CN115029396A - 一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 - Google Patents
一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115029396A CN115029396A CN202210004428.8A CN202210004428A CN115029396A CN 115029396 A CN115029396 A CN 115029396A CN 202210004428 A CN202210004428 A CN 202210004428A CN 115029396 A CN115029396 A CN 115029396A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- sorbitol
- liquid
- preparing
- vitamin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 87
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 87
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title claims abstract description 20
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 17
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 title claims abstract description 17
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 title claims abstract description 17
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 238000004904 shortening Methods 0.000 title claims abstract description 14
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims abstract description 75
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims abstract description 75
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 45
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 17
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 14
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 11
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 claims description 16
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 4
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 20
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 abstract description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589232 Gluconobacter oxydans Species 0.000 description 1
- 241001599018 Melanogaster Species 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- BJHIKXHVCXFQLS-PYWDMBMJSA-N sorbose group Chemical group OCC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO BJHIKXHVCXFQLS-PYWDMBMJSA-N 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/04—Oxygen as only ring hetero atoms containing a five-membered hetero ring, e.g. griseofulvin, vitamin C
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，该方法包括配制种液，配制发酵培养基，发酵；所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇400g/L，玉米浆1.3‑1.7g/L，碳酸钙0.9‑1.1g/L，酵母膏0.9‑1.1g/L，消泡剂0.25‑0.35g/L；所述配制发酵培养基，先加入1/2山梨醇，剩余山梨醇分别在发酵步骤中山梨醇锤度降至3时分两次加入，后两次的加入量相同；本发明的方法能够使山梨醇浓度达到40%的同时解除高浓度山梨醇对生黑醋酸杆菌的抑制高的问题，同时还能够缩短发酵周期，提高产糖速率，增加OD最大值，增加设备的利用率。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，尤其是涉及一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法。
背景技术
维生素C在医药和临床方面都具有重要的应用价值，亦广泛用于食品工业和化妆品工业。目前维生素C生产常用方法为“二步发酵法”，第一步发酵中需以山梨醇为底物，但是发酵过程长，操作工艺烦琐，易受杂菌、噬菌体污染等。生产中一步发酵多采用一次投醇，将山梨醇最高浓度控制在35%左右，但是当初始山梨醇浓度较高时，会导致分批发酵的氧化率减少，从而导致山梨糖的产率降低。而且在35%山梨醇浓度下的发酵，存在前期高浓度山梨醇前期对生黑醋酸杆菌抑制高的现象，但是若采用较低浓度山梨醇，则设备利用率低，目前仍没有既可以减少山梨醇前期高抑制，缩短发酵周期，还可以提高设备利用率的有效方法。
发明内容
为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，能够使山梨醇浓度达到40%的同时解除高浓度山梨醇对生黑醋酸杆菌的抑制高的问题，同时还能够缩短发酵周期，提高产糖速率，增加OD最大值，增加设备的利用率。
为解决以上技术问题，本发明采取的技术方案如下：
一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，包括配制种液，配制发酵培养基，发酵。
所述配制种液，配制一次种液，将一次种液pH调至5-5.5，然后在整个过程不再控制pH,在110-120℃灭菌18-22min后将培养温度降至30-32℃，再接入二次种液，罐压0.035-0.045MPa，通气量4.8-5.2L/min，转速290-310rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到种液。
所述一次种液与二次种液的体积比为65:8-12。
所述一次种液和二次种液的组成为：山梨醇190-210g/l；玉米浆干粉4-6g/l；硫酸铵0.9-1.1g/l；磷酸二氢钾0.9-1.1g/l；种液的OD值为3-4。
所述一次种液和二次种液中的菌种为生黑醋酸杆菌，菌种保藏号为GDMCC No：61006。
所述配制发酵培养基，使用自来水配制发酵培养基，再将PH调至4.8-5.2后在113-117℃下对发酵罐培养基灭菌23-27min，得到发酵培养基。
所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇400g/L，玉米浆1.3-1.7g/L，碳酸钙0.9-1.1g/L，酵母膏0.9-1.1g/L，消泡剂0.25-0.35g/L；
所述玉米浆和碳酸钙均为标准产品。
所述配制发酵培养基，先加入总量的1/2山梨醇，在发酵步骤中山梨醇锤度降至3时加入总量的1/4山梨醇，待山梨醇锤度再次降至3时再加入总量的1/4山梨醇。
所述发酵，将发酵罐的通气量控制到1.7-1.9L/min，转速控制到440-460rpm，培养温度控制到35-37℃，罐压控制到0.035-0.045MPa培养，持续发酵，每1.9-2.1h取样检测发酵进程，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，结束发酵。
本发明所述生黑醋酸杆菌，分类命名为：Gluconobacter oxydanssubsp.melanogenus，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2020年4月29日，保藏编号为GDMCC No：61006。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
（1）本发明的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，OD最大值为4.598-4.872；
（2）本发明的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，产糖速率快，产糖速率最高值可达32.81-34.65g/l/h，产糖速率平均值可达10.15-10.94g/l/h，反应周期能够缩短至32-34h；
（3）本发明的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，通过分加可以在维持相同周期的条件下实现山梨醇浓度达到40%，明显缩短设备空闲时间，并将设备利用率由50%提高到75%。
附图说明
图1为实施例5的OD值数据；
图2为实施例5的山梨糖单位含量数据。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和效果有更加清楚的理解，现说明本发明的具体实施方式。
实施例1
一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，具体为：
1.选四个5L搅拌发酵罐紧密组合成一组，四个5L搅拌发酵罐之间不连通，按照一步发酵培养基配方配制发酵罐培养基；
所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇 400g/L，玉米浆 1.5g/L，碳酸钙 1g/L，酵母膏1g/L，消泡剂0.3g/L；
所述发酵培养基使用自来水配制，在配制发酵培养基时，使用自来水定容至3L后，再将PH调至4.8-5.2。
所述玉米浆和碳酸钙均为标准产品。
2.利用1L自动发酵罐培养生黑醋酸杆菌二级种液，具体的培养过程为：配制0.65L种液，将种液pH调至5.1，然后在整个过程不再控制pH,在115℃灭菌20min后将培养温度降至31℃，再接入0.1L种液，罐压0.04MPa，通气量5L/min，转速300rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到培养好的二级种液。
所述种液的组成为：山梨醇200g/l；玉米浆干粉5g/l；硫酸铵1g/l；磷酸二氢钾1g/l；种液的OD值为3-4。
所述种液中的菌种为生黑醋酸杆菌，菌种保藏号为GDMCC No：61006。
3.在115℃下对发酵罐培养基灭菌25min，然后待罐内冷却后，控制初始通气量为1.8L/min，转速为450rpm，培养温度为36℃，种液的接种量为15%。
4.不同罐之间的条件对比：1#罐山梨醇一次投入；2#罐山梨醇先加入总量的1/4，剩余山梨醇在山梨醇锤度降至3时分两次加入，每次加入总量的3/8；3#罐山梨醇先加入1/2，剩余山梨醇在山梨醇锤度降至3时分两次加入，每次加入总量的1/4；4#罐山梨醇先加入3/4，剩余山梨醇分别在山梨醇锤度降至3时分两次加入，每次加入总量的1/8。
发酵过程中每2h用液相检测山梨糖含量，每8h用阿贝折射仪检测一次发酵液浓度，将发酵液浓度减去山梨糖含量除以10即为此时间点的锤度。
4.发酵数据检测：将发酵罐的通气量控制到1.8L/min，转速控制到450rpm，培养温度控制到36℃，罐压控制到0.04MPa培养，持续发酵，每2h取样检测发酵进程，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，结束发酵。
5.计算与分析：1#发酵罐作为基础对照组，反应周期为40h，L-山梨糖含量355.44mg/ml,产糖速率8.89g/l/h。2#发酵罐反应周期为36h，L-山梨糖含量353.15mg/ml，产糖速率9.81g/l/h。3#发酵罐反应周期为34h，L-山梨糖含量348.37mg/ml，产糖速率10.25g/l/h；4#发酵罐反应周期为38h，L-山梨糖含量347.92mg/ml，产糖速率9.16g/l/h。2#罐反应初期产糖速率最快，OD值最高，但是补加之后，山梨醇浓度瞬间增大，导致产糖速率变缓，OD值有所下降；3#罐始终保持较低浓度的山梨醇，产糖速率和OD值在一次、二次补加山梨醇后均为受到影响；4#初始山梨醇浓度较高，导致产糖速率和OD值都较低，且形态异常的菌较多。
综合考虑，采用3#罐的培养条件进行后续实验。
实施例2
用相同配方和培养条件，重复3次实施例1的试验，均使用3#罐实验条件，从而保证实验结果准确性，避免偶发、不可重复事件。最终实验发酵周期平均为32.67h，产糖速率为10.15-10.94g/l/h之间，实验结论准确有效。
实施例3
1.利用10L自动发酵罐培养生黑醋酸杆菌二级种液，具体的培养过程为：配制6.5L种液，将种液pH调至5.1，然后在整个过程不再控制pH,在115℃灭菌20min后将培养温度降至31℃，再接入1L种液，罐压0.04MPa，通气量5L/min，转速300rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到培养好的二级种液。
所述二级种液中的菌种为生黑醋酸杆菌，菌种保藏号为GDMCC No：61006。
所述种液的组成为：山梨醇200g/l；玉米浆干粉5g/l；硫酸铵1g/l；磷酸二氢钾1g/l；种液的OD值为3-4。
2. 在115℃下对50L自动发酵罐中的25L发酵培养基灭菌25min，然后待罐内冷却后，将7.5L培养好的二级种液，接入发酵罐中；
所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇 400g/L，玉米浆 1.5g/L，碳酸钙 1g/L，酵母膏1g/L，消泡剂0.3g/L。
3.控制发酵罐中的初始pH值为4.8-5.2，培养温度为36℃，搅拌速度为450rpm，初始加入总量的一半山梨醇，利用移种之后空闲的10L罐进行剩余山梨醇的灭菌，待山梨醇锤度降至3，补入剩余山梨醇的一半，锤度再次降至3，将剩余山梨醇一次补入，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，为发酵终点。发酵33h至发酵终点后，L-山梨糖含量352.18mg/ml，产糖速率10.67g/l/h。
对比例1
生黑醋酸杆菌二级种液的组成和发酵过程与实施例3相同，其不同之处在于：山梨醇在发酵培养基的制备过程中为一次性加入。
对比例1发酵42h至终点，L-山梨糖含量358.42mg/ml，产糖速率8.53g/l/h。
实施例4
1.利用100L自动发酵罐培养生黑醋酸杆菌二级种液，具体的培养过程为：配制65L种液，将种液pH调至5.1，然后在整个过程不再控制pH,在115℃灭菌20min后将培养温度降至31℃，再接入10L种液，罐压0.04MPa，通气量5L/min，转速300rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到培养好的二级种液。
所述二级种液，发酵培养基的组成及发酵培养基的灭菌方法与实施例3相同。
2.将75L培养好的二级种液，接入含有250L发酵培养基的500L自动发酵罐中，初始pH值5.0-5.3，培养温度36℃，搅拌速度450rpm进行发酵。
3.初始加入总量的一半山梨醇，利用移种之后空闲的100L罐进行剩余山梨醇的灭菌，待山梨醇锤度降至3左右，补入剩余山梨醇的一半，锤度再次降至3左右，将剩余山梨醇一次补入，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，为发酵终点。发酵34h至发酵终点后，L-山梨糖含量359.42mg/ml，产糖速率10.57g/l/h。
对比例2
生黑醋酸杆菌二级种液的组成和发酵过程与实施例4相同，其不同之处在于：山梨醇在发酵培养基的制备过程中为一次性加入。
对比例1发酵41h至终点，L-山梨糖含量351.37mg/ml，产糖速率8.57g/l/h。
实施例5
按照实施例4的方法，控制山梨醇在三次加入后在发酵培养基的占比为400g/L，初始加入总量的一半山梨醇，利用移种之后空闲的100L罐进行剩余山梨醇的灭菌，待山梨醇锤度降至3左右，补入剩余山梨醇的一半，锤度再次降至3左右，将剩余山梨醇一次补入，进行了三批500L发酵罐实验，同时设置对比试验，对比试验为将山梨醇一次性加入，实验结果如下：
除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，其特征在于，包括配制种液，配制发酵培养基，发酵；
所述配制发酵培养基，使用自来水配制发酵培养基，再将PH调至4.8-5.2后在113-117℃下对发酵罐培养基灭菌23-27min，得到发酵培养基；
所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇400g/L，玉米浆1.3-1.7g/L，碳酸钙0.9-1.1g/L，酵母膏0.9-1.1g/L，消泡剂0.25-0.35g/L；
所述配制发酵培养基，先加入总量的1/2山梨醇，在发酵步骤中山梨醇锤度降至3时加入总量的1/4山梨醇，待山梨醇锤度再次降至3时再加入总量的1/4山梨醇。
2.根据权利要求1所述的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，其特征在于，所述配制种液，配制一次种液，将一次种液pH调至5-5.5，然后在整个过程不再控制pH,在110-120℃灭菌18-22min后将培养温度降至30-32℃，再接入二次种液，罐压0.035-0.045MPa，通气量4.8-5.2L/min，转速290-310rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到种液。
3.根据权利要求2所述的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，其特征在于，所述一次种液与二次种液的体积比为65:8-12。
4.根据权利要求3所述的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，其特征在于，所述一次种液和二次种液的组成为：山梨醇190-210g/l；玉米浆干粉4-6g/l；硫酸铵0.9-1.1g/l；磷酸二氢钾0.9-1.1g/l；种液的OD值为3-4。
5.根据权利要求1所述的有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，其特征在于，所述发酵，将发酵罐的通气量控制到1.7-1.9L/min，转速控制到440-460rpm，培养温度控制到35-37℃，罐压控制到0.035-0.045MPa培养，持续发酵，每1.9-2.1h取样检测发酵进程，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，结束发酵。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210004428.8A CN115029396A (zh) | 2022-01-05 | 2022-01-05 | 一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210004428.8A CN115029396A (zh) | 2022-01-05 | 2022-01-05 | 一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115029396A true CN115029396A (zh) | 2022-09-09 |
Family
ID=83119897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210004428.8A Pending CN115029396A (zh) | 2022-01-05 | 2022-01-05 | 一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115029396A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0625578A1 (de) * | 1993-05-06 | 1994-11-23 | Südzucker Aktiengesellschaft Mannheim/Ochsenfurt | Süssungsmittel, Verfahren zur Herstellung desselben sowie dessen Verwendung |
| CN1346401A (zh) * | 1999-02-19 | 2002-04-24 | Basf公司 | L－山梨糖的制备方法 |
| US20100248315A1 (en) * | 2005-02-11 | 2010-09-30 | Marie-Gabrielle Beuzelin-Ollivier | Fermentative vitamin C production |
| CN102286567A (zh) * | 2011-07-21 | 2011-12-21 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | 一种生产山梨糖的方法 |
| CN103114111A (zh) * | 2012-11-14 | 2013-05-22 | 江苏江山制药有限公司 | 一种提高l-山梨糖发酵生产率的加工方法 |
| CN104404121A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-03-11 | 天津大学 | 一种发酵生产2-酮基-l-古龙酸的方法 |
-
2022
- 2022-01-05 CN CN202210004428.8A patent/CN115029396A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0625578A1 (de) * | 1993-05-06 | 1994-11-23 | Südzucker Aktiengesellschaft Mannheim/Ochsenfurt | Süssungsmittel, Verfahren zur Herstellung desselben sowie dessen Verwendung |
| CN1346401A (zh) * | 1999-02-19 | 2002-04-24 | Basf公司 | L－山梨糖的制备方法 |
| US20100248315A1 (en) * | 2005-02-11 | 2010-09-30 | Marie-Gabrielle Beuzelin-Ollivier | Fermentative vitamin C production |
| CN102286567A (zh) * | 2011-07-21 | 2011-12-21 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | 一种生产山梨糖的方法 |
| CN103114111A (zh) * | 2012-11-14 | 2013-05-22 | 江苏江山制药有限公司 | 一种提高l-山梨糖发酵生产率的加工方法 |
| CN104404121A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-03-11 | 天津大学 | 一种发酵生产2-酮基-l-古龙酸的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 曹友声等: "《现代工业微生物学》", 湖南科学技术出版社, pages: 312 - 316 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6854911B2 (ja) | Ｌ−イソロイシン生産コリネバクテリウムグルタミカムの発酵培地および培養方法 | |
| EP3640337A1 (en) | Method for continuously culturing aspergillus niger seeds and producing citric acid using same | |
| CN102268466A (zh) | 一种发酵生产利普司他汀的方法及其培养基组份 | |
| Beckord et al. | Bacterial Amylases. | |
| CN104152497A (zh) | 一种多级连续发酵生产丁二酸的方法 | |
| CN102021214B (zh) | 基于氧消耗速率的维生素b12发酵生产控制工艺 | |
| CN107955828A (zh) | 一种维生素c二步发酵生产方法 | |
| CN111748480B (zh) | 一种维斯假丝酵母及其应用 | |
| CN115029396A (zh) | 一种有效缩短维生素c一步菌发酵反应周期的方法 | |
| CN111424058A (zh) | 一种采用连续发酵的方式制备赤藓糖醇的方法 | |
| CN104212851A (zh) | 一种多级连续发酵生产l-苯丙氨酸的方法 | |
| CN106854670B (zh) | 一种发酵法生产替考拉宁并调控其组分含量的方法 | |
| CN106520871B (zh) | 一种发酵法生产a40926的方法 | |
| CN101586133A (zh) | 阿维菌素批发酵优化工艺 | |
| CN1026129C (zh) | 微生物发酵正烷烃生产长链α.ω-二羧酸的方法 | |
| CN108841886B (zh) | 一种生产l-脯氨酸的方法 | |
| CN112725223A (zh) | 一种用于提高质粒发酵产量的方法 | |
| CN111893077A (zh) | 一种丁酸梭菌的规模化生产方法 | |
| CN112852896A (zh) | 一种l-精氨酸的发酵生产方法 | |
| CN111733202A (zh) | 一种泰乐菌素混种发酵方法 | |
| CN112795487B (zh) | 一种生产夫西地酸的发酵培养基及发酵方法 | |
| CN103614424A (zh) | 一种提高古龙酸发酵单位的方法 | |
| CN114045243B (zh) | 一种缩短生黑葡萄糖酸杆菌发酵周期的方法 | |
| CN114875100B (zh) | 一种通过提前激活纳他霉素合成来提高纳他霉素发酵产量的方法 | |
| CN111705092B (zh) | 一种提高大观霉素发酵效价的补料及其制备方法和使用方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |