CN114736159A - 一种光交联分子探针及其制备方法和应用 - Google Patents

一种光交联分子探针及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于化学和生物技术领域，具体涉及一种光交联分子探针及其制备方法和应用。本发明的探针结构如式Ⅰ所示。式Ⅰ化合物作为分子探针在鉴定靶蛋白中的应用也属于本发明的保护范围。本发明首次合成了可反生点击反应的苯乙酰谷氨酰胺的光交联分子探针，通过在苯环上添加光交联和生物正交基团，保持了苯乙酰谷氨酰胺的生物学活性，添加羧基甲酯化提高了分子的穿膜能力，可用于鉴定苯乙酰谷氨酰胺的靶蛋白和下游信号通路。
Figure DDA0003524026570000011

Description

一种光交联分子探针及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于化学和生物技术领域，具体涉及一种光交联分子探针及其制备方法和应用。
背景技术
苯乙酰谷氨酰胺是肠道菌群与人体的共代谢产物，首先由肠道菌将来自饮食的必需氨基酸苯丙氨酸代谢为苯乙酸，后者与谷氨酰胺在人体肝酶作用下形成苯乙酰谷氨酰胺(Nemet I,Saha PP,Gupta N,Zhu W,Romano KA,Skye SM,et al.A CardiovascularDisease-Linked Gut Microbial Metabolite Acts via AdrenergicReceptors.Cell.2020；180(5):862-77e22.doi:10.1016/j.cell.2020.02.016)。研究表明，与人类共生的梭状芽孢杆菌是将苯丙氨酸代谢为苯乙酸的最主要菌属(Dodd D,Spitzer MH,Van Treuren W,Merrill BD,Hryckowian AJ,Higginbottom SK,et al. Agut bacterial pathway metabolizes aromatic amino acids into nine circulatingmetabolites.Nature.2017；551(7682):648-52.doi:10.1038/nature24661)，而梭状芽胞杆菌具有减轻炎症、强化肠道屏障的潜在功能(3.Guo P,Zhang K,Ma X,He P.Clostridium species as probiotics:potentials and challenges.J Anim SciBiotechnol. 2020；11:24.doi:10.1186/s40104-019-0402-1)。申请人前期基于大规模人群队列开展代谢组流行病学研究，首次发现高水平的苯乙酰谷氨酰胺降低结直肠癌早期病变的发生风险，表明苯乙酰谷氨酰胺具有抑制结直肠癌前病变的生物学功能。
为开发苯乙酰谷氨酰胺的药用价值，亟需深入阐明该分子与活细胞的作用方式及靶向信号通路。基于点击化学和蛋白质组学技术是研究小分子与蛋白质相互作用的前沿方法，但其依赖于灵敏度高、特异性强，且不影响分子本身功能的小分子探针，目前缺乏可发生点击反应的苯乙酰谷氨酰胺探针。
发明内容
针对现有问题的不足，本发明的第一个目的是提供一种光交联分子探针；本发明的第二个目的是提供上述光交联分子探针的制备方法；本发明的第三个目的是提供上述分子探针的应用。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是：
本发明保护一种化合物，其结构式Ⅰ所示：
Figure RE-GDA0003629568400000021
在苯乙酰谷氨酰胺的苯环上添加光交联和生物正交基团，不影响分子的生物活性，并通过羧基甲酯化提高分子的穿膜能力。
上述式Ⅰ化合物的合成路线如下：
Figure RE-GDA0003629568400000022
上述化合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将4-氨基苯乙酸乙酯、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N-二异丙基乙胺和2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸反应得到中间产物1；
(2)将N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺加入氯化亚砜得到中间产物2；
(3)将中间产物1加入氢氧化锂反应后，获得中间产物3；
(4)中间产物2加入钯碳反应，得中间产物4；
(5)中间产物4，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N-二异丙基乙胺和中间产物3反应得到式Ⅰ目标产物；
Figure RE-GDA0003629568400000031
其中，
所述步骤(1)具体为：将4-氨基苯乙酸乙酯、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺溶解于二氯甲烷，在0℃加入2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸，室温搅拌，得中间产物1；其中，4-氨基苯乙酸乙酯和2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸的摩尔比为1:0.5～2.0，优选为1:1；室温搅拌时间8-15h，优选为12h；
所述步骤(2)具体为：将N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺溶解于甲醇，在0℃缓慢加入氯化亚砜，室温搅拌12h，得到中间产物2；其中，所述N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺和氯化亚砜摩尔比为1:1～3，优选为1:2；室温搅拌时间为8～15h，优选为12h；所述步骤(3)具体为：中间产物1溶解于四氢呋喃和水，加入氢氧化锂，室温搅拌，当起始物料消失后，加入0.1M盐酸调整pH至5，得中间产物3；其中，中间产物1与氢氧化锂的摩尔比为1:3～6，优选为1:5；室温搅拌时间1～5h，优选为2h；
所述步骤(4)具体为：中间产物2溶解于甲醇，加入钯碳，加氢气室温下搅拌，去除溶剂后得中间产物4；其中，中间产物2与钯碳的质量比为10:1；室温搅拌 2～10h，优选为6h；
所述步骤(5)具体为：中间产物4，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺溶解于N,N-二甲基甲酰胺，在0℃加入中间产物3，室温搅拌，去除溶剂纯化得到目标产物。
具体地，所述中间产物4与中间产物3的摩尔比为1:1；室温搅拌时间8～15h, 优选为12h。
作为本申请的优选技术方案，所述步骤(5)中，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺的摩尔比为1:0.5～3，优选为1:1.8。
本发明还保护前述化合物在制备鉴定靶蛋白的荧光探针中的应用。
本发明还保护一种分子探针，所述荧光探针为前述式Ⅰ化合物。
所述分子探针的制备方法同前述式Ⅰ化合物的制备。
作为本申请的优选技术方案，所述分子探针用于鉴定靶蛋白。
本发明还保护一种鉴定靶蛋白的检测试剂盒，所述试剂盒含有前述式Ⅰ化合物。
本发明还保护前述式Ⅰ化合物、前述分子探针、前述试剂盒在鉴定靶蛋白中的应用。
具体地，在体积为1ml的蛋白质组中加入二甲基亚砜或探针(对照组和实验组)，终浓度为0或100μM，二甲基亚砜终浓度为1％，25℃孵育60min，进行光交联反应。将样品置于冰上，在365nm紫外灯照射下，交联反应15min；结束后，进行点击化学反应；再基于高分辨质谱的化学蛋白质组学实验完成靶蛋白的鉴定。
有益效果
本发明提供的一种光交联分子探针及其制备方法和应用，与现有技术相比，具有以下有益效果：(1)本发明首次合成了可发生化学点击反应的苯乙酰谷氨酰胺的光交联分子探针，通过在苯环上添加光交联和生物正交基团，保持了苯乙酰谷氨酰胺的生物学活性，添加羧基甲酯化提高了分子的穿膜能力，可用于鉴定苯乙酰谷氨酰胺的靶蛋白和下游信号通路；(2)本申请的探针在已有相关探针的报道中尚未发现，且合成方法反应效率高，副反应少，反应条件温和，具有良好的选择性、敏感性和稳定性，能反映苯乙酰谷氨酰胺进入细胞后的行为，包括在活细胞中直接捕捉相互作用蛋白，是药物研发的重要技术支撑。
附图说明
图1为中间产物1的核磁氢谱表征；
图2为中间产物2的核磁氢谱表征；
图3为目标化合物的核磁氢谱表征(a)和碳谱表征(b)；
图4基于质谱技术发现靶蛋白Maoa(被探针富集的强度值最高)。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。所用试剂或者仪器设备未注明生产厂商的，均视为可以通过市场购买的常规产品。
化学品和溶剂均购自J&K chemicals公司和Sigma-Aldrich公司。应用Bruker 公司AVANCE III–400MHz核磁共振波谱仪获得核磁氢谱(1H NMR)和碳谱 (13C NMR)表征。
实施例1
本实施例提供一种苯乙酰谷氨酰胺的光交联分子探针，结构式如下：
Figure RE-GDA0003629568400000051
其制备方法包括以下步骤：
(1)4-氨基苯乙酸乙酯(2.35g,13.16mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.03g,15.79mmol)和N,N-二异丙基乙胺(3.74g,29mmol)溶解于二氯甲烷(80ml)，在0℃加入2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸，室温搅拌12h，薄层色谱进行检测。当起始物料消失后，抽真空去除溶剂，用硅胶柱层析纯化得到中间产物1(2.51g,产率61％)。1H NMR(400MHz,chloroform)δ7.38(d,J＝6.5 Hz,2H),7.23–7.10(m,2H),4.19–3.93(m,2H),3.51(s,2H),3.42(s,1H),2.32(s, 2H),2.13–1.90(m,2H),1.75(t,J＝7.2Hz,2H),1.18(td,J＝7.1,3.9Hz,5H)。
(2)将N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺(5.6g,20mmol)溶解于甲醇(200ml)，在0℃缓慢加入氯化亚砜(4.76g,40mmol)，室温搅拌12h,薄层色谱进行检测。当起始物料消失后，抽真空去除溶剂，用硅胶柱层析纯化得到中间产物2(4.4g,产率 75％).1H NMR(400MHz,二甲基亚砜)δ7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.37(d,J＝6.8 Hz,5H),5.03(s,2H),4.12–3.95(m,1H),3.63(s,3H),2.14(t,J＝7.4Hz,2H),2.02 –1.63(m,2H)。
(3)中间产物1(2.5g,7.98mmol)溶解于四氢呋喃(50ml)和水(50ml)，加入氢氧化锂(1.68g,40mmol)，室温搅拌2h,薄层色谱进行检测。当起始物料消失后，加入0.1M盐酸调整pH至5，混合物经二氯甲烷萃取，抽真空去除溶剂，获得中间产物3(1.57g,产率70％)。
(4)中间产物2(1.97g,6.7mmol)溶解于甲醇(50ml)，加入钯碳(200mg)，加氢气室温下搅拌6小时，质谱进行检测。当起始物料消失后，用硅藻土过滤混合液，抽真空去除溶剂，然后应尽快将中间产物4与中间产物3进行反应。
(5)中间产物4(880mg,5.5mmol)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.25g,6.6mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.56g,12.1mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(80ml)，在0℃加入中间产物3(1.57g,5.5mmol)，室温搅拌12h,薄层色谱进行检测。当起始物料消失后，抽真空去除溶剂，用硅胶柱层析纯化得到双吖丙啶探针(1.01g,产率43％)。1HNMR(400MHz,二甲基亚砜)δ9.90(s, 1H),8.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.46(d,J＝8.5Hz,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,2H),6.78 (s,1H),4.20(dd,J＝12.8,9.0Hz,1H),3.61(s,3H),3.41(s,2H),2.83(t,J＝2.7Hz, 1H),2.46(s,2H),2.22–2.09(m,3H),2.06(td,J＝7.5,2.7Hz,2H),1.71(t,J＝7.4 Hz,2H)；13C NMR(101MHz,二甲基亚砜)δ173.64,172.95,170.90,166.62,137.56,131.68,129.73,119.54,83.57,72.30,52.23,52.20,41.67,41.06,32.35,31.55,27.14,27.10,13.13。
由上述结果分析可知，所得产物为目标化合物。
实施例2
将本发明实施所得化合物作为光交联探针分子，应用于基于高分辨质谱的化学蛋白质组学实验，具体操作如下：
(1)在体积为1ml的蛋白质组中加入二甲基亚砜或探针分子(对照组和实验组)，终浓度为0或100μM，二甲基亚砜终浓度为1％，25℃孵育60min，进行光交联反应。
(2)将样品置于冰上，在365nm紫外灯照射下，交联反应15min。结束后，进行点击化学反应。反应结束之后将蛋白质进行甲醇-氯仿沉淀。
(3)将蛋白质重悬于1.2％SDS/PBS缓冲液，高速离心去除可能的沉淀杂质。在每份样品中加入100μL链霉亲和素磁珠，室温孵育3h。富集结束后，用0.2％ SDS/PBS洗涤，将磁珠重悬于6M缓冲液，加入二硫苏糖醇，终浓度为10mM, 37℃上下颠倒混匀0.5h，冷却后加入碘乙酰胺，终浓度为20mM，35℃上下颠倒混匀0.5h，去上清。将磁珠重悬于100μL 1M缓冲液，1μL氯化钙(100mM)， 2μL LysC蛋白酶(0.5μg/μL)，37℃，上下颠倒混匀，12-14h。之后加入2μL 胰蛋白酶(0.5μg/uL)，37℃，上下颠倒混匀，6h。
(4)酶切结束后，进行二甲基化标记实验，在对照组和实验组样品中加入甲醛，然后加入8μL 0.6M氰基硼氢化钠，室温振动反应1h。反应结束后，加入32 μL 1％氨水终止反应。每个样品中加入16μL 5％甲酸，并将对照组和实验组样品合并。取上清，清洗磁珠，用C18除盐柱处理，所得肽段样品旋干后上机。
(5)将上述样品重悬于10μL含有0.1％(v/v)甲酸的水中，应用液相色谱与串联质谱进行检测，仪器为Easy-nLC 1200液相串联Q-Exactive HF-X Orbitrap massspectrometer(Thermo Fisher Scientific)。质谱采集条件为：正离子模式， Orbitrap质量分析器，一级谱扫描范围350到1800Da，分辨率为70000，二级谱数据采集方式为数据依赖型，取强度最高的20个离子峰进行二级高能碰撞解离方式碎裂，二级谱分辨率为17500。质谱所得数据用MaxQuant 1.6.5.0软件进行搜库定量分析。
本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求为保护范围。

Claims (10)

1.式Ⅰ所述的化合物：
Figure RE-FDA0003629568390000011
2.权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，
(1)将4-氨基苯乙酸乙酯、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N-二异丙基乙胺和2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸反应得到中间产物1；
(2)将N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺加入氯化亚砜得到中间产物2；
(3)将中间产物1加入氢氧化锂反应后，获得中间产物3；
(4)中间产物2加入钯碳反应，得中间产物4；
(5)中间产物4，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N-二异丙基乙胺和中间产物3反应得到式Ⅰ目标产物；
Figure RE-FDA0003629568390000012
3.根据权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于，
所述步骤(1)具体为：将4-氨基苯乙酸乙酯、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺溶解于二氯甲烷，在0℃加入2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸，室温搅拌，得中间产物1；其中，4-氨基苯乙酸乙酯和2-(3-丁炔基氮二丙啶-3-基)乙酸的摩尔比为1:0.5～2.0，优选为1:1；室温搅拌时间8-15h，优选为12h；
所述步骤(2)具体为：将N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺溶解于甲醇，在0℃缓慢加入氯化亚砜，室温搅拌12h，得到中间产物2；其中，所述N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺和氯化亚砜摩尔比为1:1～3，优选为1:2；室温搅拌时间为8～15h，优选为12h；
所述步骤(3)具体为：中间产物1溶解于四氢呋喃和水，加入氢氧化锂，室温搅拌，当起始物料消失后，加入0.1M盐酸调整pH至5，得中间产物3；其中，中间产物1与氢氧化锂的摩尔比为1:3～6，优选为1:5；室温搅拌时间1～5h，优选为2h；
所述步骤(4)具体为：中间产物2溶解于甲醇，加入钯碳，加氢气室温下搅拌，去除溶剂后得中间产物4；其中，中间产物2与钯碳的质量比为10:1；室温搅拌2～10h，优选为6h；
所述步骤(5)具体为：中间产物4，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺溶解于N,N-二甲基甲酰胺，在0℃加入中间产物3，室温搅拌，去除溶剂纯化得到目标产物。
4.根据权利要求3所述的化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，中间产物4与中间产物3的摩尔比为1:1；室温搅拌时间8～15h，优选为12h。
5.根据权利要求3或4所述的化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N-二异丙基乙胺的摩尔比为1:0.5～3，优选为1:1.8。
6.权利要求1所述的化合物在制备鉴定靶蛋白的荧光探针中的应用。
7.一种分子探针，其特征在于，所述荧光探针为权利要求1所述的化合物。
8.根据权利要求7所述的分子探针，其特征在于，所述分子探针用于鉴定靶蛋白。
9.一种鉴定靶蛋白的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1所述的化合物、权利要求7所述的分子探针。
10.权利要求1所述的化合物、权利要求7所述的分子探针、权利要求9所述的试剂盒在鉴定靶蛋白中的应用。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103421061A (zh) * 2013-08-14 2013-12-04 中国药科大学 来那度胺衍生物、其制法及其医药用途
CN111087344A (zh) * 2019-11-19 2020-05-01 南京理工大学 含有双吖丙啶基团的氨基酸类化合物及其合成方法
CN113061111A (zh) * 2021-03-16 2021-07-02 无锡海伦生物科技有限公司 具有光交联活性的氨基酸类化合物的制备方法
CN115594649A (zh) * 2022-10-24 2023-01-13 南京科络思生物科技有限公司（Cn） 一种半胱氨酸残基特异性化学探针及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103421061A (zh) * 2013-08-14 2013-12-04 中国药科大学 来那度胺衍生物、其制法及其医药用途
CN111087344A (zh) * 2019-11-19 2020-05-01 南京理工大学 含有双吖丙啶基团的氨基酸类化合物及其合成方法
CN113061111A (zh) * 2021-03-16 2021-07-02 无锡海伦生物科技有限公司 具有光交联活性的氨基酸类化合物的制备方法
CN115594649A (zh) * 2022-10-24 2023-01-13 南京科络思生物科技有限公司（Cn） 一种半胱氨酸残基特异性化学探针及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
M. SC. PHILIPP KLEINER ET AL.: ""A Whole Proteome Inventory of Background Photocrosslinker Binding"", 《ANGEWANDTE CHEMIE INTERNATIONAL EDITION》, vol. 56, pages 1396 - 1401, XP072088855, DOI: 10.1002/anie.201605993 *
聂建军主编: "《药物化学》", 吉林大学出版社, pages: 319 *

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