CN115024380A - 一种富硒及富含dha构树肉鹅饲料的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法。本发明通过裂殖壶菌和螺旋藻混合发酵制备富含硒和DHA的复合藻添加剂,明显缩短发酵时间同时节省了原料成本。生产的复合藻添加剂用于配方饲料,可保证饲料中硒和DHA的含量及其比例。从肉鹅饲喂效果试验可以看出,日粮中添加复合藻添加剂可改善肉鹅免疫应答反应、抗病性、抗病毒和抗菌作用,维持肠道功能和益生菌定殖,可以增加肉鹅的日采食量,日增重也有所增加,料重比下降明显,提高了饲料转化率,从而改善肉鹅的生长发育和生产性能,并且在鹅肉中检测到了硒元素,达到了富硒效果;具有较高的应用价值。

Description

一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法
技术领域
本发明属于饲料技术领域,具体涉及一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法。
背景技术
硒和DHA作为饲料添加剂饲喂动物得到很大的应用发展,也产生了很多产品,但目前市面上都是单一产品,要么单一DHA添加剂,要么单一硒源添加剂,尚未有复合添加剂,如果需要同时添加,只能分别购买,成本也相对较高。
动物饲料中所用的硒源主要为无机硒(硒酸盐和亚硒酸盐等)和有机硒(硒代蛋氨酸和酵母硒等)。无机硒存在生物利用率低,毒性高,易与其他微量元素发生拮抗作用等问题,而动物生产中,为追求高经济效益而过度盲目地添加高剂量的无机硒饲喂动物,给动物健康带来了隐患,当动物采食过量的无机硒后,机体会产生不良反应,严重者会危及生命安全。另外,机体未吸收的硒排出体外后,也会造成环境污染。有机硒具有生物利用率高、毒性小、对环境友好等优点,在动物生长发育、抗氧化、免疫和肉品质方面发挥着重要作用,是替代无机硒的有效硒源。但生产成本高,添加剂产品售价贵,使用受到限制。
发明内容
本发明第一方面的目的,在于提供一种饲料添加剂的制备方法。
本发明第二方面的目的,在于提供一种饲料添加剂。
本发明第三方面的目的,在于提供上述饲料添加剂的应用。
本发明第四方面的目的,在于提供一种动物饲料。
本发明第五方面的目的,在于提供上述动物饲料的制备方法。
本发明所采取的技术方案是:
本发明的第一方面,提供一种饲料添加剂的制备方法,通过裂殖壶菌和螺旋藻混合发酵制备。
在本发明的一些实施方式中,在发酵过程中流加NaCl和NaHCO3混合液。
在本发明的一些优选实施方式中,在发酵过程中,在发酵46~50小时后以80~120mL/h的流速流加NaCl和NaHCO3混合液,在发酵82~86小时停止流加。
在本发明的一些实施方式中,所述流加的混合液中NaCl的浓度为75~85g/L,所述流加的混合液中NaHCO3的浓度为75~85g/L。
在本发明的一些实施方式中,所述发酵的培养基包含如下组分:葡萄糖43~47g/L、酵母粉18~22g/L、NaCl 1.8~2.2、NaHCO3 1.8~2.2、NaNO3 1.8~2.2g/L、MgSO40.8~1.2g/L、KH2PO4 0.3~0.4g/L、KCl 0.4~0.6g/L、CaCl2 0.4~0.6g/L、NaSeO3 0.03~0.05g/L、微量元素溶液0.05~0.2%(v/v)。
在本发明的一些实施方式中,所述发酵条件为:光照强度(3~5)×(102~104)lx,温度28~32℃,接种量8~12%,培养时间4.5~7天,pH7.8~8.2,转速100~200rpm,通气量4~8m3/L。
在本发明的一些实施方式中,所述种子液中裂殖壶菌与螺旋藻的体积比为(1~2):(1~2)。
在本发明的一些实施方式中,发酵后进一步离心、干燥。
在本发明的一些实施方式中,所述离心为沉降式离心、管式离心。
在本发明的一些实施方式中,所沉降式离心条件为2800~3200rpm;所述管式离心条件为10000~14000rpm。
在本发明的一些实施方式中,所述干燥为38~42℃,22~28h。
本发明的第二方面,提供一种饲料添加剂,由本发明第一方面所述的制备方法制备而成。
本发明的第三方面,提供本发明第二方面所述饲料添加剂在制备动物饲料中的应用。
在本发明的一些实施方式中,所述动物为肉鹅。
本发明的第四方面,提供一种动物饲料,包含本发明第二方面所述的饲料添加剂。
在本发明的一些实施方式中,按重量份计,所述饲料中包含以下成分:构树28~32份、玉米粒28~32份、豆粕18~22份、碎米8~12份、盐0.5~1.5份、鱼粉2~6份、复合预混料3~7份、饲料添加剂0.5~1.5份。
在本发明的一些实施方式中,所述复合预混料每千克含:Fe 96~100mg,Zn 41~45mg,Cu 38~42mg,Mn 28~32mg,I 0.3~0.7mg,Se 0.2~0.4mg,维生素A 5200~5600IU,维生素D3 980~1180IU,维生素E18~22mg,泛酸2~4mg,维生素K3 1.5~2.7mg,烟酸0.8~1.2mg,维生B1 0.4~0.8mg,生物素0.07~1.11mg,维生素B12 0.004~0.008mg。
本发明的第五方面,提供本发明第四方面所述动物饲料的制备方法:将各成分混合均匀后即得所述动物饲料。
在本发明的一些实施方式中,所述饲料为颗粒饲料。
在本发明的一些实施方式中,所述颗粒饲料的粒径为0.5-1cm。
本发明的有益效果是:
申请人在分别对螺旋藻和裂殖壶菌进行培养,当发酵结束时,发现发酵液中还有大量的培养基原料没有被利用,但进一步优化减少培养基中的成分时,不仅不会被完全利用,还会影响生长,导致生物量和产物产量明显降低。而在优化复合发酵培养时可以大大减少培养基中的成分,生物量和产物产量差别不明显,证明了螺旋藻和裂殖壶菌复合发酵时,螺旋藻的培养基某些成分或者代谢物有利于裂殖壶菌对营养物质的利用,导致裂殖壶菌生物量和产物产量有少许提高,同时,裂殖壶菌的培养基成分或者代谢物也不对螺旋藻的生长代谢有影响,螺旋藻生物量和产物产量差别不大,二者适合复合发酵。
现有技术中利用裂殖壶菌发酵生产DHA,一直存在着培养基盐离子浓度高,DHA含量偏低,生产成本过高等问题,严重制约着该产业的发展。本发明解决了传统培养基中高盐的问题,利用螺旋藻培养基的协同作用,不但解决了裂殖壶菌培养基中的高浓度海水晶问题,还得到富含硒元素的螺旋藻。同时由于盐离子浓度相对较低,发酵废水的处理难度也下降明显。
本发明通过复合藻发酵一步制备富含硒和DHA的复合藻添加剂,明显缩短发酵时间同时节省了原料成本。生产的复合藻添加剂用于配方饲料,可保证饲料中硒和DHA的含量及其比例。
从肉鹅饲喂效果试验可以看出,日粮中添加富硒及富含DHA的复合藻添加剂可改善肉鹅免疫应答反应、抗病性、抗病毒和抗菌作用,维持肠道功能和益生菌定殖,可以增加肉鹅的日采食量,日增重也有所增加,料重比下降明显,提高了饲料转化率,从而改善肉鹅的生长发育和生产性能,并且在鹅肉中检测到了硒元素,达到了富硒效果;具有较高的应用价值。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述,以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然,所描述的实施例只是本发明的一部分实施例,而不是全部实施例,基于本发明的实施例,本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例,均属于本发明保护的范围。
裂殖壶菌种子培养:(1)培养基(g/L):葡萄糖35、酵母粉10、NaCl 8、NaNO3 1.0、MgSO4﹒7H2O 1.0、KH2PO4 0.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、微量元素溶液1ml;(2)培养条件:温度30℃,培养时间48h,摇床转速150rpm;得到裂殖壶菌种子液,种子液中的生物量约为100g/L。
螺旋藻种子培养:(1)培养基(g/L):葡萄糖25、酵母粉10、NaHCO3 8、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O 0.5、KH2PO4 0.3、KCl 0.2、CaCl2 0.1、微量元素溶液1ml;(2)培养条件:光照强度4×103lx、温度26℃,培养时间48h,摇床转速150rpm;得到螺旋藻种子液,种子液中的生物量约为5.5g/L。
微量元素溶液:CuSO4·5H2O 6.0g/L、NaI 0.08g/L、MnSO4·H2O 3.0g/L、Na2MoO4·2H2O 0.2g/L、H3BO3 0.02g/L、CoCl2 0.5g/L、ZnCl2 20.0g/L、FeSO4 7H2O 65.0g/L、生物素0.2g/L、98%H2SO4 5.0mL/L。
复合预混料每千克含:Fe 98.0mg,Zn 43.0mg,Cu 40.0mg,Mn 30.0mg,I 0.5mg,Se0.3mg,维生素A5400IU,维生素D3 1080IU,维生素E 20mg,泛酸3.0mg,维生素K3 2.1mg,烟酸1.0mg,维生B1 0.6mg,生物素0.09mg,维生素B12 0.006mg。
生物量的测定:取5mL发酵液,8000r/min离心10min去除发酵液,用蒸馏水洗涤两次后将菌泥转移至干燥恒重的称量皿中并放入烘箱,40℃烘干24h,取出后于干燥器中冷却至室温,称量至恒重,计算干重:菌体干重(g/L)=(实皿重-空皿重)×1000/5。
脂肪酸含量的测定:GB 5009.168-2016食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定。DHA含量的测定:准确称取0.1g的脂肪酸和适量的内标物二十烷酸,置于50mL磨口锥形瓶中,加入5mL的0.5mol/L的KOH-CH3OH溶液于65℃水浴回流至油滴消失,然后从冷凝管顶部加入5mL 30%的三氟化硼乙醚反应30min;冷却后加入5mL正己烷振荡,然后加入足量的饱和食盐水,静置分层后取上层正己烷相并加入无水硫酸钠脱水,过滤,所得样品即可进行气相色谱分析。气相色谱条件:选用HP-88色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)。采用程序升温:初始温度100℃,然后按20℃/min升温到180℃,再按15℃/min升温至220℃,保持30min;柱压0.0936MPa,进样口温度250℃,FID检测器温度260℃。
脂肪酸中DHA占比:DHA含量/脂肪酸含量。
总硒、有机硒、无机硒测定采用2,3-DAN荧光光度法。样品经强酸消化后,直接测定总硒,不经消化处理测定无机硒,两者之差为有机硒。培养液中不溶性硒于4℃、12000r/min离心10min收集,测定沉淀和上清液中可溶性总硒含量。
检测指标特别说明:生物量是指发酵液中的总菌量;脂肪酸、DHA、总硒、有机硒和无机硒为藻粉中的含量。
实施例1裂殖壶菌的发酵条件优化
试验1
裂殖壶菌30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖35、酵母粉10、NaCl 8、NaNO3 1.0、MgSO4﹒7H2O 1.0、KH2PO40.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、微量元素溶液1ml。
培养条件:温度30℃,pH7.5,培养时间168h,接种量10%,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验2
裂殖壶菌30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖35、酵母粉10、NaCl 12、NaNO3 1.0、MgSO4﹒7H2O 1.0、KH2PO40.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、微量元素溶液1ml。
培养条件:温度30℃,pH7.5,培养时间168h,接种量10%,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验3
裂殖壶菌30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖35、酵母粉10、NaCl 2、NaNO3 1.0、MgSO4﹒7H2O 1.0、KH2PO40.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、微量元素溶液1ml。
培养条件:温度30℃,pH7.5,培养时间168h,接种量10%,转速150rpm,通气量6.0m3/L。在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl溶液(浓度80g/L),培养至84小时停止流加。
对试验1~3发酵液中的生物量及藻粉的脂肪酸含量进行检测,检测结果见表1~表3。
表1试验1的生物量及藻粉的脂肪酸含量检测结果
Figure BDA0003718599990000051
Figure BDA0003718599990000061
表2试验2的生物量及藻粉的脂肪酸含量检测结果
Figure BDA0003718599990000062
表3试验3的生物量及藻粉的脂肪酸含量检测结果
Figure BDA0003718599990000063
试验1和试验2发酵条件基本一致,唯一不同的是试验1的培养基NaCl浓度为8g/L,试验2的培养基NaCl浓度为12g/L,从结果可以看出,无论是生物量、脂肪酸含量还是DHA含量,试验2的结果都明显优于试验1的结果,证明裂殖壶菌的发酵NaCl浓度较为关键,需要较高浓度的盐才能生长代谢。
试验2和试验3发酵条件基本一致,唯一不同的是试验2的培养基NaCl一次性添加,试验3的培养基NaCl初始浓度为2g/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl溶液(浓度80g/L),培养至84小时停止流加,两次试验NaCl的总用量基本相同。从结果可以看出,无论是生物量、脂肪酸含量还是DHA含量,试验2的结果和试验3的结果都类似,但试验2的最佳发酵时间为120h,试验3的最佳发酵时间为144h,明显试验3发酵时间更长,证明在单独培养裂殖壶菌时,流加NaCl没有优势,因为裂殖壶菌发酵需要高浓度的盐。
综上试验1、试验2和试验3,裂殖壶菌以试验2的发酵条件最佳。
实施例2螺旋藻的发酵条件优化
试验4
螺旋藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖25、酵母粉10、NaHCO3 8、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O 0.5、KH2PO40.3、KCl 0.2、CaCl2 0.1、微量元素溶液1ml、Na2SeO3 0.04。
培养条件:光照强度4×103lx、温度26℃,接种量10%,培养时间168h,pH8.5,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验5
螺旋藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖25、酵母粉10、NaHCO3 12、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O 0.5、KH2PO40.3、KCl 0.2、CaCl2 0.1、微量元素溶液1ml、Na2SeO3 0.04。
培养条件:光照强度4×103lx、温度26℃,接种量10%,培养时间168h,pH8.5,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验6
螺旋藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖25、酵母粉10、NaHCO3 2、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O 0.5、KH2PO40.3、KCl 0.2、CaCl2 0.1、微量元素溶液1ml、Na2SeO3 0.04。
培养条件:光照强度4×103lx、温度26℃,接种量10%,培养时间168h,pH8.5,转速150rpm,通气量6.0m3/L。在培养至48小时开始以100mL/h流加NaHCO3溶液(浓度80g/L),培养至84小时停止流加。
表4试验4的生物量及螺旋藻粉的硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000071
表5试验5的生物量及螺旋藻粉的硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000072
Figure BDA0003718599990000081
表6试验6的生物量及螺旋藻粉的硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000082
试验4和试验5发酵条件基本一致,唯一不同的是试验4的培养基NaHCO3浓度为8g/L,试验5的培养基NaHCO3浓度为12g/L,从结果可以看出,无论是生物量、还是有机硒含量,试验5的结果都明显优于试验4的结果,证明螺旋藻的发酵NaHCO3浓度较为关键。
试验5和试验6发酵条件基本一致,唯一不同的是试验5的培养基NaHCO3一次性添加,试验6的培养基NaHCO3初始浓度为2g/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaHCO3溶液(浓度80g/L),培养至84小时停止流加,两次试验NaHCO3的总用量基本相同。从结果可以看出,无论是生物量、还是有机硒含量,试验5的结果和试验6的结果都类似,但试验5的最佳发酵时间为120h,试验6的最佳发酵时间为168h,明显试验6发酵时间更长,证明在单独培养螺旋藻时,流加NaHCO3没有优势。
综上试验4、试验5和试验6,螺旋藻以试验5的发酵条件最佳。
实施例3复合藻的发酵条件优化
试验7
复合藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖60、酵母粉20、NaCl 12、NaHCO3 12、NaNO3 3.0、MgSO4﹒7H2O1.5、KH2PO4 0.65、KCl 0.7、CaCl2 0.6、NaSeO3 0.04,微量元素溶液2ml。
培养方法:光照强度4×103lx,温度30℃,接种量10%(种子液裂殖壶菌与螺旋藻体积比为1:1),培养时间168h,pH8.0,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验8
复合藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖45、酵母粉20、NaCl 8.0、NaHCO3 8.0、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O1.0、KH2PO4 0.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、NaSeO3 0.04,微量元素溶液1ml。
培养方法:光照强度4×103lx,温度30℃,接种量10%(种子液裂殖壶菌与螺旋藻体积比为1:1),培养时间5天,pH8.0,转速150rpm,通气量6.0m3/L。
试验9
复合藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖45、酵母粉20、NaCl 2.0、NaHCO3 2.0、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O1.0、KH2PO4 0.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、NaSeO3 0.04,微量元素溶液1ml。
培养方法:光照强度4×103lx,温度30℃,接种量10%(种子液裂殖壶菌与螺旋藻体积比为1:1),培养时间5天,pH8.0,转速150rpm,通气量6.0m3/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl和NaHCO3混合液(浓度均为80g/L),培养至84小时停止流加。
试验10
复合藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖45、酵母粉20、NaCl 2.0、NaHCO3 2.0、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O1.0、KH2PO4 0.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、NaSeO3 0.04,微量元素溶液1ml。
培养方法:光照强度4×103lx,温度30℃,接种量10%(种子液裂殖壶菌与螺旋藻体积比为2:1),培养时间5天,pH8.0,转速150rpm,通气量6.0m3/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl和NaHCO3混合液(浓度均为80g/L),培养至84小时停止流加。
试验11
复合藻30L发酵培养:
培养基(g/L):葡萄糖45、酵母粉20、NaCl 2.0、NaHCO3 2.0、NaNO3 2.0、MgSO4﹒7H2O1.0、KH2PO4 0.35、KCl 0.5、CaCl2 0.5、NaSeO3 0.04,微量元素溶液1ml。
培养方法:光照强度4×103lx,温度30℃,接种量10%(种子液裂殖壶菌与螺旋藻体积比为1:2),培养时间5天,pH8.0,转速150rpm,通气量6.0m3/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl和NaHCO3混合液(浓度均为80g/L),培养至84小时停止流加。
表7试验7的生物量及藻粉的脂肪酸和硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000091
Figure BDA0003718599990000101
表8试验8的生物量及藻粉的脂肪酸和硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000102
表9试验9的生物量及藻粉的脂肪酸和硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000103
表10试验10的生物量及藻粉的脂肪酸和硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000104
表11试验11的生物量及藻粉的脂肪酸和硒含量检测结果
Figure BDA0003718599990000105
Figure BDA0003718599990000111
试验7的培养基根据试验2和试验5的培养基简单叠加组成,从结果可以看出,菌种几乎没有生长,各种产物的含量非常低,证明菌种的共发酵不是简单叠加。
试验8的培养基综合查阅了相关文献资料和试验2、试验5和试验7的结果,对培养基进行了初步优化,考虑到菌种共发酵的相互之间协同作用,把很多培养基成分作了降低,结果明显比试验7结果好,各种产物的含量高了许多。
试验9的培养条件与试验8基本一致,不同的是试验8的NaCl和NaHCO3为一次性加入,试验9的培养基NaCl和NaHCO3初始浓度为2g/L,在培养至48小时开始以100mL/h流加NaCl和NaHCO3混合液,培养至84小时停止流加,最终两次试验NaCl和NaHCO3的总用量基本相同。从试验8和试验9可以看出,流加NaCl和NaHCO3混合液比一次性加入更有优势。
综上试验7、试验8和试验9,复合藻以试验9的发酵条件最佳。
试验10和试验11在试验9的基础上调整种子液的配伍,试验10种子液中裂殖壶菌与螺旋藻体积比为2:1,试验11种子液中裂殖壶菌与螺旋藻体积比为1:2,从结果可以看出,试验9、10、11的结果差别不大,证明两种菌之间几乎没有抗拒作用,互不影响之间的生长代谢。
综合考虑,复合菌的培养以试验9的培养条件最佳。
实施例4复合藻粉生产
1、离心脱水:将实施例3中试验9的复合发酵液经沉降式(3000rpm)、管式离心机二级离心(12000rpm),得菌体。
2、干燥:加2%甘油作保护剂,40℃烘干24h,即得复合藻添加剂。
实施例5
一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法,其特征在于按重量份组分如下:构树30份,玉米粒30份、豆粕20份,碎米10份、盐1份、鱼粉4份、复合预混料5份、复合藻添加剂0.5份。依次加入混合搅拌后倒入制粒机中制粒,制得粒径为0.5-1cm的颗粒饲料。
实施例6
一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法,其特征在于按重量份组分如下:构树30份,玉米粒30份、豆粕20份,碎米10份、盐1份、鱼粉4份、复合预混料5份、复合藻添加剂1份。依次加入混合搅拌后倒入制粒机中制粒,制得粒径为0.5-1cm的颗粒饲料。
实施例7
一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法,其特征在于按重量份组分如下:构树30份,玉米粒30份、豆粕20份,碎米10份、盐1份、鱼粉4份、复合预混料5份、复合藻添加剂1.5份。依次加入混合搅拌后倒入制粒机中制粒,制得粒径为0.5-1cm的颗粒饲料。
对比例1
一种富硒及富含DHA构树肉鹅饲料的制备方法,其特征在于按重量份组分如下:构树30份,玉米粒30份、豆粕20份,碎米10份、盐1份、鱼粉4份、复合预混料5份。依次加入混合搅拌后倒入制粒机中制粒,制得粒径为0.5-1cm的颗粒饲料。
效果例
为了更好地对比本发明制备的构树肉鹅饲料与现有的饲料对肉鹅生长的影响,发明人进行了以下对比试验。取80只长势健康,大小相似的雏鹅(重量在1-1.5kg),分成4组,每组20只,分别记为实施例5饲料效果试验、实施例6饲料效果试验、实施例7饲料效果试验、对比例1饲料效果试验。
试验时间为60天,试验期间,试验鹅自由饮水,每日饲喂2次(8:00-9:00,16:00-17:00),喂量以料槽内略有剩余为度。鹅舍舍温控制在25-32℃。
平均日增重:分别在试验起始、实验结束早上9点对鹅进行空腹称重,计算平均日增重。
平均日采食量:试验期间准确记录每天采食量,计算平均日采食量。
料重比:根据平均日增重和平均日采食量计算料重比,即料重比=平均日采食量(g)/平均日增重(g)。
表12肉鹅饲喂效果检测结果
Figure BDA0003718599990000131
从肉鹅饲喂效果试验可以看出,日粮中添加富硒及富含DHA的复合藻粉可改善肉鹅免疫应答反应、抗病性、抗病毒和抗菌作用,维持肠道功能和益生菌定殖,可以增加肉鹅的日采食量,日增重也有所增加,料重比下降明显,提高了饲料转化率,从而改善肉鹅的生长发育和生产性能,并且在鹅肉中检测到了硒元素,达到了富硒效果。
上述具体实施方式对本发明作了详细说明,但是本发明不限于上述实施例,在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外,在不冲突的情况下,本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (10)

1.一种饲料添加剂的制备方法,通过裂殖壶菌和螺旋藻混合发酵制备。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在发酵过程中流加NaCl和NaHCO3混合液;优选地,在发酵46~50小时后以80~120mL/h的流速流加NaCl和NaHCO3混合液,在发酵82~86小时停止流加。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述流加的混合液中NaCl的浓度为75~85g/L,NaHCO3的浓度为75~85g/L。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵的培养基包含如下组分:葡萄糖43~47g/L、酵母粉18~22g/L、NaCl 1.8~2.2、NaHCO3 1.8~2.2、NaNO3 1.8~2.2g/L、MgSO40.8~1.2g/L、KH2PO4 0.3~0.4g/L、KCl 0.4~0.6g/L、CaCl2 0.4~0.6g/L、NaSeO30.02~0.06g/L、微量元素溶液0.05~0.2%(v/v)。
5.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其特征在于,所述发酵条件为:光照强度(3~5)×(102~104)lx,温度28~32℃,接种量8~12%,培养时间4.5~7天,pH7.8~8.2,转速100~200rpm,通气量4~8m3/L。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,发酵后进一步离心、干燥。
7.一种饲料添加剂,由权利要求1~6任一项所述的制备方法制备。
8.一种动物饲料,包含权利要求7所述的饲料添加剂;优选地,所述动物为肉鹅。
9.根据权利要求8所述的动物饲料,其特征在于,按重量份计,所述饲料中包含以下成分:构树28~32份、玉米粒28~32份、豆粕18~22份、碎米8~12份、盐0.5~1.5份、鱼粉2~6份、复合预混料3~7份、饲料添加剂0.5~1.5份。
10.权利要求9所述的动物饲料的制备方法,将各成分混合均匀后即得所述动物饲料;优选地,所述饲料为颗粒饲料;所述颗粒饲料的粒径优选为0.5-1cm。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106333062A (zh) * 2016-08-31 2017-01-18 通威股份有限公司 一种裂殖壶菌固态发酵饲料原料提高附加值的方法
CN106833876A (zh) * 2017-01-20 2017-06-13 武汉净宇微藻科技有限公司 一种富含omega‑3多不饱和脂肪酸油脂添加剂的制备方法
CN108634116A (zh) * 2018-05-15 2018-10-12 贵州务川科华生物科技有限公司 一种构树饲料及其制备方法
CN110432400A (zh) * 2019-08-23 2019-11-12 江苏省农业科学院 一种提高育肥期采食量的肉鹅饲料及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106333062A (zh) * 2016-08-31 2017-01-18 通威股份有限公司 一种裂殖壶菌固态发酵饲料原料提高附加值的方法
CN106833876A (zh) * 2017-01-20 2017-06-13 武汉净宇微藻科技有限公司 一种富含omega‑3多不饱和脂肪酸油脂添加剂的制备方法
CN108634116A (zh) * 2018-05-15 2018-10-12 贵州务川科华生物科技有限公司 一种构树饲料及其制备方法
CN110432400A (zh) * 2019-08-23 2019-11-12 江苏省农业科学院 一种提高育肥期采食量的肉鹅饲料及其制备方法

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