CN115177580A - 一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 - Google Patents
一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115177580A CN115177580A CN202210502558.4A CN202210502558A CN115177580A CN 115177580 A CN115177580 A CN 115177580A CN 202210502558 A CN202210502558 A CN 202210502558A CN 115177580 A CN115177580 A CN 115177580A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- temperature
- solution
- curcumin
- gel
- sensitive hydrogel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 title claims abstract description 236
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims abstract description 149
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 title claims abstract description 118
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 title claims abstract description 118
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 title claims abstract description 118
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 118
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims abstract description 145
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 132
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 72
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 70
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 58
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 claims abstract description 36
- 229940044476 poloxamer 407 Drugs 0.000 claims abstract description 36
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims abstract description 35
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims abstract description 35
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 52
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 45
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims description 40
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 40
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims description 40
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 30
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 20
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 19
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 19
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 17
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 claims description 17
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 13
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 claims description 8
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 claims description 8
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 6
- 239000005457 ice water Substances 0.000 claims description 6
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 abstract description 27
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 26
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 abstract description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 36
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 5
- 238000009529 body temperature measurement Methods 0.000 description 4
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000032798 delamination Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000013173 literature analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/12—Ketones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N11/00—Investigating flow properties of materials, e.g. viscosity, plasticity; Analysing materials by determining flow properties
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备及评价方法，涉及一种水凝胶的制备及评价方法。本发明以泊洛沙姆407（P407）与泊洛沙姆188（P188）为原料，得到温度敏感型水凝胶的最优处方为：每制成5ml的空白凝胶溶液需21.4%的P407溶液3.705ml，5%的P188溶液1.295ml，并通过荷载模型药物姜黄素来对制作的水凝胶进行了初步的评价。该处方具有较为合适的胶凝温度、胶凝时间、酸碱度等，同时其性质也较为稳定，是一种适于局部注射来治疗肿瘤的良好药物载。
Description
技术领域
本发明涉及一种医用水凝胶的制备及评价方法，特别是涉及一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备及评价方法。
背景技术
历年来临床上积累的各种资料显示，肿瘤的发病率与致死率近年来仍在处于不断增加的状态，而肿瘤这种疾病作为人类一生中一种会严重威胁到人类健康与生命的重大疾病，目前针对于它的治疗手段仍旧是人类最常用的化疗方式，但是通过跟踪一些经过化疗治疗的病人的数据显示，这种治疗方式对于人体内的肿瘤组织选择性较差，并且长时间的化疗，那些恶性肿瘤组织会对化疗药物产生耐药性，使得化疗效果大大削弱，甚至于无效。因此，一种能够避免这些现状发生的新的治疗方式亟待被发掘。
选择合适的药物能够有效的对肿瘤组织进行抑制，而选择适宜的给药剂型在保证药物有效利用的同时，也能方便病人的使用和保证病人的安全是药物治疗上的关键所在。凝胶剂(gels)是一种新的药物剂型，其给药途径广泛，包括经皮、眼用、鼻用、口腔、阴道、直肠和注射等，在临床应用中具有广阔的前景，根据所用基质的不同可分为水性基质的凝胶剂与油性基质的凝胶剂。2020版《中国药典》中明确指出，凝胶剂是指原料药与能形成凝胶的辅料制成的具有凝胶特性的稠厚液体或半固体制剂。在肿瘤治疗过程中，为充分运用肿瘤组织的特殊环境，制备出各种环境响应型的水凝胶在未来的肿瘤治疗当中具有极其重要的意义。
温度敏感型水凝胶是一种基于肿瘤组织微环境而设计出的一种新型给药方式，这种新的药物递送方式在肿瘤治疗当中具有易于修饰、载药量高、稳定性好、稠度小利于药物的释放等多种优势，因此这种新的给药途径的更成熟的研究能够给肿瘤治疗带来福音。
泊洛沙姆，也称普兰尼克，为聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，被广泛用于制备温敏型水凝胶的一种材料。大多数设计中，普兰尼克在纳米医学上报道主要是通过包载疏水性小分子抗癌药物，此外，也有一些通过酯键连接的前药制剂被开发。然而，由于流体剪切力作用，传统的物理包封常常极易导致药物泄露在血液循环中，这将会降低药物利用度同时带来负面效应。此外，酯键连接的药物易组装进粒子内部，断裂位点难以有效地同相关酶接触，从而导致缓慢的药物释放。更重要的是，普兰尼克外部亲水的PEO链还会阻碍粒子进入细胞，导致胞内药物水平更低，最终影响化疗效果。
姜黄素作为一种天然药物，在应用于肿瘤治疗的过程中，具有许多的缺点：其水溶性较低，疏水性较强，在制剂过程中会遇到许多的问题；生物利用率较低，口服不易吸收；半衰期较短，在体内的抗肿瘤活性偏低等。因此，如何制备出一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶，使其具有较为合适的胶凝温度、胶凝时间、酸碱度，同时其性质也较为稳定，适用于局部注射，以实现姜黄素的缓释，从而提高治疗效果，是业内亟待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备及评价方法，本发明一方面提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，另一方面提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，应用于载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备；本发明制备的载姜黄素温度敏感型水凝胶具有较为合适的胶凝温度、胶凝时间、酸碱度，同时其性质也较为稳定，适用于局部注射，可实现姜黄素的缓释，从而提高治疗效果。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，包括：
称取5.35g泊洛沙姆407于烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆407完全溶解；
待泊洛沙姆407完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为21.4%的泊洛沙姆407溶液；
称取泊洛沙姆188 1.25g于25ml的烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆188完全溶解；
待泊洛沙姆188完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为5%的待泊洛沙姆188溶液；
将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液充分溶胀，最终得到澄清透明的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液；
用移液器分别量取21.4% 泊洛沙姆407溶液3.705ml、5% 待泊洛沙姆188溶液1.295ml置于西林瓶中，用磁力搅拌器搅拌15min，得到空白温度敏感型水凝胶溶液；
在西林瓶中加入姜黄素，磁力搅拌器搅拌15min，制得载姜黄素温度敏感型水凝胶。
所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，所述姜黄素的浓度为2.5mg/ml。
所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液充分溶胀，最终得到澄清透明的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188的步骤中，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液用保鲜膜密封置于4℃的冰箱中充分溶胀。
一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，所述评价方法包括胶凝温度的考察、胶凝时间的考察、凝胶pH值的考察以及凝胶稳定性的考察；
所述胶凝温度的考察包括：将装有配制好的空白温度敏感型水凝胶溶液的西林瓶放置于恒温水浴锅中，每隔两分钟升温1度，每隔30秒倾斜一次西林瓶，查看西林瓶中凝胶状态，待到西林瓶中凝胶溶液倒置30秒仍不流动时，该温度即为胶凝温度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝温度的平均值；
所述胶凝时间的考察包括：配置两个相同的空白温度敏感型水凝胶溶液和两个载姜黄素温度敏感型水凝胶，放置于25.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15分钟，保持相同的温度，随后立即放置于温度为37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中，并开始计时，到西林瓶中凝胶倒置30秒仍不流动时的时间即为胶凝时间，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝时间的平均值；
所述凝胶pH值的考察包括：制备空白水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，使用pH计分别测定两溶液的酸碱度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组酸碱度的平均值；
所述凝胶稳定性的考察包括：制备两份15ml的载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，将两溶液分别放置于25.0℃±0.3℃和37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15min，然后以2000r/min离心15min，观察是否存在分层不稳定现象。
所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，所述水凝胶的评价方法，包括载药凝胶含药量测定，所述载药凝胶含药量测定包括：
称取姜黄素粉末25mg置于烧杯中，加入0.25mol/L的NaOH溶液溶解，并用100ml的容量瓶定容，得到姜黄素对照液；分别量取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0ml之前配置好的姜黄素对照液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；以0.25mol/L的NaOH溶液为空白对照，在波长470nm处测定吸光度A，以稀释后姜黄素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，运用EXCEL软件作图，得到回归方程；
称取载姜黄素的温度敏感型水凝胶1.594g于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度，再量取5ml该溶液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；过滤后取滤液，在所选择的波长470nm测定吸光度A，带入回归方程，计算含量；
所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，所述水凝胶的评价方法，包括凝胶体外溶蚀时间的考察和凝胶体外溶蚀率的考察，所述凝胶体外溶蚀时间的考察包括：
将盛载有载姜黄素温度敏感型水凝胶的西林瓶进行称重，然后加入5g载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，放置于37.0℃±0.3℃的水浴恒温振荡器中静置10min成为凝胶状态；向凝胶中加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液，pH=6.5，作为释放介质；再放入水浴恒温振荡器中在37.0℃±0.3℃下以40r/min的速率进行振荡后倒出全部释放介质，再将西林瓶擦干水后进行称重，随后重新放入水浴恒温振荡器中静置10min，再加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液；按照以上方法反复操作，直至剩余凝胶量少于起始重量的10%为止；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组溶蚀率平均值；
W1：西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
Wt：剩余凝胶量少于起始重量的10%时西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
W0：西林瓶的重量。
所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，所述水凝胶的评价方法，包括凝胶黏度的考察，所述凝胶黏度的考察包括：将配置好的空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液分别放入25℃的水浴锅中保持15分钟，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶溶液用黏度计测定；然后再将空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液放入37℃的水浴锅中保持15分钟，使二者处于凝胶状态，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶用黏度计测定；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组凝胶黏度的平均值。
本发明的优点与效果是：
本发明提供的载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备及评价方法，以泊洛沙姆407与泊洛沙姆188为原料，制备了温度敏感型空白水凝胶，并通过荷载模型药物姜黄素来对制作的该水凝胶进行初步的评价。该种凝胶在载药时的胶凝温度为35.7℃，在局部注射给药治疗肿瘤时可以以液体的状态注入体内，以半固态或者固态形式存在于肿瘤组织部位，可延长给药时间，提升疗效。该种凝胶在载药时的胶凝时间为251s，能够使药物在病变部位的很小范围内释放药物，可提升疗效。该种凝胶载药前的pH值为7.15，载药后的pH值为7.13，酸碱度适宜，不会对人体内的内环境造成影响，不会产生刺激性。该种凝胶的稳定性较好，在注入体内的过程成不会使药物因受到种种因素的影响而未能大剂量的到达病灶处，从而达到预期的治疗效果。该种凝胶的包封率和载药量也较为适宜，不仅能够很好的包覆药物，并且其载药率完全满足肿瘤治疗的需要，是一种良好的药物载体。该凝胶的体外溶蚀时间与溶蚀率测定结果均表现良好，能够达到缓释的效果。该凝胶的黏度在体内与体外也较好，能够顺畅地注射到体内，且在体内的释药部位较为集中。综上，该种温度敏感型水凝胶的胶凝温度和时间适宜，酸碱性也符合，并且具有良好的载药性、稳定性、释药性等优点，十分适宜用于局部注射治疗肿瘤。
附图说明
图1为载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法流程图；
图2为X1、X2、X3与Y的三维效应面图；
图3为X1、X2与Y的二维等高线图；
图4为稀释后姜黄素紫外吸光度线性回归线。
具体实施方式
下面结合附图所示实施例对本发明进行详细说明。
实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。本发明提供了以下优选的实施例。
目前，利用化疗来对抗肿瘤是人们普遍认为最有效的方法，但这种方法有选择性差、可产生耐药等缺陷。本发明基于肿瘤组织微环境制备温度响应型可用于局部注射的水凝胶，它可根据环境温度的变化及时作出响应，实现溶液-凝胶之间的可逆性转变。使用的模型药物姜黄素作为一种天然药物，在应用于肿瘤治疗的过程中存在代谢快、生物利用度低的问题，本发明以高分子材料为基质，制成温度响应型水凝胶，该水凝胶作为一种缓释剂型，可实现姜黄素的缓释，从而提高治疗效果。
本发明制备出以泊洛沙姆407（Poloxamer 407，F127；以下简称P407）和泊洛沙姆188（Poloxamer 188，F68；以下简称P188）为凝胶基质的温度敏感型水凝胶，并以姜黄素为药物模型，考察该种凝胶的性能及药物在体外的释放行为。
如图1所示，本发明实施例提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，包括：
步骤一，称取5.35g泊洛沙姆407于烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆407完全溶解。
步骤二，待泊洛沙姆407完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为21.4%的泊洛沙姆407溶液。
步骤三，称取泊洛沙姆188 1.25g于25ml的烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆188完全溶解。
步骤四，待泊洛沙姆188完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为5%的待泊洛沙姆188溶液。
步骤五，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液充分溶胀，最终得到澄清透明的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液。
优选地，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液用保鲜膜密封置于4℃的冰箱中充分溶胀。
步骤六，用移液器分别量取21.4% 泊洛沙姆407溶液3.705ml、5% 待泊洛沙姆188溶液1.295ml置于西林瓶中，用磁力搅拌器搅拌15min，得到空白温度敏感型水凝胶溶液。
本发明具体通过以下方法，得到上述空白凝胶处方最优处方。
预实验方案。经查阅文献可以了解浓度为15%以上的P407可制备成凝胶，因此预实验主要是配置浓度为15%、18%、20%、21%、24%、25%的P407并对其进行温度的初步测定，选取出一个胶凝温度较为合适的P407浓度。因单独使用P407所制备的凝胶在使用过程中容易产生气泡，且为达到适宜温度所用P407浓度会过高，因此在P407基质中掺入适宜浓度的P188来克服P407的缺点，因此选择出合适的P407浓度，进而进行下一步的单因素实验。每个实验设置3个平行组，最终取其平均值。
单因素实验方案。
⑴ P188浓度变化的单因素实验方案
根据预实验所测定出的温度，确定一个较为适宜的P407浓度（21%），分别与浓度为1%、3%、4%、5%、6%、7%的P188以3：1的比例混合，测定胶凝温度。找出胶凝温度较为适宜的P188浓度，进而进行下一项单因素实验方案设计。每个实验设置3个平行组，最终取其平均值。
⑵ P407浓度变化的单因素实验方案
根据上一组单因素实验所测定出的胶凝温度，确定一个较为适宜的P188浓度（5%），分别与浓度为15%、18%、21%、24%的P407以1：3的比例混合，测定胶凝温度。通过以上两组单因素实验初步确定胶凝温度较为合适的P407与P188浓度组合，进而进行下一项单因素实验方案。每个实验设置3个平行组，最终取其平均值。
⑶ P188体积变化的单因素实验方案
由以上两组单因素实验方案可以确定出较好的P407与P188浓度组合（P407：21%；P188：5%），接下来的实验需要确定P407体积为3ml，变化P188的体积分别为0.60ml、0.75ml、1.00ml、1.20ml、1.50ml、2.00ml、3ml，将两者混合并测定出其胶凝温度。每个实验设置3个平行组，最终取其平均值。
⑷ P407体积变化的单因素实验方案
根据确定的P407与P188浓度组合（P407：21%；P188：5%），确定P188的体积为1ml不变，分别与体积为1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml的P407混合，并测定出胶凝温度。根据以上单因素实验，可初步确定出温度较为合适的凝胶溶液浓度与配比。每个实验设置3个平行组，最终取其平均值。
响应面法优化空白水凝胶的处方。本发明采用响应面法对空白水凝胶的制备处方进行优化。根据前期预实验与单因素实验的结果，可以知道存在三个对水凝胶的胶凝温度影响较大的因素，分别为：泊洛沙姆188的浓度（X1，%，g/ml），泊洛沙姆407的浓度（X2，%，g/ml），泊洛沙姆188的体积（X3，ml/5ml；因所制备的凝胶溶液体积固定，P407与P188体积呈线性关系，故本实验仅选择P188体积为第三个因素）；各元素的取值范围分别为：X1：20～22，X2：4～6，X3：1.15～1.35。以空白水凝胶的胶凝温度T（℃）为考察指标，运用Design-Expert10.0软件设计出实验方案。根据实验方案所得结果进行数据分析，通过软件得出效应面、等高线图及方程，通过软件预测分析即可得出最优处方，并将此最优处方进行验证。
具体实验结果如下：预实验的胶凝温度测定结果见表1，由预实验测定结果可知，21%的P407温度较为适宜，可用于下一步的单因素实验。且P407浓度在15%-24%的实验数据也具有较大的参考价值，可用于做响应面时P407浓度的参考范围。
表1 预实验胶凝温度测定结果表
单因素实验方案结果：P188浓度变化的单因素实验结果。根据预实验结果，将P407确定为21%测定分别与不同浓度的P188混合后的胶凝温度，其结果见表2，可以确定当P188浓度为5%时胶凝温度较好，可使用5%的P188进行下一步的单因素实验。且当P188浓度为4%-6%时的实验数据具有较大的参考价值，可用于做响应面时P188浓度的参考范围。
表2 P188 浓度变化的单因素实验结果表
P407浓度变化的单因素实验结果：根据上一个单因素实验的结果，确定P188的浓度为5%，测定分别于不同浓度的P407混合后的胶凝温度，其结果见表3，可以初步确定21%的P407与5%的P188以3：1的比例混合较为适宜。
表3 P407 浓度变化的单因素实验结果表
P188体积变化的单因素实验结果：通过以上实验可知，21%的P407与5%的P188混合温度较为适宜，可通过改变体积比来测定不同配比对胶凝温度的影响。首先确定21%的P407体积为3ml，改变5%的P188的体积，测定其胶凝温度，其结果见表4，可以知道体积比为1：3时其胶凝温度较为适宜。
表4 P188体积变化的单因素实验结果表
P407体积变化的单因素实验结果：该单因素实验确定5%的P188溶液体积为1ml，改变21%的P407溶液的体积，测定胶凝温度，其结果见表5，可以知道体积比为1：3时其胶凝温度较为适宜。
表5 P407体积变化的单因素实验结果表
响应面法优化空白水凝胶处方结果：根据空白温度敏感型水凝胶的制备的凝胶制备方法，制备空白的温度敏感型水凝胶，并测定出通过Design-Expert 10.0软件设计的15组实验的胶凝温度，试验安排及结果见表6。
表6 响应面法设计的试验安排及结果表
根据实验结果，运用软件分析可得凝胶温度公式：
；然后将数据输入软件得出三维效应面见图2，二维等高线见图3，由图2可得出：当固定P407的浓度时，胶凝温度随P188浓度的增加而呈现先升高后降低的趋势；当固定P188浓度时，胶凝温度随P407浓度的增加而降低。根据此次研究温度敏感型水凝胶的用途，用于治疗人体内肿瘤的水凝胶胶凝温度应为35.0℃≤T≤37.0℃，并让其尽量趋近于37.0摄氏度，经软件分析可知空白凝胶的最优处方见表7。
表7 温度敏感型空白水凝胶的最优处方
处方验证结果：根据软件预测出的最优处方，配置出相应的凝胶溶液并在磁力搅拌锅中搅拌15min，然后对胶凝温度进行测定，其结果见表8。
表8 空白水凝胶处方验证结果表
步骤七，在西林瓶中加入姜黄素，磁力搅拌器搅拌15min，制得载姜黄素温度敏感型水凝胶。
优选地，所述姜黄素的浓度为2.5mg/ml。上述空白温度敏感型水凝胶的制备的方法制备出空白凝胶后，在西林瓶中加入所需量的姜黄素，磁力搅拌器搅拌15min，即可制得载姜黄素温度敏感型水凝胶。通过查阅文献，将姜黄素含量设置5个浓度梯度，分别为：1.5mg/ml、2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml、3.5mg/ml。通过对凝胶温度等方面的考察并结合参考文献给定数据来确定最佳载药量。
最优载药量确定：按照设计的试验方案，将设计的五个浓度梯度的载药凝胶进行胶凝温度的测定，其结果见表9。根据测定结果，并结合文献分析可知，当载药量浓度为2.5mg/ml时，其胶凝温度较为适宜，且据文献记载该浓度下姜黄素对于肿瘤组织的抑制效果也最好，因此，确定最佳载药浓度为2.5mg/ml。
表9 不同载药量测定结果表
本发明通过制备出不同浓度的P407和P188溶液，然后配置不同浓度的P407和P188不同配比的混合溶液，并运用响应面法设计出多组实验，根据已有数据运用软件推测出最优的空白凝胶处方，并对该最优处方进行验证，并得以应用。本发明运用的药物模型为姜黄素，对于姜黄素的浓度的确定主要通过查阅文献以及对所制备的载药凝胶进行表征，最终确定最佳的载药浓度。经研究，最终得到载姜黄素温度敏感型水凝胶的最优处方为：每制成5ml的空白凝胶溶液需21.4%的P407溶液3.705ml，5%的P188溶液1.295ml，姜黄素浓度为2.5mg/ml。该处方具有较为合适的胶凝温度、胶凝时间、酸碱度等，同时其性质也较为稳定，是一种适宜的可用于局部注射的良好药物载体。
本发明还提供一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，应用于以上所述的载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，包括：胶凝温度的考察、胶凝时间的考察、凝胶pH值的考察以及凝胶稳定性的考察；其中，所述胶凝温度的考察包括：将装有配制好的空白温度敏感型水凝胶溶液的西林瓶放置于恒温水浴锅中，每隔两分钟升温1度，每隔30秒倾斜一次西林瓶，查看西林瓶中凝胶状态，待到西林瓶中凝胶溶液倒置30秒仍不流动时，该温度即为胶凝温度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝温度的平均值。
所述胶凝时间的考察包括：配置两个相同的空白温度敏感型水凝胶溶液和两个载姜黄素温度敏感型水凝胶，放置于25.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15分钟，保持相同的温度，随后立即放置于温度为37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中，并开始计时，到西林瓶中凝胶倒置30秒仍不流动时的时间即为胶凝时间，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝时间的平均值。
所述凝胶pH值的考察包括：制备空白水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，使用pH计分别测定两溶液的酸碱度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组酸碱度的平均值。
所述凝胶稳定性的考察包括：制备两份15ml的载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，将两溶液分别放置于25.0℃±0.3℃和37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15min，然后以2000r/min离心15min，观察是否存在分层不稳定现象。
进一步地，所述方法还包括载药凝胶含药量测定，所述载药凝胶含药量测定包括：
称取姜黄素粉末25mg置于烧杯中，加入0.25mol/L的NaOH溶液溶解，并用100ml的容量瓶定容，得到姜黄素对照液；分别量取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0ml之前配置好的姜黄素对照液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；以0.25mol/L的NaOH溶液为空白对照，在波长470nm处测定吸光度A，以稀释后姜黄素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，运用EXCEL软件作图，得到回归方程。
称取载姜黄素的温度敏感型水凝胶1.594g于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度，再量取5ml该溶液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；过滤后取滤液，在所选择的波长470nm测定吸光度A，带入回归方程，计算含量；
进一步地，所述方法还包括凝胶体外溶蚀时间的考察和凝胶体外溶蚀率的考察，所述凝胶体外溶蚀时间的考察包括：
将盛载有载姜黄素温度敏感型水凝胶的西林瓶进行称重，然后加入5g载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，放置于37.0℃±0.3℃的水浴恒温振荡器中静置10min成为凝胶状态；向凝胶中加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液，pH=6.5，作为释放介质；再放入水浴恒温振荡器中在37.0℃±0.3℃下以40r/min的速率进行振荡后倒出全部释放介质，再将西林瓶擦干水后进行称重，随后重新放入水浴恒温振荡器中静置10min，再加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液；按照以上方法反复操作，直至剩余凝胶量少于起始重量的10%为止；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组溶蚀率平均值；
W1：西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
Wt：剩余凝胶量少于起始重量的10%时西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
W0：西林瓶的重量。
进一步地，所述方法还包括凝胶黏度的考察，所述凝胶黏度的考察包括：
将配置好的空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液分别放入25℃的水浴锅中保持15分钟，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶溶液用黏度计测定；然后再将空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液放入37℃的水浴锅中保持15分钟，使二者处于凝胶状态，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶用黏度计测定；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组凝胶黏度的平均值。
本发明在得出最优处方后对该处方的胶凝温度、胶凝时间、凝胶溶液的pH值、凝胶的稳定性、体外溶蚀时间和载药后的包封率、含药量等进行测定，对该凝胶进行初步的评价，具体评价结果如下。
胶凝温度的测定结果：根据实验方案，本实验测定了一个空白温敏水凝胶的胶凝温度，一个载姜黄素温敏水凝胶的胶凝温度，其测定结果见表10，载药前后的水凝胶均在37℃时呈现为凝胶状态，适合人体使用。
表10 胶凝温度测定结果表
胶凝时间测定结果：根据实验方案，本实验测定了一个空白温敏水凝胶的胶凝时间，一个载姜黄素温敏水凝胶的胶凝时间，其测定结果见表11，胶凝时间均较为合适，可是药物在注射部位的小范围内释放，不会因长时间未呈凝胶状态而流往他处，使得药物达不到预期疗效。
表11 胶凝时间测定结果表
凝胶pH测定结果：根据实验方案，本实验测定了一个空白温敏水凝胶的pH，一个载姜黄素温敏水凝胶的pH，其测定结果见表12，通过表中数据可知，所制作的水凝胶载药前后的酸碱度均适宜用于人体局部注射治疗肿瘤，不会对人体产生刺激。
表12 凝胶pH测定结果表
凝胶稳定性测定结果：凝胶的稳定性测定结果中可见均为出现分层现象，说明该凝胶在正常储存过程及注入体内时候时的稳定性均表现良好，因此可用作药物载体。
含药量的测定结果：采用酶标仪测定得到的各浓度的紫外吸光度见表13，根据数据表所得到的回归线见图4，其回归方程为：
，其线性范围为0.0025~0.02mg/ml。在470nm波长下测得载姜黄素温度敏感型水凝胶的紫外吸光度为0.608，代入回归方程得姜黄素浓度为0.0056mg/ml，故水凝胶中姜黄素的量为2.8mg，根据公式计算得载药率为0.18%，包封率为76.2%。针对于肿瘤的治疗，其药物能够达到所要求的量，且其包封率良好，适宜局部注射给药。
表13稀释后姜黄素紫外吸光度测定表
凝胶体外溶蚀时间、溶蚀度的考察结果：根据凝胶体外溶蚀时间、溶蚀率的考察测定体外溶蚀时间与溶蚀度的结果见表14，载姜黄素温度敏感型水凝胶的体外溶蚀时间为6.28h，溶蚀率为92.18%，可以证明，该水凝胶在人体内注射后药物的作用时间较长，能够达到缓释的效果。
表14 载药水凝胶体外溶蚀时间、溶蚀度考察结果表
凝胶黏度的考察结果：根据凝胶粘度的考察的方法测定凝胶的黏度，胶凝前凝胶黏度的考察结果见表15，胶凝后凝胶黏度的考察结果见表16。结果表明，所制备的水凝胶其在室温下有良好的流动性，能够保证顺畅的注入体内；在体内其黏度较大，能够保证药物仅在肿瘤组织的局部进行释放。
表15 胶凝前凝胶黏度的考察结果表（单位：mPa.s）
表16 胶凝后凝胶黏度的考察结果表（单位：mPa.s）
综上所述，本实验主要是以泊洛沙姆407与泊洛沙姆188为原料，制备了温度敏感型空白水凝胶，并通过荷载模型药物姜黄素来对制作的该水凝胶进行初步的评价。该种凝胶在载药时的胶凝温度为35.7℃，在局部注射给药治疗肿瘤时可以以液体的状态注入体内，以半固态或者固态形式存在于肿瘤组织部位，可延长给药时间，提升疗效。该种凝胶在载药时的胶凝时间为251s，能够使药物在病变部位的很小范围内释放药物，可提升疗效。该种凝胶载药前的pH值为7.15，载药后的pH值为7.13，酸碱度适宜，不会对人体内的内环境造成影响，不会产生刺激性。该种凝胶的稳定性较好，在注入体内的过程成不会使药物因受到种种因素的影响而未能大剂量的到达病灶处，从而达到预期的治疗效果。该种凝胶的包封率和载药量也较为适宜，不仅能够很好的包覆药物，并且其载药率完全满足肿瘤治疗的需要，是一种良好的药物载体。该凝胶的体外溶蚀时间与溶蚀率测定结果均表现良好，能够达到缓释的效果。该凝胶的黏度在体内与体外也较好，能够顺畅地注射到体内，且在体内的释药部位较为集中。综上，该种温度敏感型水凝胶的胶凝温度和时间适宜，酸碱性也符合，并且具有良好的载药性、稳定性、释药性等优点，十分适宜用于局部注射治疗肿瘤。
以上仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，其特征在于，包括：
称取5.35g泊洛沙姆407于烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆407完全溶解；
待泊洛沙姆407完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为21.4%的泊洛沙姆407溶液；
称取泊洛沙姆188 1.25g于25ml的烧杯中，并加入蒸馏水，在冰水浴中搅拌，使泊洛沙姆188完全溶解；
待泊洛沙姆188完全溶解后，置于25ml的容量瓶中定容，得到浓度为5%的待泊洛沙姆188溶液；
将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液充分溶胀，最终得到澄清透明的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液；
用移液器分别量取21.4% 泊洛沙姆407溶液3.705ml、5% 待泊洛沙姆188溶液1.295ml置于西林瓶中，用磁力搅拌器搅拌15min，得到空白温度敏感型水凝胶溶液；
在西林瓶中加入姜黄素，磁力搅拌器搅拌15min，制得载姜黄素温度敏感型水凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，其特征在于，所述姜黄素的浓度为2.5mg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法，其特征在于，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液充分溶胀，最终得到澄清透明的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188的步骤中，将配置好的泊洛沙姆407溶液、待泊洛沙姆188溶液用保鲜膜密封置于4℃的冰箱中充分溶胀。
4.一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，其特征在于，所述评价方法包括胶凝温度的考察、胶凝时间的考察、凝胶pH值的考察以及凝胶稳定性的考察；
所述胶凝温度的考察包括：将装有配制好的空白温度敏感型水凝胶溶液的西林瓶放置于恒温水浴锅中，每隔两分钟升温1度，每隔30秒倾斜一次西林瓶，查看西林瓶中凝胶状态，待到西林瓶中凝胶溶液倒置30秒仍不流动时，该温度即为胶凝温度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝温度的平均值；
所述胶凝时间的考察包括：配置两个相同的空白温度敏感型水凝胶溶液和两个载姜黄素温度敏感型水凝胶，放置于25.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15分钟，保持相同的温度，随后立即放置于温度为37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中，并开始计时，到西林瓶中凝胶倒置30秒仍不流动时的时间即为胶凝时间，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组胶凝时间的平均值；
所述凝胶pH值的考察包括：制备空白水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，使用pH计分别测定两溶液的酸碱度，每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组酸碱度的平均值；
所述凝胶稳定性的考察包括：制备两份15ml的载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，将两溶液分别放置于25.0℃±0.3℃和37.0℃±0.3℃的恒温水浴锅中静置15min，然后以2000r/min离心15min，观察是否存在分层不稳定现象。
5.根据权利要求4所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，其特征在于，所述水凝胶的评价方法，包括载药凝胶含药量测定，所述载药凝胶含药量测定包括：
称取姜黄素粉末25mg置于烧杯中，加入0.25mol/L的NaOH溶液溶解，并用100ml的容量瓶定容，得到姜黄素对照液；分别量取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0ml之前配置好的姜黄素对照液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；以0.25mol/L的NaOH溶液为空白对照，在波长470nm处测定吸光度A，以稀释后姜黄素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，运用EXCEL软件作图，得到回归方程；
称取载姜黄素的温度敏感型水凝胶1.594g于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度，再量取5ml该溶液于50ml的容量瓶中，用0.25mol/L的NaOH溶液定容至刻度；过滤后取滤液，在所选择的波长470nm测定吸光度A，带入回归方程，计算含量；
6.根据权利要求4所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，其特征在于，所述水凝胶的评价方法，包括凝胶体外溶蚀时间的考察和凝胶体外溶蚀率的考察，所述凝胶体外溶蚀时间的考察包括：
将盛载有载姜黄素温度敏感型水凝胶的西林瓶进行称重，然后加入5g载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液，放置于37.0℃±0.3℃的水浴恒温振荡器中静置10min成为凝胶状态；向凝胶中加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液，pH=6.5，作为释放介质；再放入水浴恒温振荡器中在37.0℃±0.3℃下以40r/min的速率进行振荡后倒出全部释放介质，再将西林瓶擦干水后进行称重，随后重新放入水浴恒温振荡器中静置10min，再加入1ml温度为37℃的磷酸盐缓冲溶液；按照以上方法反复操作，直至剩余凝胶量少于起始重量的10%为止；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组溶蚀率平均值；
W1：西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
Wt：剩余凝胶量少于起始重量的10%时西林瓶与瓶中载姜黄素温度敏感型水凝胶的总重量；
W0：西林瓶的重量。
7.根据权利要求4所述的一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的评价方法，其特征在于，所述水凝胶的评价方法，包括凝胶黏度的考察，所述凝胶黏度的考察包括：将配置好的空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液分别放入25℃的水浴锅中保持15分钟，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶溶液用黏度计测定；然后再将空白温度敏感型水凝胶溶液与载姜黄素温度敏感型水凝胶溶液放入37℃的水浴锅中保持15分钟，使二者处于凝胶状态，调整黏度计零点，控制凝胶的温度，将两凝胶用黏度计测定；每个实验设置3个平行组，最终取3个平行组凝胶黏度的平均值。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210502558.4A CN115177580A (zh) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | 一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210502558.4A CN115177580A (zh) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | 一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115177580A true CN115177580A (zh) | 2022-10-14 |
Family
ID=83514217
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210502558.4A Pending CN115177580A (zh) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | 一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115177580A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116115557A (zh) * | 2023-02-03 | 2023-05-16 | 安徽农业大学 | 一种常山酮温敏凝胶复合物及其制备方法与应用 |
| CN117159445A (zh) * | 2023-01-28 | 2023-12-05 | 济宁医学院 | 一种姜黄素纳米乳温敏水凝胶的制备方法及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102406594A (zh) * | 2011-12-02 | 2012-04-11 | 常州市第一人民医院 | 一种姜黄素鼻用凝胶剂及其制备方法和应用 |
| US20190192430A1 (en) * | 2015-09-16 | 2019-06-27 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Gelling compositions for treating malignant tumours and/or preventing tumour recurrence |
| CN111759800A (zh) * | 2020-08-14 | 2020-10-13 | 广东海洋大学 | 一种姜黄素包合物温敏性凝胶及其制备方法与应用 |
| CN113456580A (zh) * | 2021-07-21 | 2021-10-01 | 沈阳化工大学 | 一种白藜芦醇原位凝胶制备及其表征方法 |
| CN113633608A (zh) * | 2021-08-26 | 2021-11-12 | 辽宁万嘉医药科技有限公司 | 一种抗hpv病毒多酚缓释脂质纳米粒凝胶及其制备方法 |
-
2022
- 2022-05-10 CN CN202210502558.4A patent/CN115177580A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102406594A (zh) * | 2011-12-02 | 2012-04-11 | 常州市第一人民医院 | 一种姜黄素鼻用凝胶剂及其制备方法和应用 |
| US20190192430A1 (en) * | 2015-09-16 | 2019-06-27 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Gelling compositions for treating malignant tumours and/or preventing tumour recurrence |
| CN111759800A (zh) * | 2020-08-14 | 2020-10-13 | 广东海洋大学 | 一种姜黄素包合物温敏性凝胶及其制备方法与应用 |
| CN113456580A (zh) * | 2021-07-21 | 2021-10-01 | 沈阳化工大学 | 一种白藜芦醇原位凝胶制备及其表征方法 |
| CN113633608A (zh) * | 2021-08-26 | 2021-11-12 | 辽宁万嘉医药科技有限公司 | 一种抗hpv病毒多酚缓释脂质纳米粒凝胶及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 别海燕等: "星点设计-响应面法优化盐酸氮卓斯汀温敏型原位凝胶滴眼液处方", 《中国新药杂志》, vol. 25, no. 8, 31 December 2016 (2016-12-31), pages 954 - 960 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117159445A (zh) * | 2023-01-28 | 2023-12-05 | 济宁医学院 | 一种姜黄素纳米乳温敏水凝胶的制备方法及其应用 |
| CN116115557A (zh) * | 2023-02-03 | 2023-05-16 | 安徽农业大学 | 一种常山酮温敏凝胶复合物及其制备方法与应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115177580A (zh) | 一种医用载姜黄素温度敏感型水凝胶的制备方法 | |
| Liu et al. | In vivo retention of poloxamer-based in situ hydrogels for vaginal application in mouse and rat models | |
| CN101342142B (zh) | 一种可注射的温敏原位凝胶制剂,它们的制备方法及其应用 | |
| CN103405773B (zh) | 一种可生物降解的温敏性原位水凝胶的制备与应用 | |
| Cheng et al. | Development of a dual drug-loaded hydrogel delivery system for enhanced cancer therapy: in situ formation, degradation and synergistic antitumor efficiency | |
| CA2640997C (en) | Doxorubicin formulations for anti-cancer use | |
| CN109316440B (zh) | 一种温敏性液晶纳米水凝胶及其制备方法与应用 | |
| CN105878177B (zh) | 美沙拉嗪温敏凝胶灌肠液及其制备方法 | |
| CN102670577B (zh) | 一种光敏剂组合物、其使用方法及用途 | |
| CN107823126B (zh) | 双醋瑞因注射型温敏凝胶及其制备方法 | |
| TWI227143B (en) | In situ gel formation for ophthalmic delivery by combining Pluronic/Carbopol medic composition and its preparing method | |
| Liu et al. | Metal-organic framework-based injectable in situ gel for multi-responsive insulin delivery | |
| CN103251551A (zh) | 一种可注射性氧化石墨烯/石墨烯复合水凝胶及其制备方法 | |
| CN103272239B (zh) | 一种氧化石墨烯复合水凝胶药物载体 | |
| Almeida et al. | Influence of drug incorporation, temperature and storage time on the pH, textural and rheological properties of different poloxamer hydrogels | |
| CN113456580B (zh) | 一种白藜芦醇原位凝胶制备及其表征方法 | |
| CN114369259A (zh) | 一种pH可解离温敏性水凝胶、制备方法及其应用 | |
| CN101816777B (zh) | 新颖的博安霉素组合物及其制备方法 | |
| Salehi et al. | In situ forming thermosensitive vaginal hydrogels containing curcumin-loaded polymeric nanoparticles with their sustained release: rheological measurements and cytotoxicity effect on cervix cancer cell | |
| CN105902485B (zh) | 一种去甲斑蝥素注射用温敏型原位凝胶制剂及其制备方法和应用 | |
| Guzálin et al. | Gelatine gels and polyoxyethylene-polyoxypropylene gels: Comparative study of their properties | |
| Li et al. | Hypoglycemic effect of insulin-loaded hydrogel-nanogel composite on streptozotocin-induced diabetic rats | |
| Vineetha et al. | Investigation of a biodegradable injectable in situ gelling implantable system of rivastigmine tartrate | |
| Sun et al. | A combined therapy of rtPA-loaded thermoresponsive gels and ultrasound on hematoma in a rat model of intracerebral hemorrhage | |
| Bagul et al. | Optimization and Evaluation of in Situ Nasal Gel of Memantine Hydrochloride for Alzheimer’s Disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |