CN114788521B - 一种复合增效多功能消毒剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种复合增效多功能消毒剂及其制备方法，所述消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐3～5％，杀菌剂0.6～1.3％，稳定剂3～6％，增效剂0.5～1.5％，pH调节剂2～4％，表面活性剂4～6％，增香剂0.5～1.5％，余量为水，所述季铵盐为烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵中的至少一种；所述制备方法包括以下步骤：(1)将所述季铵盐、稳定剂、pH调节剂、表面活性剂与水混合，搅拌使混合液充分溶解；(2)继续加入所述杀菌剂、增效剂和增香剂，搅拌均匀后静置，即得到所述的消毒剂。本发明提供的消毒剂无刺激、无腐蚀、无毒性，既对细菌、真菌具有较好的杀灭效果，同时还对冠状病毒具有良好的杀灭效果。
Description
技术领域
本发明属于消毒剂领域，具体涉及一种复合增效多功能消毒剂及其制备方法。
背景技术
目前市面上销售的消毒产品多以单一化学原料为主要成分，主要为含氯消毒剂和含醇消毒剂。含 氯消毒剂，如84消毒液、二氯异氰尿酸钠、三氯异氰尿酸等，虽然可以保证消毒效果，但消毒后可 能会对人体或环境造成二次毒害。特别是公共环境方面的卫生防疫的要求很高：既要求达到大范围的消毒效果，又要求对人体安全无毒，对环境无害，而含氯消毒剂由于消毒副产物毒性大、腐蚀性强、 皮肤黏膜刺激性强，无法满足要求。含醇类消毒剂(如75％酒精)则属于甲类危险物质，易燃易爆， 尤其误用于空间喷雾时容易引发火灾事故，而且长期使用会造成皮肤失水，引起皮肤干燥，酒精过敏 者更无法使用。因此，酒精消毒和含氯消毒剂的使用具有严重的场景局限性。
进入新世纪，绿色化学受到了广大学者的关注，成为国际科学研究前沿之一。因此，国内外杀菌 剂研究者将关注焦点转移到研究开发兼具安全、高效、环保和广谱的理想型杀菌剂方面。季铵盐类消 毒剂是新型环保的消毒剂，具有极强的杀菌和抑菌性能、广谱高效、有效期长、无毒副作用、无腐蚀性和刺激性，使用安全，而且自然环境下可降解，对环境友好、无污染，是近年来新型消毒剂开发的 主要成分。季铵盐类杀菌剂包括单链(如苯扎氯铵和苯扎溴铵)和双链季铵盐(如双十烷基二甲基氯化 铵，DDAC)两类，一端带有正电，一端为长链脂肪烷/芳烃，属阳离子表面活性消毒剂，其杀菌机理 为带正电荷季铵盐单元吸附于带负电荷的细菌表面，长链烷基/芳基单元作为亲脂性基团与细胞类脂 层上的物质结合而使细菌的细胞壁和细胞膜结构被破坏，改变细胞通透性，致使细胞内物质外泄，相关酶活性被抑制以及蛋白质变性，致使细菌死亡。此外，季铵盐类的消毒剂不易燃不易爆，对人体的 刺激性小，自上个世纪50年代投产至今，品种达数百种，少数种类具有良好的杀菌作用。
但单组分季铵盐杀菌谱较窄，目前国内市场传统的消毒剂多以杀菌为主，比如季铵盐虽然对医院 外科手术室常见的铜绿假单胞菌具有一定杀菌能力，其中杀菌率为99.999％的剂量仅为39ppm，但是 对病毒灭活效果较弱。
发明内容
针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种复合增效多功能消毒剂及其制备方法， 该消毒剂无刺激、无腐蚀、无毒性，不仅对细菌、真菌具有较好的杀灭效果，同时对冠状病毒也具有 良好的杀灭效果，解决现有消毒剂病毒灭活效果较弱的问题。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种复合增效多功能消毒剂，按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐3～5％，杀菌剂0.6～1.3％， 稳定剂3～6％，增效剂0.5～1.5％，pH调节剂2～4％，表面活性剂4～6％，增香剂0.5～1.5％，余量为水， 所述季铵盐为烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵中的至少一种。
作为优选，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵中的烷基碳链长度为 C12～C14。
优选的，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵为十二烷基二甲基乙基苄基氯化铵、十三烷基二甲基乙 基苄基氯化铵或十四烷基二甲基乙基苄基氯化铵，所述烷基苄基二甲基氯化铵为十二烷基苄基二甲基 氯化铵、十三烷基苄基二甲基氯化铵或十四烷基苄基二甲基氯化铵。
作为优选，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵的质量比为1:0.5～2。具体 可为1:0.7、1:1.3、1:1.6、1:1.8、1:1等。
作为优选，所述杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸。
作为优选，所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠或二乙烯三胺五乙酸五钠中的至少一种。
作为优选，所述增效剂为乙醇。更优选为无水乙醇。
作为优选，所述pH调节剂为无机碱或醇胺类化合物。更优选为碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、 氢氧化铵、乙醇胺、二乙醇胺或三乙醇胺。
作为优选，所述表面活性剂为醇醚糖苷或烷基糖苷。
作为优选，所述增香剂为柠檬烯、肉桂酸甲酯、肉桂酸乙酯、玫瑰醇、苯乙醇、香叶油、玫瑰花 油、α-紫罗兰酮、β-紫罗兰酮、麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素以及草莓醛中的一种或多种。
本发明还提供了上述复合增效多功能消毒剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将季铵盐、稳定剂、pH调节剂、表面活性剂与水混合，搅拌使混合液充分溶解；
(2)继续加入杀菌剂、增效剂和增香剂，搅拌均匀后静置，即得到所述的消毒剂；
本发明制备方法中，所用水可以一次性加入混合，也可以分批加入混合，如分为两部分，各50％， 分别在步骤(1)和步骤(2)中加入。
优选的，步骤(1)中搅拌和步骤(2)中搅拌在30-50℃水浴下进行。
优选的，步骤(1)中搅拌60-120min，步骤(2)中搅拌15-30min。
优选的，步骤(2)中静置3-4h。其中静置温度为室温20-25℃。
本发明通过单链复配、单双混合、体系增效三个关键技术，以烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基 苄基二甲基氯化铵为主要成分，添加烷基酰胺乙胺酸为杀菌剂，辅以乙二胺四乙酸二钠为稳定剂，少 量无水乙醇为增效剂，无机碱或醇胺类化合物为pH调节剂，加入醇醚糖苷和柠檬烯等相应助剂，在 常温常压下复配制得无刺激、无腐蚀、无毒性的复合季铵盐消毒剂。
本发明制备的消毒剂可与水按体积比1：99稀释至1％用于实际消毒，经测试1％浓度的消毒剂 即可对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌具有较好的杀灭效果，同时对冠状病毒具有良好的 杀灭效果，达到了既高效又无毒，使用方便、节能环保的要求，是一种理想的消毒剂。未来可广泛用于医院、疗养院、学校、食品加工厂、食品服务机构、运输终点站、汽车车库、办公楼、制造设施、 住宿机构、零售企业、体育/娱乐设施等公共场所，也可直接用于人体皮肤表面。还可以抑制霉菌和 霉菌的生长，可用于淋浴、浴缸、淋浴门、乙烯基和塑料浴帘、固定装置和马桶清洁。它不仅可以作 为环境的专业消毒剂来使用，也可作为原料来开发相应的抗抑菌产品，在此类领域的应用完全符合国家相关卫生及环保要求。
本发明所提供的消毒剂，可在1min内杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌，冠状病毒， 杀灭率高达99.999％以上。所述消毒剂无刺激性，可应用于手部、皮肤、创面、黏膜等部位；本发明 相比现有的产品，工艺简单易操作，使用的配料品种少，可以快速大量生产。
相比现有技术，本发明具有如下有益效果：
1、本发明所提供的多功能高效复方消毒剂所用的主要有效微生物杀灭成分为无毒环保的双链季 铵盐与烷基酰胺乙胺酸，使用浓度的碱性为7.76，可以直接作用于皮肤，还可以在皮肤表面形成一层 有效的保护膜，具有高效杀菌、长效抑菌的效果。
2、本发明所提供的多功能高效复方消毒剂采用复方配方，充分利用各成分协同作用，具有用量 少(浓度1％)、杀菌效果好、杀菌谱广等优点。
3、本发明所提供的多功能高效复方消毒剂含有表面活性剂，能有效增强主成分的杀菌效果，降 低刺激性，使用后皮肤不干裂，不起皮，绿色、环保、无毒副作用，适宜人群广，使用方便、便捷， 免洗，可随身携带，同时制备工艺简单，对设备要求较低，成本相对低廉。
4、本发明所提供的多功能消毒剂，可在1min内杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌， 流感病毒等致病微生物，杀灭率高达99.999％以上。
5、本发明所提供的多功能消毒剂，适宜于外科手、卫生手、硬质物体表面、织物和其他多孔物 体表面，适用范围广，适应性强。
6、本发明所提供的多功能消毒剂，在稀释后不会出现分层沉淀现象。
7、本发明通过单链复配和单双混合技术，扩宽了消毒剂的消杀范围。通过极少量醇、两性表面 活性剂与季铵盐三者之间的复合增效作用，添加络合剂消除消毒体系及环境中离子干扰，酸碱调节剂 增强N+离子的亲电性，使消毒液呈现新一代消毒剂的特征。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1
本实施例复合增效多功能消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐4％，杀菌剂1％、稳 定剂3％、增效剂1％、pH调节剂3％、表面活性剂5％、增香剂1％、余量为水。
其中，季铵盐为十二烷基二甲基乙基苄基氯化铵和十四烷基苄基二甲基氯化铵的组合，两者质量 比为1：0.6，杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸，稳定剂为乙二胺四乙酸二钠，增效剂为无水乙醇，pH调节 剂为碳酸钠，表面活性剂为醇醚糖苷，增香剂为柠檬烯。
本实施例消毒剂的制备方法包括以下步骤：
(1)用去灭菌离子水清洗反应釜、玻璃仪器以及配制过程中的所有管道；
(2)制备消毒液溶液储备液
在反应釜中先加入所需去离子水总量的50％，后按顺序加入两种季铵盐、稳定剂、pH调节剂以 及表面活性剂，然后40℃水浴搅拌80min使其充分溶解；继续加入杀菌剂、增效剂和增效剂，去离 子水补齐剩余体积，搅拌20min，室温静置3h即得到消毒液。
实施例2
本实施例复合增效多功能消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐3％，杀菌剂0.6％、稳 定剂4％、增效剂0.5％、pH调节剂2％、表面活性剂4％、增香剂0.5％、余量为水。
其中，季铵盐为十二烷基二甲基乙基苄基氯化铵和十二烷基苄基二甲基氯化铵的组合，两者质量 比为1：1，杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸，稳定剂为二乙烯三胺五乙酸五钠，增效剂为无水乙醇，pH调 节剂为氢氧化钠，表面活性剂为烷基糖苷，增香剂为草莓醛。
本实施例消毒剂的制备方法包括以下步骤：
(1)用去灭菌离子水清洗反应釜、玻璃仪器以及配制过程中的所有管道；
(2)制备消毒液溶液储备液
在反应釜中先加入所需去离子水总量的50％，后按顺序加入两种季铵盐、稳定剂、pH调节剂以 及表面活性剂，然后30℃水浴搅拌100min使其充分溶解；继续加入杀菌剂、增效剂和增效剂，去离 子水补齐剩余体积，搅拌30min，室温静置3h即得到消毒液。
实施例3
本实施例复合增效多功能消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐5％，杀菌剂1.3％、稳 定剂6％、增效剂1.5％、pH调节剂4％、表面活性剂6％、增香剂1.5％、余量为水。
其中，季铵盐为十三烷基二甲基乙基苄基氯化铵和十二烷基苄基二甲基氯化铵的组合，两者质量 比为1：1.5，杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸，稳定剂为乙二胺四乙酸二钠，增效剂为无水乙醇，pH调节 剂为乙醇胺，表面活性剂为醇醚糖苷，增香剂为玫瑰醇。
本实施例消毒剂的制备方法包括以下步骤：
(1)用去灭菌离子水清洗反应釜、玻璃仪器以及配制过程中的所有管道；
(2)制备消毒液溶液储备液
在反应釜中先加入所需去离子水总量的40％，后按顺序加入两种季铵盐、稳定剂、pH调节剂以 及表面活性剂，然后50℃水浴搅拌60min使其充分溶解；继续加入杀菌剂、增效剂和增效剂，去离 子水补齐剩余体积，搅拌15min，室温静置4h即得到消毒液。
实施例4
本实施例复合增效多功能消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐3.5％，杀菌剂0.8％、 稳定剂4.8％、增效剂0.8％、pH调节剂2.5％、表面活性剂4.5％、增香剂0.8％、余量为水。
其中，季铵盐为十四烷基二甲基乙基苄基氯化铵和十二烷基苄基二甲基氯化铵的组合，两者质量 比为1：2，杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸，稳定剂为二乙烯三胺五乙酸五钠，增效剂为无水乙醇，pH调 节剂为三乙醇胺，表面活性剂为醇醚糖苷，增香剂为α-紫罗兰酮。
本实施例消毒剂的制备方法包括以下步骤：
(1)用去灭菌离子水清洗反应釜、玻璃仪器以及配制过程中的所有管道；
(2)制备消毒液溶液储备液
在反应釜中先加入所需去离子水总量的60％，后按顺序加入两种季铵盐、稳定剂、pH调节剂以 及醇醚糖苷，然后40℃水浴搅拌100min使其充分溶解；继续加入杀菌剂、增效剂和柠檬烯，去离子 水补齐剩余体积，搅拌25min，室温静置3.5h即得到消毒液。
实施例5
本实施例复合增效多功能消毒剂按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐4.5％，杀菌剂1.1％、 稳定剂5.5％、增效剂1.2％、pH调节剂3.5％、表面活性剂5.5％、增香剂1.2％、余量为水。
其中，季铵盐为十四烷基二甲基乙基苄基氯化铵和十三烷基苄基二甲基氯化铵的组合，两者质量 比为1：1.2，杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸，稳定剂为乙二胺四乙酸二钠，增效剂为无水乙醇，pH调节 剂为碳酸钠，表面活性剂为烷基糖苷，增香剂为乙基麦芽酚。
本实施例消毒剂的制备方法包括以下步骤：
(1)用去灭菌离子水清洗反应釜、玻璃仪器以及配制过程中的所有管道；
(2)制备消毒液溶液储备液
在反应釜中先加入所需去离子水总量的50％，后按顺序加入两种季铵盐、稳定剂、pH调节剂以 及醇醚糖苷，然后45℃水浴搅拌90min使其充分溶解；继续加入杀菌剂、增效剂和柠檬烯，去离子 水补齐剩余体积，搅拌20min，室温静置3h即得到消毒液。
表1实施例1-5中消毒剂的组分及含量
性能测试(测试中使用的消毒液浓度均为体积浓度)
一、无纺布浸润溶液量及消毒剂本身对无纺布的影响
1、两种无纺布按照市面常用规格16*18cm；
2、分别用精密天平对两种无纺布进行称重；
3、用1ml移液器加入稀释好的消毒剂(浓度1％)，直至无纺布被全部浸润，液滴有微微渗出；
4、利用分析天平再次称重，计算两种无纺布的浸液容量；
5、将浸满液体的无纺布放入60℃的鼓风干燥烘箱进行烘干，烘干后称取无纺布的重量；
6、计算浸液前无纺布重量和烘干后重量差值，评估消毒剂对无纺布的影响。
将实施例1-5制备的消毒剂分别配置成体积浓度1％用于实验，实验结果发现两种无纺布的浸液 量为10-14ml/片，且消毒剂对无纺布本身并无明显影响。
二、消毒剂pH的测定
参照GB/T 9724-2007《化学试剂pH值测定通则》进行试验。
利用用不同校准液(pH4.68、pH 7.00、pH 9.21校准液)对pH测量仪(ThermoFisher pH测定仪) 进行校准，斜率达到100％后，对样品进行测试。
将实施例1制备的消毒剂用于实验，实验结果发现消毒液为碱性，随着稀释梯度增加，pH逐渐 降低，1％浓度的消毒液pH为7.76，试验结果见表2。实施例2-5制备的消毒剂的实验结果与实施例 1相同。
表2消毒剂pH值试验结果
三、消毒剂的有效成分含量测定
依据GB/26369-2010《季铵盐类消毒剂卫生标准》进行试验。
(1)精密称取消毒剂25g，置烧杯中，用蒸馏水35mL分3次洗入250mL分液漏斗中。
(2)加0.1mol/L氢氧化钠10mL和氯仿25mL，用容量吸管精密加人新制的50g/L碘化钾溶液 10.00mL，剧烈振摇120次，静置使分层，弃去氯仿层。水层用氯仿提取3次，每次10mL。弃去氯 仿层，水层移人250mL具塞锥形瓶，用蒸馏水约15mL分3次淋洗分液漏斗，合并洗液和水液。
(3)加盐酸40mL，放冷，用0.05mol/L碘酸钾标准溶液滴定至氯仿层淡棕色，加氯仿5mL，继 续滴定并剧烈振摇至氯仿层无色记录碘酸钾滴定液用量。空白试验：将蒸馏水代替样品重复上述步骤， 重复测2次。
含量计算：季铵盐含量按下式计算：
X＝(c×Vst×M)/(V×M×500)×1000
X：季铵盐含量，单位为摩尔每升(mol/L)
c：碘酸钾滴定液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)
Vst：碘酸钾滴定液空白与样品体积差，单位为毫升(mL)
M：季铵盐分子量
V：季铵盐样品体积，单位为克(mL)。
本实验共重复2次，碘酸钾滴定浓度为0.05mol/L，取消毒液25g，消耗碘酸钾体积9.45mL、9.42mL。
利用上述公式计算得到实施例1-5制备的消毒剂中季铵盐有效成分为：0.042±0.000091mol/L。
四、消毒剂储存稳定性测试试验
依据《消毒技术规范》-2002版、GB/26369-2010《季铵盐类消毒剂卫生标准》进行试验。
依据国家卫生部《消毒技术规范》-2017版，取包装完好的消毒液原液，置54℃恒温培养箱内14 天，分别测定放置前、后消毒液原液活性成分，计算活性下降率。
季铵盐含量计算与性能测试三中的方法相同，取消毒液25g，消耗碘酸钾体积9.52mL、9.65mL， 计算得到实施例1-5制备的消毒剂中季铵盐有效成分为：0.03834±0.000367mol/L，有效成分变化为 9.52％，符合《消毒技术规范》-2002版，储存稳定性1年的判定标准。
五、消毒剂腐蚀性试验
依据GJB/T7901-1999《金属材料实验室均匀腐蚀全浸试验方法》进行试验。
(1)用120砂纸打磨试片；
(2)清洗试片并烘干至恒重；
(3)试片称重，然后与迷彩布放入不同浓度的消毒剂中悬挂浸泡和直接浸泡72h；
(4)试片取出后进行化学处理，然后清洗并烘干至恒重；
(5)观察外观并称重；
(6)计算腐蚀速率。
试片为不锈钢，消毒剂浓度分别为10％、5％、2.5％、1％、0.5％、0.2％、0.1％消毒液。
腐蚀性试验结果见表3所示，结果发现，0.1％～10％的消毒液对不锈钢材料的腐蚀性为无腐蚀。
实施例2-5制备的消毒剂的测试结果与实施例1相同。
表3消毒剂腐蚀性测试试验结果
六、消毒剂急性经口毒性测试
参照《消毒技术规范》2002版-消毒剂毒理学试验技术方法，采用一次最大限度试验。一次灌胃 剂量5000mg/kg，观察14d内无死亡，可判定LD50大于5000mg/kg体重。
急性经口毒性试验采用一次最大限度试验方法，将实施例1-5制备的消毒剂分别用于测试。对20 只健康的ICR小鼠，体重18～22g，雌雄各半观察期14天，一次灌胃剂量5000mg/kg，14天的观察 期内未观察到异常症状或行为，均无死亡，半数致死剂量(LD50)>5000mg/kg，初步判定5％消毒剂 实际无毒。
七、急性吸入毒性试验
参照《消毒技术规范》2002版-消毒剂毒理学试验技术方法。采用静式染毒法，将试验动物放在 一定体积的密闭容器(染毒柜100L)内，加入5mL的消毒液，并使其挥发，造成实际含消毒剂空 气10000mg/m3，一次性吸入染毒2h。
急性吸入毒性试验采用一次最大限度试验-静式染毒法，将实施例1-5制备的消毒剂分别用于测 试。20只小鼠吸入给药10000mg/m3 2h，观察14天，小鼠未出现死亡，且未观察到异常症状或行为。 以14天的观察期LC50＞10000mg/m3，初步判定5％消毒剂实际无毒。
八、皮肤刺激性试验
参照《消毒技术规范》2002版-消毒剂毒理学试验技术方法中的一次皮肤刺激性试验方法。
(1)试验前24h，将家兔背部脊柱两侧的毛剔除，不得损伤表皮，左右两侧各约3cm×3cm。 (2)次日将受试物(1.25％消毒液)0.5mL滴于2.5cm×2.5cm大小的4层纱布上并敷贴在一侧去毛 皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖，在以无刺激胶布固定。另一侧去毛皮肤作用作为空 白对照，滴加0.5mL生理盐水，以相同方式固定。敷贴时间为4h。试验结束后，用温水除去残留消 毒液。(3)去除消毒液后1h、24h和48h，分别观察皮肤局部反应，记录刺激反应评分。
将实施例1-5制备的消毒剂分别用于测试，采用一次皮肤刺激性试验，48h观察期，结果1.25％ 消毒剂对兔皮肤刺激反应级数评分为0。
九、眼刺激性试验
参照《消毒技术规范》2002版-消毒剂毒理学试验技术方法中的急性眼刺激试验方法进行试验。
(1)粘膜消毒应用1.25％浓度消毒液，吸取受试物0.1mL，滴入家兔一侧结膜囊内，另一侧眼 以生理盐水作为正常对照。
(2)滴受试物后使眼被动闭合1s，30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后24h、48h、72h、7d、 14d和21d，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤和恢复情况。如果第7d或第14d，眼睛刺激 反应评分降至0，即可终止试验。必要时，用2％荧光素钠溶液或裂隙灯检查角膜及虹膜变化。
(3)评定准则
《消毒技术规范》2017版中“家兔急性眼刺激反应的评分标准”对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急 性刺激反应进行评分，并分别计算每只动物在三个不同观察时段(24h、48h和72h)角膜、虹膜和 结膜充血、水肿四方面的平均评分(即24h、48h和72h评分之和除以时段数3)。分别以动物眼角 膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行综合评价，以《眼刺激反应分级标准》判定受 试物对眼的刺激强度。
将实施例1-5制备的消毒剂分别用于眼刺激性试验。试验使用1.25％浓度消毒液，试验动物数分 别为3只。1.25％消毒剂组观察3天，3只动物角膜均无溃疡或浑浊、虹膜均正常，其中1只家兔结 膜出现轻度充血，但是无水肿，参照《眼刺激性反应分级标准》判定，1.25％消毒剂对眼无刺激性。
十、大肠杆菌杀灭实验
参照《消毒技术规范》2002版-消毒剂杀微生物试验技术方法，采用细菌定量杀灭试验。
(1)从保存有E.coli 25922的半固体斜面上刮取菌落，划线接种至远藤平板培养基上。恒温培 养箱中37℃过夜培养后，用接种环挑取单菌落接种至10ml营养肉汤中，再置于37℃恒温摇床上过 夜培养。吸取菌液，5000r/min离心10min，弃上清，用PBS重悬沉淀。再次离心、混匀及重悬，重 复三次，将最后得到的10ml菌液于4℃无菌保存。
(2)实施例1制备的消毒剂配置成浓度1％的消毒液，观察1％的消毒液对大肠杆菌25922的消 毒效果，所有消毒试验均于20℃恒温条件下，100ml反应体系(pH 7.2)中进行。每个条件下设置三 组平行试验。在加入消毒剂前，先于反应体系中加入制备好的微生物悬液1ml，磁力搅拌器上快速搅 拌后取样，计为微生物的初始浓度。取一定体积加入反应体系，以达到各条件下消毒剂的目标浓度。于各时间点上取样5ml利用GE Microspin S-400HR进行中和，用于微生物灭活情况分析。
(3)采用平板法对E.coli 25922进行计数，具体操作如下：将菌悬液进行10倍梯度稀释，每个 平板涂布1ml样本。放于37℃培养箱中培养，24h后对菌落形成单位(colonyforming unit，CFU) 进行计数。
(4)评价规定
将所选稀释度平板上生长的菌落数乘以稀释倍数，即为所检样本中每毫升的菌落总数，单位用 “CFU/ml”表示。(尽量选择10～100CFU/平板的稀释度)。
表4对大肠杆菌的杀灭效果
实施例2-5制备的消毒剂的实验结果与实施例1相同。
十一、金黄色葡萄球菌杀灭实验
方法参照性能测试十，试验菌株选用金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)，第5代。
1.检测依据：《消毒技术规范》(2002年版)第2.1.1.7.4项。
2.杀菌试验：实施例1制备的消毒剂配置成浓度1％的消毒液，作用时间为0.5min、1.0min和 1.5min，试验温度为20℃恒温。试验重复3次。
3.检测环境温度：22.6℃；相对湿度：49％。
经3次重复试验，在20℃恒温试验条件下，应用消毒液，作用1.0min，对悬液中的金黄色葡萄 球菌的杀灭对数值均＞5.00。
表5对金黄色葡萄球菌的杀灭效果的杀灭效果
注：阴性对照组无菌生长。
实施例2-5制备的消毒剂的实验结果与实施例1相同。
十二、白色念珠菌杀灭实验
方法参照性能测试十，试验菌株选用白色念珠菌(ATCC 10231)，第5代。
1.检测依据：《消毒技术规范》(2002年版)第2.1.1.7.4项。
2.杀菌试验：实施例1制备的消毒剂配置成浓度1％的消毒液，作用时间为0.5min、1.0min和 1.5min，试验温度为20℃恒温。试验重复3次。
3.检测环境温度：22.6℃；相对湿度：49％。
经3次重复试验，在20℃恒温试验条件下，应用消毒液，作用1.0min，对悬液中的白色念珠菌 的杀灭对数值均＞5.00
表6对白色念珠菌的杀灭效果的杀灭效果
注：阴性对照组无菌生长。
实施例2-5制备的消毒剂的实验结果与实施例1相同。
十三、冠状病毒消毒试验
测试消毒剂对冠状病毒杀灭作用，参考《消毒技术规范》2002版-消毒剂杀微生物试验技术方法， 采用定量杀灭试验。
(1)将实施例1制备的消毒剂配置成1％浓度的消毒液，分别取适量病毒与1％的消毒液等体积 混合，室温作用1min、5min和10min后，各取适量混合物于细胞培养基中混匀。
(2)取上述稀释后的混合物感染Vero细胞，每组接种6孔，同时设置病毒感染对照和正常细胞 对照。
(3)1h后换新鲜培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养，连续观察4天。
(4)评价规定：采用TCID50方法对病毒进行滴度测定，并按Reed-Muench两氏法计算TCID50值。
结果表明，在目前测定条件下，1％消毒液作用1min后，对冠状病毒的杀灭效果为100％。
实施例2-5制备的消毒剂的实验结果与实施例1相同。
本发明的上述实施例仅仅是为说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对 于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其他不同形式的变化和变动。这里 无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
Claims (11)
1.一种复合增效多功能消毒剂，其特征在于，按质量百分数计，包括以下组分：季铵盐3~5%，杀菌剂0.6~1.3%，稳定剂3~6%，增效剂0.5~1.5%，pH调节剂2~4%，表面活性剂4~6%，增香剂0.5~1.5%，余量为水，所述季铵盐为烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵中的至少一种；所述杀菌剂为烷基酰胺乙胺酸；所述表面活性剂为醇醚糖苷或烷基糖苷。
2.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵中的烷基碳链长度为C12~C14。
3.根据权利要求2所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵为十二烷基二甲基乙基苄基氯化铵、十三烷基二甲基乙基苄基氯化铵或十四烷基二甲基乙基苄基氯化铵，所述烷基苄基二甲基氯化铵为十二烷基苄基二甲基氯化铵、十三烷基苄基二甲基氯化铵或十四烷基苄基二甲基氯化铵。
4.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述烷基二甲基乙基苄基氯化铵和烷基苄基二甲基氯化铵的质量比为1:0.5~2。
5.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠或二乙烯三胺五乙酸五钠中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述增效剂为乙醇。
7.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述pH调节剂为无机碱或醇胺类化合物。
8.根据权利要求7所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述pH调节剂为碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、乙醇胺、二乙醇胺或三乙醇胺。
9.根据权利要求1所述的复合增效多功能消毒剂，其特征在于，所述增香剂为柠檬烯、肉桂酸甲酯、肉桂酸乙酯、玫瑰醇、苯乙醇、香叶油、玫瑰花油、α-紫罗兰酮、β-紫罗兰酮、麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、草莓醛中的一种或多种。
10.如权利要求1至9任一项所述的复合增效多功能消毒剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将所述季铵盐、稳定剂、pH调节剂、表面活性剂与水混合，搅拌使混合液充分溶解；
（2）继续加入所述杀菌剂、增效剂和增香剂，搅拌均匀后静置，即得到所述的消毒剂。
11.根据权利要求10所述的复合增效多功能消毒剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中搅拌和步骤（2）中搅拌在30-50℃水浴下进行；步骤（1）中搅拌60-120min，步骤（2）中搅拌15-30min；步骤（2）中静置3-4h。
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