CN114916597B - 治疗2型糖尿病的茶疗组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种治疗2型糖尿病的茶疗组合物，具体为以茯砖茶为基础的按照常规冲泡方法使用的茶疗组合物，所述茶疗组合物包括如下重量比的成分：青钱柳35～40份、茯砖茶35～40份、藤茶18～22份、木姜叶柯10份。将各原料用粉碎机粉碎后，使其连续通过规格为4孔和16孔的筛孔，弃掉过16孔的粉末，收集过4孔的原料；然后分装即可。本发明茶疗组合物不仅仅有明显的治疗2型糖尿病的作用，特别是在修复2型糖尿病导致的肝脏、胰腺受损方面显著优于普通茯砖茶的效果，而且茶香气协调，富有茶香，且滋味协调，有茶味，适于日常饮用。

Description

治疗2型糖尿病的茶疗组合物
技术领域
本专利涉及一种治疗2型糖尿病的茶疗组合物，更具体来说涉及一种以茯砖茶为基础的茶疗组合物，用于调理2型糖尿病导致的肝脏、胰腺受损。
背景技术
糖尿病是一种多病因引起的代谢疾病，特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，主要分为1型糖尿病(diabetes mellitustype 1，T1DM)、2型糖尿病(diabetes mellitus type 2，T2DM)。2型糖尿病也称为成人发病型糖尿病，多在35～40岁之后发病，占糖尿病患者90％以上，表现为体内胰岛素相对缺乏，可以通过某些口服药物刺激体内胰岛素的分泌。2型糖尿病是一种以高血糖和胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)为特征的代谢疾病。
2型糖尿病与多种慢性肝病之间复杂的双向关系。胰岛素抵抗和2型糖尿病是非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎和肝细胞癌的重要危险因素。伴随T2DM的肝病最常见是的脂肪肝。先前的一项研究显示，约80％的2型糖尿病患者患有脂肪肝。肝脏脂肪变性是由于脂肪酸摄取增加和脂肪从头生成。脂肪肝的发病机制很复杂，目前接受度最高的是“双重打击假说”。第一个打击涉及胰岛素抵抗和肝细胞中的脂质积聚。这会导致肝脏脂肪变性，增加肝脏的脆弱性。即当胰岛素抵抗发生，肝脏糖原合成受损，将利用多余的葡萄糖进行脂质合成，导致肝脏发生脂肪变性。非脂肪组织中的脂肪积累可能导致脂肪毒性；这种对胰岛的脂肪毒性可以通过破坏胰岛素供应和影响胰岛素的生物合成、加工和分泌减少和损害β细胞功能[。第二次打击由第一次打击引起的许多因素构成，包括氧化应激、随后的脂质过氧化和炎症。因此，肝脏脂肪变性与胰岛素抵抗之间的关系是一个恶性循环，其中全身胰岛素抵抗导致肝脏脂肪变性，肝脏脂肪变性随后导致肝脏代谢受阻，增加胰岛素抵抗。
2型糖尿病的临床用药主要包括胰岛素及胰岛素类似物、磺酰脲类与非磺酰脲类等胰岛素促分泌剂、噻唑烷二酮类等胰岛素3增敏剂、α-糖苷酶抑制剂、双胍类、GLP-1受体激动剂等，这些药物能够有效控制血糖及减少2型糖尿病并发症的发生，但长期服用会产生不良反应，如二甲双胍常见的不良反应为恶心、腹泻、腹胀等消化道症状，这极大降低了患者的生活质量。因此，寻找高效、无毒副作用的天然降糖药物及保健食品尤为必要。天然功能性食品及饮料资源丰富、毒副作用小、食用简易，容易被人们所接受，是自我调理、日常保健和辅助治疗的最佳手段，对2型糖尿病防治也具有较大潜力。
T2DM患者常伴有多种肝脏疾病，其中肝脏脂肪变性最为常见。由于肝脏在糖脂代谢中起着关键作用，肝功能障碍反过来会使T2DM恶化。因此，这类糖尿病的首选治疗方案包括针对T2DM的肝保护药物。然而现有的大多数口服降糖药物在肝脏中代谢，这可能导致肝脏恶化的增加。从长远来看，不利于血糖稳态。尽管许多天然产物分子在肝脏吸收后也会发生代谢修饰，由于植物活性物质的作用方式不同，含有多种植物成分的复合茶可能比单独的植物成分具有更高的药用质量和/或更低的毒性。由多种植物材料组成的复合茶可能是治疗伴有肝损伤的T2DM的一种有效策略。
湖南黑茶中的茯砖茶是以茶树成熟新梢为原料，经过特殊的发花工序制成的一类茶叶，含有丰富的茶多糖、多酚聚合物及微生物代谢产物(傅冬和等，茯砖茶加工过程中主要化学成分的变化[J].食品科学,2008,(02):64-7；文杰宇等，黑茶中微生物及其相关保健功能研究进展[J].食品科学,2010,31(09):329-32。有人建立了T2DM小鼠模型，深入研究了茯砖茶改善小鼠代谢紊乱问题(代昕玥等，茯砖茶改善2型糖尿病小鼠代谢紊乱的效果研究，茶叶科学，2022，42(1)：63-75。
青钱柳(Cyclocarya paliurus)是一种中国本土植物，属于CyclocaryaIljinskaja属，是该属的唯一物种，主要分布在海拔420-2500米的安徽、福建、湖北、湖南、江苏、江西、四川、贵州和浙江等山区。青钱柳由于其树叶带甜味被称为“甜茶”。青钱柳主要的活性物质有多糖，黄酮及三萜类物质(唐梅等，青钱柳化学成分及药理作用研究进展[J].国际药学研究杂志,2017,44(09):851-9)，其甜味物质是三萜皂甙。
藤茶(Vine tea)，又称霉茶，为葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物，广泛分布于中国南方山区。藤茶的干叶和干茎是药用食品研究中的重要植物资源，其主要活性成分为二氢杨梅素(YE L,WANG H,DUNCAN S E,et al.Antioxidant activities of Vine Tea(Ampelopsis grossedentata)extract and its major component dihydromyricetin insoybean oil and cooked ground beef[J].Food Chem,2015,172:416-22)。
木姜叶柯(Lithocarpus litseifolius(Hance)Chun)，别名甜茶、多穗石柯等，为壳斗科柯属植物，具有明显甜味，1000多年来一直被中国南方人作为日常饮料接受，并于2017年被批准为中国的一种新食品原料。木姜叶柯富含黄酮类化合物，主要有根皮苷与三叶苷，属二氢查尔酮类成分(LI S-H,WU X-J,YANG Q-D,et al.Studies on the chemicalconstituents of Lithocarpus polystachyus[J].Zhong yao cai＝Zhongyaocai＝Journal of Chinese medicinal materials,2010,33(4):549-51)。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明提供一种以茯砖茶为基础的茶疗组合物，用于治疗2型糖尿病，特别是调理2型糖尿病导致的肝脏、胰腺受损。
本发明的具体技术方案如下：一种茶疗组合物，包括如下重量比的成分：青钱柳35～40份、茯砖茶35～40份、藤茶18～22份、木姜叶柯10份；优选方案是，青钱柳36～39份、茯砖茶36～39份、藤茶19～21份、木姜叶柯10份；青钱柳37～38份、茯砖茶37～38份、藤茶19～21份、木姜叶柯10份。
茯砖茶可以采用市面上有售的各种品牌的茯砖茶，例如湖南安化茶厂生产的。青钱柳、藤茶、木姜叶柯分别用其干燥的嫩叶/茎，可以自行采摘、制作，也可以从市面上采购。
本发明茶疗组合物的制备方法：将各原料用粉碎机粉碎后，使其连续通过规格为4孔和16孔的筛孔，弃掉过16孔的粉末，收集过4孔的原料；然后分装即可。
使用方法：按照常规冲泡方法使用本发明茶疗组合物，即用沸水冲泡适当时间比如30-40分钟后，按照饮茶方式使用。如果是工业化生产水提取物的话，可以用100℃沸水浸提一到两次；第一次茶水比适当大一些，比如茶疗组合物干重和浸提用水比例控制在1﹕10～1﹕8之间；每次浸提时间控制在30～60分钟之间，比如浸提时间为45分钟。
本发明茶疗组合物不仅仅有明显的治疗2型糖尿病作用，特别是在修复2型糖尿病导致的肝脏、胰腺受损方面具有明显的优于普通茯砖茶的效果；而且茶香气协调，富有茶香，且滋味协调，有茶味，适于日常饮用。
附图说明
图1所示为茯砖茶与复合茶对2型糖尿病小鼠糖耐量及胰岛素抵抗的影响，其中：A代表血糖曲线下面积(AUC)；B代表胰岛素抵抗指数；不同小写字母代表组间存在显著差异(P<0.05)。
图2所示为各组小鼠胰腺病理学变化的显微镜照片，放大倍数×200。
图3所示为茯砖茶与复合茶对2型糖尿病肝体比及肝功能指标的影响，其中：A代表肝体比值；B代表血清谷丙转氨酶(ALT)；C代表血清谷草转氨酶(AST)；D代表总胆汁酸(TBA)；不同小写字母代表组间存在显著差异(P<0.05)。
图4所示为各组小鼠肝脏病理学变化的显微镜照片，放大倍数×200。
图5所示为茯砖茶与复合茶对2型糖尿病肝脏TC、TG含量的影响，其中：A代表肝脏总胆固醇(TC)；B代表总甘油三酯(TG)；不同小写字母代表组间存在显著差异(P<0.05)。
图6所示为茯砖茶与复合茶对2型糖尿病肝脏氧化应激及糖原存储的影响，其中：A代表肝脏超氧岐化酶(SOD)；B代表肝脏过氧化氢酶(CAT)；C代表肝脏丙二醛(MDA)；D代表肝糖原；不同小写字母代表组间存在显著差异(P<0.05)。
图7A～D所示分别为小鼠肠道菌群辛普森指数、香农指数、ACE指数和Chao1指数；图7E所示为PCA。
具体实施方式
实施例1：茶疗组合物、水提取物的制备以及感官审评、理化指标测定
按照如下重量比制备茶疗组合物：青钱柳、茯砖茶、藤茶和木姜叶柯的混合重量比例为3571：3571：1905：953。用粉碎机粉碎后，使其连续通过规格为4孔和16孔的筛孔，弃掉过16孔的粉末，收集过4孔的原料；混合均匀，制得茶疗组合物。
将制得的茶疗组合物用100℃沸水浸提两次，茶水比分别为1：10、1：8，浸提时间为45、30min，期间每隔10min搅拌一次，合并两次水提取物，冷却至室温后用双层工业用纱布过滤，将两次滤液充分混合后取样品进行感官审评，其余部分再用真空抽滤，滤液用旋转蒸发仪浓缩，后冷冻干燥30h，后保存于-80℃超低温冰箱中保存备用。
初步感官审评发现，茶汤均清澈明亮，故不再将茶汤色泽作为审评因子，仅仅采用香气与滋味作为审评因子。参照茶叶感官审评标准GB/T 14487-2017，制订了审评体系，如表1所示。组织有审评经验的10人进行密码感官审评，结果取平均值。结果见表2。
表1复合茶感官审评-评价体系
Figure BDA0003636850820000051
表2复合茶感官评价得分
Figure BDA0003636850820000052
理化检测：含水量测定参照GB 5009.3-2016；水浸出物测定参照GB/T8305-2013；可溶性糖测定采用蒽酮硫酸法；总黄酮测定采用三氯化铝比色法；总多酚测定采用福林酚法。经过测定，以茶疗组合物干重量为基数，其中可溶性糖含量为5.90±0.24％，多酚含量为5.43±0.36％，黄酮含量为3.37±0.24％。
实施例2：不同重量配比的茶疗组合物之间的对比
按照实施例1相同的方法，制备不同重量配比的茶疗组合物以及相应的水提取物。青钱柳、茯砖、藤茶、木姜叶柯分别按照水平1、2、3进行，总共9个处理，具体如表3所示方案，分别按照实施例1相同的方法进行感官评价，结果如表4所示。
表3重量配比优化试验方案
Figure BDA0003636850820000061
表4复合茶感官评价得分
Figure BDA0003636850820000062
实施例3：T2DM小鼠模型
采用高脂高糖饲料联合链脲佐霉素建立T2DM小鼠模型，用实施例1所制备的茶疗组合物(复合茶)、茯砖茶的水提取物灌胃干预，分别评估其降糖效果。在4周治疗期内，每日记录摄食量及饮水量，每周记录体重及空腹血糖。在治疗4周末，进行IPGTT，评估糖耐量受损程度。在治疗结束后，检测小鼠血清胰岛素含量并计算胰岛素抵抗指数；血脂指标(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、血清炎性因子(IL-1β，TNF-α)、胰腺病理学变化等。通过生化指标检测和组织病理学来综合评价复合茶改善小鼠糖脂代谢紊乱的作用。
三周龄雄性昆明小鼠，体重为13±2g，所有小鼠均购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司(长沙湖南)，许可证号：SCXK(湘)2019-0004。小鼠普通饲料(26.0％鼓皮+20.0％面粉+20.0％玉米+20.0％豆料+10.0％米粉+2.0％鱼粉+2.0％骨粉)；小鼠高脂饲料：35％脂肪比糖尿病大鼠定制饲料(65％大小鼠维持饲料+20％蔗糖+10％猪油+2.5％胆固醇+1％胆酸钠+1％矿物质混合物+0.5％纤维素混合物)均购于北京博爱港生物技术有限公司(北京，中国)。
雄性昆明小鼠，3周龄，置于标准实验室条件下(温度25℃，12小时光/暗循环)，均可以自由获得食物和水。适应性喂养一周后，对造模组进行4周的高脂高糖饲料喂养。正常组小鼠饲喂普通维持饲料；造模组小鼠饲喂高脂肪高糖饲料(35％脂肪，50％碳水化合物)。在结束4周高脂高糖饲料饲养后，空腹16小时后，造模组小鼠接受腹腔注射链脲佐菌素溶液(streptozocin，STZ，120mg.kg-1；缓冲溶液为柠檬酸缓冲液：柠檬酸和柠檬酸钠，按摩尔数1:1混合，pH值约为4.2-4.5)。正常对照组注射等量的柠檬酸缓冲液。3d后通过尾静脉采集小鼠血液，并使用便携式血糖仪检测空腹血糖。将空腹血糖值≥11.1mmol.L-1并维持3天的认定为2型糖尿病小鼠。
将符合上述标准的小鼠随机分为2型糖尿病模型组、复合茶组、茯砖茶组。复合茶组、茯砖茶组小鼠每日分别给予茶水提取物165mg·kg-1、400mg·kg-1(制备方法见实施例1)；正常对照组和2型糖尿病模型组小鼠每天等量蒸馏水灌胃。除正常对照组以外，其余小鼠饲喂高脂高糖饲料直到研究结束。治疗4周后采集所有小鼠新鲜粪便。禁食8h，后进行腹膜内葡萄糖耐量试验。所有小鼠空腹过夜后用4％水合氯醛麻醉处死(禁食不禁水)。取小鼠肝脏、胰腺组织和全血作进一步分析。每周记录一次体重和血糖，每日监测饮水量和饮食量。
实施例4：糖脂代谢指标测定
(1)测定小鼠饮食量、饮水量、体重及血糖变化比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠血糖的影响。
测定结果如表5所示。与对照组相比，T2DM小鼠体重显著减少，饮食量和饮水量显著增加(P<0.05)，空腹血糖也显著增加(P<0.05)，表现出明显的“三多一少”症状；与模型组相比，茯砖茶、复合茶干预显著改善了T2DM小鼠“三多一少”的症状(P<0.05)。
表5 4周干预期内各组小鼠日常指标记录
项目 对照组 模型组 茯砖茶组 复合茶组
0d体质量g 50.53±2.39a 48.44±2.15a 48.62±2.32a 48.74±2.71a
7d体质量g 51.14±2.46a 43.89±1.96b 45.16±2.10b 46.01±3.29b
14d体质量g 52.28±2.76a 40.15±1.37b 43.27±1.36b 43.49±3.33b
21d体质量g 52.81±2.95a 39.46±1.69c 45.8±1.79b 43.75±1.9b
28d体质量g 53.03±1.87a 37.16±1.48c 45.49±1.68b 42.39±1.87b
平均每天每只饮食量g 6.92±0.47c 13.57±2.49a 9.84±1.98b 8.66±0.59b
平均每天每只饮水量g 6.60±0.52c 35.28±3.13a 19.43±1.95b 19.41±1.69b
0d空腹血糖值mmol·L-1 7.64±1.02b 19.98±4.38a 20.21±3.74a 21.23±2.94a
7d空腹血糖值mmol·L-1 7.15±0.87c 21.94±5.65a 21.97±3.35a 22.69±1.69a
14d空腹血糖值mmol·L-1 6.94±0.74c 23.29±3.46a 21.02±3.93a 22.06±2.37a
21d空腹血糖值mmol·L-1 7.06±0.83b 24.91±3.78a 19.58±4.27a 20.14±1.92a
28d空腹血糖值mmol·L-1 7.14±0.76c 26.97±4.03a 18.21±3.61b 19.41±1.69b
(2)测定小鼠糖耐量及胰岛素抵抗比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠的胰岛素抵抗的影响。
如图1所示，与对照组相比，T2DM模型组小鼠AUC增加了264.01％及胰岛素抵抗指数增加了966.19％，这提示其糖耐量严重受损，胰岛素抵抗指数增加了(P<0.05)。葡萄糖耐量受损是胰岛素抵抗的一个关键特征，可进一步证实2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的产生。与2型糖尿病模型组小鼠相比，茯砖茶组与复合茶组的AUC分别降低了55.59％、59.06％，胰岛素抵抗指数分别降低了34.09％、36.67％，提示茯砖茶组与复合茶组的糖耐量受损，及胰岛素抵抗症状有显著改善作用(P<0.05)。
实施例5：T2DM小鼠胰腺病理学研究
按照如下方法进行小鼠胰腺切片制作与观察
(1)取材：新鲜组织用固定液固定24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
(2)脱水浸蜡：将脱水盒放进脱水机内依次梯度酒精进行脱水。具体如下：75％酒精4h，85％酒精2h，90％酒精2h，95％酒精1h，无水乙醇I 30min，无水乙醇II 30min，醇苯溶液5-10min，二甲苯I 5-10min，二甲苯II 5-10min，65°融化石蜡I1h，65°融化石蜡II 1h，65°融化石蜡III 1h。
(3)包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20℃冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
(4)切片：将修整好的蜡块，放入-20℃冻台冷却，再将冷却的蜡块置于石蜡切片机切片，厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平，载玻片将组织捞起，60℃烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后，取出常温保存备用。
(5)石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75％酒精5min，自来水洗。
(6)苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。
(7)伊红染色：切片依次入85％、95％的梯度酒精脱水各5min，入伊红染液中染色5min。
(8)脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
(9)显微镜镜检，图像采集分析。
如图2所示，正常对照组显示了典型的胰腺结构，表现为由均匀的胰腺外分泌腺泡和正常的胰岛组成(即胰岛结构完整，边界清晰，分散在胰腺外分泌腺泡中，且胰岛细胞数量大，细胞密集均匀排列)。2型糖尿病模型组显示出胰腺外分泌腺泡分布不均匀，胰岛面积明显萎缩，边界较迷糊，有许多空泡细胞和固缩核。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶和复合茶组的胰腺外分泌腺泡分布情况有所改善，胰岛轮廓改善，空泡细胞减少，坏死相对减少。值得注意的是，复合茶组显示出与正常对照组类似的相对健康的胰腺结构，显示出对胰腺结构的更优保护。
实施例6：对受损肝脏的影响
通过计算小鼠肝体比值，测定肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)，观察肝脏病理学变化，测定肝脏总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)含量、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性，丙二醛(MDA)含量、肝糖原的含量，评估2型糖尿病小鼠的肝损伤影响。
使用以下公式计算肝体指数：肝体指数＝(肝重/体重)为100％。
使用市售试剂盒分别测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)以及小鼠肝脏总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和肝糖原水平。按照试剂盒说明书要求，测定血清ALT、AST、TBA及肝脏TC、TG、SOD、CAT、MDA、肝糖原的含量。
(1)如图3所示，与对照组相比，2型糖尿病模型组小鼠肝体指数显著增加了43.60％(P<0.05)。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的肝体指数分别降低了18.09％、26.07％(P<0.05)。与对照组相比，2型糖尿病模型组小鼠血清ALT、AST活性分别上升了400.70％和180.42％，TBA含量显著增加了1334.16％(P<0.05)。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的ALT活性分别降低了47.50％、60.34％，AST活性分别降低32.06％、47.44％，TBA含量分别降低了80.90％、81.10％(P<0.05)。以上结果表明，复合茶组对T2DM小鼠肝损伤的改善作用明显优于茯砖茶组。
(2)按照胰腺病理切片制作相同的方法制作肝脏病例切片。观察小鼠肝脏病理学变化，比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠肝损伤的改善作用。如图4所示，正常对照组显示了典型的肝脏结构。2型糖尿病模型组显示出中央静脉狭窄，肝细胞排列不整齐，皱缩严重且变形，呈空泡状，核被挤到边缘且有变形现象，中央静脉肝索增粗，有脂肪浸润现象，且大量炎性细胞浸润，有点状坏死现象。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的脂肪沉积及炎性浸润减少。复合茶组显示出与正常对照组类似的相对健康的肝脏结构，显示出对肝脏结构的修复作用明显优于茯砖茶组。
(3)测定小鼠肝TC、TG比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠肝脂质紊乱的影响。如图5所示，与对照组相比，2型糖尿病模型组小鼠TC、TG分别上升了485.44％、207.28％(P<0.05)。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组和复合茶组的肝脏TC分别减少了54.87％、61.39％、TG分别减少了37.41％、48.85％(P<0.05)。以上结果提示复合茶在改善肝脏脂质紊乱方面明显优于茯砖茶组。
(4)测定小鼠肝脏SOD、CAT、MDA比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠肝脏氧化应激的调节作用。如图6(A-C)所示，与对照组相比，2型糖尿病模型组小鼠SOD、CAT活性分别下降了45.81％、51.63％，脂质氧化产物MDA显著增加了302.83％(P<0.05)，这提示肝脏氧化应激，可能发生脂质氧化损伤。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的肝脏SOD活性分别提高了51.30％、57.10％，CAT活性提高了63.02％、67.32％，MDA含量降低了43.83％、51.42％(P<0.05)，这说明复合茶组明显优于茯砖茶组。
(5)测定小鼠肝脏糖原比较茯砖茶和复合茶对T2DM小鼠肝脏糖原合成的调节作用。如图6D所示，与对照组相比，2型糖尿病模型组小鼠肝糖原含量下降了73.34％(P<0.05)，这提示肝脏糖异生增加。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的肝脏糖原的含量分别增加了183.98％、196.46％(P<0.05)，这说明复合茶组优于茯砖茶组。
综合上述实验可以看出，本发明茶疗组合物有明显的降糖效果，就糖脂代谢指标而言，与2型糖尿病模型组相比，表现为“三多一少症状”的明显改善、胰岛素抵抗的明显改善等方面。就本发明茶疗组合物与茯砖茶对比而言，在剂量存在明显差异的情况下(165mg·kg-1：400mg·kg-1)，在糖脂代谢指标方面，本发明茶疗组合物仍然显示出了基本相同甚至更优的降糖效果；从修复受损胰腺、肝脏组织方面来说，不管是从显微镜观察切片结果，还是从肝体比及肝功能指标以及肝脏总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、肝脏氧化应激及糖原存储等具体指标而言，本发明茶疗组合物都明显优于茯砖茶，显示出各个成分之间产生了较好的协同效果。
实施例7：对T2DM小鼠肠道菌群的影响
灌胃治疗干预结束后，在处死小鼠前一天，采集每只实验小鼠的粪便。小鼠粪便标本采用16S rRNA测序分析。通过小鼠粪便16S rRNA测序数据研究复合茶对2型糖尿病诱导的肠道菌群的调控作用。其中，香农指数和辛普森指数用于评价肠道菌群群落多样性，ACE指数和Chao1指数用于评价群落丰富度。
辛普森指数和香农指数的结果表明(图7A、B)，2型糖尿病导致了较低的微生物群落多样性(P<0.05)；根据ACE和Chao指数(图7C,D)，2型糖尿病组肠道菌群丰富度明显降低(P<0.05)。与2型糖尿病模型组相比，茯砖茶组、复合茶组的肠道微生物群落多样性和丰富度均有所增加(P<0.05)。PCA主成分分析显示了小鼠肠道菌群的组成和结构。图7E中，NC、MC、BTE、FBT分别代表：正常对照组、2型糖尿病模型组、复合茶组、茯砖茶组；图7E显示，2型糖尿病模型组和复合茶组的肠道菌群组成与对照组有明显差异，但是复合茶组的肠道菌群组成比茯砖茶组更接近于对照组。

Claims (10)

1.一种茶疗组合物，由如下重量比的成分组成：青钱柳35~40份、茯砖茶35~40份、藤茶18~22份、木姜叶柯10份。
2.根据权利要求1所述的茶疗组合物，由如下重量比的成分组成：青钱柳36~39份、茯砖茶36~39份、藤茶19~21份、木姜叶柯10份。
3.根据权利要求2所述的茶疗组合物，由如下重量比的成分组成：青钱柳37~38份、茯砖茶37~38份、藤茶19~21份、木姜叶柯10份。
4.根据权利要求1所述的茶疗组合物，由青钱柳、茯砖茶、藤茶和木姜叶柯按照3571：3571：1905：953的重量比制成。
5.根据权利要求1所述的茶疗组合物，所述青钱柳、藤茶、木姜叶柯分别是其干燥的嫩叶/茎。
6.权利要求5所述的茶疗组合物的制备方法，其特征在于，将各原料用粉碎机粉碎后，使其连续通过规格为4孔和16孔的筛孔，弃掉过16孔的粉末，收集过4孔的原料；然后分装即可。
7.权利要求1~5中任一权利要求所述的茶疗组合物在制备用于治疗2型糖尿病方面药物中的用途。
8.权利要求1~5中任一权利要求所述的茶疗组合物在制备修复2型糖尿病导致的肝脏、胰腺受损药物中的用途。
9.一种茶疗组合物的水提取物，通过如下方法制得：将权利要求1~5中任一权利要求所述的茶疗组合物用100℃沸水浸提一到两次，所述茶疗组合物干重和浸提用水比例控制在1﹕10 ~ 1﹕8之间；每次浸提时间控制在30~60分钟之间。
10.根据权利要求1~5中任一权利要求所述的茶疗组合物，以茶疗组合物干重量为基数，其中可溶性糖含量为5.90±0.24%，总多酚含量为5.43±0.36%，总黄酮含量为3.37±0.24%；所述可溶性糖测定采用蒽酮硫酸法；所述总黄酮测定采用三氯化铝比色法；所述总多酚测定采用福林酚法。
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