CN115137017B - 一种植物精油饲料添加剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于混合型饲料添加剂技术领域，提供了一种植物精油饲料添加剂及其应用。该植物精油饲料添加剂，由精油和辅料组成，通过调节精油各成分百里香酚、肉桂醛和香芹酚的不同组成配比，最终实现了在抑制致病菌生长的同时对益生菌生长没有显著影响、增强肠道对营养物质的吸收等多重效果，从而达到调节肠道内菌群平衡作用。
Description
技术领域
本发明属于混合型饲料添加剂技术领域，具体涉及一种植物精油饲料添加剂及其应 用。
背景技术
近年来，抗生素在畜牧业中滥用的问题尤为严重，人们越来越担心抗药性细菌通过食 物链传播和扩散，许多国家限制甚至禁止使用抗生素作为饲料添加剂，目前已实现全面禁 抗的国家有瑞典、丹麦、欧盟等国家，预示着寻找开发新型、绿色、安全、高效的抗生素替代品已成大势所趋。
植物提取物(植物精油)、有机酸、饲料酶和/或微生物制剂等替抗产品在动物饲料中 得到了很好的应用。其中，植物精油作为抗生素替代品，具有抗菌、抗真菌和抗病毒的作用，可降低肠道致病菌数量；改善饲料风味和适口性，增加采食量，提高体重；增加唾液 和消化酶活性，促进饲料消化吸收；提高肠道上皮细胞再生绒毛能力，增强肠道吸收，在饲料添加剂领域应用前景具有较大潜力。
肠道菌群是一个由益生菌、条件致病菌和病原菌组成的复杂微生态系统，其微生物种 类超过1000种。其中益生菌主要有乳杆菌和双歧杆菌等，大肠埃希氏菌属是肠道最为常见 的引起腹泻的致病菌，肠道的病原菌还包括通过食用外界霉变的食物而进入肠道的霉菌，其中常见的有黄曲霉。
众多资料显示，根据植物精油的抑菌机理可知其对任何微生物都会起到抑制作用，但 是不同活性成分的植物精油对微生物的抑制强度都不一样。因此，通过植物精油间协同增 效可能有助于寻找出在抑制致病菌生长的同时对益生菌生长没有显著影响的复配植物精 油，从而能达到抗生素调节肠道内菌群平衡作用。
目前，有关植物精油对益生菌生长影响的研究少有报道，文献1：吴克刚等，8种植物 精油对肠道常见微生物体外抑菌效果的研究，现代食品科技，2017，33(6)，133-141， 公开了肉桂油、牛至油、百里香油、茶树油、桉叶油、薄荷油、迷迭香油和茴香油等8种 不同活性成分的植物精油对常见肠道微生物的抑菌效果，并在研究将抑菌效果最好的肉桂油、牛至油和百里香油进行复配时，发现整体抑菌效果最好的是肉桂-牛至复配组合，其对 肠道致病菌的抑制作用全表现出相加作用(FICI≤0.75)，而对肠道益生菌的生长却没有影响(FICI＝1)，同时还分析了植物精油的化学组成成分，肉桂精油主要含52.17％肉桂醛，牛至精油主要含51.73％香芹酚，还有1.89％百里香酚等，为开发新型绿色、安全、高效的抗生素替代品提供理论依据。
目前，市面上销售的植物精油饲料添加剂产品，大部分会过度抑菌，同时将猪体内的 益生菌也抑制了，还会影响猪体内益生菌的丰度，会出现肠道不健康，营养吸收不好等问 题，从而最终导致猪的生长发育不好。因此在饲料添加剂的实际生产中，还需要开发出切实可行的精油配方产品，来满足市场需要。
发明内容
本发明目的在于，针对现有技术的缺陷，提供了一种用于改善猪肠道菌群微环境的植 物精油饲料添加剂，该植物精油饲料添加剂一方面能有效抑制肠道致病菌，特别是在有效 抑制肠道致病菌的同时还不影响肠道益生菌的生长，甚至还可以通过使肠道有益菌种类更丰富、致病菌种类减少，增强了肠道对营养物质的吸收。该植物精油饲料添加剂，通过调 节各精油成分的用量，达到调节肠道内菌群平衡的效果，保证了饲料添加剂产品的有效性 与安全性。
为实现本发明目的，采用以下技术方案：
首先，本发明的一个目的是提供一种能有效抑制肠道致病菌的植物精油饲料添加剂A。
该植物精油饲料添加剂A，含有质量比为0.7-1.6：5-20：5-20的百里香酚、肉桂醛和香 芹酚。
进一步地，该植物精油饲料添加剂A，由精油和辅料组成，包括如下质量百分含量的组 分：0.7％-1.6％百里香酚、5％-20％肉桂醛和5％-20％香芹酚，余量为辅料。
优选地，本发明的另一个目的是提供一种能有效抑制肠道致病菌的同时还不影响肠道 益生菌的生长的植物精油饲料添加剂B。
该植物精油饲料添加剂B，含有质量比为0.75-1.5：5-15：5-13的百里香酚、肉桂醛和香 芹酚。
进一步地，该植物精油饲料添加剂B，由精油和辅料组成，包括如下质量百分含量的组 分：0.75％-1.5％百里香酚、5％-15％肉桂醛和5％-13％香芹酚，余量为辅料。
优选地，本发明的另一个目的是提供一种通过升高肠道有益菌相对丰度、降低肠道致 病菌相对丰度，使得肠道有益菌种类更丰富、致病菌种类减少，从而增强了肠道对营养物 质的吸收，并同时抑制了致病菌的植物精油饲料添加剂C。
该植物精油饲料添加剂C，含有质量比为0.7-1.0：5-10：5-9的百里香酚、肉桂醛和香芹 酚。
进一步地，该植物精油饲料添加剂C，由精油和辅料组成，包括如下质量百分含量的组 分：0.7％-1.0％百里香酚、5％-10％肉桂醛和5％-9％香芹酚，余量为辅料。
更优选地，本发明的另一个目的是提供一种能有效抑制肠道致病菌的同时还不影响肠 道益生菌的生长，并且通过使肠道有益菌种类更丰富、致病菌种类减少，增强了肠道对营 养物质的吸收，同时抑制了致病菌的植物精油饲料添加剂D。
该植物精油饲料添加剂D，含有质量比为0.75-1.0：5-10：5-9的百里香酚、肉桂醛和香 芹酚。
进一步地，该植物精油饲料添加剂D，由精油和辅料组成，包括如下质量百分含量的组 分：0.75％-1.0％百里香酚、5％-10％肉桂醛和5％-9％香芹酚，余量为辅料。
更优选地，上述植物精油饲料添加剂D中所含百里香酚、肉桂醛和香芹酚的质量比为 0.85-1.0：8-10：6-9。
更进一步地，上述植物精油饲料添加剂D，由精油和辅料组成，包括如下质量百分含量 的组分：0.85％-1.0％百里香酚、8％-10％肉桂醛和6％-9％香芹酚，余量为辅料。
本发明还提供了上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D在制备改善猪肠道菌群微环境的饲料中的应用。
进一步地，本发明还提供了上述植物精油饲料添加剂A在制备有效抑制肠道致病菌的饲 料中的应用。
进一步地，本发明还提供了上述植物精油饲料添加剂B在制备有效抑制肠道致病菌、同 时不影响肠道益生菌生长的饲料中的应用。
进一步地，本发明还提供了上述植物精油饲料添加剂C在制备使肠道有益菌相对丰度升 高、致病菌相对丰度降低的饲料中的应用。
进一步地，本发明还提供了上述植物精油饲料添加剂D在制备能有效抑制肠道致病菌、 不影响肠道益生菌生长、使肠道有益菌相对丰度升高且致病菌相对丰度降低的饲料中的应 用。
更进一步地，在上述这些应用中，所述饲料的制备是在基础饲料中添加0.5kg/T-5kg/T 的饲料添加剂，更优选的是添加1kg/T的饲料添加剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，所述的辅料为淀粉、二氧化硅、 碳酸钙、微晶纤维素、聚乙二醇-6000、吐温-80、丙二醇、纯化水、单硬脂酸甘油酯、阿拉伯胶、明胶、壳聚糖、冰醋酸、氢氧化钠中三种及以上的任意组合。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，可以是颗粒剂、乳剂、包衣颗 粒、微囊等各种剂型。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，可以是采用干法、湿法、高速搅 拌等方法制备为常规颗粒剂，也可以是采用乳化工艺、包被工艺、微囊工艺制备为乳剂、 包衣颗粒、微囊等多种新型制剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为颗粒剂，所述辅料包含 吸附剂和填充剂，更进一步地，辅料还包含粘合剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为颗粒剂，所述辅料包含 质量比6％-34.2％吸附剂和49.85％-59.60％填充剂，或者所述辅料包含质量比20％吸附剂、49.25％填充剂和20％粘合剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为颗粒剂，所述吸附剂为 碳酸钙，所述填充剂为淀粉、二氧化硅和微晶纤维素中的至少两种，所述粘合剂为聚乙二 醇-6000。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为颗粒剂，所述辅料包含 质量比17.2％-34.2％碳酸钙、41.85％-50.3％淀粉和5.5％-12％二氧化硅，或者所述辅料包含质 量比6％-13.8％碳酸钙、15.5％-31.3％淀粉、15.4％-21.4％二氧化硅和10％-15.5％微晶纤维 素，或者所述辅料包含质量比20％碳酸钙、44.25％淀粉、5％二氧化硅和20％聚乙二醇- 6000。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂D，其剂型为颗粒剂，所述辅料包含质量比34.0％- 34.2％碳酸钙、41.85％-45.65％淀粉和5.5％-8％二氧化硅，或者所述辅料包含质量比20％碳酸 钙、44.25％淀粉、5％二氧化硅和20％聚乙二醇-6000。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为乳剂，所述辅料包含乳 化剂、助表面活性剂和溶剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为乳剂，所述辅料包含质 量比10％-15％乳化剂、9％-15％助表面活性剂和31.4％-63.2％溶剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为乳剂，所述乳化剂为吐温-80，助表面活性剂为丙二醇，溶剂为纯化水。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为乳剂，所述辅料包含质 量比10％-15％吐温-80、9％-15％丙二醇和31.4％-63.2％纯化水。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含填充剂、吸附剂和包衣材料。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含质量比52.1％填充剂、27％吸附剂和3％包衣材料。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述填充剂 为淀粉和二氧化硅，吸附剂为碳酸钙，包衣材料为羟丙基纤维素。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含质量比43.1％淀粉、9％二氧化硅、27％碳酸钙和3％羟丙基纤维素。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含填充剂和包衣材料。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含质量比69.5％填充剂和3％包衣材料。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述填充剂 为淀粉和二氧化硅，包衣材料为聚乙二醇-6000。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为包衣颗粒，所述辅料包 含质量比54.9％淀粉、14.6％二氧化硅和3％聚乙二醇-6000。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含乳 化剂和壁材。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含质 量比25.4％乳化剂和54.6％壁材。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述乳化剂为单 硬脂酸甘油酯，壁材为阿拉伯胶和明胶。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含质 量比25.4％单硬脂酸甘油酯、27.5％阿拉伯胶和27.1％明胶。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含吸 附剂、填充剂、壁材和pH调节剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含质 量比37％吸附剂、35.8％填充剂、2％壁材和3％pH调节剂。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述吸附剂为碳 酸钙，填充剂为二氧化硅和淀粉，壁材为壳聚糖，pH调节剂为冰醋酸和氢氧化钠。
进一步地，上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D，其剂型为微囊，所述辅料包含质 量比37％碳酸钙、11％二氧化硅、24.8％淀粉、2％壳聚糖、1％冰醋酸和2％氢氧化钠。
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.75 | 0.75％ |
| 肉桂醛 | 5 | 5％ |
| 香芹酚 | 5 | 5％ |
| 淀粉 | 44.25 | 44.25％ |
| 二氧化硅 | 5 | 5％ |
| 碳酸钙 | 20 | 20％ |
| 聚乙二醇-6000 | 20 | 20％ |
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.85 | 0.85％ |
| 肉桂醛 | 8 | 8％ |
| 香芹酚 | 6 | 6％ |
| 淀粉 | 45.65 | 45.65％ |
| 二氧化硅 | 5.5 | 5.50％ |
| 碳酸钙 | 34 | 34％ |
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.95 | 0.95％ |
| 肉桂醛 | 7 | 7％ |
| 香芹酚 | 8 | 8％ |
| 淀粉 | 41.85 | 41.85％ |
| 二氧化硅 | 8 | 8％ |
| 碳酸钙 | 34.2 | 34.20％ |
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.8 | 0.80％ |
| 肉桂醛 | 9 | 9％ |
| 香芹酚 | 8 | 8％ |
| 吐温-80 | 10 | 10％ |
| 丙二醇 | 9 | 9％ |
| 纯化水 | 加至100kg | 63.20％ |
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.9 | 0.90％ |
| 肉桂醛 | 8 | 8％ |
| 香芹酚 | 9 | 9％ |
| 羟丙基纤维素 | 3 | 3％ |
| 碳酸钙 | 27 | 27％ |
| 淀粉 | 43.1 | 43.10％ |
| 二氧化硅 | 9 | 9％ |
上述植物精油饲料添加剂的优选实施例，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.0 | 1.0％ |
| 肉桂醛 | 10 | 10％ |
| 香芹酚 | 9 | 9％ |
| 单硬脂酸甘油酯 | 25.4 | 25.4％ |
| 阿拉伯胶 | 27.5 | 27.5％ |
| 明胶 | 27.1 | 27.1％ |
本发明的另一个目的是提供将上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D制成颗粒剂、乳剂、包被颗粒、微囊的制备方法。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将淀粉、二氧化硅、聚乙二醇-6000和碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取5％-6％配方量的淀粉，加入少量温水打散，然后加入开水，边加边搅拌，搅 拌至淀粉糊化为止，制成含量为18％的淀粉浆，降温至30℃左右，备用；
(2)向槽混机中加入配方量二氧化硅，然后加入百里香酚、香芹酚和肉桂醛，搅拌20 分钟，然后加入配方量的碳酸钙搅拌均匀；
(3)将剩余淀粉加入槽式混合机中，混合15-20分钟，加入淀粉浆制得合适的软材，制粒，得到合适湿颗粒；
(4)将制得的湿颗粒置于流化床干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至 室温，即得植物精油饲料添加剂。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取配方量的淀粉、二氧化硅与碳酸钙，加入高速湿法制粒机中，搅拌至均匀，约15-20分钟；
(2)向高速湿法制粒机中加入配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，搅拌均匀，加入 适量纯化水，搅拌约20-30分钟，得到适宜的湿颗粒；
(3)将湿颗粒置于流化床中干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至室温，即得植物精油饲料添加剂。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D乳剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将配方量的百里香酚、肉桂醛、香芹酚混合均匀，加入配方量的吐温-80，搅拌均匀；
(2)加入配方量的丙二醇，搅拌均匀后加入纯化水至全量。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D包衣颗粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)将包衣材料溶于水中，制成包衣液备用；
(2)称取配方量的淀粉、二氧化硅加入槽混机中，混合15-20分钟，然后将配方量的百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入槽混机中，搅拌20-30分钟，过摇摆制粒机，制粒；
(3)将步骤(2)所得湿颗粒加入沸腾造粒机中，按配方量包衣，干燥，即得植物精油饲料添加剂。
更具体地，上述包衣颗粒制备方法的步骤一制备包衣液，是将羟丙基纤维素溶于纯化 水中制成3％的包衣液备用，或者是将聚乙二醇6000溶于14kg热水(60℃以上)中，搅拌至完全溶解，配置成5％聚乙二醇6000溶液备用。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D微囊的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取配方量的单硬脂酸甘油酯、阿拉伯胶和明胶，加热搅拌至完全融化；
(2)称取配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，加入步骤(1)所得融化的辅料中，高速均质乳化30-40分钟；
(3)将混合均匀的物料冷却至50-60℃，喷雾干燥，即得植物精油饲料添加剂。
一种上述植物精油饲料添加剂A、B、C、D微囊的制备方法，包括以下步骤：
(1)将配方量的壳聚糖溶于纯化水中，加入冰醋酸，搅拌至完全溶解；
(2)将配方量的百里香酚、香芹酚、肉桂醛溶于壳聚糖溶液中，搅拌均匀；
(3)将氢氧化钠溶于纯化水中，开启搅拌，然后将步骤(2)所得溶液加入氢氧化钠溶液中，搅拌20-30分钟；
(4)过滤，洗涤沉淀，加入配方量的二氧化硅、淀粉和碳酸钙，混合均匀，制粒，即得植物精油饲料添加剂。
发明效果：
采用上述技术方案，本发明实现的有益效果如下：
(1)本发明通过筛选百里香酚、香芹酚和肉桂醛三种精油的用量配比：0.7％-1.6％百 里香酚、5％-20％肉桂醛和5％-20％香芹酚，获得了对致病菌大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌 极佳的抑制作用，比单一使用百里香酚、香芹酚、肉桂醛或者两两组合使用的MIC明显降 低，抑菌效果显著。
(2)本发明通过筛选百里香酚、香芹酚和肉桂醛三种精油的用量配比：0.75％-1.5％百 里香酚、5％-15％肉桂醛和5％-13％香芹酚，达到了能有效抑制肠道致病菌的同时还不影响 肠道益生菌的生长。
(3)本发明通过筛选百里香酚、香芹酚和肉桂醛三种精油的用量配比：0.7％-1.0％百 里香酚、5％-10％肉桂醛和5％-9％香芹酚，实现了通过使肠道有益菌种类更丰富、致病菌种 类减少，增强了肠道对营养物质的吸收，同时抑制致病菌的效果。
(4)本发明通过筛选百里香酚、香芹酚和肉桂醛三种精油的用量配比：0.75％-1.0％百 里香酚、5％-10％肉桂醛和5％-9％香芹酚，实现了最优效果，有效抑制肠道致病菌、不影响 肠道益生菌生长、升高肠道有益菌相对丰度并降低致病菌相对丰度，从而提高了自身免疫 力，增强了肠道对营养物质的吸收，对仔猪和育肥猪的生长均很有帮助。其中，更优选的范围是0.85％-1.0％百里香酚、8％-10％肉桂醛和6％-9％香芹酚。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明，但只是用于帮助理解本发明，使 本领域专业技术人员能够实现或使用本发明，不对本发明构成任何限制。
实施例1
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅、聚乙二醇-6000和碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是由干法制备的颗粒剂。
实施例2
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.85 | 0.85％ |
| 肉桂醛 | 8 | 8％ |
| 香芹酚 | 6 | 6％ |
| 淀粉 | 45.65 | 45.65％ |
| 二氧化硅 | 5.5 | 5.50％ |
| 碳酸钙 | 34 | 34％ |
制备方法：
(1)称取2.7kg淀粉，加入少量温水打散，然后加入10kg开水，边加边搅拌，搅拌至淀 粉糊化为止，制成15kg含量为18％的淀粉浆，降温至30℃左右，备用；
(2)向槽混机中加入配方量二氧化硅，然后加入百里香酚、香芹酚和肉桂醛，搅拌20 分钟，然后加入配方量的碳酸钙搅拌均匀；
(3)将剩余淀粉加入槽式混合机中，混合15-20分钟，加入淀粉浆制得合适的软材，制粒，得到合适湿颗粒；
(4)将制得的湿颗粒置于流化床干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至 室温，即得植物精油饲料添加剂，是由湿法制备的颗粒剂。
实施例3
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.95 | 0.95％ |
| 肉桂醛 | 7 | 7％ |
| 香芹酚 | 8 | 8％ |
| 淀粉 | 41.85 | 41.85％ |
| 二氧化硅 | 8 | 8％ |
| 碳酸钙 | 34.2 | 34.20％ |
制备方法：
(1)称取配方量的淀粉、二氧化硅与碳酸钙，加入高速湿法制粒机中，搅拌至均匀，约15-20分钟；
(2)向高速湿法制粒机中加入配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，搅拌均匀，加入 适量纯化水，搅拌约20-30分钟，得到适宜的湿颗粒；
(3)将湿颗粒置于流化床中干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至室温，即得植物精油饲料添加剂，是由高速搅拌制备的颗粒剂。
实施例4
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.8 | 0.80％ |
| 肉桂醛 | 9 | 9％ |
| 香芹酚 | 8 | 8％ |
| 吐温-80 | 10 | 10％ |
| 丙二醇 | 9 | 9％ |
| 纯化水 | 加至100kg | 6320％ |
制备方法：
(1)将配方量的百里香酚、肉桂醛、香芹酚混合均匀，加入配方量的吐温-80，搅拌均匀；
(2)加入配方量的丙二醇，搅拌均匀后加入纯化水至全量，即得植物精油饲料添加剂，是乳剂。
实施例5
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.9 | 0.90％ |
| 肉桂醛 | 8 | 8％ |
| 香芹酚 | 9 | 9％ |
| 羟丙基纤维素 | 3 | 3％ |
| 碳酸钙 | 27 | 27％ |
| 淀粉 | 43.1 | 43.10％ |
| 二氧化硅 | 9 | 9％ |
制备方法：
(1)将羟丙基纤维素溶于纯化水中，制成3％的包衣液备用；
(2)将配方量碳酸钙、淀粉和二氧化硅加入槽式混合机中，搅拌20分钟，然后加入配 方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，搅拌20-30分钟，过摇摆制粒机，制粒；
(3)将步骤(2)所得湿颗粒加入沸腾造粒机中，包衣液为3％羟丙基纤维素溶液，按配方量包衣，干燥，即得植物精油饲料添加剂，是由包被工艺制备的包衣颗粒。
实施例6
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.0 | 1.0％ |
| 肉桂醛 | 10 | 10％ |
| 香芹酚 | 9 | 9％ |
| 单硬脂酸甘油酯 | 25.4 | 25.4％ |
| 阿拉伯胶 | 27.5 | 27.5％ |
| 明胶 | 27.1 | 27.1％ |
制备方法：
(1)称取配方量的单硬脂酸甘油酯、阿拉伯胶和明胶，加热搅拌至完全融化；
(2)称取配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，加入步骤(1)所得融化的辅料中，高速均质乳化30-40分钟；
(3)将混合均匀的物料冷却至50-60℃，喷雾干燥，即得植物精油饲料添加剂，是微囊剂。
实施例7
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.7 | 0.70％ |
| 肉桂醛 | 5 | 5％ |
| 香芹酚 | 5 | 5％ |
| 淀粉 | 50.3 | 50.30％ |
| 二氧化硅 | 6.5 | 6.50％ |
| 碳酸钙 | 32.5 | 32.50％ |
制备方法：
(1)称取约2.7kg淀粉，加入少量温水打散，然后加入约10kg开水，边加边搅拌，搅拌 至淀粉糊化为止，制成约15kg含量为18％的淀粉浆，降温至30℃左右，备用；
(2)向槽混机中加入配方量二氧化硅，然后加入百里香酚、香芹酚和肉桂醛，搅拌20 分钟，然后加入配方量的碳酸钙搅拌均匀；
(3)将剩余淀粉加入槽式混合机中，混合15-20分钟，加入淀粉浆制得合适的软材，制粒，得到合适湿颗粒；
(4)将制得的湿颗粒置于流化床干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至 室温，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
实施例8
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.2 | 1.20％ |
| 肉桂醛 | 10 | 10％ |
| 香芹酚 | 12 | 12％ |
| 淀粉 | 47.6 | 47.60％ |
| 二氧化硅 | 12 | 12％ |
| 碳酸钙 | 17.2 | 17.20％ |
制备方法：
(1)称取约2.7kg淀粉，加入少量温水打散，然后加入约10kg开水，边加边搅拌，搅拌 至淀粉糊化为止，制成约15kg含量为18％的淀粉浆，降温至30℃左右，备用；
(2)向槽混机中加入配方量二氧化硅，然后加入百里香酚、香芹酚和肉桂醛，搅拌20 分钟，然后加入配方量的碳酸钙搅拌均匀；
(3)将剩余淀粉加入槽式混合机中，混合15-20分钟，加入淀粉浆制得合适的软材，制粒，得到合适湿颗粒；
(4)将制得的湿颗粒置于流化床干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至 室温，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
实施例9
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.2 | 1.20％ |
| 肉桂醛 | 10 | 10％ |
| 香芹酚 | 11 | 11％ |
| 壳聚糖 | 2 | 2％ |
| 冰醋酸 | 1 | 1％ |
| 氢氧化钠 | 2 | 2％ |
| 二氧化硅 | 11 | 11％ |
| 碳酸钙 | 37 | 37％ |
| 淀粉 | 24.8 | 24.80％ |
制备方法：
(1)将配方量的壳聚糖溶于纯化水中，加入冰醋酸，搅拌至完全溶解；
(2)将配方量的百里香酚、香芹酚、肉桂醛溶于壳聚糖溶液中，搅拌均匀；
(3)将氢氧化钠溶于纯化水中，开启搅拌，然后将步骤(2)所得溶液加入氢氧化钠溶液中，搅拌20-30分钟；
(4)过滤，洗涤沉淀，加入配方量的二氧化硅、淀粉和碳酸钙，混合均匀，制粒，即得植物精油饲料添加剂，是微囊剂。
实施例10
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.5 | 1.50％ |
| 肉桂醛 | 15 | 15％ |
| 香芹酚 | 13 | 13％ |
| 淀粉 | 31.3 | 31.30％ |
| 二氧化硅 | 15.4 | 15.40％ |
| 碳酸钙 | 13.8 | 13.80％ |
| 微晶纤维素 | 10 | 10％ |
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅、碳酸钙和微晶纤维素按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
实施例11
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.5 | 1.50％ |
| 肉桂醛 | 13 | 13％ |
| 香芹酚 | 13 | 13％ |
| 聚乙二醇-6000 | 3 | 3％ |
| 淀粉 | 54.9 | 54.90％ |
| 二氧化硅 | 14.6 | 14.60％ |
制备方法：
(1)将聚乙二醇6000溶于14kg热水(60℃以上)中，搅拌至完全溶解，配置成5％聚乙二醇6000溶液备用；
(2)称取配方量的淀粉、二氧化硅加入槽混机中，混合15-20分钟；
(3)将配方量的百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入槽混机中，搅拌20-25分钟，过摇摆制粒机，制粒；
(4)将步骤(3)所得湿颗粒加入沸腾造粒机中，包衣液为5％聚乙二醇6000溶液，按配方量包衣，干燥，即得植物精油饲料添加剂，是由包被工艺制备的包衣颗粒。
实施例12
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.6 | 1.6％ |
| 肉桂醛 | 20 | 20％ |
| 香芹酚 | 20 | 20％ |
| 淀粉 | 15.5 | 15.5％ |
| 二氧化硅 | 21.4 | 21.4％ |
| 微晶纤维素 | 15.5 | 15.5％ |
| 碳酸钙 | 6 | 6％ |
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅、微晶纤维素与碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
实施例13
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.6 | 1.60％ |
| 肉桂醛 | 18 | 18％ |
| 香芹酚 | 19 | 19％ |
| 吐温-80 | 15 | 15％ |
| 丙二醇 | 15 | 15％ |
| 纯化水 | 加至100kg | 31.40％ |
制备方法：
(1)将配方量的百里香酚、肉桂醛、香芹酚混合均匀，加入配方量的吐温-80，搅拌均匀；
(2)加入配方量的丙二醇，搅拌均匀后加入纯化水至全量，即得植物精油饲料添加剂，是乳剂。
对比例1
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
制备方法：
(1)称取配方量的淀粉、二氧化硅与碳酸钙，加入高速湿法制粒机中，搅拌至均匀，约15-20分钟；
(2)向高速湿法制粒机中加入配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，搅拌均匀，约20-30分钟，得到适宜的湿颗粒；
(3)将湿颗粒置于流化床中干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至室温，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
对比例2
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 0.7 | 0.70％ |
| 肉桂醛 | 4 | 4％ |
| 香芹酚 | 5 | 5％ |
| 淀粉 | 58.5 | 58.50％ |
| 二氧化硅 | 5 | 5％ |
| 碳酸钙 | 26.8 | 26.80％ |
制备方法：
(1)称取约2.7kg淀粉，加入少量温水打散，然后加入约10kg开水，边加边搅拌，搅拌 至淀粉糊化为止，制成约15kg含量为18％的淀粉浆，降温至30℃左右，备用；
(2)向槽混机中加入配方量二氧化硅，然后加入百里香酚、香芹酚和肉桂醛，搅拌20 分钟，然后加入配方量的碳酸钙搅拌均匀；
(3)将剩余淀粉加入槽式混合机中，混合15-20分钟，加入淀粉浆制得合适的软材，制粒，得到合适湿颗粒；
(4)将制得的湿颗粒置于流化床干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至 室温，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
对比例3
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
制备方法：
(1)称取配方量的淀粉、二氧化硅与碳酸钙，加入高速湿法制粒机中，搅拌至均匀，约15-20分钟；
(2)向高速湿法制粒机中加入配方量的百里香酚、肉桂醛和香芹酚，搅拌均匀，约20-30分钟，得到适宜的湿颗粒；
(3)将湿颗粒置于流化床中干燥，待颗粒干燥至适宜的水分，取出物料，冷却至室温，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
对比例4
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.6 | 1.60％ |
| 肉桂醛 | 22 | 22％ |
| 香芹酚 | 20 | 20％ |
| 淀粉 | 24.4 | 24.40％ |
| 二氧化硅 | 22 | 22％ |
| 碳酸钙 | 10 | 10％ |
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅与碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
对比例5
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.7 | 1.70％ |
| 肉桂醛 | 15 | 15％ |
| 香芹酚 | 20 | 20％ |
| 淀粉 | 25.5 | 25.50％ |
| 二氧化硅 | 20.5 | 20.50％ |
| 碳酸钙 | 17.3 | 17.30％ |
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅与碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
对比例6
一种植物精油饲料添加剂，包括下列质量百分比的组分：
| 质量(kg) | 质量百分比(％) | |
| 百里香酚 | 1.6 | 1.60％ |
| 肉桂醛 | 20 | 20％ |
| 香芹酚 | 23 | 23％ |
| 淀粉 | 20.8 | 20.80％ |
| 二氧化硅 | 23.3 | 23.30％ |
| 碳酸钙 | 11.3 | 11.30％ |
制备方法：
(1)将淀粉、二氧化硅与碳酸钙按处方质量比配料、混合均匀，得混合载体物料，备用；
(2)将百里香酚、香芹酚、肉桂醛加入混合载体物料，混合均匀，加入干法制粒机，即得植物精油饲料添加剂，是颗粒剂。
试验例1：不同配方精油对主要致病菌的抑菌性研究
以40％乙醇为溶剂制备不同配比的混合精油溶液，得到配方1-19的方案，其中精油部分 分为单组份、双组分和三组分，其各自用量如表1所示，混合精油中各精油百分比即精油用 量占混合溶液的质量百分比，同时也是精油用量在饲料添加剂中的质量百分占比。并按照 美国临床和实验室标准协会(The Clinical&Laboratory Standards Institute，CLSI)方法对 40％乙醇溶液和所制备的不同组分及用量的混合精油溶液进行最低抑菌浓度(MIC)测定， 以考察不同配比的精油对主要致病菌大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌的抑菌效果，筛选出更 好的精油组分配比。结果见表1。
MIC检测方法：在96孔板的每孔中加入50倍稀释的菌悬液100μL，在三个列的第一个孔 中再加入复合植物精油浓度为1024μg/mL的50倍稀释的菌悬液100μL，使得第一孔中复合植 物精油浓度为512μg/mL，然后对复合植物精油进行2倍稀释。第一孔中加入药液后用移液枪 充分吹打，然后吸取100μL加入第2孔中再充分吹打使之与培养基充分混匀，以此重复直至 最后一孔，在第8列吸出100μL弃去，在同一块板的第9列上加入100μL不加复合植物精油的 菌悬液作为阳性对照，第10列上加入100μLLB培养基作为阴性对照，将96孔板置于37℃恒 温培养箱中培养18h，使用分光光度仪测定菌悬液在600nm的OD值。采用目测法，将肉眼能 观察到有明显浑浊孔所对应的上一个稀释度的精油浓度作为该混合复合精油对该细菌的最低抑菌浓度(MIC)。若全部浓度的孔都澄清，则从8μg/mL起，重新测定最低抑菌浓度。 混合复合植物精油对细菌的抑菌率(％)＝[(阳性对照孔OD－阴性对照孔OD)-(药物孔 OD－阴性对照孔)]/(阳性对照孔OD－阴性对照孔)，计算各孔的抑菌率。
表1不同配方精油对主要致病菌的抑菌试验
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从实验数据中可以看出，40％乙醇溶液对三种致病菌无抑菌能力，对精油抑菌的结果 没有影响。
配方1-1、配方1-2、配方1-3、配方1-4、配方2-1、配方2-2、配方2-3、配方2-4、配方3- 1、配方3-2、配方3-3、配方3-4为单组份精油，抑菌效果随浓度升高而增强，不同种类的精 油抑菌能力不同。单组份最低抑菌浓度(MIC)范围是512μg/mL-大于1024μg/mL。
配方4-1、配方4-2、配方4-3、配方5-1、配方5-2、配方5-3、配方6-1、配方6-2、配方6- 3为双组分精油，最低抑菌浓度范围是256μg/mL-大于1024μg/mL，与单组分配方相比，同等用量百分比下，双组分精油的抑菌效果更好，MIC较小。
配方7-配方19为三组分精油溶液，最低抑菌浓度范围是8μg/mL-256μg/mL，相同用量 百分比下，MIC较单、双组分更低，说明三组分混合精油的抑菌效果比单独使用或两种混合使用的效果更佳。
在三组分精油溶液的各个配方中，配方7-配方9，最低抑菌浓度在64μg/mL-256μg/mL 范围内，抑菌率均小于95％；配方10-配方16，最低抑菌浓度在8μg/mL-128μg/mL范围内，各个配方的MIC较配方7-配方9更低，同时抑菌率均大于95％，抑菌效果更好；配方17-配方19，三个配方的最低抑菌浓度在8μg/mL-16μg/mL范围内，但与配方10-配方16相比，临近 精油浓度配方的MIC没有降低太多，变化不大，且抑菌率均低于95％，所以抑菌效果并没有显著增强。通过数据提示，精油含量过高时对上述三种致病菌的抑制效果增强不明显。
综上，配方10-配方16最低抑菌浓度更低的同时抑菌率均大于95％，因此在不添加更多 精油的情况下，对三种致病菌抑菌效果更佳，配方10-配方16中百里香酚含量为0.7％- 1.6％、肉桂醛含量为5％-20％、香芹酚含量为5％-20％，该三组分用量范围对主要致病菌抑 制作用更好。将该用量范围命名为“最大范围”。
试验例2：不同配方精油对益生菌双歧杆菌、嗜酸性乳杆菌的抑制作用
以40％乙醇为溶剂制备不同配比的混合精油溶液，得到配方1-19的方案，其中精油部分 分为单组份、双组分和三组分，其各自用量如表2所示，混合精油中各精油百分比即精油用 量占混合溶液的质量百分比，同时也是精油用量在饲料添加剂中的质量百分占比。按照美 国临床和实验室标准协会(The Clinical&Laboratory Standards Institute，CLSI)方法对40％ 乙醇溶液和所制备的不同组分及用量的混合精油溶液进行最低抑菌浓度(MIC)测定，以 考察不同配比的精油对益生菌双歧杆菌、嗜酸性乳杆菌的抑菌效果，筛选出对益生菌抑制 更小的精油组分配比。结果见表2。MIC检测方法与试验例1中方法相同。
表2不同配方精油对益生菌双歧杆菌、嗜酸性乳杆菌的抑菌试验
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配方1-1、配方1-2、配方1-3、配方1-4、配方2-1、配方2-2、配方2-3、配方2-4、配方3- 1、配方3-2、配方3-3、配方3-4是单组分精油，对益生菌的最低抑菌浓度为512μg/mL-大于 1024μg/mL。配方4-1、配方4-2、配方4-3、配方5-1、配方5-2、配方5-3、配方6-1、配方6-2、配方6-3是双组分精油，对益生菌的最低抑菌浓度为256μg/mL-1024μg/mL。通过与前面数据比较，对于单、双组分精油，对益生菌和致病菌的MIC范围是相当的，如前所述单、 双组分对致病菌抑制作用不佳，但对益生菌抑制作用较小。
配方7-配方19是三组分精油，对益生菌的最低抑菌浓度为2μg/mL-256μg/mL。在三组分 精油溶液的各个配方中，配方7-配方9，对两种益生菌的最低抑菌浓度均为256μg/mL，对上 述致病菌的最低抑菌浓度为64μg/mL-256μg/mL，对致病菌抑制作用较弱，且益生菌与致病 菌的MIC有重合；配方10，对两种益生菌的最低抑菌浓度为128μg/mL，对上述致病菌的最 低抑菌浓度为32μg/mL-128μg/mL，此时益生菌和致病菌的MIC范围也有重合，会存在对致 病菌和益生菌抑制作用强度相当的情况；配方11-配方15，对两种益生菌的最低抑菌浓度为 64-128μg/mL，对上述致病菌的最低抑菌浓度为8μg/mL-32μg/mL，在此精油浓度范围内， 致病菌的MIC小于益生菌的MIC，且两者无重合，精油对致病菌有显著抑制作用，同时不影响益生菌生长；配方16对益生菌的最低抑菌浓度分别为16μg/mL、32μg/mL，对上述致病菌的最低抑菌浓度为8μg/mL-16μg/mL，益生菌与致病菌的MIC有重合，且对益生菌抑制作用较大；配方17-配方19，对两种益生菌的最低抑菌浓度在2-8μg/mL范围内，对益生菌抑制作用过大。
因此，更优选配方11-配方15，其中三种精油的用量范围为百里香酚含量为0.75％- 1.5％、肉桂醛含量为5％-15％、香芹酚含量为5％-13％。该用量范围对致病菌有显著抑制作 用，同时不影响益生菌生长，将该用量范围命名为“优选范围1”。
试验例3：不同配方精油对肠道菌群的影响
依据实施例1的制备方法，按配方7-19中的精油比例制备饲料添加剂，进行动物试验， 筛选合适的精油浓度范围。
选用80-90日龄、初始体重为50±3kg的健康杜长大三元杂交育肥猪作为试验动物，随 机分成14个组，每组6头猪。对照组饲喂基础饲料，试验组在基础饲料中添加1kg/T的饲料 添加剂，试验期为90天。
试验结束时，取每组猪的新鲜粪便，选择粪便内部未与空气和地面接触的部分，装入 无菌离心管中，放入液氮中速冻保存备用，提取微生物基因组DNA，进行生物学信息分析。
表3不同配方精油对肠道细菌相对丰度的影响
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丰度其实就是丰富程度。细菌丰度，就是说在一定的范围内，描述细菌种类多少的指 标。种类越多，丰度越大。
拟杆菌门是肠道菌群的优势微生物，参与许多重要的代谢活动，包括碳水化合物和蛋 白质的代谢。拟杆菌门丰度增加可能增强了肠道对饲料中碳水化合物和蛋白质的代谢能 力，有利于饲料中营养成分的吸收；厚壁菌门的成员包括乳酸杆菌、粪杆菌、瘤胃球菌等，它们可产生乙酸盐、乳酸盐和丁酸盐，可抑制病原菌的增殖，对肠道起保护作用；柔膜菌门中包含支原体、螺原体、丹毒丝菌等，寄生于人与动植物，支原体以宿主的胆固醇 保持细胞膜稳定，有些菌可引起动物的疾病；变形菌门包含多种致病菌，如沙门氏菌、鼠 疫杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌等；螺旋体门中大多数营厌氧自由生活，其中细螺旋体 可引起细螺旋体病，该疾病是一种人畜共患病，另外钩端螺旋体的储存宿主之一为猪，可长期存在于感染动物的肾脏中，持续随尿液排出，污染环境，感染人体。
结合表3的试验数据得知，配方7-9中，拟杆菌门丰度没有显著变化，厚壁菌门丰度略 下降，并不能对肠道起到有益效果；配方10-13中，拟杆菌门丰度上升，厚壁菌门丰度上升，变形菌门丰度下降，提示了10-13可能增强了肠道对营养物质的吸收，同时抑制了致病菌；配方14-19中，拟杆菌门和厚壁菌门的丰度均有不同程度的下降，同时变形菌门、螺旋体门、柔膜菌门的丰度上升，可能使肠道中毒素含量增加，引发炎症反应。
因此，总结上面试验结果，通过研究肠道细菌相对丰度，优选出对有益菌相对丰度增 加，也就是可使肠道有益菌种类更丰富，另外对致病菌相对丰度降低，也就是使肠道致病 菌种类减少的方案，配方10-13是最优选的配方组合方式，可增强肠道对营养物质的吸收，同时还对致病菌有很好的抑制作用，其三种精油的用量分别是百里香酚含量为0.7％-1.0％、 肉桂醛含量为5％-10％、香芹酚含量为5％-9％。将该用量范围命名为“优选范围2”。
最后，结合试验例1、试验例2、试验例3对精油配方的筛选结果，得到最优选的用量范 围是配方11-配方13，其三种精油的用量分别是百里香酚含量为0.75％-1.0％、肉桂醛含量为 5％-10％、香芹酚含量为5％-9％。将该用量范围命名为“最优范围”，在保证对致病菌有较 好抑制作用的同时，还不影响益生菌生长，同时因为拟杆菌门和厚壁菌门的细菌种类增 多，会增强肠道对营养物质的吸收，实现了多重的控制肠道菌群的有益效果。更进一步 地，配方12和配方13的上述效果更好一些，其三种精油的用量分别是百里香酚含量为0.85％-1.0％、肉桂醛含量为8％-10％、香芹酚含量为6％-9％。将该用量范围命名为“最优范围内的更优范围”。
试验例4：不同配方精油对肠道吸收的影响
选用健康断奶仔猪作为试验动物，随机分组，每组6头猪，称重记录数据。对照组饲喂 基础饲料，试验组在基础饲料中添加1kg/t的饲料添加剂，饲养38天，记录每日采食量和腹 泻情况。饲养试验结束后，称重记录数据，并进行各指标计算，方法如下。
腹泻频率：腹泻频率(％)＝腹泻头次数/(仔猪头数ⅹ试验天数)ⅹ100％
若仔猪粪便为半液体或水样粪便，则认为该头猪腹泻。
平均日增重＝(平均末重-平均初始重)/天数
平均日采食量＝(第1天日采食量+……+第N天日采食量)/天数
料肉比＝平均日采食量/平均日增重
表4不同配方精油对肠道吸收的影响
实施例1-6在精油用量的“最优范围”内，仔猪腹泻频率低在5.06％-6.81％之间，料肉 比低在1.81-1.86之间，证明仔猪肠道健康，对营养物质吸收能力强，生长情况良好。
其中实施例2、实施例5和实施例6在“最优范围内的更优范围”内，仔猪腹泻频率更低 在5.06％-6.12％之间，料肉比更低在1.81-1.83之间，仔猪生长情况更佳。
实施例7在“优选范围2”内，但不在“最优范围”内，与实施例1-6相比，仔猪腹泻频率稍有增加为8.21％，仔猪肠道比较健康，吸收也较好，因此料肉比也较低，为1.87。
实施例8-11在“优选范围1”内，但不在“最优范围”内，仔猪腹泻频率为7.97％-8.20％，高于实施例1-6，略低于实施例7，但营养吸收情况不如实施例1-7，料肉比较高，为1.89-1.93，增重较慢。
实施例12、13在“最大范围”内，不在其他几个范围内，仔猪生长情况较差，腹泻频率更高一些，分别为10.62％和10.73％，料肉比更高一些，分别为2.03和2.01，增重更慢。
对比例1-6效果极差，仔猪腹泻频率高达11.82％-13.08％，料肉比高达2.06-2.15，说明对 比例组的仔猪肠道不健康，肠道屏障不完整，易腹泻，生长速度极慢。
试验例5：不同配方精油对提高育肥猪免疫力的影响
选用120日龄，体重70kg左右，健康的杜长大育肥猪作为试验动物，随机分组，每组10 头，称重记录数据。对照组饲喂基础饲料，试验组在基础饲料中添加1kg/t的饲料添加剂， 饲养40天，采血，用试剂盒测定免疫蛋白，并记录IgA、IgM、IgG含量数据。
表5不同配方精油对提高育肥猪免疫力的影响
实施例1-6在“最优范围”内，此时三种免疫蛋白的含量均为最高值，育肥猪免疫力很 强。
其中实施例2、实施例5和实施例6在“最优范围内的更优范围”内，三种免疫蛋白的含 量更高，证明育肥猪免疫力更强。
实施例7为“优选范围2”内,但不在“最优范围”内，免疫蛋白含量较低，免疫力较弱。
实施例8-11为“优选范围1”内，但不在“最优范围”内，免疫蛋白含量较高，免疫力较强，优于实施例7，但不及实施例1-6。
实施例12、13在“最大范围”内，不在其他几个范围内，此时育肥猪免疫力更弱。
对比例1-6效果极差，免疫力低下。
试验例6：不同配方精油对育肥猪生产性能的影响
选用120日龄，体重70kg左右，健康的杜长大育肥猪作为试验动物，随机分组，每组10 头，称重记录数据。对照组饲喂基础饲料，试验组在基础饲料中添加1kg/t的饲料添加剂， 饲养40天，记录每日采食量、日增重和增重耗料比，记录死亡率。饲养试验结束后，称重记录数据，并进行各指标计算，方法如下。
平均日增重＝(平均末重-平均初始重)/天数
平均日采食量＝(第1天日采食量+……+第N天日采食量)/天数
料肉比＝平均日采食量/平均日增重
表6不同配方精油对育肥猪生产性能的影响
| 日增重/g | 日采食量/g | 料肉比 | |
| 对照组 | 901.6 | 2515.5 | 2.79 |
| 实施例1 | 942.3 | 2280.3 | 2.42 |
| 实施例2 | 940.8 | 2229.7 | 2.37 |
| 实施例3 | 936.4 | 2256.7 | 2.41 |
| 实施例4 | 932.8 | 2229.4 | 2.39 |
| 实施例5 | 945.8 | 2251.0 | 2.38 |
| 实施例6 | 946.6 | 2224.5 | 2.35 |
| 实施例7 | 923.6 | 2327.4 | 2.52 |
| 实施例8 | 934.1 | 2288.5 | 2.45 |
| 实施例9 | 927.6 | 2309.7 | 2.49 |
| 实施例10 | 917.6 | 2275.6 | 2.48 |
| 实施例11 | 915.6 | 2234.1 | 2.44 |
| 实施例12 | 908.4 | 2307.3 | 2.54 |
| 实施例13 | 916.4 | 2355.1 | 2.57 |
| 对比例1 | 903.8 | 2377.0 | 2.63 |
| 对比例2 | 908.8 | 2408.3 | 2.65 |
| 对比例3 | 910.3 | 2375.9 | 2.61 |
| 对比例4 | 913.4 | 2429.6 | 2.66 |
| 对比例5 | 905.7 | 2391.0 | 2.64 |
| 对比例6 | 914.5 | 2423.4 | 2.65 |
实施例1-6在精油用量的“最优范围”内，育肥猪平均日采食量在2224.5g-2280.3g之 间，料肉比在2.35-2.42之间，证明本范围可降低采食量，促进肠道营养吸收能力，促进生 长。
其中实施例2、实施例5和实施例6在“最优范围内的更优范围”内，料肉比更低些，在 2.35-2.38之间，育肥猪生长情况更佳。
实施例7为“优选范围2”内,但不在“最优范围”内，平均日采食量较高，为2327.4g，但日增重很低，为923.6g，导致料肉比升高，为2.52，主要由于免疫力差，多发 病，影响了育肥猪的生长发育。
实施例8-11为“优选范围1”内，但不在“最优范围”内，料肉比稍有升高，在2.44-2.49之间，低于实施例7但不及实施例1-6，是因为虽然育肥猪免疫力提高，但由于肠道吸收欠佳，从而还是会略微影响其生长。
实施例12、13在“最大范围”内，不在其他几个范围内，免疫力差，肠道吸收不好，料肉比更高一些，分别为2.54和2.57，此时育肥猪生长情况较差，增重慢。
对比例1-6效果极差，料肉比高达2.61-2.66，增重很慢，料肉比略高于对照组。
综上可见，实施例1-6对于仔猪和育肥猪的生长都很有帮助，其中实施例2、实施例5、 实施例6效果更为突出；而实施例7对于养殖仔猪效果较好，对育肥猪效果欠佳；实施例8- 11则较为适合对育肥猪养殖，对仔猪效果欠佳；实施例12和实施例13对仔猪和育肥猪的效 果均稍差，但优于对比例1-6的效果，更优于对照组的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和 原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种植物精油饲料添加剂在制备有效抑制肠道致病菌的同时不影响肠道益生菌生长的饲料中的应用，其特征在于，所述的植物精油饲料添加剂，包括如下质量百分含量的组分：0.75%-1.5%百里香酚、5%-15%肉桂醛和5%-13%香芹酚，余量为辅料。
2.一种植物精油饲料添加剂在制备使肠道有益菌相对丰度升高、致病菌相对丰度降低的饲料中的应用，其特征在于，所述的植物精油饲料添加剂，包括如下质量百分含量的组分：0.7%-1.0%百里香酚、5%-10%肉桂醛和5%-9%香芹酚，余量为辅料。
3.一种植物精油饲料添加剂在制备能有效抑制肠道致病菌、不影响肠道益生菌生长、使肠道有益菌相对丰度升高且致病菌相对丰度降低的饲料中的应用，其特征在于，所述的植物精油饲料添加剂，包括如下质量百分含量的组分：0.75%-1.0%百里香酚、5%-10%肉桂醛和5%-9%香芹酚，余量为辅料。
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