CN114966028A - 一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用 - Google Patents

一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物医药技术领域，提供了一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用，该应用解决了现有技术中可用于结直肠癌检测的肿瘤标志物较少的问题。首先通过对结直肠癌患者肿瘤组织中胸腺素β10蛋白表达情况进行免疫评估，再通过分析胸腺素β10蛋白的表达量与患者病理学参数之间的相关性，最终作为肿瘤分子标志物用于结直肠癌检测。本发明通过分析免疫学指标胸腺素β10蛋白表达量对结直肠癌患者进行辅助诊断，为结直肠癌肿瘤标志物缺乏的现状提供一种快速、精确的检测方法。

Description

一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试 剂中的应用
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用。
背景技术
结直肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤之一。随着老龄化社会的到来和饮食结构的变化，结直肠癌的发病率呈现逐年升高和年轻化趋势。近年来结直肠癌筛查的广泛应用和治疗方式的不断进步，其早期患者的5年生存率已显著提升至81%，但晚期患者的5年生存率仍仅为14%。
目前结直肠癌患者的主要治疗方式是通过外科手术方法对恶性肿瘤进行切除。然而，大多数患者在首次诊断时即被确诊为晚期结直肠癌，外科手术对存在远处转移的晚期结直肠癌疗效较差。近年来，分子靶向治疗在提高晚期结直肠癌患者的临床疗效和生存率方面发挥着越来越重要的作用。晚期结直肠癌的治疗虽然取得了很大进展，但在抗肿瘤方面仍面临很大困难。与其它肿瘤类型相比，结直肠癌的早期诊断标志物及靶向治疗的靶点甚为局限，缺乏可供参考的国际标准。因此，深入探索结直肠癌的发生发展机理，对于临床发现早期诊断的分子标志和制定有效的临床干预措施显得至关重要。深入了解结直肠癌的致癌性机制，探索其潜在治疗靶点势在必行。
胸腺素β10是β胸腺素家族的重要组成部分。β胸腺素家族是胸腺素家族的一个亚家族，最早从胸腺中分离出来，是一个高度保守的5kDa多肽家族，广泛分布于人体器官和组织中，包括胸腺素β4、胸腺素β10和胸腺素β15等，其通过结合和隔离单体球形肌动蛋白以调节肌动蛋白的聚合，在控制细胞骨架微丝系统中发挥重要作用。此外，β胸腺素家族还参与组织再生、炎症调节和中枢神经发育等多种生理作用的调节。胸腺素β10基因位于染色体2p11，编码蛋白由43个氨基酸组成，主要定位于细胞质中，在结合肌动蛋白及细胞骨架组成中起重要作用，并参与细胞增殖、凋亡与血管生成等多种生理过程。
近期研究表明β胸腺素在多种癌症中广泛上调表达，β胸腺素家族在各种癌症的发生、发展及转移中起着重要的调控作用。如，胸腺素β4通过上调ILK激活的AKT通路和诱导上皮间质转化促进结直肠癌转移；通过调节胶质瘤细胞的侵袭性和干性，影响胶质瘤患者的总生存期。胸腺素β15A在转化生长因子β1处理的乳腺癌细胞中表达上调，并参与表皮生长因子诱导的前列腺癌细胞迁移。胸腺素β10在肾透明细胞癌组织的表达显著升高，促进了肾透明细胞的增殖和侵袭并与较差的临床预后相关；胸腺素β10通过AKT/FOXO通路促进乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移等。同时，胸腺素β10在脑胶质瘤、食管癌、肝癌等多种肿瘤内上调表达并参与癌症的发生发展，但目前胸腺素β10在结直肠癌中的表达及相关机制研究鲜有报道。
对胸腺素β10在结直肠癌中的作用及其调控机制进行研究，有助于了解胸腺素β10在结直肠癌恶性增殖过程中的作用，且胸腺素β10作为一个潜在的诊断和治疗靶点可能对结直肠癌患者的早期诊断和靶向治疗具有重要临床价值。然而，胸腺素β10与结直肠癌发生发展的关系研究鲜见报道。
发明内容
本发明针对现有技术中的问题，提供了一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用，为确定胸腺素β10表达水平与结直肠癌患者临床病理学参数的关系，探讨其作为肿瘤分子标志物在结直肠癌检测试剂中的应用价值。解决了现有技术中结直肠癌肿瘤分子标志物较少的技术问题。
本发明由如下技术方案实现的：本发明提供了一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用。
我们通过GEPIA在线数据库分析发现胸腺素β10基因在结直肠癌内的表达显著高于癌旁组织，免疫组化实验进一步证实胸腺素β10蛋白在结直肠癌中的表达显著高于癌旁正常组织，且胸腺素β10的表达与结直肠癌患者病理分期显著相关，提示胸腺素β10可能参与结直肠癌的发生发展。
对结直肠癌组织及癌旁对照组织中的胸腺素β10蛋白表达进行了的免疫组化分析显示，结直肠癌组织中胸腺素β10蛋白表达显著高于癌旁组织；胸腺素β10表达与结直肠TNM分期相关，II/III期均显著高于I期；提示胸腺素β10蛋白可能在结直肠癌的恶性增殖中起重要作用，可作为结直肠癌检测的一个潜在肿瘤标志物和抗肿瘤药物的一个潜在靶点。在此基础上，对胸腺素β10蛋白的功能进行了初步研究。在HT29和SW480两株结直肠癌细胞中敲除胸腺素β10基因后，直肠癌细胞的增殖被抑制，细胞周期被阻断在S/G2期，细胞凋亡率显著升高。上述结果提示，胸腺素β10与结直肠癌发生发展密切相关，在结直肠癌中作为促癌基因促进细胞增殖。
本发明通过对结直肠癌患者肿瘤组织中胸腺素β10蛋白表达情况进行免疫评估，然后分析胸腺素β10蛋白的表达量与患者临床病理学参数的相关性，以用于结直肠癌检测分析。
本发明和现有技术相比，本发明通过免疫学指标胸腺素β10蛋白表达量用于结直肠癌检测，为解决结直肠癌肿瘤分子标志物缺乏的现状提供一种快速、精准的检测方法。
附图说明
图1 为胸腺素β10在结直肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中的蛋白表达水平图，图中，A: 胸腺素β10在结直肠癌组织和癌旁正常组织的免疫组织图；B:结直肠癌组织及癌旁正常组织胸腺素β10免疫组织化学评分；C: 胸腺素β10在结直肠癌组织及其配对癌旁正常组织中的免疫组织化学评分；D：胸腺素β10在不同TNM分期结直肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中的免疫组织化学评分；
图2为ROC曲线筛选结直肠癌肿瘤组织中胸腺素β10表达阈值图；
图3为根据图2阈值划分胸腺素β10高表达和低表达在结直肠癌肿瘤和正常组织样本中所占比例图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
除非另有定义，所有在此使用的技术和科学术语，和本发明所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。
本领域技术人员意识到的通过常规实验就能了解到的描述的特定实施方案的等同技术，都将包含在本申请中。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的仪器设备，如无特殊说明，均为实验室常规仪器设备；下述实施例中所用的实验材料，如无特殊说明，均为由常规生化试剂商店购买得到的。
本发明实施例中所用的173例结直肠癌组织及癌旁正常组织均来自于山西省人民医院（山西医科大学附属第五医院），均为术前未经过新辅助疗法、化疗和放疗的首次进行手术切除治疗的患者。结直肠癌的临床分级参照美国癌症联合委员会及国际抗癌联盟指定的第8版TNM分级标准。结直肠癌组织及配对的癌旁正常组织样本制成组织芯片后进行免疫组化染色以分析相关蛋白表达水平。本实验已通过了山西省人民医院伦理委员会批准，所有样本的采集均通过了患者本人或家属同意并签署了知情同意书。
通过免疫组化染色法评估结直肠癌组织及癌旁正常组织中胸腺素β10蛋白的表达量。样本对应的详细临床病例资料如性别、年龄、吸烟史、淋巴结转移和TNM分期等情况详见表1。本研究所采用的数据采集和统计学分析方法为：所有统计及相应绘图采用SPSS15.0软件进行；分别使用Levene检验和Kolmogorov–Smirnov检验方差和正态性的数据同质性，Student的t检验分析结直肠癌及癌旁正常组织中胸腺素β10表达水平差异；利用受试者工作特征曲线（ROC曲线）被用于分析胸腺素β10蛋白高表达和低表达间的最佳分界值（阈值）；卡方检验用于胸腺素β10表达水平与临床信息的相关性分析；p < 0 .05被视为具有统计学差异。
表1：结直肠癌患者临床病例资料
Figure RE-RE-DEST_PATH_IMAGE001
本发明的实施例中所用到的试剂分别为：胸腺素β10抗体（美国Abcam）、二甲苯（天津市富宇精细化工有限公司)；无水乙醇（天津市大茂化学试剂厂）；DAB显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)；羊抗原鼠/兔二抗（福州迈新生物技术开放有限公司）；山羊血清（博士德生物工程有限公司）；苏木素染液（北京索莱宝科技有限公司）；柠檬酸盐修复液、石蜡、中性树脂、4%福尔马林等。
所用到的试剂和实验仪器与耗材为：高压灭菌锅（日本Panasonic公司）；组织芯片阵列蜡块制备仪（北京克洛伊科技有限公司）；显微镜（德国Olympus公司）；冰箱（中科美菱公司）；超纯水系统（Heal Force公司）；微量移液器（德国eppendorf公司）；振荡器（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；电热恒温鼓风干燥箱（上海智城分析仪器制造有限公司）；载玻片、盖玻片（江苏世泰实验器材有限公司）；切片机（德国徕卡公司）；全自动数字病理扫描设备（美国Aperio公司）；水平摇床（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）等。
实施例1：一种通过免疫组学分析肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10表达量以检测结直肠癌的方法。组织芯片在4℃环境中用100倍稀释的胸腺素β10抗体（抗兔单克隆抗体，货号：ab14338，美国Abcam公司）过夜孵育后，DAB显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）处理。采用Scanscope数字病理扫描系统(美国Aperio公司)分析结直肠癌组织及其癌旁正常组织细胞中胸腺素β10 蛋白的表达情况。
具体步骤如下：
一、组织芯片制备：
1、组织蜡块的制备：对结直肠癌组织和癌旁正常组织样本进行石蜡包埋处理以制为蜡块：10％中性福尔马林固定组织，梯度酒精脱水包埋为组织蜡块。
2、受体蜡块的制备:采用组织芯片蜡块制备仪制备8X4孔的组织芯片受体蜡块，孔间距为1 mm、内径为2.2 mm。
3、组织芯片蜡块制备:选取患者石蜡标本及HE染色玻片，通过HE染色玻片选取肿瘤组织与癌旁组织，并在相应石蜡块上做好对应标记。利用打孔套针(内径为2. 2mm)穿刺标记好的癌组织及癌旁组织，并放入制备好的受体蜡块小孔内。为便于定位需在受体蜡块左上角留有两个空白小孔。组织全部放入小孔内后需加热充分融合组织与受体蜡块以利于切片。
4、组织芯片制备: 组织芯片蜡块制作完成后，利用石蜡切片机常规连续切片，厚度为2μm，置于水中，迅速利用3-氨丙基-3-甲氧基硅烷处理的载玻片捞取切片，全部敷贴完毕后放入恒温箱中，70 ℃过夜。
二、免疫组织化学染色：
1.脱蜡：免疫组化中为使抗原抗体能够反应，需脱除组织芯片中的石蜡，将所有切好的片子放入70 ℃恒温箱中10分钟。取出后需经过一系列二甲苯及梯度乙醇的脱蜡，其具体步骤及时间如下：
二甲苯中浸泡10min，二甲苯中浸泡10min，二甲苯中浸泡10min，无水酒精浸泡2min，无水酒精浸泡2min，90%酒精浸泡2min，80%酒精浸泡2min，70%酒精浸泡2min。
2、阻断内源性过氧化物酶：因内源性过氧化物酶会影响后续DAB显色反应，所以需利用3%双氧水阻断其发挥作用，将脱蜡后的所有组织芯片切片置于3% H2O2中15min，（时间比较严格，若双氧水放置时间稍长，时间可调整至20min）以使组织细胞中存在的过氧化物酶失活，减少非特异性染色。
3、洗片：双氧水中取出切片，用三蒸水充分冲洗5min，完毕后，利用PBS冲洗3次，每次2min。
4、抗原修复：组织芯片中的组织利用固定剂包埋时，其内部的蛋白抗原决定簇被甲醛等固定剂封闭，从而影响到抗原与抗体的结合，影响最终实验结果。为使抗原充分暴露，需通过抗原修复的方法。我们高压热修复将盛有pH6. 0构椽酸钠液的高压锅煮沸，之后将冲洗后的全部组织芯片置入其中，温度约120 ℃，时间约2min，根据抗原类型，选择不同时间。然后等待其冷却。
5、清洗：将冷却后的组织芯片取出，三蒸水洗片5min，PBST清洗3次，每次2min。
6、抗原暴露及抗原修复：组织切片浸入PH6.0的枸橼酸盐缓冲液高压热修复120℃2min，自然冷却至15-30℃；PBST清洗3次，每次2min。
7、孵育抗体：加入配制好的胸腺素β10一抗（1：100稀释），抗体工作液全部覆盖组织，置入冰箱4 ℃孵育过夜后取出芯片；于室温复温1小时后，利用配制好的PBST清洗3次，每次10min，充分冲洗未结合的抗体及杂质；清洗完毕后，向芯片中组织上加入相应二抗，37℃孵育20min，根据抗原类型，选择不同时间，使一抗与二抗充分反应。
8、清洗：反应完毕后，利用PBST冲洗3次，每次5min。
9、DAB显色：清洗完毕后，用移液器取1ml DAB底物液置于1.5ml的避光EP管中，在避光条件下滴加一滴DAB液于EP管，充分混匀。吸取适量显色工作液，迅速准确滴于组织切片上，具体方法同一抗，借助显微镜观察染色强度，及时控制时间，镜下观察3-5min细胞质变淡黄色后，自来水终止显色反应。
10、苏木素复染：
①因放置的苏木素中会存在结晶，影响显色效果，故使用前需将结晶捞取干净；
②将组织芯片浸入处理过的苏木素中1min10s，取出后可以观察到样本染为蓝色，显示染色效果较好；
③将取出后的组织芯片用自来水充分清洗，去除芯片上的苏木素；
④取出后置于盐酸乙醇中，迅速取出；
⑤再次过自来水缸，清洗芯片上残留的盐酸乙醇；
⑥观察芯片颜色，若稍浅，可置于氨水中返蓝，若颜色过浅，可将芯片重新置于苏木素中染色。苏木素复染：将组织切片移至金属染色架上，置于苏木素染液体缸中复染1分钟，然后将组织切片置于自来水中终止染色。
11、脱水：为利于封片及保存组织芯片，需将芯片组织中的水分去除干净，方法如下：70%酒精5min，80%酒精5m i n，90%酒精5min，无水酒精l0min，无水酒精10min，二甲苯10min，二甲苯10min，二甲苯10min。
12、封片：中性树脂封片：将组织芯片进行通风处理，充分挥发组织切片残留的二甲苯；中性树脂滴于芯片中心后缓慢平铺盖玻片，使组织完全被中性树脂封闭，且不留气泡，待切片完全干燥后镜下观察并保存。
13、使用Aperio公司的病理芯片扫描系统ScanScope 对免疫组织化学染色后的组织芯片进行扫描后，采用AperioCytoplasma 2.0软件分析细胞浆中胸腺素β10蛋白的表达情况。
高倍镜下(200x)观察并分析每个样本后随机选取的5个视野，AperioCytoplasma2.0软件会对每一例样本得出一个值，这个值代表胸腺素β10蛋白的阳性强度。样本中胸腺素β10蛋白的表达用TMSB10蛋白的阳性百分率与阳性强度的乘积来表示，即H-score 值。
14. 统计学分析：分别使用Levene检验和Kolmogorov–Smirnov检验方差和正态性的数据同质性，Student的t检验结直肠癌及癌旁正常组织中胸腺素β10表达水平差异；利用受试者工作特征曲线（ROC曲线）被用于分析胸腺素β10蛋白高表达和低表达间的最佳分界值（阈值）；卡方检验用于胸腺素β10表达水平与临床信息的相关性分析；p < 0 .05被视为具有统计学差异。
实验结果：本研究通过收集山西省人民医院173例结直肠癌患者的石蜡标本制作组织芯片，并利用免疫组化检测了结直肠癌及其癌旁正常组织细胞中胸腺素β10蛋白的表达。结果显示，胸腺素β10定位在细胞质中，在结直肠癌组织和癌旁组织中均有不同程度的表达；t检验分析显示胸腺素β10在结直肠癌组织中的平均表达量明显高于癌旁组织（H-score 平均值±标准差分别为31.60 ± 2.25和5.39 ± 0.77，图1A-B），且具有统计学显著性差异（p < 0.0001）。根据绘制的ROC曲线（AUC=0 .866 , P=0 .000 , 95% 可信区间:0.822-0 .910; 图2），选取H值13.9904作为分界阈值，将所有的癌组织样本分为胸腺素β10低表达组(H值≤ 13.9904)和胸腺素β10高表达组 (H值 >13.9904 )。秩和检验结果显示在癌组织及癌旁正常组织中高低两组的分配存在明显差异，其中结直肠癌癌组织中胸腺素β10普遍高表达，而癌旁正常组织则普遍低表达（图3）。
表2为胸腺素β10的表达情况及其与结直肠癌患者临床病理资料相关性分析。表2结果显示，癌组织内胸腺素β10蛋白表达水平与患者年龄(P=0 .638 ,χ2 =0.222)、性别（P=0 .861,χ2 =0.031）、分化程度（P=0.296 ,χ2 =2.438）、吸烟史（P=0 .731 ,χ2 =0.135）、饮酒史(P=0.546 ,χ2=0.364)、浸润深度（P=0 .235 ,χ2 =4.255）、远处转移（P=0 .0.896 ,χ2=0.017）无显著相关性，而与淋巴结转移（P=0 .046 ,χ2 =6.141）和临床分期（P=0 .041 ,χ2 =4.166，I + II vs III + IV）显著相关；表明胸腺素β10蛋白表达水平与年龄、性别、组织学分化、吸烟史、饮酒史、浸润深度和远处转移无关，但与淋巴结转移和临床分期相关。
表2：胸腺素β10蛋白表达情况及其与结直肠癌患者临床病理资料相关性
Figure RE-391628DEST_PATH_IMAGE002
综上，结直肠癌免疫组织化学结果显示：结直肠癌肿瘤样本中胸腺素β10表达量显著高于癌旁正常组织 (31.60 ± 2.25 vs 5.39 ± 0.77，p<0 .0001)；
胸腺素β10蛋白表达与淋巴结转移（Χ2=6.141，p=0 .046）和临床分期（Χ2=4.166，p=0 .041, I+II vs III+IV）显著相关。
本发明通过免疫组化试验，对胸腺素β10表达情况与结直肠癌患者临床病理参数关系进行研究。观察到胸腺素β10的表达在肿瘤组织中要明显高于正常对照组织。胸腺素β10的高表达水平和患者癌症的临床分期，淋巴结有无转移显著有关。同时，对该蛋白在结直肠癌中的深入研究有望揭示结直肠癌新的癌变机理，为鉴定结直肠癌新的早诊标志物及设计新的抗肿瘤治疗方案提供理论基础。
本发明是一种将免疫学指标胸腺素β10蛋白作为肿瘤标志物用于结直肠癌检测的应用，即根据结直肠癌患者肿瘤组织中胸腺素β10蛋白表达的高低直接确定患者的应用。
以上所述仅是本发明的实施方式的举例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (2)

1.一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在结直肠癌患者癌组织中特异性表达水平上调。
CN202210477609.2A 2022-04-29 2022-04-29 一种肿瘤特异性抗原蛋白胸腺素β10在制备结直肠癌检测试剂中的应用 Pending CN114966028A (zh)

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115436636A (zh) * 2022-11-08 2022-12-06 济南市中心医院 连接粘附分子样蛋白jaml在结直肠癌中的应用

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CN115436636A (zh) * 2022-11-08 2022-12-06 济南市中心医院 连接粘附分子样蛋白jaml在结直肠癌中的应用

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