CN111568945A - 一种复方青钱柳制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种复方青钱柳制剂,由青钱柳和葛根组成。优选的,在8重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为4重量份,葛根的含量为4重量份。本发明还提供所述复方青钱柳制剂在制备用于临床治疗2型糖尿病的药物中的应用。通过不同种类药物组间给药效果对比可知,复方青钱柳降低空腹血糖水平、改善糖耐量异常、降低胰岛素水平和改善胰岛素抵抗指数效果明显优于单用青钱柳和单用葛根,综合作用最为显著,两者联合有明显的协同作用,为糖尿病的防治提供了新的选择和思路。
Description
技术领域
本发明涉及用于临床治疗2型糖尿病的复方制剂。
背景技术
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是由于体内胰岛素分泌不足或靶细胞对胰岛素敏感性降(即胰岛素抵抗)引起的以血糖增高为特征的慢性内分泌代谢性疾病。糖尿病及其并发症对人类健康带来严重危害,已成为继肿瘤、心脑血管疾病之后人类第三大死亡原因。据国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation,IDF)2019年发布的第9版糖尿病地图显示,全球糖尿病患者人数不断上升,全球平均增长率为51%,目前有4.63亿20-79岁成人患糖尿病(11个人中有1个为糖尿病患者),预计到2030年,糖尿病患者将达到5.784亿。数据显示,中国糖尿病人群已达1.164亿,居世界首位,是名符其实的糖尿病大国。与庞大的糖尿病人群形成鲜明对比的是,我国糖尿病治疗现状却十分令人堪忧:糖尿病知晓率低,治疗率低,治疗达标率低,并发症却高。不仅血糖达标率低,体重、血压等达标率也不尽如人意:52.3%患者血糖控制不达标,58.3%患者超重,71.6%患者血压控制不达标。
临床上,2型糖尿病(T2DM)患者占糖尿病总人数的90%左右,迫于严峻的流行形势,世界各国对T2DM的研究均给予高度关注。T2DM是由于胰岛B细胞功能缺陷或胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)引起的以糖脂代谢紊乱为主要特征的代谢性疾病。糖尿病时长期存在的高血糖,易导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍,对人类健康、寿命和生活质量已构成严重威胁。
发明内容
针对上述原因和现有技术中存在的主要问题,当前迫切需要提供一种新的药物治疗2型糖尿病。为此,本发明目的在于提供用于治疗2型糖尿病的复方青钱柳制剂。
为了解决上述技术问题,本发明的技术方案如下:
一种复方青钱柳制剂,由青钱柳和葛根组成,在10重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为1-9重量份,葛根的含量为1-9重量份。
优选的,在10重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为4重量份,葛根的含量为1-8重量份。
优选的,在10重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为4重量份,葛根的含量为4重量份。
优选的,所述复方青钱柳制剂为胶囊、片剂、粉末状或口服液或者食品型添加剂。
一种粉末状袋装茶,由上述复方青钱柳制剂制成粉末状茶。
本发明还提供所述复方青钱柳制剂在制备用于治疗2型糖尿病的药物中的应用。
青钱柳[Cyclocarya paliurus(Bata1)Iljinsk]属于双子叶植物胡桃科青钱柳属,是中国特有的单属种植物。前期研究表明,青钱柳叶提取物可显著改善胰岛素抵抗,其中降糖活性成分3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物能明显增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗量并抑制脂肪细胞中游离脂肪酸的合成,降低FFA含量,并对PPARγ有很强的激活作用,激活效果与PPARγ激活剂罗格列酮相当。PPARγ的激活可以刺激白色脂肪细胞分化,增加小脂肪细胞的数量而减少大脂肪细胞的数量,小脂肪细胞对胰岛素的反应性更强,有利于促进葡萄糖摄取[1];另外PPARγ在前脂肪细胞中的激活可以增加胰岛素及胰岛素样生长因子(IGF-1)刺激的脂肪细胞分化过程,成熟的脂肪细胞可以表达胰岛素敏感的葡萄糖运载体GluT4,促进葡萄糖转运[2]。此外现代药理研究表明,3,4-裂环达玛烷型四环三萜可以增加胰岛素的敏感性,促进小鼠脂肪细胞和成肌细胞对葡萄糖的消耗,具有潜在的治疗胰岛素抵抗和高血糖症的作用[3]。葛根为豆科植物野葛[Pueraria lobata(Willd.)Ohwi]的干燥根,作为传统中药有悠久的应用历史,多种治疗消渴症的古代方剂中含有葛根,现代药理研究发现葛根可以通过改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞、促进糖代谢、改善氧化应激等多途径发挥治疗糖尿病的作用[4-6]。其中异黄酮类化合物葛根素是葛根中的主要有效成分,文献报道葛根素能介导HepG2胰岛抵抗细胞模型PI3K/Akt/GSK-3β信号转导过程,明显增加细胞PI3K蛋白和p-Akt蛋白表达,同时在减少GSK-3β蛋白的表达同时提高其磷酸失活水平使p-GSK-3β不再具有抑制糖原合成酶GS的能力,从而促进肝糖原合成以此改善HepG2胰岛素抵抗[7]。
以青钱柳叶为主要原料,配伍常用中药葛根,两者结合可以从不同途径和机制发挥协同降血糖的作用:青钱柳中以3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物为代表的的降糖成分通过激活PPARγ刺激脂肪细胞分化,上调葡萄糖运载体GluT4表达,促进葡萄糖转运;葛根素可增强细胞中PI3K/Akt/GSK-3β信号转导过程,促进肝糖原的合成,改善胰岛素抵抗。二者协同作用,达到降低血糖和改善胰岛素抵抗效果。
参考文献:
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与现有技术相比,本发明的有益效果如下:
复方青钱柳制剂能显著的改善大鼠多饮多食症状,体重比模型组显著增加;给药6周后明显降低空腹血糖水平,改善糖耐量异常,降低胰岛素水平,改善胰岛素抵抗,对2型糖尿病具有明显治疗作用。
具体实施方式
以下将结合实施例来详细说明本发明。需要说明的是,在不冲突的情况下,本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
实施例1
1.1药品
1.1.1青钱柳叶(QQL)为棕褐色干浸膏粉,含量:8.83g生药/g干浸膏粉;葛根(GG)为棕褐色干浸膏粉,含量:8.83g生药/g干浸膏粉;复方青钱柳(HRLYQ-1,配比QQL:GG=1:0.25;HRLYQ-2,配比QQL:GG=1:0.5;HRLYQ-3,配比QQL:GG=1:1;HRLYQ-4,配比QQL:GG=1:2)为棕褐色干浸膏粉,含量:8.83g生药/g干浸膏粉,批号:20161201,有效期至2018年12月01日,由湖南和然生物科技开发有限公司提供。
1.1.2阳性对照药:盐酸二甲双胍片,由中美上海施贵宝制药有限公司生产,规格:0.25g/片,批号:201511039,有效期至2018年04月。适应症:用于单纯饮食控制不满意的2型糖尿病病人,尤其是肥胖和伴高胰岛素血症者,用本药不但有降血糖作用,还可能有减轻体重和高胰岛素血症的效果,是临床上应用最广泛的口服降糖药之一。
1.2实验动物:SD大鼠300只,雄性,SPF级,体重189.5~218.6g,动物合格证号:No.43004700007971,购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司,实验动物生产许可证号:SCXK(湘)2013-0004;在湖南省药物安全评价研究中心屏障环境B区饲养,实验动物使用许可证号:SYXK(湘)2012-0004。
1.3主要试剂:柠檬酸钠(批号:F20070914,国药集团化学试剂有限公司产品);柠檬酸(批号:2013109,天津大茂化学试剂厂产品);链脲佐菌素(批号:131211,Sigma公司产品);配制取链脲佐菌素0.625g置于250mL容量瓶中,用0.1mol/L的枸橼酸缓冲液(PH=4.0)溶解;葡萄糖(GLU)测定试剂盒(批号:306529,日本和光纯药工业株式会社产品);高脂饲料(基础饲料59.5%,胆酸钠0.5%,猪油10%,蛋黄粉10%,蔗糖20%)购于武汉市万千佳兴生物科技有限公司。
1.4主要仪器:LABOSPECT003型自动生化分析仪(本中心编号:001,日本日立公司生产)。
2.实验方法
2.1造模、分组与给药
SPF级SD大鼠,雄性,体重189.5~218.6g,每日饲喂高脂饲料,作为模型组。另取10只大鼠作为正常对照组,每日饲喂普通饲料。模型组大鼠饲喂高脂饲料45天后禁食不禁水16h,然后每只动物按0.1mL/100g腹腔注射链脲佐菌素40mg/kg,建立2型糖尿病模型。造模后7天,两组大鼠禁食不禁水16h,眼眶后静脉丛采血,检测空腹血糖水平(FBG)。选取FBG≥11.1mmol/L的大鼠290只,按血糖水平兼顾体重分层随机分为29组,每组10只。分组后正常对照组继续饲喂基础饲料,模型对照组和其它各组继续饲喂高脂饲料。每日给药前将盐酸二甲双胍片(研磨成粉)、青钱柳叶、葛根及复方青钱柳干浸膏粉用蒸馏水配制成相应浓度药液,各组动物按10mL/kg灌胃给予相应剂量药液,模型对照组、正常对照组灌胃给予等体积蒸馏水,1次/日,连续42天,给药期间各组动物采用普通饲料饲喂。
2.2检测指标
2.2.1对体重的影响:分别于给药第0、2、4、6周称重各组大鼠体重。
2.2.2对摄水量的影响:分别于给药第0、2、4、6周测量各组大鼠24h摄水量。
2.2.3对血糖的影响:各组大鼠于给药第42天后禁食不禁水16h,眼眶静脉丛采空腹血,然后灌胃给予2.0g/kg的葡萄糖溶液,给糖给糖后30min、60min、120min再次采血。血样3000rpm离心,取上清液,自动生化仪检测各组大鼠空腹血糖GLU水平及给糖后30min、60min、120min的血糖水平,并计算糖耐量AUC:
2.2.4对空腹胰岛素的影响:各组大鼠于给药第0、6周眼眶采血,3000rpm离心,取上清液,采用大鼠胰岛素ELISA试剂盒检测胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数=空腹血糖*胰岛素水平/22.5。
2.3剂量设计
青钱柳叶的临床拟用量为12g生药/天,根据体表面积法换算成大鼠等效剂量为12*0.018/0.2≈1.1g生药/kg。本实验以青钱柳大鼠等效剂量作为低剂量,另设中、高剂量,分别为等效剂量的2、4倍,即2.2、4.4g生药/kg(详见表1)。
葛根的临床拟用量均为12g生药/天,根据体表面积法换算成大鼠等效剂量为12*0.018/0.2≈1.1g生药/kg。本实验分别以葛根大鼠等效剂量作为低剂量,另设中、高剂量,分别为等效剂量的2、4倍,即2.2、4.4g生药/kg(详见表1)。
复方青钱柳的临床拟用量以生药计为12g生药/天(6g青钱柳叶生药+6g葛根生药/天),根据体表面积法换算成大鼠等效剂量为12*0.018/0.2≈1.1g生药/kg。本实验以复方青钱柳大鼠等效剂量作为低剂量,另设中、高剂量,分别为等效剂量的2、4倍,即2.2、4.4g青钱柳叶生药/kg(详见表1)。
盐酸二甲双胍片临床用量:成人开始一次0.25g,一日2~3次,以后根据疗效逐渐加量,一般每日量1~1.5g,规格为250mg/片。本实验以1g作为成人临床用量,根据体表面积法换算成大鼠等效剂量为250mg/片*4片*0.018/0.2≈100mg/kg,本实验以等效剂量作为盐酸二甲双胍片组的剂量,即100mg/kg(详见表1)。
表1组别与剂量设计
2.4统计方法:
采用SPSS16.0进行统计分析,统计学意义的水平设定为P<0.05。计量资料采用均数±标准差 用Leven’s test方法检验正态性和方差齐性。如果符合正态性和方差齐性,用单因素方差分析(One-way ANOVA)和post Hoc LSD进行统计分析;如果不符合正态性和方差不齐,则用Kruskal-Wallis检验。如果Kruskal-Wallis检验有统计学意义(P<0.05),则用Dunnett’s Test(非参数方法)进行比较分析。
3.结果
3.1对体重的影响
如表2所示,正常组大鼠随着时间延长体重一直呈增加趋势。其余11组大鼠在第14天左右达到体重最大值,之后随着糖尿病症状的加剧,大鼠体重开始下降。给药42天实验结束后,模型组大鼠体重低于正常组,二甲双胍组、青钱柳(高剂量组)、复方青钱柳(中、高剂量组)均能不同程度缓解糖尿病大鼠体重的降低(P<0.05);给药组间比较,与等剂量的单味药组(中、高剂量组)比较,复方青钱柳组能显著缓解体重的降低;HRLYQ-3与HRLYQ-4配比处方作用相当,且两者作用效果优于HRLYQ-1、HRLYQ-2配比处方(P<0.05)。
注:与正常对照组比较++P<0.01,与模型对照组比较*P<0.05。
3.2对摄水量的影响
如表3所示,与正常的对照组比较,第14、28、42天模型组大鼠摄水量均显著增加(P<0.01)。与模型对照组比较,二甲双胍组、青钱柳、葛根低、中、高剂量组大鼠给药14天左右摄水量均达到最大值,28天、42天数据显示摄水量均逐渐降低(P<0.05)。给药42天后,与模型对照组比较,青钱柳叶、葛根、复方青钱柳各低、中、高剂量组均能不同程度缓解高血糖大鼠多饮的症状(P<0.05或P<0.01);给药组间比较,与等剂量的单味药组(低、中、高剂量组)比较,复方青钱柳组的效果优于单药青钱柳组和单用葛根组,效果最为显著;HRLYQ-3与HRLYQ-4配比处方作用相当,且两者作用效果优于HRLYQ-1、HRLYQ-2配比处方。
注:与正常对照组比较++P<0.01,与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01。
3.3对空腹血糖水平及糖耐量的影响
如表4,表5所示,与正常组比较,各组大鼠给药前血糖水平显著升高(P<0.01),且组间比较无明显差异;与模型对照组比较,连续给药14天,二甲双胍组、复方青钱柳高剂量组大鼠的空腹血糖均有所降低(P<0.05);连续给药28、35、42天,二甲双胍组和青钱柳、葛根、复方青钱柳低、中、高剂量组均能不同程度降低高血糖大鼠空腹血糖水平(P<0.05或P<0.01)。给药42天后,与模型对照组比较,二甲双胍组和青钱柳、葛根、复方青钱柳低、中、高剂量组大鼠的空腹血糖均显著降低(P<0.05或P<0.01);给药组间比较,与等剂量的单味药组(低、中、高剂量组)比较,复方青钱柳组的效果明显优于单独用药青钱柳组和葛根组,效果最为显著;HRLYQ-3与HRLYQ-4配比处方作用相当,且两者作用效果优于HRLYQ-1、HRLYQ-2配比处方。
给予葡萄糖后30min的血糖水平显著降低(P<0.05),0min、30min、60min、120min血糖曲线下面积(AUC)显著减少(P<0.05)。
注:与正常对照组比较++P<0.01,与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01。
注:与正常对照组比较++P<0.01,与模型对照组比较**P<0.01,*P<0.05。
3.4对空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数的影响
如表6所示,与正常对照组比较,模型对照组大鼠给药前胰岛素水平和胰岛素抵抗指数均显著升高(P<0.05)。与模型对照组比较,连续给药14天,二甲双胍组、复方青钱柳高剂量组大鼠的胰岛素和胰岛素抵抗指数均有所降低(P<0.05);连续给药28、35、42天,二甲双胍组、青钱柳(低、中、高剂量组)、葛根(中、高剂量组)和复方青钱柳(低、中、高剂量组)大鼠的胰岛素和胰岛素抵抗指数均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。给药42天后,与模型对照组比较,二甲双胍组、青钱柳(低、中、高剂量组)、葛根(高剂量组)以及复方青钱柳(低、中、高剂量组)大鼠的胰岛素和胰岛素抵抗指数均显著降低(P<0.05或P<0.01);给药组间比较,与等剂量的单味药组(低、中、高剂量组)比较,复方青钱柳组的效果明显优于单独用药青钱柳组和葛根组,效果最为显著;HRLYQ-3与HRLYQ-4配比处方作用相当,且两者作用效果优于HRLYQ-1、HRLYQ-2配比处方。
4.小结
本研究发现青钱柳、葛根、复方青钱柳均能明显改善糖尿病大鼠模型的多饮症状,糖尿病大鼠体重增长比模型组也均有明显改善;青钱柳、葛根、复方青钱柳各剂量组糖尿病大鼠的空腹血糖水平均显著降低,对糖耐量异常也有改善作用;青钱柳、复方青钱柳各剂量组和葛根高剂量组糖尿病大鼠的胰岛素水平和胰岛素抵抗指数均显著降低。通过不同种类药物组间给药效果对比可知,复方青钱柳降低空腹血糖水平、改善糖耐量异常、降低胰岛素水平和改善胰岛素抵抗指数效果明显优于单用青钱柳和单用葛根,综合作用最为显著,两者联合有明显的协同作用;通过复方青钱柳处方中青钱柳与葛根不同配比研究发现,青钱柳:葛根=1:1时效果最佳。上述研究为糖尿病的防治提供了新的选择和思路。
上述实施例阐明的内容应当理解为这些实施例仅用于更清楚地说明本发明,而不用于限制本发明的范围,在阅读了本发明之后,本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落入本申请所附权利要求所限定的范围。
Claims (6)
1.一种复方青钱柳制剂,其特征在于,由青钱柳和葛根组成,在10重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为1-9重量份,葛根的含量为1-9重量份。
2.根据权利要求1所述的复方青钱柳制剂,其特征在于,在8重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为4重量份,葛根的含量为1-8重量份。
3.根据权利要求1所述的复方青钱柳制剂,其特征在于,在8重量份所述复方青钱柳制剂中,青钱柳的含量为4重量份,葛根的含量为4重量份。
4.根据权利要求1所述的复方青钱柳制剂,其特征在于,所述复方青钱柳制剂为胶囊、片剂、粉末状或口服液。
5.一种复方青钱柳袋装茶,其特征在于,由权利要求1-4任一项所述的复方青钱柳制剂制成。
6.一种复方青钱柳制剂在制备用于疗2型糖尿病的药物中的应用。
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