CN115297722A - 具有延长的保质期的即用型蝇新生幼虫及其生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了用于在有益蝇的新生幼虫、特别是黑水虻幼虫中诱导假死的组合物和方法。在假死期间,所述幼虫显示出延长的保质期和提高的运输耐用性。所述假死是可逆的,并且在暴露到标准的饲养条件后,所述幼虫达到与相应的非假死幼虫相当的成熟度。
Description
技术领域
本发明提供了用于在蝇新生幼虫中诱导假死状态,从而抑制幼虫生长并长时间维持小尺寸的组合物和方法。在假死期间,所述新生幼虫显示出延长的保质期和提高的运输耐用性。所述假死是可逆的,并且在暴露到标准的饲养条件后所述幼虫达到与在整个生长期中在标准条件下生长的相应的非假死幼虫相当的成熟特征。
背景技术
昆虫可用于各种不同应用,例如害虫管理、无论是作为整体还是作为提取物在食品和动物饲料行业中作为蛋白质和油的来源、生产制药和化妆品行业用材料、减少废物、生产农业用肥料等等。
为了支持用于这些应用的昆虫的大规模生产,它们的养殖必须被工业化并扩大规模。目前,大多数昆虫工厂采用在生物体的整个生命周期中就地生长(繁殖),以生产各种用途所需的幼虫。
昆虫产卵的产量每周可能会有很大差异,并且昆虫群落经常会遭受生产力下降甚至突然崩溃。这使得在最终产品生产地的昆虫繁殖效率低下且成本高昂,并且需要不断地过量生产卵以跟上生产需求。此外,一些物种的幼虫阶段或整个生命周期较短,对环境条件敏感,给昆虫的繁殖和储存工作带来困难。
在黑水虻(Hermetia illucens,BSF)的情况下,将繁殖地选在饲养和加工设施附近会显著影响工厂的规模及其运营复杂性。此外,它还限制了此类设施在经济上可行的最低生产能力。
目前正在尝试以商业化的量高效生长和储存活的幼虫。例如,国际(PCT)专利申请公开号WO 2019/234107公开了用于活昆虫幼虫的储存装置。所述储存装置包括冷却介质例如水,其中将所述储存装置中幼虫-水混合物中的水量控制在30%至80%之间。将所述储存装置的内容物保持在低于15℃的温度下并搅拌。WO 2018/002519公开了一种用于自动繁殖处于幼虫状态和成虫状态下的昆虫幼虫的饲养盘。
除了其他因素之外,提供给幼虫的营养可能对幼虫的可储存性和保质期长度有影响。例如,国际(PCT)专利申请公开号WO 2019/199309公开了一种用于储存黑水虻幼虫的构造,其包括容器,所述容器底部的发酵营养源层(底层),所述发酵营养源层顶上的黑水虻幼虫(中间层),所述黑水虻幼虫顶上的干燥营养源层(顶层),以及所述容器顶上的允许空气进出容器的盖子,其中所述营养源为以体积计约50%的麦麸、30%的苜蓿粉和20%的玉米面(corn meal)。
对延长昆虫、特别是蝇幼虫的新生期,同时维持高存活率,从而延长它们的保质期并改善其运输的组合物、方法和系统存在着需求,并且因此是非常有利的。
发明内容
本发明满足了对产生有益蝇、特别是黑水虻(BSF,hermetia illucens)的原种和运输其幼虫的经济有效的方式的需求,所述幼虫在农业、医药和研究用途中以及作为饲料、食品或作为食品成分的用途中大量需要。幼虫被广泛用作废物分解者和蛋白质来源。本发明提供了延长新生幼虫发育持续时间的组合物和方法,从而延长它们的保质期而不会对幼虫特性产生负面影响。本发明还提供了处于假死状态的新生幼虫,其能够根据目标用途在需要的时候恢复到正常发育和生长。本发明的组合物和方法有利地适用于冷敏感和/或生命周期短的物种。这些特性使得新生幼虫能够在国内和国际上运输,并且能够实现不需要完整育种单元的饲养和加工设施。这些特性还可以实现用于大规模饲养原种管理或实验室目的的生命周期管理。
本发明部分是基于下述出人意料的发现,即特定饲料组合物将Hermetiaillucens(黑水虻)的一龄幼虫期延长至少14天,同时保持它们进入高级生长阶段的能力。所述组合物包含至少一种防腐剂和提供水性溶液含量高、同时所述组合物不含游离液体的胶凝剂。在将所述诱导假死的新生幼虫转移到标准饲养饲料后,所述幼虫开始正常发育和成熟。本发明的方法优于迄今已知的用于在幼虫中诱导假死状态的方法,特别是对于幼虫运输,这至少是因为所述组合物和方法适用于幼虫的中到大规模可重复生产;所述生产产生可重复的高百分率的所需尺寸的活新生幼虫,其与相应的幼虫在标准条件下生长所获得的百分率和尺寸相当;并且所述幼虫可以容易地以高密度运输。
本发明还提供了一种用于运输新生幼虫的容器,其特征在于能够进行空气交换,同时提供从其中包含的诱导假死的饲料组合物的有限的水分蒸发。本发明的组合物和方法的显著优势在于下述事实,即所述假死幼虫具有相对低的代谢率,因此可以保持单位生长面积的高幼虫密度,这允许降低运输成本以及可预测的费用。
根据一个方面,本发明提供了一种用于在蝇新生幼虫中诱导假死状态的饲料组合物,其包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂。
根据某些实施方式,所述饲料组合物包含至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或至少一种它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。不希望受到任何特定理论或作用机制限制,所述组合物的低蛋白质含量有助于诱导假死。
根据某些实施方式,所述饲料组合物中碳水化合物与蛋白质的比例为约18:1至1:1。
根据某些实施方式,所述昆虫幼虫相容性防腐剂是食品级或化妆品级防腐剂。
根据某些实施方式,所述食品级或化妆品级防腐剂选自对羟基苯甲酸酯、苯甲酸盐、丙酸和/或其盐(丙酸盐)、亚硫酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、山梨酸盐及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
根据某些实施方式,所述食品级或化妆品级防腐剂是对羟基苯甲酸酯,其选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸苄酯、其盐及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些示例性实施方式,所述防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐。
根据另外的某些示例性实施方式,所述食品级或化妆品级防腐剂是丙酸和/或其盐。
根据某些当前的示例性实施方式,所述饲料组合物包含对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐和丙酸和/或其盐。
根据某些实施方式,所述至少一种胶凝剂选自琼脂、琼脂糖、藻酸盐、卡拉胶、阿拉伯胶、茄替胶、黄芪胶、结冷胶、黄原胶、果胶、瓜尔胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素和刺槐豆胶。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些示例性实施方式,所述胶凝剂是琼脂。根据某些当前的示例性实施方式,所述胶凝剂是琼脂。不希望受到任何理论或作用机制限制,所述胶凝剂为所述组合物提供了包含高含量的水性溶液(特别是水)、同时不含液相的能力。所述高含量的水性溶液提供了维持所述处于假死状态的幼虫存活所需的湿度。
根据本发明的教导,可以使用已知适合于饲养蝇幼虫的任何碳水化合物和蛋白质来源。
根据某些实施方式,所述碳水化合物和蛋白质的来源选自植物源性粉、全酵母制剂、酵母提取物及其任何组合。
根据某些实施方式,所述植物源性粉从选自玉米、小麦、黑麦、大豆、燕麦的植物及其组合获得。根据某些示例性实施方式,所述植物源性粉是玉米粉(corn flour)。
根据某些实施方式,所述至少一种碳水化合物是可溶性碳水化合物。根据某些实施方式,所述至少一种可溶性碳水化合物选自糖蜜、蔗糖、红糖、淀粉、蜂蜜、果糖及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些实施方式,所述可溶性碳水化合物是糖蜜。根据某些实施方式,所述可溶性碳水化合物是红糖。
根据某些示例性实施方式,所述饲料组合物包含选自对羟基苯甲酸甲酯、丙酸及其盐的至少一种防腐剂、至少一种胶凝剂、至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。根据某些示例性实施方式,所述胶凝剂是琼脂。根据某些实施方式,所述碳水化合物与蛋白质的比例为10:1。
根据某些示例性实施方式,所述饲料组合物包含对羟基苯甲酸甲酯和/或丙酸和/或其盐、至少一种胶凝剂、玉米粉、干酵母和糖蜜。
本发明的诱导假死的饲料组合物可以是预混干燥组合物的形式或即用型组合物的形式。
根据某些实施方式,本发明的饲料组合物是干燥形式。根据这些实施方式,将所述干燥组合物在使用前用水性溶液水化。根据某些实施方式,使用水性溶液在约70℃至约100℃的温度下形成水化。
根据某些实施方式,当所述至少一种防腐剂包括对羟基苯甲酸酯、特别是对羟基苯甲酸甲酯时,所述干燥饲料组合物基本上不含所述对羟基苯甲酸酯。根据这些实施方式,所述对羟基苯甲酸酯在如上所述将所述干燥组合物水化后,在低于70℃的温度下添加。
根据某些实施方式,在所述干燥预混饲料组合物中,所述至少一种胶凝剂的含量以所述组合物的总干重计为约1%至约30%w/w。
根据某些实施方式,在所述干燥预混饲料组合物中,所述至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂的含量以所述组合物的总干重计为约0.2%至约10%w/w。
根据某些示例性实施方式,所述水性溶液是水。根据某些实施方式,所述干燥饲料组合物被水化,以形成半固体或固体凝胶组合物,其包含以所述组合物的总湿重计约35%至约90%w/w的水性溶液。
根据某些实施方式,所述饲料组合物是包含水性溶液的即用型饲料组合物的形式。根据这些实施方式,所述即用型饲料组合物是包含高含量的水性溶液的半固体或固体凝胶的形式,其中所述饲料组合物不含液相。不希望受到任何特定理论或作用机制限制,所述胶凝剂、特别是琼脂提供了所述饲料的高水含量而不产生液相。
根据某些实施方式,所述即用型饲料组合物包含以所述组合物的总湿重计约35%至约90%w/w的水性溶液。
根据某些示例性实施方式,所述水性溶液是水。
根据某些实施方式,所述即用型饲料组合物中所述胶凝剂的量以所述组合物的总湿重计为约0.1%至约3%w/w。
根据某些实施方式,所述即用型饲料组合物中所述至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂的量以所述组合物的总湿重计为约0.01%至约6.5%。
根据本发明的教导的诱导假死的饲料组合物适用于生长各种不同品种的有益蝇的幼虫,特别是Hermetia illucens(黑水虻,BSF)的幼虫。
根据某些示例性实施方式,所述幼虫是BSF幼虫。
根据某些实施方式,所述饲料组合物在摄食所述饲料组合物的幼虫上诱导可逆的假死。根据这些实施方式,在转移到普通饲养饲料后所述幼虫正常成熟,达到与在整个发育过程中在普通饲料上饲养的相应幼虫相当的尺寸和功能。适合于饲养蝇幼虫的普通饲料对于本领域技术人员来说是已知的。根据某些实施方式,所述普通饲料包含超过15%、通常超过20%的蛋白质。
本发明还提供了通过本发明的方法生产的幼虫。
本领域中已知的用于生长和/或运输幼虫的任何容器均可以与本发明的饲料组合物一起使用。此类容器应该提供空气交换并防止新生幼虫逃逸。
根据某些实施方式,所述饲料组合物的成分促进所述容器内湿度的维持。不希望受到任何特定理论或作用机制限制,所述饲料组合物的胶凝剂、特别是琼脂促进所述容器内湿度的维持。
根据另一方面,本发明提供了一种在蝇新生幼虫中诱导假死状态的方法,包括将蝇卵和/或幼虫放置在诱导假死的饲料组合物上,所述组合物包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂,其中所述饲料组合物是半固体或固体凝胶形式,包含以所述组合物的总重量计至少35%w/w的水性溶液。根据某些示例性实施方式,所述水性溶液是水。
所述昆虫幼虫相容性防腐剂如上文所述。根据某些实施方式,所述防腐剂选自食品级和/或化妆品级对羟基苯甲酸酯,特别是对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐、丙酸和/或其盐;及其组合。
所述胶凝剂如上文中所述。根据某些示例性实施方式,所述胶凝剂是琼脂。根据某些当前的示例性实施方式,所述蝇幼虫来自于Hermetia illucens(黑水虻)。
所述诱导假死的饲料组合物如上文中所述。
根据某些实施方式,所述放置在饲料组合物上的幼虫处于一龄发育期。根据某些示例性实施方式,在孵化后即刻至孵化后约12h的时间段内将所述幼虫放置在所述饲料组合物上。根据其他示例性实施方式,将所述卵直接放置在所述饲料组合物上。根据这些实施方式,将所述卵在所述饲料组合物上孵化。
根据某些实施方式,所述幼虫的环境温度为约4℃至约35℃。根据某些实施方式,所述环境温度为10-30℃。根据某些示例性实施方式,所述新生幼虫只要放置在所述饲料组合物上即保持在假死阶段。根据某些示例性实施方式,所述新生幼虫只要在约20℃至约30℃的环境温度下放置在所述饲料组合物上即保持在假死阶段。根据某些实施方式,所述新生幼虫以一龄至四龄期之间的某个龄期特有的尺寸保持存活。根据某些示例性实施方式,当所述幼虫来自于BSF时,所述新生幼虫只要放置在本发明的饲料组合物上,其尺寸即维持在2-8mm之间。应该明确地理解,所述处于假死期的幼虫是活的,并且所述假死是可逆的。
根据某些示例性实施方式,所述幼虫摄食所述饲料组合物。根据另外某些示例性实施方式,所述诱导假死的饲料组合物是所述新生幼虫的唯一营养来源。
根据其他示例性实施方式,在将所述新生幼虫从所述诱导假死的饲料组合物转移到普通饲养饲料后,所述幼虫在整个剩余的幼虫阶段正常发育,并任选地直至成熟。根据某些实施方式,将所述幼虫转移到普通饲养饲料以达到五龄期。
根据某些实施方式,至少70%、至少75%、至少80%或至少85%的所述被放置在本发明的诱导假死的饲料组合物上并随后转移到普通饲养饲料组合物的新生幼虫达到与在整个生长期中在普通饲养饲料上生长的相应幼虫的尺寸和/或发育阶段相当的尺寸和/或发育阶段。
根据某些实施方式,所述所需发育阶段是幼虫五龄期。根据某些实施方式,所述所需发育阶段是幼虫六龄期。
本领域中已知的用于生长和/或运输幼虫的任何容器可以与本发明的方法一起使用。
根据某些实施方式,所述方法包括将多个卵和/或新生幼虫放置在所述诱导假死的饲料组合物上。根据这些实施方式,所述幼虫以约100至约5000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。
根据某些实施方式,所述方法包括仅放置多个幼虫。根据可选实施方式,所述方法包括仅放置多个卵。
根据另一方面,本发明提供了一种用于运输和/或储存有益蝇幼虫的系统,包含容器、根据本发明的教导的诱导假死的饲料组合物和多个新生幼虫。
根据某些实施方式,所述系统适合于将所述有益蝇幼虫储存约1-20周,其中所述幼虫处于假死阶段。
根据某些实施方式,将所述饲料组合物和多个新生幼虫放置在所述容器内。
根据某些实施方式,所述系统的容器包含至少一个能够与环境进行气体交换的壁。根据这些实施方式,所述至少一个壁由至少部分穿孔的材料构成。根据某些示例性实施方式,所述至少一个壁由网制成。根据某些实施方式,所述网包含50-100μm的孔眼。根据某些实施方式,所述穿孔材料选自醋酸纤维素、低密度聚乙烯(LDPE)和纤维素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些当前的示例性实施方式,所述由至少部分穿孔的材料构成的至少一个壁是所述容器的顶壁。
根据某些实施方式,所述容器包含平底完整壁和在容器顶部的由至少部分穿孔的材料构成的壁。根据这些实施方式,所述容器包含在所述容器底部的诱导假死的饲料组合物、在所述饲料顶上的新生幼虫和/或卵、足以容纳氧气和相对均匀的湿气的空隙体积以及由至少部分穿孔的材料构成的顶壁。
根据某些实施方式,所述容器材料选自有机聚合物、玻璃、塑料、金属或其任何组合。
根据某些实施方式,所述穿孔材料允许所述容器内的气体交换,同时限制湿气从所述饲料组合物蒸发。根据其他实施方式,所述容器不可透过液体。
根据某些实施方式,所述容器的体积在100ml至5,000ml之间。
根据某些实施方式,所述容器具有直壁、锥形壁或不规则壁。
根据某些实施方式,将蝇卵放置在所述诱导假死的饲料组合物顶上。所述卵可以含有处于任何发育阶段的胚胎。
正如本领域技术人员已知的,所述标准饲养条件和普通饲料成分将根据蝇种来确定。
应该理解,本文公开的每个方面和实施方式的任何组合被明确地涵盖在本发明的公开内容中。
本发明的其他实施方式和全部适用范围将从下文给出的详细描述中变得显而易见。然而应该理解,所述详细描述和具体实例尽管指示了本发明的优选实施方式,但仅以说明的方式给出,因为对于本领域技术人员来说,在本发明的精神和范围内的各种不同改变和修改将从所述详细描述变得显而易见。
附图说明
图1示出了在放置到标准饲料(图1A)或诱导假死的饲料组合物(图1B)上之后4天的幼虫。
图2描绘了在诱导假死的饲料组合物(实线)或标准饲料(虚线)上孵化后生长14天的幼虫的以mm为单位的平均长度。
图3A示出了在含有约83%的水的诱导假死状态的饲料组合物上在25℃生长14天(“假死新生幼虫”)、然后转移到在标准饲料上生长14-16天的幼虫;和在13-16天的整个生长阶段中在标准饲料组合物上生长的幼虫(“常规生长”);直至5龄期的存活率百分数。
图3B示出了如图3A中所述诱导假死状态或在标准饲料组合物上生长的5龄期幼虫的平均体重。
图4A示出了以与图3A中相似的方式生长的幼虫直至5龄期的存活率百分数,但其中所述假死饲料包含少约50%的水。
图4B示出了如图4A中所述诱导假死状态或在标准饲料组合物上生长的5龄期幼虫的平均体重。
图5A示出了以与图3A中相似的方式生长的幼虫直至5龄期的存活率百分数,但其中所述假死步骤在22℃下进行。
图5B示出了如图5A中所述诱导假死状态或在标准饲料组合物上生长的5龄期幼虫的平均体重。
图6呈现了在标准饲料上(图像底部)或在诱导假死的饲料组合物上(图像顶部)生长的14日龄幼虫。比例尺表示5mm。
发明详述
本发明解决了在昆虫幼虫、特别是蝇幼虫的大规模生产中涉及的,对用于将孵化的幼虫在存活状态下维持足够长时间的可靠且可重复的系统和方法的迄今尚未满足的工业需求。具体来说,所述需求是将存活的幼虫维持几天直至几个月的时间段。
本发明提供了饲料组合物,其在提供给孵化后不久的蝇幼虫时,在所述幼虫中诱导假死状态。所述诱导假死的饲料组合物包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂,以及含量以所述组合物的干重计为至多约20%w/w的蛋白质。本发明还提供了在新生幼虫中诱导假死状态的方法,以及用于运输和储存所述幼虫的系统,其包含容器和所述饲料组合物。根据本发明的教导,所述假死在将所述幼虫转移到标准饲养条件后是可逆的,此时所述幼虫重新获得正常发育。
定义
当在本文中使用时,术语“蝇”是指双翅目的蝇。根据某些实施方式,所述蝇是Hermetia illucens(黑水虻)。
当在本文中使用时,术语“新生幼虫”是指从孵化时直至第一次蜕皮的昆虫幼虫,特别是蝇幼虫。
当在本文中使用时,术语“琼脂”是指由琼脂糖(由琼脂二糖的重复单元组成的线性聚合物,所述琼脂二糖是由D-半乳糖和3,6-脱水-L-吡喃半乳糖组成的二糖)和琼脂果胶(硫酸化半乳聚糖混合物)组成的胶凝剂(也称为固化剂)。
当在本文中使用时,术语“龄期”是指在昆虫(更具体来说全变态昆虫的幼虫形式)在达到性成熟之前的蜕皮之间的发育阶段。幼虫经过6个龄期。一龄期幼虫(刚从它们的卵中萌出)是不透明、乳白色的,具有红棕色头部。在五龄期时幼虫达到全尺寸,具有表面粗糙的外观,呈灰黄色。黑水虻通常在卵萌出后14-21天的五龄期时达到全尺寸。五龄幼虫的长度达到17-25mm,取决于性别、饲料来源和亚种。幼虫的生命在六龄期时结束,此后它变成蛹。
术语“幼虫环境温度”是指幼虫感受到的温度。应该明确地理解,所述术语可以是指其中放置幼虫的容器内的温度,和/或容器所放置的环境的温度,或其上放置幼虫的表面的周围的环境温度。
当在本文中使用时,指称本发明的饲料组合物的术语“即用型”是指包含水性溶液的所述组合物。根据某些实施方式,所述水性溶液是水。根据某些示例性实施方式,本发明的诱导假死的即用型饲料组合物是固体或半固体凝胶的形式。
当在本文中使用时,术语“约”应该理解为在本领域的正常公差范围内,例如在平均值的2个标准偏差内。约可以理解为在所陈述的值的10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.1%、0.05%或0.01%以内。本文中提供的所有值均理解为由该术语约修饰。
根据某些当前的示例性实施方式,本发明的系统和方法用于维持黑水虻(Hermetia illucens)的活幼虫。
黑水虻(BSF)在工业中被用作饲料的替代蛋白质来源和减少废物。不幸的是,BSF的产卵量存在差异,并且它们的卵/新生幼虫不能储存超过几天(卵在产卵后3-4天孵化,新生幼虫必须在孵化后约24小时进食)。BSF在其生命周期的早期阶段对寒冷条件也非常敏感。因此,将BSF的卵或新生幼虫暴露到低温可能是致命的。目前,在中央生产工厂生产BSF并将它们运送到远程终端用户例如废物分解设施或蛋白质工厂的能力尚不令人满意。
本发明部分是基于下述出人意料的发现,即包含琼脂、至少一种对羟基苯甲酸酯、低蛋白质含量和足够湿气的饲料组合物,当将黑水虻幼虫在从卵孵化后几小时放置在所述饲料组合物上时,在所述幼虫中提供假死状态。
假死是生物学功能的暂时减慢或停止,导致短期或长期的发育停滞,以便保留生理能力。当在本文中使用时,所述术语是指延长的一龄/二龄幼虫阶段,典型的持续时间从约1-4天延长至约至少7天、至少14天、至少21天或至少28天并长达约140天。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
根据一个方面,本发明提供了一种在蝇新生幼虫中诱导假死状态的饲料组合物,其包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂。根据某些实施方式,所述昆虫幼虫相容性防腐剂是食品级或化妆品级防腐剂。
根据某些实施方式,所述饲料组合物包含至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。
根据某些实施方式,所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多15%、至多16%、至多17%、至多18%或至多19%w/w。根据某些实施方式,所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计在5%-20%w/w之间。根据某些示例性实施方式,所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为约8%w/w。
根据某些实施方式,所述碳水化合物与蛋白质的比例为约18:1至1:1。根据某些实施方式,所述碳水化合物与蛋白质的比例为约15:1至1:1。根据某些实施方式,所述碳水化合物与蛋白质的比例为约10:1至1:1。
与已知适合于饲养蝇幼虫的普通饲料组合物包括小鸡饲料、Gainesville家蝇饮食等中存在的蛋白质含量相比,本发明的饲料组合物的蛋白质含量更低。不希望受到任何特定理论或作用机制限制,所述低的蛋白质和高的碳水化合物与蛋白质比例可能有助于本发明的饲料组合物诱导假死的能力。
根据本发明的教导,可以使用与昆虫幼虫、特别是蝇幼虫、特别是BSF幼虫相容并且对蝇幼虫没有致死作用的任何食品级防腐剂以及化妆品级防腐剂。
根据某些实施方式,所述防腐剂选自对羟基苯甲酸酯、苯甲酸盐、丙酸或其盐(丙酸盐)、亚硫酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、山梨酸盐及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
食品级或化妆品级对羟基苯甲酸酯和/或丙酸和/或其盐是本发明的当前优选的示例性实施方式。
根据某些实施方式,所述至少一种防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯。
根据某些实施方式,所述至少一种防腐剂是丙酸。
根据某些示例性实施方式,所述饲料组合物包含防腐剂对羟基苯甲酸甲酯与丙酸的组合。
对羟基苯甲酸酯,即对羟基苯甲酸烷基酯,主要包括对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)和对羟基苯甲酸丙酯(PP),由于它们的广谱抗微生物作用和相对低的毒性、良好的稳定性和非挥发性,已在食品、制药、化妆品和工业产品中广泛用作防腐剂。
调查对羟基苯甲酸酯对作为无脊椎动物模式生物的黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)的作用的研究发现,单独的MP对果蝇的繁殖力和发育具有毒性作用,并且MP与EP的组合对黑腹果蝇的寿命和成虫前发育期具有潜在的累加毒性(Chen Q.等,2016.Journal of Insect Science 16(1):15;1-8)。Zha等人研究了MP作为添加到饲养幼虫的营养物中的抗真菌剂的作用,并显示出在蚜虫(Budworm)和彩绘夫人蝴蝶(PaintedLady Butterfly)幼虫中对含有高浓度MP的饮食的接受度降低(Zha C.和Cohen AC.,2014.Entomology,Ornithology&Herpetology 3(1):120)。
根据某些实施方式,所述对羟基苯甲酸酯选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸苄酯、其盐及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些示例性实施方式,所述对羟基苯甲酸酯是对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐。
本发明的饲料组合物可以作为预混干燥组合物提供,其在使用前需要用水性溶液、特别是水进行水化,或者作为包含所述水性溶液的即用型组合物提供。
根据某些实施方式,所述干燥预混饲料组合物中所述至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂的含量以所述组合物的总干重计为约0.2%至约10%w/w。根据某些实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合的含量以所述组合物的总干重计为约0.5%至8.5%w/w。根据某些实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合的含量以所述组合物的总干重计为约1%至5%w/w。
根据某些实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合以所述组合物总重量的约0.01%至约10%的量添加到所述配制成即用型的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合以所述组合物总重量的约0.01%至约6.5%的量添加到所述配制成即用型的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合的量以所述组合物的总重量计为0.10%至3%w/w。根据某些示例性实施方式,所述防腐剂或防腐剂的组合以所述组合物总重量的约0.10%至约0.15%w/w的量添加到所述饲料组合物。
当本发明的饲料组合物是干燥形式时,将所述干燥预混物在使用前用水性溶液水化。据某些实施方式,水化用水性溶液在约70℃至约100℃的温度下形成。所述水性溶液的温度将取决于胶凝剂,以便获得半固体或固体凝胶形式的所述水化饲料组合物。根据某些实施方式,所述干燥组合物用水性溶液在90℃-100℃温度下的沸腾条件下水化。
对羟基苯甲酸酯在水性溶液中的溶解性不佳。因此,当所述防腐剂或防腐剂的组合包含对羟基苯甲酸酯、特别是对羟基苯甲酸甲酯时,所述干燥饲料组合物不含对羟基苯甲酸酯。根据这些实施方式,将所述干燥预混物用水性溶液在约70℃至约100℃、通常约100℃的温度下水化;然后将得到的溶液冷却至低于70℃;并将通常溶解在有机溶剂中的对羟基苯甲酸酯添加到所述冷却的溶液中。
根据某些实施方式,所述干燥预混饲料组合物中所述至少一种胶凝剂的含量以所述组合物的总干重计为约1%至约30%w/w。根据某些实施方式,所述干燥预混饲料组合物中所述至少一种胶凝剂的含量以所述组合物的总干重计为约1%至约20%w/w。根据某些实施方式,所述干燥预混饲料组合物中所述至少一种胶凝剂的含量以所述组合物的总干重计为约1%至约10%w/w。
根据某些实施方式,所述胶凝剂以所述湿组合物的总重量计约0.1%至约5%的量添加到所述配制成即用型的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述胶凝剂以所述湿组合物的总重量计约约0.1%至约3%的量添加到所述配制成即用型的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述胶凝剂的量以所述组合物的总重量计为约0.3%至约1.5%w/w。根据某些示例性实施方式,所述胶凝剂的量以所述湿组合物的总重量计为约0.5%w/w。
可用于获得半固体或固体培养基的胶凝剂在本领域中是已知的。根据某些实施方式,所述胶凝剂选自琼脂、琼脂糖、藻酸盐、卡拉胶、阿拉伯胶、茄替胶、黄芪胶、结冷胶、黄原胶、果胶、瓜尔胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素和刺槐豆胶。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些示例性实施方式,所述胶凝剂是琼脂。
根据某些实施方式,所述碳水化合物和蛋白质的来源选自植物源性粉、全酵母制剂、酵母提取物、糖蜜及其任何组合。
根据某些实施方式,所述至少一种碳水化合物是可溶性碳水化合物。根据某些实施方式,所述至少一种可溶性碳水化合物选自糖蜜、蔗糖、红糖、淀粉、蜂蜜、果糖及其任何组合。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据某些实施方式,所述可溶性碳水化合物是糖蜜。根据某些实施方式,所述可溶性碳水化合物是红糖。
糖蜜通常从甘蔗或甜菜制造。糖蜜由于植物的年份和提取方法可能含有不同量的糖。从其他来源制造的糖蜜也可以与本发明的组合物和方法一起使用。根据某些实施方式,所述诱导假死的饲料组合物含有糖蜜。正如本领域技术人员已知的,各种不同的糖蜜类型可用于所述饲料组合物,包括但不限于硫化糖蜜、未硫化糖蜜、浅色糖蜜、深色糖蜜或赤糖糊(blackstrap molasses)。根据某些示例性实施方式,根据本发明的教导使用的糖蜜是未硫化甘蔗糖蜜。根据某些实施方式,所述充当碳水化合物和蛋白质来源的至少一种糖蜜类型以所述饲料组合物的总干重或湿重的约5%至约20%的含量添加到所述配制成干燥预混组合物或即用型组合物的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述至少一种糖蜜的量以所述饲料组合物的总干重或湿重计为约7.5%至约15%w/w。
根据某些实施方式,所述植物源性粉从选自玉米、小麦、黑麦、橡子、燕麦、杏仁、苋菜、香蕉、豆、冠米、荞麦、木薯(cassava)、栗子、chuno、椰子、咖啡、玉米面(cornmeal)、糯米、大麻、牧豆树(mesquite)、坚果、豌豆粉或豌豆、花生、马铃薯淀粉、水稻、高粱、木薯粉、画眉草、大豆、竹芋(arrowroot)、芋头、香蒲、橡子、树薯(manioc)、藜麦的植物和其他磨碎的谷物、根、豆类、坚果或种子及其任何组合获得。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
根据某些实施方式,所述饲料组合物包含玉米粉。根据某些实施方式,所述饲料组合物包含小麦粉。
根据某些实施方式,所述至少一种粉以所述组合物的总湿重计约1%至约20%w/w的含量添加到所述配制成即用型组合物的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述至少一种粉的含量以所述组合物的总湿重计为约1%至约10%w/w。根据某些示例性实施方式,所述至少一种粉的含量以所述组合物的总湿重计为约2.5%至约7.5%w/w。
根据某些实施方式,所述至少一种粉以所述组合物的干重计约10%至约95%w/w的含量添加到所述配制成干燥预混组合物的饲料组合物中。根据某些实施方式,所述至少一种粉的含量以所述组合物的干重计为约20%至约80%w/w。根据某些示例性实施方式,所述至少一种粉的含量以所述组合物的干重计为约50%至约70%w/w。
根据某些实施方式,所述饲料组合物包含酵母。根据本发明的教导,可以使用被批准用于人类食用的任何酵母。根据某些当前的示例性实施方式,所述酵母是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。根据某些实施方式,所述酵母是巴氏酵母(Saccharomycespastorianus)。根据其他实施方式,所述酵母是压缩酵母。根据某些实施方式,所述酵母选自奶油酵母、速溶酵母、快速发酵酵母、灭活干酵母及其任何组合。每种可能性代表本发明的不同实施方式。根据某些示例性实施方式,所述酵母是灭活干酵母。
根据某些实施方式,所述配制成即用型组合物的饲料组合物中的干酵母含量以所述组合物的总湿重计为约0.5%至约10%w/w。根据某些示例性实施方式,所述干酵母含量以所述组合物的总湿重计为约0.5%至约5%w/w。根据某些示例性实施方式,所述干酵母含量以所述组合物的总湿重计为约0.5%至约2%w/w。
根据某些实施方式,所述配制成干燥预混组合物的饲料组合物中的干酵母含量以所述组合物的干重计为约1%至约40%w/w。根据某些示例性实施方式,所述干酵母含量以所述组合物的总湿重计为约5%至约30%w/w。根据某些示例性实施方式,所述干酵母含量以所述组合物的干重计为约5%至约15%w/w。
根据某些示例性实施方式,所述碳水化合物和蛋白质的来源包括至少一种糖蜜类型、玉米面(corn meal)和酵母提取物的组合。根据某些示例性实施方式,所述配制成即用型组合物的饲料组合物中所述碳水化合物和蛋白质源的含量以所述饲料组合物的总湿重计为约8%至约65%。根据某些示例性实施方式,所述配制成干燥预混组合物的饲料组合物中所述碳水化合物和蛋白质源的含量以所述饲料组合物的总湿重计为约50%至约99%。
根据某些实施方式,所述配制成即用型组合物的饲料组合物包含高含量的水性溶液,其中所述饲料组合物不含液相。根据某些示例性实施方式,所述水性溶液是水。根据某些实施方式,所述饲料组合物包含以所述组合物的总湿重计浓度为至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%或至少90%w/w的水性溶液。
根据另一方面,本发明提供了一种用于在蝇新生幼虫中诱导假死状态的方法,包括将蝇卵和/或幼虫放置在诱导假死的饲料组合物上,所述组合物包含昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂。
所述诱导假死的饲料组合物如上文中所述。
根据某些实施方式,所述方法包括将多个卵和/或新生幼虫放置在所述饲料组合物上。根据这些实施方式,所述幼虫以约50至约5000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。根据某些实施方式,所述幼虫以约100至约3000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。根据某些示例性实施方式,所述幼虫以约500至约2000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。根据某些实施方式,所述多个卵以使幼虫密度达到约50至约5000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。根据某些示例性实施方式,所述卵以使幼虫密度达到约100至约3000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。根据某些示例性实施方式,所述卵以使幼虫密度达到约500至约1500-2000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。
根据某些实施方式,达到所需的幼虫密度包括以与所述所需幼虫密度相比高出约10%的密度放置蝇卵。例如,达到5,000个幼虫/cm2饲料组合物的幼虫密度包括以5,500个卵/cm2饲料组合物的密度放置卵。
根据某些实施方式,所述被诱导到假死状态的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少一周。根据某些实施方式,所述诱导出假死的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少14天。根据某些实施方式,所述诱导出假死的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少三周。根据某些实施方式,所述诱导出假死的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少4周。根据某些实施方式,所述诱导出假死的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少8周。根据某些实施方式,所述诱导出假死的幼虫当被放置在诱导假死的饲料组合物上时保持存活至少10周、至少11周、至少12周、至少15周或至少20周。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
根据某些实施方式,用诱导假死的饲料组合物饲养的新生幼虫,特别是蝇新生幼虫,示例性实施方式是BSF幼虫,保持存活至少7天、至少10天、至少15天、至少20天、至少25天或至少30天、至少40天、至少45天、至少50天、至少55天、至少60天、至少65天、至少70天、至少75天、至少80天、至少85天、至少90天、至少95天、至少100天、至少110天、至少120天、至少130天或长达约至少140天。每种可能性代表本发明的独立实施方式。根据其他实施方式,所述用假死饲料饲养的新生幼虫保持存活并处于一龄发育阶段。
根据某些实施方式,用诱导假死的饲料组合物饲养的蝇新生幼虫对变化的气候条件不太敏感。根据某些示例性实施方式,所述用饲料组合物饲养的蝇新生幼虫对环境低温表现出提高的抵抗力。
根据某些实施方式,所述幼虫环境温度为约4℃至约35℃。应该理解,正如上文中所定义的,幼虫环境温度是指幼虫的环境温度,其可以是当幼虫放置在开放表面上时的空气温度、其中放置幼虫的容器内测量到的温度,或幼虫放置在其中的开放表面上或容器内的温箱的温度。根据某些实施方式,在由本发明的饲料组合物诱导的假死状态期间所述幼虫环境温度是恒定的。根据某些实施方式,所述幼虫环境温度为约10℃至约30℃。根据某些示例性实施方式,所述幼虫环境温度为约22℃至30℃。
根据某些实施方式,在由本发明的饲料组合物诱导的假死状态期间所述幼虫环境温度是变化的。根据这些实施方式,所述幼虫环境温度在孵化后约0天至约2天、孵化后约0天至约4天或孵化后约0天至孵化后约7天的第一生长期时为约20℃至约30℃;并且随后在直至幼虫达到所需尺寸的第二生长期时为约4℃至约30℃。
根据另一方面,本发明提供了一种用于运输和/或储存有益蝇幼虫的系统,所述系统包含:容器;包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂的诱导假死的饲料组合物;和多个新生幼虫。
所述诱导假死的组合物如上文中所述。
根据某些实施方式,所述系统适合于将所述有益蝇幼虫在存活状态下储存约7天至约20周。根据某些实施方式,所述系统适合于将所述有益蝇幼虫在存活状态下储存约14天至约16周、约21天至约12周或约30天至约10周。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
具有任何形状的任何容器可以与本发明的系统一起使用,只要所述容器允许容器与其周围环境之间的气体交换,同时限制从所述饲料组合物的湿气蒸发即可。根据某些实施方式,所述容器包含至少一个由至少部分穿孔的材料构成的壁。
根据某些示例性实施方式,所述系统包含容器,所述容器包含平底完整壁和在容器顶部的由至少部分穿孔的材料构成的壁。根据这些实施方式,所述系统包含容器,所述容器包含在容器底部的诱导假死的饲料组合物,在所述饲料顶上的新生幼虫和/或卵,足以容纳氧气和相对均匀的湿度的空隙体积,以及由至少部分穿孔的材料构成的顶壁。
提供下述实施例是为了更全面地说明本发明的某些实施方式。然而,它们决不应该被解释为限制本发明的广泛范围。本领域技术人员可以容易地设计出本文公开的原理的许多变化和修改,而不背离本发明的范围。
实施例
实施例1诱导假死的饲料组合物
示例性的诱导假死状态的饲料组合物的成分包括琼脂、玉米粉、干酵母、糖蜜、对羟基苯甲酸甲酯、丙酸和水。
所述组合物如下制备:
1.将琼脂(约0.5%w/w)、玉米粉(6.5%w/w)和95%的水(最终水含量为约83%w/w)合并并煮沸10min。在另一个示例性组合物中,最终的水组成为约42%w/w(例如在图4中)
2.添加糖蜜(约9%w/w),并将组合物搅拌5min。
3.添加酵母(干酵母,约1%w/w)。
4.将组合物的温度降低到65℃,并添加其余的水。
5.添加对羟基苯甲酸甲酯(约0.1-0.15%w/w)和丙酸(液体形式,约0.4%w/w)。
然后将所述组合物分发到带有能够进行气体交换并防止幼虫离开的盖子的生长箱中(5x5x10cm塑料瓶,带有高密度醋酸纤维素盖子)。所述组合物中的总蛋白质含量以干物质计为约8%。
实施例2:在黑水虻(BSF)的幼虫中诱导假死
在产卵后立即和直至产卵后12h收集BSF胚胎。将胚胎在30℃和>80%湿度下温育。直至孵化后4-8h,对新生幼虫(小幼虫)进行计数(每个实验25,000个),并移入含有40ml如上文实施例1中所述制备的诱导假死的饲料组合物的瓶子中。将所述瓶子放置到设置为22-25℃65%湿度的培养箱/加热板中。将具有相近数量的新生幼虫的另一个样品用作对照,最初在包含基于含有约40-50%蛋白质(来自干物质)的大豆粉的植物粉混合物的固体组合物上生长4天,然后转移到小鸡饲料上生长。所述对照幼虫在30℃和65%湿度下生长。
在4天(对于在普通饲料上生长的幼虫)或14天(对于在诱导假死的饲料组合物上生长的幼虫)后,将幼虫以及残留的饲料转移到装有0.5kg湿小鸡饲料(18.5%蛋白质,Tadmir Israel)的箱子中5-7天,并保持在28℃、60%湿度下。随后,将幼虫以及残留的饲料转移到更大的箱子中,在两轮饲料中添加6kg湿小鸡饲料(18.5%蛋白质,Tadmir Israel)。8-10天后,当所述幼虫达到5龄期时,收获幼虫并计数。对照幼虫除了第一次的0.5kg饲料外,经历了相同的程序。
图1示出了放置并生长在标准固体饲料组合物(图1A)和本发明的诱导假死状态的饲料组合物(图1B)上的幼虫。正如清楚地证实的,在本发明的组合物上生长的幼虫的生长被阻止,而在标准饲料上饲养的幼虫显示出显著生长。
图2示出了生长曲线,其呈现了如上所述在对照饲料上生长的幼虫和如上所述在本发明的诱导假死的饲料组合物上生长14天然后转移到标准小鸡饲料上继续生长的幼虫的平均幼虫长度。该图证实了由本发明的饲料组合物诱导的假死状态是可逆的:在转移到标准饲料后9天内,幼虫重新获得生长并达到与仅在标准饲料上生长的幼虫相近的平均长度。
图3、4和5进一步证实假死状态的诱导是可逆的,并且一旦将所述幼虫转移到标准固体饲料上生长时,所述幼虫表现出与在整个生长期中在标准固体饲料(小鸡饲料)上生长的幼虫相当的五龄期存活率(图3A、图4A和图5A)和平均体重(图3B、图4B和图5B)。在图3中,幼虫假死步骤维持在25℃下,并且假死饲料含有约83%的水。在图4中,幼虫假死步骤维持在22℃下,并且假死饲料含有约83%的水。在图5中,幼虫假死步骤维持在25℃下,并且假死饲料含有约42%的水。图6示出了在诱导假死的饲料组合物上生长的幼虫(图6,图像的顶部)和在常规饲料上生长的幼虫(底部)的代表性图片。
上述具体实施方式的描述如此充分地揭示了本发明的一般性质,使得其他人可以通过应用当前知识容易地修改和/或改编这些具体实施方式以适应于各种不同应用,而不需过多实验并且不背离一般概念,因此,这样的改编和修改应该并且旨在被理解为在所公开的实施方式的等同物的含义和范围之内。应该理解,本文中使用的短语或术语是出于描述而非限制的目的。在不背离本发明的情况下,用于执行各种不同的公开功能的装置、材料和步骤可以采用各种不同的可替代形式。
Claims (63)
1.一种用于在蝇新生幼虫中诱导假死状态的饲料组合物,其包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂。
2.权利要求1所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物包含至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或至少一种它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。
3.权利要求2所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物中的碳水化合物与蛋白质的比例为约18:1至约1:1。
4.权利要求1-3中的任一项所述的饲料组合物,其中所述昆虫幼虫相容性防腐剂选自食品级防腐剂、化妆品级防腐剂及其组合。
5.权利要求4所述的饲料组合物,其中所述食品级或化妆品级防腐剂选自对羟基苯甲酸酯、丙酸、苯甲酸盐、亚硫酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、山梨酸盐、其盐及其任何组合。
6.权利要求5所述的饲料组合物,其中所述食品级或化妆品级防腐剂是对羟基苯甲酸酯或其盐。
7.权利要求6所述的饲料组合物,其中所述对羟基苯甲酸酯选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸庚酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸苄酯、其盐及其任何组合。
8.权利要求7所述的饲料组合物,其中所述对羟基苯甲酸酯是对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐。
9.权利要求5所述的饲料组合物,其中所述食品级或化妆品级防腐剂是丙酸或其盐。
10.权利要求5所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物包含对羟基苯甲酸甲酯和/或其盐和丙酸和/或其盐。
11.权利要求1-10中的任一项所述的饲料组合物,其中所述至少一种胶凝剂选自琼脂、琼脂糖、藻酸盐、卡拉胶、阿拉伯胶、茄替胶、黄芪胶、结冷胶、黄原胶、果胶、瓜尔胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、刺槐豆胶及其任何组合。
12.权利要求11所述的饲料组合物,其中所述胶凝剂是琼脂。
13.权利要求2-12中的任一项所述的饲料组合物,其中所述蛋白质和/或碳水化合物的来源选自至少一种植物源性粉、全酵母制剂、酵母提取物、糖蜜及其任何组合。
14.权利要求13所述的饲料组合物,其中所述植物源性粉从选自玉米、小麦、黑麦、大豆、燕麦的植物及其任何组合获得。
15.权利要求2-12中的任一项所述的饲料组合物,其中所述至少一种碳水化合物是可溶性碳水化合物。
16.权利要求15所述的饲料组合物,其中所述可溶性碳水化合物选自糖蜜、蔗糖、红糖、淀粉、蜂蜜、果糖及其任何组合。
17.权利要求1-16中的任一项所述的饲料组合物,所述饲料组合物包含选自对羟基苯甲酸甲酯、丙酸及其盐的至少一种防腐剂、至少一种胶凝剂、至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。
18.权利要求17所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物包含对羟基苯甲酸甲酯和/或丙酸和/或其盐、琼脂、玉米粉(corn flour)、干酵母和糖蜜。
19.权利要求17-18中的任一项所述的饲料组合物,其中所述碳水化合物与蛋白质的比例为10:1。
20.权利要求1-19中的任一项所述的饲料组合物,所述饲料组合物是预混干燥组合物的形式。
21.权利要求20所述的饲料组合物,其中所述组合物包含以所述组合物的干重计约1%至约30%w/w的量的所述至少一种胶凝剂。
22.权利要求21所述的饲料组合物,所述组合物包含以所述组合物的干重计约0.2%至约10%w/w的量的所述至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂。
23.权利要求1-19中的任一项所述的饲料组合物,所述饲料组合物是包含水性溶液的即用型组合物的形式。
24.权利要求23所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物是不含液相的半固体或固体凝胶的形式。
25.权利要求23-24中的任一项所述的饲料组合物,其中所述组合物包含以所述组合物的湿重计约0.1%至约3%w/w的量的所述至少一种胶凝剂。
26.权利要求25所述的饲料组合物,其中所述组合物包含以所述组合物的湿重计约0.01%至约10%w/w的量的所述至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂。
27.权利要求23-26中的任一项所述的饲料组合物,其中所述水性溶液的含量以所述组合物的湿重计为约35%至约90%w/w。
28.权利要求27所述的饲料组合物,其中所述水性溶液是水。
29.权利要求1-28中的任一项所述的饲料组合物,其中所述饲料组合物在摄食所述饲料组合物的蝇幼虫上诱导可逆的假死状态。
30.权利要求29所述的饲料组合物,其中在将摄食所述组合物的蝇幼虫转移到普通饲养饲料后,所述幼虫达到与在其整个发育过程中在所述普通饲料上饲养的相应幼虫的尺寸和功能相当的尺寸和功能。
31.权利要求29-30所述的饲料组合物,其中所述蝇幼虫来自于Hermetia illucens(黑水虻)。
32.一种在蝇新生幼虫中诱导假死状态的方法,所述方法包括将蝇卵和/或新生幼虫放置在诱导假死状态的饲料组合物上,所述组合物包含至少一种昆虫幼虫相容性防腐剂和至少一种胶凝剂,其中所述饲料组合物是以所述组合物的湿重计含有至少35%w/w的水性溶液的半固体或固体凝胶的形式,从而在所述幼虫中诱导假死状态。
33.权利要求32所述的方法,其中所述饲料组合物包含至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或至少一种它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。
34.权利要求32-33中的任一项所述的方法,其中所述昆虫幼虫相容性防腐剂选自食品级防腐剂、化妆品级防腐剂及其组合。
35.权利要求34所述的方法,其中所述食品级或化妆品级防腐剂选自对羟基苯甲酸酯、丙酸、苯甲酸盐、亚硫酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、山梨酸盐、其盐及其任何组合。
36.权利要求35所述的方法,其中所述食品级或化妆品级防腐剂是对羟基苯甲酸酯或其盐。
37.权利要求34所述的方法,其中所述食品级或化妆品级防腐剂是丙酸或其盐。
38.权利要求32-37中的任一项所述的方法,其中所述至少一种胶凝剂选自琼脂、琼脂糖、藻酸盐、卡拉胶、阿拉伯胶、茄替胶、黄芪胶、结冷胶、黄原胶、果胶、瓜尔胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、刺槐豆胶及其任何组合。
39.权利要求38所述的方法,其中所述胶凝剂是琼脂。
40.权利要求32-39中的任一项所述的方法,其中所述饲料组合物包含选自对羟基苯甲酸甲酯、丙酸及其盐的至少一种防腐剂、至少一种胶凝剂、至少一种碳水化合物和至少一种蛋白质或它们的来源,其中所述蛋白质的含量以所述组合物的干重计为至多20%w/w。
41.权利要求32-40中的任一项所述的方法,其中所述蝇卵和/或幼虫来自于Hermetiaillucens(黑水虻)。
42.权利要求32-41中的任一项所述的方法,其中所述放置在饲料组合物上的幼虫处于一龄发育阶段。
43.权利要求32-41中的任一项所述的方法,其中在孵化后即刻至孵化后约24h的时间段内将所述幼虫放置在所述饲料组合物上。
44.权利要求43所述的方法,其中在孵化后即刻至孵化后约12h的时间段内将所述幼虫放置在所述饲料组合物上。
45.权利要求32-44中的任一项所述的方法,其中所述幼虫摄食所述饲料组合物。
46.权利要求45所述的方法,其中所述诱导假死状态的饲料组合物是所述新生幼虫的唯一营养来源。
47.权利要求32-46中的任一项所述的方法,其中所述幼虫的环境温度为约4℃至约35℃。
48.权利要求47所述的方法,其中所述幼虫只要放置在所述饲料组合物上即可在所述假死阶段保持存活。
49.权利要求48所述的方法,其中所述幼虫以一龄至四龄期之间的某个龄期特有的尺寸保持存活。
50.权利要求48-49中的任一项所述的方法,其中所述幼虫在假死状态下保持存活至少一周。
51.权利要求50所述的方法,其中所述幼虫在假死状态下保持存活至少2周、4周、至少8周或至少10周。
52.权利要求32-51中的任一项所述的方法,其中在将所述幼虫从所述诱导假死状态的饲料组合物转移到普通饲养饲料后,所述幼虫在整个剩余的幼虫阶段中正常发育。
53.权利要求52所述的方法,其中将所述幼虫在普通饲养饲料上生长以达到五龄期。
54.权利要求32-53中的任一项所述的方法,所述方法包括将多个蝇卵和/或幼虫放置在所述诱导假死的饲料组合物上。
55.权利要求54所述的方法,其中所述幼虫以约50至约5000个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。
56.权利要求54所述的方法,其中所述卵以约55至约5500个幼虫/cm2饲料组合物的密度放置。
57.多个幼虫,其通过权利要求54-56中的任一项所述的方法生产。
58.一种用于运输和储存有益蝇幼虫的系统,包含容器、根据权利要求1-29中的任一项所述的诱导假死的饲料组合物和多个新生蝇幼虫。
59.权利要求58所述的系统,其中所述系统当保持在约4℃至约35℃的温度下时适合于将所述有益蝇幼虫储存约7天至约20周。
60.权利要求58-59中的任一项所述的系统,其中将所述饲料组合物和所述多个新生幼虫放置在所述容器内。
61.权利要求58-60中的任一项所述的系统,其中所述系统的容器包含至少一个能够与环境进行气体交换的壁。
62.权利要求61所述的系统,其中所述能够与环境进行气体交换的壁由至少部分穿孔的材料构成。
63.权利要求62所述的系统,其中所述系统包含容器,所述容器具有放置在容器底部的诱导假死的饲料组合物,在所述饲料组合物顶上的新生幼虫,足以容纳氧气和相对均匀的湿气的空隙体积,以及由至少部分穿孔的材料构成的顶壁。
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