CN114949037B - 黄芩黄酮类提取物在抑制鸭源鸡杆菌中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于家禽养殖技术领域,具体公开一种黄芩黄酮类提取物在抑制鸭源鸡杆菌中的用途。经体外抑菌试验证明,黄芩黄酮类提取物在体外对鸭源鸡杆菌在1~100mg/mL浓度范围内有良好的抑菌效果。经临床试验证明,黄芩茎叶及黄芩根均可以改善患病蛋鸡的呼吸道症状,恢复蛋鸡生产水平,减低肺部炎性细胞水平。
Description
技术领域
本发明属于家禽养殖技术领域,具体公开一种黄芩黄酮类提取物在抑制鸭源鸡杆菌中的用途。
背景技术
蛋鸡呼吸道疾病是养禽业常见疾病,主要症状包括甩头流涕、打喷嚏、咳嗽、“呼噜”音、啰音、呼吸困难等,由于禽类呼吸系统与哺乳动物不同,气管较长,易造成外界有害物质入侵以及细菌病毒等微生物感染,发病后导致分泌物在气管沉淀,影响鸡群的正常生长发育,导致产蛋量严重下降,甚者导致蛋鸡死亡,大规模流行感染,严重影响生产。
从中医理论来讲,蛋鸡呼吸道疾病发病原因主要包括风寒犯表型、风热犯表型、暑湿相袭型、热毒炽盛型四种类型。从现代医学来讲能引发蛋鸡呼吸道疾病的常见原因有多种,包括禽霍乱鸡败血症支原体、禽结合、分枝杆菌、传染性鼻炎、鸡绿脓杆菌病,鸡滑液支原体病等细菌性疾病;禽流感、新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎等病毒性疾病以及鸡隐孢子虫病等寄生虫病。还会因环境和饲养管理等因素引发继发性感染,包括鸡舍卫生不良导致霉菌毒素感染、通风不佳空气不流通导致有害气体堆积、氨气过重、或因季节交替保温不当、鸡舍寒冷干燥导致应激及免疫力下降。蛋鸡呼吸道疾病呈季节多发性,分为慢性和急性两种类型,可长期存在,反复发病,还伴随多种病原混合感染造成严重损失。鸡杆菌属是巴氏杆菌科中的属,鸭源鸡杆菌是鸡杆菌属的代表种,是家禽上呼吸道和下生殖道的常在菌,该菌可参与感染产蛋家禽,与之相关的疾病有蛋鸡腹膜炎、产蛋性能下降且偶尔增加死亡率。
在目前集约化养殖中,蛋鸡呼吸道疾病主要有老兵不断、新病频发等问题,普遍存在多种病原混合感染现象,传统抗生素、疫苗以及化药治疗存在易产生耐药性、保护效率低、针对性低、不易根治等诸多问题。通过中兽医辩证分析思路,对蛋鸡呼吸道疾病进行“对症治疗”,与针对病原治疗不同,更注重于“病症”,不局限于单一致病病原,更具有广泛性。
黄芩具有清热燥湿、泻火解毒的功效,目前黄芩已有较为成熟的治疗呼吸道感染、咽喉肿痛、清热解毒的产品,例如双黄连口服液、青金散、银黄提取物口服液、黄芩可溶粉等,用于治疗肺热咳喘、宣肺燥湿、利咽解毒、风热犯肺等多种症状;黄芩对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌以及流感病毒、呼吸道合包病毒、新城疫病毒及传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒等多种呼吸道致病原有良好的抑制效果,且其对抗肺炎及抗氧化功效明显。黄芩根部及黄芩茎叶中均含有丰富的黄酮类化合物,其具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、清除自由基、改善记忆、降压降血脂、保肝、增强免疫力等作用,但黄芩黄酮类提取物对鸭源鸡杆菌的抑制作用尚未见报道。
发明内容
鉴于以上技术问题,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了黄芩黄酮类提取物在抑制鸭源鸡杆菌中的用途。
优选地,所述黄芩黄酮类提取物用于制备治疗和/或预防家禽呼吸道疾病的药物。
优选地,所述黄芩黄酮类提取物用于提高家禽产蛋性能。
优选地,所述黄芩黄酮类提取物提取分离自黄芩植株的根部和/或茎叶。
本发明还提供一种用于抑制鸭源鸡杆菌的药物,其包括所述黄芩黄酮类提取物。
本发明还提供一种用于治疗和/或预防家禽呼吸道疾病的药物,其包括所述黄芩黄酮类提取物。
本发明还提供一种用于提高家禽产蛋性能的药物,其包括所述黄芩黄酮类提取物。
优选地,上述任一项所述的药物中还包括药学或兽药学上可接受的辅料或载体。
对比现有技术,本发明的有益效果为:
1、本发明经体外抑菌试验证明,黄芩黄酮类提取物在体外对鸭源鸡杆菌在1~100mg/mL浓度范围内有良好的抑菌效果。
2、本发明经临床试验证明,黄芩茎叶可以改善患病蛋鸡的呼吸道症状,恢复蛋鸡生产水平,减低肺部炎性细胞水平,和黄芩根部有相同效果,对以呼吸道症状为主的疾病有良好的治疗作用,且日粮添加量为125.56mg/kg的黄芩茎叶提取物对感染呼吸道疾病的蛋鸡的治疗效果最佳。
附图说明
图1是用药12d后的蛋鸡进行临床症状打分结果;
图2是各组对感染呼吸道疾病蛋鸡生产性能影响;A、试验12d内产蛋率变化;B、试验12d内异常蛋率变化;C、用药12d后各组产蛋率统计情况;D用药12d后各组异常蛋率统计情况;
图3是各组治疗前后肺组织H&E染色;
图4是各组治疗前后mage J定量分析肺组织炎性细胞面积;
图5是蛋鸡临床病理症状及产蛋情况;A、咳嗽;B、气管出血;C、肺部黑色斑点;D、异常蛋;
图6是病毒鉴定结果;
图7是病原菌菌落形态及革兰氏染色;A、细菌在血平板上单菌落形态;B、细菌革兰氏染色染色形态;
图8是细菌生化鉴定结果图;
图9是病原菌抗生素敏感试验;
图10是细菌16S rRNA鉴定及进化树分析;A、气管分离病原细菌16S rRNA鉴定;B、分离菌Blast进化树分析;
图11是病原菌生长曲线;
图12是不同浓度黄芩茎叶提取物对鸭源鸡杆菌体外抑菌试验;A、菌落抑制状态图;B、菌落抑制统计图。
具体实施方式
为了便于理解本发明,现结合具体实施方式对本发明作进一步说明,以进一步诠释本发明,但不构成对本发明的任何方式的限制。
1、试验动物的选择及试验设计
选取360日龄128只患有咳嗽、流涕、呼吸带有“呼噜”音呼吸道症状的海兰褐蛋鸡作为实验动物,随机分为4组,每组4个重复,每个重复8只,将药物按照表1中所示剂量分别加入对照组、黄芩茎叶粉末组、黄芩根部粉末组、黄芩茎叶提取物组日粮中,混匀。预饲喂3d,正式饲喂12d,整个试验周期15d。
其中,黄芩茎叶提取物的主要活性成分为黄酮类物质,具体是按照以下方法制备得到:称取黄芩干燥茎叶的粉末,加入相当于其重量30倍量的质量分数50%乙醇溶液,超声提取3次,每次2h,合并3次提取液的滤液,在1500rmp/min下离心10min,取上层液体,干燥,即得。
表1各处理组日粮组成
处理组 | 日粮组成 |
对照组 | 基础日粮+0mg/kg药物 |
黄芩茎叶粉末组 | 基础日粮+760mg/kg黄芩茎叶粉末 |
黄芩根部粉末组 | 基础日粮+190mg/kg黄芩根部粉末 |
黄芩茎叶提取物组 | 基础日粮+125.56mg/kg黄芩茎叶提取物 |
2、蛋鸡饲养管理
试验动物采用笼养方式,分为三层阶梯型,按照北京市平谷区北京青年养殖场饲养方式,每天7:30、10:00、14:00、17:30喂食4次,蛋鸡自由采食,饮水,每天11:30收集鸡蛋并进行检查记录,鸡舍内人工光照,机械通风,每周消毒1~2次,其余均依照蛋鸡饲养管理常用方法进行。
3、样品采集与处理
试验开始后每天收集鸡蛋,并记录每组产蛋数量和异常蛋数量,并计算产蛋率及异常蛋率。观察监测蛋鸡健康状况、采食量及粪便的排泄情况,观察蛋鸡临床症状及病理变化。于试验第0d和第12d每组随机选取8只(每个重复2只)进行剖检,无菌采取肺组织,后续待用。
产蛋率=(产蛋总数/鸡总数)×100%
异常蛋率=(软、破蛋数/产蛋总数)×100%
4、临床症状观察
在用药12d后,根据蛋鸡呼吸道疾病症状设置打分表,由于该蛋鸡场为集约化饲养不易观察单一动物情况,以每个重复组为单位,对蛋鸡临床症状进行打分,若该重复内90%蛋鸡未出现该症状,判断为痊愈,50~90%蛋鸡未出现症状判断为明显改善,10~50%蛋鸡未出现该症状判断为稍改善,10%以下蛋鸡出现该症状判断为无效,临床打分标准如表2所示。
表2蛋鸡临床症状打分表
5、肺组织病理切片制作
5.1、组织切片
将剖检后的肺组织固定在4%多聚甲醛溶液中,固定24h以上,将固定好的组织从10%多聚甲醛中取出,取病变明显部位,切成大小适中的组织块放入包埋盒中,放入烧杯内自来水冲洗过夜。将过夜冲洗后的组织进行乙醇梯度脱水,70%乙醇溶液浸泡1h,80%乙醇溶液浸泡40min,90%乙醇溶液浸泡40min,95%乙醇溶液浸泡30min,100%无水乙醇溶液浸泡30min,100%无水乙醇溶液再次浸泡30min,将组织完全脱水处理。将脱水后的组织放入二甲苯∶无水乙醇=1∶1的混合液中浸泡20min,100%二甲苯溶液中20min重复两次,进行组织透明处理,将透明处理后的组织放入包埋机中进行组织包埋,包埋后组织放入4℃保存。用切片机将组织块切成薄片,并用摊片机烤干后放置37℃烘箱中过夜烘干。
5.2、苏木素--伊红染色法染色
烘干后的组织切片进行脱蜡处理,放入二甲苯溶液中10min重复两次,二甲苯∶无水乙醇=1∶1混合液中5min,无水乙醇溶液5min重复两次,95%乙醇溶液5min,80%乙醇溶液5min,70%乙醇溶液5min,蒸馏水5min后取出进行苏木素--伊红染色法,放入苏木素染液浸泡10min,流水冲洗5min清除切片上的蓝色,用1%盐酸酒精分色1s后自来水冲洗40min,70%乙醇溶液浸泡5min,80%乙醇溶液浸泡5min,伊红染色1min后用自来水冲洗直至洗去所有染色,放入95%乙醇溶液中浸泡1min,无水乙醇浸泡1min重复两次。将染色后的切片进行透明处理,放入无水乙醇:二甲苯=1:1的混合液中2min,二甲苯溶液浸泡5min重复两次后自然风干,用中性树胶封片后室温下自然凉干24h,然后通过光学显微镜观察样品。
6、数据处理
试验结果采用Graphpad Prism 8软件进行统计分析,病理切片使用Image J分析。以P<0.05表示差异显著、P<0.01表示差异极显著、P>0.05表示差异不显著。
7、试验结果
7.1、对鸭源鸡感染蛋鸡临床症状影响
根据表2打分标准,对用药12d后的蛋鸡进行临床症状观察如图1所示,三个用药组对咳嗽、“呼噜”音症状有明显改善,对流涕、甩头等症状稍有改善,经药物治疗后,呼吸道症状有了明显效果,流涕、甩头症状基本痊愈,黄芩茎叶提取物的治疗效果最佳,但对“呼噜”音症状改善效果不佳。
7.2、对患有呼吸道疾病蛋鸡生产性能影响
如图2A所示,0~12d对照组产蛋率呈下降趋势,除对照组外,各用药组产蛋率均呈上升趋势,其中黄芩茎叶提取物组增长最高。
如图2C所示在用药12d后,各用药组与对照组产蛋率均差异显著增加。
如图2B所示各组异常蛋率在试验前3d均成升高趋势,对照组在3d后异常蛋率持续升高,用药组在试验3d后缓慢降低,各试验组效果差异不大。
如图2D所示,与对照组相比,各用药组异常蛋率显著下降,用药12d后,各用药组均对产蛋鸡产蛋情况有所增加,异常蛋情况有所减少,对蛋鸡生产性能有所恢复,黄芩茎叶粉末、黄芩根部粉末及黄芩茎叶提取物三种药物治疗效果相当,黄芩茎叶提取物效果最佳。
7.3、对患有呼吸道疾病蛋鸡肺组织影响
通过H&E染色观察不同处理组蛋鸡肺部的变化。
如图3所示,经显微镜观察治疗前蛋鸡自然感染疾病后肺组织有明显的充血和实质病变,炎性细胞浸润明显,肺部伴有炎症反应发生,在治疗后,对照组炎性细胞面积增加,病变更为严重,用药肺泡空腔面积增加,肺泡结构更加完整、充血减少,炎性细胞减少。
如图4所示,经Image J分析炎性细胞面积可知,与治疗前相比,黄芩茎叶粉末、黄芩根部粉末、黄芩茎叶提取物粉末治疗后可显著降低炎性细胞面积,证明经三种药物治疗后,对感染呼吸道疾病的蛋鸡有明显改善作用。
根据体内试验结果可知,黄芩茎叶针对该鸡场发病所产生的主要呼吸道临床症状有较好的作用,主要改善咳嗽、“呼噜”音症状,对于流涕、甩头症状有轻微改善,还可改善由疾病引发的生产性能下降症状,恢复蛋鸡的生产性能。
通过进一步对肺部病理切片进行分析发现,黄芩茎叶还可以降低肺部炎性细胞面积,减少肺部炎症反应,从而间接改善治病理症状;在总黄酮含量相同时,改善呼吸道症状、生产性能及降低肺部炎性细胞水平方面,黄芩茎叶还可起到与黄芩根部相等的效果,但由于黄芩茎叶中总黄酮含量相对根部较低,黄芩茎叶的用药剂量相比黄芩根部有所增加。
以上结果表明,黄芩茎叶可以改善患病蛋鸡的呼吸道症状,恢复蛋鸡生产水平,减低肺部炎性细胞水平,和黄芩根部有相同效果,对以呼吸道症状为主的疾病有良好的治疗作用,日粮添加量为125.56mg/kg的黄芩茎叶提取物对感染呼吸道疾病的蛋鸡的治疗效果最佳。
进一步对引起蛋鸡呼吸道疾病的病原菌进行分离鉴定,并确定黄芩茎叶提取物对病原菌的抑制情况。
1、病原调查及病理解剖
记录发病鸡舍内患病鸡病理症状,从发病鸡舍内,随机选取48只蛋鸡进行剖检,随机分为6组,每组8个重复,观察患病蛋鸡的病理变化。无菌分离病鸡的肺组织,待后续检测。
2、病毒检测
呼吸道致病病毒检测由中国检验检疫科学研究院综合测试中心代理完成,主要针对蛋鸡呼吸道常见病进行PCR鉴定。
3、病原菌分离、纯化及革兰氏染色
将分离器官直接涂抹于提前倒好的血平板上,37℃恒温培养箱倒置培养12~48h待有细菌长出后,刮取少量细菌,接种于加有1%的营养肉汤培养基中37℃恒温震荡培养箱121rmp/min培养8~12h,待菌液浑浊后,沾取少量菌液,将菌液划线于血平板中,37℃恒温培养箱倒置培养12h后,挑取单菌落,接种于加有1%的营养肉汤培养基中37℃恒温震荡培养箱121rmp/min培养8h获得纯化菌液。将细菌进行革兰氏染色后于镜下观察,并按2∶1加入60%甘油于-80℃保种。
4、病原菌生化试验
使用海博生物细菌微量生化鉴定管进行细菌生化试验鉴定,按说明书,采用直接接种法,用接种针从培养好的血平板上挑取已纯化分离的鸭源鸡杆菌菌落接种于需要试验的试管中,接种后贴上封口膜,置于37℃恒温培养箱中培养12~48h。
5、病原菌抗生素敏感试验
将培养好的菌液浓度调整为1×107CFU/mL菌液,吸取100μL菌液于血液琼脂板上,涂布均匀。将抗生素药敏片贴在涂有菌液的板子上,倒置培养12h,测量抑菌圈的大小。参考文献“M100-S11,Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[J].Clinical MicrobiologyNewsletter,2001,23(6):49”中的标准判断:抑菌圈直径>20mm为高度敏感,10~20mm为中度敏感,5~10mm为低度敏感,抑菌圈直径≤5mm为不敏感。
6、病原菌16S rRNA鉴定及Blast分析
利用天根细菌DNA提取试剂盒对纯化后的细菌进行DNA提取。将提取后的DNA利用Nano drop检测浓度。按照以下体系进行PCR体系配置,反应体系如表3所示。PCR反应设置参数:94℃预变性3min;94℃变性45s,50℃退火45s,72℃延伸90s,35个循环,72℃延伸7min。将PCR产物,于1%琼脂糖凝胶110V,电泳30min,电泳结束后,取出凝胶,置于凝胶成像系统中采集图像。将PCR送至上海生物工程股份公司进行双向测序,测序引物为27F和1492R,正反测序,引物序列参照表4所示。将细菌16S rRNA基因序列导入美国NCBI网站(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)的Blast在线软件,选择Nucleotide Collection数据库,运行Blast程序,获取与该16S rRNA基因序列同源的序列和对应的细菌名称。利用MEGA X进行同源性分析。
表3细菌16S rRNA PCR反应体系
试剂 | 体积/μL |
DNA模板 | 1 |
上游引物(10μmol/L) | 2 |
下游引物(10μmol/L) | 2 |
PCRMasterMix | 25 |
<![CDATA[H<sub>2</sub>O]]> | 20 |
表4细菌16S rRNA引物
引物名称 | 引物序列 | 扩增片段长度/bp |
27F | AGAGTTTGATCCTGGCTCAG | 1500 |
1492R | ACGGCTACCTTGTTACGACTT | 1500 |
7、病原菌生长曲线
该临床菌在营养肉汤培养基中生长不良,为确定该细菌最适培养条件,将纯化后的细菌单菌落分别接入BHI+1%血清、NB+1%血清、LB+1%血清三种培养基,37℃恒温摇床200rmp/min培养,并分别于2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h、16h、18h、20h、22h、24h使用酶标仪在OD=600nm处测定吸光度。
8、黄芩茎叶提取物与鸭源鸡杆菌体外抑菌试验
黄芩茎叶黄酮类物质提取:精密称取1g黄芩茎叶提取物溶于10mL无菌蒸馏水中,过0.45μm滤膜,取1mL过滤后溶液,加入9mL无菌蒸馏水中进行梯度稀释,重复以上操作获得100mg/mL、10mg/mL、1mg/mL、0.1mg/mL黄芩茎叶提取物待用。
将纯化后的病原菌液调整到浓度为1×107CFU/mL,将不同浓度的黄芩茎叶提取物1∶1与病原菌混合,对照组加入等体积培养基,于恒温摇床121rmp/min,37℃共孵育12h,取100μL孵育后的菌液,加入900μL培养基中进行梯度稀释,重复以上步骤,将共孵育后的菌液进行10-1~10-8倍稀释,分别取10μL稀释后的菌液,滴在血液平板上,待干燥后,放入37℃倒置培养,待12h后记录相应单菌落个数。
9、试验结果
9.1、临床病理症状
根据临床症状观察,该鸡场鸡舍内主要临床症状包括:咳嗽、流涕、呼吸带有“呼噜”音如图5A所示,病理剖检结果表明,部分蛋鸡气管内有轻微出血,多数鸡的肺组织表面有黑色斑点如图5B-C所示,蛋鸡还出现产蛋率下降,异常蛋增多的症状,异常蛋包括(破壳蛋、带斑蛋、小蛋)如图5D所示。
9.2、病原细菌病毒检出情况
在随机抽取的48只蛋鸡(随机分为6组,每组8只)中,均从气管部位分离到细菌,仅两组检测出病毒阳性,该病毒确定为鸡传染性喉气管炎,该病毒检测上游引物:5′-ACG ATGACT CCG ACT TTC-3′、下游引物:5′-CGT TGG AGG TAG GTG GTA-3′在634bp处出现阳性条带,与预期结果一致。见表5及图6。
表5各组细菌病毒检测情况
9.3、病原菌菌落形态及革兰氏染色
致病菌在普通琼脂不生长,如图7A所示,在鲜血琼脂培养基上生长出表面光滑,灰白色小菌落,菌落周围呈微血环,菌体灰白透明。如图7B所示,经革兰氏染色后由油镜在显微镜下观察,可见革兰氏阴性分离菌呈红色两极浓染的杆菌。
9.4、病原菌生化鉴定
生化鉴定结果如表6及图8所示,结果表明,该病原菌能发酵葡萄糖、甘露醇、肌醇、山梨醇,过氧化氢酶、氧化酶试验呈阳性。
表6细菌生化鉴定
9.5、病原菌抗生素敏感试验
如图9所示,药物敏感性试验结果表明,该致病菌对氨苄西林、羧苄西林、青霉素、哌拉西林、头孢氨苄、万古霉素、复方新诺明、氯霉素、卡那霉素、麦迪霉素、林克霉素、呋喃唑酮不敏感;对多粘菌素、四环素、氧氟沙星中度敏感;对新霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星低度敏感;对头孢唑林、头孢拉定、头孢呋辛、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、庆大霉素、丁胺卡那、多西环素、米诺环素高度敏感。头孢类及四环素类抗生素对该致病菌有较好的抑制效果,该致病菌对β-内酰胺类抗生素有将强抵抗能力。
9.6、细菌16S rRNA鉴定及Blast进化树分析
将提取的病原菌DNA进行16S rRNA鉴定,经PCR扩增及1%琼脂糖凝胶电泳后在1500bp处有明显的条带(图10A),与预期结果相符。测序后的序列在NCBI的GenBank中进行Blast分析,Blast结果该致病菌与鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)高度相似,核苷酸同源性高达99.84%,将相似度前50的基因序列导入MEGA-X进行基因同源性分析,经比较分离出的鸭源鸡杆菌与参考菌株(KP998483.1)同源性为90%,处于同一遗传进化分支,确定该致病菌为鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)。
9.7、病原菌生长曲线
如图11所示,加入血清后,该病原菌生长情况转好,在加入1%血清后,鸭源鸡杆菌在BHI及LB培养基中均生长良好,在4h后进入对数生长期,在NB+1%血清培养基中生长不良,LB+1%血清中生长最好,4~12h为对数生长期,12h后衰退期,确定鸭源鸡杆菌最适培养条件为LB+1%血清培养6~8h,用于后续试验培养条件。
9.8、黄芩茎叶提取物与鸭源鸡杆菌体外抑菌试验
结果表明,如图12所示,黄芩茎叶提取物在100mg/mL~1mg/mL对鸭源鸡杆菌有抑制作用,抑菌率在50%以上,0.1mg/mL浓度对鸭源鸡杆菌有抑菌效果,但抑菌效果高于50%,抑菌效果不佳。
本试验确认该鸡场蛋鸡患病原因主要为鸭源鸡杆菌感染,该分离菌属于呼吸道型慢性输卵管炎致病菌,黄芩茎叶提取物在体外对鸭源鸡杆菌在1~100mg/mL浓度范围内有良好的抑菌效果。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (3)
1.黄芩黄酮类提取物在制备抑制鸭源鸡杆菌的药物中的用途,所述黄芩黄酮类提取物是按照以下步骤制备得到:称取黄芩干燥茎叶的粉末,加入相当于其重量30倍量的质量分数50 %乙醇溶液,超声提取3次,每次2 h,合并3次提取液的滤液,在1500 rmp/min下离心10min,取上层液体,干燥,即得。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述黄芩黄酮类提取物用于制备治疗和/或预防家禽呼吸道疾病的药物。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述黄芩黄酮类提取物用于制备提高家禽产蛋性能的药物。
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