CN114796462B

CN114796462B - 一种长效glp-1衍生物的药物制剂

Info

Publication number: CN114796462B
Application number: CN202210738961.7A
Authority: CN
Inventors: 曹海燕; 林兆生; 王淳; 朱志伟; 赵爽; 张海朝
Original assignee: Jilin Huisheng Biopharmaceutical Co ltd; Beijing Huizhiheng Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Jilin Huisheng Biopharmaceutical Co ltd; Beijing Huizhiheng Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2021-12-28
Filing date: 2022-06-28
Publication date: 2022-09-13
Anticipated expiration: 2042-06-28
Also published as: CN114621339B; CN115850438A; CN114621339A; WO2023124847A1; CN114874314B; CN114796462A; CN114874314A; CN115850438B

Abstract

本发明涉及一种长效GLP‑1衍生物的药物制剂，本发明的长效GLP‑1衍生物具有与GLP‑1受体（GLP‑1R）的良好的结合亲和力，且与已上市的其他GLP‑1衍生物相比，本发明的长效GLP‑1衍生物具有更为明显和优异的降糖能力和减重能力。且基于本发明的GLP‑1衍生物的药物制剂具备良好的稳定性，处方及工艺简单，适于工业化生产。

Description

一种长效GLP-1衍生物的药物制剂

技术领域

本发明涉及多肽技术及其衍生物领域，尤其涉及一种长效GLP-1衍生物的药物制剂。

背景技术

糖尿病是一组因胰岛素绝对或相对分泌不足和/或胰岛素利用障碍引起的碳水化合物、蛋白质、脂肪等代谢紊乱性疾病，以高血糖为主要标志，可由遗传和环境等多种因素引起。糖尿病是人类三大致死疾病之一，它的死亡率仅次于心脑血管疾病和癌症。

糖尿病主要分为1型糖尿病和2型糖尿病，其中大多数患者为2型糖尿病患者（据统计，约占90%）。2型糖尿病（diabetes mellitus type 2，T2DM），旧称非胰岛素依赖型糖尿病（noninsulin-dependent diabetes mellitus，NIDDM）或成人发病型糖尿病（adult-onsetdiabetes），患者特征为高血糖、相对缺乏胰岛素、胰岛素抵抗等。目前，临床上使用的治疗2型糖尿病的药物主要有双胍类、磺酰脲类、噻唑烷二酮类、DPP-4受体抑制剂、SGLT-2受体抑制剂和GLP-1衍生物。而其中，GLP-1衍生物由于具有与胰岛素类似的降糖效果，但同时几乎无低血糖风险、兼具减重效果和心血管保护功能，正逐渐成为2型糖尿病的主要治疗药物和研究热点。

胰高血糖素样肽1（GLP-1）是一种由肠道L细胞分泌的促胰素，具有促进胰岛素分泌、抑制胰高血糖素的释放、刺激胰岛β细胞增殖、诱导胰岛β细胞再生、阻止胰岛β细胞凋亡、改善胰岛素敏感性和增加葡萄糖的利用等作用。因此，GLP-1及其类似物和衍生物在治疗1和2型糖尿病的发生、发展中起着重要作用。

GLP-1类似物和胰高血糖素的氨基酸序列有近一半相同，具有葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌和生物合成、抑制胰高血糖素分泌及抑制胃排空等多种功能（付刚，龚珉，徐为人.胰高血糖素样肽1及其受体激动剂研究进展[J] .天津医药，2012，40(2):181-184 .）。

在文献Normalization of fasting hyperglycaemia by exogenous glucagon-like peptide 1 (7-36 amide) in type 2 (non-insulin-dependent) diabeticpatients（[J]. Diabetologia, Nauck M . ，1993, 36）中，作者对10例血糖控制不佳的2型糖尿病患者进行了研究，并在空腹状态下分别给予患者GLP-1或安慰剂，结果显示，患者在输注GLP-1后，其胰岛素和C肽水平显著增加，胰高血糖素水平显著降低，空腹血糖水平在4小时后变为正常；在血糖水平正常后，虽然仍持续输注GLP-1，患者的胰岛素水平却不会再升高，血糖水平也维持稳定，不再进一步下降，这说明GLP-1作为一种肠源性激素，其是在营养物质（特别是碳水化合物）的刺激下才释放入血的，其促胰岛素分泌作用呈葡萄糖浓度依赖性，能够在血糖升高时发挥降糖作用，抑制胰高糖素分泌，增加饱腹感，减少饥饿感，从而达到降低血糖作用。而在文献Effect of 6-week course of glucagon-like peptide 1on glycaemic control, insulin sensitivity, and β-cell function in type 2diabetes: a parallel-group study.（[J]. Lancet, Zander, Mette, Madsbad, et al.，2002）中，研究者的研究表明GLP-1通过多种途径产生降低体重的作用，包括抑制胃肠道蠕动和胃液分泌，抑制食欲及摄食，延缓胃内容物排空。此外，GLP-1还可作用于中枢神经系统（特别是下丘脑）抑制食欲，减少进食量，从而使人体产生饱胀感和食欲下降，减少卡路里的摄入量，进而达到减轻体重的目的。

目前，已上市的GLP-1衍生物主要有艾塞那肽、利拉鲁肽、度拉糖肽、利司那肽、艾塞那肽微球制剂、阿必鲁肽、聚乙二醇洛塞那肽和索马鲁肽（又名司美鲁肽）。其中，索马鲁肽为GLP-1衍生物药物中的代表。

索马鲁肽(Semaglutide)是由诺和诺德公司研发的长效GLP-1衍生物，该药物只需要进行每周一次的皮下注射给药，目前已在多国获批上市。而且，诺和诺德通过制剂技术，开发了索马鲁肽的口服制剂。从结构上看，索马鲁肽是将GLP-1（7-37）链上第26位Lys接上AEEA、谷氨酸和十八烷脂肪二酸侧链，并将其中第8位氨基酸采用非天然氨基酸氨基异丁酸（Aib）取代原Ala所得。与利拉鲁肽相比，索马鲁肽的脂肪链更长，疏水性增加，但是索马鲁肽经过短链的AEEA修饰，亲水性大大增强。AEEA修饰后不但可以与白蛋白紧密结合，掩盖DPP-4酶水解位点，还能降低肾排泄，延长生物半衰期，达到长循环的效果。索马鲁肽在多个临床试验研究已经证明联合不同的口服降糖药可以有效控制血糖，并能够使患者减轻体重、减少收缩压及改善胰岛β细胞功能。

目前，对于GLP-1的应用形式包括口服、注射等，注射指药物制成的供注入体内的无菌溶液（包括乳浊液和混悬液）以及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末或浓溶液。注射剂作用迅速可靠，不受pH、酶、食物等影响，无首过效应，可发挥全身或局部定位作用，适用于不宜口服药物和不能口服的病人。

注射剂的组成结构一般包括主药、附加剂和溶剂，制备工艺一般包括原料药的准备、配制、灌封、灭菌和包装等步骤。其中的附加剂一般是用以增加注射剂的有效性、安全性和稳定性，其选择种类和使用的浓度需要对机体无毒，同时不影响主要的疗效。目前常用的附加剂包括助溶剂、抗氧剂、pH值调节剂、抑菌剂、渗透压调节剂等。并且，虽然辅料的添加能够增加注射液的稳定性，溶解性等，但由于主药含量较低，若辅料添加种类以及添加量较大，则需要更多地考虑成分的有效性，以及安全性等问题。

CN109908332A公开了一种GLP-1注射液及其制备方法，其注射液中使用的附加剂包括等渗剂、防腐剂和缓冲剂，具体为甘露醇、苯乙醇、冰醋酸和三水合醋酸钠，其制备的注射液虽然能够放置稳定一段时间，但是其并未过多的考虑在强光高热下的稳定性，即GLP-1注射液的稳定性依旧有可提升空间。

为此，本发明针对前期构建的长效GLP-1衍生物，提供一种长效GLP-1注射制剂，使其具有优异的稳定性、有效性和安全性。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种长效GLP-1衍生物的药物制剂。本发明提供的药物制剂能够在强光、高热（40℃）下稳定保存，且制备工艺简单，更加适于工业化生产。

本发明所述长效GLP-1为专利CN2022101139459中公开的长效GLP-1衍生物，具体如下：

本发明提供了一种GLP-1（7-37）类似物，所述GLP-1（7-37）类似物由下式所示的氨基酸序列的多肽组成：

HX₈EGTFTSDVSSYLEEQAAX₂₆EFIAWLVX₃₄X₃₅X₃₆G；

其中，X₈选自V、I、T、L、G或S，X₂₆为R或K，X₃₄为R或K，X₃₅为G或R，X₃₆为G或R，其中X₂₆和X₃₄中仅有一个为K。

本发明提供一种长效GLP-1（7-37）衍生物，所述衍生物包含分别与所述GLP-1（3-37）类似物K残基连接的脂肪酸侧链，优选通过K残基上的ε氨基与侧链连接。

当所述GLP-1（7-37）类似物为Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴-GLP-1（7-37）时，所述GLP-1（7-37）类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

当所述GLP-1（7-37）类似物为Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴-GLP-1（7-37）时，所述GLP-1（7-37）类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

当所述GLP-1（7-37）类似物为Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶-GLP-1（7-37）时，所述GLP-1（7-37）类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

当所述GLP-1（7-37）类似物为Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶-GLP-1（7-37）时，所述GLP-1（7-37）类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

作为本发明的一种优选技术方案，本发明所述长效GLP-1（7-37）衍生物中使用的脂肪酸侧链结构为HOOC(CH₂)_nCO-，其中n为选自10-24的整数，更优选为16-20的整数。具体地，所述脂肪酸侧链可以选自HOOC(CH₂)₁₄CO-、HOOC(CH₂)₁₅CO-、HOOC(CH₂)₁₆CO-、HOOC(CH₂)₁₇CO-、HOOC(CH₂)₁₈CO-、HOOC(CH₂)₁₉CO-、HOOC(CH₂)₂₀CO-、HOOC(CH₂)₂₁CO-或HOOC(CH₂)₂₂CO-，优选地，所述脂肪酸侧链结构为HOOC(CH₂)₁₆CO-。

作为本发明的一种优选技术方案，所述脂肪酸侧链通过接头与残基连接。

作为本发明的一种优选技术方案，所述脂肪酸侧链通过接头与所述GLP-1（3-37）类似物上的位置X₂₆或X₃₄的Lys的ε氨基连接。

作为本发明的一种优选技术方案，所述接头选自：

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

；

其中，m为0-6的整数，例如0、1、2、3、4、5、6等，n为1-3的整数，例如1、2、3等，s为0-3的整数，例如0、1、2、3等，t为0-4的整数，例如0、1、2、3、4等，p为1-23的整数，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23等。

作为本发明的一种具体实施方式，所述接头为：

；

其中，s为1，n为1或2。

对于上述优选的接头部分（当n为1时），按照IUPAC命名法，可表示为γ-Glu-OEG-OEG，其中OEG表示基团-NH(CH₂)₂O(CH₂)₂CO-，即“2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙酰基”的简写。当选择HOOC(CH₂)₁₆CO-作为侧链时，上述侧链和接头的组合（酰基基团），按照IUPAC命名法，可以被称为“[2-(2-[2-(2-[2-(2-)4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]”。

作为本发明的一种具体实施方式，本发明所述衍生物包含与所述GLP-1（7-37）类似物的第34位的赖氨酸的ε氨基连接的脂肪酸侧链，所述脂肪酸侧链为HOOC(CH₂)₁₆CO-，所述脂肪酸侧链通过-γ-Glu-OEG-OEG-与上述第34位的赖氨酸的ε氨基连接。

因此，优选地，本发明所述长效GLP-1衍生物选自如下化合物：

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴]GLP-1（7-37）（简称为HS-G1）；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴]-GLP-1（7-37）（简称为HS-G2）；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37）（简称为HS-G3）；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37）（简称为HS-G4）。

发明人发现通过部分位点的变化，尤其是将GLP-1（7-37）类似物多肽第35位和第36位的氨基酸分别修饰为氨基酸Arg和Gly后，再在特定位点经过酰化后得到的GLP-1衍生物，具有更为优异的降糖和减重活性。

体外结合活性表明，本发明提供的长效GLP-1衍生物相比于索马鲁肽，保持了与之相当的GLP-1R结合亲和力。具体体外活性检测结果（EC50）如表1所示：

表1

样品	HS-G1	HS-G2	HS-G3	HS-G4	索马鲁肽
						EC50(nM)	4.814	9.269	3.842	2.463	1.892

在糖尿病动物模型（db/db小鼠）中的降糖实验表明，本发明的衍生物在几乎每次给药2 h和48 h时，均有显著优于索马鲁肽的降糖效果；其中，HS-G3效果最为明显，降糖效果最佳，同样优于与其序列类似的HS-G1；而HS-G4降糖效果在优于索马鲁肽的同时，同样优于HS-G2。具体结果如表2所示：

表2

GLP-1衍生物的另外一个重要作用即是其减重效果，可开发为减重适应症药物，而且索马鲁肽作为减重适应症药物已经获得美国FDA批准。本发明肥胖动物模型中的研究结果表明，相比于索马鲁肽，本发明的GLP-1衍生物（尤其是HS-G3和HS-G4）在正常动物模型和糖尿病动物模型中，平均具有近两倍或两倍以上的减重效果，且不存在低血糖风险，因此，本发明的长效GLP-1衍生物具有更为广阔的商业开发价值。具体的在db/db小鼠中的减重效果如表3所示：

表3

样品

模型对照组

阳性对照组(索马鲁肽)

实验组1 (HS-G1)

实验组2 (HS-G2)

实验组3 (HS-G3)

实验组4 (HS-G5)

DAY1

59.0±7.7

58.2±7.7

58.6±8.5

58.1±8.4

58.0±8.2

59.0±7.7

DAY3

58.2±8.5

55.5±7.7

56±7.5

56.1±7.2

56.3±6.8

58.2±8.5

DAY5

59.3±6.2

56.5±4.6

55.5±5.6

55.6±5.6

56.1±5.5

59.3±6.2

DAY7

58.7±3.1

55±2.8

54.9±3.3

55.6±3

56.3±2.8

58.7±3.1

DAY9

57.9±2.6

52.6±3.3

51.9±2

52.7±1.6

53.2±2.2

57.9±2.6

体重变化/g

-1.0

-1.9

-3.2

-2.4

-4.7

-4.2

体重变化率/%

-1.69

-3.26

-5.40

-4.09

-8.12

-7.22

基于上述改进的长效GLP-1衍生物，本发明提供一种长效GLP-1衍生物的药物制剂（药物组合物），所述药物组合物包括长效GLP-1衍生物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料；

其中，所述GLP-1衍生物为：

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴]GLP-1（7-37），其类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴]-GLP-1（7-37），其类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37），其类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基] 乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37），其类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

作为本发明的一种优选技术方案，所述长效GLP-1衍生物为N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2- [2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙 氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37）。

本发明提供的序列为SEQ ID NO.3的GLP-1类似物得到的长效GLP-1衍生物具有与索马鲁肽相当的人胰岛素受体的结合亲和力，且其具有优异的降糖效果以及优于索马鲁肽的减重效果，同时不会导致过度的血浆较低，无低血糖风险，因此，应用本发明提供的上述长效GLP-1衍生物具有更优异的效果。

作为本发明的一种优选技术方案，所述药物组合物为注射液制剂。

作为本发明的一种优选技术方案，所述辅料为磷酸氢二钠、丙二醇和苯酚。

作为本发明的一种优选技术方案，所述辅料组成为：磷酸氢二钠1.133 mg/mL、丙二醇14.00 mg/mL，苯酚5.50 mg/mL。

本发明发现，当渗透压调节剂为丙二醇，所述防腐剂为苯酚，最后得到的注射制剂在强光（5000 Lux）、高温（40℃）条件下具有优异的稳定性。

作为本发明的一种优选技术方案，所述药物组合物的组成为：长效GLP-1衍生物1.34 mg/mL、磷酸氢二钠1.133 mg/mL、丙二醇14.00 mg/mL和苯酚5.50 mg/mL。

作为本发明的一种优选技术方案，所述药物组合物的pH值为6.8-7.4。

本发明发现，药物组合物的pH值对化学稳定性有一定的影响，本发明优选6.8-7.4的pH值，在此范围内，药物组合物在强光（5000 Lux）、高温（40℃）条件下具有优异的稳定性，若pH值过高，则疏水杂质及高分子蛋白含量随之增高。

此外，本发明还提供了所述的药物组合物的制备方法，所述制备方法包括：

（1）辅料溶解：将磷酸氢二钠、丙二醇和苯酚溶于70-90 wt%的注射用水中；

（2）原料药溶解：在步骤（1）得到的辅料溶液中加入长效GLP-1衍生物溶解至澄清；

若步骤（2）得到的溶液pH值需要调整，则：

（3）利用稀盐酸/氢氧化钠调节pH值；

（4）定容：将剩余的注射用水加入步骤（2）或（3）得到的溶液混合均匀。

第二方面，本发明提供了一种所述药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的应用。

第三方面，本发明提供了一种所述药物组合物在制备减重药物中的应用。

本发明提供的长效GLP-1衍生物与现有技术相比具有如下优点：

（1）本发明提供的GLP-1衍生物，在糖尿病患者中具有更优异的降糖能力；

（2）相比于索马鲁肽，本发明提供的长效GLP-1衍生物，对正常人群和糖尿病患者均具有更加优异且显著的减重能力，具备更优的减重应用潜力；

（3）本发明提供的药物组合物在强光（5000 Lux）、高温（40℃）条件下具有优异的稳定性。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点，下面将对本发明的方案进行进一步描述。需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但本发明还可以采用其他不同于在此描述的方式来实施；显然，说明书中的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。

实施例1

本实施例提供了一种长效GLP-1衍生物的注射制剂的制备方法。

所述注射制剂组成为：

长效GLP-1衍生物1.34 mg/mL、磷酸氢二钠1.133 mg/mL、渗透压调节剂（丙二醇14.00 mg/mL或甘油17.00 mg/mL），防腐剂（苯酚5.50mg/mL或间甲酚2.20 mg/mL），余量为注射用水。

其中，所述长效GLP-1衍生物为N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰 胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37），其氨基酸序列为HIEGTFTSDVSSYLEEQAAREFIAWLVKRGG（SEQ ID NO.3）。

制备方法如下：

（1）配液

室温条件下，称取90%处方量注射用水置于试剂瓶中，开启搅拌器，依次加入处方量的无水磷酸氢二钠、渗透压调节剂、防腐剂搅拌溶解，再加入长效GLP-1衍生物（简称HS-G3）搅拌溶解；检测其pH值，并采用稀盐酸/氢氧化钠调节pH值至7.4，最后加入注射用水定容至处方量；

（2）过滤

采用0.22μm PES滤膜将配制好的溶液过滤，收集滤液；

（3）灌装

按照每支3mL装量，将过滤后的溶液灌装至已与活塞、铝盖组合的卡式瓶中。

实施例2

本实施例考察了防腐剂苯酚和间甲酚对长效GLP-1衍生物的注射制剂稳定性的影响。本发明使用的两种不同处方的组成如表4所示：

表4

原辅料名称	处方1（mg/mL）	处方2（mg/mL）
			长效GLP-1衍生物	1.34	1.34
磷酸氢二钠	1.133	1.133
			丙二醇	14.00	14.00
苯酚	5.50	/
			间甲酚	/	2.20
注射用水	注射用水配制	注射用水配制

性能分析：稳定性分析

将上述样品分别放置于强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下5天、10天和15天，检测样品分别于0天、5天、10天和15天的性状、可见异物、有关物质和高分子蛋白，结果见表5：

表5

由表5数据可知，相比于间甲酚，以苯酚作为防腐剂制备得到的注射制剂具有更优异的稳定性，在强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下放置15天后，纯度仍保持在95%的较高水平，各杂质水平仍在可接受的范围内。

实施例3

本实施例比较了丙二醇和甘油对长效GLP-1衍生物的注射制剂稳定性的影响。本实施例使用的处方组成如表6所示：

表6

原辅料名称	处方1（mg/mL）	处方2（mg/mL）
			长效GLP-1衍生物	1.34	1.34
磷酸氢二钠	1.133	1.133
			丙二醇	14.00	/
甘油	/	17.00
			苯酚	5.50	5.50
注射用水	注射用水配制	注射用水配制

性能分析：稳定性分析

注射制剂分别放置于强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下5天、10天和15天，检测样品分别于0天、5天、10天和15天的性状、可见异物、有关物质和高分子蛋白，结果见表7：

表7

由表7数据可知，在强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下放置15天后，相比于甘油，以丙二醇作为渗透压调节剂制备得到的注射制剂具有更优异的稳定性。

实施例4

本实施例比较了不同PH值对长效GLP-1衍生物的注射制剂稳定性的影响，本实施例使用的制剂组成为：长效GLP-1衍生物1.34 mg/mL、磷酸氢二钠1.133 mg/mL、丙二醇14.00 mg/mL，苯酚5.50 mg/mL，余量为注射用水。

参照实施例1的制备方法制备本实施例的注射制剂，并将药液分成5份，分别采用稀盐酸/氢氧化钠调节pH值至6.8、7.1、7.4、7.7、8.0，备用。

性能分析：稳定性分析

将本实施例得到的注射制剂分别放置于强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下5天、10天和15天，检测样品分别于0天、5天、10天和15天的性状、可见异物、有关物质和高分子蛋白，结果见表8：

表8

由表8数据可知，在强光照射5000 Lux、高温40℃（HT40）条件下放置15天后，注射制剂的pH值为6.8-7.4能够使其具有更优异的稳定性，若其pH值过高，则有可能导致疏水杂质2及高分子蛋白两项杂质含量随之上升，且当pH高于7.4时，上升趋势更为显著。

综上，当本发明提供的注射制剂的渗透压调节剂为丙二醇，防腐剂为苯酚，且注射制剂的pH值为6.8-7.4时，注射制剂具有更优异的稳定性。能够在强光、高温下放置较长时间。

需要说明的是，在本文中，诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

以上所述仅是本发明的具体实施方式，使本领域技术人员能够理解或实现本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所述的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

序列表

<110> 北京惠之衡生物科技有限公司

吉林惠升生物制药有限公司

<120> 一种长效GLP-1衍生物的药物制剂

<130> KP2212969.2Z

<150> 202111629476.8

<151> 2021-12-28

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 31

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

His Ile Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu

1 5 10 15

Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly

20 25 30

<210> 2

<211> 31

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

His Thr Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu

1 5 10 15

Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly

20 25 30

<210> 3

<211> 31

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

His Ile Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu

1 5 10 15

Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Arg Gly Gly

20 25 30

<210> 4

<211> 31

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

His Thr Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu

1 5 10 15

Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Arg Gly Gly

20 25 30

Claims

1.一种药物组合物，其特征在于，包括长效GLP-1衍生物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料；

其中，所述GLP-1衍生物为：

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基]乙氧 基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Ile⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37）；或

N-ε ³⁴ -[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-羧基十七烷酰胺基)-4(S)-羧基丁酰基氨基]乙氧 基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Thr⁸Glu²²Arg²⁶Lys³⁴Arg³⁵Gly³⁶]GLP-1（7-37）。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为注射液制剂。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述辅料为磷酸氢二钠、丙二醇和苯酚。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述辅料组成为：磷酸氢二钠1.133mg/mL、丙二醇14.00 mg/mL，苯酚5.50 mg/mL。

5.权利要求1-4中的任一项所述的药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的应用。

6.权利要求1-4中的任一项所述的药物组合物在制备减重药物中的应用。