性胃肠炎疫苗、轮状病毒性腹泻苗、流行性腹泻疫苗，每种疫苗注射量0.5ml/只鸡；
e.六周后对蛋鸡第四次免疫，其方法：每只鸡分别注射下述疫苗和菌苗：沙门氏杆菌多价苗，大肠肝菌多价菌，魏氏梭菌多价菌或者兔瘟-巴氏杆菌-魏氏梭菌三联灭活菌、羊快疫-羔羊痢疾、猝狙-肠毒血-黑疫五联苗，传染性胃肠炎疫苗，伪狂犬灭话苗和轮状病毒腹泻苗，每种疫苗和菌苗的注射量为0.5ml-1.0/只鸡；
f.八周后进行卵黄抗体免疫学检测为多联多价抗体中K88、K99、987P抗体凝集效价1∶160-1∶640后收集多联多价高免疫鸡蛋，在16℃条件下保存待用，如果检测不合格，重复步骤(e)，重新免疫，直至检测合格。
(2)多联多价抗体提纯
a.将步骤(1)得到的多联多价高免疫鸡蛋先进行消毒，打碎鸡蛋进行分离，得到卵清和卵黄，其中卵清经喷雾干燥，制得卵清粉；
b.在(a)步卵黄中加入卵黄重量的2-10倍的无菌去离子水和0.1-1.0NHCl，使PH值至5.0-5.8，加NaCl，浓度至0.5-0.9％(W/W)，再加聚乙二醇6000，浓度至3.5-5.0％(W/V)，然后搅拌10-20分钟后静置0.5-24小时，控制液体温度为4-20℃时，在3000-15000转/分下离心10-30分钟，得到上清液和沉淀物，沉淀物经喷雾干燥，得到卵黄粉；
c.在(b)步的上清液中加入聚乙二醇-6000，浓度至12-15％(W/V)，再加0.1-1.0N NaOH，使PH值至6.8-7.5，搅拌10-20分钟，静置0.5-24小时，控制液体温度达4℃时，在3000-15000转/分下离心2040分钟，弃去上清液，沉淀物即为多联多价抗体粗制品；
d.将多联多价抗体粗制品溶于无菌却离子水中，再重复(c)步过程，取沉淀，进行抗体效价测定，K88、K99、987P抗体凝集效价达1∶320∽1∶2560即得到精制的多联多价抗体，所述的无菌去离子水的量为多联多价抗体粗制品重量的2-10倍；
(3)制取中药干粉
选自黄柏、侧柏叶、黄连、秦皮、白头翁、苍术、木香、苦参、车前草、泽泻中的五种或五种以上的中草药分别按下述过程提取，制得干粉：
a.中药原料切碎、洗净后用冷水浸泡1-5小时，至药心充分浸透后加入原料重量的5-8倍的水，加热至沸腾后文火煎煮，第一次煎煮30-60分钟，倒出药液，然后再进行两次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的5倍水，煎煮1-2小时，然后将三次药液混合得到混合药液，剩下的药渣中再加入原料重量的3倍水，煎煮30分钟，药液用于下一批药煎煮使用；
b.将步聚(a)混合药液，在负压3-8千帕、温度40-80℃下减压浓缩，至干物质的含水量为10-15％，再离心除去土；
c.步骤(b)除去土后的物质进行在离心喷雾干燥机上喷雾干燥，即得到中药干粉，所述的喷雾干燥机操作条件：进口温度150-280℃、出口温度70-90℃、转速12000-30000转/分；
(4)制取抗体中药双岐因子复合制剂
将步骤(2)制得的精制的多联多价抗体、抗体增效保护剂、步骤(3)分别制取的中药干粉以及包括果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖在内的双岐因子糖类，经混匀后，加无菌去离子水，至混合物的重量浓度达25-30％，然后在高速乳化机或匀质机上乳化、过滤，然后在离心喷雾干燥机上喷雾干燥后过3-5号筛，最后进行质量检查、分装、入库，所述的喷雾干燥机操作条件：进口温度150-220℃、出口温度65-90℃、转速12000-30000转/分、负压10-80帕。
CNB021001324A 2002-01-09 2002-01-09 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法 Expired - Fee Related CN1153591C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB021001324A CN1153591C (zh) 2002-01-09 2002-01-09 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB021001324A CN1153591C (zh) 2002-01-09 2002-01-09 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1370575A CN1370575A (zh) 2002-09-25
CN1153591C true CN1153591C (zh) 2004-06-16

Family

ID=4739205

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB021001324A Expired - Fee Related CN1153591C (zh) 2002-01-09 2002-01-09 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1153591C (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1714562A1 (en) * 2005-04-22 2006-10-25 N.V. Nutricia Process for drying uronic acid oligosaccharides
CN102133389B (zh) * 2011-04-06 2012-05-09 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一种降低畜禽传染病发病率和死亡率的中药
CN104431340B (zh) * 2013-09-13 2017-12-26 中国科学院大连化学物理研究所 一种提高断奶雌性动物卵泡发育能力的功能糖复合物及其应用
CN104510779B (zh) * 2013-09-29 2017-12-22 瑞普（天津）生物药业有限公司 一种治疗奶牛隐性乳房炎的中药微生态制剂
CN105879003A (zh) * 2014-11-24 2016-08-24 李雷 一种治疗羔羊腹泻中药组合物
CN104489266A (zh) * 2014-12-03 2015-04-08 青岛百慧智业生物科技有限公司 用于防治犊牛腹泻的饲料添加剂
CN105409885A (zh) * 2015-12-12 2016-03-23 贵州康正畜牧科技有限公司 一种预防特种野猪仔猪白痢的特种野猪母猪饲养方法
RU2736830C2 (ru) * 2016-01-12 2020-11-20 Др. Редди'С Лабораторис Лимитед Стабильная фармацевтическая композиция

Also Published As

Publication number Publication date
CN1370575A (zh) 2002-09-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1380098A (zh) 一种抗感染复合制剂及其制备方法
CN101731488B (zh) 预防断奶仔猪腹泻的中草药添加剂及其猪饲料
CN101698024B (zh) 一种猪用治疗呼吸道疾病、促生长的中药及其制备方法
CN101167918A (zh) 用于增强猪、家禽免疫力的中药制剂
CN101357229A (zh) 能防治猪腹泻的免疫球蛋白复合剂的生产技术
CN102302778A (zh) 一种中药免疫球蛋白复合剂的制备方法与应用
Tan et al. Dietary supplementation of Astragalus polysaccharides enhanced immune components and growth factors EGF and IGF-1 in sow colostrum
CN1840064A (zh) 治疗禽流感的药物组合物、制备方法及其用途
CN1153591C (zh) 一种用于防治幼畜腹泻的复合制剂及其制备方法
CN104208163B (zh) 一种提高动物免疫力的中兽药组合物、应用及其制备方法
CN105641031A (zh) 扶正解毒复方药物组合物，其用途及饲料
CN101049375A (zh) 一种防治仔猪黄白痢、禽大肠杆菌病的中药组合物
CN111789190A (zh) 一种提高动物机体免疫力的中药饲料添加剂、饲料及制备方法
CN104222522A (zh) 一种可预防竹丝鸡白痢的鸡饲料及其制备方法
CN101366453A (zh) 一种用于防治猪腹泻的非抗生素药物
CN104208678B (zh) 一种兽用抗病毒组合物、冻干粉、制备方法及应用
CN108379577A (zh) 一种增强pedv疫苗免疫应答的免疫增强剂
CN107998332B (zh) 一种治疗猪蓝耳病的中药组合物及其应用
CN109984255B (zh) 一种抗毒增免肽复合型微生物饲料添加剂及其制备方法
CN106472411A (zh) 一种防大肠杆菌病养猪的方法
CN104208653A (zh) 一种治疗仔猪黄白痢的中药组合物及其制备方法
CN101032596A (zh) 一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物及其制备方法
CN110338266A (zh) 一种母猪中药复合肽饲料添加剂及其制备方法
CN1178703A (zh) 幼儿胃肠安制剂及其生产工艺
CN104758367B (zh) 一种增强机体免疫力的植物药复方制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C53 Correction of patent for invention or patent application
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Zhao Bing

Inventor after: Jiang Yuwen

Inventor after: Yang Bailiang

Inventor after: Zhang Anzhou

Inventor after: Shen Zejiang

Inventor after: Zhang Chaoxing

Inventor after: Li Xianjun

Inventor after: Zhang Anwen

Inventor after: Shao Wenai

Inventor after: Zhang Yongfei

Inventor after: Ren Jilin

Inventor after: Dong Xide

Inventor after: Zhang Shufang

Inventor after: Cheng Guizhen

Inventor after: Wu Jiemei

Inventor after: Xu Jianmin

Inventor after: Gao Yingjie

Inventor before: Zhang Yongfei

Inventor before: Jiang Yuwen

Inventor before: Yang Bailiang

Inventor before: Zhang Anzhou

Inventor before: Shen Zejiang

Inventor before: Zhang Chaoxing

Inventor before: Li Xianjun

Inventor before: Zhang Anwen

Inventor before: Shao Wenai

Inventor before: Ren Jilin

Inventor before: Dong Xide

Inventor before: Zhang Shufang

Inventor before: Cheng Guizhen

Inventor before: Wu Jiemei

Inventor before: Zhao Bing

Inventor before: Xu Jianmin

Inventor before: Gao Yingjie

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: ZHANG YONGFEI REN JILIN DONG XIDE ZHANG SHUFANG CHENG GUIZHEN WU JIEMEI ZHAO BING XU JIANMIN GAO YINGJIE JIANG YUWEN YANG BAILIANG ZHANG ANZHOU SHEN ZEJIANG ZHANG ZHAOXING LI XIANJUN ZHANG ANWEN SHAO WENAI TO: ZHAO BING ZHANG YONGFEI REN JILIN DONG XIDE ZHANG SHUFANG CHENG GUIZHEN WU JIEMEI XU JIANMIN GAO YINGJIE JIANG YUWEN YANG BAILIANG ZHANG ANZHOU SHEN ZEJIANG ZHANG ZHAOXING LI XIANJUN ZHANG ANWEN SHAO WENAI

ASS Succession or assignment of patent right

Free format text: FORMER OWNER: ZHANG ANZHOU

Effective date: 20121231

Owner name: LIAONING YIKANG BIOLOGICAL CO., LTD.

Free format text: FORMER OWNER: ZHANG YONGFEI

Effective date: 20121231

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: HAIDIAN, BEIJING TO: 111000 LIAOYANG, LIAONING PROVINCE

TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20121231

Address after: 111000 Liaoyang City, Liaoning Province in the southern Taizi River Road No. 12

Patentee after: Liaoning Yikang Biological Corporation Limited

Address before: College of Agronomy and biotechnology, China Agricultural University, Beijing, Haidian, Zhao Bingzhuan

Patentee before: Zhang Yongfei

Patentee before: Zhang Anzhou

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: ZHANG YONGFEI

Free format text: FORMER OWNER: LIAONING YIKANG BIOLOGICAL CO., LTD.

Effective date: 20150511

Owner name: ZHANG ANZHOU

Effective date: 20150511

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 111000 LIAOYANG, LIAONING PROVINCE TO: 100193 HAIDIAN, BEIJING

TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20150511

Address after: 100193 Zhao Bingzhuan, College of agriculture, China Agricultural University, 2 West Old Summer Palace Road, Beijing, Haidian District

Patentee after: Zhang Yongfei

Patentee after: Zhang Anzhou

Address before: 111000 Liaoyang City, Liaoning Province in the southern Taizi River Road No. 12

Patentee before: Liaoning Yikang Biological Corporation Limited

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20040616

Termination date: 20160109

EXPY Termination of patent right or utility model