CN114917146A - 一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、传递体凝胶及制备 - Google Patents

Abstract

本发明涉及日用化妆品组合物技术领域，尤其涉及一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，包括下列原料组分，磷脂、胆固醇、边缘活化剂、组合物以及水。所述多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物为：β‑熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲。本发明进一步包括一种用于制备多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体凝胶的制备，包括上述组合物传递体、卡波姆和化妆品可接受的辅料和溶剂。所述传递体凝胶使用方便、易于在皮肤附着、易于涂抹，皮肤渗透作用强、能够渗透到深层皮肤，具有优良的协同抗氧化、抗炎、袪黑、抗衰老等功效。

Description

一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、传递 体凝胶及制备

技术领域

本发明涉及日用化妆品组合物技术领域，尤其涉及一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、传递体凝胶及制备。

背景技术

皮肤衰老是不可避免的生理变化过程，主要由内源性因素和外源性因素共同导致的。内源性衰老受遗传因素和时间流逝的影响，而外源性衰老是由于长期暴露于日光照射、污染、电离辐射等因素下皮肤出现的肤色不均、色素沉着、表面干燥粗糙、皮肤松弛和皱纹形成等明显的形态和生理变化。随着公众的求美意识逐渐增强，人们对皮肤衰老的重视，使人们对延缓皮肤衰老的高效产品需求越来越旺盛，如何开发有效延缓皮肤衰老、改善衰老皮肤症状的护肤品，成为医美及化妆品行业关注的热点。

延缓皮肤衰老相对来说是个复杂的概念，如何延缓皮肤衰老也一直是化妆品领域的研究焦点之一。由于暴露于外源因素下，皮肤细胞发生氧化应激代谢产生过量活性氧，这是导致皮肤衰老的主要因素。过量的活性氧不仅会导致胶原蛋白降解使皮肤失去弹性，还会导致皮肤炎症的发生以及色素的沉着。但是单纯使用抗氧化产品是不够的，如果皮肤由于干燥缺水，失去它作为理化屏障的功能也会加速皮肤老化，加上皮肤氧化衰老导致的炎症和色素沉着以及皮肤干燥问题都需要及时积极解决。因此要更具针对性解决人们改善老化皮肤的需求，需要从减轻皮肤氧化应激、减少炎症反应、抵抗色素沉着、补充水分等多个维度着手进行活性物质的组合，从而协同解决皮肤衰老问题。

即使成功配伍能够协同解决皮肤衰老问题的组合物，在实际应用中，其效果并不理想。这是由于化妆品的功效成分由于皮肤的屏障作用很难吸收，大部分仅停留在角质层或皮肤表层，未达到皮肤深层，而不能有效发挥其作用。为此，许多纳米制剂技术如固体脂质纳米粒、脂质体、传递体、聚合物纳米粒以及囊泡等被用于提高化妆品活性成分的经皮递送，其中脂质体技术在许多高端化妆品中已有广泛的应用。以脂质体为载体的透皮制剂虽然比普通的乳膏、乳剂等能提高物质的经皮渗透量，但递送达到的皮肤深度有限，以致需要在皮肤更深层才能起效的活性成分的功效还是不能很好地发挥。传递体是在脂质体中加入边缘活化剂，使其容易发生弹性形变，能够通过比其自身小数倍的皮肤孔道，进入皮肤深层，达到脂质体不能达到的皮肤渗透深度，从而发挥更好的功效。

为此，本发明提出一种能从减轻皮肤氧化应激、减少炎症反应、抵抗色素沉着、补充水分等多个维度解决皮肤衰老问题的化妆品组合物，并提出一种能够提高其经皮吸收的传递体及其凝胶的制备方法。

发明内容

为解决人们对延缓皮肤衰老护理产品的迫切需求，本发明提供了一种抗衰老组合物。该抗衰老组合物为含有β-熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲的复配物，该组合物能够多维度解决皮肤衰老问题，具有良好的抗氧化、抗炎、袪除色素、滋润、保湿功效。

本发明的目的还在于提供一种能促进组合物皮肤吸收的传递体的制备，将功效成分包裹于传递体囊泡中，利用传递体的弹性形变容易穿透皮肤的特性，将功效成分递送到皮肤深层进而有效发挥作用。还提供一种基于上述组合物的传递体凝胶的制备，利用凝胶的半固体特性，使制剂易于在皮肤附着、使用方便，更好地发挥其抗衰老功效。

本发明是通过以下技术方案实现的：.一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，包括下列原料组分，磷脂、胆固醇、边缘活化剂、功效成分以及水。

其中所述磷脂0.49-9.00wt％，胆固醇0.19-0.95wt％，边缘活化剂0-1.06wt％，功效成分0.01-5wt％；其中边缘活化剂不为0。

本发明进一步提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，由下列重量百分比的原料组分组成，磷脂0.49-9.00wt％，胆固醇0.19-0.95wt％，边缘活化剂0-1.06wt％，功效成分0.01-5wt％，余量为水；其中边缘活化剂不为0。

本发明进一步提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，由下列重量百分比的原料组分组成，磷脂0.98-4.71wt％，胆固醇0.39-0.90wt％，边缘活化剂0.17-0.87wt％，功效成分0.09-2wt％，余量为水。

一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，所述磷脂选自大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。

本发明进一步提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，所述磷脂与胆固醇的质量比为5:2。

本发明提供的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，所述功效成分包括β-熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲。

本发明提供的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体的制备方法，包括如下步骤：

(1)磷脂和胆固醇混合后溶解于有机溶剂，减压蒸发有机溶剂，在容器壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥，使有机溶剂完全挥干，形成沉积薄膜；

(2)功效成分和边缘活化剂在水中搅拌溶解形成混合液，加入至盛有沉积薄膜的容器内，水化；

(3)水化获得的脂质囊泡充分溶胀，并降温进行超声处理；

(4)获得的脂质囊泡通过微孔滤膜，获得包载组合物的传递体。

本发明还提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物传递体凝胶，包括多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、卡波姆和化妆品可接受的辅料与溶剂。

本发明提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物传递体凝胶的制备，包括如下步骤：

(1)将卡波姆分散于溶解了甘油的水中，完全溶胀、溶解后加入防腐剂。

(2)轻轻搅拌下，将步骤(1)的溶液与组合物传递体混合。

(3)用三乙醇胺调节步骤(2)的pH至6.5-7.0，搅拌均匀即得。

在本发明中，各种功效成分的相关作用如下：

1.β-熊果苷。有效地抑制皮肤中的酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的形成，通过自身与酪氨酸酶直接结合，加速黑色素的分解与代谢，从而减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，而且对黑色素细胞不产生毒害性、刺激性、致敏性等副作用。同时还有抗氧化、杀菌、消炎的作用。

2.传明酸。能抑制酪氨酸酶的合成，从而抑制皮肤黑色素的形成，而且安全无毒，不会产生白斑后遗症，还可消除人体内在自由基，增强白细胞动力等作用，有利于人体健康，还能起到防腐与保湿作用。

3.透明质酸钠。本发明所述的透明质酸钠，为中分子量透明质酸钠和小分子量透明质酸钠的混合物，优选的中分子透明质酸钠与小分子透明质酸钠的质量比为1:1，具有协同互补抗衰老的效果。中分子透明质酸钠可填补细纹，去除皱纹，在皮肤表皮形成一层透气薄膜，使皮肤光滑湿润，并可阻隔外来细菌、灰尘、紫外线的侵入，保护皮肤免受自由基等侵害，但被皮肤吸收较差。小分子透明质酸能深入真皮层补充缺失的水分，修复受损肌肤，起到保湿嫩肤的作用，还有抗炎、抑制病菌产生、保持皮肤光洁的作用，可直接促进细胞生长、分化、重建与修复等。

4.尿囊素。可以促进角质层的水分补充，增加皮肤的保水性。在本发明中是作为一种保湿剂。

5.维生素B12。红细胞生成的必需原料之一，可促进红细胞的发育和成熟，保持气色红润。还可减少一氧化氮的产生，减小促炎细胞因子生成，预防皮炎。

6.羟乙基脲。在本发明中是作为一种保湿剂和滋润剂。

本发明与现有技术相比具有下列优点和有益效果：

1.本发明的组合物将植物提取物、维生素和化学高纯度物质搭配，互相促进、从不同层次共同作用于肌肤，具有多层次、多途径、协同互补的抗衰老及改善衰老皮肤症状的功效。既有清除自由基、保湿补水、抗炎、祛除皱纹的透明质酸钠，又有抑制皮肤黑色素、抗炎、抗氧化的β-熊果苷和传明酸，还有抗皮肤炎症、使肤色红润的维生素B12，配合保湿补水、活化细胞的尿囊素、羟乙基脲，能进一步加强产品的抗衰老功效，减少皮肤皱纹产生并增加皮肤弹性。

2.由于皮肤是人体的内外屏障，化妆品活性物质很难透过皮肤，以致其功效无法发挥。本发明选择复合物中分子量高、难于皮肤渗透的维生素B12为模型成分，为复合物筛选出具有高渗透速率、高累积渗透量和皮肤滞留量的传递体处方，包括最优边缘活化剂及其含量，如附表1、2所示。

3.本发明组合物均为水溶性的，作为化妆品使用时可直接采用水性基质，避免乳化操作。在组合物传递体制备中，本发明将活性组分与边缘活化剂共分散于水相，而非传统方法中将边缘活化剂先溶于脂质膜材，在水合过程中活性物质与边缘活化剂以复合物的形式转移至脂质囊泡的亲水区域，此形式一方面有利于传递体对活性物质皮肤促渗效果的发挥，另一方面有利于屏蔽维生素B12较深的色泽。

4.本发明基于上述组合物制备的传递体凝胶，兼具传递体优良促渗功效和凝胶的多维网状结构，便于涂抹、便于皮肤附着，进一步提高了组合物功效的发挥。

5.本发明的抗衰老复合物传递体凝胶制备工艺简单，体系稳定、质地分散均匀，有效弥补了现今抗衰老产品单一作用机理和功效成分难以透皮吸收发挥功效的缺陷。对于斑马鱼氧化应激、炎症模型具有明显的协同抗氧化和抗炎作用，如附图3、4。具备良好的袪黑美白效果，如附图5。对于过氧化氢诱导的人皮肤成纤维细胞，其功效成分组合物具有明显的抗衰老作用，如附图6。对皮肤安全温和无刺激性，如附图7。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例8所述的包载维生素B12传递体的外观示意图(A)以及透射电镜微观形态示意图(B)。

图2为实施例17所述的复合物传递体凝胶的外观示意图(A)以及微观形态示意图(B)。

图3为荧光显微镜下斑马鱼幼鱼体内的活性氧荧光图像(A)及统计结果(B)。(A)中CG表示空白对照组、H₂O₂表示过氧化氢氧化应激模型组、H₂O₂+NC表示氧化刺激后给予不含功效成分的空白传递体凝胶组、H₂O₂+CTG表示氧化刺激后给予复合物传递体凝胶组。(B)中VC表示阳性对照组、AR表示熊果苷、TA表示传明酸、VB表示维生素B12、HA表示透明质酸、ALT表示尿囊素、HEU表示羟乙基脲；“##”代表与CG组相比，P＜0.01；“**”代表与过氧化氢模型组相比，P＜0.01，n＝30。

图4为荧光显微镜下斑马鱼幼鱼体内的嗜中性粒细胞荧光图像(A)及嗜中性粒细胞迁移数量统计结果(B)。(A)图中为空白对照组(CG)、硫酸铜诱导炎症模型组(CuSO₄)、布洛芬阳性药组(IBU)、不含功效成分的空白传递体凝胶组(NC)、不同浓度复合物传递体凝胶组(实施例15、16和17)对斑马鱼尾部嗜中性粒细胞向侧线神经丘扩散数量的影响。(B)图为各单一成分的统计结果，其中AR表示熊果苷、TA表示传明酸、VB表示维生素B12、HA表示透明质酸、ALT表示尿囊素、HEU表示羟乙基脲；“##”代表与CG组相比，P＜0.01；“**”代表与硫酸铜模型组相比，P＜0.01，n＝30。

图5为显微镜下斑马鱼局部黑色素沉着图片(A)及统计结果(B)。(A)中CG表示空白对照组、PTU表示阳性对照组、NC表示不含功效成分的空白传递体凝胶组、CTG表示复合物传递体凝胶组(实施例17)。(B)中AR表示熊果苷、TA表示传明酸、VB表示维生素B12、HA表示透明质酸、ALT表示尿囊素、HEU表示羟乙基脲；“##”代表与CG组相比，P＜0.01；“**”代表与CG组相比，P＜0.01，n＝30。

图6为显微镜下人皮肤成纤维细胞的衰老β-半乳糖苷酶染色图像。CG表示空白对照组、H₂O₂表示过氧化氢氧化应激模型组、H₂O₂+APC表示氧化刺激后给予功效成分组合物组。

图7为豚鼠皮肤和真皮组织切片的显微照片。(A)正常皮肤；(B)给予复合物传递体凝胶；(C)给予不含功效成分的空白传递体凝胶。

具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体的具体实施例，包括下列原料组分，磷脂、胆固醇、边缘活化剂、功效成分以及水。

本发明还提供了另外一个多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体的具体实施例，所述磷脂0.49-9.00wt％，胆固醇0.19-0.95wt％，边缘活化剂0-1.06wt％，功效成分0.01-5wt％；其中边缘活化剂不为0。

在本发明提供的一个实施例中，多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体是由下列重量百分比的原料组分组成的，磷脂0.49-9.00wt％，胆固醇0.19-0.95wt％，边缘活化剂0-1.06wt％，功效成分0.01-5wt％，余量为水；其中边缘活化剂不为0。

在本发明提供的另外一个实施例中，多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体是由下列重量百分比的原料组分组成的，磷脂0.98-4.71wt％，胆固醇0.39-0.90wt％，边缘活化剂0.17-0.87wt％，功效成分0.09-2wt％，余量为水。

作为一种优选方案，所述磷脂选自大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。

作为一种优选方案，所述磷脂与胆固醇的质量比为5:2。

本发明提供的多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，所述功效成分包括β-熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲。优选的，所述功效成分是由β-熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲组成的。在本发明提供的实施例中，所述功效成分中β-熊果苷为0.2份-0.5份，所述传明酸0.2份-0.5份，所述透明质酸钠0.01份-0.5份，所述尿囊素0.01份-0.5份，所述维生素B12 0.01份-0.5份，所述羟乙基脲0.01份-0.5份。

本发明所述多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体可采用薄膜分散法进行制备。

本发明还进一步提供了所述多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体的制备方法，包括如下步骤：

(1)磷脂和胆固醇混合后溶解于有机溶剂，减压蒸发有机溶剂，在容器壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥，使有机溶剂完全挥干，形成沉积薄膜；

(2)功效成分和边缘活化剂在水中搅拌溶解形成混合液，加入至盛有沉积薄膜的容器内，水化；

(3)水化获得的脂质囊泡充分溶胀，并降温进行超声处理；

(4)获得的脂质囊泡通过微孔滤膜，获得包载组合物的传递体。

在本发明制备方法的实施例中，所述有机溶剂用于促进磷脂和胆固醇的均匀混合，且本实施例所采用的有机溶剂能够在真空干燥环境下挥发干。具体的，在本实施例中，所述有机溶剂可采用氯仿、甲醇或氯仿与甲醇的混合溶剂。当采用氯仿和甲醇的混合溶剂时，氯仿和甲醇的体积比为3:2。

在本发明制备方法的实施例中，所述减压蒸发的操作是在旋转蒸发仪中实现的，具体减压蒸发的温度可采用不低于42℃的温度，优选的减压蒸发的温度为45℃。

在本发明制备方法的一个实施例中，水化温度高于磷脂的相转变温度，优选的水化温度为50℃。为了加快水化处理，优选的，在水化过程中采用60-75rpm的搅拌速度。

在本发明制备方法的实施例中，所述溶胀是在不高于50℃的温度下进行的，具体的可直接在室温下进行(22-25℃)。具体的，溶胀时间可根据脂质囊泡的具体情况选择，当直接在室温下进行溶胀时，溶胀时间为2h。

在本发明制备方法的实施例中，超声处理的时间为20min。本实施例所采用的超声处理的设备为JY92-IIN型超声波细胞粉碎机，购自宁波新芝生物科技股份有限公司。在启用超声处理时，以3s“开”、3s“关”的模式进行。

在本发明制备方法的实施例中，所采用的微孔滤膜可采用0.80μm、0.45μm和0.22μm孔径的滤膜。为了提升脂质囊泡的均一性，优选的将脂质囊泡依次通过0.80μm、0.45μm和0.22μm孔径的微孔滤膜。

为了增加功效成分的透皮吸收，提高传递体的稳定性，提高传递体与皮肤间的附着力，本发明提供了一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体凝胶，包括所述的多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、卡波姆和化妆品可接受的辅料与溶剂。

在上述复合物传递体凝胶中，卡波姆可采用卡波姆980、940或910。所述化妆品可接受的辅料可采用防腐剂苯氧乙醇或对羟基苯乙酮，优选的采用苯氧乙醇作为防腐剂。所述化妆品可接受的溶剂可采用水或PBS溶液，优选的采用水作为凝胶溶剂。

本发明还提供了组合物传递体凝胶的制备方法，具体为：

0.1-2％的卡波姆980撒入甘油浓度为0.1-5％的水溶液中，充分溶胀溶解后，加入0.01-1％苯氧乙醇，然后在轻轻搅拌下以0.5-5:1的质量比与上述组合物传递体缓慢混合，再滴加三乙醇胺将其pH值调节至6.5-7.0，搅拌均匀得到组合物传递体凝胶。

在组合物传递体凝胶的制备方法中，所述甘油、补充功效成分、卡波姆980、苯氧乙醇的百分含量指的是在凝胶体系中的百分含量。

在上述复合物传递体凝胶中，甘油是作为保湿剂和溶剂。苯氧乙醇是作为一种防腐剂。

本发明实施例中所述的包载功效成分的传递体的粒径、Zeta电位和形态的评价方法如下：

1.形态评价方法

取包载功效成分的传递体溶液(或其凝胶)适量，用水稀释，滴到铜网上，用1％磷钨酸溶液负染，滤纸吸去多余染色液，干燥后用透射电子显微镜观察。

2.粒径及Zeta电位评价方法

取包载功效成分的传递体溶液(或其凝胶)用去离子水稀释适当倍数，用激光粒度分析仪测定传递体(或其凝胶)的粒径和Zeta电位。

下面通过具体实施例来对本发明的技术方案进行详细的说明。本实施例中传递体处方筛选和边缘活化剂种类和用量筛选的实施例仅以维生素B12为模型物质，未加入组合物中的其它组分。

实施例1

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿与甲醇的混合液使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例2

称取2.5g大豆卵磷脂和0.5g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿与甲醇的混合液使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例3

称取5g大豆卵磷脂和0.5g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿与甲醇的混合液使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例4

称取1g大豆卵磷脂、0.4g胆固醇和和0.35吐温80于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例5

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g脱氧胆酸钠溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例6

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g十二烷基硫酸钠溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例7

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g司盘80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例8

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例9

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g甜菜碱溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例10

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.35g醋酸氯己定溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例11

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.15g吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例12

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.25吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例13

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.45吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例14

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.1g维生素B12和0.55吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载维生素B12的传递体。

实施例15

称取0.5g大豆卵磷脂和0.2g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.25g熊果苷、0.2g传明酸、0.05g透明质酸钠、0.05g尿囊素、0.05g维生素B12、0.025g羟乙基脲和0.175g吐温80溶解于51.5g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载功效成分的传递体。将2.12g甘油与48.23g去离子水混合用于溶胀2.65g卡波姆980，将上述传递体缓慢加入到溶胀好的卡波姆中，加入0.1g苯氧乙醇，再滴加三乙醇胺将其pH值调节至6.5-7.0，搅拌均匀得到复合物传递体凝胶。

实施例16

称取0.25g大豆卵磷脂和0.1g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.125g熊果苷、0.1g传明酸、0.025g透明质酸钠、0.025g尿囊素、0.025g维生素B12、0.0125g羟乙基脲和0.0875g吐温80溶解于52.25g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载功效成分的传递体。将2.12g甘油与48.23g去离子水混合用于溶胀2.65g卡波姆980，将上述传递体缓慢加入到溶胀好的卡波姆中，加入0.1g苯氧乙醇，再滴加三乙醇胺将其pH值调节至6.5-7.0，搅拌均匀得到复合物传递体凝胶。

实施例17

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.5g熊果苷、0.4g传明酸、0.1g透明质酸钠、0.1g尿囊素、0.1g维生素B12、0.05g羟乙基脲和0.35g吐温80溶解于50g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得包载功效成分的传递体。将2.12g甘油与48.23g去离子水混合用于溶胀2.65g卡波姆980，将上述传递体缓慢加入到溶胀好的卡波姆中，加入0.1g苯氧乙醇，再滴加三乙醇胺将其pH值调节至6.5-7.0，搅拌均匀得到复合物传递体凝胶。

实施例18

称取1g大豆卵磷脂和0.4g胆固醇于干燥的圆底烧瓶中，并加入少量的氯仿使其溶解，用旋转蒸发仪在45℃减压蒸发溶剂，直到烧瓶壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥一夜，使其完全挥干有机溶剂。将0.35g吐温80溶解于51.25g去离子水中，在50℃，转速为75rpm的条件下，将沉积的薄膜加上述溶液水化1h。得到的脂质囊泡在室温下(22-25℃)充分膨胀2h，然后，在冰浴中超声处理20min，3s“开”，3s“关”。最后，进一步将获得的囊泡系统依次挤压通过0.80μm、0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，即得空白传递体。将2.12g甘油与48.23g去离子水混合用于溶胀2.65g卡波姆980，将上述空白传递体缓慢加入到溶胀好的卡波姆中，加入0.1g苯氧乙醇，再滴加三乙醇胺将其pH值调节至6.5-7.0，搅拌均匀得到复合物传递体凝胶。

实验例1

以维生素B12为模型物质、维生素B12水溶液剂(SOL)为对照，实施例1、4和8为评价对象，进行经豚鼠皮肤的离体渗透实验，以对制剂因素对促渗能力的影响进行评价。

将离体豚鼠皮肤固定在YB-P6智能透皮测试仪的Franz静态垂直扩散室(有效扩散面积1.789cm²)，角质层面朝向供给池，以去离子水为接受介质，37±0.1℃恒温水浴，350rpm恒速搅拌，稳定1h后，分别加入SOL以及实施例1、4和8各1.5g(每个样品平行6次)，分别在0.5、1、2、4、6、8、10、12h取1.0mL的透皮接受液，然后补充等体积的新鲜接收液，分别于0.22μm微孔滤膜下过滤，取续滤液，进行HPLC分析，测定维生素B12的含量，按照如下公式计算维生素B12的累积透皮渗透量(Q_n)。

式中V₀为接收池容积，V_i为取样体积，C_n为第n次取样点浓度(μg·mL^-1)，C_i为第i次取样点浓度(μg·mL^-1)，A为透皮扩散面积。以Q_n对时间t进行线性回归，所得回归直线的斜率即为稳态渗透速率J_ss(μg·cm^-2·h^-1)。将切好的皮肤有效表面积在甲醇中浸泡24h，以充分提取皮肤中残留的维生素B12，分别测定其在各组的滞留量。结果如表1所示。

与对照组相比，实施例1、4、8中维生素B12经豚鼠皮肤的稳态渗透速率和皮内滞留量均显著优于对照组，说明脂质体(实施例1)和传递体(实施例4、8)均能促进物质的经皮吸收。与实施例1相比，实施例8的J_ss和皮内滞留量显著提高，而实施例4没有显著差异。该结果说明将边缘活化剂吐温80加入水相中所制备的传递体(实施例8)的经皮吸收显著优于脂质体；而实施例4的传递体是将边缘活化剂加入脂质中，由于这种方法不利于将亲水性较强的维生素B12在水合过程中由水相转移至脂质囊泡的亲水区域，进而在经皮传递过程中不能随囊泡一起经角质层、表皮进入皮肤深层，以致其经皮吸收能力低于实施例8。

表1不同载体中维生素B₁₂的离体皮肤渗透性和皮内滞留量(n＝6)

注：“##”表示与实施例1相比有极显著性差异(P<0.01)；“*”表示与SOL组相比有显著性差异(P<0.05)；“**”表示与SOL组相比有极显著性差异(P<0.01)；

实验例2

实施例1-10的粒径、Zeta电位表征及皮肤渗透性评价，结果如表2。

表2实施例1-10的表征和皮肤渗透性评价

第二列说明：“-”表示该组无边缘活化剂，第4组中边缘活化剂为加入脂质中，其余5-10组中边缘活化剂加入水相中。

表2结果表明：

(1)实施例1、2、3的结果表明，三种脂质体中实施例1的粒径最小、Zeta电位最大，且Q_n和J_ss高于其它两例，说明磷脂与胆固醇的质量比为5:2时，具有高的制剂稳定性和皮肤渗透性。

(2)实施例7、9、10的粒径大、Zeta电位小，制剂不稳定，放置一段时间后出现明显的分层，且稳态渗透速率(J_ss)和累积渗透量(Q_n)也显著降低；而实施例5、6和8的粒径较小、Zeta电位较大，制剂稳定，放置未发现分层现象。说明边缘活化剂种类对传递体的理化性质和经皮渗透性有显著影响，HLB值大的十二烷基硫酸钠、吐温80和脱氧胆酸钠作为边缘活化剂有较好的稳定作用和促进皮肤吸收作用。

(3)与实施例1相比，只有以吐温80作为边缘活化剂的实施例8有更小的粒径、更大的Zeta电位和更高的稳态渗透速率和累积渗透量，说明吐温80为边缘活化剂最优选择。

(4)实施例4比实施例8有较大的粒径和较小的Zeta电位，进一步说明将边缘活化剂加入脂质的方法不仅不利于传递体经皮递送能力的发挥，也不利于制剂的稳定。

综上所述，实施例1-10，对传递体的制备方法和边缘活化剂的种类进行了优选，结果显示实施例8的粒径小，稳定性好，且稳态渗透速率和累计渗透量较其它实施例高，利于功效成分的透皮。

实验例3

实施例8和实施例17的表征。

实施例8制备的包载维生素B12的传递体的平均粒径为(113.46±0.51)nm，PDI为(0.20±0.19)，说明粒子大小分布集中；平均Zeta电位为(-38.23±0.14)mV，绝对值大于30mV，说明具有较高的物理稳定性。外观为粉红色的半透明溶液，外观清澈透光、无沉淀及絮状物，如图1(A)所示。透射电镜下观察得到传递体的微观形态如图1(B)所示，从图中可以看出传递体呈球形、近球形囊泡状，无聚集现象，均匀分散在溶液中。

实施例17制备的复合物传递体凝胶，其平均粒径为(131.6±0.28)nm，PDI为(0.21±0.08)，说明粒度均一；平均Zeta电位为(-48.38±0.55)mV，绝对值大于30mV，说明物理稳定性较高；平均黏度为(43.85±0.25)Pa·s，说明黏度较为适宜，易于黏附在皮肤表面，并均匀涂布；pH为(6.82±0.01)，适宜皮肤使用。外观呈粉红色凝胶状，质地细腻、均匀，无肉眼可见的颗粒或块状物。透射电镜下观察到的微观形态如附图2所示，传递体凝胶呈近球形囊泡状，无聚集现象，均匀分散，所呈现的粒径与粒度仪测定结果基本一致。

实验例4

用马尔文粒度仪测定实施例8、11、12、13、14的粒径和Zeta电位。采用超速离心法，测定它们的包封率(EE)和载药量(DL)。

精密量取包载维生素B12的传递体溶液，加入甲醇超声5min以破坏囊泡，在HPLC上检测，分析计算药物总量(W_总)。另取包载维生素B12的传递体400μL置于超滤离心管中，3500r/min离心45min后取上层包封液，在HPLC上检测，分析计算包封于传递体中的药物量(W_包)，结果见表3。包封率和载药量的计算公式为：

其中W为称量时添加的维生素B12的质量。

表3边缘活化剂用量的筛选

由表3可知，随着吐温80用量的增加，传递体粒径略微增大，而Zeta电位、包封率和载药量呈先增后减的趋势，当吐温80与磷脂之比为0.35:1时，Zeta电位、包封率和载药量达到最大，被筛选为最优用量。

实验例5

组合物中透明质酸钠、尿囊素、羟乙基脲的保湿和滋润功效有很多文献报道，在此未对保湿、滋润等化妆品基础效果进行评价，仅对组合物体系的抗氧化、抗炎、美白、抗衰老这四种特殊功效进行评价。

斑马鱼抗氧化评价：斑马鱼胚胎孵育至受精后8小时(8hpf)，设置空白对照组、过氧化氢氧化应激模型组、阴性对照组(实施例18)、受试组(实施例17)和同制剂中对应成分含量相同的各单一成分组。除空白组和模型组外，其余组别分别给予对应试剂预保护1h。1h后，除空白对照组外，每组加入过氧化氢处理16h。结束后，弃去处理液，每孔加入养鱼水继续孵育。当斑马鱼孵育至48hpf时，用专用尖嘴镊子将卵膜撕去。每孔加入DCFH-DA探针染色液，染色1h后，加入适量麻醉剂在倒置荧光显微镜下拍照，并用软件统计其活性氧水平。结果如附图3所示。

由附图3(A)可以清楚地观察到空白组斑马鱼鱼体仅有微弱的绿色荧光，而斑马鱼幼鱼体经过氧化氢诱导刺激后具有较强的绿色荧光，说明此时鱼体内发生氧化应激现象。经过阴性对照溶液暴露后，其相同部位上未能明显观察到绿色荧光强度的减弱；而在复合物传递体凝胶溶液处理组中，斑马鱼幼鱼体相同部位上观察到的荧光强度整体上有明显的减弱。这些结果表明复合物传递体凝胶在斑马鱼模型中发挥了对过氧化氢诱导的氧化应激的保护作用。

由附图3(B)可以看出，与过氧化氢模型组相比，熊果苷(AR)外和透明质酸钠(HA)组能够显著降低活性氧水平(P＜0.01)，其余单一成分组无显著差异。因复合物凝胶CTG组活性氧水平降低的程度高于各单一成分组，说明复合物凝胶CTG组的抗氧化作用是熊果苷和透明质酸钠共同作用的结果。

斑马鱼抗炎效果评价：Tg(Lyz：DsRed2)系斑马鱼胚胎孵育至受精后3天(3dpf)，设置空白对照组、硫酸铜炎症模型组、阳性对照组、阴性对照组(实施例18)、不同浓度受试组(实施例15、16、17)和同实施例17中对应成分含量相同的各单一成分组。首先，所有组别斑马鱼预保护6h，6h后除空白对照组，所有组别加入硫酸铜造模。造模1h后，清洗每组斑马鱼，每孔加入适量三卡因麻醉剂，在荧光倒置显微镜下观察记录斑马鱼的异常和嗜中性粒细胞分布情况，并对迁移至侧线神经丘及以上的嗜中性粒细胞数量进行统计分析。结果如附图4所示。

由附图4(A)、(B)可见，与空白对照组相比，模型组斑马鱼尾部侧线神经丘附近荧光点(嗜中性粒细胞)数量显著增多(P＜0.01)。经阳性药布洛芬(IBU)预保护的斑马鱼尾部侧线神经丘附近荧光点相比模型组数量减少(P＜0.01)。以上结果说明斑马鱼炎症模型可用于本发明的抗炎活性研究。与模型组相比，空白辅料阴性对照组无统计学差异，证明复合物传递体凝胶中辅料无抗炎活性。不同浓度复合物传递体凝胶组均具有抑制斑马鱼尾部嗜中性粒细胞向侧线神经迁移的作用，且具有浓度依赖趋势，与模型组相比，均具有极显著差异(P＜0.01)。以上结果说明，复合物传递体凝胶对嗜中性粒细胞转基因斑马鱼幼鱼具有抗炎的作用。

与硫酸铜模型组相比，除HEU外，其余单一成分组AR、TA、VB、HA、ALT向侧线神经中丘迁移的嗜中性粒细胞数量均有显著减少(P＜0.05)。复合物凝胶CTG组嗜中性粒细胞数量减少的程度远大于各单一成分组，其抗炎效果是各单一因素共同作用的结果。值得一提的是，保湿剂尿囊素(ALT)在此起到协同抗炎作用。

斑马鱼美白功效评价：斑马鱼胚胎孵育至24hpf，设置空白对照组、阳性对照组、阴性对照组(实施例18)、受试组(实施例17)和同制剂中对应成分含量相同的各单一成分组并给予对应试剂。加盖，置于培养箱中使胚胎继续发育。给药后48h加入适量三卡因麻醉剂，在显微镜下观察斑马鱼局部黑色素并采集图像后进行局部黑色素面积的统计分析。结果如附图5所示。

由附图5(A)可见，空白对照组中，在斑马鱼幼鱼的脊柱上下两侧及躯干中间部分可以明显地观察到大量的黑色斑点即沉着的黑色素；在阴性对照处理组中，斑马鱼幼鱼相同部位上不能明显观察到黑色素沉着的减少；而在阳性对照和复合物传递体凝胶处理组中，斑马鱼幼鱼相同部位上观察到的黑色素沉着显著减少，说明复合物传递体凝胶能够抑制斑马鱼幼鱼黑色素的合成，从而起到美白作用。

附图5(B)可以看出，与空白对照组CG相比，能显著降低局部黑色素面积的单一成分的顺序为AR>VB>TA。复合物传递体凝胶的抗黑色素作用显著大于各单一成分组，其效果为三个单一因素共同作用的结果。因维生素B12有显著降低黑色素的作用(P＜0.01)，说明在此实验模型下，维生素B12起到协同作用。

细胞抗衰老功效评价：人皮肤成纤维细胞接种于孔板中贴壁后，设置空白对照组、过氧化氢诱导的衰老模型组，功效成分组合物的受试组。对应试剂预保护24h后，除空白对照组外，其余每孔加入过氧化氢造模1h，之后弃去孔板内液体，加入完全培养基，于适宜条件孵育2d后按照细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒说明书进行染色并在显微镜下采集图像。结果如附图6所示。

由附图6可见，空白对照组细胞呈正常的梭形，状态较佳，且几乎无染蓝细胞，而在模型组中阳性染蓝的衰老细胞数明显增多，呈现细胞核体积增大，细胞形态更加圆顿的现象，此时细胞处于衰老状态。在功效物质的组合物溶液处理后，阳性染蓝细胞数明显减少，说明衰老细胞数量明显减少。说明功效物质组合物处理能缓解人皮肤成纤维细胞衰老。

实验例6

采用豚鼠皮肤刺激性实验和组织病理学研究，评价实施例17和18的安全性。

实验前24h将每只豚鼠两侧的背毛剃掉，并确保皮肤完好无损。分别在豚鼠背部的两侧应用0.5g实施例17和实施例18作为自我对照，给药后1、24、48、72小时观察有无刺激和红斑。应用Draize量表评估皮肤刺激，并使用0到4之间的刺激分数来评估刺激强度，范围从无反应到严重反应，在皮肤刺激试验后，观察皮肤的组织病理学变化。

表4中的皮肤刺激试验结果表明，实施例17和18在1、24、48和72h内对豚鼠无刺激性。由附图7可见，正常皮肤显示完整的角质层、表皮、真皮和毛囊结构。与正常皮肤相比(图7A)，实施例17(图7B)和实施例18(图7C)处理的皮肤无显著变化。可以看到皮脂腺结构完整，没有真皮水肿，也没有明显的中性粒细胞或炎症细胞浸润，表明所发明的复合物传递体凝胶对豚鼠背部皮肤没有刺激作用，可以安全地作为化妆品使用。

表4豚鼠皮肤的刺激性分数

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，包括下列原料组分，磷脂、胆固醇、边缘活化剂、功效成分以及水。

2.根据权利要求所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，所述磷脂0.49-9.00wt%，胆固醇0.19-0.95wt%，边缘活化剂0-1.06wt%，功效成分0.01-5wt%；其中边缘活化剂不为0。

3.一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，是由下列重量百分比的原料组分组成的，磷脂0.49-9.00wt%，胆固醇0.19-0.95wt%，边缘活化剂0-1.06wt%，功效成分0.01-5wt %，余量为水；其中边缘活化剂不为0。

4.根据权利要求3所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，是由下列重量百分比的原料组分组成的，磷脂0.98-4.71wt%，胆固醇0.39-0.90wt%，边缘活化剂 0.17-0.87wt%，功效成分0.09-2wt %，余量为水。

5.根据权利要求3所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，所述磷脂选自大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。

6.根据权利要求3所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，所述磷脂与胆固醇的质量比为5:2。

7.根据权利要求3所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体，其特征在于，所述功效成分包括β-熊果苷、传明酸、透明质酸钠、尿囊素、维生素B12、羟乙基脲。

8.如权利要求1至7任一权利要求所述一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）磷脂和胆固醇混合后溶解于有机溶剂，减压蒸发有机溶剂，在容器壁上形成均匀的脂质层后，在真空下干燥，使有机溶剂完全挥干，形成沉积薄膜；

（2）功效成分和边缘活化剂在水中搅拌溶解形成混合液，加入至盛有沉积薄膜的容器内，水化；

（3）水化获得的脂质囊泡充分溶胀，并降温进行超声处理；

（4）获得的脂质囊泡通过微孔滤膜，获得包载组合物的传递体。

9.一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物传递体凝胶，其特征在于，包括权利要求3至7任一权利要求所述的多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物的传递体、卡波姆和化妆品可接受的辅料与溶剂。

10.根据权利要求9所述的一种多维度协同解决皮肤衰老问题的组合物传递体凝胶的制备，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将卡波姆分散于溶解了甘油的水中，完全溶胀、溶解后加入防腐剂；

（2）轻轻搅拌下，将步骤（1）的溶液与组合物传递体混合；

（3）用三乙醇胺调节步骤（2）的pH至6.5-7.0，搅拌均匀即得。

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