CN115006312A - 一种抗炎抑菌组合物和应用及其含该组合物的制品和制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及口腔护理制品技术领域，具体涉及一种抗炎抑菌组合物和应用及其含该组合物的制品和制备方法。抗炎抑菌组合物的主要功效成分由0.001‑1份积雪草提取物和0.001‑2份槲蕨根茎提取物组成。本发明将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物相结合，二者组合使用，协同增效，有效抑菌，缓解口腔溃疡和牙龈炎症。本发明解决了现有技术中的利用植物提取物作为口腔护理用品抗菌消炎功效成分时，由于所需提取物种类多而造成的制备成本和工艺难度高的问题，还通过添加槲蕨来实现积雪草抗菌抗炎功效的协同增效。本方案的组合物可以抑制口腔细菌、清火、抗炎，且适合长期使用，还具有成本较低的特点，便于推广和长期使用。

Description

一种抗炎抑菌组合物和应用及其含该组合物的制品和制备 方法

技术领域

本发明涉及口腔护理制品技术领域，具体涉及一种抗炎抑菌组合物和应用及其含该组合物的制品和制备方法。

背景技术

民间的所说的口腔上火，一般是口腔溃疡、牙龈肿痛的表现。目前，口腔溃疡的病因及致病机制仍不明确。口腔溃疡的诱因可能是局部创伤、精神紧张、食物、药物、激素水平改变及维生素或微量元素缺乏，链球菌、幽门螺杆菌、白色念珠菌等也与口腔溃疡关系密切，由于口腔溃疡病程长且疼痛，常给患者带来不便和痛苦。牙龈炎症是发生在牙龈组织的急慢性炎症，中医常称作为“牙龈上火”，表现为牙龈红肿、出血，甚至疼痛不适，多因为菌斑、牙石、食物嵌塞、不良修复体、咬创伤等，如不及时干预或治疗，菌斑中滋生着大量毒力较大的牙周致病菌，使牙龈的炎症加重并扩延，将会导致更严重的牙周疾病，进一步出现牙齿甚至脱落，从而给患者日常生活带来不适和痛苦。

积雪草提取物具有清热利湿、解毒消肿之功效，主要成分为积雪草甙，积雪草酸和羟基积雪草酸。现代药理研究表明，积雪草甙具有较强的抗菌抗炎药理活性，可促进伤口愈合、刺激生物合成、抗胃溃疡等多种药理作用。目前，积雪草的提取物被广泛的应用于牙膏中，使得牙膏具有治疗口腔溃疡、抗炎作用。例如：中国专利CN103520049A公开了复方中药提取物在制备口腔护理保健品中的应用，涉及口腔护理技术领域，即在制备口腔护理品的工艺中将两面针提取物、益母草提取物、栀子提取物、积雪草提取物这四种中药提取物作为消炎止血作用的辅助药物原料加入口腔护理保健品中，具有明显的消炎止血作用。公开号CN107184492A公开了一种保健牙膏及其制备方法，保健牙膏中包括0.1-5wt％的中药材提取物，中药材提取物为黄芩提取液、积雪草提取液、板蓝根提取液、艾草提取液和黄菊花提取液的组合物，具有优异的抗敏、消炎以及镇痛的作用。上述专利技术虽然能够一定程度上达到消炎效果，但是使用到了除积雪草外大量其他种类的植物提取物，导致制备成本以及工艺难度增加。另外，积雪草提取物作为一种良好的抗菌抗炎物质，其在口腔清洁用品中的作用没有得到充分发挥。亟需研发一种能够充分发挥积雪草抗菌抗炎功效的用于口腔护理的产品，并同时降低工艺难度和生产成本。

发明内容

本发明意在提供一种抗炎抑菌组合物，以解决现有技术中的利用植物提取物作为口腔护理用品抗菌消炎功效成分时，功效有限且制备成本和工艺难度高的技术问题。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种抗炎抑菌组合物，其功效成分由积雪草提取物和槲蕨根茎提取物组成。

本方案的原理及优点是：

本发明采用中药提取物来抗炎抑菌，缓解“口腔上火”。中药是中国传统医学文化的瑰宝，人们对中药有一种特殊的偏爱，任何疾病的发生、发展过程都是致病因素作用于人体，致机体阴阳偏盛偏衰、脏腑经络功能失调的结果。若病情比较复杂，单味应用难以避免不良反应，往往需要同时使用两种及其以上的药物，可增强原有药效，抑制副作用等。寒热从药物性味来说，凡药物均有“气味之偏”，寒热互制是中药寒热配伍法则中的一种重要类型，可实现“扬长避短”，互制互用。

槲蕨是一种药用植物，也是蕨类植物的一种，这种植物的地下块状根能入药，能保健身体也能治疗疾病。槲蕨作为复方中药成分用于口腔疾病的治疗和卫生保健已有上千年历史，是在中药使用价值上比较高的植物。现代药理学研究表明，槲蕨别名骨碎补，水龙骨科植物，其性味苦、温，归肾、肝经。具有补肾，活血，止血，强骨，续伤止痛之功能。用于肾虚久泻及腰痛，风湿痹痛，齿痛，耳鸣，跌打闪挫，骨伤，阑尾炎，斑秃，鸡眼等。槲蕨主要含柚皮苷、新北美圣草苷等多种黄酮成分，其内在质量评价多以柚皮苷为指标，具有抑菌、止痛的效果。在本方案中，发明人首次将积雪草和槲蕨联合使用，相对于现有技术中的多种中药连用，获得了较为理想的效果，进而降低了原料的复杂程度、加工成本以及工艺复杂性。另外，积雪草提取物作为一种良好的抗菌抗炎物质，在槲蕨的协同作用下，其在口腔清洁用品中的作用得到了充分发挥。

发明人在研究中发现，积雪草提取物与槲蕨根茎提取物的单独使用，无法达到两者配合使用的最佳效果，二者组合使用达到协调增效的效果，有效抑菌，实现预防口腔溃疡、牙龈炎等口腔炎症的效果。并通过大量试验研究后，把握主次，相互为用，得到了配比关系，相比积雪草提取物、槲蕨根茎提取物单独使用的情况来讲，抑菌效果更优。

综上所述，与现有技术相比，本发明的优点在于：

1、将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物相结合，积雪草提取物具有抗炎、修复作用，能缩短血凝时间，具有药用价值的修复级别，可促进口腔溃疡的愈合；槲蕨根茎提取物具有抗菌、止痛作用和良好的抗氧化活性，抑制自由基反应，改善口腔健康，二者共同发挥功效，有效抑制口腔细菌，缓解牙龈炎和口腔溃疡等口腔炎症症状。

2、积雪草提取物和槲蕨根茎提取物主要的作用机理是抑制口腔细菌、清火、抗炎，能从根本上进行治疗，不会损害人体的各种免疫机能，适合长期使用。

3、积雪草提取物和槲蕨根茎提取物为较常见的药物，成本较低，便于推广和长期使用。

进一步，积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的质量比为0.001-1：0.01-2。在上述比例范围内，积雪草提取物和槲蕨根茎提取物可以较好地实现抗炎抑菌的效果，并且，在抑菌效果上呈现出协同增效的效应。

进一步，积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的质量比为0.01-0.1：0.1-1。采用上述质量比的积雪草提取物和槲蕨根茎提取物可以实现理想的抗炎抑菌的效果，并且实现了对原材料的节约。

进一步，所述积雪草提取物为粉末，其总苷含量≥50wt.％；所述的槲蕨根茎提取物为水溶液，其总黄酮(以柚皮苷计)≥4mg/ml。采用上述规格的积雪草提取物和槲蕨根茎提取物可确保功效成分含量，并实现协同抑菌抗炎的效果。

本方案还提供了一种抗炎抑菌组合物在口腔护理用品中的应用，所述口腔护理用品包括牙膏、漱口水、口香糖和口腔凝胶中的一种。本方案的抗炎抑菌组合物可以应用于口腔护理用品的制备的实践操作中，制备成为牙膏、漱口水、口香糖和口腔凝胶，实现抑制口腔细菌和治疗口腔炎症的制品。

本方案还提供了一种含抗炎抑菌组合物的制品，其100份原料中，包括0.001-1份积雪草提取物和0.01-2份槲蕨根茎提取物。将本方案的抗炎抑菌组合物制备为口腔清洁用品等制品，可以充分发挥重要提取物作用，抑制和治疗口腔验证，具有理想的应用前景。

进一步，一种含抗炎抑菌组合物的制品，当其为牙膏时，每100份原料包括积雪草提取物0.03-0.1份和槲蕨根茎提取物0.5-1份。在上述用量范围下，牙膏的抑菌抗炎效果最好，且稳定性佳。

进一步，一种含抗炎抑菌组合物的制品，当其为漱口水时，每100份原料包括积雪草提取物0.02-0.1份和槲蕨根茎提取物0.1-0.8份。在上述用量范围下，漱口水的抑菌抗炎效果最好，且稳定性佳。

本方案还提供了一种含抗炎抑菌组合物的制品的制备方法，所述制品为牙膏，包括以下依次进行的步骤：

S1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，45-55℃搅拌5min，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为1:2；

S2：先后在制膏机中甘油和粘合剂，均质后再加入山梨醇；均质后升温至45-55℃，再加入调味剂、表面活性剂、提取物分散液和水，均质后获得混合物料A；

S3：在混合物料A中加入摩擦剂后抽真空，均质后获得混合物料B；

S4：在混合物料B中加入香精，均质后真空脱气25min，真空度≥-900mmHg；冷却后获得牙膏。

本方案还提供了一种含抗炎抑菌组合物的制品的制备方法，所述制品为漱口水，包括以下依次进行的步骤：

S1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，45-55℃搅拌5min，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为1:2；

S2：将水、保湿剂、提取物分散液、甜味剂和表面活性剂混合均匀，获得水相；

S3：将香精、防腐剂搅拌混合均匀，搅拌过程中加入所述水相，过滤后获得漱口水。

采用上述制备方法，可以将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物制备成为商品化的口腔清洁用品(漱口水以及牙膏)。特别是在牙膏的制备过程中，具体的制备方式会影响积雪草提取物中功效成分(总皂苷)的稳定性。本方案的积雪草为纯度较高的粉末，总苷≥50wt.％，水溶性较差，加入槲蕨根茎提取物，再加入水，搅拌并通过加热快速形成积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的混合物，提高溶解性，温度控制在45-55℃可减少功效成分的损失。而增稠剂先在甘油分散、溶胀，使分子链呈伸展状态，再加入积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的混合物、配方中剩余的水、调味剂糖精钠、表面活性剂十二烷基硫磺酸钠，并加热均匀搅拌，可以减少溶解性较差的物质形成小颗粒，形成稳定性强的膏体结构，减少牙膏中功效成分如总苷随时间的衰减。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明，下述实施例以及实验例所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，且所用的材料、试剂等，均可从商业途径得到。

实施例1-7以及对比例1-8：一种含抗炎抑菌组合物的牙膏的制备

各实施例和对比例的原料及其质量如表1所示，单位：g，每个实施例的原料总量为100g。在实施例中，100份原料中含有0.001-1份积雪草提取物和0.01-2份槲蕨根茎提取物；优选为100份原料中含有0.01-0.1积雪草提取物和0.1-1份槲蕨根茎提取物；更优选为，每100份原料包括积雪草提取物0.03份、槲蕨根茎提取物0.5份，或者包括积雪草提取物0.05份、槲蕨根茎提取物0.5份，或者包括积雪草提取物0.1份、槲蕨根茎提取物1份。

在本实施例中，积雪草提取物(粉末)购买于桂林莱茵生物科技股份有限公司，总皂苷含量为72％(需保证：总皂苷≥50wt.％，总皂苷包括羟基积雪草苷、积雪草苷、积雪草苷-B)；槲蕨根茎提取物(水溶液)购买于云南英格生物技术有限公司，总黄酮(以柚皮苷计)为5mg/ml(需保证：总黄酮(以柚皮苷计)≥4mg/ml)。

表1：实施例和对比中原料组成情况(牙膏)

现以实施例2为例，具体来说明本实施例中牙膏的制备方法(实施例1-7，对比例1-7除了未加的原料步骤省略外，均采用该制备方法，简称为制备方法一)：

S1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，50℃搅拌5min(实际操作中可采用45-55℃搅拌4-6min)，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为1:2(实际操作中可采用0.8-1.2:1.5-2.5的质量比)。

S2：先后在制膏机中甘油和粘合剂，均质后再加入山梨醇；均质后升温至45℃(实际操作中可采用45-55℃，直接打开45-55℃热水循环即可)，再加入调味剂、表面活性剂、提取物分散液和水(余量)，均质后获得混合物料A。

S3：在混合物料A中加入摩擦剂后抽真空，均质后获得混合物料B

S4：在混合物料B中加入香精，搅拌均质，高真空脱气25min(实际操作可采用20-30min)，真空度不低于-900mmHg，冷却至室温，牙膏制备完成。

对比例8采用另一种制备方法(制备方法二，为传统制备方法)，具体如下：

S1：在制膏机里，加入保湿剂甘油、山梨醇，快速搅拌均匀，再依次加入糖精钠、积雪草提取物、槲蕨根茎提取物、表面活性剂十二烷基硫酸钠和水余量，并搅拌均匀。

S2：抽真空加入摩擦剂二氧化硅，增稠剂羧甲基纤维素钠，搅拌均匀。

S3：加入香精，本实施例中为水果香精，当然也可用其他香精替代，对产品无影响，搅拌均匀，脱气，牙膏制作完成。

比较了实施例2和对比例8获得的牙膏的各项参数，具体实验内容如下：积雪草总苷参照《中华人民共和国药典》2020年版一部积雪草总苷项下【含量测定】P431规定的方法进行检验，总苷含量以羟基积雪草苷、积雪草苷、积雪草苷-B三个成分的总量计。采用两种工艺制备的牙膏的外观与功效成分检验结果如表2所示。

表2：实施例2和对比例8的牙膏外观和功效成分含量检测结果

由表2实验结果可知，制备方法二和制备方法一最大的区别在于，没有事先将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物配制成为提取物分散液，以及增稠剂羧甲基纤维素钠的加入工艺时间点。上述区别导致了制备方法二的膏体外观不符合要求，并且，积雪草提取物中的功效成分不稳定，随着时间的增加，总苷的含量减少速度较快。

发明人进而对产生上述现象的可能的原因进行了分析：本方案的积雪草为纯度较高的粉末，总苷≥50wt.％，水溶性较差，加入槲蕨根茎提取物，再加入2倍质量的去离子水，搅拌5min，并通过加热快速形成积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的混合物，提高溶解性，温度控制在45-55℃可减少功效成分的损失。而增稠剂先在甘油分散、溶胀，使分子链呈伸展状态，再加入积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的混合物、配方中剩余的水、调味剂糖精钠、表面活性剂十二烷基硫磺酸钠，并加热均匀搅拌，可以减少溶解性较差的物质形成小颗粒，形成稳定性强的膏体结构，减少牙膏中功效成分如总苷随时间的衰减。从表2可以看出，采用制备工艺二制备的膏体外观光滑，且3个月45℃加速老化试验后的总苷衰减率可以控制在10％以内。

试验一：抑菌试验

白色念珠菌(Candida Albicans,C.a)是引起鹅口疮、口腔溃疡等的主要真菌，牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis，P.g)是引发牙周炎的主要细菌，利用纸片扩散法评估表1、表2的实施例1-实施例7、对比例1-对比例7的牙膏对白色念珠菌和牙龈卟啉单胞菌的抑菌能力。操作步骤如下：将50μL浓度为1.5×10⁶CFU/mL的P.g菌悬液均匀涂布于牛脑心浸液琼脂培养基(BHIA)上，共28个。将50μL浓度为1.0×10⁷CFU/mL的C.a菌悬液用均匀涂布于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，共28个。分别把14种实验牙膏以膏状约50mg均匀涂布于直径为6mm的无菌小圆滤纸片上，每种牙膏12片，以0.03mol/L PBS和0.2％的葡萄糖酸氯己定溶液分别作为阴性和阳性对照。将涂布一种牙膏的小圆滤纸片分为两组，每个平板贴同一种牙膏的3片，再贴阴性对照和阳性对照各一片，每组分别均匀对称地贴附于培养基上的中央区域(每种细菌各一个培养基，每个平板做一个平行，平行样之间的相对偏差不得超过5％)。最后将白色念珠菌的培养皿置于37℃的恒温培育箱中48h后观察结果，测定抑菌圈直径，将牙龈卟啉单胞菌的培养皿置于37℃的厌氧培养箱中，培养3-5天后，测定抑菌圈直径。重复3次实验，以3次平均值为抑菌直径。结果如表3所示。

表3：牙膏抑菌试验结果

由表3的实验数据可知：实施例1-7，随着积雪草提取物、槲蕨根茎提取物质量份数的逐渐增加，抑菌效果递增，在积雪草提取物、槲蕨根茎提取物的含量分别在0.1％、1％及以上时，抑菌效果出现稳定的平缓增长，不再增加显著。所以，积雪草提取物的含量在0.01-0.1％，槲蕨根茎提取物的含量在0.1％-1％，既保证了抗菌活性，还满足了节约物料的要求。更优选地，积雪草提取物的含量在0.03-0.1％，槲蕨根茎提取物的含量在0.5％-1％。

对比例1未使用两种提取物，抑菌圈的直径较小，抑菌效果差。对比例2和对比例3均只使用了槲蕨根茎提取物，对比例4和5均只使用了积雪草提取物。将实施例3(0.03积雪草提取物、0.5g槲蕨根茎提取物)、对比例2(0.5槲蕨根茎提取物)、对比例4(0.03积雪草提取物)相比较，针对牙龈卟啉单胞菌的抑制效果，三个实验组分别为18.25±0.32、11.75±0.28和10.35±0.24，将上述实验数据减去对比例1的7.75±0.24(未添加提取物的基础水平)，计算抑制效果增量。实施例3的增量为10.5，对比例2的增量是4，对比例4的增量是2.6，即实施例3的增量＞对比例2的增量+对比例4的增量，这说明积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的联合使用获得了协同增效的效应。同理，将实施例5、对比例3和对比例5相对比，也能发现积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的协同增效的效应。同理针对于白色念球菌，也能得到上述协同增效的结论。

对比例6中槲蕨根茎提取物的用量过高，积雪草提取物用量过少，两种物质之间的协同增效作用难以充分发挥。对比例7中积雪草提取物的用量过高，槲蕨根茎提取物的用量过少，两种物质之间的协同增效作用同样难以充分发挥。发明人分析这是因为槲蕨根茎提取物或积雪草提取物含量过高，一定程度上影响了膏体稳定性，导致槲蕨根茎提取物或积雪草提取物的生物利用度降低。同时也有两种物质配比不均衡，导致协同增效作用无法充分发挥的原因。

试验二：稳定性测试

牙膏放置于45℃恒温箱进行加速老化测试，观察其三个月稳定性(模拟室温3年，3年为市面牙膏常规保质期)。

表4：稳定性测试实验结果

由表4可知，牙膏在45℃加速试验三个月后，牙膏会出现稍微变色、稍微变味等现象，但不影响使用。综合抑菌试验和稳定性试验结果可以看出，实施例4的抑菌效果和稳定性较好，实施例3次之。对比例1-7，添加了积雪草提取物、槲蕨根茎提取物的抑菌效果优于不添加或单一添加的，二者配合使用可协同增效。由于提取物自带颜色和特征性气味，加上选用的水果香精里含有的天然甜橙油等成分，在45℃加速试验下，膏体出现轻微的变色、变味，属于正常现象，未发生明显变色、变味、分油现象，不影响保存寿命及使用，可判定通过膏体稳定性测试。但积雪草提取物用量高于1％时，牙膏在45℃加速试验三个月后，牙膏出现明显分油现象，槲蕨根茎提取物用量分别高于2％时，牙膏在45℃加速试验三个月后，牙膏会出现明显的变色、变味、分油等现象，影响保存寿命及使用，未通过膏体稳定性测试。分油可能是过多的活性成分等因素破坏了牙膏的胶体结构。

试验三：消除炎症效果测试

动物模型：取140只昆明小鼠，雌雄各半，体重约20-25g，平均分成7组，每组20只，于实验开始前将小白鼠的右耳正反面涂上二甲苯(单面50μL/只)，使其肿胀发炎，左耳不作处理作为空白对照，以蒸馏水处理作为阴性对照组，以实施例1-7的牙膏组合物处理作为实验组。

给予受试物：二甲苯致炎30min后，阴性对照组以蒸馏水处理，剂量0.1mL/只；实验组分别使用实施例1-7的牙膏组合物涂于肿胀处，剂量1g/只。

实验取材、称重：2个小时后，将小鼠断颈处死，将左右两只耳朵连根剪下，用生理盐水洗净右耳廓上的受试物，将左右双耳重叠，用8mm打孔器准确剪取相同面积的耳片，分别称重，按公式(1)求出每只小鼠的肿胀消除率，结果见表5。

公式(1)：肿胀消除率＝(右耳质量-左耳质量)/右耳质量×100％；

显效——肿胀消除率≥50％；

有效——肿胀消除率≥20％；

无效——肿胀消除率＜20％。

表5：有效率统计

组别	显效/只	有效/只	无效/只
				实施例1	4	13	3
实施例2	8	10	2
				实施例3	12	7	1
实施例4	14	6	0
				实施例5	15	5	0
实施例6	16	4	0
				实施例7	16	4	0

从表5中可以看出：实施例1-7的牙膏对小鼠耳朵的肿胀消除有效率大于85％，在积雪草提取物、槲蕨根茎提取物的含量分别在0.1％、1％及以上时，抗炎效果出现稳定的平缓增长，有效率达100％，显效率大于75％，具有良好的抗炎效果。

因此，当本发明含抗炎抑菌组合物用牙膏其原料的质量份数为积雪草提取物0.001-1份、槲蕨根茎提取物0.01-2份时，其抑菌抗炎效果均较好，在范围内二者协同增效抑菌，显效率明显提升。当其原料的质量份数为积雪草提取物0.03-0.5份(更优选0.03-0.1份)、槲蕨根茎提取物0.1-1份(更优选0.5-1份)时，其抑菌抗炎效果最好，且稳定性佳。考虑到产品的成本问题，同时，槲蕨根茎提取物为棕色液体，随着添加量的增加漱口水会颜色会加深，其实际使用时，为了保证理想膏体呈色，其原料的质量份数为积雪草提取物0.03-0.05份、槲蕨根茎提取物0.1-0.5份为最佳配比。

综合实施例1-7以及对比例1-7的实验结果，在积雪草提取物的含量在0.03-1％之间以及槲蕨根茎提取物的含量在0.5-2％之间时，牙膏的抑菌效果和抗炎效果都比较理想。但是，一旦积雪草提取物的含量≥0.1％以及槲蕨根茎提取物的含量≥1％，膏体稳定性以及外观等就会受到影响，因此，为了即获得理想的抑菌抗炎效果，又保证较好的外观，可以将积雪草提取物的含量控制在0.03-0.05％之间并将槲蕨根茎提取物的含量控制为0.5％。并且，在积雪草提取物的含量为0.03％以及槲蕨根茎提取物的含量为0.5％，槲蕨根茎提取物和积雪草提取物显示出了最为显著的协同作用(实施例5与实施例3相对比)。因此，两种中药提取物的协同效应的发挥受到两者浓度以及配比的非常显著的影响，发明人分析原因在于两种中药提取物的存在环境是在口腔护理用品之中，牙膏的其他原料的性能影响两种中药提取物协同效应的效率。如果积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的浓度过大，会对牙膏的其他原料以及膏体整体的稳定性产生影响，进而反过来影响积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的协同作用的发挥。因此，在特定的口腔护理用品的应用环境中，我们发现了积雪草提取物和槲蕨根茎提取物协同抗菌的作用规律，进一步将这种规律应用到产品的制备的实践操作中，获得了理想的效果，实现了抗菌消炎功效并且节约了原材料。

实施例8-14以及对比例9-15：一种含抗炎抑菌组合物的漱口水的制备

一种抗炎抑菌组合物的漱口水，各实施例的原料及其质量如表6所示，单位：g，每个实施例的原料总量为100g。

表6：实施例和对比中原料组成情况(漱口水)

以实施例9为例，说明本发明的制备方法：

制备步骤如下：

SS1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，50℃搅拌5min(实际操作中可采用45-55℃搅拌4-6min)，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为1:2(实际操作中可采用0.8-1.2:1.5-2.5的质量比)。

SS2：将水、保湿剂、提取物分散液、甜味剂和表面活性剂混合均匀成水相。

SS3：将香精、防腐剂搅拌混合均匀，搅拌过程中加入所述水相，过滤后获得漱口水。

其余实施例、对比例按照以上制作方法进行，除了未加的原料步骤省略外，其余操作方法均一致。

试验四：抑菌试验

利用纸片扩散法评估表7的实施例8-14和以及对比例9-15的漱口水对白色念珠菌和牙龈卟啉单胞菌的抑菌能力。操作步骤如下：将50μL浓度为1.5×10⁶CFU/mL的P.g菌悬液均匀涂布于牛脑心浸液琼脂培养基(BHIA)上，共28个。将50μL浓度为1.0×10⁷CFU/mL的C.a菌悬液用均匀涂布于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，共28个。将直径为6mm的无菌滤纸分别放入14种漱口水样品中浸透，夹出时在容器边缘停靠片刻，滤掉多余的漱口水，把滤纸片放在平板中凝好的培养基的中心，用镊子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴，每种漱口水侵染12片，以0.03mol/L PBS和0.2％的葡萄糖酸氯己定溶液分别作为阴性和阳性对照。将侵染一种漱口水的小圆滤纸片分为两组，每个平板贴同一种漱口水的3片，再贴阴性对照和阳性对照各一片，每组分别均匀对称地贴附于培养基上的中央区域(每种细菌各一个培养基，每个平板做一个平行，平行样之间的相对偏差不得超过5％)。最后将白色念珠菌的培养皿置于37℃的恒温培育箱中48h后观察结果，测定抑菌圈直径，将牙龈卟啉单胞菌的培养皿置于37℃的厌氧培养箱中，培养3-5天后，测定抑菌圈直径。重复3次实验，以3次平均值为抑菌直径。结果如表7所示：

表7：漱口水抑菌试验结果

对比例9未使用两种提取物，抑菌圈的直径较小，抑菌效果差。对比例10和对比例11均只使用了槲蕨根茎提取物，对比例12和13均只使用了积雪草提取物。将实施例10(0.02积雪草提取物、0.3g槲蕨根茎提取物)、对比例10(0.3槲蕨根茎提取物)、对比例13(0.02积雪草提取物)相比较，针对牙龈卟啉单胞菌的抑制效果，三个实验组分别为19.25±0.36、12.85±0.28和13.39±0.48，将上述实验数据减去对比例9的7.97±0.24(未添加提取物的基础水平)，计算抑制效果增量。实施例10的增量为11.28，对比例10的增量是4.88，对比例12的增量是3.34，即实施例10的增量＞对比例10的增量+对比例12的增量，这说明积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的联合使用获得了协同增效的效应。同理针对于白色念球菌，也能得到上述协同增效的结论。

试验五：稳定性测试

制备的漱口水放置于45℃恒温箱进行加速老化测试，观察其三个月稳定性(模拟室温3年，3年为市面漱口水常规保质期)。

表8：稳定性测试结果

由表7、表8可知，实施例8-14，随着积雪草提取物、槲蕨根茎提取物质量份数的逐渐增加，抑菌效果递增，在积雪草提取物、槲蕨根茎提取物的含量分别在0.1％、0.3％及以上时，抑菌效果出现稳定的平缓增长，不再增加显著，漱口水在45℃加速试验三个月后，漱口水会出现轻微变色、稍微变味等现象，由于提取物自带颜色和特征性气味，加上选用的水果香精里含有天然甜橙油等成分，在45℃加速试验下，膏体出现轻微的变色、变味，属于正常现象，未发生明显变色、变味、分油现象，不影响保存使命及使用，可判定通过膏体稳定性测试。综合抑菌试验和稳定性试验结果可以看出，实施例4的抑菌效果和稳定性较好，实施例3次之。对比例9-15，积雪草提取物、槲蕨根茎提取物的抑菌效果优于不添加或单一添加的，且两者单独使用其效果均不佳，只有两者配合使用时效果才可达到最佳。当积雪草提取物用量高于1％时，漱口水在45℃加速试验三个月后，漱口水会出现有悬浊物现象，可能是过多的活性成分破坏了体系的稳定性，槲蕨根茎提取物用量分别高于2％时，漱口水在45℃加速试验三个月后，漱口水会出现明显的变色、变味等现象，影响保存寿命及使用，未通过稳定性测试。

因此，当本发明含抗炎抑菌组合物用漱口水其原料的质量份数为积雪草提取物0.001-1份、槲蕨根茎提取物0.01-2份时，其抑菌抗炎效果均较好，当其原料的质量份数为积雪草提取物0.02-0.5份、槲蕨根茎提取物0.1-0.8份时，其抑菌抗炎效果最好，且稳定性佳，考虑到产品的成本问题，同时，槲蕨根茎提取物为棕色液体，随着添加量的增加漱口水会颜色会加深。其实际使用时，为避免膏体性状(例如颜色)发生变化，其原料的质量份数为积雪草提取物0.02-0.05份、槲蕨根茎提取物0.1-0.3份为最佳配比。

综合实施例8-14以及对比例9-15的实验结果，在积雪草提取物的含量在0.02-1％之间以及槲蕨根茎提取物的含量在0.3-2％之间时，牙膏的抑菌效果和抗炎效果都比较理想。但是，一旦积雪草提取物的含量≥0.1％以及槲蕨根茎提取物的含量≥0.8％，漱口水稳定性以及外观等就会受到影响，因此，为了即获得理想的抑菌抗炎效果，又保证较好的外观，可以将积雪草提取物的含量控制在0.02-0.05％之间并将槲蕨根茎提取物的含量控制为0.3％。并且，在积雪草提取物的含量为0.02％以及槲蕨根茎提取物的含量为0.5％，槲蕨根茎提取物和积雪草提取物显示出了最为显著的协同作用(实施例12与实施例10相对比)。因此，两种中药提取物的协同效应的发挥受到两者浓度以及配比的非常显著的影响，发明人分析原因在于两种中药提取物的存在环境是在口腔护理用品之中，漱口水的其他原料的性能影响两种中药提取物协同效应的效率。

以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体技术方案和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

Claims (10)

1.一种抗炎抑菌组合物，其特征在于：其功效成分由积雪草提取物和槲蕨根茎提取物组成。

2.根据权利要求1所述的一种抗炎抑菌组合物，其特征在于：积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的质量比为0.001-1：0.01-2。

3.根据权利要求2所述的一种抗炎抑菌组合物，其特征在于：积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的质量比为0.01-0.1：0.1-1。

4.根据权利要求3所述的一种抗炎抑菌组合物，其特征在于：所述积雪草提取物为粉末，其总苷含量≥50wt.％；所述的槲蕨根茎提取物为水溶液，其总黄酮以柚皮苷计≥4mg/ml。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的一种抗炎抑菌组合物在口腔护理用品中的应用，其特征在于：所述口腔护理用品包括牙膏、漱口水、口香糖和口腔凝胶中的一种。

6.一种含抗炎抑菌组合物的制品，其特征在于：其100份原料中，包括0.001-1份积雪草提取物和0.01-2份槲蕨根茎提取物。

7.根据权利要求6所述的一种含抗炎抑菌组合物的制品，其特征在于：当其为牙膏时，每100份原料包括积雪草提取物0.03-0.1份和槲蕨根茎提取物0.5-1份。

8.根据权利要求6所述的一种含抗炎抑菌组合物的制品，其特征在于：当其为漱口水时，每100份原料包括积雪草提取物0.02-0.1份和槲蕨根茎提取物0.1-0.8份。

9.根据权利要求6所述的一种含抗炎抑菌组合物的制品的制备方法，其特征在于：所述制品为牙膏，包括以下依次进行的步骤：

S1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，45-55℃搅拌4-6min，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为1:1-1:3

S2：先后在制膏机中甘油和粘合剂，均质后再加入山梨醇；均质后升温至45-55℃，再加入调味剂、表面活性剂、提取物分散液和水，均质后获得混合物料A；

S3：在混合物料A中加入摩擦剂后抽真空，均质后获得混合物料B；

S4：在混合物料B中加入香精，均质后真空脱气20-30min，真空度≥-900mmHg；冷却后获得牙膏。

10.根据权利要求6所述的一种含抗炎抑菌组合物的制品的制备方法，其特征在于：所述制品为漱口水，包括以下依次进行的步骤：

S1：将积雪草提取物和槲蕨根茎提取物分散于水中，45-55℃搅拌4-6min，获得提取物分散液；积雪草提取物和槲蕨根茎提取物的总质量与水的质量比为0.8-1.2:1.5-2.5；

S2：将水、保湿剂、提取物分散液和甜味剂混合均匀，获得水相；

S3：将香精、防腐剂、稳定剂搅拌混合均匀，搅拌过程中加入所述水相，过滤后获得漱口水。