CN114878727B - 一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法，包括如下步骤：萃取：将待测样加入溶有内标物的提取液中，调节pH至8‑9，涡旋混合振荡，超声提取；分配：向上一步混合物中加入哌嗪衍生物、盐，混合至均匀，调节pH至4‑6，涡旋混合振荡，离心，留取上清液；萃取步骤提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液的混合物，通过控制pH为碱性，利用树状大分子、噁霉灵分子间的氢键作用进行分子自组装，增大噁霉灵在提取液中的溶解性，使烟草中的噁霉灵被充分提取出来；分配步骤通过调节pH为酸性破坏自组装结构，在哌嗪衍生物和盐的作用下使杂质进入水相，噁霉灵进入有机相，以此提高噁霉灵的提取分离效率，保证噁霉灵残留检测的准确性、精度和稳定性。

Description

一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法

技术领域

本发明属于农药残留提取和检测技术领域，具体涉及一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法。

背景技术

噁霉灵，化学名称为3-羟基 -5-甲基异噁唑，是一种广谱、高效、低毒的内吸性杀菌剂，同时又是一种土壤消毒剂，对镰刀霉属、丝囊霉属、腐霉属和伏革菌属引起的病害有较好的预防效果，常用作烟草的杀菌剂，对烟草的赤星病、立枯病、猝倒病、黑胫病等有良好的防治效果。噁霉灵毒性虽较低，但存在农药残留问题，对人类生命、健康构成潜在的威胁。

QuEChERS方法是近年来新兴的一种农药残留测试方法，其首先由美国农业部于2003年提出，经多方验证和改进的农药残留测试方法，具有简便、快速、结果准确和样品处理量高的特点，该方法广泛的实用性和易用性使其成为烟草中噁霉灵的残留分析的极佳选择。如张建平等人(黄朝章、余志强、谢卫、刘泽春、许寒春、蓝洪桥、邓其馨、黄延俊.超高效液相色谱串联质谱法测定烟草中的噁霉灵残留[J].中国烟草科学,2020,41(4):6.)对QuEChERS方法进行了改进，最终确定烟草中噁霉灵检测工艺包括：将样品加水浸润，经丙酮萃取、盐析试剂包除水、石墨化炭黑除杂后采用液相色谱柱分离、甲醇-水程序洗脱，质谱检测；专利CN201410436623.3公开了烟草中恶霉灵农药残留的提取净化方法以及所用组合物，还涉及一种检测恶霉灵农残的方法以及用于提取净化恶霉灵或者用于检测恶霉灵的组合物或试剂盒。具体地，所述提取净化方法包括：(1)将烟草样品在碱液中浸润，加入乙酸乙酯，振荡，得到初提取液；(2)将得到的初提取液与选自如下的试剂组A-C中的任意一组混合，静置，取上清液，得到上清液1；A.硫酸镁和氯化钠，B.硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠，和C.硫酸镁、醋酸钠和醋酸。采用该方法的恶霉灵提取率高、污染性小、成本低。以上公开技术均为在现有QuEChERS方法的基础上进行的改进、修正，以期提高噁霉灵的检测精度，但由于烟草中含有大量尼古丁、烟焦油等复杂成分，较常见的西瓜、番茄、甜菜等基质更为复杂，比如尼古丁同样也为杂环类化合物，与噁霉灵结构、极性相近，对检测结果的干扰更强，加之上述公开技术中烟草中噁霉灵的提取不充分，难以排除烟草中复杂基质对噁霉灵残留检测准确性、精度和稳定性的影响，基于此，亟需对QuEChERS方法进一步优化，以提高除杂、净化效果，使烟草这一含有复杂基质的物质中噁霉灵的提取分离效率更高，对噁霉灵的残留检测以及保障人类生命健康具有重要意义。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其中萃取步骤以乙腈、端氨基树状大分子溶液为提取液，控制pH为碱性，利用树状大分子、噁霉灵分子间的氢键作用进行分子自组装，增大噁霉灵在提取液中的溶解性，使烟草中的噁霉灵被充分提取出来；分配步骤通过调节pH为酸性破坏自组装结构，在哌嗪衍生物和盐的作用下使杂质进入水相，噁霉灵进入有机相，杂质和噁霉灵分离，以此提高噁霉灵的提取分离效率，保证噁霉灵残留检测的准确性、精度和稳定性。

为实现上述目的，本发明采用如下具体方案：

一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法，所述方法包括如下步骤：

1)清洁：将烟草去除泥土及腐败根叶，烘干至恒重，粉碎，备用；

2)萃取：将步骤1)所得物质加入溶有内标物的提取液中，调节pH至8-9，涡旋混合振荡，超声提取；

3)分配：向步骤2)混合物中加入哌嗪衍生物、盐，混合至均匀，调节pH至4-6，涡旋混合振荡，离心，留取上清液；

4)净化：取步骤3)所得上清液加至离心管中，加入盐、净化剂，涡旋混合振荡，离心，留取上清液，过滤，得净化液，备用；

5)衍生：遮光条件下，向步骤4)所得净化液中加入缓冲液调节pH至9-11，加入丹磺酰氯溶液，混合均匀后，室温遮光静置反应，反应结束后加入盐酸甲胺溶液涡旋混匀，静置至不再有沉淀产生，取上清液过滤，备用；

6)检测分析：采用液相色谱-串联质谱法测定噁霉灵衍生物的浓度，保留时间和离子对定性；采用同位素内标法，标准曲线定量；

步骤2)所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液的混合物。

步骤2)所述调节pH为用20-30wt％的氨水调节，所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液按照体积比为2:0.15-0.25的混合物，所述端氨基树状大分子为3-8代，所述端氨基树状大分子溶液的浓度为3-6wt％，所述端氨基树状大分子选自聚酰胺-胺、聚丙烯亚胺中的一种或两种的组合，所述端氨基树状大分子溶液的溶剂为甲醇；所述提取液的用量为步骤1)所得烟草重量的2-6倍；所述内标物为噁霉灵-D3，纯度>99.5％，提取液中内标物的浓度为0.005-0.02mg/L；所述涡旋转速为2000-3000r/min，涡旋时间为2-5min，所述超声提取频率为 20-40KHZ，时间为15-25min；

步骤3)所述哌嗪衍生物的添加量为步骤2)所得混合物的5-10wt％，所述盐的添加量为步骤2)所得混合物的10-20wt％，所述盐选自硫酸镁、氯化钠、硫酸钠、醋酸钠、氯乙酸钠中的一种或两种及以上的组合；所述调节pH使用试剂没有特别的限定，本领域常用的即可，包括但不限于使用浓度为10-20wt％的盐酸，所述涡旋转速为2000-3000r/min，涡旋时间为 2-5min，离心转速为5000-8000r/min，离心时间为2-5min；

步骤4)所述上清液、盐与净化剂的重量比为10:1-0.7:1-1.3，所述盐包括硫酸镁，所述净化剂选自乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、石墨化碳(GCB)、C18中的一种或两种及以上的组合，所述涡旋转速为2000-3000r/min，涡旋时间为2-5min，离心转速为5000-8000r/min，离心时间为2-5min；所述过滤为使用微孔膜过滤，微孔膜孔径为0.22-0.45μm；

步骤5)所述缓冲液的pH为9-11，所述缓冲液包括但不限于碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液；所述丹磺酰氯溶液的浓度为1-2g/mL，溶剂为乙腈；所述净化液、丹磺酰氯溶液的体积比为 1:0.8-1.3，所述盐酸甲胺溶液的用量为净化液体积的1/10-1/12，所述盐酸甲胺溶液的溶剂为水，浓度为15-25mg/L，所述过滤为使用微孔膜过滤，微孔膜孔径为0.22-0.45μm；

所述哌嗪衍生物由醛基吡啶类化合物和哌嗪类化合物上的醛基和氨基发生席夫碱反应制得，所述醛基吡啶类化合物和哌嗪类化合物的摩尔比为1:0.8-0.95。

所述醛基吡啶类化合物选自1-吡啶-3-基-1H-吡咯-2-甲醛、1-吡啶-4-基-1H-吡咯-2-甲醛、 1-(2-吡啶基)-1H吡咯-2-甲醛、1-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡咯-2-甲醛、1-(4-甲基吡啶-2-基)-1H- 吡咯-2-甲醛、1-(3-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡咯-2-甲醛、5-甲基-1-(3-吡啶基)-1H-吡咯-2-甲醛、2,5- 二甲基-1-吡啶-2-基-1H-吡咯-3-甲醛、2,5-二甲基-1-吡啶-3-基-1H-吡咯-3-甲醛、2-(1-吡咯烷基) 吡啶-3-甲醛中的一种或两种及以上的组合。

所述哌嗪类化合物选自N,N'-二(氨乙基)-哌嗪，N-(2-氨乙基)-N-[2-(1-哌嗪基)乙基]-1,2-乙二胺、1-[2-[(2-氨乙基)[2-[(2-氨乙基)氨基]乙基]氨基]乙基]哌嗪、1-[2-[[2-[双(2-氨乙基)氨基]乙基]氨基]乙基]哌嗪、2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙胺、4-甲基-1-哌嗪乙胺中的一种或两种及以上的组合。

具体的，所述哌嗪衍生物通过包括如下步骤的方法制得：

将醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物、吸水剂加至盛有有机溶剂1的反应釜中搅拌均匀，升温至回流状态，进行反应，反应结束后自然冷却至室温，加入有机溶剂2，过滤，滤渣再次溶于有机溶剂1中进行重结晶，真空干燥即得上述哌嗪衍生物。

所述有机溶剂1为甲醇和乙腈的混合溶剂，其中甲醇体积占比为60-80％，所述吸水剂包括但不限于硫酸镁、氧化钙、硫酸钠中的一种或两种及以上的组合；所述吸水剂的用量为醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物总重的15-25wt％；所述反应时间为6-12h，所述有机溶剂2 包括己烷、庚烷中的一种或两种的组合。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明烟草中噁霉灵残留物的方法萃取步骤以乙腈、端氨基树状大分子溶液为提取液，控制pH为碱性，利用树状大分子、噁霉灵分子间的氢键作用进行分子自组装，增大噁霉灵在提取液中的溶解性，使烟草中的噁霉灵被充分提取出来；分配步骤通过调节pH为酸性破坏自组装结构，在哌嗪衍生物和盐的作用下使杂质进入水相，噁霉灵进入有机相，杂质和噁霉灵分离，以此提高噁霉灵的提取分离效率，保证噁霉灵残留检测的准确性、精度和稳定性。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限于说明书上的内容。若无特殊说明，本发明实施例中所述“份”均为重量份。所用试剂均为本领域可商购的试剂。

设备：三重四级杆液质联用仪(HPLC-MS/MS)，GERY-SPY-30，美国安捷伦，Agilent1290-6470；

聚酰胺-胺溶液，溶剂为甲醇，8.0代，浓度为5wt％，购自Sigma-Aldrich。

烟草来源

山东省青岛市试验点：地处北温带季风区域，属温带季风气候，又具有显著的海洋性气候特点。空气湿润，雨量充沛，温度适中，四季分明。年平均气温12.7℃，平均降雨量662.1 毫米。试验期间最高气温：34.3℃，最低气温：3.6℃，平均气温：19.17℃，总降雨量：2121.4 毫米。

试验时间为2021-03-06～2021-09-13。

试验地点为山东省青岛市即墨区龙泉镇石门村选取100平方米烟草小区(空白处理和施药处理各50平方米)。

烟草品种：中烟100。

施药历史：该田地2020年06月27日使用异恶唑草酮悬浮剂。

2021-03-09和2021-04-14施用噁霉灵乳油(噁霉灵有效成分10％)，稀释1000倍液。

2021-03-09第一次施药为苗床喷洒。

2021-04-14第二次施药为出苗后2叶期。

2021-09-06采收成熟烟叶。

哌嗪衍生物的制备

制备例1

将0.1mol 1-吡啶-3-基-1H-吡咯-2-甲醛、0.08mol N,N'-二(氨乙基)-哌嗪，7.7g硫酸镁加至盛有甲醇体积占比为80％的120ml甲醇和乙腈混合溶剂的反应釜中搅拌均匀，升温至回流状态，进行反应10h，反应结束后自然冷却至室温，加入己烷至不再有沉淀产生，过滤，滤渣再次溶于甲醇体积占比为80％的甲醇和乙腈混合溶剂中进行重结晶，真空60℃干燥12h即得上述哌嗪衍生物。

实施例1

1)采摘经施药处理的鲜烟草，去除泥土及腐败根叶，60℃烘干至恒重，粉碎，备用；

2)萃取：将步骤1)所得100份物质加入噁霉灵-D3含量为0.01mg/L(纯度99.7％)的600份提取液中，提取液由乙腈、聚酰胺-胺溶液按照体积比为2:0.25混合而成，其中聚酰胺- 胺溶液浓度为5wt％，聚酰胺-胺溶液的溶剂为甲醇，用25wt％的氨水调节pH至9，2500r/min 涡旋混合5min，用频率为28KHZ的超声提取20min；

3)分配：向上一步中加入占步骤2)所得混合物10wt％的制备例1制备的哌嗪衍生物、以及占步骤2)所得混合物15wt％的盐，盐由重量比为4:1:1的硫酸镁、氯化钠及氯乙酸钠组成，将混合物混合至均匀，用浓度为15wt％的盐酸调节pH至6，2500r/min涡旋混合5min， 8000r/min离心5min，留取上清液；

4)净化：取步骤3)所得10份上清液加至离心管中，加入1份硫酸镁、0.5份PSA+0.5份C18，2500r/min涡旋混合振荡5min，8000r/min离心，留取上清液，0.22μm微孔膜过滤，得净化液，备用；

5)衍生：遮光条件下，向1份步骤4)所得净化液中加入碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液，调节 pH为10，再加入1份浓度为1g/mL的丹磺酰氯溶液(溶剂为乙腈)，混合均匀后，室温遮光静置反应，反应结束后加入0.1份浓度为20mg/L的盐酸甲胺溶液涡旋混匀，静置至不再有沉淀产生，取上清液用0.22μm微孔膜过滤，备用；

6)检测分析：采用液相色谱-串联质谱法测定噁霉灵衍生物的浓度，保留时间和离子对定性；采用同位素内标法，标准曲线定量，定量限为0.01mg/kg；在空白处理烟草样品中添加农药标准溶液，对检测方法准确度进行评价；采用回收率试验的相对标准偏差衡量检测方法精密度。

液相条件：

色谱柱：Agilent C18，2.1mm×50mm，1.8μm；

流速：0.4mL/min；

柱温：40℃；

进样量：1μL；

流动相：A相：水(含0.1％甲酸)，B相：乙腈(含0.1％甲酸)；

后运行时间：2min；

流动相及梯度洗脱程序：如表1所示；

表1流动相及梯度洗脱条件

质谱条件：

质谱离子源：电喷雾离子源(AJS ESI)；

扫描模式：正离子模式；

扫描方式：多反应监测(MRM)；

毛细管电压：5500V；

喷嘴电压：500V；

喷雾器压力：35psi；

干燥气体流速：8L/min；

干燥气体温度：300℃；

鞘气流速：11L/min；

鞘气温度：300℃；

多反应监测离子信息：如表2所示。

表2噁霉灵衍生物及噁霉灵D3衍生物多反应监测离子信息表(MRM)

标准曲线

噁霉灵标准液配置：称取98.00％的噁霉灵标准品0.01020g，用色谱纯乙腈溶解并定容至 10mL容量瓶中，配制成1000mg/L的标准储备液。用色谱纯乙腈将1000mg/L的噁霉灵标准储备液逐级稀释成100mg/L、10mg/L的标准溶液，待用。

称取97.80％的噁霉灵D3标准品0.00102g，用色谱纯乙腈溶解并定容至10mL容量瓶中，配制成100mg/L的标准储备液。用色谱纯乙腈将100mg/L的噁霉灵D3标准储备液稀释成 10mg/L的标准溶液，待用。

用空白处理鲜烟叶基质溶液(烘干至恒重，用步骤1)提取液萃取所得)对噁霉灵标准溶液进行梯度稀释，得到噁霉灵(内标噁霉灵D3浓度为0.01mg/L)在鲜烟叶基质上的混合标准溶液，标准工作曲线浓度均为0.0005mg/L、0.001mg/L、0.005mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、 0.1mg/L，与实施例进行同步衍生，在上述高效液相色谱质谱联用仪条件下进行测定，以监测定量离子的浓度与峰面积作出标准曲线，得到：噁霉灵在鲜烟叶上的标准曲线方程为y＝2.25 ×x+0.03，r＝0.9996。拟合的标准曲线线性回归方程的相关系数r大于0.999，满足残留分析的拟合要求。

1.残留量结果计算

用外标法定量，按照下式计算样品中的目标物残留量：

式中：

X——样品中目标物残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

c——由标准曲线得出的测定液中目标物的浓度，单位为毫克每升(mg/L)；

V——测定液定容体积，单位为毫升(mL)；

n——稀释或浓缩因子；

m——样品质量，单位为克(g)。

2.回收率(R)(％)结果计算

加标回收率＝(加标试样测定值-未加标试样测定值)/加标理论值×100％

加标试样测定值：加入噁霉灵标准溶液的提取液测得的噁霉灵浓度；

未加标试样测定值：未加标标准溶液的提取液测得的噁霉灵浓度，此处指空白处理烟草试样中噁霉灵的浓度，即未施药烟草中噁霉灵的浓度，即为0；

加标理论值：指噁霉灵标准溶液的浓度乘以加入的体积。

3.精密度结果计算

方法精密度以添加回收率的相对标准偏差RSD(％)表示。对三个添加浓度的试验结果进行数据统计，求算相对标准偏差RSD(％)。

式中：

RSD——相对标准偏差，％；

n——测量次数；

Xi——单个样品的测定值；

i——样品顺序编号；

——测定平均值。

实施例2

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)提取液由乙腈、聚酰胺-胺溶液按照体积比为2:0.15混合而成。

实施例3

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)提取液由乙腈、聚酰胺-胺溶液按照体积比为2:0.1混合而成。

实施例4

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)提取液由乙腈、聚酰胺-胺溶液按照体积比为2:0.4混合而成。

实施例5

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)中所用的步骤1)所得的物质为100份，提取液为200份。

实施例6

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤3)中制备例1制备的哌嗪衍生物用量占步骤2)所得混合物的5wt％，盐占步骤2)所得混合物的25wt％，硫酸镁、氯化钠及氯乙酸钠的重量比依然为4:1:1。

实施例7

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤3)pH调至4。

实施例8

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)pH调至8。

对比实施例1

其余与实施例1相同，不同之处在于，步骤2)600份提取液全部为乙腈。

表3

由上表可以看出，本发明中以乙腈、端氨基树状大分子溶液为提取液，控制pH为碱性，利用树状大分子、噁霉灵分子间的氢键作用进行分子自组装，增大噁霉灵在提取液中的溶解性，使烟草中的噁霉灵被充分提取出来；分配步骤通过调节pH为酸性破坏自组装结构，在哌嗪衍生物和盐的作用下使杂质进入水相，噁霉灵进入有机相，杂质和噁霉灵分离，可显著提高噁霉灵的回收率和精密度，大大保证了噁霉灵残留检测的准确性、精度和稳定性。

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。

Claims (8)

1.一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）清洁：将烟草去除泥土及腐败根叶，烘干至恒重，粉碎，备用；

2）萃取：将步骤1）所得物质加入溶有内标物的提取液中，用氨水调节pH至8-9，涡旋混合振荡，超声提取；

3）分配：向步骤2）混合物中加入哌嗪衍生物、盐，混合至均匀，调节pH至4-6，涡旋混合振荡，离心，留取上清液；所述哌嗪衍生物通过包括如下步骤的方法制得：将醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物、吸水剂加至盛有有机溶剂1的反应釜中搅拌均匀，升温至回流状态，进行反应，反应结束后自然冷却至室温，加入有机溶剂2，过滤，滤渣再次溶于有机溶剂1中进行重结晶，真空干燥即得上述哌嗪衍生物；所述有机溶剂1为甲醇和乙腈的混合溶剂；所述有机溶剂2包括己烷、庚烷中的一种或两种的组合；所述醛基吡啶类化合物和哌嗪类化合物的摩尔比为1:0.8-0.95；所述醛基吡啶类化合物为1-吡啶-3-基-1H-吡咯-2-甲醛；所述哌嗪类化合物为N,N'-二(氨乙基)-哌嗪；有机溶剂1中甲醇体积占比为60-80%；

4）净化：取步骤3）所得上清液加至离心管中，加入盐、净化剂，涡旋混合振荡，离心，留取上清液，过滤，得净化液，备用；

5）衍生：遮光条件下，向步骤4）所得净化液中加入缓冲液调节pH至9-11，加入丹磺酰氯溶液，混合均匀后，室温遮光静置反应，反应结束后加入盐酸甲胺溶液涡旋混匀，静置至不再有沉淀产生，取上清液过滤，备用；

6）检测分析：采用液相色谱-串联质谱法测定噁霉灵衍生物的浓度，保留时间和离子对定性；采用同位素内标法，标准曲线定量；

步骤2）所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液的混合物；所述端氨基树状大分子为聚酰胺-胺。

2.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液按照体积比为2:0.15-0.25的混合物。

3.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述提取液的用量为步骤1）所得烟草重量的2-6倍，所述端氨基树状大分子为3-8代，所述端氨基树状大分子溶液的浓度为3-6wt%，所述端氨基树状大分子溶液的溶剂为甲醇。

4.如权利要求3所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述内标物为噁霉灵-D3，纯度>99.5%，提取液中内标物的浓度为0.005-0.02mg/L。

5.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤3）所述哌嗪衍生物的添加量为步骤2）所得混合物的5-10wt%，所述盐的添加量为步骤2）所得混合物的20-25wt%，所述盐选自硫酸镁、氯化钠、硫酸钠、醋酸钠、氯乙酸钠中的一种或两种及以上的组合。

6.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤4）所述上清液、盐与净化剂的重量比为10:1-0.7:1-1.3，所述盐包括硫酸镁，所述净化剂选自乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化碳、C18中的一种或两种及以上的组合。

7.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤5）所述缓冲液的pH为9-11，所述缓冲液包括碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液；所述丹磺酰氯溶液的浓度为1-2 g/mL，溶剂为乙腈；所述净化液、丹磺酰氯溶液的体积比为1:0.8-1.3，所述盐酸甲胺溶液的用量为净化液体积的1/10-1/12，所述盐酸甲胺溶液的溶剂为水，浓度为15-25 mg/L。

8.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，哌嗪衍生物的制备方法中，所述吸水剂选自硫酸镁、氧化钙、硫酸钠中的一种或两种及以上的组合；所述吸水剂的用量为醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物总重的15-25wt%；所述反应时间为6-12h。