CN114769296A - 一种利用有机废物发酵液培养产pha颗粒污泥的方法及系统 - Google Patents

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Abstract

一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法及系统,该方法通过采用模拟发酵液进行产PHA颗粒污泥预培养后采用有机废物发酵液进行加速产PHA颗粒污泥培养,在实现有机废物处理的同时通过将PHA菌种富集与颗粒污泥培养进行耦合培养出产PHA颗粒污泥,具有成本低、操作简单等优势;该方法大大缩短了利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的时间,所得污泥结构紧实、污泥颗粒>0.5mm,PHA产量可高达65%,实现了有机废物的快速、高价值资源化利用;该方法通过预培养使产PHA菌占据优势地位,通过长期培养阶段在产PHA菌占据优势地位的情况下使其逐渐形成颗粒污泥,长期培养阶段由于产PHA菌能保持优势地位,实现了反应器的长期稳定运行。

Description

一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法及系统
技术领域
本发明属于环境保护技术领域,涉及固废资源化利用,特别涉及一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法及系统。
背景技术
传统塑料的大量使用及其难降解材料的积累造成了环境质量的下降,由于其产量大、分布广泛和不可生物降解的特性,被认为是对环境产生重大影响的新兴污染物。为避免塑料污染的进一步扩大,宜采用低碳塑料替代传统塑料。
聚羟基脂肪酸酯(PHA)由于具有完全可生物降解性和较高的产量,是低碳塑料中最具应用前景的传统塑料替代品。但现有PHA生产工艺主要是以纯菌、纯底物的形式,需要灭菌且底物成本高。较高的生产成本阻碍了其大规模商业化应用。目前,对于PHA生产工艺的优化研究主要采用混菌、混底物的方法。混菌主要指通过不断筛选富集形成的以产PHA菌为主要菌种的絮状污泥;混底物一般指的是模拟废水或一些富含有机物的废水或废物厌氧产酸发酵后的产物。有研究者发现,絮状污泥的形式合成PHA可以在一定程度上减少工艺成本,但使用絮状污泥实现PHA的稳定生产,具有培养周期较长(通常为1年左右)、容积负荷有限、适合使用的废水、废物种类有限,且PHA合成产率普遍不高的不足。颗粒污泥由于自身沉降性能好、结构紧实、能抵抗有毒物质等特点可以很好的克服这些缺陷。
陈志强等利用一种污泥合成生物可降解塑料的方法利用颗粒污泥合成生物塑料,通过底物的丰盈与缺乏来筛选菌群的PHA合成功能,利用选择性排泥的方法,筛选菌群的沉淀性能,从而培养出具有合成生物塑料能力的颗粒污泥,利用颗粒污泥合成生物塑料。但是,这种方法在使用乙酸为碳源时效果较好,但在使用具有复杂组分的有机废水、废物或其发酵液时具有培养周期长的缺陷。如,Gobi等以棕榈油厂废水为底物,采用陈志强等的方法培养产PHA颗粒污泥,并进一步缩短沉淀时间和排水时间至1.5分钟和8.5分钟,周期时间为6h。在培养450天后,获得了PHA产量为68.33%的颗粒污泥。虽说培养出了具有生产生物塑料能力的颗粒污泥,但培养时间过长,成本高,无法进行大规模商业化应用。
发明内容
(一)发明目的
本发明的目的是提供一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法及系统,所述方法在实现有机废物处理的同时通过将PHA菌种富集与颗粒污泥培养进行耦合培养出产PHA颗粒污泥,在实现颗粒污泥PHA高产量的同时,大大缩短了利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的时间,实现了有机废物快速、高价值资源化利用的同时实现了产PHA颗粒污泥的快速、稳定培养。
(二)技术方案
为了实现上述目的,本发明一方面提供了一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法,包括:
步骤1:向反应器中接种二沉池污泥,进行产PHA颗粒污泥预培养,所述预培养包括多个培养周期,预培养的总时间为1~30天,污泥停留时间为1~10天,每个培养周期时长为6~24h,每个培养周期的具体操作包括:
1-1:在厌氧条件下向所述反应器中加入模拟发酵液1,进行曝气,在反应器内溶解氧突增后加入模拟发酵液3直至反应器内溶解氧不再降低时停止曝气,然后沉淀、出水,所述模拟发酵液1为含有碳源的水溶液但不包含微生物可利用的氮源,所述模拟发酵液3为碳源的水溶液,且碳源浓度为模拟发酵液1碳源浓度的50~200倍;
1-2:步骤1-1出水完成后在厌氧条件下向所述反应器中加入模拟发酵液2,然后进行曝气、沉淀、出水,所述模拟发酵液2为含有氮源、磷源的水溶液,但不包含微生物可利用的碳源;
步骤2:预培养结束后,进行加速产PHA颗粒污泥培养,得到产PHA颗粒污泥,其中,加速产PHA颗粒污泥培养过程包括多个培养周期,加速产PHA颗粒污泥培养过程的总时间为1~120天,污泥停留时间为1~10天,每个培养周期时长为6~24h,每个培养周期具体包括:
在厌氧条件下,向所述反应器中加入有机废物发酵液,然后进行曝气、沉淀、出水。
具体地,本发明中所述反应器优选序批式曝气反应器;所述二沉池污泥是指污水处理厂的污水经二沉池泥水分离后产生的污泥;各步骤所述的厌氧条件具体是指进料时管道内不含气泡;所述有机废物发酵液是指餐厨垃圾等有机废物在厌氧条件下进行厌氧发酵处理时得到的发酵液;所述模拟发酵液1是指根据实际有机废物发酵液中乙酸、丙酸、丁酸和乳酸等碳源含量,由三水乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠和DL-乳酸等原料配置而成的水溶液,可以添加酸/碱调节水溶液的pH值为适宜微生物生长的弱酸性或中性,使模拟发酵液中的碳源主要以有机酸的形式存在,进一步地,还可以根据需要添加微量元素和/或维生素等营养物质,由于微量元素和维生素中含氮量非常少且微量元素和维生素的添加量也非常少,所以,认为模拟发酵液1中不含微生物可利用的氮源;所述模拟发酵液2是指根据实际有机废物发酵液中氨氮含量及磷含量,由铵盐、磷盐配置的水溶液,进一步地,还可以根据需要添加微量元素和/或维生素等营养物质;所述模拟发酵液3的溶质中只含有碳源,且碳源与模拟发酵液1碳源一致,可以由与模拟发酵液1相同质量的三水乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠和DL-乳酸等原料配置而成,其中,配溶液时的加水量为配置模拟发酵液1时加水量的1/50~1/200;所述有机废物发酵液、模拟发酵液1、模拟发酵液2的pH值均优选5~7,模拟发酵液3为模拟发酵液1的浓缩液且添加量较少,pH可不另行调配。
优选地,所述产PHA颗粒污泥为自凝聚形成的好氧颗粒污泥或附着生长在颗粒载体上的好氧生物膜。
优选地,步骤1-1所述向所述反应器中加入模拟发酵液1的具体条件包括:
模拟发酵液1通过蠕动泵进料,在0.2~1h内完成模拟发酵液1的进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4。
所述模拟发酵液1中的碳源包括有机酸,还可以包括所含有机酸对应的有机酸盐,所述模拟发酵液1的COD为1000~6000mg/L;
所述有机酸包括乳酸,以乳酸根含量计,所述模拟发酵液1中乳酸的含量为15~40mmol/L,优选30~40mmol/L,以确保颗粒污泥直径>1mm最大PHA含量>50%;
所述有机酸还包括丁酸、乙酸、丙酸中的至少一种,丁酸、乙酸、丙酸的具体含量可以根据有机废物发酵液中的实际含量确定;
所述模拟发酵液1中还包括微量元素和/或维生素;
所述微量元素可选自Na2SO4、FeCl2·4H2O、H3BO3、ZnCl2、CuCl2·2H2O、MnCl2·4H2O、(NH4)6Mo7O24·4H2O、AlCl3、NiCl2·6H2O、CoCl2·6H2O、EDTA-2Na、HCl、NaHSeO3等;
所述维生素可选自维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B4、维生素B5、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素H、维生素BX、硫辛酸等;
所述模拟发酵液1中微量元素的质量含量为0.001~0.05%;
所述模拟发酵液1中维生素的质量含量为0.00001~0.00005%。
具体地,步骤1-1中:
所述曝气的具体条件包括:
在模拟发酵液1进料结束后进行;
在模拟发酵液1进料完成后反应器内溶解氧先维持在1~4mg/L;
当反应器中溶解氧由1~4mg/L升高至6mg/L以上时认为反应器内溶解氧突增;
加入模拟发酵液3的具体条件包括:
分多次加入模拟发酵液3,每次加入量为模拟发酵液1加入量的1/50~1/200;
所述沉淀的具体时间为10~50min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。优选地,步骤1-2所述向所述反应器中加入模拟发酵液2的具体条件包括:
在0.2~1h内完成模拟发酵液2进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4;
所述模拟发酵液2中的氮源为铵盐,在相同体积的条件下,模拟发酵液1中的C与模拟发酵液2中的N的摩尔比为5~100:1;
所述模拟发酵液2中的磷源为磷盐,且以磷的质量计,模拟发酵液2中磷源的质量含量为0.005~0.5%;
所述模拟发酵液2中还包括微量元素和/或维生素;
所述微量元素可选自Na2SO4、FeCl2·4H2O、H3BO3、ZnCl2、CuCl2·2H2O、MnCl2·4H2O、(NH4)6Mo7O24·4H2O、AlCl3、NiCl2·6H2O、CoCl2·6H2O、EDTA-2Na、HCl、NaHSeO3等;
所述维生素可选自维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B4、维生素B5、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素H、维生素BX、硫辛酸等;
所述模拟发酵液2中微量元素的质量含量为0.001~0.05%;
所述模拟发酵液2中维生素的质量含量为0.00001~0.00005%。
在一优选实施例中,微量元素包括以下质量份组分:
Na2SO440~60份、FeCl2·4H2O1~3份、H3BO30.03~0.06份、ZnCl20.03~0.06份、CuCl2·2H2O0.01~0.05份、MnCl2·4H2O0.2~0.5份、(NH4)6Mo7O24·4H2O0.03~0.06份、AlCl30.03~0.06份、NiCl2·6H2O0.05~0.15份、CoCl2·6H2O0.05~0.15份、EDTA-2Na0.3~0.8份、36wt%HCl1~1.5份、NaHSeO30.06~0.1份;
维生素包括以下质量份组分:
D生物素/维生素H0.001~0.003份、叶酸/维生素B90.001~0.003份、盐酸吡哆辛/维生素B60.005~0.015份、核黄素/维生素B20.003~0.008份、盐酸硫胺素/维生素B10.003~0.008份、氰钴胺素/维生素B120.0001~0.0002份、烟酸/维生素B30.003~0.008份、对氨基苯甲酸/维生素Bx0.003~0.008份、硫辛酸0.003~0.008份、泛酸钙/维生素B50.003~0.008份。
当模拟发酵液1、模拟发酵液2为上述配方时,通过实验证明能够培养出粒径大于1mm的颗粒污泥,颗粒污泥PHA产量大于50%。
优选地,步骤1-2所述曝气的具体条件包括:
在模拟发酵液2进料结束后进行;
依据周期时间设定曝气时间(即曝气时间=周期时长-其他步骤所用时长),曝气流量为0.5~2L/min;
所述沉淀的具体时间为10~60min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。
具体地,步骤2所述向所述反应器中加入有机废物发酵液的具体条件包括:
有机废物发酵液通过蠕动泵进料,在0.2~1h内完成有机废物发酵液进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4;
所述有机废物发酵液为餐厨垃圾乳酸型发酵液,即乳酸的总质量含量占发酵产物的比例≥40%的发酵液。
具体地,所述有机废物发酵液中含有乳酸,且乳酸的COD占所述有机废物发酵液总COD的10~80%。
优选地,步骤2中:
所述曝气的具体条件包括:
在有机废物发酵液进料结束后进行;
使有机废物发酵液进料完成后至反应器内溶解氧突增(微生物由于缺少可利用碳源而消耗氧气量减少,溶解氧大于6mg/L时视为突增)期间,溶解氧维持在1~4mg/L;
依据周期时间设定曝气时间,曝气流量为0.5~2L/min,优选1~1.2L/min;
所述沉淀的具体时间为5~30min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。
优选地,步骤2中的第一个培养周期的沉淀时间为10~30min,后续各周期的沉淀时间根据反应器内悬浮固体浓度的变化而调整,当反应器内悬浮固体浓度>7000mg/L时,本周期沉淀时间在上一周期沉淀时间基础上减少4~6min,当反应器内悬浮固体浓度<1000mg/L时,沉淀时间在上一周期沉淀时间基础上增加4~6min,特别的,在缩短沉淀时间阶段,沉淀时间在小于或等于5min时不再缩短沉淀时间。由于氮磷和碳源一起添加,微生物在经过一段适应期后会在反应器中更多的生长繁殖,理想情况下,随着培养的进行反应器中的微生物会越来越多,污泥量会逐渐增大,沉淀时间会随之逐渐缩短。
本发明实施例中,步骤1先以模拟发酵液1为底物,在厌氧条件下的缓慢进水有利于营养物质更均匀的分布在菌体周围,有助于颗粒污泥的形成;在丰盛期,由于底物缺乏氮磷,其他菌无法利用碳源,而产PHA菌可以吸收碳源合成PHA并储存在菌体内,这使得产PHA菌密度增加,沉淀性能提升,同时通过添加模拟发酵液3快速给予系统足量的碳源,让产PHA菌在短时间内最大限度的合成PHA,后续通过沉淀及排水,可以对菌群的产PHA能力进行筛选;在饥饿期,由于饥饿期较长且通过加入模拟发酵液2添加了氮、磷营养元素,产PHA菌利用PHA作为碳源在维持正常生命活动的同时进行增殖,而其它菌以及一些PHA合成能力较差的菌会由于缺乏碳源无法维持正常生命活动,逐渐被淘汰随排水排出,实现产PHA菌的快速富集;步骤2结合丰盛-饥饿模式所产生的营养选择压力以及逐步调整沉淀时间给予适当的物理选择压力,对反应器内菌群的PHA合成能力和沉淀性能进行筛选,使其在筛选的同时逐步自凝聚形成颗粒污泥。首先,厌氧条件下的缓慢进水有利于营养物质的吸收,有利于颗粒污泥的形成;在丰盛期,与快速富集阶段(即步骤1)不同,该阶段营养物质均在底物中提供,但是营养不均衡(有机废物发酵液的高碳、低氮、低磷),这种条件有利于产PHA菌利用碳源合成PHA,而不利于其他菌对于碳源的利用,由于碳、氮和磷等营养元素都具备,产PHA菌和一些其他菌均可以生长繁殖;在饥饿期,由于碳、氮、磷营养元素的不足,PHA合成菌利用PHA作为碳源维持正常生命活动,而其他菌由于无法利用碳源不能维持正常生命活动,逐渐被淘汰;在曝气结束后,通过逐步调节沉淀时间,对菌群沉淀性能进行筛选,使菌群逐渐自凝聚形成颗粒状的污泥。
优选地,所述产PHA颗粒污泥的直径≥2mm。
本发明另一方面提供了一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的系统,包括时间控制单元、模拟发酵液1储存罐、模拟发酵液2储存罐、模拟发酵液3储存罐、真实发酵液储存罐及反应器,所述模拟发酵液1储存罐的出水口、模拟发酵液2储存罐的出水口、真实发酵液储存罐的出水口分别与所述反应器的进水口连接,所述模拟发酵液3储存罐与反应器上部连通;所述时间控制单元用于控制所述模拟发酵液1储存罐与所述反应器的连通或断开、所述模拟发酵液2储存罐与所述反应器的连通或断开、所述真实发酵液储存罐与所述反应器的连通或断开及所述反应器的曝气时间、沉淀时间、出水时间,以使所述反应器实现上述任一项所述的方法。
(三)有益效果
本发明的上述技术方案具有如下有益的技术效果:
本发明提供的有机废物产酸发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法,该方法先在厌氧条件下使模拟发酵液1均匀分布在菌体周围,有助于颗粒污泥的形成,然后通过添加模拟发酵液3快速给予系统足量的碳源,使PHA菌在短时间内最大限度的合成PHA,之后添加模拟发酵液2,通过维持较长的碳源缺乏期以及碳源充足时不加氮源、在碳源缺乏时添加氮磷的方式,使不具有PHA合成能力菌和PHA合成能力差的菌由于缺乏可利用的碳源而被淘汰,实现产PHA菌快速富集,最后采用真实有机废物发酵液作为底物进一步加速产PHA颗粒污泥培养,该方法在实现有机废物处理的同时通过将PHA菌种富集与颗粒污泥培养进行耦合培养出产PHA颗粒污泥,具有成本低、操作简单等优势;该方法大大缩短了利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的时间(缩短至1个月,且后续稳定运行6个月),所得污泥结构紧实、污泥颗粒≥0.5mm,PHA产量可高达65%,实现了有机废物的快速、高价值资源化利用;该方法通过预培养使产PHA菌占据优势地位,通过长期培养阶段在产PHA菌占据优势地位的情况下使其逐渐形成颗粒污泥,由于产PHA菌占据优势地位,长期培养阶段杂菌生长的影响较小,从而实现长期稳定运行。
附图说明
图1是本发明实施例提供的一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的系统示意图;
图2是本发明实施例各阶段工艺示意图;
图3是本发明实施例2所培养出的产PHA颗粒污泥实物照片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例详细说明本发明的实施方式。
本发明各实施例所用二沉池污泥为北京沙河再生水厂经二沉池沉淀后得到的活性污泥;
本发明各实施例所用有机废物发酵液为餐厨垃圾在pH≤5的条件下,长期在连续搅拌条件下进行厌氧发酵得到的乳酸型发酵液(乳酸的含量占发酵产物的比例≥40%,具体地,发酵液中乙酸36mmol/L、丙酸8.4mmol/L、丁酸3.3mmol/L、乳酸36.5mmol/L),从长期稳定运行的餐厨垃圾连续搅拌反应器获得;
本发明各实施例其他原料均为市售产品。
本发明各实施例中,PHA测定方法为:称取一定量冻干后的污泥(m1,细胞干重(CDW),m1>20mg)于消解管中,加入2mL氯仿、2mL酸化甲醇(15%v/v H2SO4),于90℃反应4小时,冷却至室温后加入1mL高纯水,摇晃混匀,静置分层;用1mL注射针管吸取下层有机相1.0mL,转移至样品瓶内,使用气相色谱仪对样品进行检测,得出PHB(m2)和PHBV(m3)质量。PHA产量=PHA重量(m2+m3)/污泥干重(m1)*100%。
实施例1
如图1所示,本实施例提供了一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的系统,包括模拟发酵液1储存罐1、模拟发酵液2储存罐2、模拟发酵液3储存罐4、真实发酵液储存罐3、时间控制单元5、反应器6及出水储存罐7;本实施例中反应器6为序批式SBR反应器,反应器6主体的有效体积为3L,反应器6主体底部设有曝气装置,所述曝气装置包括位于所述反应器6主体内部的曝气砂头6.3、位于反应器主体外部的曝气泵11,曝气泵11的输入端与时间控制单元5的输出端连接,反应器6靠近底部的位置设有相背的第一进水口6.1和第二进水口6.2,反应器6顶部悬挂设置有溶解氧电极13和pH电极14,溶解氧电极13的输出端和pH电极14的输出端分别与时间控制单元5的输入端连接,反应器6中部设有出水口6.4;模拟发酵液1储存罐1通过第一进水管1.1与反应器6的第一进水口6.1连接,模拟发酵液2储存罐2通过第二进水管2.1与反应器6的第一进水口6.1连接,第一进水管1.1与第二进水管2.1通过第一电磁阀8后合二为一,第一电磁阀8用于控制第一进水管1.1和/或第二进水管2.1的通断,第一进水口6.1与第一电磁阀8之间设有第一蠕动泵9,第一蠕动泵9用于将模拟发酵液1储存罐1中的模拟发酵液1或模拟发酵液2储存罐2中的模拟发酵液2通过第一进水口6.1注入反应器6中;真实发酵液储存罐3通过第三进水管3.1与反应器6的第二进水口6.2连接,第三进水管3.1上设有第二蠕动泵10,用于将真实发酵液储存罐3中的有机废物发酵液通过第二进水口6.2注入反应器6中;模拟发酵液3储存罐4与反应器6上部通过管路连通,出水储存罐7通过设有第二电磁阀15、第三蠕动泵16的管路与反应器6的出水口6.4连接,其中各电磁阀、蠕动泵的输入端均分别与时间控制单元5的输出端连接,以使时间控制单元5控制电磁阀或蠕动泵的启停。
实施例2
如图2所示,本实施例基于实施例1提供的系统,提供了一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法,具体包括:
1)预培养阶段
该阶段所用模拟发酵液1储存罐(1)中的模拟发酵液1COD为2500mg/L,模拟发酵液1包含碳源、微量元素和维生素,其中碳源由乙酸(36mmol/L)、丙酸(8.4mmol/L)、丁酸(3.3mmol/L)和乳酸(34.44mmol/L)组成,微量元素和维生素由表1中的C(取1mL/L)、D(取1mL/L)、E(取5mL/L)3种营养母液混合后形成;模拟发酵液3为碳源的水溶液,碳源与模拟发酵液1相同,不同之处在于乙酸3600mmol/L、丙酸840mmol/L、丁酸330mmol/L、乳酸3444mmol/L;模拟发酵液2储存罐(2)中的模拟发酵液2为表1中的A(取5mL/L)、B(取4mL/L)、C(取1mL/L)、D(取1mL/L)和E(取5mL/L)混合后形成;模拟发酵液1、模拟发酵液2和模拟发酵液3每天现配更换;该阶段培养总时间为7d、污泥停留时间为1~4d;
按照以下内容设置时间控制单元的控制方式:
周期时长为24h,参见图2a,每一周期包括:厌氧进料30min,丰盛期曝气,沉淀10min,出水5min;饥饿期进料30min,饥饿期曝气,沉淀15min,出水5min;丰盛期曝气和饥饿期曝气总时间1345min,出水结束后均立马开始进料以进行下一周期,使反应器处于不断对菌种进行筛选和富集的过程;
步骤一,从反应器上部加入接种污泥(二沉池污泥)1.5L,通过时间控制单元,启动第一蠕动泵9,调节功率,使在厌氧情况下用30min向反应器6中匀速加入1.5L模拟发酵液1;
步骤二,进料完成后,利用时间控制单元启动曝气泵11,手动调控曝气泵11功率,使模拟发酵液1进料完成后至体系内溶解氧突增(微生物由于缺少可利用碳源而消耗氧气量减少)期间,溶解氧维持在1~4mg/L;
步骤三,在反应器6内溶解氧浓度突增时(溶解氧浓度>6mg/L),加入模拟发酵液3,每次加入量为15mL,直至反应器内溶解氧随着模拟发酵液3的添加维持稳定,然后关闭曝气泵11,待静置沉淀10分钟后开启第三蠕动泵16,用5分钟排水1.5L,本发明各实施例排水是指沉淀后从反应器中排出一定有效容积的泥水混合物;
步骤四,在厌氧条件下,用30min向反应器6中加入1.5L模拟发酵液2;
步骤五,进料完成后曝气,曝气完成后沉淀15分钟,出水5min,排出1.5L泥水混合物。
2)长期培养阶段
该阶段所用底物为真实有机废物产酸发酵液,每天从发酵罐中获取,并调节pH值为5~7;该阶段培养总时间为23d、水力停留时间为1d、污泥停留时间为1~4d;
按照以下内容设置时间控制单元的控制方式:
周期时间为12小时,参见图2b,每个周期包括厌氧进料30分钟,曝气655~680分钟,沉淀30~5分钟,周期时间不变,沉淀时间减少,曝气时间增加,沉淀结束后出水5分钟;出水结束后均立马开始进料,使反应器处于不断对菌种进行筛选和富集的过程;
步骤一,启动第二蠕动泵10,调节功率,使在厌氧情况下用30分钟向反应器中加入1.5L有机废物产酸发酵液;
步骤二,进料完成后,启动曝气泵11,手动调控曝气泵功率,使底物进料完成后至体系内溶解氧突增(微生物由于缺少可利用碳源而消耗氧气量减少)期间,溶解氧维持在1~4mg/L;
步骤四:在反应器6曝气结束后,关闭曝气泵11,待静置沉淀完成后开启第三蠕动泵16,用5分钟排出1.5L的泥水混合物,出水结束后立即进料进入下一周期。
当达到培养总时间后,反应器6中得到了产PHA颗粒污泥。
表1各实施例营养母液配方表
Figure BDA0003654630120000121
Figure BDA0003654630120000131
实施例3
与实施例2基本相同,不同之处在于:预培养阶段模拟发酵液1和模拟发酵液3中均不含乳酸,模拟发酵液1中乙酸、丙酸和丁酸之间的摩尔比与实施例2相同,由于添加乳酸量减少,所以乙酸、丙酸和丁酸添加量相应增加,COD为2500mg/L,模拟发酵液3中乙酸、丙酸和丁酸比例与实施例2的模拟发酵液3中的比例相同。
实施例4
与实施例2基本相同,唯一不同的是预培养阶段模拟发酵液1中含乳酸量为实施例2模拟发酵液1的一半,模拟发酵液1中乙酸、丙酸和丁酸之间的摩尔比与实施例2相同,由于添加乳酸量减少,所以乙酸、丙酸和丁酸添加量相应增加,COD为2500mg/L;模拟发酵液3中含乳酸量为实施例2模拟发酵液3的一半,其中乙酸、丙酸和丁酸比例与实施例2的模拟发酵液3中的比例相同。
对各实施例所得产PHA颗粒污泥进行表征测试,所得结果参见表2:
表2各实施例产PHA颗粒污泥结果统计表
Figure BDA0003654630120000132
参见表2,以实施例2所得产PHA颗粒污泥为典型代表,如图3所示本发明各实施例在1月内均成功获得了颗粒污泥,污泥结构紧实、污泥粒径≥0.5mm(最高可达2mm),最大PHA产量达到细胞干重的40%以上(最高可达65%),且工艺运行稳定;后续经过6个月的运行,反应器内污泥量保持相对稳定,所富集菌群PHA合成能力略有增加。
对于本技术领域的普通技术人员来说,在上述原理的基础上,还可以对本发明方法做出若干改变和改进,这些改变和改进也应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的方法,其特征在于,包括:
步骤1:向反应器中接种二沉池污泥,进行产PHA颗粒污泥预培养,所述预培养包括多个培养周期,预培养的总时间为1~30天,污泥停留时间为1~10天,每个培养周期时长为6~24h,每个培养周期的具体操作包括:
1-1:在厌氧条件下向所述反应器中加入模拟发酵液1,进行曝气,在反应器内溶解氧突增后加入模拟发酵液3直至反应器内溶解氧不再降低时停止曝气,然后沉淀、出水,所述模拟发酵液1为含有碳源的水溶液但不包含微生物可利用的氮源,所述模拟发酵液3为碳源的水溶液,且碳源浓度为模拟发酵液1碳源浓度的50~200倍;
1-2:步骤1-1出水完成后在厌氧条件下向所述反应器中加入模拟发酵液2,然后进行曝气、沉淀、出水,所述模拟发酵液2为含有氮源、磷源的水溶液,但不包含微生物可利用的碳源;
步骤2:预培养结束后,进行加速产PHA颗粒污泥培养,得到产PHA颗粒污泥,其中,加速产PHA颗粒污泥培养过程包括多个培养周期,加速产PHA颗粒污泥培养过程的总时间为1~120天,污泥停留时间为1~10天,每个培养周期时长为6~24h,每个培养周期具体包括:
在厌氧条件下,向所述反应器中加入有机废物发酵液,然后进行曝气、沉淀、出水。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1-1所述向所述反应器中加入模拟发酵液1的具体条件包括:
在0.2~1h内完成模拟发酵液1的进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4;
所述模拟发酵液1中的碳源包括有机酸,所述模拟发酵液1的COD为1000~6000mg/L;
所述有机酸包括乳酸,以乳酸根含量计,所述模拟发酵液1中乳酸的含量为15~40mmol/L;
所述有机酸还包括丁酸、乙酸、丙酸中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1-1中:
所述曝气的具体条件包括:
在模拟发酵液1进料结束后进行;
在模拟发酵液1进料完成后反应器内溶解氧先维持在1~4mg/L;
当反应器中溶解氧含量由1~4mg/L升高至6mg/L以上时认为反应器内溶解氧突增;
加入模拟发酵液3的具体条件包括:
分多次加入模拟发酵液3,每次加入量为模拟发酵液1加入量的1/50~1/200;
所述沉淀的具体时间为10~50min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1-2所述向所述反应器中加入模拟发酵液2的具体条件包括:
在0.2~1h内完成模拟发酵液2进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4;
所述模拟发酵液2中的氮源为铵盐,在相同体积的条件下,模拟发酵液1中的C与模拟发酵液2中的N的摩尔比为5~100:1;
所述模拟发酵液2中的磷源为磷盐,且以磷的质量计,模拟发酵液2中磷源的质量含量为0.005~0.5%。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1-2所述曝气的具体条件包括:
在模拟发酵液2进料结束后进行;
曝气流量为0.5~2L/min;
所述沉淀的具体时间为10~60min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2所述向所述反应器中加入有机废物发酵液的具体条件包括:
在0.2~1h内完成有机废物发酵液进料,且进料量为反应器有效容积的1/4~3/4。
7.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述有机废物发酵液中含有乳酸,且乳酸的COD占所述有机废物发酵液总COD的10~80%。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2中:
所述曝气的具体条件包括:
在有机废物发酵液进料结束后进行;
在有机废物发酵液进料完成后至反应器内溶解氧突增期间,溶解氧维持在1~4mg/L;
曝气流量为0.5~2L/min;
所述沉淀的具体时间为5~30min;
所述出水的具体时间为3~30min,出水量为所述反应器有效容积的1/4~3/4。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤2中的第一个培养周期的沉淀时间为10~30min,后续各周期的沉淀时间根据反应器内悬浮固体浓度的变化而调整,当反应器内悬浮固体浓度>7000mg/L时,本周期沉淀时间在上一周期沉淀时间基础上减少4~6min,当反应器内悬浮固体浓度<1000mg/L时,沉淀时间在上一周期沉淀时间基础上增加4~6min。
10.一种利用有机废物发酵液培养产PHA颗粒污泥的系统,其特征在于,包括时间控制单元、模拟发酵液1储存罐、模拟发酵液2储存罐、模拟发酵液3储存罐、真实发酵液储存罐及反应器,所述模拟发酵液1储存罐的出水口、模拟发酵液2储存罐的出水口、真实发酵液储存罐的出水口分别与所述反应器的进水口连接,所述模拟发酵液3储存罐与反应器上部连通;所述时间控制单元用于控制所述模拟发酵液1储存罐与所述反应器的连通或断开、所述模拟发酵液2储存罐与所述反应器的连通或断开、所述真实发酵液储存罐与所述反应器的连通或断开及所述反应器的曝气时间、沉淀时间、出水时间,以使所述反应器实现权利要求1~9任一项所述的方法。
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